Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-30Bitstream added on 2014-06-13T18:31:06Z : No. of bitstreams: 1 agostini_dls_me_bauru.pdf: 3608842 bytes, checksum: 9f88482e6ed9f6d122b753891fe26c0a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As membranas de borracha natural são usadas frequentemente como material biológico na indução de angiogênese e neoformação. Neste trabalho foram realizados estudos com objetivo de identificar os componentes do látex que são responsáveis pelo processo de angiogênese e neoformação. O látex, as fases centrifugadas do látex e as membranas da borracha natural, tratados termicamente em 60, 85 e 120ºC, foram liofilizados para a redução de água nos mesmos. A caracterização de tais materiais foi realizada por espectroscopia infravermelha (FTIR), micro-Raman, ressonância magnética nuclear (NMR - 1H e 13C), difração de raio x (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia de força atômica (AFM), análise do termogravimétrica (TG) acoplado com infravermelho (TG/FT-IR), calorimetria exploratória diferencial (DSC), análise dinâmico mecânica (DMA) e o método de Bradford. Nos resultados de espectroscopia no infravermelho, micro de Raman, NMR (1H e 13C), de raios x e TG/FT-IR; os componentes químicos do látex, das fases centrifugadas do látex e das membranas da borracha natural foram identificados. A técnica de TG foi utilizada para avaliar a estabilidade térmica e os resultados mostraram que as membranas obtidas a 60ºC possuem maior estabilidade. Nos resultados de DSC notou-se que a transição vítrea acontece em ~ -68ºC, para todos os materiais que contêm isopreno e a degradação estrutural ocorrem em torno de 376ºC. As transições de vítreas foram confirmadas através dos resultados de DMA. O látex centrifugado apresenta três fases: partículas de borracha (F1), lutóides (F2) e Frey-Wyssling (F3). Nas frações F2 e F3 o isopreno é ausente, ou apresenta pequena proporção, mas contêm diversos componentes químicos: proteínas, ácidos aminados e grupos funcionais que podem induzir o angiogênese e a neoformação em tecidos biológicos... / Natural latex and natural rubber membranes are frequently used as biomaterial in the angiogenesis induction and neoformation of biological tissues. Our studies aimed to study and identify the latex components that are responsible for angiogenesis and neoformation processes. The natural latex, the centrifuged latex phases and the natural rubber membranes were thermally treated at 60, 85 and 120ºC and afterward all samples were lyophilized. The characterization of such materials were carried out using infrared (FT-IR), micro Raman spectroscopy, nuclear magnetic resonance (NMR - 1H e 13C), X-ray diffraction, scanning electronic microscopy (SEM) and atomic force microscopy (AFM), thermogravimetry analysis coupled with infrared (TG/FT-IR), differential scanning calorimeter (DSC), dynamic mechanical analysis (DMA) and the method of Bradford. From the results of infrared and micro Raman spectroscopy, NMR (1H e 13C), X-rays and TG/FT-IR the chemical components present in the latex, in the centrifuged latex phases and in natural rubber membranes were identified. TG technique was used to evaluate the thermal stability and results showed that membranes obtained at 60ºC present greater stability, up to 350ºC. From DSC results it was found that the glass transition happens at –68ºC, for all materials containing isoprene, and the structural degradation occurs at 376ºC. Glass transitions were confirmed also by DMA results. Centrifuged latex presents three phases: rubber particles (F1), lutoids (F2) and Frey-Wyssling (F3). In the fractions F2 and F3 the isoprene is absent but they contain several chemical components: proteins, amino acids and functional groups that can induce angiogenesis and neoformation on biological tissues. The treated membrane 60ºC of natural rubber showed the highest angiogenesis and neoformation activities. Furthermore, membranes containing pores favor the cicatrization process and the vascularization processes.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:37:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:56:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 05381.pdf: 5329504 bytes, checksum: c318444feb48e0e30c208b55d7e2217d (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

ARAÚJO, E. S. Látex de Plumeria rubra L. (jasmim): perfil protéico, caracterização enzimática e ação contra insetos. 2009. 90 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-12-15T21:41:55Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_esaraujo.pdf: 3707223 bytes, checksum: cc7319968dcadccfe82fc0bbf1676d78 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-20T14:12:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_esaraujo.pdf: 3707223 bytes, checksum: cc7319968dcadccfe82fc0bbf1676d78 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-20T14:12:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_esaraujo.pdf: 3707223 bytes, checksum: cc7319968dcadccfe82fc0bbf1676d78 (MD5) Previous issue date: 2009 / Plumeria rubra L. is a laticífera plant belonging to the family Apocynaceae popularly known as Jasmim. For spicy and fragrant flowers make this tree is commonly seen ornate squares and gardens of residential urban centers. Laticífer plants are well known for producing a fluid endogenously generally milky in appearance - latex - that exudates from the plant when it undergoes some type of injury, either by mechanical damage or attack by predators. Latex is a material that has been the subject of biochemical and pharmacological studies show that it is a promising source of compounds with potential biotechnological application. In this study the latex of P. rubra was the subject of biochemical and biological research with emphasis on the search for proteins that could make any deleterious action against agricultural insect pests. Laboratory procedures that employ centrifugation and dialysis allowed the fractionation of latex into three distinct components: rubber (BL), proteins (PLPr) and low molecular weight molecules (DL). The PLPr fraction was subject to biochemical and enzymatic characterization and was used in bioassays with the bean weevil-of-rope, Callosobruchus maculatus and the fruit fly, Ceratitis capitata. The full latex and its fractions were used in testing the repellency of oviposition of C. maculatus and Zabrotes subfasciatus. The BL fraction is the major component of latex, 70 %, while PLPr and DL fractions are about 15 % each one. The content of soluble protein in PLPr fraction was 0.33 mg / mL. Espectrometric and electrophoretic analysis revealed the presence of proteins with molecular weights ranging from 12 to 117 kDa, with a maximum of protein with 26 kDa and pI <6.0. The characterization showed that the enzyme antioxidativas enzymes superoxide dismutase and peroxidase were detected in the protein fraction, as well as activity chitinases. Proteins of latex were able to degrade azocasein (nonspecific substrate) and BANA (specific substrate for cysteine proteases). The proteolytic enzymes were detected mainly of type cysteine and to a lesser extent, serine proteases. The pH and temperature optimum for this activity was 6.0 and 37 ºC respectively, where higher values of temperature cancel the activity. Through experiments with artificial diet can be observed that the protein fraction of latex in 0.4 % was able to reduce by 50 % the survival and, in 0.1 %, reduce the by 50 % the weight gain of larvae of C. maculatus. When these proteins were denatured by heating the larval development was similar to the control, suggesting that the maintenance of protein structure is essential for the observed effect. Proteins of latex were not digested by endogenous proteases of the digestive tract of larvae, suggesting that they would be free to cause deleterious effects. No effect on the development of the larvae of C. capitata was observed when the proteins were added to the diet, even at a concentration of 4 %. Whole latex when adsorbed in bean seeds, showed repellent activity on oviposition of both bruchid, being more evident in Z. subfasciatus. The repellent activity was observed time and dose dependent. The latex was unable to affect the viability of eggs or larval development. The PLPr and DL fractions showed no repellent activity, showing that neither protein nor molecules with low molecular weight are involved in this action. The insects, when exposed directly to the latex for a long period of time had not affected their fecundity or oviposition. / Plumeria rubra L. é uma planta laticífera pertencente à família Apocynaceae popularmente conhecida como Jasmim. Por apresentar flores vistosas e perfumadas, essa árvore é comumente vista ornamentando praças e jardins residenciais dos grandes centros urbanos. Plantas laticíferas são assim denominadas por que produzem endogenamente um fluido de aspecto geralmente leitoso - o látex - que é exsudado da planta quando esta sofre algum tipo de ferimento, seja por dano mecânico ou por ataque de predadores. O látex é um material vegetal que tem sido alvo de estudos bioquímicos e farmacológicos que mostram ser ele uma fonte promissora de compostos com potencial aplicação biotecnológica. No presente trabalho o látex de P. rubra foi alvo de investigações bioquímicas e biológicas com ênfase na pesquisa de proteínas que pudessem apresentar alguma ação deletéria contra insetos pragas agrícolas. Procedimentos laboratoriais que empregam centrifugações e diálises permitiram o fracionamento do látex em três componentes distintos: borracha (BL), proteínas (PLPr) e moléculas de baixa massa molecular (DL). A fração PLPr foi alvo de caracterização bioquímica e enzimática e foi utilizada em bioensaios com o caruncho do feijão-de-corda, Callosobruchus maculatus e com a mosca-das-frutas, Ceratitis capitata. O látex íntegro e suas frações foram utilizados em ensaios de repelência da ovoposição de C. maculatus e Zabrotes subfasciatus. A fração BL é o componente majoritário do látex, 70 %, enquanto as frações PLPr e DL constituem cerca de 15 % cada uma. O teor de proteínas solúveis na fração PLPr foi de 0,33 mg/mL. Análises eletroforética e espectrométricas revelaram a presença de proteínas com massas moleculares que variaram de 12 a 117 kDa, com um máximo de proteínas com 26 kDa e pI<6,0. A caracterização enzimática mostrou que as enzimas antioxidantes superóxido dismutase e peroxidase foram detectadas na fração protéica, assim como, uma atividade quitinásica. As proteínas do látex foram capazes de degradar azocaseína (substrato inespecífico) e BANA (substrato específico para proteases cisteínicas). As enzimas proteolíticas detectadas foram principalmente do tipo cisteínica, e em menor proporção, serínica. O pH e a temperatura ótimos para esta atividade foram 6,0 e 37 ºC, respectivamente, onde valores de temperatura superiores anulam a atividade. Utilizando experimentos de dieta artificial pôde-se observar que a fração protéica do látex a 0,4 % foi capaz de diminuir em 50 % a sobrevivência, e a 0,1 %, diminuir 50 % do ganho de massa das larvas de C. maculatus. Quando essas proteínas foram desnaturadas por aquecimento o desenvolvimento larval foi igual ao controle, sugerindo que a manutenção da estrutura protéica é essencial para o efeito observado. As proteínas do látex não foram digeridas pelas proteases endógenas do trato digestório das larvas, sugerindo que as mesmas ficariam livres para causar o efeito deletério. Nenhum efeito no desenvolvimento das larvas de C. capitata foi observado quando as proteínas foram adicionadas à dieta, mesmo na concentração de 4 %. O látex íntegro, quando adsorvido em sementes de feijão, apresentou atividade inibitória do tipo repelente sobre a ovoposição de ambos os bruquídeos testados, sendo mais evidente em Z. subfasciatus. A ação repelente observada foi dose e tempo dependente. O látex não foi capaz de afetar a viabilidade dos ovos e nem o desenvolvimento larval. As frações PLPr e DL não apresentaram atividade repelente, mostrando que nem proteínas nem moléculas de baixa massa molecular estão envolvidas nessa ação. Os insetos, quando expostos diretamente ao látex por longo período de tempo não tiveram sua fecundidade nem ovoposição afetados, sugerindo que o efeito observado não altera a fisiologia do animal.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-05Bitstream added on 2014-06-13T18:44:19Z : No. of bitstreams: 1 agostini_dls_dr_bauru.pdf: 1803645 bytes, checksum: 1ba74c4c9393d0cd53d03478b6fe2f01 (MD5) / Atualmente é comprovado o poder de indução de angiogênese e neoformação tecidual através de membranas de borracha natural de Hevea brasiliensis. Este trabalho apresenta um estudo sobre as propriedades e a caracterização das frações não isoprênicas, separadas por centrifugação do látex, utilizado como biomaterial na indução de angiogênese e de neoformação. As frações constituintes, F2 e F3 sem o tradicional agente estabilizante de hidroxido de amônio (NH4OH), foram liofilizadas para a redução da quantidade de água e estabilização, em seguida tratadas termicamente a temperatura de 40,60,80, 100, 120 e 140ºC e novamente liofilizadas, sendo caracterizada através das técnicas de Kjeldahl, Soxhlet, de espectroscopia de absorção no infravermelho (FT-IR), Ressonância Magnética Nuclear (RMn-13C). Difração de raios x (DRX), termogravimetria (TG) acoplado ao FT-IR (IG/FT-IR), calorimetria exploratória diferencial (DSC), eletroforese, dosagens de citocinas e síntese de óxido nítrico considerando o fator limitate do uso do látex como um material bioativo, que é a temperatura de tratamento térmico, realizado para a obtenção das membranas de borracha natural, em torno de 85ºC. Foi possível verificar que a fração F3 constituinte do látex, tem propriedades anti-inflamatórias e que a fração F2 possui propriedades pró-inflamatórias / Currently it is proven the hability of inducing angiogenesis and tissue neoformating through membranes of natural rubber Hevea brasiliensis, so this work presents a study on the properties and characterization of non-isoprene fractions, separated by centrifugation, the latex used as biomaterial for induction and neoformation of angiongenesis and lyophilized without the traditional stabilizing agent, ammonium hydroxide (NH4OH). The fractions constituents, F2 and F3 fractions were lyophilized without the traditional stabilizing agent, ammonium hydroxide (NH4OH). The fractions constituents, F2 and F3 fractions were lyophilized to reduce the amount of water and stabilization, and then heat treated at temperature of 40, 60, 80, 100, 120 and 140ºC bieng characterized by the techniques of kjeldahl, Soxhlet, of absorption spectroscopy infrared (FT-IR), Nuclear Magnetic Resonance (NMR-13C), X-ray Diffraction (XRD), thermogravimetry (TG) coupled to FT-IR (TG-IR), differential scanning calorimetry (DSC), electrosphoresis, serum cytokines and oxide nitric (NO) considering the limiting factor in the use of latex as a bioactive material, which is the thermal treatment temperature, held for obtaining membranes of natural rubber, about 85ºC. It was possible to verify that the fraction F3 constituent latex has anti-inflammatory and the fraction F2 take inflammatory properties

Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:27Z : No. of bitstreams: 1 000834664_20170227.pdf: 320546 bytes, checksum: 4725e11d30032eb48947da17b2712fbb (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-03T11:01:30Z: 000834664_20170227.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-03T11:02:39Z : No. of bitstreams: 1 000834664.pdf: 2824361 bytes, checksum: e197c8e5e072c3f2488fffcf302fda2d (MD5) / O látex natural (NRL) extraído da árvore seringueira Hevea brasiliensis é um sistema coloidal composto pelo polímero cis-1,4-poliisopreno. Quando centrifugado ocorre a separação das proteínas relacionadas às reações alérgicas, porém permanecem as proteínas relacionadas à atividade angiogênica que este material tem apresentado. Suas aplicações biológicas têm crescido devido à atividade angiogênica e por apresentar baixo custo e fácil processamento. Dentre suas aplicações pode-se citar a liberação de compostos ativos (fármacos, extratos, nanopartículas, entre outros), uso como emplasto (acelerando a cicatrização de úlceras crônicas), prótese vascular, etc. Também tem sido utilizada como barreira mecânica na regeneração óssea guiada (GBR), mostrando-se eficiente e acelerando a cicatrização óssea. Desta forma, este trabalho se baseou em testar a citotoxicidade das membranas de látex natural; produzir membranas com diferentes porosidades; avaliar a adesão de pré-osteoblastos; testar a mineralização celular na membrana com maior porosidade. A citotoxicidade foi avaliada segundo a norma técnica ISO 10993-5 (pelo teste de extração do material); as membranas foram elaboradas segundo a técnica de separação de fases induzida termicamente (TIPS) a fim de proporcionar porosidade nas membranas e caracterizadas por microscópio eletrônico de varredura com energia dispersiva de raio-X (MEV-EDS), espectroscopia no infravermelho (FTIR-ATR) e resistência a tração; a adesão e morfologia celular da célula MC3T3-E1 subclone 14 foi avaliada pelo MEV e microscopia óptica; a mineralização foi avaliada por MTT, MEV-EDS, FTIR-ATR, vermelho de alizarina S, von Kossa e fosfatase alcalina. A membrana foi tóxica para o extrato na concentração de 100%, porém nas concentrações abaixo de 80% já não apresentava toxicidade. Todas as membranas continham irregularidades em sua... / The natural rubber latex (NRL) extracted from the rubber tree Hevea brasiliensis is a colloidal system composed of cis-14-polyisoprene polymer. The centrifugation separates the proteins related to allergic reactions, preserving the proteins related to angiogenic activity presented by this material. Their biological applications have grown due to the angiogenic activity and due to its low cost and easy handling. Among its applications, one can mention the release of active compounds (drugs, extracts, nanoparticles, etc.), use as a wound dressing (accelerating the healing of chronic ulcers), vascular prosthesis, etc. It has also been used as a mechanical barrier in guided bone regeneration (GBR), being efficient and accelerating bone healing. Thus, this work aimed a cytotoxicity test of natural rubber latex membrane; producing membranes with different porosities; and assess the adherence of pre-osteoblasts; a mineralization test in the membrane with higher porosity. Cytotoxicity was tested according to the standard ISO 10993-5; the membranes were produced by thermally induced phase separation (TIPS) to provide porosity in the membranes and characterized by scanning electron microscopy with energy dispersive X-ray (SEM-EDS), infrared spectroscopy (FTIR-ATR ) and tensile strength; cell adhesion and morphology of MC3T3-E1 cell subclone 14 was evaluated by SEM-EDS and optical microscopy; mineralization was assessed by MTT, SEM-EDS, FTIR-ATR, alizarin red S, von Kossa staining, and alkaline phosphatase. The membrane was toxic to extract at concentration of100%, but at concentration lower than 80% no longer showed toxicity. All membranes presented irregularities on its surface, with porosity only in those produced at -10°C to -20°C, the latter with higher pores and was tested for mineralization. FTIR-ATR showed no change in the functional groups due to processing and the tensile test showed a typical...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-24Bitstream added on 2014-06-13T20:16:46Z : No. of bitstreams: 1 canaveze_y_me_botib.pdf: 1530397 bytes, checksum: 38cd09032fc1d653c3d3c1bee0f283e3 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Laticíferos e coléteres são estruturas secretoras comuns em Apocynaceae e tendo sido registrados em órgãos vegetativos e reprodutivos em diferentes gêneros. Tabernaemontana catharinensis A.DC. é uma espécie de Apocynaceae, conhecida como leiteira ou casca-de-cobra, amplamente usada na medicina popular e com atividade medicinal comprovada. É planta heliófita, comum em áreas degradadas, pastagens e como invasora de cultivos, sendo amplamente distribuída no Brasil. Este trabalho teve como objetivo estudar a estrutura, origem e desenvolvimento de laticíferos e coléteres em plantas de T. catharinensis em diferentes fases do desenvolvimento vegetativo. Para este estudo foram analisados embriões maduros, plântulas aos 20 dias e plantas aos 80 dias após a germinação. Laticíferos dos tipos articulados anastomosados e não-anastomosados com crescimento intrusivo e, possivelmente, laticíferos não-articulados ramificados ocorrem em todos os estágios analisados. A fase meristemática dos laticíferos é breve e sua função secretora em regiões próximas ao promeristema foi confirmada histoquimicamente. Grãos protéicos, gotas de lipídeos e terpenos foram detectados nos laticíferos em todas as regiões analisadas. Laticíferos se caracterizam por apresentar crescimento axial, lamela média espessa, protoplasto granuloso e número variável de núcleos. Laticíferos do sistema primário se originam do meristema fundamental e procâmbio. Nas regiões diferenciadas da raiz e sistema caulinar, os laticíferos ocorrem imersos no parênquima fundamental e associados ao floema primário; células parenquimáticas na região cortical do caule, nervura principal e mesofilo podem ser adicionadas aos laticíferos. Laticíferos de origem secundária se originam do câmbio vascular em direção ao floema secundário... / Laticifers and colleters are secretory structures common in Apocynaceae and they have been reported in vegetative and reproductive organs to different genera. Tabernaemontana catharinensis A.DC. is a species of Apocynaceae known as leiteira or casca-de-cobra broadly used in the folk medicine and presents therapeutic activity confirmed. It is a heliophytic plant, common in degraded area and pasture areas and as invasive crops, being broadly distributed in Brazil. This work aimed to study the structure, origin and development of laticifers and colleters in T. catharinensis plants at different stages of vegetative development. For this study we analyzed mature embryos, 20-day seedlings and 80-day plants after the germination. Articulated anastomosing and nonanastomosing laticifers, and, possibly, nonarticulated branched types occur at all analyzed stages. The meristematic phase of laticifers is brief and your secretory function was histochemically confirmed in regions close to the promeristem. Protein grains, lipid droplets and terpenes were detected in the laticifers in all then analyzed regions. The laticifers were structurally differentiated from the surrounding cells by their axial growth, thick middle lamella, granular protoplast and variable number of nuclei. The primary laticiferous system arises from the ground meristem and the procambium. In the differentiated regions of the root and shoot system, the laticifers occur immersed in the fundamental parenchyma and associated to the phloem; parenchyma cells in the cortical region of the stem, midrib and mesophyll can be added to the laticifers. Laticifers of secondary origin were also produced from the vascular cambium toward the secondary phloem. Colleters occur in nodal region of cotyledons, eophylls and metaphylls at intrapetiolar and interpetiolar (stipulates) positions... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Rondinelli Donizetti Herculano / Co-orientador: Karina Alves de Toledo / Banca: Patrícia Targon Campana / Banca: Ricardo José de Mendonça / Resumo: O látex natural (NRL) extraído da árvore seringueira Hevea brasiliensis é um sistema coloidal composto pelo polímero cis-1,4-poliisopreno. Quando centrifugado ocorre a separação das proteínas relacionadas às reações alérgicas, porém permanecem as proteínas relacionadas à atividade angiogênica que este material tem apresentado. Suas aplicações biológicas têm crescido devido à atividade angiogênica e por apresentar baixo custo e fácil processamento. Dentre suas aplicações pode-se citar a liberação de compostos ativos (fármacos, extratos, nanopartículas, entre outros), uso como emplasto (acelerando a cicatrização de úlceras crônicas), prótese vascular, etc. Também tem sido utilizada como barreira mecânica na regeneração óssea guiada (GBR), mostrando-se eficiente e acelerando a cicatrização óssea. Desta forma, este trabalho se baseou em testar a citotoxicidade das membranas de látex natural; produzir membranas com diferentes porosidades; avaliar a adesão de pré-osteoblastos; testar a mineralização celular na membrana com maior porosidade. A citotoxicidade foi avaliada segundo a norma técnica ISO 10993-5 (pelo teste de extração do material); as membranas foram elaboradas segundo a técnica de separação de fases induzida termicamente (TIPS) a fim de proporcionar porosidade nas membranas e caracterizadas por microscópio eletrônico de varredura com energia dispersiva de raio-X (MEV-EDS), espectroscopia no infravermelho (FTIR-ATR) e resistência a tração; a adesão e morfologia celular da célula MC3T3-E1 subclone 14 foi avaliada pelo MEV e microscopia óptica; a mineralização foi avaliada por MTT, MEV-EDS, FTIR-ATR, vermelho de alizarina S, von Kossa e fosfatase alcalina. A membrana foi tóxica para o extrato na concentração de 100%, porém nas concentrações abaixo de 80% já não apresentava toxicidade. Todas as membranas continham irregularidades em sua... / Abstract: The natural rubber latex (NRL) extracted from the rubber tree Hevea brasiliensis is a colloidal system composed of cis-14-polyisoprene polymer. The centrifugation separates the proteins related to allergic reactions, preserving the proteins related to angiogenic activity presented by this material. Their biological applications have grown due to the angiogenic activity and due to its low cost and easy handling. Among its applications, one can mention the release of active compounds (drugs, extracts, nanoparticles, etc.), use as a wound dressing (accelerating the healing of chronic ulcers), vascular prosthesis, etc. It has also been used as a mechanical barrier in guided bone regeneration (GBR), being efficient and accelerating bone healing. Thus, this work aimed a cytotoxicity test of natural rubber latex membrane; producing membranes with different porosities; and assess the adherence of pre-osteoblasts; a mineralization test in the membrane with higher porosity. Cytotoxicity was tested according to the standard ISO 10993-5; the membranes were produced by thermally induced phase separation (TIPS) to provide porosity in the membranes and characterized by scanning electron microscopy with energy dispersive X-ray (SEM-EDS), infrared spectroscopy (FTIR-ATR ) and tensile strength; cell adhesion and morphology of MC3T3-E1 cell subclone 14 was evaluated by SEM-EDS and optical microscopy; mineralization was assessed by MTT, SEM-EDS, FTIR-ATR, alizarin red S, von Kossa staining, and alkaline phosphatase. The membrane was toxic to extract at concentration of100%, but at concentration lower than 80% no longer showed toxicity. All membranes presented irregularities on its surface, with porosity only in those produced at -10°C to -20°C, the latter with higher pores and was tested for mineralization. FTIR-ATR showed no change in the functional groups due to processing and the tensile test showed a typical... / Mestre

Orientador: Silvia Rodrigues Machado / Banca: Simone de Pádua Teixeira / Banca: Joecildo Francisco Rocha / Resumo: Laticíferos e coléteres são estruturas secretoras comuns em Apocynaceae e tendo sido registrados em órgãos vegetativos e reprodutivos em diferentes gêneros. Tabernaemontana catharinensis A.DC. é uma espécie de Apocynaceae, conhecida como leiteira ou casca-de-cobra, amplamente usada na medicina popular e com atividade medicinal comprovada. É planta heliófita, comum em áreas degradadas, pastagens e como invasora de cultivos, sendo amplamente distribuída no Brasil. Este trabalho teve como objetivo estudar a estrutura, origem e desenvolvimento de laticíferos e coléteres em plantas de T. catharinensis em diferentes fases do desenvolvimento vegetativo. Para este estudo foram analisados embriões maduros, plântulas aos 20 dias e plantas aos 80 dias após a germinação. Laticíferos dos tipos articulados anastomosados e não-anastomosados com crescimento intrusivo e, possivelmente, laticíferos não-articulados ramificados ocorrem em todos os estágios analisados. A fase meristemática dos laticíferos é breve e sua função secretora em regiões próximas ao promeristema foi confirmada histoquimicamente. Grãos protéicos, gotas de lipídeos e terpenos foram detectados nos laticíferos em todas as regiões analisadas. Laticíferos se caracterizam por apresentar crescimento axial, lamela média espessa, protoplasto granuloso e número variável de núcleos. Laticíferos do sistema primário se originam do meristema fundamental e procâmbio. Nas regiões diferenciadas da raiz e sistema caulinar, os laticíferos ocorrem imersos no parênquima fundamental e associados ao floema primário; células parenquimáticas na região cortical do caule, nervura principal e mesofilo podem ser adicionadas aos laticíferos. Laticíferos de origem secundária se originam do câmbio vascular em direção ao floema secundário... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Laticifers and colleters are secretory structures common in Apocynaceae and they have been reported in vegetative and reproductive organs to different genera. Tabernaemontana catharinensis A.DC. is a species of Apocynaceae known as leiteira or casca-de-cobra broadly used in the folk medicine and presents therapeutic activity confirmed. It is a heliophytic plant, common in degraded area and pasture areas and as invasive crops, being broadly distributed in Brazil. This work aimed to study the structure, origin and development of laticifers and colleters in T. catharinensis plants at different stages of vegetative development. For this study we analyzed mature embryos, 20-day seedlings and 80-day plants after the germination. Articulated anastomosing and nonanastomosing laticifers, and, possibly, nonarticulated branched types occur at all analyzed stages. The meristematic phase of laticifers is brief and your secretory function was histochemically confirmed in regions close to the promeristem. Protein grains, lipid droplets and terpenes were detected in the laticifers in all then analyzed regions. The laticifers were structurally differentiated from the surrounding cells by their axial growth, thick middle lamella, granular protoplast and variable number of nuclei. The primary laticiferous system arises from the ground meristem and the procambium. In the differentiated regions of the root and shoot system, the laticifers occur immersed in the fundamental parenchyma and associated to the phloem; parenchyma cells in the cortical region of the stem, midrib and mesophyll can be added to the laticifers. Laticifers of secondary origin were also produced from the vascular cambium toward the secondary phloem. Colleters occur in nodal region of cotyledons, eophylls and metaphylls at intrapetiolar and interpetiolar (stipulates) positions... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Calotropis procera à uma planta laticÃfera pertencente à famÃlia Apocynaceae, encontrada na Ãsia, Ãfrica e AmÃrica do Sul. Seu lÃtex à constituÃdo por um grande nÃmero de molÃculas bioativas que apresentam relevantes propriedades farmacolÃgicas que inclui anti- e prÃ-inflamatÃria, antitumoral, cicatrizante, antimicrobiana, entre outras. As proteÃnas extraÃdas deste lÃtex possuem mÃltiplos efeitos imunomodulatÃrios, dependendo da via de administraÃÃo utilizada. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a resposta prÃ-inflamatÃria da fraÃÃo proteica (PL) do lÃtex de Calotropis procera nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea; investigando a quimiotaxia de neutrÃfilos (in vivo e in vitro); o papel das cÃlulas residentes e os mediadores envolvidos. Foram utilizados camundongos Swiss (25-30 g). Verificou-se que PL induziu migraÃÃo de neutrÃfilos (MN) de forma dose-e-tempo dependente nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea. Foi demonstrado um aumento na permeabilidade vascular induzido pela administraÃÃo da PL (1 mg/cav) na cavidade peritoneal no modelo de Azul de Evans. O aumento na populaÃÃo de macrÃfagos residentes pelo prÃ-tratamento com tioglicolato, intensificou a MN induzida por PL, sendo observado um resultado semelhante com o grupo depletado de mastÃcitos pelo composto 48/80. Os mastÃcitos parecem exercer um papel modulador inibitÃrio sobre a quimiotaxia de neutrÃfilos, enquanto os macrÃfagos potencializam a MN, possivelmente por meio da liberaÃÃo de mediadores. Para investigaÃÃo dos mediadores envolvidos foram utilizados fÃrmacos bloqueadores especÃficos antes da administraÃÃo da PL. A modulaÃÃo farmacolÃgica com Dexametasona (0,5 mg/kg, s.c.), Pentoxifilina (100 mg/kg, s.c.), Talidomida (50 mg/kg, s.c.), Indometacina (3 mg/kg, s.c.) e Celecoxib (30 mg/kg, s.c.), mas nÃo com Meclizina (40 mg/kg, s.c.) e PCA (10 mg/kg; s.c.), inibiram a MN induzida por PL. Foi verificado por ELISA que os nÃveis dos mediadores IL-1 e IL-6 estavam aumentados no fluido peritoneal 4 h apÃs a administraÃÃo de PL (1 mg/cav, i.p.). Os nÃveis de nitrito tambÃm estavam aumentados no fluido da bolsa de ar subcutÃnea, demonstrando um envolvimento do Ãxido nÃtrico (NO) no efeito prÃ-inflamatÃrio da PL. A PL induziu rolamento e adesÃo de leucÃcitos ao endotÃlio vascular do mesentÃrio de camundongos, bem como quimiotaxia de neutrÃfilos in vitro. AlÃm disso, foi capaz de interagir diretamente com neutrÃfilos, induzindo a sÃntese dos mediadores prÃ-inflamatÃrios TNF-&#945;, IL-1&#946;, PGE2 e NO em cultura de neutrÃfilos. Em conclusÃo, PL induz uma resposta inflamatÃria aguda, caracterizada pela intensa migraÃÃo de neutrÃfilos e aumento da permeabilidade vascular. Promove quimiotaxia para neutrÃfilos de forma indireta, via macrÃfagos residentes, e de forma direta, interagindo com neutrÃfilos, induzindo rolamento e adesÃo no endotÃlio e liberaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrios. / Calotropis procera is a laticiferous plant belonging to the family Apocynaceae, found in Asia, Africa and South America. Its latex is comprised of a large number of bioactive molecules that show significant pharmacological properties including anti- and pro- inflammatory, antitumor, healing, antimicrobial, among others. The proteins extracted from this latex have multiple immunomodulatory effects, depending on the route of administration utilized. The objective of this study was to characterize the pro- inflammatory response of protein fraction PL latex Calotropis procera in models of peritonitis and subcutaneous air pouch; neutrophil chemotaxis (in vivo and in vitro); the role of resident cells and mediators involved. Swiss mice were used (25-30 g). It was found that PL induced neutrophil migration (MN) in a dose- and time - dependent in models of peritonitis and subcutaneous air pouch. An increase in vascular permeability induced by the administration of PL (1 mg / cav) in the peritoneal cavity in the Evans blue model was demonstrated. The increase in the population of resident macrophages after pre-treatment with thioglycolate intensified the MN induced by PL, with the similar result observed with the mast cell -depleted group by compound 48/80. Mast cells appear to exert an inhibitory modulatory role on neutrophil chemotaxis, whereas macrophages potentiate the MN, possibly through the release of mediators. For investigation of involved mediators, blocking drugs were used before administration of the PL. Pharmacological modulation Dexamethasone (0.5 mg/kg , s.c.), Pentoxifylline (100 mg/kg , s.c.), Thalidomide (50 mg/kg , s.c.), Indomethacin (3 mg/kg , s.c.) and Celecoxib (30 mg/kg , s.c.), but not with Meclizine (40 mg/kg , s.c.) and PCA (10 mg/kg, s.c.) inhibited the MN induced by PL. It was verified by ELISA, that levels of mediators IL-1 and IL-6 were elevated in the peritoneal fluid 4 hours after administration of PL (1 mg/cav, i.p.). The nitrite levels were also higher in the subcutaneous air pouch fluid, demonstrating the involvement of nitric oxide (NO) in the pro-inflammatory effects of LP. PL induced rolling and adhesion of leukocytes to the vascular endothelium of mesenteric mice and neutrophil chemotaxis in vitro. Furthermore, it can directly interact with neutrophils by inducing the synthesis of pro-inflammatory mediators TNF-&#945;, IL- 1&#946;, PGE2 and NO in neutrophilâs culture. In conclusion, PL induces an acute inflammatory response characterized by intense neutrophil migration and increase of vascular permeability. Promotes neutrophil chemotaxis indirectly, via resident macrophages and directly interacting with neutrophils, inducing rolling and adhesion to the endothelium and release of pro-inflammatory mediators.

Orientador: Lucia H. I. Mei / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-23T10:56:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Covolan_VeraLucia_D.pdf: 6105181 bytes, checksum: 4fb45bd4a3942111f7a69fd53add4f73 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Este trabalho visando a obtenção de partículas de poliestireno funcionalizadas com grupos amínicos, foi realizado a partir de reações de copolimerização entre o estireno o monômero funcional aminoestireno. Através destas reações, o objetivo foi o de se introduzir grupos NH2 laterais na cadeia polimérica do PS através da incorporação de monômeros aminados durante a reação de polimerização, obtendo assim, partículas de um polímero intrinsecamente funcionalizado com grupos NH2. Este trabalho foi desenvolvido em diferentes fases de pesquisa, iniciando pela escolha de uma técnica de polimerização e ajuste de um método experimental, tendo sido concluído pela aplicação desta técnica em reações de copolimerização entre o estireno e o aminoestireno. Foram pesquisadas na fase preliminar deste trabalho, as técnicas de polimerização em emulsão e em dispersão, tendo sido verificado que através da polimerização em dispersão se conseguiram os resultados que mais atendiam aos objetivos deste trabalho. A partir desta técnica de polimerização, foi pesquisado um procedimento experimental, a partir do qual fosse possível obter partículas com homogeneidade em diâmetros e as condições experimentais mais adequadas foram obtidas a partir de estudos dos fatores que podem causar alterações nas dimensões das partículas, como: concentrações do monômero, iniciador, dispersante e agitação. Utilizando-se a técnica de polimerização por dispersão e empregando as condições experimentais propostas ao longo da evolução deste trabalho, foram realizadas reações de copolimerização de estireno com aminoestireno. Estas reações inicialmente mostraram ocorrer preferencialmente pela polimerização do estireno, tendo sido observada uma baixa conversão para o aminoestireno. A partir destes resultados foi decidido realizar a síntese do monômero aminoestireno contendo seu grupo NH2 protegido, a partir de reação com ditert-butil-dicarbonato (BOC), para obtenção do monômero Boc-aminoestireno. Foram obtidos os melhores resultados, pelo emprego do Bocaminoestireno em copolimerização com o estireno em dispersão, com conversões de aproximadamente 90%. A partir da realização das reações de copolimerização do Bocaminoestireno e estireno em dispersão, foi possível produzir partículas esféricas deste copolímero e para a obtenção destas partículas com grupos NH2 sobre suas superfícies, foram realizados tratamentos químicos para a desproteção dos grupos NH do copolímero. Foram realizados vários tipos de tratamentos ácidos e verificou-se que o tratamento que respondeu às expectativas desejadas com êxito, foi aquele utilizando-se solução de HCI 2M em isopropanol a 50°C, sob atmosfera inerte e agitação, quando foram obtidos os gruposNH3+ no copolímero.Após uma reação de neutralizaçãodos grupos NH3+,pelo emprego de uma solução de NaOH foram obtidos os grupos NH2 conforme desejado. Estes tratamentos demonstraram ser muito eficientes quando aplicados às partículas obtidas com baixas concentrações de Boc-aminoestireno na composição do copolímero, pois não foram observadas alterações na forma das partículas, porém devem ser aperfeiçoados para utilização em tratamentos de partículas cujas composições forem mais ricas em Boc-aminoestireno, pois para estes casos foram verificados fortes efeitos de inchamento e fragmentação destas partículas / Abstract: The synthesis of the functionalized PS particles containing amino-groups on their surfaces, was the subject of study in the present work. It consisted of two different steps of the research: development of a method for polymerization of styrene, resulting in homogeneous particle size distribution; application of the developed method to prepare PS particles containing amino-groups on their surfaces, by styrene and aminostyrene monomers copolymerization reaction. The techniques which have been tested for these purposes were the emulsion and dispersion polymerization. It was verified that the particles obtained through the dispersion polymerization presented the best results in terms of mean particle diameter and particle size distribution. Polimerization tests were carried out in order to study the influence of reagents concentration on the particle size. The results show that in the emulsion polymerization process, particle size decreases with increasing initiator concentration, while in the dispersion polymerization process, this effect was the oposite. In both cases the increase of the monomer concentration resulted in increased particle size and it was also verified that the emulsifier (in the emulsion process) and the dispersant (in dispersion process) have an important role in controlling the particle dimensions. In both cases, by the reduction of their concentrations, the particles presented an increase in their mean diameter. In the second phase of this work, the dispersion polymerization reaction was applied to obtain functionalized particles with amino-groups on their surfaces, through the styrene copolymerization with aminostyrene. The results demonstrated that the styrene monomer is preferentially inserted in the copolymer, presenting a low conversion rate for the aminostyrene, even at higher aminostyrene/styrene ratios in the feed. To overcome the above situation, it was decided to carry out the protection of the amino groups of the aminostyrene monomer by reaction with t-butyl carbamate (BOC group), obtaining the BOC-aminostyrene monomer. By using the BOC-aminostyrene monomer with styrene in copolymerization reactions, the reactivity ratios were determined for both monomers and it was also verified that the reactivity of the BOC-aminostyrene (rBOCAMS=T0,96) is higher than the reactivity of the styrene(rSTY= 0,47).These results demonstrated that these monomers get the formation of statistic copolymers with a tendence to give alternated sequences. The obtainment of the amino groups on the surfaces of the polymer particles was carried out by chemical treatments, using a solution of HCI in isopropanol in order to remove the BOC groups of the polymer structure, obtaining the NH3+groups. By the neutralization reaction, using NaOH solution, the NH2group were obtained on the particles surfaces. These chemical treatments demonstrated to be very efficient when applied to particles with low BOCAMST concentration in the copolymer composition. However, these treatments have to be improved for the application to particles with high BOCAMST concentrations in the copolymer composition, because it was verified very strong effect on the particles shape, resulting in their destruction / Doutorado / Doutor em Engenharia Química