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Efeitos da laserterapia de baixa intensidade sobre marcadores de estresse oxidativo do músculo gastrocnêmio de ratos diabéticos submetidos a exercício de alta intensidade / Effects of low level laser on oxidative stress markers of the gastrocnemius muscle of diabetic rats subjects to high intensity exercise

Frigero, Marcelo 14 December 2015 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-15T13:28:20Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Frigero.pdf: 4578817 bytes, checksum: bb7e000ccbea1f3da7af610ed7c95a39 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T13:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Frigero.pdf: 4578817 bytes, checksum: bb7e000ccbea1f3da7af610ed7c95a39 (MD5) Previous issue date: 2015-12-14 / Purpose: The aim of the present study was to determine whether low-level laser therapy (LLLT), when used in gastrocnemius muscle of diabetic rats subjected to high-intensity exercise to fatigue, Interferes with the expression of stress markers oxidative. Materials and Methods: The total of 24 male Wistar rats (Norvergicos Albinos). Were used for this study: 24 diabetics rats. The animals were randomly divided into three groups designated as follows: Group Diabetic Fatigue - Did not receive irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol; Group Diabetic Laser Fatigue - received irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol and Group Non-Diabetic Control - Did not receive irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol. Diabetes was induced in rats by streptozotocin (50 mg / kg, ip) was subsequently performed measure of blood lactate levels, LLLT laser was applied at 808 nm and 4 joules of energy to the Indicated groups and the animals were exercised groups submitted to treadmill running with speed and gradual slope until exhaustion noted by VO2máx and lactate level. The rats were euthanized, and muscle tissue and presented the analysis of SOD markers; CAT; GPX and TBARS. Results: VO20.75máx values in the Group Diabetic Fatigue were significantly higher from those in the control group (p <0.01) and the Group Diabetic Laser Fatigue (p <0.05). The results indicate that the activities of CAT, SOD, and GPx were higher and statistically significant (p<0.05) in the Group Diabetic Laser Fatigue than those in the diabetic groups. Outcomes for LBI group were similar than control group (p>0.05), statistically significant activities of antioxidant enzymes compared to the Group Diabetic Fatigue. The LBI group could also mitigate the concentration of TBARS (p> 0.05). Conclusion: LBI imay reduce oxidative stress, as well as increase VO20.75máx. Furthermore, our outcomes indicate that LBI can be an alternative to maintain physical fitness in conditions where subjects aren’t able to perform exercise. Which needs to be tested in further clinical studies. / Objetivo: O objetivo do presente estudo foi determinar se a terapia Laser de baixa intensidade (LBI), quando usado no músculo gastrocnêmio de ratos diabéticos, submetidos a exercícios de alta intensidade, até a fadiga, interfere com a expressão de marcadores de estresse oxidativo. Materiais e Métodos: Para realização do trabalho, a amostra foi composta por 24 ratos machos (Norvergicos Albinus), de linhagem Wistar. Os animais foram divididos aleatoriamente em três grupos designados da seguinte forma: Grupo Diabético Fadiga - Não recebeu irradiação para LBI e realizou o protocolo de fadiga; Grupo Diabético Fadiga Laser - recebeu irradiação com LBI e realizou o protocolo de fadiga e o Grupo Controle Não Diabético – não recebeu irradiação e realizou protocoloco de fadiga. A Diabetes foi induzida por estreptozotocina (STZ) (50 mg / kg, ip), e confirmado através da medida de glicose no sangue. Foi utilizado o Laser de 808 nm e energia de 4J, para os grupo indicado e os animais foram submetidos ao exercicio de corrida em esteira rolante com velocidade e inclinação gradual até a fadiga, observado através do VO2máx e nível de lactato. Os ratos foram sacrificados, e o tecido muscular retirado para a análise dos marcadores de SOD; CAT; GPX e TBARS. Resultados: Os valores VO20.75máx no Grupo Diabético Fadiga foram significativamente mais elevados do que aqueles no Grupo Controle Não Diabético (p <0,01) e do Grupo Diabético Fadiga Laser (p <0,05). Os resultados indicam que as atividades de CAT, SOD, e GPx foram maiores e estatisticamente significativas (p <0,05) no do que as dos Grupo Diabético Fadiga. Resultados para o Grupo Diabético Fadiga Laser foram semelhantes ao Grupo Controle Não Diabético e estatisticamente (p> 0,05) significativas para as atividades de enzimas antioxidantes em comparação com o Grupo Diabético Fadiga. No Grupo Diabético Fadiga Laser poderia também minimizar a concentração de TBARS (p> 0,05). Conclusão: LBI pode reduzir o estresse oxidativo, bem como aumentar o VO20.75máx. Além disso, nossos resultados indicam que a LBI pode ser uma alternativa para melhoria das condições musculares em relação a fadiga. Novos estudos clínicos devem ser realizados para verificar a eficácia da técnica.
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Terapia de fotobiomodulação (PBMT) e/ou crioterapia na recuperação do músculo esquelético, o que é melhor? Um estudo clínico randomizado placebo controlado / Photobiomodulation therapy (PBMT) and / or cryotherapy in skeletal muscle restituion, what is better? A randomized placebo-controlled clinical trial

Paiva, Paulo Roberto Vicente de 03 February 2016 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-15T14:18:54Z No. of bitstreams: 1 Paulo Roberto Vicente de Paiva.pdf: 1229830 bytes, checksum: dd6855853f5863b4ff76e7eb6ac01830 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T14:18:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Roberto Vicente de Paiva.pdf: 1229830 bytes, checksum: dd6855853f5863b4ff76e7eb6ac01830 (MD5) Previous issue date: 2016-02-03 / Background/Aim: Cryotherapy for post-exercise recovery remains widely used despite the lack of quality evidence. Photobiomodulation Therapy (PBMT) studies have demonstrated positive scientific evidence to suggest its use. The study aims to evaluate PBMT and cryotherapy as a single or combined treatment on skeletal muscle recovery after eccentric contractions of knee extensors. Methods: Fifty healthy male volunteers were recruited and randomized into five groups (PBMT, Cryotherapy, Cryotherapy+PBMT, PMBT+Cryotherapy or Placebo) for a randomized, double-blinded, placebo-controlled trial that evaluated exercise performance (maximum voluntary contraction - MVC), delayed onset muscle soreness (DOMS), and muscle damage (Creatine Kinase - CK). Assessments were performed at baseline, immediately after, and at 1, 24, 48, 72 and 96 hours. Comparator treatments was performed 3 minutes after exercise and repeated at 24, 48 and 72 hours. PBMT was applied with GameDay™ (905nm super-pulsed laser, 875nm and 640nm LEDs combined, Multi Radiance Medical™), and cryotherapy by flexible rubber ice packs. Results: PBMT alone was optimal for post-exercise recovery with improved MVC, decreased DOMS and CK activity (p<0.05) from 24 to 96 hours compared to placebo, cryotherapy and Cryotherapy+PBMT. In the PBMT+Cryotherapy group, the effect of PBMT was decreased (p>0.05), but demonstrated significant improvement in MVC, decreased DOMS and CK activity (p<0.05). Cryotherapy as single treatment and Cryotherapy+PBMT were similar to placebo (p>0.05). Conclusions: We conclude that PBMT used as single treatment is the best modality for enhancement of post-exercise restitution, leading to complete recovery to baseline levels from 24 hours after high-intensity eccentric contractions. / A recuperação pós-exercício é de fundamental importância no esporte de alto rendimento e atualmente vários recursos são utilizados com este intuito, dos quais podemos destacar a recuperação ativa, massagem, terapia de contraste com água fria e água quente, hidroterapia, anti-inflamatórios não esteroidais, crioterapia, laserterapia de baixa potência, entre outros. A crioterapia é um dos recursos mais utilizados e que consiste no uso de gelo ou de água em temperaturas baixas para acelerar a recuperação pós-exercício, contudo, a sua evidência científica é extremamente limitada e controversa. Estudos recentes envolvendo fototerapia têm demonstrado resultados positivos no retardo da fadiga muscular e na recuperação de marcadores bioquímicos relacionados a recuperação muscular. Contudo, diversos fatores ainda permanecem desconhecidos, tais como: doses e parâmetros ideais de aplicação, mecanismos de ação, os efeitos em exercícios de longa duração e os efeitos em longo prazo na recuperação musculoesquelética. Da mesma maneira, ainda não são totalmente conhecidos os efeitos da combinação de diferentes fontes de luz (lasers e LEDs) sobre a performance e recuperação muscular pós-exercício. Objetivo: Com estes fatores em mente, o presente projeto de pesquisa tem como objetivo determinar os efeitos da fototerapia com lasers e LEDs e da crioterapia utilizadas isoladamente ou combinadas na recuperação muscular pós-exercício excêntrico de extensores de joelho. Métodos: Será realizado um ensaio clínico randomizado, placebo-controlado e duplo-cego, com a participação voluntária de indivíduos saudáveis. Analisaremos parâmetros relativos ao desempenho físico dos voluntários (pico de torque / contração voluntária máxima - CVM), dor muscular tardia (DMT) através da escala visual analógica (EVA) e marcador bioquímico de dano muscular (creatina quinase - CK). Resultados: A terapia de fotobiomodulação (PBMT) isolada foi ótima para recuperação pós-exercício com melhora da contração voluntária máxima (MVC), diminuição de dor muscular tardia (DOMS) e atividade de creatina quinase (CK) (p<0.05) de 24 a 96 horas em comparação com Placebo, Crioterapia e Crioterapia+PBMT. No grupo PBMT+Crioterapia, o efeito de PBMT foi diminuído (p>0.05), mas demonstrou melhoras significativas na MVC, diminuiu DOMS e atividade de CK (p<0.05). O tratamento isolado com Crioterapia e Crioterapia+PBMT foi similar ao Placebo (p>0.05). Conclusão: Nós concluímos que o uso isolado do tratamento PBMT é a melhor modalidade para acelerar a recuperação pós-exercício, levando a completa recuperação aos níveis basais em 24 horas após contrações excêntricas de alta intensidade.
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Evaluation of critical parameters of low level laser irradiation on human osteoblast cell proliferation and differentiation

Waddoups, Samuel Dean 01 January 2012 (has links)
Abstract Orthodontic tooth movement is a biological response to a mechanical force. One of the challenges in orthodontics is obtaining desired tooth movement during treatment. Accelerating tooth movement and decreasing demands on anchorage can reduce treatment times and overall satisfaction for patient and doctor. Low-level laser therapy (LLLT) is emerging as a technology that may decrease orthodontic treatment time. Many in vitro and in vivo studies have reported the effects of low level lasers at random time points and energy densities. None of the studies have optimized the dose required for osteoblast proliferation and differentiation. The purpose of this study was to find the optimum stimulatory dose of low level laser irradiation (LLLI) on human osteoblast cell proliferation and differentiation and to analyze our findings with reference to the Arndt-Shultz Law of applied energy. In this in vitro study a GaAlAs laser at 830nm, 20 mW with continuous exposure at various doses were used on a human osteoblast cell line. According to the Arndt-Shulz Law weak stimuli initiate vital activity, moderate stimuli enhance the cellular activity with subsequent peak stimulation and greater stimuli (beyond a threshold value) may not have any influence or inhibit the vital activity. The implications of LLLI on human osteoblasts and influencing tooth movement in orthodontics were discussed. Human osteoblasts were cultured in minimum essential medium (MEM) complete medium consisting 10% fetal bovine serum and 1% antibiotics. Cells grown in complete medium were plated onto 96 well plate, allowed to adhere for 4-5 hours and were exposed to GaAlAs lasers at 6 , 12, 18, 24, 30, 36, 45, 60, 75, and 90 seconds. The cells treated with xiii LLLI were assessed for cell proliferation at 24, 48 and 72 hour intervals. A calorimetric cell proliferation assay (WST-1) assay was performed according to manufacture's instructions. The results indicated that at 24 hours the 6 and 12 seconds doses significantly inhibited proliferation compared to the control. At 48 hours the 30 seconds exposure significantly increased proliferation. At 72 hours time interval, cell proliferation was observed in a dose dependent pattern with a minimum at 6 seconds with peak proliferation at 18 seconds. A gradual decrease in cell viability was observed in the cells treated beyond this dose with a maximum inhibition seen at 60 seconds. At 75 and 90 seconds no difference was observed between the control and experimental group. To establish efficient acquisition of adequate quantities of alkaline phosphatase, cells were grown in 12 well plates in complete medium or osteogenic medium. These cells were exposed to LLLI for 18, 48, and 60 seconds. The activity of early osteogenic differentiation marker alkaline phosphatase (ALP) was investigated 10 days post exposure. Our results demonstrated that alkaline phosphatase activity at 2.4 - 7.3 J/cm2 with 48 - 60 seconds of exposure, and an incident power ranging from 85-269mw significantly increased. The findings suggest that these irradiated cells obeyed the Arndt Shulz Law governing cellular response to applied energy. Further this research indicates the possible role of LLLT to accelerate tooth movement in orthodontics. Complete disclosure of low level laser parameters is essential in order to accurately compare findings of researchers.
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Laser-Assisted Tubal Anastomosis

Kao, L W., Giles, H. R. 01 August 1995 (has links)
OBJECTIVE: To determine if laser-assisted anastomosis is superior to microsurgical anastomosis and laser welding for tubal reconstruction. STUDY DESIGN: Sixty uterine tubes from 30 rabbits were transected and then anastomosed with a microsurgical technique, laser welding and laser-assisted anastomosis using a microscope. The rabbits were mated one month postoperatively and examined for implantation sites and adhesion formation three to seven days postpartum. RESULTS: The amount of time required to perform laser-assisted anastomosis as well as laser welding was significantly shorter than for microsurgery. All the tubes withstood the distension pressure of pregnancy with the exception of 1 of the 20 laser-welded tubes, which had 30% of its circumference dehisced. There was no difference in the number of implantation sites per tube between the different groups. The anastomotic sites were well healed and were nonidentifiable except for holding stitches and microsurgical sutures. CONCLUSION: Laser-assisted anastomosis and laser welding took less time to perform than microsurgery. Laser-assisted anastomosis resulted in excellent healing, as did microsurgery. With the protection of serum albumin, laser-assisted anastomosis did not cause any thermal damage, and the anastomotic sites could tolerate the distension pressure of pregnancy and parturition without problems. Laser welding without protection of serum albumin could cause thermal damage and dehiscence. The implantation and pregnancy rates were comparable The implantation and pregnancy rates were comparable with all three types of procedure.
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Avaliação do músculo masseter através da eletromiografia de superfície após aplicação do laser de baixa potência em indivíduos submetidos à exodontia de terceiros molares inferiores retidos / Evaluation by surface electromyography of the masseter muscle after low-intensity laser therapy in patients undergoing extraction of retained inferior third molars

Sevilha, Fabio Moschetto 19 May 2014 (has links)
A cirurgia de terceiro molar é um dos procedimentos mais realizados na área de cirurgia e traumatologia bucomaxilofaciais, e buscando um aumento na velocidade da recuperação pós-cirúrgica, muitos recursos fisioterápicos são empregados, entre eles a laserterapia e o acompanhamento da evolução pode ser baseado em evidência clínica. Neste trabalho, foi proposto acompanhar a evolução pós-cirúrgica através da utilização do eletromiografia de superfície em dois grupos distintos: pacientes sem fisioterapia com laser no pós-operatório e pacientes tratados no pós-cirúrgico com laserterapia. Realizamos quatro tomadas, no pré-operatório, normalizando, e três no pósoperatório, 7, 14, 21 dias, em amostra de 60 pacientes. Observamos, que no sétimo dia no grupo onde houve a aplicação do laser de baixa intensidade 23,3% dos pacientes ja haviam recuperado sua atividade muscular do préoperatório contra apenas 3,3% do grupo controle, ja no décimo quarto dia 73,3% contra 6,7% do grupo controle e no vigésimo primeiro dia 80% contra 10% do grupo controle. Constatamos através da eletromiografia de superfície que a utilização do laser de baixa intensidade acelera significativamente a recuperação muscular pós-trauma cirúrgico / The surgery for extraction of the retained inferior third molar is one of the most commonly performed procedures in the field of maxillofacial surgery and traumatology. With the aim of accelerating the post-surgical recovery, many physiotherapy resources are employed, including laser therapy and its evolution was based on clinical evidence. In this study, we proposed to monitor the post-surgical evolution by using surface electromyography in two distinct groups of patients, treated or not with laser therapy postoperatively. In a sample of 60 patients, we held four evaluations: preoperatively, normalizing, and three times after surgery, at 7, 14, and 21 days postoperatively. On the seventh day, 23.3% of the patients in the group receiving low intensity laser had already regained their muscle activity as they presented preoperatively, versus only 3.3% of the control group. In the fourteenth day, this happened with 73.3% of treated patients versus 6.7% in the control group, and in the twenty-first day, 80% versus 10% in the control group. It was verified, by surface electromyography evaluation, that the use of low intensity laser significantly accelerates muscle recovery after surgical trauma
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Efeito da laserterapia de baixa intensidade (904 nm) e do alongamento estático em pacientes com osteoartrite de joelho: ensaio controlado randomizado simples cego / Effect of low-level laser therapy (904 nm) and static stretching in patients with knee osteoarthritis: a single blinded randomised controlled trial

Meneses, Sarah Rubia Ferreira de 04 September 2015 (has links)
Objetivo: Investigar o efeito da laserterapia de baixa intensidade (LBI) e do alongamento estático, combinados ou não, em pessoas com osteoartrite de joelho (OAJ). Método: Foram randomizados 145 sujeitos de 50 a 75 anos com OAJ em cinco grupos de intervenção (n=29 cada): Laserativo+Along; Laserplacebo+Along; Along; Laserativo e controle. A laserterapia (GaAs; 904nm; 40mW; 3J/ponto; 27J/joelho) consistiu de nove sessões nos grupos de terapia combinada e 24 quando monoterapia. O alongamento foi composto por sete exercícios repetidos por 24 sessões. O controle recebeu uma cartilha educacional. A frequência de tratamento foi de 3x/sem. A variável primária foi a intensidade da dor medida pela Escala Visual Analógica e as variáveis secundárias incluídas foram domínios dor, função, rigidez e escore total do questionário Western Ontario and McMaster Universities Arthritis Index (WOMAC), funcionalidade avaliado pelo Lequesne, mobilidade pelo Timed Up and Go, amplitude de movimento do joelho (ADMJ) pela goniometria e encurtamento de isquiotibiais (IQT) pelo ângulo poplíteo. O nível de significância foi de ?=0,05. Resultados: Nos grupos de terapia combinada, não foi observada diferença entre o laser ativo e placebo (p>0,05). Ao final do estudo, os grupos demonstraram, em média, ganho relativo significativo na dor durante AVDs (50%), WOMAC total (39%), funcionalidade (30%) e mobilidade (20%) em comparação ao controle (p < 0,001). Houve melhora de 43% no encurtamento de IQT e de 9% no ganho de ADMJ nos grupos de terapia combinada em relação ao controle (p < 0,001 e p=0,02, respectivamente). Conclusão: LBI e alongamento estático, quando isolados, foram efetivos na melhora da dor, funcionalidade, mobilidade e nos domínios dor, função e escore total do WOMAC. A LBI nos grupos de terapia combinada não foi superior à aplicação placebo. Portanto, não devemos desconsiderar a contribuição do efeito placebo no resultado do tratamento isolado. A LBI combinada ao alongamento não promoveu benefícios adicionais em relação ao alongamento de forma isolada / Objective: To investigate the effect of low-level laser therapy (LLLT) and static stretching, in combination and as monotherapy, in people with knee osteoarthritis (KOA). Methods: 145 people aged 50-75 years with KOA were randomly allocated to five groups (each n=29): Laseractive+Stretch, Laserplacebo+Stretch, Stretch, Laseractive and control. The laser therapy (GaAs; 904nm; 40mW; 3J/point; 27J/knee) consisted of nine sessions in the combined treatment groups and 24 when used as monotherapy. Stretching consisted of seven exercises repeated for 24 sessions. The control group received an educational booklet. Treatment frequency was 3 times/week. The primary outcome was pain intensity measured by Visual Analogue Scale and the secondary outcomes included pain, function and stiffness\' domains and total score of Western Ontario and McMaster Universities Arthritis Index (WOMAC), function assessed by Lequesne, mobility by Timed Up and Go, knee range of motion (KROM) by goniometry and hamstring shortening by popliteal angle. Results: In the combined treatment groups, there was no difference between the laser active and placebo (p > 0.05). At the end of the study, the treatment groups demonstrated, on average, a significant relative gain in pain (50%), total WOMAC (39%), function (30%) and mobility (20%) when compared to control (p < .001). For the combined treatment groups there was a 43% improvement in hamstring shortening (p <.001) and 9% improvement in KROM (p=0.02) when compared to control group. Conclusion: LLLT and stretching exercises, as monotherapy, were effective in reducing pain and improving function, mobility and the domains pain and function as well as the total score of WOMAC. The LLLT in the combined groups was not superior to the placebo application. Thus, we should not discard the contribution of the placebo effect in the result of the LLLT as monotherapy. The LLLT combined with stretching did not promote additional benefits compared to stretching alone
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Efeitos da radiação laser em baixa intensidade na cicatrização de queimaduras de pele. Estudo Laser Doppler fluxométrico e histológico em ratos / Effects of low intensity laser radiation on burned skin healing. a laser doppler flowmetry and histological study in rats

Sugayama, Stella Thyemi 28 November 2006 (has links)
Queimaduras severas causam trauma às vítimas, pela perda de líquido corpóreo, injúria no sistema vascular cutâneo e demora na cicatrização das lesões. A irradiação com laser em baixa intensidade vem sendo estudada como tratamento alternativo, por ser uma terapia não-invasiva e capaz de acelerar o processo de cicatrização. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa potência (&lambda; = 660 nm) em queimaduras de pele por histomorfometria e fluxometria laser Doppler utilizando duas condições de irradiação. Trinta e seis animais com duas queimaduras criadas por vapor foram divididos em três grupos: no grupo dose fracionada (GF), as lesões foram irradiadas com dose de 1 J/cm2 nos dias 1, 3, 8 e 10; no grupo dose única (GU), as lesões foram irradiadas com dose de 4 J/cm2 no dia 1. O grupo controle (GC) não foi irradiado. O fluxo sanguíneo foi monitorado nos dias 3, 8, 10, 15 e 21 e três animais por grupo foram sacrificados nestes momentos. Os grupos irradiados mostraram um pico de vasos neoformados no dia 15, enquanto que o pico do GC foi no dia 21. O número de vasos no GC foi significantemente maior que GF e GU no dia 21. Com relação ao fluxo sangüíneo, os grupos irradiados mostraram um valor mais alto que o controle no dia 8, porém, sem diferenças significantes entre os grupos. Estes achados sugerem que o laser acelera a cicatrização de queimaduras, porém, sem diferenças significativas entre as doses estudadas. / Severe burn injuries cause extensive damage and are notoriously complicated by loss of body fluids, injury in the cutaneous vasculature and delayed wound healing. Low intensity laser therapy (LILT) has been studied as an alternative method since it is a non invasive treatment and is able to accelerate wound healing. The purpose of the present study was to evaluate the effects of LILT (&lambda; = 660 nm) in burned skin with two different doses by histomorphometry and laser Doppler flowmetry. Thirdy six male adult Wistar rats with two burns created on the back using water vapor were divided into 3 groups. In the fractioned dose laser group (GF), the lesions were irradiated with 1 J/cm2 on days 1, 3, 8 and 10; in the single dose laser group (GU), the lesions were irradiated with 4 J/cm2 on day 1. On control group (GC) lesions were not irradiated. The blood flow was measured on days 1, 3, 8, 10, 15 and 21 and three animals per group were sacrificed in these moments. Irradiated groups showed a peak of new blood vessels formation on day 15 while for GC the peak was on day 21. At this moment, the number of vessels in GC was significantly higher than GF and GS. Regarding to blood flux, irradiated groups displayed a higher value than GC on day 8, though no significant differences were observed. These findings suggest that LILT may accelerate skin repair, however, no significant differences were observed between the studied doses.
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Análise da expressão de metaloproteinases da matriz em células satélites gliais do gânglio trigeminal de ratos portadores de inflamação da articulação temporomandibular persistente submetidos a laserterapia de baixa intensidade / Analysis of matrix metalloproteinase expression in glial cells satellites of the trigeminal ganglia of rats with persistent inflammation of the temporomandibular joint subjected to low intensity laser therapy

Desiderá, Amanda de Carvalho 14 April 2016 (has links)
A dor é uma das principais sintomatologias capazes de levar indivíduos a buscar tratamento médico-odontológico. Na odontologia estima-se que cerca de 40 a 75% da população seja portadora de dor de origem orofacial e tenha pelo menos um sinal ou sintoma de disfunção temporomandibular (DTM). A DTM corresponde a um quadro patológico de caráter multifatorial que acomete a articulação temporomandibular (ATM) e os músculos mastigatórios, ocasionando dores na região orofacial bom como alterações na realização de movimentos bucais. O principal sinal desta enfermidade é a inflamação articular, a qual gera dor nas estruturas relacionadas. A inflamação, por sua vez, leva a liberação de mediadores tais como, substância P, peptídeo relacionada ao gene da calcitonina (CGRP), além de fator de necrose tumoral a (TNF-&alpha;) e interleucina 1&beta; (IL-1&beta;). Estes mediadores sensibilizam as terminações nervosas livres e a informação nociceptiva caminha para a primeira estação sináptica, o gânglio trigeminal. A inflamação quando persistente promove a expressão de metaloproteinases da matriz (MMP), cuja ação modifica a matriz extracelular podendo, então, modular vias neuronais de percepção. Células satélites gliais (CSGs) são células envolvidas no suporte microambiente neuronal e, possivelmente, células que atuariam na modulação de vias de percepção nociceptiva. Conhecendo mais profundamente os mecanismos de modulação da dor, são buscadas terapêuticas não invasivas eficientes para atenuar a sintomatologia dolorosa advinda da DTM. A laserterapia de baixa intensidade (LLLT) mostra-se como um tratamento eficiente, porém seu efeito dose-dependente gera resultados ambíguos. Nesse contexto o presente trabalho teve como objetivos verificar os biomarcadores inflamatórios presentes no fluído sinovial em ratos portadores de inflamação persistente da ATM, tratados ou não com LLLT. Foram utilizados ratos Wistar (200-240g, n=440 - CEUA 2013.1.1111.58.7), os quais receberam administração de CFA (Adjuvante Completo de Freund) ou salina 0,9% (SAL) intraarticular e que foram submetidos (LLLT) ou não a aplicação de laser na região temporomandibular no primeiro dia, 1 hora após a indução da inflamação,, e nos dias 3, 5, 7 e 10 após indução da inflamação. Resultados obtidos neste trabalho mostram que a LLLT reduz as células polimorfonucleares presentes na cápsula articular das ATM, e, também, de espécies reativas de oxigênio (redução da atividade de mieloperoxidase - MPO). Ainda, verificou-se a redução da expressão de MMP-2 e MMP-9 no líquido sinovial de ratos com inflamação persistente induzida pela administração de CFA intraarticular. Citocinas pró-inflamatórias (por exemplo: IL-1&alpha;, IL-1&beta;, IL-6, IL-12p70, IFN-&upsih;, GM-CSF e TNF-&alpha;.) analisadas do líquido sinovial mostraram aumento significativo em sua expressão quando da presença de inflamação, a LLLT reduziu a expressão de dessas citocinas. No entanto, a fotoestimulação em alguns momentos na ausência de inflamação estimulou a expressão das citocinas IL-2, IL-5, IL-12p70, GM-CSF. Além disso, a terapia fotodinâmica aumentou expressão das citocinas anti-inflamatórias IL-4, IL-10 e IL-13 na presença de inflamação. A análise da imunofluorescência para marcação de MMP-2 e MMP-9 co-localizadas para células suporte mostrou que a expressão mais significativa ocorreu em neurônios, e resultados apontam que a LLLT na dose de 60J/cm&sup2; não reduziu a expressão dessas gelatinases no gânglio trigeminal. / Pain is one of the main symptomatology able to lead individuals to seek medical and dental treatment. In dentistry it is estimated that about 40-75% of the population is a carrier of orofacial pain source and has at least one sign or symptom of temporomandibular disorders (TMD). The TMD corresponds to a pathological condition of multifactorial affecting the temporomandibular joint (TMJ) and masticatory muscles, causing pain in the orofacial region well as changes in the performance of mouth movements. The main sign of this disease is joint inflammation, which generates pain related structures. The inflammation leads to release of mediators such as substance P, calcitonin-related peptide gene (CGRP), and tumor necrosis factor (TNF-&alpha;) and interleukin-1&beta; (IL-1&beta;). These mediators sensitize terminal fiber nerves and nociceptive information goes to the first synaptic station, the trigeminal ganglion. The persistent inflammation when promotes the expression of metalloproteinase (MMP), whose operation modifies the extracellular matrix may therefore modulate neuronal pathways perception. Satellite glial cells (CSGs) are involved in neuronal microenvironment support, and possibly cells that act in the modulation of nociceptive pathways perception. Knowing deeper into the mechanisms of pain modulation, are sought noninvasive therapeutic effective to alleviate the painful symptoms arising from the DTM. The low level laser therapy (LLLT) is shown as an effective treatment, but their dose-dependent effect produces ambiguous results. In this context, this study aimed to verify the inflammatory biomarkers present in the synovial fluid in rats with persistent inflammation of the ATM, or not treated with LLLT. Wistar rats (200-240g, n = 440 - CEUA 2013.1.1111.58.7), which received CFA administration (Complete Freund\'s Adjuvant) or 0.9% saline (SAL) intraarticular and underwent (LLLT) or not applying laser temporomandibular region on the first day, 1 hour after inflammation induction, and after days 3, 5, 7 and 10. Our results showed that LLLT reduces polymorphonuclear cells present in the joint capsule of the TMJ, and also of reactive oxygen species (reduction in myeloperoxidase activity - MPO). Still, there was a reduction in expression of MMP-2 and MMP-9 in the synovial fluid of rats with persistent inflammation induced by the intraarticular administration of CFA. Pro-inflammatory cytokines (IL-1&alpha;, IL-1&beta;, IL-6, IL-12p70, IFN-&upsih;, GM-CSF and TNF-&alpha;) analyzed synovial fluid showed a significant increase in its expression induced by TMJ 20 inflammation, and LLLT reduced expression of these cytokines. However, the photostimulation in the absence of inflammation stimulated the expression of cytokines IL-2, IL-5, IL-12p70, GM-CSF. Furthermore, photodynamic therapy increased expression of anti-inflammatory cytokines IL-4, IL-10 and IL-13 in rats with TMJ inflammation. Analysis of immunofluorescence for MMP-2 and MMP-9 co-located to support cells showed that the most significant expression was located in neurons, and results indicate that LLLT at a dose of 60 J/cm&sup2; did not reduce the expression of these gelatinases in the ganglion trigeminal.
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Avaliação da reparação tecidual de excisões realizadas em dorso de ratos submetidas à terapia foto-dinâmica com utilização de corante azul de metileno / Wound healing evaluation of excisions performed on the back of rats and submitted to photodynamic therapy mediated by methylene blue dye

Sperandio, Felipe Fornias 03 July 2009 (has links)
A terapia foto-dinâmica consiste na irradiação luminosa de um determinado tecido ou microorganismo previamente exposto à ação de um corante foto-sensibilizador. Ela é eficazmente utilizada em neoplasias e em processos infecciosos. No entanto, poucos estudos avaliam o efeito desta terapia em reparação tecidual. Estes trabalhos mostram resultados que variam entre satisfatórios e não-satisfatórios. Além disso, os estudos que envolvem a terapia com laser em baixa intensidade e a terapia foto-dinâmica em reparação tecidual preocupam-se, na maioria das vezes, com a organização e quantificação dos componentes da matriz extra-celular. Estudar o epitélio, em contrapartida, por meio das proteínas expressas pelos queratinócitos é igualmente importante, sabendo-se que a reparação da ferida depende também da organização e proliferação das células epiteliais. Este trabalho avaliou a reparação tecidual de excisões realizadas em dorso de ratos submetidas à irradiação com laser em baixa intensidade ou terapia foto-dinâmica mediada pelo corante azul de metileno. Para tal, realizou-se a análise morfológica e histomorfológica das feridas em determinados tempos experimentais, além da análise imunoistoquímica das citoqueratinas 10 e 14 e p63. Os resultados mostraram que a reparação tecidual foi favorecida com a irradiação laser em baixa intensidade, o que foi confirmado através das análises morfológica e histo-morfológica que mostraram fechamento prévio da ferida para este grupo experimental. Além disso, a expressão de citoqueratina 10 na língua epitelial formada nas feridas pertencentes ao grupo Laser precedeu a expressão da mesma nos outros grupos, o que indicou uma maturação acelerada do epitélio para este grupo. O grupo da terapia foto-dinâmica não apresentou aceleração da reparação tecidual bem como não a prejudicou. Isto sugere que a reparação tecidual frente à irradiação laser é diferente daquela encontrada com a terapia foto-dinâmica. Além disso, não houve atraso da reparação tecidual com a terapia foto-dinâmica, sugerindo que esta terapia foi segura e que devem ser consideradas suas vantagens em situações de infecção. / The photodynamic therapy involves delivering visible light of the appropriate wavelength into a tissue or microorganism previously exposed to a photo-sensitive dye. Its use is widely spread between neoplastic and infeccious diseases. Nevertheless, its effects upon wound healing has not yet been completely verified and the few studies concerning this subject present whether good or bad results. In addition, studies that involve low intensity laser therapy or photodynamic therapy on wound healing concern mostly on the organization and quantification of the extracellular matrix components. Studying the epithelium, on the other hand, by the keratinocyte expressed proteins is equally important, once the wound healing depends also of the organization and proliferation of the epithelial cells. This study evaluated the wound healing of excisions performed on the back of rats submitted to low intensity laser therapy or photodynamic therapy mediated by methylene blue dye. Morphological and histo-morphological analysis of the wounds in pre-determined periods were performed, as well as immunohistochemistry of citokeratins 10 and 14 and p63. The results showed that the wound healing was enhanced by the low intensity laser therapy, which was confirmed by the morphological and histomorphological analysis. The wound closure was previously seen for the laser group. The citokeratin 10 expression on the epithelial tongue of the wounds that belong to the laser group preceded the expression in the other groups, which indicated an accelerated maturation of this epithelium. The photodynamic therapy group did not present accelerated wound healing but did not present any delay as well. This suggests that the wound healing found for the laser group differs from that found for the photodynamic therapy group. Moreover, the lack of delay presented by the photodynamic therapy suggests a safe therapy with advantages regarding disinfection that should be considered in specific situations.
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Avaliação da remodelação óssea após disjunção da sutura palatina mediana experimental e laserterapia de baixa potência, em ratos Wistar / Bone remodeling after experimental rapid maxillary expansion and low-level laser therapy, in Wistar rats

Stuani, Adriana Sasso 27 April 2012 (has links)
INTRODUÇÃO: O uso da laserterapia concernente ao estímulo da formação óssea e da revascularização tem tornado objeto de estudo na área de saúde. OBJETIVO: O presente trabalho in vivo teve como objetivo avaliar quantitativamente os efeitos do laser de baixa potência (LBP) na remodelação óssea após a expansão rápida da maxila (ERM) em ratos jovens, através da expressão do RNAm dos genes RANK, RANK-L, Osteoprotegerina (OPG), e o Fator do Crescimento do Endotélio Vascular (VEGF) bem como a análise histológica. MATERIAL E MÉTODO: Utilizou-se 105 ratos Wistar (Rattus norvegicus, albinus), machos, divididos em 4 grupos: Grupo Controle (n=10) animais não tratados (sem ERM e sem aplicação do LBP; Grupo Experimental I (n=40) animais que tiveram apenas a ERM; sendo 25 animais sacrificados nos dias 1, 2, 3, 7, e 10 dias após a ERM para análise com RT-PCR e western blotting e 15 animais foram sacrificados nos dias 0, 7 e 10 dias para análise histológica; Grupo Experimental II (n=40) animais que tiveram ERM + LBP com diodo de Ga-Al-As (Gálio-Alumínio-Arsênio:160J/cm2) no primeiro dia do experimento; os animais foram sacrificados nos mesmos períodos que o Grupo Experimental I; Experimental III (n=15) animais que receberam 3 aplicações de LBP após ERM, totalizando 480J/cm2. Os animais foram sacrificados nos dias 3, 7 e 10 dias após a ERM para análise com RT-PCR e western blotting. A extração do RNAt da maxila foi feita com trizol. A síntese da fita de DNA complementar (cDNA) foi feita a partir de 1&#181;g de RNA, por meio de uma reação de transcrição reversa, com a utilização da enzima transcriptase reversa, e a análise da expressão gênica foi realizada pela reação em cadeia pela polimerase em tempo real (qRT-PCR) no sistema TaqMan®. A análise protéica do VEGF, RANK, RANK-L e OPG foi realizada por meio da técnica western blotting. O teste de variância (ANOVA) foi usado comparando os grupos entre si e inter-grupos seguida pelo teste complementar de Tukey, com nível de significância de 5%. RESULTADOS: A separação dos incisivos induzida pela ERM foi semelhante nos grupos experimentais I e II, o espaço entre os incisivos foi mantido durante toda a fase experimental, e não houve diferença significativa entre os grupos laser e não-laser (p<0,05), demostramdo a eficiência da metodologia usada para abertura da sutura palatina mediana. Para o grau de abertura da sutura, foi quantificada, a área de abertura sutural em todos os grupos após a ERM, e observou-se aumentou significativo comparado com o grupo controle, sendo que no grupo de laser o grau de abertura final foi significativamente menor no grupo laser do que não-laser aos 7 e 14 dias, mostrando que a formação óssea no grupo laser foi mais acelerada, o que pode ser comprovado com os dados histológicos, demonstrando que o laser acelerou o processo de formação óssea. Em relação à expressão relativa dos genes RANK/RANK-L/OPG tanto o grupo com laser quanto o sem-laser mostraram um aumento significativo da expressão comparado ao grupo controle (p < 0,05), principalmente nos períodos iniciais e quando comparou-se o grupo irradiado com o não irradiado observou-se que no grupo com laser houve uma maior expressão desses genes do que no grupo sem laser. CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que a formação óssea após a ERM foi observada dentro da sutura palatina e o uso do LBP influenciou a formação óssea acelerando o processo de osteogênese durante a fase inicial do experimento. / BACKGROUND: The use of low-level laser terapy with bone stimulation has been studied in the health science field. OBJECTIVE: The aim of the present in vivo study was to quantitatively evaluate the effects of low-level laser therapy (LLLT) on bone healing after rapid maxillary expansion (RME) in young rats, and the RANK, RANK-L, OPG and VEGF gene expressions; and histological analyses. MATERIALS and METHODS: A total of 105 rats Wistar (Rattus norvegicus, albinus), male were assigned tofour groups: Control Group (n=10) with no treatment (no RME and no LLLT); Experimental I (n=40) with RME without LLLT: 25 animals were euthanized at days 1, 2, 3, 7 and 10 after RME for real time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and western blotting analysis and 15 animals were euthanized at days 0, 7 and 10 after RME for histological evaluation; Experimental II (n=40) with RME and LLLT (160J/cm2): animals were euthanized at the same periods described for Experimental I. Experimental III (n=15) with RME and 3 aplication of LLLT (480J/cm2): animals were euthanized at days 3, 7 and 10 after RME for real time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and western blotting analysis. Part of the sample was kept at -80&#176;C for genes expression and protein production, and another for histological analysis. The total RNA was extracted using trizol. Complementary DNA (cDNA) was synthesized using 1&#181;g of RNA in a reverse transcription reaction and for genes expression we used RT-PCR in the TaqMan® system. The RANK, RANK-L, OPG, and VEGF and proteins analysis was made using western blotting. The ANOVA and Tukey tests were used and significance level was set at 5%. RESULTS: The expansion-induced opening of the incisors was similar among the groups, the space between the incisors was kept during all the experimental phase and there was no difference between laser and no laser therapy groups (p<0,05) showing that this methodology was efficient to open the palatine suture. The the opened along the suture was quantified, the area in all RME groups significantly increased compared with control group. Following laser therapy, the palatal suture opening decreased at 7 and 14 days, showing that bone formation in laser group was accelerate, and it was proved with histological analysis, that showed that LLLT accelerated bone formation. Regarding RANK/RANK-L/OPG gene expression, both laser and no-laser therapy groups showed a significant increased in these genes expression, compared to the control group, mainly at the initial periods of healing. Laser therapy group showed a higher expression of these genes than no laser group. CONCLUSIONS: The results suggest that bone formation after RME was observed within palatal suture and the application of the LLLT influenced bone formation accelerating the process of bone mineralization during the initial experimental phase.

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