Tese (doutorado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2012 / Inclui bibliografias / Introdução: O Líquen Plano Bucal (LPB) é uma doença inflamatória crônica. Estudos confirmaram associação entre LPB e Vírus da Hepatite C (VHC). A avaliação das Regiões Organizadoras Nucleolares (NORs) em lesões bucais reflete o índice proliferativo celula

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-18Bitstream added on 2014-06-13T19:56:57Z : No. of bitstreams: 1 alves_mgo_me_sjc.pdf: 834163 bytes, checksum: 8578bf554b74c355303c43996ea144dd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O líquen plano (LP) é caracterizado como uma doença crônica de cunho autoimune que apresenta prevalência estimada de 2% na população em geral. Há grande controvérsia quanto à classificação da Organização Mundial de Saúde de que este seria uma desordem potencialmente maligna. O presente trabalho tem como proposição avaliar a expressão das proteínas p53, MDM2 e SUMO-1 em lesões de LP bucal e comparar a expressão destas proteínas com a observada em displasia epitelial (DE) bucal e carcinoma de células escamosas (CCE) bucal. A amostra por interesse foi constituída por cinco grupos de lesões em mucosa jugal. O primeiro grupo foi constituído por amostras de mucosa com aspecto clínico de normalidade (MN), o segundo por hiperplasia fibrosa inflamatória (HFI), o terceiro por LP, o quarto por DE e o quinto grupo por CCE. Estas amostras teciduais foram submetidas a exame histoquímico pela técnica da hematoxilina-eosina e exame imunoistoquímico para anticorpo anti-p53, anti-MDM2 e anti-SUMO-1. Os dados foram tabulados e tratados pelos testes de Kolmogorov-Smirnov e exato de Fisher. Os resultados do presente estudo mostraram que não houve diferença estatisticamente significante da expressão de p53 quando comparado LP com DE (p=0.2042) e com CCE (p=0.0656), esta diferença estava presente quando o LP foi comparado a HFI (p=0.00001) e a MN (p=0.0007). A diferença na expressão da MDM2 não foi estatisticamente significante quando comparado LP com DE (p=1.0) e com CCE (p=0.9972), mas não estava presente quando o LP foi comparado a HFI (p=0.0005) e a MN (p=0.0052). Em relação à proteína SUMO-1, houve diferença estatisticamente significante quando comparado LP com DE (p=0.0492) e com CCE (p=0.0001), na comparação de LP com HFI (p=1.0) e com MN (p=0.8302) não houve diferença estatisticamente significante. Conclui-se pela necessidade de estudos para esclarecer... / Lichen planus (LP) is a chronic autoimmune disease with an estimated prevalence of 2% in the general population. Controversy exists regarding the World Health Organization classification of LP as a potentially malignant disease. The objective of this study was to investigate the expression of proteins p53, MDM2 and SUMO-1 in oral LP lesions and to compare the expression of these proteins between LP and oral epithelial dysplasia (OED) and oral squamous cell carcinoma (OSCC). The sample consisted of the following five groups of cheek mucosa lesions was studied: normal oral mucosa (NM), inflammatory fibrous hyperplasia (IFH), LP, OED, and OSCC. The tissue samples were stained with hematoxylineosin for histochemical analysis and submitted to immunohistochemistry using anti-p53, anti-MDM2 and anti-SUMO-1 antibodies. The results were analyzed by the Kolmogorov-Smirnov test and Fisher’s exact test. No significant difference in the expression of p53 was observed between LP and OED (p=0.2042) or OSCC (p=0.0656). However, there was a significant difference when LP lesions were compared to IFH (p=0.00001) and NM (p=0.0007). Expression of MDM2 differed significantly between LP and IFH (p=0.0005) and NM (p=0.0052), but not between LP and OED (p=1.0) or OSCC (p=0.9972). A significant difference in the expression of SUMO-1 was observed between LP lesions and OED (p=0.0492) and OSCC (p=0.0001), but not between LP and IFH (p=1.0) or NM (p=0.8302). Further studies are needed to determine the role of inflammation as a possible malignant transformation in cases of LP.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-13Bitstream added on 2014-06-13T19:58:29Z : No. of bitstreams: 1 justi_mm_me_bauru.pdf: 615674 bytes, checksum: 1b89b58761347726f7fd07653566c181 (MD5) / O Líquen Plano Oral (LPO) caracteriza-se como doença complexa e multideterminada, cujas manifestações mostram-se sensíveis à influência de variáveis biopsicossociais, devendo ser estudada e tratada de forma integrativa, conjugando conhecimentos e esforços interdisplinares. Estudos apontam que a doença é exacerbada de acordo com as condições de estresse, tensão e perturbação emocional dos portadores. Pesquisas atuais sobre o estresse e suas relações com o adoecimento, principalmente no campo da psicoimunologia, têm enfatizado que tais relações dependem de aspectos de personalidade ou modos de ser dos diferentes indivíduos, que configuram variados modos de enfrentamento dos eventos estressores, mantendo ou não os efeitos imunodepressores do estresse e incrementando ou não seu potencial patogênico. Considerando tais registros pode-se relacionar o LPO com o estresse - presente na vida moderna e, cada vez mais, indicado como o principal elemento desencadeador das doenças da adaptação. O enfrentamento também deve ser relacionado, pois configura-se na forma como ocorre o processo de adaptação do sujeito frente às exigências da vida atual. O objetivo geral consiste em realizar estudo longitudinal de 10 pacientes com diagnóstico de LPO e que participaram de psicoterapia breve grupal e de acompanhamento do tamanho de LPO em 2003, averiguando suas condições de saúde, ocorrência de lesões de LPO, eventos de estresse, enfrentamento e eficácia adaptativa, de 2003 a 2008. Para o procedimento de coleta de dados foram utilizadas duas entrevistas (EDAO-R; Entrevista Estresse, Enfrentameto e Saúde - elaborada para o estudo), medidas atuais de LPO e registros de avaliações anteriores realizadas em 2003 e que consistiram de realização de Psicoterapia Breve Operacionalizada (PBO), aplicação da EDAO-R e coleta de medidas de LPO no início e no final da PBO... / Oral lichen planus (OLP) is characterized as a complex and multifactorial disease, and its manifestations are sensible to the influence of biopsychosocial variables, and, therefore, must be studied and treated in an integrative way, joining interdisciplinary efforts and knowledge. Studies demonstrate that this disease is aggravated according to the patients' conditions of stress, tension and emotional disturbance. Present researches on stress and its relation with the condition of falling sick, mainly in the field of psychoimmunology, have emphasized that such relations are dependent of personality aspects or ways of being of different individuals, which figure several ways of confrontation of the stressful events, maintaining or not the stress immunodepressive effects and increasing or not its pathogenic potential. Considering such registers, it is possible to relate OLP to stress - present in the modern life and, more and more, indicated as the main triggering element of adaptation diseases. Confrontation must also be related to the disease, because it figures in the way as the individual adaptation process occurs face to the requirements of the modern life. The general purpose of this paper is to accomplish a longitudinal study of 10 patients with OLP diagnosis who took part in a group brief psychotherapy and had a continuous attendance controlling the size of the OLP lesions in 2003, investigating their health conditions, OLP lesions occurrences, sress events, confrontation and adaptative efficacy from 2003 to 2008. For the procedure of data gathering, the following items were used: two interviews (EDAO-R; Stress Interview, Confrontation and Health - specially elaborated for this study), present OLP measurements and anterior evaluation registers accomplished in 2003, which consisted in the accomplishment of BPO (Brief Pssychotherapy Operacionalized), EDAO-R application and OLP... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Glauco Issamu Miyahara / Coorientador: Cáris Maroni Nunes / Banca: Cristiane Fumiko Furuse / Banca: João Paulo de Carli / Resumo: O líquen plano caracteriza-se como uma doença inflamatória crônica mucocutânea relativamente comum na população. Possui etiologia incerta, sendo possivelmente associado a fatores genéticos, psicológicos e infecciosos, dentre os quais o último vem ocupando um maior destaque devido a uma possível correlação com o vírus do papiloma humano (HPV) e com o Epstein-Barr vírus (EBV). O HPV possui alguns tipos considerados oncogênicos associados ao câncer de colo de útero e fortemente associado ao carcinoma espinocelular (CEC) de orofaringe. O EBV pertence à família herpesvirus humano e está relacionado com o carcinoma nasofaríngeo, linfoma de Burkitt e linfoma não-Hodgkin e sua possível relação com o CEC vem sendo estudada. O objetivo deste estudo foi detectar a presença do DNA do HPV e do EBV em amostras de tecido fresco, plasma sanguíneo, saliva e células esfoliadas orais, extraídas de um grupo pareado por sexo e idade de pacientes portadores de líquen plano bucal (LPB) e de um grupo de pacientes sem lesões de LPB, além de correlacionar as variáveis epidemiológicas dos grupos estudados com a presença viral e verificar se as fontes materiais testadas por este estudo são fontes viáveis para detecção do HPV e do EBV. Foram avaliados 24 pacientes portadores de LPB (Grupo caso) e 17 pacientes sem lesões de LPB (Grupo controle). A extração de DNA das amostras foi realizada após confirmar a presença e integridade do DNA. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística (Teste exato de Fisher e Teste do Qui-Quadrado Mantel-Haenszel, ambos, com nível de significância de 5%). A nPCR foi utilizada para detecção do HPV e do EBV. Obteve-se a positividade viral para o HPV em 41,7% das amostras teciduais, em 12,5% das amostras de células esfoliadas e em nenhuma amostra de plasma sanguíneo e saliva dos pacientes do Grupo / Abstract: Lichen planus is characterized as a chronic inflammatory mucocutaneous disease relatively common in the population. It has uncertain etiology, possibly associated with genetic, psychological and infectious factors. The infectious factor has excelled due the possible correlation of lichen planus with human papilloma virus (HPV) and Epstein-Barr virus (EBV). HPV has some types considered oncogenic, associated with cervical cancer and strongly associated with squamous cell carcinoma (SCC) of oropharynx. EBV belongs to human herpesvirus family and is associated with nasopharyngeal carcinoma, Burkitt's lymphoma and non-Hodgkin lymphoma. Its possible relation to SCC has been studied. The aim of this study was to detect the presence of the DNA of the HPV and EBV in fresh tissue samples, blood plasma, saliva and oral exfoliated cells extracted from a group of patients with oral lichen planus (OLP) paired by age and gender and from a group of patients without OLP lesions, and also correlate the epidemiological variables of the studied groups with the viral presence and verify that the source materials tested in this study are viable for HPV and EBV detection. It was evaluated 24 patients with OLP (Case group) and 17 patients without OLP lesions (Control group). DNA extraction of samples was performed after confirming the presence and integrity of DNA. The results were subjected to statistical analysis (Fisher's exact test and Mantel-Haenszel 19 chi-square test, both with a significance level of 5%). The nPCR was used to detect the presence of HPV and EBV. Was obtained the viral positivity for HPV in 41.7% of tissue samples and in 12.5% of exfoliated cells samples. No samples of blood plasma and saliva were positive in the Case group. On the other hand, the Control group / Mestre

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-05-28T23:29:22Z No. of bitstreams: 1 448387.pdf: 2406290 bytes, checksum: b9c686175b2c7a33644bea96bc032d9a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-28T23:29:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448387.pdf: 2406290 bytes, checksum: b9c686175b2c7a33644bea96bc032d9a (MD5) / O presente estudo teve por objetivo avaliar o padrão de expressão dos receptores toll-like (TLR) 5 e 9 e do fator de transcrição forkhead box p3 (Foxp3) de células T regulatórias em lesões orais de líquen plano e lúpus eritematoso. Vinte e um espécimes de biópsias de líquen plano, 21 de lúpus eritematoso e 21 de hiperplasia fibrosa inflamatória (grupo-controle) foram submetidos a processamento imunoistoquímico com os marcadores anti-TLR5, anti-TLR9 e anti-Foxp3, e a quantificação da expressão desses marcadores foi realizada por meio do software Image Pro Plus 4.5.1 (Media Cybernetics). O padrão de expressão do Foxp3 diferiu significativamente entre os três grupos, sendo os maiores níveis observados no grupo líquen plano, e os menores, no grupo-controle. A expressão do TLR5 não diferiu significativamente entre os grupos lúpus eritematoso e controle, mas foi maior nesses grupos quando comparados ao grupo líquen plano. Ao discriminarem-se os subtipos de lúpus eritematoso sistêmico e discoide, não foi verificada diferença significativa na expressão do TLR5 entre líquen plano e lúpus sistêmico, mas foram verificados maiores níveis desse marcador no lúpus discoide e no grupo-controle quando comparados ao grupo líquen plano. O padrão de expressão do TLR9 não diferiu significativamente entre os grupos. Foxp3 e TLR5 apresentaram correlação negativa fraca (r= -0.279). As demais variáveis não apresentaram correlação, mesmo quando analisadas intragrupo. Os resultados do presente estudo permitem concluir que a expressão de Foxp3 está aumentada em lesões orais de líquen plano e lúpus eritematoso, enquanto TLR5 e TLR9 não exibem maior expressão nessas lesões; Foxp3 e TLR5 estão inversamente correlacionados. Novas investigações sobre células T regulatórias, receptores toll-like e citocinas pró-inflamatórias fazem-se necessárias para o melhor entendimento de doenças como líquen plano e lúpus eritematoso. / The present study aimed at analyzing the expression of toll-like receptors (TLR) 5 and 9 and forkhead box p3 regulatory T cells transcription factor (Foxp3) in oral lesions of lichen planus and lupus erythematosus. Twenty-one biopsy specimens of lichen planus, 21 of lupus erythematosus and 21 of inflammatory fibrous hyperplasia (control group) were subjected to immunohistochemical staining with anti-TLR5, anti-TLR-9 and anti-Foxp3, whose expressions were quantified using Image Pro Plus 4.5.1 software (Media Cybernetics). Immunostaining for Foxp3 differed significantly between the three groups, where the highest levels were shown by lichen planus and the lowest ones by controls. TLR5 expression did not differ significantly between lupus erythematosus and control group, but it was significantly greater in these two groups than in lichen planus. When we considered the two types of lupus separately, there was no significant difference of TLR5 between lichen planus and systemic lupus erythematosus, but discoid lupus erythematosus as well as the control group showed significantly greater values than lichen planus. TLR9 immunostaining did not differ significantly between the groups analyzed. A weak negative correlation was observed between Foxp3 and TLR5 (r= -0.279), while there was no other correlation. When this analysis was performed within each group, no correlation was observed between the variables. In conclusion, Foxp3 expression is increased in oral lesions of lichen planus and lupus erythematosus, whereas TLR5 and TLR9 do not show increased expression in these lesions. Foxp3 and TLR5 are inversely correlated. Further investigations analyzing Treg cells and proinflammatory cytokines in these diseases are warranted.

Realizar estudo imuno-histoquímico com os marcadores p16 e Ki-67 nas lesões de líquen plano bucal em pacientes assintomáticos e sintomáticos, verificando a presença e modo de marcação, analisando se existe correlação entre os resultados que possa indicar os riscos de transformação maligna. MATERIAL E MÉTODOS: nove pacientes assintomáticos e 12 sintomáticos de líquen plano bucal. Cinco amostras de hiperplasia fibrosa inflamatória foram empregadas como grupo controle. Foram utilizados anticorpos p16 (pré-diluído – BioSB/EUA) e Ki-67 (clone MIB-1 – DAKO/EUA) pela técnica Envision Labelled (DAKO). Os resultados foram analisados de acordo com os parâmetros baseados no estudo de Klaes et al. (2001) avaliando a porcentagem de células marcadas, a distribuição pela camada epitelial e a intensidade da marcação. A análise estatística procedeu ao estudo do risco relativo entre pacientes assintomáticos e sintomáticos com relação ao local da expressão celular (nuclear, citoplasmática ou ambas), com as localizações mais prevalentes da lesão (mucosa jugal e língua) e com os tipos clínicos mais comuns (reticular e atrófico). RESULTADOS: a correlação entre pacientes assintomáticos e sintomáticos foi estatisticamente significativa (p<0,05) quando avaliamos a distribuição da p16 pela camada epitelial com relação ao local da expressão celular e com a localização da lesão. Odds ratio da marcação nuclear foi de 4,091. A total (nuclear e citoplasmática) foi de 5,179. Já a marcação somente citoplasmática teve odds ratio de 8,461. A correlação com a localização resultou num odds ratio de 5,130 para a língua e 14,234 para a mucosa jugal. As outras categorias avaliadas, porcentagem e intensidade da p16, as características clínicas avaliadas e os resultados do Ki-67, não foram significativos em nenhum item avaliado. CONCLUSÕES: o risco relativo maior quando da marcação somente citoplasmática nos mostra que este é um importante sítio de expressão da p16, não devendo ser desprezado, como sugerido por alguns estudos. A localização apontada na literatura como de maior prevalência nos casos de transformação maligna é a língua, porém o risco relativo no nosso estudo foi maior na mucosa jugal. Como a distribuição foi o único item estatisticamente significativo, faz-se necessário estudo futuro para incluir ou excluir a presença do vírus do papiloma humano nas lesões de líquen plano bucal, visto que a proteína p16 vem sendo indicada para detectar anormalidades celulares nas amostras de cérvice uterina, sendo atribuída a sua superexpressão com a presença de HPV de alto riso, além de estudo da p16 nos casos de displasias liquenóides. / We realized immunohistochemical procedures with p16 and Ki-67 in lesions of oral lichen planus to verify the presence and kind of its immunoexpression amog the two groups of patients, asymptomatic and symptomatic, correlating the clinical and histopathological diagnosis with the immunohistochemical data in order to verify if oral lichen planus can be considered a lesion with risk of malignant transformation. MATERIAL AND METHOD: nine asymptomatic patients and 12 symptomatic of oral lichen planus. Five cases of inflammattory fibrous hyperplasia were included as control group. For immunohistochemical studies we used p16 (prediluted–BioSB/USA) and Ki-67 (clone MIB-1–DAKO/USA) by Envision Labelled techniques (DAKO). Results were annalyzed according to parameters based on Klaes et al. (2001) evaluating the immunomarked cell rates, the distribution through the epithelial layer and the immunoexpression intensity. The statistics analysis proceeded the study of relative risk between asymptomatic and symptomatic patients regarding to its cellular immunoexpression (nuclear, cytoplasmic or both), the more prevalent topography of the lesion (buccal mucosa and tongue) and clinical characteristics (atrophic and reticular types). RESULTS: the correlation between asymptomatic and symptomatic patients was statistically significant (p<0.05) when comparison was made of the distribution of p16 throug the epithelial layer by analysis its cellular imumunoexpression. The nuclear immunoexpression of p16 showed an odds ratio of 4.091. The nuclear and cytoplasmatic were 5.179. The odds ratio for cytoplasmatic expression was 8.461. The correlation between immunoexpression and topography resulted in an odds ratio of 5.130 for tongue and 14.234 for buccal mucosa. The other categories availed as percentage and intensity of the p16 immunoexpression, clinical characteristics, besides the Ki-67 results gave non significant results. CONCLUSIONS: The citoplasmatic expression results indicates that this immunoexpression must not be discarded, as suggested by some studies. The high relative risk saw in buccal mucosa rather than tongue was an unexpected result, because the localization pointed as with greater involvement in cases of malignat transformation is the tongue. The distribution was the only one that reached a statistically significant result, so further studies must be made in order to include or exclude the human papillomavirus presence in oral lichen planus lesions, since the p16 protein is currently nowadays used as an indicator of cellular abnormalities in cervical lesions, where its overexpression is related to the presence of high risk human papillomavirus, beyond study of p16 in the cases of liquenoid dysplasia.

Introdução: As alopecias cicatriciais são subdivididas em primárias e secundárias. Nas alopecias cicatriciais primárias o folículo piloso é o alvo principal da destruição; diferentemente das secundárias onde a destruição folicular não é o evento patológico primário. Objetivo: Revisar os achados histológicos de pacientes com diagnóstico de alopecia cicatricial primária, em uma fase tardia e reclassificá-los em seus respectivos subtipos. Casuística e Métodos: Os espécimes de biópsia de pacientes com diagnóstico histológico prévio de alopecia cicatricial foram revisados e submetidos a colorações por hematoxilina e eosina (HE), ácido periódico-Schiff (PAS) e Weigert, a fim de reclassificá-los de acordo com os diferentes subtipos de alopecia. Foram utilizados para a revisão histológica critérios de infiltrado inflamatório acrescidos de coloração para fibra elástica. Resultados: Os 37 casos de alopecia cicatricial primária foram reclassificados em: lupus eritematoso discóide (16), líquen plano pilar (4), pseudopelada de Brocq (12), foliculite decalvante (3), foliculite abscedante/dessecante (1), e alopecia não-específica (1). Conclusão: Mesmo em uma fase tardia, pauci ou não inflamatória, o exame histológico, utilizando colorações de rotina, PAS e coloração para fibra elástica, permitiu o diagnóstico mais acurado das alopecias cicatriciais primárias / BACKGROUND: Scarring alopecias are classified into primary and secondary according to the initial site of inflammation. In primary scarring alopecias, the hair follicle is the main target of destruction. The term secondary cicatricial alopecia implies that follicular destruction is not the primary pathologic event. AIMS: To review the histopathologic diagnoses of cases of cicatricial alopecia in order to classify them according to the North American Hair Research Society. PATIENTS AND METHODS: Patients with biopsy specimens diagnosed as cicatricial alopecia seen from 2000 to 2005 at the Dermatologic Department of Hospital das Clínicas, São Paulo University Medical School had hematoxylin and eosin, Periodic Acid-Schiff (PAS) and Weigert stained slides reevaluated and sub-typed into different primary cicatricial alopecias. RESULTS: Thirty-seven cases of primary cicatricial alopecias were reclassified as: discoid lupus erythematosus (16), lichen planus pilaris (4), pseudopelade of Brocq (12), folliculitis decalvans (3), dissecting folliculitis (1), and non-specific scarring alopecia (1). CONCLUSIONS: Even in late, pauci or noninflammatory phases, an approach with systematic evaluation of a constellation of criteria in routine hematoxylin and eosin stain, PAS and Weigert stain permitted an accurate diagnosis of cicatricial alopecias

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:07:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8344_1.pdf: 2911564 bytes, checksum: b1951dd981c6652122c54a6c2a84a7e5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / Os liquens são reconhecidos como bioindicadores de ambientes e biomonitores da qualidade do ar atmosférico. Neste trabalho selecionou-se o Distrito de Jaboatão, situado na Mesoregião Metropolitana do Recife (RMR), Pernambuco, Brasil, para avaliar a qualidade do ar naquela área, correlacionando os dados fornecidos pelos monitores biológicos liquens, com os resultados obtidos das estações de monitoramento mecânico instaladas pela Companhia Pernambucana de Meio Ambiente (CPRH). Líquen da espécie (Raddi.) Fr. foi o biomonitor utilizado. A espécie foi coletada sobre solos arenosos de tabuleiros costeiros (cerrado) da Paraíba, nas seguintes localidades: Mamanguape, na Reserva Biológica de Guaribas, e em Alhandra, às margens da BR 101 (PB). Os biomonitores ativos foram coletados e acondicionados em recipientes plásticos, bem como o solo de área de ocorrência. Experimentos de transplante do material liquênico foram montados junto às estações de medição da CPRH localizadas na Estação do Metrô (ponto 1) e da CHESF (ponto 2) no referido distrito. As amostras de ambas as localidades foram coletadas em março de 2000, e imediatamente expostas ao ambiente nos pontos de experimento. Após 12 e 18 meses de exposição aos poluentes amostras foram retiradas e analisadas, química e fisiologicamente. Foram quantificados por Espectrômetro de Emissão Atômica por Plasma Indutivamente Aplicado (ICP/AES) os teores de Pb, Cd, Fe, Cu, Mn, Zn, Cr, Ni e Ca. Parte das mesmas amostras foram extraídas por sistema de esgotamento a frio com acetona, e analisadas por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para identificação e quantificação dos fenóis liquênicos nas amostras. Filtros dos amostradores de grandes volumes (Hi-vol) da CPRH foram analisados, e neles quantificados Pb, Cd, Fe, Cu, Mn, Cr, Zn e Ni. Para este experimento foram consideradas as amostras representativas para as maiores concentrações mensais de Poeira Total em Suspensão (PTS), cujos filtros foram recolhidos no mesmo período em que os biomonitores. Os metais pesados supra referidos foram determinados via Espectrofotometria de Absorção Atômica por Chama (EAA). Para averiguação do comportamento de" % sob condições laboratoriais, foram montados experimentos onde amostras do líquen foram diariamente borrifadas com soluções de acetato de chumbo de chumbo a 1%, 0,1%, e água deionizada como controle. Foram coletadas amostras a 24h, 48h, 5dias e 10 dias, sendoposteriormente analisadas, segundo os mesmos parâmetros já referidos para o material exposto às condições ambientais. Ao final, as amostras mais preservadas e as em maior estado de deterioração, tanto as de experimento em campo, como as de laboratório, foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura. Os resultados demonstraram que todas elas tiveram prejuízo na síntese de fenóis comuns da espécie. Análises em CCD e CLAE comprovaram a ocorrência de substâncias distintas das detectadas nas amostras padrão. Nos ensaios em CLAE ficou comprovado que os poluentes prejudicaram a síntese de fenóis tanto no aspecto qualitativo (substâncias intermediárias das vias metabólicas), mas também no teor das substâncias produzidas no total. Foi evidenciada a produção do ácido protocetrárico, além do hipoprotocetrárico e seu aldeído, como compostos intermediários. Sugeriu-se que o baixo teor de substâncias, e/ou a produção de metabólitos intermediários das rotas metabólicas tenha sido causado por um prejuízo na fotossíntese do fotobionte, por acidificação da célula pelos poluentes, o bloqueio de reações enzimáticas pelos elementos que contaminaram o líquen, ou a associação desses fatores. Em relação à quantificação dos contaminantes, houve o predomínio do Pb, Fe, Ca, Mn , Zn e Cr nas amostras de líquen. Nos filtros recolhidos das estações de monitoramento mecânico, detectou-se em maior concentração o Fe, Cu, Mn e Zn. No material submetido ao acetato de chumbo de chumbo foi verificado que o número de dias de exposição (10) foi suficiente para prejudicar o líquen no aspecto fisiológico. Análises por microscopia eletronica de varrredura (MEV) revelaram uma total desordem na superfície do talo liquênico, após exposição aos poluentes. As células do fotobionte, não visualizadas nas amostras controle, foram facilmente expostas, tornando-se desprotegidas em meio com alto nível de contaminantes. Dados semelhantes foram obtidos para os experimentos em laboratório. A superfície de" iniciou um processo de esfoliação resultando na sua destruição. Foi possível concluir que a zona central da cidade, onde encontra-se a estação do Metrô, é a mais poluída, e que" % como biomonitor, demonstrou capacidade de registrar os mais ínfimos níveis de contaminantes, inclusive quanto a bioacumulação de elementos iônicos, nutrientes e tóxicos e, diante desse contexto, valida a sua utilização como mais um parâmetro para avaliação da qualidade ambiental, em especial do ar atmosféricosubsequently analyzed using the same parameters mentioned above for the material exposed to environmental conditions. At the end, the best preserved samples and a greater state of deterioration, both in the field of experiment, such as laboratory, were analyzed by scanning electron microscopy. The results showed they all had impaired synthesis of phenols common species. Analyses in TLC and HPLC confirmed the presence of substances other than those detected in standard samples. In trials it was proved that HPLC pollutants impaired synthesis of phenols in both the qualitative aspect (intermediates of metabolic pathways), but also the content of the substances produced in total. Was evidenced protocetrárico acid production, and its addition to hipoprotocetrárico aldehyde as intermediate compounds. It has been suggested that low levels of substances, and / or the production of intermediate metabolites of the metabolic pathways have been caused by a loss in the photobiont photosynthesis, acidification of the cell by pollutants, the blockade of enzymatic reactions of the elements that have polluted the lichen, or a combination of these factors. Regarding the quantification of contaminants, there was predominance of Pb, Fe, Ca, Mn, Zn and Cr in samples of lichen. In filters collected from monitoring stations mechanic, was detected at higher concentration Fe, Cu, Mn and Zn. In material submitted to the lead acetate Lead was found that the number of days of exposure (10) was sufficient to affect the lichen physiological aspect. Analysis by electron microscopy varrredura (SEM) revealed a total disorder in the surface of the lichen thallus, after exposure to pollutants. The photobiont cells, not seen in samples control, were easily exposed, making it unprotected in a medium with high of contaminants. Similar data were obtained for the experiments the laboratory. The surface? " ? ?????? ? initiated a process of exfoliation resulting in its destruction. It was concluded that the downtown area, where is the subway station, is the most polluted, and that? " ? ?????? ?% As biomonitor showed ability to record the smallest levels of contaminants, including as to bioaccumulation of ionic elements, nutrients and toxic and, given this context, validates its use as an additional parameter for the assessment of environmental quality, in particular the atmospheric air.

Introdução: O remodelamento da matriz extracelular no líquen escleroso (LS) caracteriza-se histologicamente por uma faixa hialinizada situada predominantemente na derme superficial, semelhante ao que ocorre na lipoidoproteinose (LPE), uma genodermatose rara, na qual ocorre deficiência na produção da proteína 1 da matriz extracelular (ECM-1). Recentemente, em casos de LS foram descobertos auto-anticorpos contra a ECM-1 e um novo caminho foi proposto para desvendar a sua etiopatologia. O LS também é freqüentemente comparado com a Esclerodermia, visto que alguns autores consideram que são espectros de uma mesma doença. Na Esclerodermia e na LPE há aumento do colágeno tipo V (COL V), mas pouco se sabe sobre este tipo de colágeno no LS. Assim, o objetivo do presente trabalho foi demonstrar a localização e a quantidade de COL V e ECM-1 nas vulvas de pacientes com LS. Materiais e métodos: foram estudadas 21 biópsias de pacientes com LS vulvar e 21 biópsias de vulvas normais. A morfometria foi realizada nas imagens geradas através da imunofluorescência marcada com anticorpos contra os colágenos I (COL I), III (COL III) e V, e também nas de imunoistoquímica para ECM-1. Ademais, utilizou-se microscopia confocal a laser para visualizar o COL V e a ECM-1 na mesma lâmina. Resultados: Peles do grupo controle mostraram fraca e homogênea distribuição das fibras de COL I, III e V na imunofluorescência. Em contraste, peles com LS exibiram desarranjo da arquitetura da derme superficial e difuso aumento da fluorescência das fibras de COL I, III e V na faixa hialina. A fração de área das fibras de COL I, III, e V foram significativamente maiores nas peles de pacientes com LS em relação ao controle (p<0,05). Peles controles mostraram co-localização da ECM-1 e do COL V na parede de pequenos vasos e ao longo da membrana basal. Entretanto, no LS houve perda de expressão da ECM-1 na parede dos vasos sanguíneos (p<0,001) e difuso aumento da fluorescência verde do COL V (p<0,001). Conclusão: Houve inversa relação entre o COL V e a proteína ECe constatado pela histomorfometria, imunofluorescência, imunoistoquímica e reconstrução tridimensional, sugerindo que estratégias terapêuticas para prevenir o aumento da síntese de COL V e a diminuição da ECM-1 poderão ser promissoras no prognóstico e tratamento do LS / Background: The extracellular matrix remodeling in lichen sclerosus (LS) is characterized in routine light microscopy by a hyalinized band predominantly located in the superficial dermis. The same pattern occurs in the lipoid proteinosis (LPE), a rare genodermatosis, in which the production deficiency of extracellular matrix protein 1 (ECM-1) is responsible for triggering the disease. Recently, in cases of LS, autoantibodies were discovered against ECM-1 and a new way to unravel their aetiopathology was proposed. LS is also frequently compared with Scleroderma, since some authors consider that they are spectra of a similar disease. In Scleroderma and LPE there is an increase of type V collagen (COL V), but little is known about this type of collagen in LS. Thus, the objective of the current study was to demonstrate the location and quantity of COL V and ECM-1 on the vulvas of patients with LS. Materials and methods: Twenty one biopsies from patients with vulvar LS matched with 21 biopsies from normal vulvas were included in this study. Immunofluorescence against type I (COL I), (COL III) and V collagen and immunohistochemistry for ECM-1 was performed and the slides were analysed by morphometry. Furthermore, laser confocal microscopy was used to visualize the COL V fibers and the ECM-1 protein on the same slide. Results: Skins of the control group showed low and homogeneous distribution of fibers COL I, III and V in immunofluorescence. In contrast, skins with LS exhibited disruption of the architecture of the superficial dermis and diffuse increase in fluorescence fibers COL I, III and V in the range hyaline. The area fraction of fibers COL I, III, and V were significantly higher in the skin of patients with LS compared to control (p <0.05). Skins controls showed colocalization of ECM-1 and COL V the wall of small vessels and along the basement membrane. However, the LS had loss of expression of ECM-1 the wall of blood vessels (p <0.001) increase the fluorescence and diffuse green COL V (p <0.001). Conclusion: There was an inverse relationship between COL V and ECM-1 protein in LS as demonstrated by histomorphometry, immunofluorescence, immunohistochemistry and three-dimensional reconstruction, suggesting that therapeutic strategies to prevent the increased synthesis COL V and ECM-1 protein in LS as demonstrated by histomorphometry, immunofluorescence, immunohistochemistry and three-dimensional reconstruction, suggesting that therapeutic strategies to prevent the increased synthesis COL V and decreased ECM-1 may be promising in the prognosis and treatment of the LS

A experiência adquirida na realização de estudos epidemiológicos sobre o líquen plano oral associado à infecção crônica de hepatite C nos faz acreditar que as lesões atróficas/erosivas associadas ao vírus C tendem a apresentar características clínicas atípicas, por vezes exacerbadas e com resposta piorada à terapêutica proposta. Acreditando que existiria uma contrapartida histopatológica que justificasse o comportamento clinico evidenciado, o presente estudo propôs-se a estudar as populações de células T CD8+ e Foxp3+ no líquen plano oral associado à infecção crônica de hepatite C e compará-las com as populações do líquen plano oral idiopático. Foram selecionados 11 blocos de líquen plano oral associado à infecção crônica de hepatite C (Grupo 1) e 19 blocos parafinados de líquen plano oral idiopático (Grupo 2) dos arquivos do Laboratório de Patologia Cirúrgica da Disciplina de Patologia Bucal da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo e do Laboratório de Patologia Bucal, do Departamento de Patologia, da Universidade Federal de Santa Catarina. Para ambos os grupos foram realizados ensaios imunohistoquímicos com marcação dos anticorpos anti-CD8 e anti-Foxp3. As células marcadas foram contabilizadas e os resultados tratados estatisticamente. No Grupo 1, 64% dos pacientes eram do sexo feminino; 82% leucodermas e a média de idade era de 59 anos (variação 46 aos 75 anos). No Grupo 2, 63% dos pacientes eram do sexo feminino; 71% leucodermas e a média de idade era de 50,2 anos (variação 32 aos 66 anos). Quando os dados entre os Grupos 1 e 2 foram comparados, não houve correlação estatisticamente significante entre as contagens de células T CD8+, contagens de células T Foxp3+ ou na relação CD8+/Foxp3+ por mm2. As lesões atróficas/erosivas do Grupo 1 apresentaram densidade aumentada de células T CD8+ (p=0,034) e aumento na relação CD8+/Foxp3+ por mm2 (p=0,018), em relação ao Grupo 2. O estudo realizado não encontrou diferenças nas densidades de células T CD8+ e Foxp3+ no infiltrado do líquen plano oral associado ao vírus C em relação ao líquen plano idiopático. Por outro lado, as diferenças encontradas na quantidade de células T CD8+ e na relação CD8/Foxp3, em lesões atróficas/erosivas, parecem justificar as características clínicas evidenciadas em estudos prévios. / Our previous studies with oral lichen planus associated with chronic hepatitis C virus infection leads us to believe that atrophic/erosive forms of oral lesions tend to present unusual clinical features, sometimes exacerbated with a worsened response to treatment. Considering that this exacerbated aspect could indicate a similar exacerbate histopathological feature, the aim of this study was evaluated the populations of CD8(+) and Foxp3(+) T cells in oral lichen planus associated with chronic hepatitis C virus infection and correlated the findings with idiopathic forms of these lesions. The sample consisted of 11 cases of oral lichen planus associated with chronic hepatitis C virus infection (Group 1) and 19 cases of idiopathic oral lichen planus (Group 2) obtained from the Laboratories of Oral Pathology of the University of São Paulo and the Federal University of Santa Catarina. In both groups immunohistochemistry staining were performed using anti-CD8 and anti-Foxp3 antibodies. Positive cells were counted per area and the results were subjected to statistical analysis. In Group 1, 64% of the patients were female, 82% caucasian with mean age of 59 years (range from 46 to 75 years). In Group 2, 63% of the patients were female, 71% caucasian with mean age 50.2 years (range from 32 to 66 years). When Groups 1 and 2 were compared, no significant correlation between the frequencies of CD8(+), Foxp3(+) T cells and the ratio of CD8(+)/Foxp3(+) counts per mm2 was found. The atrophic/erosive lesions in Group 1 showed an increased frequency of CD8(+) T cells (p = 0.034) and an increased ratio of CD8(+)/Foxp3(+) counts per mm2 (p = 0.018) compared to Group 2. In conclusion, our data indicated no differences in the frequencies of CD8(+) and Foxp3(+) T cells in the inflammatory infiltrate of oral lichen planus associated with chronic hepatitis C virus infection compared to idiopathic lesions. However, the differences in the counts of CD8(+) T cells and the ratio of CD8(+)/Foxp3(+) in atrophic/erosive lesions seemed justify the clinical features in previous studies.