Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2010-03-07T17:17:10Z No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-03-11T13:37:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-11T13:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) Previous issue date: 2009-02-05 / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença parasitária endêmica, principalmente na região Centro-Oeste. A Leishmania é um parasita que através de seus antígenos secretados e não secretados desencadeiam, respectivamente, uma resposta imune predominantemente celular (inata e adquirida) e em menor proporção humoral. Na resposta inata participam o sistema complemento, polimorfonucleares, macrófagos e células natural killer numa resposta inicial. Desta resposta inicial, há produção de citocinas (IL-12 e INF-γ e TNF-α) que ativam linfócitos T CD4+ e T CD8+ para resposta imune celular adquirida. A IL-12 diferencia os linfócitos T CD4 numa resposta Th1, com produção de INF-γ, ativação de macrófagos e resolução da doença. Enquanto, a IL-4 tem efeito reverso direcionando para uma resposta Th2 com diminuição da ativação de macrófagos, prevenindo o dano tecidual e permitindo a persistência do parasita. Foram descritos casos de pacientes com a forma mucosa da LTA do Hospital Universitário de Brasília, analisando dados epidemiológicos, clínico-laboratoriais e correlacionando com os aspectos histopatológicos e imuno-histoquímico (CD45ro, CD4, CD8, CD20, CD15, CD68 e Bcl-2). Perfil mais freqüente dos pacientes: sexo masculino, com média de idade de 50 anos, da região Centro-Oeste, com queixa de obstrução nasal e lesão de mucosa nasal infiltrada com ulceração e perfuração de septo ao exame otorrinolaringológico. A maioria com exames laboratoriais (IFA, inoculação em hamster, cultura, esfregaço e intradermorreação de Montenegro) compatíveis com a doença, sendo que em 44,44% dos casos foi possível a identificação da Leishmania por algum método auxiliar. Na histopatologia, de maneira geral, encontrou-se um infiltrado inflamatório linfohistioplasmocitário, às vezes acompanhado de uma reação granulomatosa com ou sem necrose. As classes histopatológicas encontradas foram: REC (reação exsudativa celular), REN (reação exsudativa necrótica), RENG (reação exsudativa necrótico-granulomatosa) e REG (reação exsudativa granulomatosa), sendo a primeira a mais freqüente (66,67%). Essas classes são estatisticamente significantes (p<0,05) diferentes quando comparadas entre si em relação à quantidade de células positivas na imuno-histoquímica, exceto entre as classes REG e REN (p>0,05). Esse estudo atestou a aplicabilidade e a praticidade do programa UnBVision na análise quantitativa das células nas reações imuno-histoquímicas. Na imuno-histoquímica, os linfócitos T predominaram em relação aos linfócitos B, comprovando que a doença tem reação imune mais celular do que humoral, sendo que dentre os linfócitos T, prevaleceu os linfócitos T CD4+ em relação aos linfócitos T CD8+, exceto em único exemplo de caso REG. Houve expressão considerável de Bcl- 2 no infiltrado inflamatório. Grupos com contato prévio com o antimonial pentavalente e com presença de granulomas ou de Leishmania ao método histopatológico não tiveram significância estatística (p>0,05) para explicar a diferença de número de células positivas para todos os marcadores aplicados no estudo. Em estudos complementares, o uso da imuno-histoquímica para identificar as citocinas e marcadores pró e antiapoptóticos podem contribuir para melhores esclarecimentos da imunopatologia da doença. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The American Integumentary Leishmaniasis (AIL) is a parasitic endemic disease, mainly in the Center-West region. Leishmania is a parasite that through its secreted and not secreted antigens trigger, respectively, a predominantly cellular immune response (innate and acquired) and to a lesser extent humoral. In the innate response, complement system, neutrophils, macrophages and natural killer cells work in an initial response. In this initial response, there is production of cytokines (IL-12, INF-γ and TNF-α) that activate T CD4+ and T CD8+ cells for acquired cellular immune response. The IL-12 action differentiates CD4 T cell to Th1 response and production of INF-γ, activation of macrophages and resolution of the disease. While the IL-4 has reverse effect directing to Th2 response with decreased activation of macrophages, this reaction prevents tissue damage and allows the persistence of the parasite. In this study, we have described patients with the mucosal form of AIL, they were treated in the University Hospital of Brasilia, analyzing epidemiological, clinical and laboratory data and correlating with the histopathologic features and the following immunohistochemical antibodies: CD45RO, CD4, CD8, CD20, CD15, CD68 and Bcl-2. Most common profile of patients: male, mean age 50 years, from Center-West region, with complaint of nasal obstruction and injury of nasal mucosa infiltrated with septum ulceration and perforation detected in the otorhinolaryngologic examination. Most of them with laboratory tests (indirect immunofluorescence, inoculation in hamster, smear, culture and Montenegro Skin Test) compatible with the disease, and in 44.44% of the cases it was possible the identification of Leishmania by some auxiliary method. In histopathology, in general, there was an inflammatory infiltrate lynphohistioplasmocitary sometimes accompanied by a granulomatous reaction with or without necrosis. The histopathological grades found were: ECR (exudative cellular reaction), ENR (exudative necrotic reaction), NEGR (necrotic-exudative granulomatous reaction) and EGR (exudative granulomatous reaction), the first one was the most frequent (66.67%) These classes are statistically significant (p <0.05) different when compared to each other with the amount of positive cells in immunohistochemistry, except between ENR and EGR classes (p> 0.05). This study attested the applicability and practicality of the program UnBVision in quantitative analysis of cells in immunohistochemical reactions. In immunohistochemistry, the T cells were predominant on B cells, confirming that the disease as more cellular immune response than humoral, and in T cells, prevailed the CD4+ T on CD8+ T cells, except in only one instance case EGR. There was considerable expression of Bcl-2 in inflammatory infiltrate. In groups with previous contact with pentavalent antimony and presence of granulomas or Leishmania the histopathologic method were not statistically significant (p> 0.05) to explain the difference in the number of positive cells for all markers used in the study. In further studies, the use of immunohistochemistry to identify the cytokines and markers pro and antiapoptosis can contribute to better explanations of the immunopathology of disease.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-19T18:35:46Z No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-19T05:11:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-19T05:11:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) Previous issue date: 2009 / Considerando o papel importante da apoptose e da célula T reguladora (Treg) na modulação da resposta imune, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de proteínas envolvidas na apoptose e a expressão do fator de transcrição Foxp3 (marcador da célula Treg) em amostras de biópsia das diferentes formas clínicas da LTA (leishmaniose tegumentar americana): leishmaniose cutânea localizada (LCL), leishmaniose disseminada (LD), leishmaniose recidiva cútis (LRC), leishmaniose cutâneo-mucosa (LCM) e a leishmaniose cutânea difusa (LCD). Essa expressão foi correlacionada com dados clínico-laboratoriais, alterações histológicas e tipos celulares constituintes do infiltrado inflamatório. Foi avaliada a expressão imunohistoquímica de marcadores para linfócito T (CD45RO, CD4 e CD8), linfócito B (CD20), neutrófilo (CD15), macrófago (CD68), célula de Langerhans (CD1a), dos marcadores da apoptose (Bcl-2, Bak, Bcl-X, FasL, caspase-3 ativa) e do marcador para célula T reguladora (Foxp3) em 95 amostras de biópsias que foram distribuídas de acordo com as formas clínicas apresentadas pelos pacientes: LCL (n=68), LD (n=3), LRC (n=1), LCM (n=16) e LCD (n=7). Células apoptóticas (positivas para caspase-3 ativa) foram identificadas em apenas 49.33% (37/75) das amostras avaliadas. A maior expressão de caspase-3 ativa foi observada na LCL e houve uma correlação positiva entre a expressão de caspase-3 ativa e a expressão de FasL (r=0,49; p=0,0009; n=43) nesta forma clínica. Estes dados sugerem que a via Fas/FasL seja mediadora da apoptose na LTA e importante na evolução clínica das lesões, já que a LCL é a forma clínica caracterizada pela resolução espontânea das lesões. Houve um desequilíbrio na expressão de membros pró e anti-apoptóticos da família Bcl-2 em macrófagos e granulomas epitelioides, que expressaram Bak, mas não Bcl-2 e Bcl-X. Nas formas amastigotas, a expressão de Bcl-X sugere a possível existência de uma proteína, semelhante à Bcl-X encontrada em organismos multicelulares, mas esse achado deve ser investigado por outros métodos. Células Foxp3+ foram observadas apenas em 39.5% (32/81) das amostras avaliadas. A LCD, apesar de apresentar um menor número de células CD4+, mostrou um número significativamente maior de células Foxp3+ quando comparada com a LCL (p<0,03) e estes resultados podem indicar que o maior número de células Treg na LCD possa estar associado com a hiporresponsividade observada nessa forma clínica. Além disso, a correlação positiva (r=0,6185, p=0,0001, n=64) entre a expressão de Foxp3 e caspase-3 ativa observada na LCL e LCM, sugere que a apoptose possa ser um possível mecanismo de ação das células Treg nestas formas clínicas. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Considering the importance of apoptosis and regulatory T cell (Treg) in modulation of the immune response, our aim was to evaluate the expression of apoptosis-related proteins and Foxp3 (marker of regulatory T cell) in lesions of the different clinical forms of ATL (american tegumentary leishmaniasis): localized cutaneous leishmaniasis (LCL), disseminated leishmaniasis (DL), leishmaniasis recidiva cutis (LRC), mucocutaneous leishmaniasis (MCL) and diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL). To better characterize this expression, we also performed an analysis of histopathological findings and an identification of cell types found in inflammatory infiltrate. We analyzed, by immunohistochemistry, the expression of markers of cell subtypes (CD45RO, CD4, CD8, CD20, CD68, CD15, CD1a), markers of apoptosis (Bcl-2, Bak, Bcl-X, active caspase-3 and FasL) and presence of Foxp3+ cells in 95 biopsy samples that were divided according to the different clinical presentations of ATL: LCL (n=68), MCL (n=16), DCL (n=7), DL (n=3), LRC (n=1). Apoptotic cells (active caspase-3+) were observed in 49.33% (37/75) of the samples and the number of positive cells was low in all clinical forms. Apoptotic (active caspase 3+) cells were more frequent in LCL and a significant positive correlation between the expression of active caspase-3 and FasL was observed in this clinical form. As LCL is the clinical presentation characterized by self-healing evolution, our data suggest the Fas/FasL pathway may be important in clinical evolution of the lesions in ATL. An unbalance in expression of pro-apoptotic and anti-apoptotic members of the Bcl-2 family was observed in vacuolated macrophages and granuloma that expressed Bak but not Bcl-X and Bcl-2. The expression of Bcl-X in amastigote forms suggests a possible existence of counterparts or homologues of the Bcl-X observed in multicellular organisms, but this finding must be investigated by other methods. Foxp3+ cells were observed in 39.5% (32/81) of the samples and the number of positive cells was low in all the clinical forms. DCL (diffuse cutaneous leishmaniasis), even presenting a significantly lower number of CD4+ T cells, showed a higher expression of Foxp3 when compared with LCL and this data suggests that increased number of Treg cells may be associated to the hyporesponsiveness observed in DCL. In LCL and MCL, the number of Foxp3+ cells correlated positively with the number of apoptotic cells (active caspase 3+ cells) indicating that the apoptosis may be a possible mechanism of action of Foxp3+ regulatory T cell in these clinical forms.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-04-09T12:43:24Z No. of bitstreams: 1 2009_RenataMachadoMarchese.pdf: 3642300 bytes, checksum: 50da4ef3e8efe641805cb1f1d68df8df (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-06-23T21:27:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_RenataMachadoMarchese.pdf: 3642300 bytes, checksum: 50da4ef3e8efe641805cb1f1d68df8df (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-23T21:27:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_RenataMachadoMarchese.pdf: 3642300 bytes, checksum: 50da4ef3e8efe641805cb1f1d68df8df (MD5) Previous issue date: 2009 / As leishmanioses correspondem a um complexo de doenças tropicais causadas por protozoários pertencentes ao gênero Leishmania e encontram-se entre as seis endemias consideradas prioritárias no mundo. Suas manifestações clínicas podem variar de lesões cutâneas benignas a lesões mucocutâneas desfigurantes e destrutivas ou à forma visceral, fatal se não tratada. Sua incidência tem aumentado por diversos fatores, dentre eles a co-infecção com o HIV, que dificulta o êxito da farmacoterapia. O tratamento atualmente disponível inclui os antimoniais pentavalentes como medicamentos de primeira escolha e a pentamidina e a anfotericina B, como segunda escolha, além da miltefosina, já registrada em alguns países. Entretanto, problemas de toxicidade e alto custo associados ao uso destes medicamentos, além de casos de resistência, limitam sua utilização. Existe, portanto, uma necessidade urgente de se buscar novos compostos que possibilitem opções terapêuticas para o tratamento das leishmanioses. Extratos ou compostos de origem vegetal podem constituir-se em um valioso início pela busca de novos agentes terapêuticos. Uma triagem in vitro previamente realizada em nosso laboratório sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis, identificou a atividade do extrato hexânico das folhas de Renealmia alpinia, com IC50 de 40,58 μg/mL. O extrato hexânico de folhas e pseudocaules de Renealmia alpinia (Rottb.) Maas (Zingiberaceae) foi então testado e apresentou atividade sobre formas promastigotas de Leishmania (Leishmania) chagasi, com IC50 de 22,81 μg/mL. O fracionamento químico biomonitorado do extrato ativo sobre Leishmania (Leishmania) chagasi em coluna cromatográfica resultou na obtenção de 24 grupos, reunidos segundo atividade anti- Leishmania e perfil cromatográfico em CCD. O grupo D3, com um IC50 de 19,41 μg/mL, foi obtido em maior quantidade a partir de nova coluna e então fracionado. Seu fracionamento resultou na obtenção de 26 sub-grupos, reunidos segundo perfil cromatográfico. Destes, o sub-grupo D3-9 permitiu o isolamento do 2,4-di-hidroxi-6-(fenileteno)-benzoato de metila e do 2,4-di-hidroxi-6-(feniletano)-benzoato de metila, elucidados por meio de técnicas espectrométricas de ressonância magnética nuclear (RMN) de uma dimensão (1D) (1H e 13C) e bidimensional (2D) (COSY, HSQC e HMBC) e de infra-vermelho (IV). Até onde conhecemos, o 2,4-di-hidroxi-6-(fenileteno)-benzoato de metila é inédito na espécie Renealmia alpinia, na família Zingiberaceae e como composto natural tendo sido obtido previamente apenas por síntese. Seus dados de RMN de 13C, COSY, HSQC e HMBC são inéditos. Já o composto 2,4-di-hidroxi-6-(feniletano)-benzoato de metila é inédito na espécie Renealmia alpinia, entretanto, foi previamente isolado dos rizomas de Boesenbergia rotunda (Zingiberaceae) e também obtido por síntese. Seus dados de RMN de 13C, COSY, HSQC e HMBC são inéditos. Quanto à atividade anti-Leishmania, estes dois compostos apresentaram IC50 >100 μg/mL não sendo, portanto, os compostos responsáveis pelo potencial anti- Leishmania observado para o sub-grupo D3-9 e para a espécie. Entretanto, são substâncias inéditas na espécie Renealmia alpinia, cuja composição química é pouco conhecida. Quanto à atividade anti-Leishmania da planta, esta apresenta, em sua composição, outros grupos e subgrupos provenientes do fracionamento cromatográfico do extrato que, em triagem, apresentaram-se ativos sobre Leishmania (Leishmania) chagasi, como AcOEt2, com IC50 de 7,12 μg/mL, D4, com IC50 de 3,08 μg/mL e D3-11 e D3-16, com IC50 de 12,23 e 15,25 μg/mL, respectivamente. Tais grupos e/ou sub-grupos permanecem como promissores para novos estudos na busca de opções terapêuticas para o controle das leishmanioses. Estão sendo obtidos em maiores quantidades para prosseguimento dos estudos. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis is a complex of tropical disease caused by protozoa belonging to the genus Leishmania and it is among the six most important endemic diseases in the world. Its clinical manifestations can vary from benign cutaneous injuries to the disfiguring and destructive mucosal lesions or to the visceral form, fatal if not treated. Its incidence has increased for several factors, including co-infection with the HIV which hampers the success of the pharmacotherapy. The currently available treatment includes pentavalent antimony as first choice and the pentamidine and the amphotericin B, as second-line drugs, in addition to the miltefosine, already registered in some countries. However, problems of toxicities and high cost associated to the use of these medicines, beyond resistance cases, limit their use. So,there is an urgent need to find new compounds that provide therapeutics options for the treatment of leishmaniasis. Extracts or compounds from plants can consist in a valuable beginning on search for new therapeutics agents. An in vitro screening previously carried out in our laboratory against promastigotes forms of Leishmania amazonensis identified activity for the hexane extract of Renealmia alpinia leaves, with an IC50 of 40,58 μg/mL. The hexane crude extract of Renealmia alpinia (Rottb.) Maas (Zingiberaceae) leaves and pseudostems was then tested and showed activity against promastigotes forms of Leishmania (Leishmania) chagasi, with IC50 of 22,81 μg/mL. The chemical bioguided fractionation of the crude extract active against Leishmania (Leishmania) chagasi in chromatographic column produced 24 groups, congregated according to anti-Leishmania activity and chromatographic profile in TLC. The D3 group, with IC50 of 19,41 μg/mL, was gotten in greater quantify from a new column and then fractionated. Its fractionation resulted in 26 sub-groups, congregated according to chromatographic profile. Of these, the D3-9 sub-group allowed the isolation of 2,4-dihydroxy- 6-(phenylethene)-methyl benzoate and of 2,4-dihydroxy-6-(phenylethane)-methyl benzoate, elucidated by spectrometric techniques of nuclear magnetic resonance (NMR) (1D) (1H, 13C) e (2D) (COSY, HSQC, HMBC) and infra-red spectroscopy (IR). To the best of our knowledge, 2,4-dihydroxy-6- (phenylethene)-methyl benzoate is unpublished in Renealmia alpinia, in Zingiberaceae family and as natural compound and it was previously gotten by synthesis. Your NMR 13C, COSY, HSQC e HMBC data are unpublished. The compound 2,4- dihydroxy-6-(phenylethane)-methyl benzoate is unpublished in Renealmia alpinia specie, however, it was previously isolated from Boesenbergia rotunda rhizomes (Zingiberaceae) and it was also obtained by synthesis. Your NMR 13C, COSY, HSQC e HMBC data are unpublished. Against Leishmania (Leishmania) chagasi, both compounds showed IC50 > 100 μg/mL and, therefore, are not the antileishmanial compounds from the D3-9 subgroup and Renealmia alpinia specie. However, are unpublished in Renealmia alpinia specie, which chemical composition is almost unknown. Other groups and sub-groups proceeding from the crude extract and that had showed activity against Leishmania (Leishmania) chagasi during the study, as AcOEt2, with IC50 of 7,12 μg/mL, D4, with IC50 of 3,08 μg/mL and D3- 11 and D3-16, with IC50 of 12,23 and 15,25 μg/mL remain as promising for new studies in the search for therapeutics options for leishmaniasis control. They are being obtained in larger quantities for further studies.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2010. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2011-01-17T18:25:28Z No. of bitstreams: 1 2010_CesarOmarCarranzaTamayo.pdf: 2331387 bytes, checksum: a74afd3014bb08366f7a5e52e402ad70 (MD5) / Rejected by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br), reason: on 2011-01-17T18:31:34Z (GMT) / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2011-01-17T19:10:59Z No. of bitstreams: 1 2010_CesarOmarCarranzaTamayo.pdf: 2331387 bytes, checksum: a74afd3014bb08366f7a5e52e402ad70 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-01-30T16:49:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_CesarOmarCarranzaTamayo.pdf: 2331387 bytes, checksum: a74afd3014bb08366f7a5e52e402ad70 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-01-30T16:49:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_CesarOmarCarranzaTamayo.pdf: 2331387 bytes, checksum: a74afd3014bb08366f7a5e52e402ad70 (MD5) / Foi desenvolvido um estudo transversal baseado na prova de intradermorreação de Montenegro (IDRM) para avaliar a infecção por Leishmania nas comunidades da Fercal, área rural da região de Sobradinho, Brasília - Distrito Federal entre 2007 e 2009. A pesquisa envolveu duas avaliações com intervalo de um ano entre uma e outra. Os indivíduos foram selecionados de forma aleatória, avaliando-se uma criança ou adolescente entre 2 e 14 anos em cada casa selecionada. No período inicial foram incluídas 700 pessoas, divididos de forma estratificada segundo o número de residências em cada comunidade. Além da IDRM foram realizados testes moleculares (PCR) e um teste imunocromatográfico (Kalazar detect™) para avaliar o estado de infecção por Leishmania. Foram colhidos dados pessoais e domiciliares visando a avaliação de fatores associados com a infecção por Leishmania. Na primeira avaliação obtivemos prevalência de 33,28% (IC95% 29,87 – 36,84) segundo a IDRM. A PCR foi positiva em quatro indivíduos nesta avaliação. A positividade da prova imunocromatográfica foi de zero em ambas as avaliações. A segunda avaliação - realizada na coorte de 396 suscetíveis segundo o primeiro inquérito - mostrou incidência da infecção de 23,2% (IC95% 19,27 – 27,58) segundo a IDRM, enquanto a PCR foi positiva em nove casos. A regressão logística multivariada tipo one step mostrou que as características associadas com a positividade à IDRM foram ter mais de sete anos de idade (OR=3,04; IC95% 1,86 - 4,99; p<0,01) e a presença de gambás no peridomicílio (OR=1,46; IC95% 1,02 - 2,10; p=0,04). Esta última característica mostrou-se também associada com a incidência de infecção por Leishmania (OR=3,22; IC95% 1,35 - 7,68; p=0,01). Uma abordagem diferente dos testes de regressão logística (stepwise forward) mostrou que além das características encontradas previamente, na primeira avaliação houve associações adicionais, como gênero masculino (OR=1,95; IC95% 1,19 - 3,17; p=0,01) e criação de aves domésticas diferentes de galinhas (OR=2,23; IC95% 1,19 - 4,18; p=0,01). Na segunda avaliação observaram-se associação da positividade à IDRM com convivência com cães suspeitos de leishmaniose visceral canina (OR=2,28; IC95% 1,02 - 5,10; p=0,04) e criação de aves domésticas (OR=2,94; IC95% 1,08 - 8,02; p=0,04). A análise espacial mostrou que a medida que as comunidades se afastam da área urbana de Sobradinho a intensidade de infecção aumenta. Concluiu-se que em áreas periurbanas de introdução recente de espécies viscerotrópicas de Leishmania existem algumas características associadas ao estado de infecção diferentes às descritas em áreas de colonização antiga por este parasito. / A survey was developed based on the leishmanin test (IDRM) to evaluate the infection for Leishmania in the communities of Fercal, rural area of Sobradinho, Brasília - Federal District between 2007 and 2009. The research involved two evaluations with interval of one year between each one. The individuals were selected in a random way, being evaluated a child or adolescent between 2 and 14 years in each selected house. In the initial period 700 people were included, stratified according to the number of houses in each community. Besides leishmanin tests they were accomplished a immunocromatographic test (Kalazar detect™) and a molecular test (PCR) to evaluate the infection state for Leishmania. There were registered personal and home data seeking the evaluation of factors associated with the infection for Leishmania. In the first evaluation we obtained prevalence of 33,28% (95%CI 29,87 - 36,84) according to IDRM. PCR was positive in four individuals in this evaluation. The positivity of the immunocromatographic test was zero in both evaluations. The second evaluation - just accomplished with the 396 susceptible people according to the first survey - showed incidence of 23,2% (95%CI 19,27 - 27,58) according to IDRM, while PCR was positive in nine cases. The multivariate logistic regression type one step showed that characteristics associated with the positivity to IDRM were to be more than seven years old (OR=3,04; 95%CI 1,86 - 4,99; p < 0,01) and the presence of skunks in the neighborhood (OR=1,46; 95%CI 1,02 - 2,10; p=0,04). This last characteristic was also associated with the incidence of infection by Leishmania (OR=3,22; 95%CI 1,35 - 7,68; p=0,01). A different approach of the multivariate logistic regression tests (stepwise forward) showed that besides the characteristics previously cited, in the first evaluation there were additional associations, as masculine gender (OR=1,95; 95%CI 1,19 - 3,17; p=0,01) and creation of domestic birds different to chickens (OR=2,23; 95%CI 1,19 - 4,18; p=0,01). In the second evaluation they were observed association of the positivity to IDRM with presence of dogs suspicious of visceral canine leishmaniasis (OR=2,28; 95%CI 1,02 - 5,10; p=0,04) and creation of domestic birds (OR=2,94; 95%CI 1,08 - 8,02; p=0,04). The spatial analysis showed that in the measure that the communities stand back of the urban area of Sobradinho the infection intensity increases. It is concluded that in periurban areas of recent introduction of viscerotropic species of Leishmania there are some different characteristics associated to the infection state to described in areas of old colonization for this parasite.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Universidade de Rio Verde, Programa Multiinstitucional de Pós-graduação em Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2011-06-03T17:17:56Z No. of bitstreams: 1 2007_EdneaFreitasPortilhoSilva.pdf: 1658576 bytes, checksum: b48d6cb719ae0304ff8f5d9a93907658 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-06-05T16:41:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_EdneaFreitasPortilhoSilva.pdf: 1658576 bytes, checksum: b48d6cb719ae0304ff8f5d9a93907658 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-05T16:41:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_EdneaFreitasPortilhoSilva.pdf: 1658576 bytes, checksum: b48d6cb719ae0304ff8f5d9a93907658 (MD5) / Com o objetivo de estudar a prevalência da Leishmaniose Visceral Canina no município de Rio Verde - GO, estudou-se a microregião sudeste da cidade, onde foi realizado um inquérito através de prova sorológica por ELISA, devido ao aumento de notificação de Leishmaniose Tegumentar Humana. Realizou-se um inquérito sorológico para investigar leishmaniose tegumentar em cães de cinco bairros com notificação de casos em humanos. Foram investigados 263 cães, dos quais 70 (26,62%) apresentaram títulos significativos de anticorpos através da técnica de Imunofluorescência por ELISA/S7®, não verificado diferença significativa de incidência por área estudada, sintomatologia, idade ou procedência dos cães, e observada uma diferença significativa quanto ao sexo do animal, sendo 34,78% dos soro positivo machos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / With the objective to study the prevalence of the Canine Visceral Leishmaniosis in the city of Rio Verde - GO, it was studied Southeastern microregion of the city, where an inquiry through sorologic test for ELISA was carried through, whom had to the increase of notification of Leishmaniosis Tegument Human being. A sorologic inquiry was become fulfilled to investigate tegumentar leishmaniosis in dogs of five quarters with notification of cases in human beings. 263 dogs had been investigated, of which 70 (26.62%) had presented significant headings of antibodies through the technique of Imunofluorescense for ELISA/S7®, not verified significant difference of incidence for studied region, sintomatologic, age or origin of the dogs, and observed a significant difference how much to the sex of animal, being 34.78% of the positive serum male.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Matheus Denezine (matheusdenezine@yahoo.com.br) on 2011-06-22T18:24:59Z No. of bitstreams: 1 2011_NayaraBreaMarodin.pdf: 3730305 bytes, checksum: 2d0879ade8c4789e2326a690418afa28 (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-27T13:38:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_NayaraBreaMarodin.pdf: 3730305 bytes, checksum: 2d0879ade8c4789e2326a690418afa28 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-27T13:38:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_NayaraBreaMarodin.pdf: 3730305 bytes, checksum: 2d0879ade8c4789e2326a690418afa28 (MD5) / O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência da infecção por Leishmania spp. em felinos domésticos em uma área endêmica para leishmaniose visceral humana e canina do Distrito Federal (Sobradinho II), caracterizar as principais alterações hematológicas, bioquímicas e clínicas da infecção por Leishmania spp. e identificar as espécies que acometem os animais infectados. Foram utilizados amostras de sangue de 89 gatos domiciliados, sem raça definida (SRD), machos e fêmeas de diferentes idades. Os animais foram submetidos a exame clínico e as amostras foram utilizadas para hemogramas, testes bioquímicos e PCR para identificação dos animais positivos. Foram coletadas 10 amostras de linfonodos, medula óssea e pele de animais positivos, utilizados para o diagnóstico da infecção por Leishmania spp. por meio de técnicas moleculares(PCR e RFLP-PCR), parasitológico, imunohistoquímica, imunocitoquímica e cultivo celular. Não foram observados diferenças (p>0,05) entre os grupos positivos e negativos nos hemogramas e testes bioquímicos. Na PCR, foram identificadas 53 amostras de sangue positivas para Leishmania spp. (59,55%). Na PCR de outros tecidos, 9/10 amostras de linfonodos e medula óssea foram positivas e 8/10 dos fragmentos de pele foram positivas. Pelo menos um outro tecido também foi positivo além do sangue e, em 7/10 dos animais todos os tecidos testados foram positivos. Todas as amostras foram negativas para as outras técnicas testadas. Por meio da RFLP-PCR foi identificado infecção por L. infantum em amostras de sangue e nos outros tecidos. Os resultados encontrados nos permite concluir que a infecção por Leishmania spp. ocorre com alta freqüência nos felinos domésticos e pode estar presente em áreas onde não há Leishmaniose Visceral Humana; a espécie L. infantum é que a acomete os felinos domésticos e pode estar presente em diferentes tecidos; que não há alterações hematológicas, bioquímicas e clinicas significativas quando comparados com os animais negativos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This report had the objective of verifying the incidence of Leishmania spp. in domestic cats in an endemic area for human and canine visceral Leishmaniasis in the Federal District (Sobradinho II), to characterize the main hematological, biochemical and clinical alterations caused by Leishmania spp. and to identify the species that attack the infected animals. 89 domestic cats’ blood samples were used, mixed breed male and female of various ages. The animals went through clinical examination and the samples were used in hemograms, biochemical tests and PCR for identification of the animals who were positive. 10 samples of linfonodes, marrow bone and skin of positive animals were collected and used for diagnosis of the infection for Leishmania spp. using molecular technics (PCR and RFLP-PCR), parasitological, immunohistochemistry, immunocytochemistry and cell culture. No differences were observed (p>0, 05) between positive and negative groups in the hemograms and biochemical tests. In the PCR, 53 positive blood samples were identified for Leishmania spp. (59,55%). In the PCR for other tissues ,9/10 samples of linfonodes and bone marrow were positive and 8/10 of the skin samples were positive. At least one other tissue was positive besides the blood and in 7/10 of the animals all the tissues tested were positive. All the samples were negative for the other techniques used. Using RFLP-PCR, infection by L. infantum was identified in blood samples and in the other tissues. The results allows us to conclude that infection by Leishmania spp. has a high incidence in domestic cats and can be present in areas were there is no human visceral leishmaniasis. A type of L. infantum is what affects domestic cats and can be present in different tissues and that there are no significant hematological, biochemical and clinical alterations when compared with the negative animals.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by Gabriela Ribeiro (gaby_ribeiro87@hotmail.com) on 2011-09-01T18:37:56Z No. of bitstreams: 1 2011_CharleneBarretoPonte.pdf: 1193218 bytes, checksum: 059d1531f12cab0b7b2679f1d24a9e9a (MD5) / Approved for entry into archive by Repositorio Gerência(repositorio@bce.unb.br) on 2011-10-25T18:45:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_CharleneBarretoPonte.pdf: 1193218 bytes, checksum: 059d1531f12cab0b7b2679f1d24a9e9a (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-25T18:45:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_CharleneBarretoPonte.pdf: 1193218 bytes, checksum: 059d1531f12cab0b7b2679f1d24a9e9a (MD5) / As leishmanioses têm gerado impacto na saúde pública e fazem parte do grupo de doenças negligenciadas segundo a Organização Mundial de Saúde (OMS). O tratamento constitui um desafio de alta complexidade por se tratar de uma doença de difícil controle e cujos medicamentos disponíveis são injetáveis, têm alta toxicidade e são passíveis de falha terapêutica. A miltefosina (hexadecilfosfocolina) oral tem se mostrado eficaz e segura no tratamento da leishmaniose cutânea, mucocutânea e visceral, no entanto, pouco se sabe sobre seu mecanismo de ação e seus efeitos sobre os macrófagos, células parasitadas pelas leishmânias. Este estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, o efeito da miltefosina sobre a viabilidade dos macrófagos, além de testar a influência da droga sobre a capacidade fagocitária e sobre a produção de espécies oxidativas por macrófagos peritoneais dos camundongos da linhagem C57BL/6. Para os testes de viabilidade celular, utilizou-se o método do MTT (3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H brometo de tetrazolium) e partiu-se das concentrações de 1200 e 1600μg/mL da miltefosina e as demais foram obtidas por diluição seriada. Para os demais testes foram empregadas as doses: 10, 50 e 100μg/mL de miltefosina. A capacidade fagocitária foi avaliada utilizando-se 4 x 106 Saccharomyces cerevisiae, sensibilizadas ou não com o soro dos camundongos. A produção de óxido nítrico foi determinada pela reação de Griess e o peróxido de hidrogênio determinado pelo teste de oxidação do vermelho de fenol na presença de peroxidase. Os resultados indicaram um aumento na atividade mitocondrial, portanto as células permaneceram viáveis na presença de diferentes doses de miltefosina. Isso foi demonstrado pelo progressivo aumento no percentual de redução do MTT (p<0,05, teste t pareado). A droga aumentou em 53% a fagocitose na presença de S. cerevisiae não sensibilizadas nas preparações incubadas com 50μg/mL de miltefosina (p<0,001, teste de Wilcoxon), devido ao aumento no percentual de macrófagos envolvidos na fagocitose, embora tenha diminuído a média de leveduras fagocitadas. Na presença de S. cerevisiae sensibilizadas houve aumento do índice fagocitário com 10μg/mL, alterando a mediana de 202,0 para 382,5; e com 50μg/mL da droga, alterando a mediana de 202,0 para 602,0 (p<0,001, teste de Wilcoxon), pois aumentou o percentual de macrófagos envolvidos na fagocitose e a média de S. cerevisiae ingeridas pelos macrófagos. Todas as concentrações de miltefosina testadas diminuiram, pelo menos 93%, a produção de óxido nítrico pelos macrófagos em relação à produção basal (33,1 ± 15,0) ou estimulada com lipopolissacarídeo (50,2 ± 17,4) (p<0,001, teste t pareado); porém, não afetou a produção de peróxido de hidrogênio (p>0,05, teste t pareado). Portanto, este estudo mostrou que a miltefosina foi capaz de influenciar importantes funções do sistema imune inato dos macrófagos, principalmente potencializando a fagocitose. Além disso, a inibição da produção de óxido nítrico e a não alteração da produção de peróxido de hidrogênio sugerem que a ação microbicida da droga ocorre independente da produção destes radicais, por ação direta da miltefosina sobre o parasito. Isso pode trazer importantes implicações para o emprego deste medicamento na prática clínica, podendo trazer bons resultados aos indivíduos imunodeprimidos; além de também favorecer a redução dos efeitos deletérios gerados pelo excesso de radicais e, consequentemente, diminuir a imunopatogênese da leishmaniose. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The leishmaniasis have generated impact on public health and are part of the group of neglected diseases according to World Health Organization (WHO). Treatment is a highly complexity challenge because it is a difficult disease to control and whose medications available are injectable, have high toxicity and are susceptible of therapeutic failure. The oral miltefosine (hexadecylphosphocholine) is an effective and safe treatment of cutaneous leishmaniasis, mucocutaneous and visceral; however, little is known about its mechanism of action and its effects on macrophages, cells infected by leishmania. This study aimed at evaluating, in vitro, the effect of miltefosine on the viability of macrophages, and at testing the influence of drug on the phagocytic capacity and the production of oxidative species by peritoneal macrophages of mice C57BL/6. For the tests of cell viability, the MTT (3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H brometo de tetrazolium) metod was used and started from the concentrations of 1200 and 1600μg/mL of miltefosine and the others were obtained by serial dilution. For all other tests doses of 10, 50 and 100μg/mL de miltefosine were used. The phagocytic capacity was assessed using 4 x 106 Saccharomyces cerevisiae, sensitized or not with the serum of mice. Nitric oxide production was determined by Griess reaction and the hydrogen peroxide production was determined by the phenol red oxidation in the presence of peroxidase. The results indicated a progressive increase in mitochondrial activity and therefore the cells remained viable in the presence of different doses of miltefosine. This was demonstrated by the progressive increase in the percentage of MTT reduction (p<0,05, paired t test). The drug increased phagocytosis by 53% using nonsensitized S. cerevisiae in preparations incubated with 50μg/mL of miltefosine (p<0,001, Wilcoxon test) due to the increased percentage of macrophages involved in phagocytosis, although the average number of phagocytosed yeasts has decreased. In the presence of sensitized S. cerevisiae, the phagocytic index increase with 10μg/mL by changing the median of 202,0 to 382,5; and with 50μg/mL, changing the median of 202,0 to 602,0 (p<0,001, Wilcoxon test), because the percentage of macrophages involved in phagocytosis and the average number S. cerevisiae ingested by macrophages was increased. All concentrations of miltefosine tested decreased at least 93%, nitric oxide production by macrophages in relation to the basal production (33,1 ± 15,0) or stimulated with lipopolysaccharide (50,2 ± 17,4) (p<0,001, paired t test); however, it did not affect the hydrogen peroxide production (p>0,05, paired t test). Therefore, this study showed that miltefosine was able to influence important functions of the innate immune system of macrophages, especially enhancing phagocytosis. Furthermore, the inhibition of nitric oxide production and the no change in the hydrogen peroxide production suggests that the antimicrobial action of the drug happens independently of production of these radicals, by direct action of miltefosine against the parasite. This can bring important implications for the use of this drug in clinical practice, and it can generate good results to the immunosuppressed individuals, in addition to also promote the reduction of harmful effects caused by excess of radicals and, consequently, reduce the immunopathogenesis of the leishmaniasis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-08-12T14:35:29Z No. of bitstreams: 1 2013_AndreaLisboaCarneiro.pdf: 949245 bytes, checksum: d415d4f703a9de905242787d95c91b42 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-08-15T11:34:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AndreaLisboaCarneiro.pdf: 949245 bytes, checksum: d415d4f703a9de905242787d95c91b42 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-15T11:34:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AndreaLisboaCarneiro.pdf: 949245 bytes, checksum: d415d4f703a9de905242787d95c91b42 (MD5) / Considerando os desafios clínicos e técnicos no tratamento da Leishmaniose Cutânea, o objetivo do presente estudo, foi avaliar in vivo, a eficácia da terapia fotodinâmica usando como fotossensibilizador a ftalocianina cloro alumínio no tratamento tópico da leishmaniose cutânea experimental. Vinte e quatro camundongos C57BL/6 foram infectados com promastigotas metacíclicas de Leishmania (L.) amazonensis na concentração de 3x106 e divididos em 4 grupos: um tratado com terapia fotodinâmica (TFD) usando o fotossensibilizador ftalocianina cloro alumínio sob apresentação de gel e na concentração e 20μg/mg (aplicação por 15 minutos de laser no comprimento de onda 640-710nm, 150 J/cm2, em 10 doses em sessões diariamente), um grupo infectado e tratado com antimoniato pentavalente (Sbv), um grupo controle infectado sem tratamento e um grupo sem infecção e sem tratamento. Avaliação: realizada pela medição da pata e exames parasitológicos (cultura em meio NNN-Novy McNeal-Nicolle e esfregaços) e cultura de Leishmanias em diluição limitante seguido de análise pelo método colorimétrico MTT (método colorimétrico Methil Thiazolyl Blue) utilizando-se o programa estatístico ELIDA®. Usou-se o programa SPSS versão 17.0, teste de normalidade de Shapiro-Wilk, ANOVA seguida pelo teste de Tukey para analise estatística. Resultados: no grupo da terapia fotodinâmicas a média dos diâmetros das patas dos camundongos caíram de 0,25mm para 0,20mm. No grupo Sbv subiram de 0,25 mm para 0,30 mm, no controle infectado não tratado cresceram de 0,25mm para 0,30mm (p<0,05). Na avaliação da viabilidade das Leishmanias, pelo MTT, foi possível observar que no grupo que utilizou a droga Sbv, a redução desta viabilidade foi certa de 50% em relação ao grupo de INT, e que em relação ao tratamento, com ftalocianina cloro alumínio associada com a terapia fotodinâmica com laser, a média da viabilidade foi de cerca de 80% em relação ao grupo INT (p<0,05). Concluí-se que a terapia se mostrou eficaz com esta concentração, no tratamento de leishmaniose cutânea experimental. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Considering technical and clinical challenges in the treatment of cutaneous leishmaniasis, the aim of this study was to evaluate the in vivo efficacy of photodynamic therapy using aluminum phthalocyanine chloride as a photosensitizer in topical treatment of experimental cutaneous leishmaniasis. Twenty-four C57BL/6 mice were infected with Leishmania (L.) amazonensis metacyclic promastigotes at a concentration of 3x106 and were divided into four groups: one treated with photodynamic therapy (PDT) using aluminum phthalocyanine chloride gel at a concentration of 20μg/mg (10 daily sessions of laser application for 15 minutes at a wavelength of 640-710nm, 150 J/cm2), a group infected and treated with pentavalent antimony (Sbv), an infected control group without treatment and a group not infected and untreated. Evaluation: The primary outcome evaluation was performed by paw measures, parasitological exams (culture in NNN medium Novy-McNeal-Nicolle and smears) and culture of Leishmania in limiting dilution analysis followed by MTT-colorimetric-method (colorimetric method Methil Thiazolyl Blue) using the Statistical program (ELIDA ®). For statystical analysis, we used the SPSS version 17.0 package and the tools: Shapiro-Wilk normality test and ANOVA followed by Tukey test. Results: In the photodynamic therapy group, the mean diameter of the paws fell from 0.25 mm to 0.20 mm. In the Sbv group it increased from 0.25 mm to 0.30 mm. In infected and untreated controls it increased from 0.25 mm to 0.30 mm (p <0.05). In assessing the viability of Leishmania by the MTT test, it was observed that in the group that received Sbv, the reduction of viability was of 50% when compared to the INT group, and when compared to treatment with aluminum chloride phthalocyanine PDT associated with the laser, the average viability was of 80% when compared to the INT group (p <0.05). We may conclude that the therapy was effective at this concentration in the treatment of experimental cutaneous leishmaniasis.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-08-13T13:42:55Z No. of bitstreams: 1 2013_FelixJavierLeonMolinet.pdf: 1600942 bytes, checksum: a50699577ef3ad61a53a9718e8a70628 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-08-15T11:50:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_FelixJavierLeonMolinet.pdf: 1600942 bytes, checksum: a50699577ef3ad61a53a9718e8a70628 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-15T11:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_FelixJavierLeonMolinet.pdf: 1600942 bytes, checksum: a50699577ef3ad61a53a9718e8a70628 (MD5) / Antecedentes: A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é um problema relevante de saúde pública no Brasil. Na última década tem sido constatada a falha do tratamento com antimoniato de meglumina e até o momento não existem informações consistentes na literatura sobre os fatores associados ao prognóstico da doença. Metodologia: Foi realizado um estudo de prognóstico, baseado numa corte clínica de 178 pacientes com diagnóstico de Leishmaniose Cutânea Localizada (LCL) residentes em área endêmica para LTA por Leishmania braziliensis com o objetivo de desenvolver uma regra de predição clínica para predizer o prognóstico de pacientes tratados com antimoniato de meglumina. Os pacientes foram acompanhados durante o ano de 1996 e no período de 2001 a 2004. Foi identificada a associação das características clínicas com o desfecho de falha terapêutica, três meses após a conclusão do tratamento, por meio da análise bivariada, e a magnitude das associações foram ajustadas utilizando-se o modelo de regressão logística. Os dados da força da associação foram utilizados para explorar a possibilidade de desenvolver um escore de prognóstico utilizando curvas ROC. Resultados: Dos 178 pacientes, 69 (38,8%) apresentaram falha terapêutica e 109 61,2%) curaram. Cinco características estiveram associadas independentemente ao desfecho de falha terapêutica: “localização das lesões cutâneas acima da cintura versus outras localizações” OR = 4,6 (IC95% 2,2 a 9,8); “área ulcerada da lesão >2,5 cm²” OR = 2,6 (IC95% 1,3 a 5,2); “diâmetro da reação de Montenegro < 15 mm” OR = 2,8 (IC95% 1,4 a 5,5); “aparecimento do acometimento linfático antes da lesão cutânea” OR = 1,9 (IC95% 0,9 a 3,9) e “presença de qualquer sintoma nas lesões na pele” OR = 5,8 (IC95% 1,6 a 20,5). Não foi possível construir um escore que apresentasse acurácia razoável para discriminar pacientes com mau prognóstico. Conclusões: A predição acurada do prognóstico de pacientes com LCL tratados com antimonial pentavalente não foi viável a partir da identificação de variáveis clínicas de fácil mensuração ou da combinação dessas variáveis com o resultado da intradermorreação de Montenegro. Na amostra estudada, apesar de haver cinco características independentemente associadas ao desfecho do estudo, não foi possível a elaboração de uma regra de predição clínica para falha terapêutica na amostra de pacientes com LCL tratados com antimoniato de meglumina. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Background: American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is a relevant public health problem in Brazil. Therapeutic failure with meglumine antimoniate has been observed during the past decade and there is no consistent information in the literature on factors associated with the prognosis of the disease. Methods: We conducted a prognosis study base on a clinical cohort of 178 patients with diagnosis of localized cutaneous leishmaniasis (LCL), all residents in a Leishmania braziliensis ATL endemic area. The study purpose was the development of a clinical prediction rule to predict the prognosis of patients treated with meglumine antimoniate. Patients were enrolled and follow-up during 1996 and from 2001 to 2004. The association of clinical features and the study endpoint of therapeutic failure was evaluated three months after treatment conclusion through bivariate analysis and the magnitude of associations was adjusted using a logistic regression model. Data on the association strength were used to explore the possibility of developing a prognostic score plotting ROC plots. Results: Sixty-nine (38.8%) out of 178 patients had therapeutic failure and 109 (61.2%) patient cured. Five characteristics were independently associated with therapeutic failure: “cutaneous lesions localized above the waist versus any other localization” OR = 4.6 (95%CI 2.2 a 9.8); “ulcerated area > 2.5 cm²” OR = 2.6 (95%CI 1.3 a 5.2); “Montenegro skin test diameter < 15 mm” OR = 2.8 (IC95% 1.4 a 5.5); “lymphatic involvement before cutaneous lesion onset” OR = 1.9 (95%CI 0.9 a 3.9) and “presence of any symptom in the skin lesions” OR = 5.8 not possible the construction of a score with reasonable accuracy to discriminate patients with poor prognosis. Conclusion: Accurate prognosis prediction of patients with LCL treated with pentavalent antimonial is not feasible through the identification of clinical features of the disease which are easily measured or the combination of those variables plus the result of the Montenegro skin test. In spite of having five characteristics independently associated with the study endpoint we failed to develop a clinical prediction rule to predict poor outcome in patients with LCL treated with meglumine antimoniate.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-08-26T14:41:10Z No. of bitstreams: 1 2013_DandaraBragaSantana.pdf: 2501353 bytes, checksum: 6d96772a5d16d10a2900c58bb4539ea7 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-08-29T15:47:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_DandaraBragaSantana.pdf: 2501353 bytes, checksum: 6d96772a5d16d10a2900c58bb4539ea7 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-29T15:47:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_DandaraBragaSantana.pdf: 2501353 bytes, checksum: 6d96772a5d16d10a2900c58bb4539ea7 (MD5) / Tanto as infecções fúngicas quanto as leishmanioses são caracterizadas por tratamentos tóxicos, resistência crescente aos medicamentos disponíveis e manejo clínico com fármacos similares, como a anfotericina B. Diante desse cenário, descobrir novas alternativas terapêuticas para esses modelos biológicos torna-se uma ferramenta interessante para a comunidade acadêmica e necessária para a prática clínica. Os metabólitos secundários de plantas são uma fonte importante de moléculas promissoras para diversas doenças. Neste trabalho foi realizado uma triagem de extratos pertencentes a três espécies de plantas do Cerrado em Leishmania (Leishmania) amazonensis, dermatófitos e leveduras: Enterolobium ellipticum Benth. (Fabaceae), Sclerolobium aureum (Tul.) Baill. (Fabaceae) e Vatairea macrocarpa (Benth.) Ducke (Fabaceae). O extrato de Vatairea macrocarpa apresentou os melhores resultados nos micro-organismos testados, sendo que essa atividade ainda não havia sido relatada na literatura. O extrato acetato de etila da casca da raiz foi selecionado para o fracionamento químico e foram isolados e identificados os compostos dianellidina (D3) e vatacarpina (D93), sendo esta última não descrita na literatura. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis as well fungal infections are diseases which have toxic and similar treatments (i.e., amphotericin B) and increasing resistance to available drugs. So, finding out new therapeutic alternatives for these biologic models is essential to research and clinical practices. Plant secondary metabolites are an interesting avenue to find out promising molecules to several diseases. This work conducted a screening of Cerrado species extracts Enterolobium ellipticum Benth. (Fabaceae), Sclerolobium aureum (Tul.) Baill. (Fabaceae) e Vatairea macrocarpa (Benth.) Ducke (Fabaceae) against Leishmania (Leishmania) amazonensis, dermatophytes and yeasts. Vatairea macrocarpa extracts presented the most promising results against all three micro- organisms, which has not been described in the literature. The ethyl acetate extract of the root bark was selected for chemical fractionation and the following compounds were identified: ethanone (D3) and vatacarpina (D93), that hasn’t been previously reported.