Plantas medicinais são utilizadas no tratamento e na cura de enfermidades desde a antiguidade. Pela sua riqueza química e farmacológica, têm sido alvo de crescentes estudos no intuito de comprovar atividades atribuídas pela crença popular ou mesmo obter novos compostos ativos. A família Clusiaceae compreende quarenta e nove gêneros de ampla distribuição. Entre eles está o gênero Rheedia, também conhecido como Garcinia, que é rico em uma considerável diversidade de compostos, tais como benzofenonas polipreniladas, flavonóides, proantocianinas e xantonas. A partir do extrato hexânico do pericarpo de Rheedia brasiliensis foi possível o isolamento de 3 benzofenonas, garciniafenona, guttiferona-A e 7- epi-clusianona. Tais compostos foram então avaliados in vitro e in vivo quanto a atividade antioxidante, utilizando diferentes técnicas. A determinação da atividade antioxidante dos compostos justifica-se pela comprovada relação entre os EROs/ERNs em várias doenças, incluindo câncer, arteriosclerose, artrite reumatóide, doenças inflamatórias. In vitro, foram avaliadas a atividade sequestrante de radicais DPPH, o poder redutor, a atividade quelante de íons ferro e in vivo a lipoperoxidação através da medida espectrofotométrica de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico. In vitro, a guttiferona foi o composto mais ativo, seguida da 7-epi-clusianona e por fim a garciniafenona, demonstrando que o grupo catecol é importante para a atividade antioxidante. Além disso, a atividade do extrato apresentou uma correlação positiva com a da 7-epi-clusianona, o que era esperado por ser o seu principal componente. Já no teste in vivo, os diferentes compostos, inclusive o extrato, em duas ou mais concentrações foram efetivos demonstrando inclusive um efeito hepatoprotetor comprovado pela diminuição da peroxidação lipídica e dos níveis das transaminases. / Medicinal plants have been used in the treatment and cure of illnesses for many, many years. Due to their chemical and pharmaceutical characteristics, an increasing number of studies have been conducted to prove their theoretical medicinal capabilities or to obtain new active components. The Clusiaceae family is made up of forty nine species that are widely distributed. One of these species is Rheedia, also known as Garcinia, which is rich in a wide range of components, such as polyisoprenylated benzophenones, flavonoids, proantocianenes and xanthones. Using the hexanic extract of Rheedia brasiliensis pericarp, it was possible to isolate three benzophenones, garciniaphenone, guttiferone-A and 7-epi-clusianone. These components were then evaluated for their antioxidant properties using different technical methods both in vitro and in vivo. The antioxidant properties of these compounds are justified by the relationship between the EROs and ERNs in various illnesses, including cancer, arteriosclerosis, rheumatic arthritis and inflammatory diseases. Tests were conducted in vitro to determine the scavenging capability of DPPH radicals, reducing power, ironchelating ability and, in vivo, lipoperoxidation through the spectrophotometric measurement of thiobarbituric acid reactive species. In vitro the guttiferone-A was the most active component, followed by the 7-epi-clusianone and, lastly, garciniafenone, demonstrating that the cathecol group is important for their antioxidant properties. Furthermore, the activity of the extract presented a positive correlation with the 7-epi-clusianone, which was expected to be the main component. The in vivo test, the different components, including the extract, in two or more concentrations, were effective, demonstrating a hepatoprotector effect proven by the reduction of lipid peroxidation and the transaminases levels.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T18:01:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_CamilaArlenDinizJardim (1).pdf: 1468207 bytes, checksum: 37dc5dc70e1bb0d55bc2bc4c6e49af52 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T18:02:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_CamilaArlenDinizJardim (1).pdf: 1468207 bytes, checksum: 37dc5dc70e1bb0d55bc2bc4c6e49af52 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T18:02:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_CamilaArlenDinizJardim (1).pdf: 1468207 bytes, checksum: 37dc5dc70e1bb0d55bc2bc4c6e49af52 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T18:02:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_CamilaArlenDinizJardim (1).pdf: 1468207 bytes, checksum: 37dc5dc70e1bb0d55bc2bc4c6e49af52 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / O Carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço acomete mucosas do trato aerodigestivo superior, incluindo cavidade oral, laringe e faringe e é caracterizado por elevada agressividade e radioresistência, apresentando, muitas vezes, recidivas após o tratamento. Em trabalho anterior, foi demonstrado pelo nosso grupo que o tamponamento do Ca2+ nuclear é capaz de reduzir a taxa proliferação do carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço (células A431), bem como a sobrevida após a irradiação. Neste trabalho, investigamos quais genes estariam envolvidos na radiosensibilização observada mediante tamponamento do Ca2+nuclear, utilizando o protocolo RaSH (rapid subtraction hybridization), que permitiu a identificação de genes diferencialmente expressos nas células apenas irradiadas (RX) e nas células irradiadas em que o Ca2+ nuclear fora tamponado (RX/Ca2+ T). Foram sequenciados 91 clones, dos quais 8 mostraram elevada similaridade (93-100%) com sequências conhecidas depositadas no genebank (NCBI). Entre os clones selecionados, 3 foram escolhidos, sendo a Calpaína e a NLK selecionadas como mais expressas na condição RX/Ca2+T e a Kinesina, selecionada na condição RX. Estas proteínas são envolvidas em vias de sinalização críticas ao desenvolvimento tumoral, com base na análise por Blastn. Como a Kinesina foi identificada como superexpressa na condição RX, nós investigamos se seu silenciamento era capaz de produzir efeitos similares aos induzidos pelo tamponamento do Ca2+ nuclear. O silenciamento da Kinesina com siRNA promoveu a redução da formação de colônias e da sobrevida, em associação (90±2%) ou não (60±2%) com RX. Estes dados mostram que a Kinesina é um potencial alvo molecular a ser utilizado na radiosensibilização de carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço. / Head and neck squamous cell carcinoma affects mucosal of the upper aerodigestive tract, comprising oral cavity, pharynx and larynx and is characterized by aggressiveness and radioresistance, showing high frequency of post-treatment recurrent tumors. Our group had previously demonstrated that nuclear Ca2+ buffering promote decreased head and neck squamous cell carcinoma (A431 cells) proliferation rate and colony formation after irradiation. Here, to investigate which genes are involved on radiosensitization observed upon nuclear Ca2+ buffering, we applied RaSH (rapid subtraction hybridization) protocol that allows identification of genes differentially expressed on irradiated cells alone (RX) or combined with nuclear Ca2+ buffering (RX/Ca2+T). 91 clones were sequenced and 8 had shown high similarity (93-100%) with known sequences deposited on genebank (NCBI). Among the selected clones, 3 were choose, Calpain and NLK, that showed increased expression on RX/Ca2+T and Kinesin, that showed increased expression on RX. These clones are involved in tumor development-related signaling pathways according to BLASTn analysis. Because Kinesin was overexpressed on RX, we investigated if its silencing was capable to promote similar effect to nuclear Ca2+ buffering. Kinesin knockdown by siRNA promoted decreased colony formation, and survival either alone (60±2%) or in association (90±2%) with RX. These data show that Kinesin is a potential molecular target to radiosensitize head and neck squamous cell carcinoma.

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-07-18T19:14:53Z No. of bitstreams: 1 paloma_m_mendonca_ioc_bp_0035_2010.pdf: 5136216 bytes, checksum: 96c991db74df0f84ca5c4542f83fd6f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-18T19:14:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paloma_m_mendonca_ioc_bp_0035_2010.pdf: 5136216 bytes, checksum: 96c991db74df0f84ca5c4542f83fd6f4 (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq E FAPERJ / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Os dípteros muscóides são insetos com notável importância econômica e na entomologia médica e veterinária devido às diversas formas como eles podem estar relacionados ao homem, seja vetorando patógenos, causando miíases ou participando da degradação da matéria orgânica. A entomologia forense é uma ciência que estuda o papel dos insetos na decomposição de cadáveres e uma das principais aplicações destes nesta área é a estimativa do intervalo pós-morte, baseada no período mínimo de atividade dos insetos no corpo. No caso dos dípteros muscóides, que são os primeiros a chegar e podem ovipor logo após encontrar o cadáver, o conhecimento morfológico das fases imaturas desses insetos será mais uma ferramenta que auxiliará peritos e pesquisadores, pois em alguns casos, ovos e larvas são as únicas evidências presentes. A microscopia eletrônica de varredura é um instrumento que permite uma visualização mais detalhada dos caracteres morfológicos. Algumas espécies de muscóides destacam-se devido a sua preferência alimentar, pois buscam a matéria orgânica em decomposição para se alimentar, dentre elas podemos destacar os califorídeos Chrysomy albiceps, Chrysomya putoria e Chrysomya megacephala. Este trabalho teve como objetivo a identificação de ovos, larvas de primeiro, segundo e terceiro instar e pupários destas espécies de dípteros de grande importância forense e disseminadores de patógenos, através da utilização de microscopia eletrônica de varredura. Foram analisados 30 exemplares de cada estágio correspondente a cada espécie, provenientes de colônias de laboratório, estabelecidas a partir de adultos capturados no campus da Fundação Oswaldo Cruz, RJ. Ovos e larvas foram transferidos para placas de Petri contendo hidróxido de sódio e lavados com H 2O destilada. Depois foram fixados com solução de glutaraldeído em tampão cacodilato de sódio e pós-fixados em tetróxido de ósmio, desidratados em séries crescentes de acetona e submetidos ao método de secagem pelo ponto crítico usando CO2 em aparelho de Balzers, montados em suportes metálicos e cobertos por ouro, para permitir a visualização ao microscópio eletrônico de varredura. Pupas com 48 a 72 horas de formação foram lavadas, congeladas e depois montadas em suportes metálicos e cobertas por ouro para observação. Neste trabalho foi observado que a linha mediana termina arredondada na porção anterior dos ovos de C. putoria, enquanto nas outras duas espécies esta termina bifurcada. As ornamentações da micrópila são do tipo projeções nos ovos de C. megacephala e C. albiceps e do tipo depressões em C. putoria. O corpo da larva em todos os instares é muito semelhante entre as três espécies analisadas. No entanto, somente C. albiceps apresentou o tegumento recoberto por tubérculos organizados em fileiras ao longo do corpo da larva. No ápice dos tubérculos são encontrados espinhos que são característicos dessa espécie. Os pupários são formados a partir do endurecimento da cutícula da larva de terceiro instar, sendo assim, apresentaram estruturas muito semelhantes ao instar anterior. Este estudo permitiu destacar diversas características que podem ser utilizadas para identificar as espécies de importância sanitária e forense, além de fornecer subsídios para a elaboração de uma chave dicotômica específica para estes imaturos. / Muscoids diptera are insects with considerable economic importance and also in medical and veterinary entomology because of the way that they are related to man, as vectors of pathogens, causing myiasis or participating in organic matter degradation. Forensic entomology is a discipline that studies the role of insects in corpse’s decomposition and one of the most commom applications is to estimate postmortem interval by determining a minimum period of insect activity on a decomposing body. Flies are the first visitors to a dead body and are able to oviposit on carrion within a few hours after death. And the morphologic knowledge from imatures can be used as a tool in crime scene investigations because, sometimes, only eggs and larvae can be found in corpses. Scanning electron microscopy gives detailed information about morphologic characters. Some species of diptera are important because their larvae grow up at organic matter, such the blowflies Chrysomya albiceps, Chrysomya putoria and Chrysomya megacephala. The aim of this study was identify eggs, larvae of first, second and third instar and puparium of these species of flies of forensic importance and pathogens vectors, by using scanning electron microscopy. All the imatures examined in this study were obtained from culture set up from wild flies trapped at Fundação Oswaldo Cruz campus, Rio de Janeiro, RJ. Thirty samples from each species were observed. Eggs and larvae were transferred to a Petri dish with sodium hydroxid and then washed with destilated water. After it, imatures were fixed in glutaraldehyde in sodium cacodylate and postfixed in osmium tetroxide. They were dehydrated in a series of acetone for critical point drying, using CO 2 in Balzers apparatus. Specimens were adhered in metalic support and gold-coated for SEM examination. Pupae within 48 to 72 hours-age were washed, frozen and adhered in metalic support and gold- coated for SEM examination. Median area ends rounded anteriorly in C. putoria, whereas ended bifurcate in others species. Micropyle showed projections at C. megecephala and C. albiceps, but at C. putoria, micropyle was adorned by depressions. Larvae bodies were very similar among all the species analyzed. However, only C. albiceps body tegument was composed by tubercles organized in lines along larval body. At the apex of these tubercles some spines are only seen at this blowfly specie. The pupae are formed from the hardening of the cuticle of third instar larvae, thus, had structures very similar to the previous instar. This study helped to highlight many features that could be used to identify the species of sanitary and forensic importance, and provides subsidies for the development of a key to these specific immature.

Neste estudo, o extrato bruto obtido da cultura do fungo E. nigrum foi extraído com hexano (HEX), diclorometano (DCM) e acetato de etila (AE). Após fracionamento por HPLC, a atividade antifúngica das frações foi avaliada pelo ensaio de concentração inibitória mínima (CIM) contra Candida albicans (CA), Trychophyton rubrum (TR), Cryptococcus neoformans (CN) e Aspergillus fumigatus (AF). O extrato de AE não foi efetivo, e os extratos HEX e DCM inibiram os patógenos na faixa de 31,25 a 250 µg/mL. Das frações hexânicas, apenas HEX-F9 apresentou atividade antifúngica, com CIM entre 31,25 e 250 mg/mL, exceto sobre AF. As frações DCM-F3, F5, F6, F9 e F10 apresentaram atividade antifúngica com CIM de 31,25 a 500 mg/mL contra todos os patógenos testados. A fração DCM-F9 foi efetiva com CIM entre 62,5 e 250 mg/mL contra CA, TR e CN. As frações DCM-F9 e DCM-F11 estão em fase final de purificação para posterior caracterização físico-química. / The aim of this study was to purify the crude extract produced from E. nigrum and characterize antifungal isolated molecules. E. nigrum was cultivated and the culture supernatant extracted with hexane (HEX), dichloromethane (DCM) and ethyl acetate (AE). Fractions were obtained by HPLC. The antifungal activity were evaluated by minimal inhibitory concentration (CIM) against C. albicans (CA), T. rubrum (TR), C. neoformans (CN) and A. fumigatus (AF). The HEX extract inhibited all pathogens with CIM from 31,25 to 62,5 mg/mL while DCM from 62,5 to 250 mg/mL. From HEX fractions only HEX-F9 showed antigungal activity with CIM from 31,25 to 250 mg/mL, except AF. The DCM-F3, F5, F6, F9 and F10 fractions showed antifungal activity, mainly DCM-F6 (CIM from 31,25 to 62,5 mg/mL against all pathogens) and DCM-F9 (CIM from 62,5 to 250 mg/mL against CA, TR and CN). DCM-F6 was not produced anymore by the fungus in subsequent cultures. DCM-F9 LC/MS, CG/MS and RMN results suggested impure fraction, making difficult to determine the main compound. New approaches are being considered.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-10-19T12:25:32Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_BCM_AssmaaElKhal.pdf: 1644167 bytes, checksum: 7bb691d3e4aacbab44aea2489c898875 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-10-19T12:38:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_BCM_AssmaaElKhal.pdf: 1644167 bytes, checksum: 7bb691d3e4aacbab44aea2489c898875 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T12:38:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_BCM_AssmaaElKhal.pdf: 1644167 bytes, checksum: 7bb691d3e4aacbab44aea2489c898875 (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / O crescente surgimento de resistência bacteriana aos antibióticos convencionais é um grave problema que precisa ser enfrentado, seja pela descoberta de novas substâncias antimicrobianas, naturais ou sintéticas, ou através da pesquisa de terapias alternativas que sejam economicamente acessíveis. A terapia de fagos é uma dessas alternativas. Trata-se de uma forma de controle biológico, baseado em vírus específicos que infectam e destroem células bacterianas: os bacteriófagos. No entanto, esta é uma fonte terapêutica ainda pouco explorada. Esse trabalho utilizou o cultivo, isolamento e sequenciamento do genoma, além de técnicas de genômica de alto desempenho para isolar e caracterizar o genoma de bacteriófagos específicos para a linhagem enteroinvasiva de Escherichia coli ATCC 43893, visando o entendimento e a definição do ciclo de infecção desses vírus (líticos ou lisogênicos). A metodologia utilizada nessa pesquisa possibilitou o isolamento de 12 vírus. 8 diferentes linhagens virais tiveram seu material genético extraído e purificado, apresentando bom rendimento e quantidade reduzida de DNA bacteriano contaminante. O sequenciamento do genoma desses 8 vírus foi realizado usando a plataforma de nova geração MiSeq. Foi analisada a diversidade genética desses bacteriófagos e verificou-se que são vírus da ordem Caudovirales, sendo 2 da família Siphoviridae e 6 da família Myoviridae. Apenas um deles mostrou potencial de ter ciclo lisogênico, os outros sete vírus não continham nenhum gene que sugerisse isso. Entretanto, apesar dos bacteriófagos isolados não terem apresentado genes relacionados ao ciclo lisogênico, análises mais aprofundadas devem ser realizadas para comprovar que são realmente exclusivamente líticos, já que muitos não apresentam seu genoma completo e mais de 50% dos genes anotados não têm função definida. / serious problem that needs to be faced, either through the discovery of new antimicrobial substances, natural or synthetic, or by searching for alternative therapies that are affordable. The phage therapy is one of those alternatives. It is a form of biological control based on specific viruses that infect and kill bacterial cells: the bacteriophages. However, this therapeutic source is still poorly explored. This study used the cultivation, isolation and sequencing of the genome, as well as high-performance genomic techniques to isolate and characterize the genome of specific bacteriophages for enteroinvasive Escherichia coli ATCC 43893, for the understanding and the definition of the infection cycle (lytic or lysogenic) of these viruses. The methodology used in this study allowed the isolation of 12 viruses. 8 different viral strains had their genetic material extracted and purified, with good yield and reduced amount of contaminating bacterial DNA. The sequencing of the genome of these 8 viruses was conducted using the new generation MiSeq platform. The the genetical diversity of these bacteriophages was analyzed and it was found that the viruses belong to the Caudovirales order, which 2 belong to the Siphoviridae family and 6 to the Myoviridae family. Only one of them showed the potential to have lysogenic cycle, the other seven viruses contained no gene to suggest that. However, despite the isolated bacteriophages have not presented genes related to lysogenic cycle, further analysis should be conducted to demonstrate that they are really exclusively lytic, since many do not have their genome completed and more than 50% of the annotated genes have no defined function.

Neste estudo, o extrato bruto obtido da cultura do fungo E. nigrum foi extraído com hexano (HEX), diclorometano (DCM) e acetato de etila (AE). Após fracionamento por HPLC, a atividade antifúngica das frações foi avaliada pelo ensaio de concentração inibitória mínima (CIM) contra Candida albicans (CA), Trychophyton rubrum (TR), Cryptococcus neoformans (CN) e Aspergillus fumigatus (AF). O extrato de AE não foi efetivo, e os extratos HEX e DCM inibiram os patógenos na faixa de 31,25 a 250 µg/mL. Das frações hexânicas, apenas HEX-F9 apresentou atividade antifúngica, com CIM entre 31,25 e 250 mg/mL, exceto sobre AF. As frações DCM-F3, F5, F6, F9 e F10 apresentaram atividade antifúngica com CIM de 31,25 a 500 mg/mL contra todos os patógenos testados. A fração DCM-F9 foi efetiva com CIM entre 62,5 e 250 mg/mL contra CA, TR e CN. As frações DCM-F9 e DCM-F11 estão em fase final de purificação para posterior caracterização físico-química. / The aim of this study was to purify the crude extract produced from E. nigrum and characterize antifungal isolated molecules. E. nigrum was cultivated and the culture supernatant extracted with hexane (HEX), dichloromethane (DCM) and ethyl acetate (AE). Fractions were obtained by HPLC. The antifungal activity were evaluated by minimal inhibitory concentration (CIM) against C. albicans (CA), T. rubrum (TR), C. neoformans (CN) and A. fumigatus (AF). The HEX extract inhibited all pathogens with CIM from 31,25 to 62,5 mg/mL while DCM from 62,5 to 250 mg/mL. From HEX fractions only HEX-F9 showed antigungal activity with CIM from 31,25 to 250 mg/mL, except AF. The DCM-F3, F5, F6, F9 and F10 fractions showed antifungal activity, mainly DCM-F6 (CIM from 31,25 to 62,5 mg/mL against all pathogens) and DCM-F9 (CIM from 62,5 to 250 mg/mL against CA, TR and CN). DCM-F6 was not produced anymore by the fungus in subsequent cultures. DCM-F9 LC/MS, CG/MS and RMN results suggested impure fraction, making difficult to determine the main compound. New approaches are being considered.

INTRODUÇÃO: Onicomicose, infecção das unhas por fungo é a mais freqüente das doenças ungueais, constituindo aproximadamente metade de todas as alterações ungueais. Pode ser causada por dermatófitos, leveduras ou fungos filamentosos não dermatófitos. OBJETIVO: Caracterizar as onicomicoses causadas por fungos filamentosos não dermatófitos. (1) Verificar, dentre as suspeitas clínicas de onicomicose, qual a freqüência da recuperação de fungos,(2) Verificar, dentre as suspeitas clínicas de onicomicose, quais as espécies de fungos recuperadas, (3) Verificar, dentre o total das espécies identificadas, qual a freqüência das espécies de fungos filamentosos não dermatófitos. MÉTODOS: Duzentos e cinco indivíduos com suspeita clínica de onicomicose foram estudados no período de dezembro de 2003 a novembro de 2004, por meio de exames micológicos diretos e cultura para fungos. RESULTADOS: O diagnóstico de onicomicose foi estabelecido, pelo exame micológico direto, em 170 indivíduos. O diagnóstico etiológico foi estabelecido pela cultura para fungos. Dentre os 107 agentes identificados, os dermatófitos foram identificados em 78,52% (N=84), as leveduras em 13,08% (N=14) e os FFND em 8,40% (N=9) das vezes. CONCLUSÃO: É necessário que se estabeleça o diagnóstico etiológico dos casos de onicomicoses, já que os fungos filamentosos não dermatófitos ocorrem com freqüência considerável e são indistinguíveis daquelas por dermatófitos. / INTRODUCTION: Onychomycosis, a nail fungus infection is the most frequent nail disease, constituting about half of all nail disorder. It can be caused by dermatophytes, yeasts and non- dermatophytes filamentous fungi. OBJECTIVE: Characterize the onychomycosis caused by filamentous fungi non- dermatophytes. (1) Verify after a clinical suspicion of onychomycosis, which are the frequency of fungi recovery, (2) examine, after a clinical suspicion of onychomycosis, which species of fungi are recovered, (3) Checking, among the total of identified species , which are the frequency of the species of filamentous fungi not dermatophytes. METHODS: Two hundred and five patients with clinical suspicion of onychomycosis were studied in the period from December 2003 to November 2004, through direct mycological examination and culture for fungus. RESULTS: The diagnosis of onychomycosis has been established by direct mycological examination, in 170 individuals. The etiological diagnosis was established by the culture for fungus. Among the 107 persons identified, the dermatophytes were recovered in 78.52% (N = 84), the yeast in 13.08% (N = 14) and filamentous fungi non- dermatophytes in 8,40% (N = 9). CONCLUSION: It is necessary to establish the etiological diagnosis of the cases of onychomycosis, as filamentous fungi non- dermatophytes occur often than ever considered and are its clinic features are indistinguishable from those of the dermatophytes.

INTRODUÇÃO: Onicomicose, infecção das unhas por fungo é a mais freqüente das doenças ungueais, constituindo aproximadamente metade de todas as alterações ungueais. Pode ser causada por dermatófitos, leveduras ou fungos filamentosos não dermatófitos. OBJETIVO: Caracterizar as onicomicoses causadas por fungos filamentosos não dermatófitos. (1) Verificar, dentre as suspeitas clínicas de onicomicose, qual a freqüência da recuperação de fungos,(2) Verificar, dentre as suspeitas clínicas de onicomicose, quais as espécies de fungos recuperadas, (3) Verificar, dentre o total das espécies identificadas, qual a freqüência das espécies de fungos filamentosos não dermatófitos. MÉTODOS: Duzentos e cinco indivíduos com suspeita clínica de onicomicose foram estudados no período de dezembro de 2003 a novembro de 2004, por meio de exames micológicos diretos e cultura para fungos. RESULTADOS: O diagnóstico de onicomicose foi estabelecido, pelo exame micológico direto, em 170 indivíduos. O diagnóstico etiológico foi estabelecido pela cultura para fungos. Dentre os 107 agentes identificados, os dermatófitos foram identificados em 78,52% (N=84), as leveduras em 13,08% (N=14) e os FFND em 8,40% (N=9) das vezes. CONCLUSÃO: É necessário que se estabeleça o diagnóstico etiológico dos casos de onicomicoses, já que os fungos filamentosos não dermatófitos ocorrem com freqüência considerável e são indistinguíveis daquelas por dermatófitos. / INTRODUCTION: Onychomycosis, a nail fungus infection is the most frequent nail disease, constituting about half of all nail disorder. It can be caused by dermatophytes, yeasts and non- dermatophytes filamentous fungi. OBJECTIVE: Characterize the onychomycosis caused by filamentous fungi non- dermatophytes. (1) Verify after a clinical suspicion of onychomycosis, which are the frequency of fungi recovery, (2) examine, after a clinical suspicion of onychomycosis, which species of fungi are recovered, (3) Checking, among the total of identified species , which are the frequency of the species of filamentous fungi not dermatophytes. METHODS: Two hundred and five patients with clinical suspicion of onychomycosis were studied in the period from December 2003 to November 2004, through direct mycological examination and culture for fungus. RESULTS: The diagnosis of onychomycosis has been established by direct mycological examination, in 170 individuals. The etiological diagnosis was established by the culture for fungus. Among the 107 persons identified, the dermatophytes were recovered in 78.52% (N = 84), the yeast in 13.08% (N = 14) and filamentous fungi non- dermatophytes in 8,40% (N = 9). CONCLUSION: It is necessary to establish the etiological diagnosis of the cases of onychomycosis, as filamentous fungi non- dermatophytes occur often than ever considered and are its clinic features are indistinguishable from those of the dermatophytes.

S.aureus resistente à meticilina(SARM) é um problema em centros de fibrose cística(FC). Foi desenvolvido um multiplex PCR(mPCR) para detecção do SARM em secreção respiratória de 106 pacientes com FC. Foram usados 3 pares de primers para amplificar os genes: mecA, coa, 16S rRNA. O mPCR detectou até 0,25pg de DNA de SARM e identificou 70/106(66,0%) pacientes com S.aureus e 28/106(26,4%) com SARM. O mPCR mostrou especificidade, sensibilidade, valores preditivos positivo e negativo de 87,8%, 84,4%, 50% e 97,5%, considerando a cultura como padrão-ouro. Os resultados discordantes foram testados com outros primers, confirmando os obtidos pelo mPCR em 82/84. O mPCR mostrou-se método rápido e confiável para detecção de SARM / Methicillin-resistant S.aureus(MRSA) is a significant concern in cystic fibrosis(CF) centers. A multiplex PCR(MPCR) was developed to detect MRSA in respiratory secretion of 106 CF patients. Three pairs of primers were used for amplification of genes: mecA, coa, 16S rRNA. MPCR detected 0.25pg of MRSA DNA and identified 70/106(66.0%) of patients with S.aureus and 28/106(26.4%) with MRSA. MPCR showed specificity, sensitivity, positive and negative predicted values at 87.8%, 84.4%, 50% and 97.5%, considering culture as the gold standard. Discrepant results were retested using different primers, and confirmed MPCR results in 82/84. The developed MPCR was found to be a rapid and reliable method for MRSA detection

Foi realizado um estudo para verificar a ocorrência de leveduras do gênero Rhodotorula, em hemocultura por um período de 8 anos. Os pacientes identificados foram descritos clinicamente segundo variáveis de interesse incluindo dados sobre terapêutica e desfecho. Determinou-se também as concentrações inibitórias mínimas de 20 cepas frente a diferentes antifúngicos de acordo com NCCLS e EUCAST. Realizou-se tipagem molecular através da cariotipagem eletroforética em campo pulsátil / A study was conducted to verify the frequency of occurrence of Rhodotorula spp. from blood cultures over an 8-year period, clinically and microbiologically characterizing patients affected, including data regarding antifungal treatment and outcome. The minimal inhibitory concentrations of antifungal agents were determined against 20 isolates. Molecular typing of the strains were performed using pulsed field gel electrophoresis method