Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-26 / A via de sinalização Janus Kinase/Transdutores de Sinal e Ativadores de Transcrição (JAK/STAT) é uma das mais importantes vias de sinalização para transdução do sinal usadas pelas citocinas. Entretanto, o papel da via JAK/STAT na lesão de isquemia reperfusão (IR) hepática ainda não foi explorado. Este estudo foca no papel da proteína-quinase JAK2, que está acima de STAT-1 na cascata de sinalização JAK/STAT, e o seu papel no mecanismo da lesão de IR hepática. Isquemia quente parcial (lobos esquerdo e médio) foi induzida no fígado de camundongos C57BL/6 por 90 minutos, seguidos por 6 horas de reperfusão. Os animais foram tratados com o inibidor específico de JAK-2 (Tyrphostin AG490; 40 mg/kg, i.p) ou veículo (DMSO), 60 minutos antes do início da isquemia. O bloqueio de JAK2 resultou em significante redução da lesão hepática e da apoptose de hepatócitos. A análise imunohistoquímica revelou uma importante redução no infiltrado de macrófagos e de polimorfonucleares neutrófilos no tecido hepático dos animais que receberam AG490 anteriormente ao insulto isquêmico, comparado aos animais controle (DMSO). A expressão de citocinas pro-inflamatórias (TNF-α, IL-6, IL-1β) e das quimiocinas (CXCL-10 and CXCL-2) também estava reduzida no grupo tratado com AG490, comparado ao grupo controle. A análise da presença de células apoptóticas, através da técnica de TUNEL no tecido hepático dos camundongos, revelou menor número de hepatócitos em processo de apoptose no grupo tratado com AG490 consistente com o achado de western-blot que revelou menor expressão da proteína caspase-3 clivada em paralelo com o aumento da expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-XL, no grupo que recebeu AG490. Para confirmar nossos achados in vivo nós testamos AG490 (75 mM) em culturas de macrófagos derivados da medula óssea (BMM) e em cultura de células da linhagem de hepatoma- CRL1830, ambas estimuladas com LPS (10 ng/ml). Em culturas de macrófagos derivados da medula óssea, AG490 reduziu a expressão gênica das citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias (IL-6, IL-12p40, IL-1β, CXCL-10 e iNOS) que encontravam-se elevadas apos estimulação com LPS. Em cultura de células da linhagem de hepatoma- CRL1830, AG490 reduziu a expressão de caspase-3 clivada. Além do que, o bloqueio de JAK2 inibiu a fosforilação de STAT1 e STAT3. Pela primeira vez demonstramos que a sinalização por JAK2 é essencial na fisiopatologia da lesão de IR hepática, já que seu bloqueio seletivo protegue o fígado contra inflamação e apoptose. / The Janus kinase/signal transducers and activators of transcription (JAK/STAT) signaling is one of the major pathways for cytokine signal transduction. However, the role of the JAK/STAT pathway in liver I/R is not clear. This study focuses on JAK2, which functions upstream of STAT-1 in JAK/STAT, and its role in the mechanism of liver IRI. Partial warm ischemia was produced in the hepatic lobes of C57BL/6 mice for 90min, followed by 6h of reperfusion. Mice were treated with JAK-2 inhibitor (Tyrphostin AG490; 40 mg/kg, i.p) or veicle, 60min prior to ischemic insult. JAK2 blockade resulted in significant reduction of hepatocyte apoptosis and liver injury. Macrophage and neutrophil infiltration, as assessed by immunohistochemistry, was markedly decreased in AG490-treated livers, compared with controls. The expression of proinflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, IL-1β) and chemokines (CXCL-10 and CXCL-2) was also significantly reduced in AG490-treated group, compared with controls. AG490-treated livers showed less TUNEL positive cells and reduced cleaved caspase-3 protein expression in parallel with increased Bcl-XL expression. We employed AG490 (75 mM) in primary bone marrow-derived macrophage (BMM) and hepatoma cell (CRL1830) cultures, both stimulated with LPS (10 ng/ml). In BMM cultures, AG490 depressed otherwise LPSinduced pro-inflammatory gene expression programs (IL-6, IL-12b, IL-1β, CXCL-10 and iNOS). In hepatoma cells, AG490 reduced cleaved-caspase-3 expression. Moreover, JAK2 blockade inhibited STAT1 and STAT3 phosphorylation. This is the first report, which documents that JAK2 signaling is essential in the pathophysiology of liver IRI, as its selective blockage ameliorated the disease process and protected livers from inflammation and apoptosis. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações / 103 p.

Para investigar a modulação do estradiol na inflamação gerada no intestino e suas repercussões sistêmicas utilizamos grupos de ratos (Wistar, 60 dias, 160g) submetidos a oclusão da artéria mesentérica superior (45 min), seguida por 2 h de reperfusão. Estudando o efeito de dois protocolos de tratamento com estradiol, terapêutico (30 min após a isquemia - 280 μg/kg, i. v.) ou preventivo (24 h antes da isquemia - 280 μg/kg, s. c.). Como controle utilizamos ratos falsamente submetidos à isquemia (Sham) e ratos não manipulados (Basal). Nossos resultados mostraram que a IR intestinal desencadeia uma inflamação local, isoladamente o intestino e de sistemicamente. Ambos protocolos diminuíram o TNF-α e leucócitos do fluido intestinal, MPO no intestino, LDH e alguns mediadores. Apenas o tratamento preventivo reduziu a permeabilidade vascular intestinal, aumento da motilidade intestinal e a contagem de células da medula óssea. O tratamento terapêutico mostrou diminuição da permeabilidade da mucosa intestinal, leucócitos circulantes, fosfatase alcalina e de mediadores. / To investigate the estradiol modulation of inflammation generated in the intestine and its systemic repercussions we used groups of rats (Wistar, 60 days, 160g) submitted to superior mesenteric artery occlusion (45 min), followed by 2 h of reperfusion. Studying two estradiol treatments protocols effects, therapeutic (30 min after ischemia - 280 μg/kg, i. v.) or preventive (24 h before ischemia - 280 μg/kg, s. c.). As control we utilized rats falsely submitted to ischemia (Sham) and rats not manipulated (Naïve). Our results show that intestinal IR triggers a local inflammation, in the intestine isolated and systemically. Both protocols reduced TNF-α and leukocytes in the intestinal fluid, intestinal MPO, LDH and some mediators (IL-1β, IL-10, VEGF, MIP-1α, MCP-1, GRO/KC e IP-10). Only the preventive treatment reduced of intestinal vascular permeability, increased intestinal motility and bone marrow cell count. The therapeutic treatment showed reduction of intestinal mucosal permeability, circulating leukocytes, alcalin fosfatase and mediators (IL-6, TNF-α e GM-CSF).

Avaliamos a função cardíaca frente a Isquemia e reperfusão, em corações isolados de ratas intactas, com hipotireoidismo (Hipo), hipotireoidismo subclínico (HTS), redução dos níveis de hormônios ovarianos (OO) e a ambas condições (HTS+OO). Na estabilização, a Pressão Desenvolvida pelo Ventrículo Esquerdo (LVDP), Pressão Diastólica Final (EDP) e Pressão de Perfusão não diferiram. Porém, a Primeira Derivada Positiva das Pressões (+dP/dt), Primeira Derivada Negativa das Pressões (-dP/dt) e frequência cardíaca foram menores no grupo Hipo. Na reperfusão, os corações Hipo tiveram EDP, +dP/dt e -dP/dt semelhantes a estabilização. Assim, sugere-se que o HTS, a OO e o HTS + OO não alteraram a recuperação cardíaca após a isquemia. E que o Hipo é resistente à lesão por isquemia, apesar da função cardíaca deprimida. / We evaluate the cardiac function in relation to an ischemia and reperfusion event in hearts isolated from intact rats, With hypothyroidism (Hypo), subclinical hypothyroidism (HTS), decreased levels of ovarian hormones (OO) and both conditions (HTS + OO). At etabilization the Left Ventricle Developed Pressure (LVDP), Final Diastolic Pressure (EDP) and Perfusion Pressure did not differ. However, the First Positive Pressure Derivative (+ dP / dt), First Negative Pressure Derivative (-dP / dt) and heart rate were lower in the Hypo group. On reperfusion the hypothyroid hearts presented EDP, + dP / dt and -dP / dt Similar to stabilization. Thus, it is suggested that HTS, a OO e o HTS + OO Did not change cardiac recovery after ischemia.Is that hipo is resistant to ischemia injury, despite depressed cardiac function.

Orientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Resumo: A espécie Terminalia catappa L. (Combretaceae) é uma planta conhecida no Brasil como “amendoeira”, “amendoeira da praia” ou “chapéu-de-Sol” e é utilizada popularmente na Ásia para o tratamento de hepatite, diarreia e disenteria. Essa planta medicinal faz parte da Farmacopeia Caribenha para o tratamento de gastrite e infecção urinária. A partir de sua indicação popular, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito antiulcerogênico da infusão das folhas de Terminalia catappa (IFTC) no combate aos efeitos lesivos gástricos promovidos pelo uso do etanol, anti-inflamatório não esteroidal (AINE) e isquemia e reperfusão (I/R) em ratos. Para tanto, foram utilizados modelos experimentais agudos em que os animais receberam diferentes doses de IFTC e depois foram submetidos a indução de lesão por agente deletério (etanol, AINE ou I/R). A avaliação do efeito curativo ocorreu a partir da implantação da lesão gástrica nos animais e posteriormente foi realizado o tratamento pela via oral nos diferentes grupos experimentais por períodos que variaram de 3 à 6 dias consecutivos. Foram analisados os parâmetros macroscópicos como a área de lesão e parâmetros bioquímicos relacionados aos sistemas antioxidantes e anti-inflamatórios (superóxido dismutase, glutationa reduzida, catalase, mieloperoxidase, peroxidação lipídica). Foi possível constatar que o tratamento prévio com IFTC não é capaz de prevenir o surgimento das lesões gástricas induzidas por etanol ou I/R mas é capaz de reduzir as lesões... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The species Terminalia catappa L. (Combretaceae) is a plant known in Brazil as "amendoeira", "amendoeira da praia" or "chapeu de sol" and is popularly used in Asia for the treatment of hepatitis, diarrhea and dysentery. This medicinal plant is part of the Caribbean Pharmacopoeia for the treatment of gastritis and urinary infection. The objective of this study was to evaluate the antiulcerogenic effect of the infusion of leaves of Terminalia catappa (IFTC) against the gastric lesions promoted by the use of ethanol, non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and ischemia and reperfusion (I/R) in rats. For this, acute experimental models were used in which the animals received different doses of IFTC and then were subjected to injury induction by etanol, NSAID or I/R. The healing model occurred after implantation of the gastric lesion in the animals and afterwards the oral treatment was carried out in the different experimental groups for periods ranging from 3 to 6 consecutive days of treatment. Macroscopic parameters such as lesion area and biochemical parameters related to antioxidant and anti-inflammatory systems (superoxide dismutase, reduced glutathione, catalase, myeloperoxidase, lipid peroxidation) were analyzed. It was possible to verify that the previous treatment with IFTC is not able to prevent the appearance of the gastric lesions induced by ethanol or I/R but it is able to reduce the lesions by NSAID in the dose of 300 mg/kg. However, treatment with IFTC for 3 ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Para investigar a modulação do estradiol na inflamação gerada no intestino e suas repercussões sistêmicas utilizamos grupos de ratos (Wistar, 60 dias, 160g) submetidos a oclusão da artéria mesentérica superior (45 min), seguida por 2 h de reperfusão. Estudando o efeito de dois protocolos de tratamento com estradiol, terapêutico (30 min após a isquemia - 280 μg/kg, i. v.) ou preventivo (24 h antes da isquemia - 280 μg/kg, s. c.). Como controle utilizamos ratos falsamente submetidos à isquemia (Sham) e ratos não manipulados (Basal). Nossos resultados mostraram que a IR intestinal desencadeia uma inflamação local, isoladamente o intestino e de sistemicamente. Ambos protocolos diminuíram o TNF-α e leucócitos do fluido intestinal, MPO no intestino, LDH e alguns mediadores. Apenas o tratamento preventivo reduziu a permeabilidade vascular intestinal, aumento da motilidade intestinal e a contagem de células da medula óssea. O tratamento terapêutico mostrou diminuição da permeabilidade da mucosa intestinal, leucócitos circulantes, fosfatase alcalina e de mediadores. / To investigate the estradiol modulation of inflammation generated in the intestine and its systemic repercussions we used groups of rats (Wistar, 60 days, 160g) submitted to superior mesenteric artery occlusion (45 min), followed by 2 h of reperfusion. Studying two estradiol treatments protocols effects, therapeutic (30 min after ischemia - 280 μg/kg, i. v.) or preventive (24 h before ischemia - 280 μg/kg, s. c.). As control we utilized rats falsely submitted to ischemia (Sham) and rats not manipulated (Naïve). Our results show that intestinal IR triggers a local inflammation, in the intestine isolated and systemically. Both protocols reduced TNF-α and leukocytes in the intestinal fluid, intestinal MPO, LDH and some mediators (IL-1β, IL-10, VEGF, MIP-1α, MCP-1, GRO/KC e IP-10). Only the preventive treatment reduced of intestinal vascular permeability, increased intestinal motility and bone marrow cell count. The therapeutic treatment showed reduction of intestinal mucosal permeability, circulating leukocytes, alcalin fosfatase and mediators (IL-6, TNF-α e GM-CSF).

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Foram investigados os efeitos da L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) sobre as concentraÃÃes sanguÃneas e teciduais de metabÃlitos (lactato, piruvato, glicose e corpos cetÃnicos), substÃncias reagentes ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS), glutationa (GSH), mieloperoxidase (MPO) e avaliaÃÃo histopatolÃgica em gerbils. Tratou-se de um estudo experimental, controlado. Utilizaram-se 54 gerbils, machos, com peso mÃdio de 150g, distribuÃdos aleatoriamente em 3 grupos: salina com isquemia e reperfusÃo (SIR), salina sem isquemia e reperfusÃo (SSI), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusÃo (GIR), redistribuÃdos em 3 subgrupos: T0 (tempo mÃximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusÃo) e T60 (60 min de reperfusÃo), com 6 animais cada. Foram prÃ-tratados com soluÃÃo salina 2,0 mL 0,9% endovenoso (e.v.) ou L-ALNGLN 0,75g/Kg (e.v.), 30 min antes do inÃcio dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusÃo bilateral das artÃrias carÃtidas comuns (ACCs), por um perÃodo de 15 minutos. ApÃs todos os procedimentos cirÃrgicos as amostras (sangue e tecido) foram coletadas ao final dos trÃs tempos. Nas comparaÃÃes entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas concentraÃÃes de lactato no sangue no grupo SIR em T0 (0,756Â0,091 versus 3,596Â1,546); p=0,0122, T30 (0,869Â0,254 versus 3,316Â1,356); p=0,0015 e em T60 (0,858Â0,460 versus 2,409Â0,801); p=0,0021. No tecido cerebral houve um aumento significante do lactato em T0 (1,374Â0,172 versus 2,530Â0,850); p=0,0085, T30 (0,891Â0,697 versus 1,840Â0,530); p=0,0243 e em T60 (1,182Â0,136 versus 1,744Â0,463); p=0,0173 no grupo SIR. Para as concentraÃÃes de piruvato no sangue observou-se um aumento significante em T0 (p=0,0424); T30 (p=0,0271) e em T60 (p=0,0175) e no tecido cerebral em T0 (p=0,0369) no grupo SIR. Para as concentraÃÃes de glicose no sangue houve um aumento significante em T0 (0,493Â0,393 versus 1,116Â0,364); p=0,0174, T30 (0,617Â0,356 versus 1,502Â0,314); p=0,0010 e em T60 (0,998Â0,411 versus 1,718 Â 0,477); p=0,0190 e no tecido cerebral em T0 (0,292Â0,081 versus 0,952Â0,7140); p=0,0484, T30 (0,264Â0,080 versus 1,038Â0,609); p=0,0116 e em T60 (0,234Â0,089 versus 0,985Â0,533); p=0,0067, no grupo SIR. Verificou-se um aumento significante nos nÃveis enzimÃticos de MPO em T0 (p<0,0001), T30 (p=0,0269) e em T60 (p=0,0005) no grupo SIR. Na avaliaÃÃo histopatolÃgica no grupo SIR nas camadas piramidal interna e granular interna foram observados aumento significante de picnose, neurÃnios vermelhos, congestÃo e edema, em T0, T30 e T60. Nas comparaÃÃes entre grupos (SIR) e (GIR) houve diminuiÃÃo significante no grupo GIR no sangue de lactato em T0 (3,596Â1,546 versus 1,960Â0,450); p=0,0321, T30 (3,316Â1,356 versus 1,971Â 0,568); p=0,0490 e em T60 (2,409Â0,801 versus 1,516Â0,307); p=0,0290 e no tecido cerebral em T0 (2,530Â0,850 versus 1,540Â0,302); p=0,0228. No tecido cerebral no grupo GIR houve diminuiÃÃo significante de TBARS em T30 (0,110Â0,006 versus 0,057Â0,040); p=0,0102 e um aumento significante de GSH em T0 (3,454Â1,584 versus 10,054Â2,880); p=0,0006, T30 (10,949Â1,579 versus 81,767Â9,060); p<0,0001 e em T60 (101,83Â2,631versus 114,924Â6,311); p=0,0011. Na avaliaÃÃo histopatolÃgica no grupo GIR na camada piramidal interna foram observados diminuiÃÃo significante de picnose nos tempos T30 (3,00 (2,75 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0086 e em T60 (4,00 (3,75 a 5,55) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0379 e nos neurÃnios vermelhos em T30 (3,00 (2,00 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0159 e em T60 (4,00 (3,75 a 4,75) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0493. Na camada granular interna no grupo GIR houve diminuiÃÃo significante de picnose em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p= 0,0412, neurÃnios vermelhos em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p=0,0412 e no grau de edema em T30 (2,00 (1,00 a 2,00) versus 1,00 (0,75 a 1,00); p=0,0225. Portanto, o prÃ-condicionamento com L-ALN-GLN foi capaz de induzir glicÃlise cerebral e de promover um efeito protetor na lesÃo de isquÃmia e reperfusÃo em gerbils, uma vez que elevou a sÃntese de glutationa tanto na isquemia quanto na reperfusÃo, reduziu a peroxidaÃÃo lipÃdica durante a fase de reperfusÃo e diminuiu o grau de edema intracerebral, a quantidade de picnose e neurÃnios vermelhos no tecido cerebral. / We investigated the metabolic effects of L-alanyl-Glutamine (L-ALN-GLN) on blood and tissue concentrations of metabolites (lactate, pyruvate, glucose and ketone bodies), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), glutathione (GSH), myeloperoxidase (MPO) and histopathologic evaluation of gerbils. This was an experimental and controlled study. Fifty-four male gerbils with a mean weight of 150gwere used, and were divided randomly and equally into 3 groups: saline with ischemia and reperfusion (SIR), saline without ischemia and reperfusion (SSI), L-alanyl-glutamine ischemia and reperfusion (GIR). They were then redistributed into three subgroups: T0 (maximum time of ischemia), T30 (30 min of reperfusion) and T60 (60 min of reperfusion), containing 6 animals each. They were pretreated with saline 2.0 mL 0.9% intra-venous (iv) or ALN-L-GLN 0.75 g / kg (iv) 30 min before the start of the experiments. Cerebral ischemia was induced by bilateral occlusion of the common carotid arteries (CCAs) for a period of 15 minutes. After all surgical procedures, the samples (blood and tissue) were collected at the end of the three periods. When comparing SSI and SIR groups, a significant increase of lactate was found in SIR group in T0 (0.756Â0.091 versus 3.596Â1.546; p=0.0122, T30 (0.869Â0.254 versus 3.316Â1.356); p=0.0015, and T60 (0.858Â0.460 versus 2.409Â0.801); (p=0.0122). In brain tissue there was significant lactate increase in TO (1.374Â0.172 versus 2.530Â0.850); p=0.0085, T30 (0.891Â0.697 versus 1.840Â0.530); p=0.0243 and T60 (1.182Â0.136 versus 1.744Â0.463); p=0.0173, in SIR group. In blood and tissue concentrations of pyruvate was found a significant increase in T0 (p=0.424), T30 (p=0.0271) and T60 (p=0.0175), and in brain tissue in T0 (p=0.0369) in the SIR group. In glucose blood concentrations there was a significant increase in T0 (0.493Â0.393 versus 1.116Â0.364); p=0.0174, T30 (0.617Â0.356 versus 1.502Â0.314); p=0.0010 and T60 (0.998Â0.411 versus 1.718Â0.477); p=0.0190, and in brain tissue in T0 (0.292Â0.081 versus 0.952Â0.7140); p=0.0484, T30 (0.264Â0.080 versus 1.038Â0.609); p=0.0116 and T60 (0.234Â0.089 versus 0.985Â0.533); p=0.0067, in the SIR group. On blood ketone bodies there was a significant increase in T0 (p=0.0006) and T60 (p=0.0455), and in brain tissue in T0 (p=0.0428) in SIR group. There was a significant increase in MPO enzyme levels at T0 (p<0.0001), T30 (p=0.0269) and T60 (p=0.0005). In the histopathological evaluation in the internal pyramidal and granular layers in group CRS observed a significant increase of pyknosis, red neurons, congestion and edema, at T0, T30 and T60. In the comparison between the (SIR) and (GIR) groups, there was a significant decrease in T0 (3.596Â1.546 versus 1.960Â0.450); p=0.0321, T30 (3.316Â1.356 versus 1.971Â0.568); p=0.0490 and T60 (2.409Â0.801 versus 1.516Â0.307); p=0.0290, and in brain tissue there was significant decrease in T0 (2,530Â0,850 versus 1.540Â0,302); p=0.0228. In brain tissue was found significant decrease in TBARS concentrations in T30 (0.110Â0.006 versus 0.057Â0.040); p=0.0102, and a significant increase of GSH in T0 (3.454Â1.584 versus 10.054Â2.880), p=0.0006, T30 (10.949Â1.579 versus 81.767Â9.060); p<0.0001 and T60 (101.83Â2.631 versus 114.924Â6.311); p=0.0011 in GIR group. Regarding the histological examination, a significant decrease of pyknosis was found at T30 (3.00 (2.75 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p= 0.0086 and T60 (4.00 (3.75 to 5.55) versus 2.00 (1.75 to 4.00); p=0.0379 and red neurons at T30 (3,00 (2,00 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p=0.0159 and T60 (4.00 (3.75 to 4.75) versus 2,00 (1.75 to 4.00); p= 0.0493. in the internal pyramidal layer. In the Internal granular layer in GIR group there was a significant reduction of pyknosis at T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412, red neurons in T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412 and on the intracerebral edema level at T30 (2.00 (1.00 to 2.00) versus 1.00 (0.75 to 1.00); p=0.0225. Therefore, the preconditioning with L-GLN-ALN is able to induce brain glicolise and promote a protective effect on ischemic brain injury and reperfusion in gerbils, since it increased the glutathione synthesis both on ischemia and reperfusion, as well as decreasing lipid peroxidation during the reperfusion phase and decreased the intercerebral edema level, and the number of pyknosys and red neurons in brain tissue.

Evidências clínicas e experimentais mostram que a isquemia e reperfusão intestinal (I/R-intestinal) induz lesão pulmonar aguda (LPA) que, em casos mais graves, pode evoluir para a síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA). A LPA se caracteriza pela liberação de amplo espectro de mediadores inflamatórios, infiltração de neutrófilos e aumento de permeabilidade vascular. Sabe-se que mediadores inflamatórios gerados no local da I/R-intestinal são transportados pelo sistema linfático mesentérico e, ao atingirem o pulmão, contribuem para a LPA. A enzima heme oxigenase 1 (HO-1), exerce importante função na homeostasia celular, devido à sua ação catabólica sobre o grupo heme das hemoproteínas, gerando como subprodutos ferro, biliverdina e monóxido de carbono. Esses subprodutos possuem ação antiinflamatória, antioxidante e antiapoptótica. Todavia, o papel da HO-1 no controle da LPA causada pela I/R-intestinal ainda não está totalmente esclarecido. No presente estudo investigamos a expressão da HO-1 e o efeito de sua indução sobre as repercussões pulmonares decorrentes da I/R-intestinal. Para tanto, ratos machos Wistar (220-250 g) foram submetidos a 45 min de isquemia intestinal pela obstrução da artéria mesentérica superior e a 2 h de reperfusão. O grupo controle consistiu de animais falsamente operados (Sham). Ainda, a indução da HO-1 foi realizada pelo tratamento dos animais com o composto Hemin (10 mg/kg) 48 e 24 h antes da indução da I/R-intestinal. A I/R-intestinal aumentou a atividade pulmonar da mieloperoxidase (MPO) e o extravasamento do corante azul de Evans (AE) no pulmão. Os níveis de IL-1<font face=\"Symbol\">b elevaram no explante pulmonar (24 h) enquanto os de IL-10 foram reduzidos após a I/R-intestinal. Ainda, a I/R-intestinal diminui a expressão pulmonar da SOD-1 e promoveu aumento da expressão da iNOS. Os resultados obtidos revelam que a I/R-intestinal por si só não induziu a expressão gênica da enzima HO-1, porém o tratamento dos animais com Hemin elevou a sua expressão, a qual foi acompanhada pela redução da atividade pulmonar de MPO e do extravasamento do corante AE. Os elevados níveis pulmonares de IL-1<font face=\"Symbol\">b foram reduzidos pelo tratamento dos animais com o Hemin e houve elevação da IL-10 e VEGF no mesmo tecidos. A indução da HO-1 preveniu o aumento dos níveis de IL-1<font face=\"Symbol\">b e IL-10 e promoveu aumento dos níveis de VEGF na linfa dos animais. Com respeito ao sistema antioxidante, nossos dados indicaram que a indução da HO-1, parece estar relacionada com a elevação da expressão de SOD-1, SOD-2 e redução da expressão de iNOS. Concluindo, os dados obtidos permitem sugerir que a indução prévia da expressão de HO-1 controla a magnitude da lesão pulmonar causada pela I/R-intestinal por mecanismos envolvendo o aumento da atividade de parcela do sistema antioxidante e regulação do balanço entre a geração de citocinas antiinflamatórias e pró-inflamatórias no pulmão. / Clinical and experimental evidences have reported that intestinal ischemia and reperfusion (I/R-intestinal) induces acute lung injury (ALI), which in severe cases can progress to acute respiratory distress syndrome (ARDS). The ALI is characterized by the release of a broad spectrum of inflammatory mediators, neutrophil infiltration and increased vascular permeability. It is known that inflammatory mediators generated at the site of I/R-intestinal are transported by the mesenteric lymphatic system and, on reaching the lung, contribute to the ALI. The enzyme heme oxygenase 1 (HO-1) plays an important role in cellular homeostasis, due to its catabolic action on heme group of hemoproteins, forming as by-products such as iron, biliverdin and carbon monoxide. It is known that these by-products have anti-inflammatory, antioxidant and antiapoptotic actions. However, the role of HO-1 in the control of ALI caused by I/R-intestinal is not yet fully understood. In the present study we investigated the expression of HO-1 and the effects of its induction on pulmonary complications resulting from I/R-intestinal. So, male Wistar rats (220-250 g) were subjected to 45 min of intestinal ischemia by occlusion of the superior mesenteric artery and 2 h of reperfusion. The control group consisted of animals falsely operated (Sham). Still, the induction of HO-1 was performed by treating animals with the compound Hemin (10 mg/kg) 48 and 24 h before the induction of I/R-intestinal. The I/R-intestinal increased the pulmonary activity of the myeloperoxidase (MPO) and the extravasation of Evans blue dye (EB) in the lung. Levels of IL-1<font face=\"Symbol\">b increased in lung explant (24 h) while the IL-10 were reduced after I/R-intestinal. Further, the I/R-intestinal reduces pulmonary expression of SOD-1 and promoted the increase of iNOS expression. The results indicate that the I/R-intestinal alone did not induce gene expression of HO-1 enzyme, but the treatment of animals with Hemin increased its expression which was accompanied by reduction of pulmonary activity of MPO and extravasation of the dye EB. The high pulmonary levels of IL-1 were reduced by treatment of animals with Hemin and there was an increase of IL-10 and VEGF in the same tissue. The Induction of HO-1 prevented the increased levels of IL-<font face=\"Symbol\">b 1 and IL-10 and promoted increasing of the VEGF levels in the animals lymph. With respect to the antioxidant system, our data indicate that induction of HO-1, seems to be related to the elevation of expression of SOD-1, SOD-2 and reduction of iNOS expression. In conclusion, our data may suggest that prior induction of HO-1 expression controls the magnitude of lung injury caused by I/R-intestinal by mechanisms involving increased activity of a portion of the antioxidant system and regulation of the balance between generation anti-inflammatory cytokines and pro-inflammatory in the lung.

Citocinas geradas durante a I/R-i promovem lesão pulmonar aguda e podem causar imunossupressão. Investigamos se a inflamação pulmonar após dias de reperfusão intestinal está relacionada com alterações no sistema imune. Ratos machos Wistar foram submetidos a oclusão da artéria mesentérica superior por 45 min e a 2 h, 3, 5 ou 20 dias de reperfusão. Observamos que após 5 dias de reperfusão intestinal enterobactérias estão presentes nos linfonodos mesentéricos e que os neutrófilos circulantes estão mais ativos no combate a patógenos, enquanto leucócitos da cavidade peritoneal não. Notamos aumento de IL-1b, TNF-a, IL-17, IL-4 e diminuição de IL-10 no explante pulmonar e aumento de IL-1b, IFN-g e LDH no soro. Já os níveis de nitritos, corticosterona, HMGB-1, ácido úrico, AMPc e a mecânica respiratória não se alteraram. Os resultados apontam para a I/R-i como promotora de modificação temporais no organismo. Alterações nos mecanismos regulatórios da inflamação e do sistema imune contribuem para a inflamação pulmonar e sistêmica, sem alterar a função mecânica pulmonar / Cytokines generated during intestinal I/ R promote acute lung injury and may cause immunosuppression. We investigate if the pulmonary inflammation observed after several days of reperfusion is related to changes in the immune system. Male Wistar rats were subjected to occlusion of the superior mesenteric artery for 45 min and reperfused for 2 h , 3, 5 or 20 days. We observed that after 5 days of reperfusion enterobacteraceae are present in mesenteric lymph nodes and that circulating neutrophils are more effective against pathogens, whereas leukocytes from the peritoneal cavity are not. We noted increase of IL-1b, TNF-a, IL-17, IL -4 and decrease of IL-10 in lung explant and increase of IL-1b, IFN-g and LDH in serum. Furthermore, the levels of nitrites, corticosterone, HMGB -1, uric acid, cAMP, as well as respiratory function, did not change. Based on the foregoing, we observed that alterations in regulatory mechanisms of inflammation and immune system after contribute to pulmonary and systemic inflammation, but do not alter pulmonary mechanical function.

Introdução: O transplante renal é amplamente reconhecido como a melhor forma de tratamento para os pacientes que necessitam de terapia de substituição renal. Frequentemente a equipe transplantadora se depara com a difícil questão de determinar se órgãos, provenientes de doadores falecidos e limítrofes ou em parada cardíaca, estão aptos para serem transplantados. É difícil quantificar a intensidade do dano provocado pela isquemia no enxerto a ser utilizado, especialmente se o doador apresentou quadro de instabilidade hemodinâmica com queda significativa da perfusão tecidual e aumento do risco de diminuir a função do enxerto e afetar adversamente sua sobrevida. Desta forma torna-se justificável a utilização da técnica de espectroscopia de fluorescência induzida pelo laser, na tentativa de se avaliar a correlação entre os seus achados e o grau de lesão histológica renal experimental, uma vez que se trata de um método objetivo, não invasivo, rápido e em tempo real que, futuramente, pode ser aplicada nos transplantes renais em humanos. Objetivos: Avaliar a correlação entre os dados da espectroscopia de fluorescência induzida pelo laser e alterações histológicas na isquemia e reperfusão renal em ratos, e se existe diferença significativa na leitura da espectroscopia entre os polos superior, inferior e o terço médio. Materiais e Métodos: Foram utilizados 33 ratos (Rattus norvegicus) machos adultos da linhagem Wistar que, depois de anestesiados, tiveram seus rins esquerdos abordados. Inicialmente os rins foram submetidos à detecção da espectroscopia de fluorescência dos pólos superiores, inferiores e terços médios. As excitações foram geradas por lasers com comprimentos de onda de 408, 442 e 532 nm. Em seguida os pedículos renais esquerdos foram dissecados, isolados e clampeados com auxílio de mini-pinça vascular. Então, os animais foram divididos aleatoriamente em três grupos isquêmicos de 30, 60 e 120 minutos de isquemia quente. Em cada um dos grupos, os rins foram novamente analisados pela espectroscopia de fluorescência, bem como após 5 minutos de reperfusão, utilizando novamente feixes excitatórios com os mesmos comprimentos de onda, nas mesmas regiões renais. Posteriormente os rins esquerdos foram coletados e enviados para estudo histológico. Resultados: O tempo de isquemia mostrou forte influência com a graduação histológica. Com 30 minutos de isquemia, nenhum comprimento de onda (408, 442 e 532 nm) apresentou correlação com a graduação histológica (p = 0,81; p = 0,11; p = 0,21, respectivamente). Com 60 minutos de isquemia, o laser de excitação de 532 nm (na fase de reperfusão) apresentou coeficiente de correlação negativa significativa (r = - 0,61) com a graduação histológica. Na isquemia de 120 minutos, o laser com 442 nm de comprimento de onda (na fase de reperfusão) mostrou o coeficiente de correlação negativa significativa (r = - 0,73) com a graduação histológica. O terço médio renal apresentou média estatística superior à dos polos (p < 0,001) na leitura da espectroscopia de fluorescência. Conclusões: Há correlação entre os dados da espectroscopia de fluorescência induzida pelo laser e as alterações histológicas na isquemia renal em ratos, sendo necessário, durante a investigação, analisar apenas o terço médio renal. / Introduction: Renal transplantation is widely recognized as the best form of treatment for patients who require renal replacement therapy. Often, the transplant team is faced with a difficult question, if organs from deceased marginal donors or non-heart beating donors are able to be transplanted. It is difficult to quantify the intensity of damage caused by ischemia in the graft to be used, especially if the donor had hemodynamic instability with a significant decrease of the tissue perfusion and an increased of the risk of diminishing the graft function which could affect adversely its survival. Thus it is justified to use the technique of laser-induced fluorescence spectroscopy, to assess the correlations between its results and the histological grade in experimental renal injury, since it is an objective, non-invasive, fast and in real-time analysis, which can be applied, in the future, in human kidney transplants. Objectives: To evaluate the correlation between the data of laser-induced fluorescence spectroscopy and histological changes in kidney ischemia and reperfusion in rats, and if there are significant differences of reading between the upper and lower poles and the middle area of such kidneys. Materials and Methods: We used 33 adults male rats (Rattus norvegicus) of Wistar strain, which after anesthetized, had their left kidney addressed. Initially such kidneys were submitted to detection of the fluorescence spectroscopy of the upper pole, lower pole and the middle area. Excitations were generated by lasers having wavelengths of 408, 442 and 532 nm. Then the left renal pedicles were dissected, isolated and clamped. Then the animals were randomized into three ischemic groups of 30, 60 and 120 minutes. In each group, the kidneys were analyzed by fluorescence spectroscopy for the second time, and again after 5 minutes of reperfusion, using excitatory beam with same wavelength, at the poles (upper and lower) and the middle area of the kidneys. Later, the left kidney were collected and sent for histological examination. Results: The ischemia time showed a strong influence on the histological grade. With 30 minutes of ischemia, no wavelength (408, 442 and 532 nm) was correlated with the histological lesions (p = 0.81, p = 0.11, p = 0.21, respectively). With 60 minutes of ischemia, the laser excitation of 532 nm (in the reperfusion phase) showed a significant negative correlation coefficient (r = - 0.61) with the histological grading. In 120 minutes of ischemia, laser with 442 nm wavelength (in the reperfusion phase) showed a significant negative correlation coefficient (r = - 0.73) with the histological grade. The middle area of the kidneys showed a higher average statistically (p< 0,001) than the poles in the reading of fluorescence spectroscopy. Conclusions: There is a strong correlation between the data of laser-induced fluorescence spectroscopy and the histological changes in rats renal ischemia, being necessary, during the investigation, to analyze only the middle area of the kidneys.

Segundo a Organização Mundial da Saúde, a obesidade acomete mais de meio milhão de pessoas no mundo. A obesidade desencadeia uma inflamação sistêmica crônica de baixo grau caracterizada pela presença de mediadores pró-inflamatórios gerados no tecido adiposo. Esta inflamação crônica também está presente no tecido pulmonar podendo ser exacerbada por episódios isquêmicos. A Isquemia e Reperfusão (IR) intestinal é um modelo experimental no qual observamos inflamação pulmonar. Estudos do laboratório mostram que os hormônios sexuais femininos (HSF), principalmente o estradiol, modulam a inflamação pulmonar após a IR. Nossos estudos demostram que a redução prolongada dos HSF associada à obesidade induz aumento da inflamação local e sistêmica, com foco na inflamação pulmonar. Após a indução da IR intestinal a inflamação pulmonar mostrou-se mais acentuada. Conclui-se que os HSF apresentam papel importante no controle da inflamação decorrente da IR intestinal, podendo sugerir um estudo que avalie o tratamento prolongado de estradiol. / According to World Health Organization, obesity affects more than half a million people in the world. Obesity triggers a low-grade chronic, systemic inflammation characterized by the presence of proinflammatory mediators generated by the adipose tissue. It is noticeable that this chronic inflammation is also present in the lung tissue and may be exacerbated by ischemic episodes. Intestinal ischemia and reperfusion (IR) is an experimental model in which we observe pulmonary inflammation. Laboratory studies show that female sex hormones (FSH), especially estradiol, modulate pulmonary inflammation after IR. As a whole, our studies showed that the prolonged reduction of FSH in association with obesity induced exacerbated local, systemic and lung inflammation. After intestinal IR, pulmonary inflammation was more pronounced. In conclusion, FSH play an important role in the control of inflammation due to intestinal IR. It is suggested that the effects of a chronic treatment with estradiol in this scenario should be studied.