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Desempenho reprodutivo de novilhas Angus submetidas à IATF utilizando cipionato de estradiol ou análogo do hormônio liberador das gonadotrofinas como indutores de ovulação / Reproductive performance angus heifers submitted to a tai using estradiol cypionate or gonadotropian releasing hormone analogue as ovulation inductors

Silva, Eduardo Pradebon da January 2016 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da presença de corpo lúteo (CL) no início do protocolo de inseminação artificial a tempo fixo (IATF), no diâmetro do folículo ovulatório (DFO), na expressão de estro e na taxa de prenhez usando cipionato de estradiol (CE) ou GnRH como indutor de ovulação em novilhas de corte. No dia 0, novilhas [n = 414; 317 ± 23 kg; 3,08 ± 0,21 escore de condição corporal (escala de 1 a 5) entre 22 e 24 meses de idade] receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) e foram administrados 2 mg de benzoato de estradiol, IM. No dia 8, o dispositivo foi removido e as novilhas receberam 500 μg de cloprostenol sódico IM e foram divididas em dois grupos: CE [n = 213; 0,5 mg de CE, IM, no dia 8] e GnRH [n = 201; 25 μg de Licerelina, IM, no dia da IATF] e a IATF foi realizada 50 h após a remoção do dispositivo. As novilhas tiveram a região sacral pintada para verificar a expressão do estro entre a remoção do dispositivo de P4 e a IATF. No dia 0, foram realizados exames ultrassonográficos para verificar a presença de CL (com CL = 213, sem CL = 202), no dia 10 para medir o DFO e no dia 11 para confirmar a ovulação. As novilhas foram classificadas em 3 grupos de acordo com o DFO: pequeno (≤ 9,5mm), médio (9,6-11,5mm) e grande (≥ 11,6mm) para avaliar seu efeito na expressão de estro e prenhez. A expressão de estro foi confirmada quando a tinta estava removida no dia 10. A expressão de estro foi maior (P <0,05) no grupo CE em comparação com o grupo GnRH. O DFO diferiu (P <0,05) de acordo com a presença de CL ( P < 0,05), mas foi semelhante entre os tratamentos. A taxa de ovulação não diferiu nos grupos CE e GnRH. As taxas de prenhez foram semelhantes (P> 0,05) entre os grupos CE e GnRH, no entanto, a taxa de prenhez foi maior nas novilhas que expressaram estro (P <0,05), do que naquelas que não expressaram. A presença de CL no início do protocolo de IATF esteve associada a maior taxa de prenhez (P <0,05) no grupo GnRH em relação ao grupo CE, mas não diferiu entre novilhas sem CL. A manifestação de estro para novilhas tratadas com GnRH aumenta de acordo com DFO. O grupo CE apresenta alta manifestação de estro independente do DFO. A taxa de prenhez é maior à medida que o DFO aumenta. Em conclusão, as novilhas com CL no início do protocolo de IATF possuem maior folículo ovulatório, e quando tratadas com GnRH como indutor de ovulação atingem maiores taxas de prenhez. O tamanho do folículo ovulatório foi associado com o comportamento de estro e as taxas de prenhez nos tratamentos de CE e GnRH. / The aim of this study was to evaluate the effect of presence of corpus luteum (CL) at the onset of timed AI (TAI) protocol in ovulatory follicle diameter (OFD), estrus expression and pregnancy rate using estradiol cypionate (EC) or GnRH as ovulation inductor in beef heifers. On day 0, heifers [n=414; 317±23 kg; 3.08±0.21 body condition score (1 to 5 scale) and 22-24 months of age] received a 1g progesterone (P4) intravaginal device and 2 mg of estradiol benzoate, IM,. On day 8, device was removed, heifers received 500 μg of sodium cloprostenol, IM, and were divided in two groups: EC [n=213; 0.5mg EC, IM, on day 8] and GnRH [n=201; 25 μg of Licerelin, IM, at TAI] TAI was performed 50 h after device removal. The heifers had the base of the tail painted to verify estrus expression between P4 device removal and IATF. On day 0, ultrasound examinations were performed to verify the presence of CL (with CL = 213, without CL = 202).On day 10 to measure OFD and on day 11 to confirm ovulation. Heifers were classified into three groups according to OFD: small (≤ 9.5 mm), medium (9.6-11.5 mm) and large (≥ 11.6 mm) to evaluate their effect on estrus expression and pregnancy rate. Estrus expression was confirmed when ink marking was removed on day 10. Estrus expression was higher (P <0.05) in the EC group compared to GnRH group. The OFD differed (P <0.05) according to the presence of CL (P <0.05), but was similar between the treatments. The ovulation rate did not differ in CE and GnRH groups. Pregnancy rates were similar (P> 0.05) between the EC and GnRH groups, however, the pregnancy rate was higher in heifers who expressed estrus (P <0.05) than in those who did not express it. The presence of CL at the beginning of the IATF protocol was associated with a higher pregnancy rate (P <0.05) in the GnRH group in relation to the EC group, but did not differ between heifers without CL. The estrus manifestation for heifers treated with GnRH increases as the DFO increases, while the EC heifers has a high estrus manifestation independent of the DFO. The pregnancy rate also increases as DFO increases. In conclusion, heifers with CL at the beginning of the IATF protocol have increased ovulatory follicle size, and when treated with GnRH, as an ovulation inducer, attained higher pregnancy rates. The size of the ovulatory follicle was associated with higher estrus behavior and higher pregnancy rates in the EC and GnRH treatments.
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Diferenças nas Expressões Gênicas do Saco Vitelino de Embriões Bovinos provenientes de Inseminação Artificial e Fecundação In Vitro / Differences in gene expressions of bovine yolk sac embryos from cattle artificial insemination and in vitro fertilization

Oliveira, Claudia Marinovic de 19 December 2011 (has links)
Altas taxas de mortalidade embrionária ocorrem no período de implantação em embriões provenientes de IATF e FIV. Acredita-se que a falha no desenvolvimento do saco vitelino possa estar relacionada com estas perdas embrionárias. O objetivo deste trabalho foi descrever as características macroscópicas, microscópicas e expressão gênica do processo de involução do saco vitelino, visto que os dados da literatura são contraditórios ao descrever os processos de formação e involução do saco vitelino em embriões provenientes de IATF e FIV. Foram utilizados 19 embriões de IATF e 16 de FIV, provenientes da Sociedade Agropecuária Imaculada Conceição-Redenção/PA, Brasil. Observou-se que não houve diferença significativa no tamanho dos embriões nas idades de 25 (p=0,1), 35 (p=0,1), 40 (p=0,4) e 45 (p=0,36) dias, quando comparados os grupos de IATF e FIV. Entretanto entre os embriões de IATF e FIV com 30 dias de gestação, apresentaram diferença estatística (p= 0,03). A curva de crescimento (Crow-Rump) aumentou gradativamente e linearmente em função da idade gestacional. Macroscopicamente, observou-se que aos 25 dias de gestação, o saco vitelino apresentava formato de T e coloração translúcida. Uma porção central se encontrava próxima a região ventral do embrião emitindo duas extremidades que eram finas membranas, estas acompanhavam o alantóide juntamente com os vasos umbilicais. Aos 30 a 35 dias, apresentava coloração amarelada, sua parte central e extremidades bem diminuídas mostrando sinais de um início de regressão. Aos 40 a 45 dias, o seu processo de involução estava caracterizado, com extremidades enoveladas e região central assemelhando-se a um pequeno grão achatado que se encontrava em contato com o âmnio. Microscopicamente, o saco vitelino era formado por três camadas: o endoderma, camada única que reveste a cavidade vitelínica, uma camada intermediária mesenquimal vascular e o mesotélio, camada simples voltada ao exoceloma. O epitélio do saco vitelino formava dobras ou criptas que se projetavam para a luz. Imunohistoquímica notou-se marcação para os anticorpos VEGF, Flt-1 e KDR. Observou-se que não houve diferença significativa na expressão do mRNA do VEGF, KDR e Flt-1 entre os grupos e nas idades gestacionais analisadas, aos 30 dias notou-se uma tendência entre os grupos em relação a expressão do Flt-1. Os fatores de crescimento b FGF, FGFR-1 e FGFR-2, não apresentaram diferenças em suas expressões, somente aos 35 dias de gestação para o mRNA FGFR-1. Conclui-se que o saco vitelino está intensamente relacionado com o desenvolvimento embrionário, na qual sua involução e desaparecimento relacionam-se com o crescimento e \"maturação\" embrionária. / High mortality rates occur during embryonic implantation embryos from IVF and FTAI. It is believed that the failure in the development of the yolk sac may be related to these embryonic losses. The objective of this study was to describe the macroscopic, microscopic and mRNA expression features of the yolk sac involution process, since the literature relates contradictory information regarding the processes of formation and involution of the yolk sac in IVF and TAI embryos. Nineteen embryos were used for FTAI and 16 IVF; the specimes were obtained from the Sociedade Agropecuária Imaculada Conceição-Redenção/PA, Brazil. No significant differences were observed in the size of embryos aged 25 (p = 0.1), 35 (p = 0.1), 40 (p = 0.4) and 45 (p = 0.36) days in the groups of IVF and FTAI. However between FTAI and IVF embryos with 30 days of gestation, a difference (p = 0.03) was detectable. The growth curve (Crow-Rump) increased gradually and linearly with gestational age. Macroscopically, it was observed that after 25 days of gestation, the yolk sac was \"T-shaped\" and transparent colored. A central portion was observed in the vicinity of the ventral ends of the embryo exhibiting two thin membranes, which accompanied the allantois with the umbilical vessels. At 30 to 35 days this portion becomes yellowish and its central part together with the extremities was reduced displaying clearly signs of regression. At 40 to 45 days, the process of involution was presented in a curled fashion and ends with the central region resembling a flat small grain in contact with the amnion. Microscopically, the yolk sac was formed by three layers: the endoderm, single layer lining the vitelline cavity, an intermediate layer and vascular mesenchymal mesothelium, exoceloma focused on single layer. The epithelium of the yolk sac formed folds or crypts, which projected to the light. Immunohistochemistry marking was noted for antibodies VEGF, Flt-1 and KDR. No significant difference were observed in mRNA expression of VEGF, KDR and Flt-1 between groups and the gestational ages analyzed at 30 days there has been a trend among the groups regarding the expression of Flt-1. The growth factors bFGF, FGFR-1 and FGFR-2 showed no differences in their expressions, with the exception of 35 days of gestation for the m-RNA FGFR 1. It was concluded that the yolk sac is strongly related to embryonic development, in which the involution and disappearance are related to growth and \"maturity\" stage.
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Cl-synch: protocolo alternativo para inseminação artificial em tempo fixo em búfalas, criadas em sistema extensivo na Amazônia

NUNES, Kim de Borborema 20 May 2010 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-02-26T17:39:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ClsynchProtocoloAlternativo.pdf: 684963 bytes, checksum: 3da448a714c4fd271118bcae7e06d1e1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-02-27T14:17:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ClsynchProtocoloAlternativo.pdf: 684963 bytes, checksum: 3da448a714c4fd271118bcae7e06d1e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-27T14:17:23Z (GMT). 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Foram utilizadas 208 búfalas lactantes mestiças mediterrâneo/murrah com idades variadas de 2,5 a 10 anos com histórico de período pós parto ≥ 60 dias. As matrizes que portavam um corpo lúteo foi aplicado 2.0 ml Intra-Muscular de prostaglandina (PGF2α) (150μg/D-cloprostenol) no Dia 0 = D0. Setenta duas horas depois (Dia 3 = D3), foram realizados exame ginecológico para verificar a presença de muco e contratilidade uterina, e posterior inseminação e aplicação de 1.0 ml (100μg) IM de GnRH, com sêmen, de diferentes reprodutores. O diagnóstico de prenhez foi realizado entre 45 a 90 dias, através da palpação retal. O CL-Synch proporcionou uma taxa de prenhez media de 42,79%. Houve efeito significativo das variáveis: presença de contratilidade uterina (χ²= 10.9891; P= 0.0009), muco (χ²= 10.9891; P= 0.0009) e a condição corporal, (χ²= 20.2247; P= 0.0005). A presença do tônus uterino e do muco uterino mostraram-se como excelentes sinais indicativos de uma resposta de crescimento e diferenciação folicular e ovulação à estimulação hormonal. A relação reprodutor e taxa de prenhez não foi estatisticamente significativo (P=0,1684), sugerindo a uniformidade na qualidade do sêmen congelado proveniente da mesma central. Concluí-se que o CL-synch é promissor e suas vantagens se concentram no manejo de contenção das fêmeas e o baixo custo, pois possibilita a contenção somente duas vezes, quando comparado aos demais protocolos que necessitam de contenção de quatro vezes ou mais, diminuindo consideravelmente o estresse. / Despite technological advances in the management of buffalo ranching and breeding techniques, there is little use in practice for buffaloes in extensively breed. The development of synchronization protocols, which reduce the stress of restraint and reduce costs, contribute to increasing the use of TAI in the buffalo herds. The experiment aimed to evaluate a method of synchronization and TAI compatible economic and practical with extensively breed. The experiment was conducted at three different farms in two lowland region in the state of Amapá (Experiment 1 and 2) conducted in the favorable reproductive season. The third in the state of Pará in artificial pasture land held in the unfavorable season. We used 208 lactating crossbred buffaloes Mediterranean / Murrah ages varied from 2.5 to 10 years with a history of postpartum period ≥ 60 days. Mothers who bore a corpus luteum was applied 2.0 ml intramuscular prostaglandin (PGF2α) (150μg/D-cloprostenol) on Day 0 = D0. Seventy two hours later (Day 3 = D3), were performed gynecological exam to confirm the presence of mucus and uterine contractions, and therefore, were inseminated immediately received 1.0 ml (100μg) of GnRH IM, with semen from different bulls. The diagnosis of pregnancy was performed between 45-90 days, through rectal palpation. CL-Synch provided an average pregnancy rate of 42.79%. Significant effect of variables: the presence of uterine contractility (χ ² = 10.9891, P = 0.0009), mucus (χ ² = 10.9891, P = 0.0009) and body condition (χ ² = 20.2247, P = 0.0005). The presence of mucus and uterine tone as shown excellent signs of a growth response and follicular differentiation and ovulation to hormonal stimulation. The relationship between bull and pregnancy rate was not statistically significant (P = 0.1684), suggesting uniformity in the quality of frozen semen from the same plant. We conclude that CL-synch is promising and its benefits are concentrated in management and cost containment, as it enables the restraint only twice, when compared to other protocols that need to contain four or more times, significantly owering stress.
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Conforto térmico e eficiência da inseminação artificial em tempo fixo em búfalas leiteiras mantidas em sistemas silvipastoris na Amazônia Oriental

MATOS, Leonardo Brandão 03 November 2008 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-02-26T17:44:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ConfortoTermicoEficiencia.pdf: 4344971 bytes, checksum: fa3eb131e88205313fe5d795c00ce87b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-03-24T12:55:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ConfortoTermicoEficiencia.pdf: 4344971 bytes, checksum: fa3eb131e88205313fe5d795c00ce87b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-24T12:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ConfortoTermicoEficiencia.pdf: 4344971 bytes, checksum: fa3eb131e88205313fe5d795c00ce87b (MD5) Previous issue date: 2008 / BASA - Banco da Amazônia S.A. / O trabalho foi desenvolvido na U.P.A. “Senador Álvaro Adolpho”, Embrapa Amazônia Oriental, Belém, Pará (1º25¢ S 48º26¢ O), local de tipo climático Afi (quente e úmido). O objetivo foi avaliar o uso de sistemas silvipastoris (SSP) como ferramenta de manejo para proporcionar maior conforto térmico a búfalas leiteiras, e incrementar sua eficiência reprodutiva após a utilização da inseminação artificial em tempo fixo. Foram utilizados dois SSP´s, durante dois períodos do ano, onde: Período 1 (Abril a Junho), com maior precipitação pluviométrica e Período 2 (Setembro a Novembro), com menor precipitação pluviométrica. Foram mensuradas a freqüência cardíaca (FC), freqüência respiratória (FR), temperatura retal (TR) e movimentos ruminais (MR), sempre às 9h00min. O índice de conforto animal foi calculado conforme a fórmula: ICA = TR/38,33 + FR/23. Os animais de cada sistema foram tratados com dois diferentes protocolos para sincronização do estro e ovulação, formando os Grupos SSP 1/Ovsynch, SSP 2/Ovsynch (estro sincronizado com Ovsynch), SSP 1/Prog e SSP 2/Prog (estro sincronizado com Ovsynch + 1g de progesterona intravaginal). Os ovários de todas as búfalas foram monitorados por ultra-sonografia no D0, D7 e D9 e as búfalas foram inseminadas no D10 (D0=dia do início da sincronização). As médias de FC foram de 57,35±8,24 bat/min no Período 1 e 62,48 ±7,79 bat/min no Período 2 (P<0,01). A FR média foi de 25,66 ±10,53 mov/min no Período 1 e de 33,38 ±18,23 mov/min no Período 2 (P<0,01). Os animais mantidos no SSP 1 apresentaram TR superior aos do SSP 2 (39,02 ±0,53ºC versus 38,65 ±0,41ºC, P<0,01). As médias do ICA variaram entre 1,89 e 3,55. No Período 1 obteve-se variação de 1,89 a 2,42 e média de 2,12 ±0,46. No Período 2, a média do ICA foi de 2,46 ±0,79, com variação de 1,91 a 3,55. Houve diferença significativa das médias de ICA entre os períodos (P<0,01). O diâmetro do folículo dominante no D9 foi superior para os animais que receberam progesterona (10,40 ±1,22 mm versus 12,21 ±3,42 mm; P=0,05). A taxa de prenhez total foi de 48,21%, sendo que no Período 1 houve 56,66% de fêmeas gestantes, contra 38,46% no Período 2 (SSP1/Ovsynch: 40,0%; SSP2/Ovsynch: 38,46%; SSP1/Prog: 46,66% e SSP2/Prog: 69,23%; P>0,05). Com base nos resultados, ressalta-se a importância do manejo do ambiente físico para a criação de bubalinos na Amazônia Oriental, o que pode evitar gastos energéticos para a termorregulação animal e possibilitar melhores índices reprodutivos. / This experiment was developed in U.P.A. “Senador Álvaro Adolpho”, of Embrapa Eastern Amazon, Belém, Pará (1º25¢ S 48º26¢ W), under hot and humid conditions (Afi). The aim of this research was to evaluate the use of silvopastoral systems (SSP´s) as management tool to provide animal comfort to dairy buffaloes and to increase their reproductive efficiency after fixed time artificial insemination. Two different SSP´s were used during Phase 1 (April to June), characterized by intense rainfall and Phase 2 (September to November), characterized by mild rainfall. Heart rate (HR), respiratory rate (RR), rectal temperature (RT) and ruminal movement (RM) were measured at 9:00 A.M.. Animal Comfort Index (ACI) was calculated as ACI=RT/38.33 + RF/23. Animal received two different treatment for oestrus synchronization: SSP 1/Ovsynch, SSP 2/Ovsynch (Ovsynch based protocol), SSP 1/Prog and SSP 2/Prog (Ovsynch + 1g of intravaginal progesterone). Ovaries of all buffaloes were scanned by ultrasound in D0, D7 and D9. Females were inseminated on D10. The averages of HR were 57.35±8.24 beats/min in Phase 1 and 62.48±7.79 beats/min in Phase 2 (P <0.01). The averages of RF were of 25.66±10.53 mov/min in Phase 1, and 33.38±18.23 mov/min in Phase 2 (P <0.01). Animals kept in SSP 1 presented higher values of RT compared to the SSP 2 (39.02± 0.53 °C and 38.65±0.41 °C, P<0,01). The ACI average ranged from 1.89 to 3.55. During Phase 1, ACI ranged from 1.89 to 2.42 (mean 2.12±0.46); in Phase 2, ACI ranged from 1.91 to 3.55 (mean 2.46±0.79). Significant difference was observed between Phases (P<0,01). Dominant follicle diameter on D9 was higher on progesterone treated animals (10.40±1.22 mm versus 12.21±3.42 mm, P=0.05). Overall pregnancy rate was 48.21%, corresponding to Phase 1 = 56.66% and Phase 2 = 38.46% (SSP1/Ovsynch: 40.0%; SSP2/Ovsynch: 38.46%; SSP1/Prog: 46.66% and SSP2/Prog: 69.23%; P>0,05). These results emphasize importance of physical environment management for buffaloes production at Eastern Amazon; in order to avoid energy expenditure for animal thermoregulation and to allow shifting reproductive rates.
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Utilização de derivado progesterônico na sincronização do ciclo estral em fêmeas bovinas e bubalinas utilizadas na inseminação artificial em tempo fixo (IATF)

NOGUERA GUEVARA, Samuel Enrique 03 May 2012 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T17:51:27Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_UtilizacaoDerivadoProgesteronico.PDF: 1856364 bytes, checksum: c1168b2c3b92d8a056c99dc65b477549 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-22T12:50:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_UtilizacaoDerivadoProgesteronico.PDF: 1856364 bytes, checksum: c1168b2c3b92d8a056c99dc65b477549 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T12:50:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_UtilizacaoDerivadoProgesteronico.PDF: 1856364 bytes, checksum: c1168b2c3b92d8a056c99dc65b477549 (MD5) Previous issue date: 2012-05-03 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A utilização de dispositivos intravaginais com progestágeno como o protocolo de sincronização do ciclo estral para inseminação artificial em tempo fixo (IATF) “Pregna Heat-E,” foi utilizado em 219 fêmeas bovinas e 169 fêmeas bubalinas, pertencentes a 6 fazendas comerciais localizadas nos estados Táchira, Carabobo, e Portuguesa, na República Bolivariana da Venezuela com o objetivo de avaliar a taxa de concepção (TC) em vacas bovinas mestiças leiteiras, de corte e vacas bubalinas mestiças leiteiras, assim como em novilhas bovinas mestiças de leite e corte e novilhas bubalinas mestiças leiteiras, e de analisar algumas variáveis que podem interferir na TC, tais como o escore de condição corporal, (ECC), número de partos, intervalo parto tratamento, grau de dificuldade para a IA na Fazenda 1, e nas outras fazendas(2,3,4,5 e 6), avaliou-se somente a taxa de concepção. O manejo das fazendas era de tipo semi-intensivo, com a alimentação baseada principalmente em espécies forrageiras introduzidas em sistema de piquetes rotacionados a campo e suplementação dependendo das necessidades de cada sistema de produção. Na Fazenda 1, localizada no Sul do Lago de Maracaibo, estado Táchira, foram sincronizadas e submetidas a IATF, 22 novilhas bovinas mestiças leiteiras onde foram obtidas TC de 27,2%, igualmente foram submetidas a IATF 20 vacas bovinas mestiças leiteiras no período pós parto (PPP) com uma TC de 30%, enquanto que da mesma forma, 18 novilhas bubalinas mestiças leiteiras foram inseminadas resultando em nenhuma gestação; em 24 vacas bubalinas no (PPP) sincronizadas na época desfavorável (fevereiro, de 2011), foi obtida uma TC de 20,8%. Para na Fazenda 2, localizada na zona Sul do Estado Tachira foi praticada a IATF na época favorável (novembro de 2010) em 78 búfalas mestiças leiterias no PPP obtendo-se uma TC de 34,6%. No caso da Fazenda 3, localizada em Urama, no Estado Carabobo, foram submetidas a IATF 49 vacas bubalinas mestiças no PPP, obtendo-se uma TC de 42,8%; Na Fazenda 4, localizada em Santa Ana, estado Tachira, foi utilizada a IATF, 85 vacas bovinas mestiças leiteiras obtendo-se uma TC de 40%; Na Fazenda 5, localizada no Estado Portuguesa, foram submetidas a IATF 23 vacas bovinas mestiças de dupla aptidão no PPP, observando-se 47,8% de TC; a Fazenda 6 localizada no estado Portuguesa foram submetidas à IATF 20 novilhas mestiças de corte e 49 vacas bovinas mestiças de corte, resultando em uma TC de 55 e 48,8% respectivamente. Ademais na Fazenda 1, foram avaliadas variáveis como TC e número de partos, quando ficou demonstrado melhores TC em vacas bovinas pluriparas quando comparadas com primíparas (40,5 ≥ 4 partos, 28,5% de 2 a 3 partos e 0% para as primiparas), (P=0.4130); com relação a TC e o intervalo parto tratamento pode ser observado que as maiores TC são em vacas entre 60 e 200 dias pós–parto, sendo que vacas com intervalo entre o parto e tratamento superior a 200 dias, a TC foi muito baixa ( 9,0%), (P= 0.0241); com relação a ECC não houve diferença significativa importante pois todos os animais foram sincronizados com ECC maior ou igual a três e a variação entre os animais foi muito reduzida (P= 0.1632); no tocante a o grau de dificuldade para IA, animais com 0 grau de dificuldade para a IA, apresentaram os maiores índices de concepção (44,4 e 31,2%), respectivamente. A utilização do protocolo para IATF, como o “Pregna Heat-E”, pode ser recomendado tanto em bovinos como em bubalinos com resultados satisfatórios, sendo que as TC no caso de bovinos mestiços com maior sangue Bos taurus, em regiões úmidas quentes como o caso da Fazenda 1, observou-se uma queda na TC, o que se pode atribuir a fatores do meio ambiente interferindo de forma negativa nas TC. Da mesma maneira, é importante salientar que as fêmeas bubalinas devem de ser sincronizadas na época favorável, posto que na época desfavorável ocorreu uma queda nas TC nas fêmeas sincronizadas neste período, (20,8% vs 34,6 e 42,8%) respectivamente. No caso da utilização dos protocolos de sincronização pela IATF em novilhas bubalinas, mostrou-se inadequado, com taxas nulas de concepção, provavelmente, por razões anátomo-fisiológicas neste grupo de animais, neste sentido não devem ser incluídas novilhas bubalinas em programas de IATF, com técnicas convencionais. No tocante para o caso das novilhas bovinas o protocolo “Pregna Heat–E” apresenta se como uma alternativa viável, sendo mais eficientes as taxas de concepção em novilhas mestiças de corte quando comparadas com mestiças leiteiras, por ser mais rústicas e melhor adaptadas as condições tropicais do meio ambiente. Os custos do protocolo “Pregna Heat–E” são relativamente similares com outros protocolos com progestagenos, sendo os resultado aceitáveis, podendo este protocolo ser usado junto com outros protocolos de menor custo. O protocolo “Pregna Heat-E” pode ser usado como uma ferramenta viável na sincronização e IATF tanto em bovinos como em bubalinos, sendo que no caso dos bovinos as TC são maiores do que em bubalinos, (40,1 vs 31,9%), (Fisher = 0,9624; P= 0,0212, P<0,05). Portanto, a utilização do protocolo “Pregna Heat-E”, necessita ser melhor estudado em bubalinos para a obtenção de maiores taxas de concepção. Sendo a taxa de concepção geral tanto em bovinos como em bubalinos de 36,5%. / The use of intravaginal devices with progestin as protocol for synchronization of oestrus cycle for fixed time artificial insemination (FTAI) through “Pregna Heat - E'' protocol were used in 219 cows and 169 female buffaloes, belonging to six commercial farms located in the Tachira, Carabobo, and Portuguesa states, in the Bolivarian Republic of Venezuela with the aim to evaluate conception rates (CR) in beef cows and crossbred dairy cattle, milk buffalo and crossbred dairy cows, and crossbred beef and milk heifer as well as in milk buffalo heifers as well as, with the objective to evaluate several variables that can interfere with CR such as body condition score (BCS), number of births, birth interval treatment, degree of difficulty for AI in the farms in the Farm 1, whereas in other farms were evaluated only the CR. The farms adopted a semi-intensive management, with a diet based primarily on forage species introduced in a artificial pasture used in a rotational grazing system with supplementation on the field depending on the needs of each production system. On a Farm 1, located just south of Lake Maracaibo, Tachira State, were synchronized and subjected to FTAI, 22 crossbred dairy cattle heifers, 20 crossbred dairy cows in the postpartum period (PPP) and 18 crossbred buffalo dairy heifers inseminated when 27.2%, 30% and 0 (zero) CR were obtained; moreover in 24 buffalo cows in the PPP synchronized in the outbreeding season (February 2011), it was obtained a CR of 20.8%. For the Farm 2, located in the southern state Tachira, FTAI was performed in favorable season (November 2010) in 78 crossbred dairy buffalo cows in PPP it was obtaining a CR of 34.6%. In the case of Farm 3, located in Urama county in Carabobo State, 49 crossbred buffalo cows in the PPP, were subjected to FTAI when it was obtaining a CR of 42.8%; in Farm 4, located in Santa Ana county, Tachira state, 85 crossbred dairy cattle cows were used for FTAI with 40% CR obtained, whereas in Farm 5, located in Portuguesa state, 23 crossbred beef cows of dual purpose in PPP were subjected to FTAI and it was found47.8% CR; finally in the Farm 6 located in Portuguesa State 20 crossbred beef heifers and 49 crossbred beef cow, were subjected to FTAI were found a CR of 55 and 48.8%, respectively. Also on Farm 1 were compared variables such as CR and number of births, when it was clear demonstrated that CR in pluriparous beef cows with more than four parturitions the results obtained where quite higher when confronted with cows with 2-3 parturitions and primiparous (40.5 ≥ 4 births, 28.5% 2-3 births and 0% for primiparous), (P = 0.4130); when compared with CR and parturition interval and the use of FTAI protocol “Pregna Heat - E'', the CR is higher in cows between 60 and 200 days postpartum, than cows with the interval of more than 200 days, which showed a very low CR (9.0%) (P = 0.0241); regarding to ECC no significant statistical difference important were observed among females with BSC=3 submitted to FTAI when confronted to animals with higher BCS. In the case of Farm 3, located in Urama county in Carabobo State, 49 crossbred buffalo cows in the PPP, were subjected to FTAI obtaining a CR of 42.8%, whereas in Farm 4, located in Santa Ana county, Táchira state, 85 crossbred dairy cattle cows was used for FTAI, 40% CR obtained, and in Farm 5, located in Portuguesa state, where 23 crossbred beef cows of dual purpose in PPP subjected to FTAI, it was found 47.8% CR; finally in the Farm 6 located in Portuguesa State 20 crossbred beef heifers and 49 crossbred beef cow, were subjected to FTAI when was found a CR of 55 and 48.8%, respectively. Still in the Farm 1 were compared variables such as CR and number of births, when it was clear demonstrated that CR in pluriparous beef cows with more than four parturitions where quite higher when confronted with cows with 2-3 parturitions and primiparous (40.5 ≥ 4 births, 28.5% 2-3 births and 0% for primiparous), (P = 0.4130); when compared with CR and parturition interval and the use of FTAI protocol “Heat-pregna - E'' the CR is higher in cows between 60 and 200 days postpartum, than cows with the interval of more than 200 days, which showed a very low CR (9.0%) (P = 0.0241); regarding to ECC no significant statistical difference important were observed among females with BSC=3 submitted to FTAI when confronted to animals with higher BCS showing a very poor (P=0.1632). With reference to the degree of difficulty for AI, animals with 0 degree of difficulty for AI, presenting the highest conception rates compared to the animals of 1 degree (44.4 and 31.2%), respectively. The use of the protocol “Pregna Heat - E” for FTAI, can be recommended for both in cattle and buffaloes with satisfactory results, however the CR in the case of crossbred Bos taurus or crossed animals with more blood of this sub-species probably due the fact that are raised in hot and humid regions as in the case of Farm 1, it has been observed a decrease in CR, which can be attributed to environmental factors interfering negatively on this variable. Likewise it is important to note that female buffaloes must be synchronized at the favorable season, not in outbreeding season, since throughout this time there was a decrease in CR in buffaloes submitted to FTAI, 20.8 vs 34.6% and 42.8%, respectively. In the case of the use of synchronization protocols such as “Pregna Heat – E” for FTAI use in buffalo heifers in the present study showed to be inadequate, with zero of CR, probably due anatomical and physiological concerned to the reproductive tract (very small cervix), thus buffalo heifers should not be included in FTAI programs with conventional techniques. The protocol ''Pregna Heat - E” can be used as a viable tool for oestrus cycle synchronization and FTAI in both cattle and buffaloes, and in the present study with the bovine CR being higher than in buffaloes (40.1 vs 31, 9%) (Fisher = 0.9624, P = 0.0212, P <0.05). That being so the use of “Pregna Heat - E” protocol as was used in the present study needs to be further studied in buffalo to obtain higher conception rates.
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Genome-wide association study for sperm motility in pigs / Estudo de associação genômica ampla para motilidade espermática em suínos

Diniz, Daniele Botelho 29 July 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1165643 bytes, checksum: afd121bfd728867f85eb3916457d8ba4 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A qualidade do sêmen de reprodutores suínos pode ser avaliada de acordo com vários critérios, sendo a motilidade espermática o mais utilizado e importante. A motilidade, essencial para a fertilização, refere-se ao movimento retilíneo dos espermatozóides. Apesar da importância da avaliação de características de qualidade do sêmen de reprodutores, tradicionalmente estes animais têm sido selecionados com ênfase em características de carcaça e crescimento, com pouca atenção dispensada à sua capacidade reprodutiva. Devido ao fato de características seminais poderem ser avaliadas nos reprodutores somente após a puberdade, técnicas moleculares e genotipagem dos animais utilizando chips de alta densidade de marcadores SNPs poderiam ser utilizados como ferramentas para avaliar e melhorar a seleção para fertilidade e qualidade de sêmen em reprodutores suínos em uma idade jovem. O estudo de associação genômica ampla (GWAS) requer o conhecimento de uma associação entre um marcador genético e alguma variação no fenótipo e assume que associação significativa pode ser detectada porque os SNPs estão em desequilíbrio de ligação (LD) com as mutações causais para as características de interesse, a nível de população. Assim, este estudo foi conduzido com o objetivo de identificar, através do GWAS, marcadores SNPs e genes candidatos relacionados com motilidade espermática em duas diferentes linhas de suínos. Os dados fenotípicos são provenientes de avaliações repetidas de motilidade de espermatozóides logo após a coleta do sêmen através do método denominado CASA (Computer Assisted Sperm Analysis). Animais de duas linhas (linha 1, n=760 animais da raça Landrace e linha 2, n=645 animais da raça Large White) foram fenotipados para a construção do arquivo de dados, que possui 32884 observações para a linha 1 e 32576 para a linha 2. Um total de 1507 animais da linha 1 e 1383 animais da linha 2 foram genotipados com o uso do chip de 60K da Illumina®. Os valores genéticos dos animais foram estimados utilizando o programa ASREML e os valores genéticos desregressados foram calculados para serem utilizados no GWAS. Após o controle de qualidade, 42551 SNPs e 602 animais genotipados (linha 1) e 40890 SNPs e 525 animais genotipados (linha 2) foram utilizados no GWAS. SNPs que possuíram q-valores baseados na taxa de falsos descobertos (FDR) menores ou iguais a 0.05 foram considerados significativos. Para a linha 1 não foram encontrados SNPs significativos relacionados com motilidade. Já para a linha 2, seis SNPs localizados no cromossomo 1 (SSC1) foram significativamente relacionados com a característica estudada. Essa diferença pode ser explicada pela baixa correlação (r = 0.0926) entre os valores de LD entre marcadores calculados para as duas linhas na região que abrange os seis SNPs significativos. O alto valor médio de r2 (r2 = 0.7275), calculado para medir o LD entre os seis SNPs significativos para a linha 2, revela que todos esses SNPs podem estar ligados a um mesmo QTL. O gene metionil-tRNA formiltransferase mitocondrial (MTFMT) é um possível gene candidato controlando a característica. Esse estudo fornece marcadores SNPs e um gene candidato associados com motilidade espermática em suínos. No entanto, por ser o primeiro trabalho a encontrar tais marcadores relacionados com motilidade espermática em suínos em uma nova região do SSC1, é necessária replicação e validação do estudo em outra população para confirmação dos resultados encontrados a fim de incluir tais informações na seleção de melhores animais. / The boar semen quality can be evaluated according to several parameters. Sperm motility is the most widely used and important test. Sperm motility, essential for fertility, is measured as the proportion of sperm cells with a straightforward movement. Despite its importance, traditionally boar selection has been done based on growth rate and carcass traits and little attention has been given on their semen quantity and quality. Because reproductive traits and sperm quality traits can only be measured on boars after puberty, molecular techniques and animal genotyping using chips with high density of SNP markers could be used to evaluate and improve selection on boar fertility at a young age. The Genome Wide Association Study (GWAS) requires knowledge of an association of a genetic marker with some variation in phenotype and it assumes that significant association can be detected because the SNPs are in linkage disequilibrium (LD) with the causative mutations for the traits of interest at the population level. Therefore, this study was conducted with the objective of performing a GWAS in order to find markers and candidate genes in the pig genome associated with sperm motility in two different pig lines. The phenotypic data consisted of repeated records of fresh sperm motility evaluated with CASA (Computer Assisted Sperm Analysis), obtained from two pure dam lines: a Landrace based line (line 1), n=760 animals and a Large White based line (line 2), n=645. The phenotypic database had in total 32,884 observations for line 1 and 32,576 observations for line 2, with 43.27 ± 36.81 observations per animal for line 1 and 50.51 ± 39.15 observations per animal for line 2. The PorcineSNP60 Beadchip of Illumina (San Diego, CA, USA, Ramos et al., 2009) was used to identify the association between sperm motility and the SNP markers. After quality control, a total of 42,551 SNPs and 602 genotyped animals (line 1) and 40,890 SNPs and 525 animals (line 2) were used in the association analyses. A False Discovery Rate based q-value of 0.05 was used as threshold for significant association. Six SNPs on pig chromosome 1 (SSC1) were significantly associated with the trait in line 2, whereas no SNPs were considered significantly associated with the trait in line 1. This difference can be explained by the low correlation (r = 0.0926) between the LD measurements (r2) between markers located in the region covering the six significant SNPs for line 2, calculated for both lines. The high average value of r2 (r2 = 0.7275), calculated to measure the LD between the six significant SNPs for line 2 reveals that all these SNPs may be linked to one QTL. The mitochondrial methionyl-tRNA formyltransferase (MTFMT) is a possible candidate gene affecting sperm motility on SSC1. This study provides some SNPs markers and a candidate gene associated with the trait of interest in a novel region on SSC1. However, replication, validation in another population and confirmation of published QTL or candidate genes related to boar sperm motility in the same region that we found in this study is necessary before using such information in selection.
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Desempenho reprodutivo de novilhas Angus submetidas à IATF utilizando cipionato de estradiol ou análogo do hormônio liberador das gonadotrofinas como indutores de ovulação / Reproductive performance angus heifers submitted to a tai using estradiol cypionate or gonadotropian releasing hormone analogue as ovulation inductors

Silva, Eduardo Pradebon da January 2016 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da presença de corpo lúteo (CL) no início do protocolo de inseminação artificial a tempo fixo (IATF), no diâmetro do folículo ovulatório (DFO), na expressão de estro e na taxa de prenhez usando cipionato de estradiol (CE) ou GnRH como indutor de ovulação em novilhas de corte. No dia 0, novilhas [n = 414; 317 ± 23 kg; 3,08 ± 0,21 escore de condição corporal (escala de 1 a 5) entre 22 e 24 meses de idade] receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) e foram administrados 2 mg de benzoato de estradiol, IM. No dia 8, o dispositivo foi removido e as novilhas receberam 500 μg de cloprostenol sódico IM e foram divididas em dois grupos: CE [n = 213; 0,5 mg de CE, IM, no dia 8] e GnRH [n = 201; 25 μg de Licerelina, IM, no dia da IATF] e a IATF foi realizada 50 h após a remoção do dispositivo. As novilhas tiveram a região sacral pintada para verificar a expressão do estro entre a remoção do dispositivo de P4 e a IATF. No dia 0, foram realizados exames ultrassonográficos para verificar a presença de CL (com CL = 213, sem CL = 202), no dia 10 para medir o DFO e no dia 11 para confirmar a ovulação. As novilhas foram classificadas em 3 grupos de acordo com o DFO: pequeno (≤ 9,5mm), médio (9,6-11,5mm) e grande (≥ 11,6mm) para avaliar seu efeito na expressão de estro e prenhez. A expressão de estro foi confirmada quando a tinta estava removida no dia 10. A expressão de estro foi maior (P <0,05) no grupo CE em comparação com o grupo GnRH. O DFO diferiu (P <0,05) de acordo com a presença de CL ( P < 0,05), mas foi semelhante entre os tratamentos. A taxa de ovulação não diferiu nos grupos CE e GnRH. As taxas de prenhez foram semelhantes (P> 0,05) entre os grupos CE e GnRH, no entanto, a taxa de prenhez foi maior nas novilhas que expressaram estro (P <0,05), do que naquelas que não expressaram. A presença de CL no início do protocolo de IATF esteve associada a maior taxa de prenhez (P <0,05) no grupo GnRH em relação ao grupo CE, mas não diferiu entre novilhas sem CL. A manifestação de estro para novilhas tratadas com GnRH aumenta de acordo com DFO. O grupo CE apresenta alta manifestação de estro independente do DFO. A taxa de prenhez é maior à medida que o DFO aumenta. Em conclusão, as novilhas com CL no início do protocolo de IATF possuem maior folículo ovulatório, e quando tratadas com GnRH como indutor de ovulação atingem maiores taxas de prenhez. O tamanho do folículo ovulatório foi associado com o comportamento de estro e as taxas de prenhez nos tratamentos de CE e GnRH. / The aim of this study was to evaluate the effect of presence of corpus luteum (CL) at the onset of timed AI (TAI) protocol in ovulatory follicle diameter (OFD), estrus expression and pregnancy rate using estradiol cypionate (EC) or GnRH as ovulation inductor in beef heifers. On day 0, heifers [n=414; 317±23 kg; 3.08±0.21 body condition score (1 to 5 scale) and 22-24 months of age] received a 1g progesterone (P4) intravaginal device and 2 mg of estradiol benzoate, IM,. On day 8, device was removed, heifers received 500 μg of sodium cloprostenol, IM, and were divided in two groups: EC [n=213; 0.5mg EC, IM, on day 8] and GnRH [n=201; 25 μg of Licerelin, IM, at TAI] TAI was performed 50 h after device removal. The heifers had the base of the tail painted to verify estrus expression between P4 device removal and IATF. On day 0, ultrasound examinations were performed to verify the presence of CL (with CL = 213, without CL = 202).On day 10 to measure OFD and on day 11 to confirm ovulation. Heifers were classified into three groups according to OFD: small (≤ 9.5 mm), medium (9.6-11.5 mm) and large (≥ 11.6 mm) to evaluate their effect on estrus expression and pregnancy rate. Estrus expression was confirmed when ink marking was removed on day 10. Estrus expression was higher (P <0.05) in the EC group compared to GnRH group. The OFD differed (P <0.05) according to the presence of CL (P <0.05), but was similar between the treatments. The ovulation rate did not differ in CE and GnRH groups. Pregnancy rates were similar (P> 0.05) between the EC and GnRH groups, however, the pregnancy rate was higher in heifers who expressed estrus (P <0.05) than in those who did not express it. The presence of CL at the beginning of the IATF protocol was associated with a higher pregnancy rate (P <0.05) in the GnRH group in relation to the EC group, but did not differ between heifers without CL. The estrus manifestation for heifers treated with GnRH increases as the DFO increases, while the EC heifers has a high estrus manifestation independent of the DFO. The pregnancy rate also increases as DFO increases. In conclusion, heifers with CL at the beginning of the IATF protocol have increased ovulatory follicle size, and when treated with GnRH, as an ovulation inducer, attained higher pregnancy rates. The size of the ovulatory follicle was associated with higher estrus behavior and higher pregnancy rates in the EC and GnRH treatments.
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Efeitos sucessórios da reprodução humana assistida homóloga post mortem / Effects of sucession in post mortem assisted human reproduction homologous

Anna de Moraes Salles Beraldo 23 August 2010 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Nesta dissertação de Mestrado em Direito Civil procura-se demonstrar que as inovações biotecnológicas, principalmente da área da medicina reprodutiva, têm trazido consequências impactantes no direito de família e das sucessões, criando, assim, a necessidade de (re)adaptar o sistema jurídico brasileiro à nova (e dinâmica) realidade social, à luz dos princípios e normas constitucionais. Nesse sentido, por exemplo, repensar e reestruturar o modelo tradicional de família parece ser um passo necessário para esta (re)adaptação, uma vez que novas tecnologias, como as técnicas de reprodução assistida, criam a possibilidade de interferência externa em processos naturais de procriação, de maneira não antes prevista pela sociedade e pelo Direito. Assim, verifica-se a possibilidade de procriação de um novo descendente anos após a morte do genitor. Este trabalho busca entender e examinar as implicações de tais inovações biotecnológicas para o sistema jurídico brasileiro. Mais especificamente, busca-se entender e examinar as consequências jurídicas da reprodução medicamente assistida post mortem no âmbito sucessório, demonstrando diversas dificuldades de ordem prática, a exemplo da necessidade do respeito à igualdade entre filhos, por um lado; e a necessidade de definição da questão sucessória, por outro. Busca-se também demonstrar o modo de garantir os direitos hereditários do filho póstumo, tanto na sucessão legítima, como na testamentária. Ademais, pretende-se provocar reflexões secundárias acerca da necessidade de autorização expressa do de cujus para implantação de seu material genético no útero materno, bem como a necessidade de existência de um prazo para essa utilização, evitando que haja insegurança jurídica. / This Master in Civil Law dissertation aims at demonstrating that biotechnological innovations, most especially in the field of reproductive medicine, have fundamental implications for family law and inheritance law, thus creating the need for (re)adapting the legal system to the new (and dynamic) social reality, in light of the Brazilian constitutional principles and norms. In this regard, for instance, rethinking and restructuring the traditional family model seems to be a necessary step within this legal (re)adaptation, since new technologies, such as techniques of assisted human reproduction, create the possibility of interfering in natural processes of procreation in ways not foreseen by society and the law. In this regard, it is now possible to imagine the birth of a child years after the death of the parent. This research seeks to understand and examine the implications of such biotechnological innovations for the Brazilian legal system. Most specifically, it aims at understanding and examining the implications of post mortem assisted reproduction for the law of succession, demonstrating and commenting on various practical difficulties, such as the need for respecting the equality of children, on the one hand, and the necessity of defining the succession problem, on the other. This work also seeks to demonstrate how to ensure the inheritance rights of the posthumous son, both in the legitimate succession and in the testament succession. Furthermore, it aims at suggesting and provoking secondary reflections on the need for previous and explicit authorization from the deceased parent for implanting his genetic material into the womb of the widow, and the need for clarifying and determining the period in which this use of genetic material may be authorized, avoiding legal uncertainty.
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Viabilidade espermática e geração de metabólicos reativos do oxigênio(ROS) no sêmen ovino criopreservado em diluidor aditivado de lauril de sódio (OE), trolox-C e catalase

Maia, Marciane da Silva [UNESP] 18 December 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-18Bitstream added on 2014-06-13T20:46:13Z : No. of bitstreams: 1 maia_ms_dr_botfmvz.pdf: 678528 bytes, checksum: 3bcfd108f831025fba94f0aefc916387 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O Objetivo deste estudo foi determinar o efeito da adição do surfactante lauril sulfato de sódio (Orvus es Paste OEP) e dos antioxidantes Trolox-C (6- hidroxi-2, 5,7,8-tetrametilcroman-2-acido carboxílico) e catalase ao meio diluidor, na motilidade espermática, integridade de membrana plasmática, acrossomal e mitocondrial, estádio de capacitação e geração de radicais livres no espermatozóide ovino pós-descongelação. Para isso, foram realizados dois experimentos. No Experimento 1, avaliou-se o efeito da adição do surfactante ao diluidor. O sêmen de 10 carneiros foi coletado por meio de vagina artificial e diluído para uma concentração final de 400x106 espermatozóides/mL no meio Tris-gema contendo OEP (0; 0,5 e 1%) ou no diluidor glicina-gema-leite (controle). A motilidade foi determinada pelo sistema computadorizado de análise de sêmen (CASA), a integridade de membrana pela combinação dos corantes fluorescente iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína (IP+DIC) e o estádio de capacitação pela técnica da CTC. Houve efeito significativo do tratamento em todos os parâmetros da motilidade, na integridade de membranas e na capacitação espermática. A adição de 0,5% ou 1% de OEP ao diluidor TRIS-gema aumentou significativamente (P<0,05) a motilidade, a integridade de membranas e o percentual de espermatozóides não capacitados, comparado ao controle. O diluidor TRIS 1 foi selecionado para utilização como meio base para o experimento 2. No Experimento 2, foi determinado o efeito da adição dos antioxidantes ao diluidor. O sêmen foi coletado e os seguintes tratamentos foram aplicados: T1- TRIS (controle), T2- TRO+ (diluidor T1 + Trolox, 50mM/108 espermatozóides), T3-CAT+ (diluidor T1 + catalase, 50mg/mL), T4- TRO/CAT+ (diluidor T1 + Trolox e Catalase, nas mesmas concentrações utilizadas no T2 e T3)...(Rsumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The aim of this study was to determine the effect of addition of surfactant sodium lauryl sulfate (Orvus es Paste OEP), and antioxidants, Trolox-C (6- hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxilic acid) and catalase to an extender on the motility, plasmatic and acrosomal and mitochondrial membrane integrity, capacitation status and free radicals generation of post thaw ram spermatozoa. Two experiments were performed. In Experiment 1, the effect of addition of surfactant was evaluated. The semen was collected from ten rams by artificial vagina and it was diluted to a final concentration of 400x 106 sperm/mL in egg yolk-Tris extender containing OEP (0, 0.5 and 1%) or glycinegg yolk-milk extender (control). The sperm motility was evaluated using a computer-assisted sperm analysis (CASA); the membrane integrity was verified using the fluorescent stains (propidium iodide and carboxyfluorescein diacetate) and the capacitation status determined by CTC technique. There was a significant treatment effect in all parameters involving sperm motility, membrane integrity and spermatic capacitation. The addition of OEP 0.5% or 1% to the egg yolk-Tris extender improved (P<0.05) the motility and membrane integrity and the percentage of uncapacited spermatozoa compared to the control. Then, the TRIS 1 extender was selected to be used at experiment 2. Experiment 2: the Exp 2 aimmed to determine the effect of antioxidants addition to the extender. Semen was collected and these treatments were applied: T1 - egg yolk-Tris extender (control), T2- TRO+ (T1 extender +Trolox, 50mM/108 spermatozoa), T3- CAT+ (T1 extender + catalase, 50mg/mL) and T4 TRO/CAT+ (T1 extender + trolox and catalase on the concentrations used in T2 and T3). Motility was determined by CASA system, plasmatic and acrosomal 4 membrane integrity and mitochondrial function were evaluated with PI, FITCPSA and JC-1 association...(Complete abstract, click electronic address below)
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Efeito do meio diluidor e da dose inseminante sobre a congebilidade e fertilidade do sêmen bovino utilizado em programas de inseminação artificial em tempo-fixo(LATF) /

Crespilho, André Maciel. January 2007 (has links)
Orientador: Frederico Ozanam Papa / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Alício Martins Junior / Resumo: A despeito das inúmeras variáveis que influenciam direta e indiretamente a fertilidade das fêmeas bovinas, a qualidade das amostras seminais exerce um papel importante na determinação das taxas de concepção dos programas de inseminação artificial. Os objetivos dessa pesquisa foram comparar a efetividade de dois diluidores de criopreservação de sêmen bovino no processamento de amostras seminais apresentando diferentes concentrações espermáticas em relação aos índices de congelabilidade determinados laboratorialmente (Experimento I) e as taxas de concepção proporcionadas por cada metodologia quando utilizada em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em bovinos (Experimento II). No Experimento I foram utilizados 14 ejaculados de diferentes touros da raça Nelore. Cada ejaculado foi fracionado em oito alíquotas iguais, submetidas a criopreservação com os diluidores Tris-gema de ovo-frutose (meio TRIS) e MKA nas concentrações de 12, 25, 50 e 100 milhões de espermatozóides totais por mililitro de meio, formando oito grupos experimentais em função das variáveis diluidor e concentração. As amostras foram descongeladas a 46 ºC por 20 segundos, avaliando-se os padrões de motilidade através do método computadorizado (CASA), integridade de membrana plasmática (IMP), resistência ao teste de termorresistência rápido (TTR) e taxa de recuperação e IMP após seleção espermática pela técnica de swim-up. Para o Experimento II foram selecionados sete touros utilizados no Experimento I, obtendo-se um ejaculado de cada animal por eletroejaculação...(Resumo completo, clicar acesso eletrõnico abaixo) / Abstract: Although there are many variables which directly or indirectly influence female bovine fertility, the quality of sperm samples plays a important role in the determination of conception rates in artificial insemination programs. The aim of the present study was to compare the efficiency of two bovine semen extenders for sperm freezing with different spermatic concentrations in the freezability determined by lab tests (Experiment I), and conception rates after fixed time artificial insemination (FTAI; Experiment II). In Experiment I 14 ejaculates of different Nelore bulls were used. Each ejaculate was splitsampled in to eight equal parts and then submitted to cryopreservation with Tris-egg yolk fructose (TRIS) and MKA extenders, at concentrations of 12, 25, 50 and 100 millions spermatozoa per milliliter forming eight experimental groups. The samples were thawed at 46 ºC for 20 seconds, and the following parameters were evaluated: sperm motility and movement (by computer-assisted semen analysis - CASA), sperm membrane integrity (SMI), resistance to the fast thermoresistance test (TT), recovery rate and sperm membrane integrity after sperm selection through swim-up technique. Seven of 14 bulls used in Experiment I were selected for Experiment II, and semen was collected from each of the animals by electroejaculation. The seven ejaculates obtained were mixed (semen pool) and cryopreserved, thus forming eight experimental groups according to the freezing extenders and sperm concentrations/straws: TRIS 12, 25, 50 and 100, and MKA 12, 25, 50 and 100...(Complete abstract, click electronic address below) / Mestre

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