Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao -16.pdf: 1891470 bytes, checksum: 1b28975beba2d1e4f43d3a0f9f79a9aa (MD5) Previous issue date: 2014-02-11 / Bombyx mori is an insect of the order Lepidoptera that is only found only in germplasm banks; it is used in scientific research and for commercial purposes. In the latter case, the silk cocoon, which is produced at the end of the 5th larval instar, is used in the production of various yarns and fabrics. This branch of Brazilian agribusiness, known as sericulture, is well developed in the state of Paraná, where it is a form of small-scale family farming. Several factors impact negatively on Brazilian sericulture, such as diseases during rearing, and B. mori is susceptible to a virus from the Baculoviridae family, namely, Bombyx mori multiple nucleopolyhedrovirus (BmMNPV), genus Alphabaculovirus (AlphaBV), which infects the larvae and jeopardises commercial production of the cocoon, causing losses to farmers and industry. Studies have proved that BmMNPV is polyorganotropic and there are several target organs, such as the tracheal system; however, details of its cytopathology are not known. The tracheal system is responsible for the aeration of the tissues of the insect. Thus, the present study aimed to describe the cytopathology of the tracheas of hybrid larvae of B. Mori, infected experimentally with BmMNPV, and isolated geographically in the state of Paraná. Fifth instar hybrid larvae were divided into two groups; one control, and the other inoculated. After ingestion, and on different days post-inoculation (dpi), from the 2nd to the 9th dpi, the larvae were anesthetized and dissected. Segments of organs such as the integument, muscle and silk gland, containing branches of the trachea, were collected and fixed in Karnovsky modified for transmission electron microscopy. On the 2st dpi, fresh hemolymph analysis was conducted in order to determine the susceptibility of the hemocytes. The results revealed that the hemocytes were infected from the 2nd dpi and the epithelial cells of the trachea were infected from the 4th dpi. The cytopathology of the tracheal cells showed hypertrophic nucleus, containing the viroplasm, the site of the synthesis of the nucleocapsids. Subsequently, the formation and development of the polyhedra occured, accentuating the nuclear hypertrophy and culminating in cell lysis. Virions were also observed, immersed in the basal lamina of the trachea, which appeared to be disorganized. Thus, the cytopathology of the trachea was consistent with the infection caused by AlphaBV, and the data that was obtained provides a better understanding of the infectious cycle of BmMNPV in the body of the insect. The time of infection, later for the hemocytes, and the presence of virions in the basal lamina of the trachea, indicated that this system is a secondary target for infection, and also that the hemolymph is an important dispersant of viral infection / Bombyx mori é um inseto da ordem Lepidoptera encontrado somente em bancos de germoplasma, sendo utilizado em pesquisas científicas e para fins comerciais. Neste caso, seu casulo de seda, construído ao final do 5º instar larval, é usado na produção de diversos fios e tecidos. Este ramo da agroindústria brasileira, conhecido como sericicultura, se apresenta bem desenvolvido no Estado do Paraná, estando incluído no programa de agricultura familiar. Vários são os fatores que exercem influência na sericicultura nacional, como as doenças, e B. mori é susceptível a um vírus da família Baculoviridae, o Bombyx mori multiple nucleopolyhedrovirus (BmMNPV), gênero Alphabaculovirus (AlphaBV). Ao infectar as lagartas o vírus compromete a produção comercial do casulo, causando prejuízos aos produtores rurais e a indústria. Estudos comprovam que o BmMNPV é poliorganotrófico e vários são os órgãos-alvos, como o sistema traqueal; entretanto, detalhes de sua citopatologia não são conhecidos. O sistema traqueal é responsável pela aeração dos tecidos do inseto e o presente estudo objetivou descrever a citopatologia das traqueias de lagartas híbridas de B. mori infectadas experimentalmente pelo BmMNPV, isolado geográfico do Paraná. Para tanto, lagartas híbridas de 5º instar foram divididas em dois grupos, controle e inoculado. Neste, o inóculo viral foi fornecido na alimentação e em diferentes dias pós-inoculação (dpi), do 2º ao 9º dpi, as lagartas foram anestesiadas e dissecadas; segmentos do tegumento, músculo e glândula da seda, contendo ramos da traqueia, foram coletados e fixados em Karnovsky modificado para a microscopia eletrônica de transmissão. No 2º dpi foi efetuada análise a fresco da hemolinfa, para averiguar a susceptibilidade dos hemócitos. Os resultados revelaram que os hemócitos se apresentaram infectados a partir do 2º dpi e as células epiteliais da traqueia a partir do 4° dpi. A citopatologia das células traqueais revelou núcleo hipertrófico, contendo o viroplasma, que é o local de síntese dos nucleocapsídeos. Posteriormente, houve a formação e o desenvolvimento dos poliedros, acentuando-se a hipertrofia nuclear e culminando com a citólise. Vírions também foram visualizados na lâmina basal da traqueia, que se apresentou desorganizada. Assim, a citopatologia da traqueia condiz com a infecção causada por AlphaBV, e as informações obtidas permitem um melhor entendimento do ciclo infeccioso do BmMNPV no corpo do inseto. O tempo de infecção, posterior ao dos hemócitos, e a presença de vírions na lâmina basal da traqueia, indicam que este sistema é alvo secundário e, ainda, que a hemolinfa se apresenta como um importante dispersor da infecção viral.

Bibliography: leaves 137-167 / viii, 189 leaves, [31] leaves of plates : ill. (some col.) ; 30 cm. / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Thesis (Ph.D.)--University of Adelaide, Dept. of Entomology, Waite Agricultural Research Institute, 1986

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 287030 bytes, checksum: ebb9db845765e572a78805c02322e7f4 (MD5) Previous issue date: 2006-02-24 / The objective of this work was to identify the species of Lepidoptera primary pests for the eucalyptus and to evaluate the influence of the temperature and rainfall on their population fluctuation in the area of Bom Despacho, Minas Gerais State, Brazil. Five light traps were used during one night, every fifteen days, from January 1994 to December 2001. The species collected were Thyrinteina arnobia and Oxydia vesulia (Geometridae), Sarsina violascens (Lymantriidae), Psorocampa denticulata (Notodontidae) and Eupseudosoma aberrans (Arctiidae). A total of 12,040.5 individuals were collected per trap, being T. arnobia the most abundant species, with 96.05% of the individuals during the eight years of collection. The largest number of individuals was collected in April and May, indicating that the outbreaks of these species are concentrate in these months. T. arnobia had no significant correlations with the temperature and the rainfall but O. vesulia had negative correlation with the rainfall. S. violascens and E. aberrans presented similar population fluctuation with negative correlation with the temperature and the rainfall. P. denticulata presented positive correlation with these factors. The Lepidoptera primary pests of eucalyptus collected in the area of Bom Despacho presented higher number of individuals in the coldest and dry months of the year, especially in April and May, except P. denticulata. This last species had higher number of individuals collected in October and November and in February and March at the beginning and the final of the raining season. / O objetivo deste trabalho foi identificar as espécies de lepidópteros pragas primárias para o eucalipto e avaliar a influência da temperatura e da precipitação pluviométrica na flutuação populacional das mesmas na região de Bom Despacho, Minas Gerais, Brasil. Foram utilizadas cinco armadilhas luminosas acionadas durante uma noite, a cada quinze dias, de janeiro de 1994 a dezembro de 2001. As espécies coletadas foram Thyrinteina arnobia e Oxydia vesulia (Geometridae), Sarsina violascens (Lymantriidae), Psorocampa denticulata (Notodontidae) e Eupseudosoma aberrans (Arctiidae). Foram coletados 1.2040,5 indivíduos por armadilha, sendo T. arnobia a espécie mais abundante, com 96,05% dos indivíduos coletados durante os oito anos de coleta. O maior número de indivíduos foi coletado em abril e maio, indicando que os surtos dessas espécies se concentram nesses meses. Não verificou-se correlação significativa da temperatura e da precipitação pluviométrica com T. arnobia, mas O. vesulia teve correlação negativa com a precipitação pluviométrica. S. violascens e E. aberrans apresentaram flutuação semelhante, com correlações negativas com a temperatura e a precipitação pluviométrica. P. denticulata apresentou correlação positiva para esses fatores. Os lepidópteros pragas primárias de eucalipto coletados, na região de Bom Despacho, apresentaram maior número de indivíduos nos meses mais frios e secos do ano, nos meses de abril e maio, exceto P. denticulata que teve maior número de indivíduos coletados de outubro a novembro e de fevereiro a março coincidindo com o início e final do período chuvoso.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissLE.pdf: 3386240 bytes, checksum: c736eb4f7c4ef3739d8139ef44d99689 (MD5) Previous issue date: 2007-07-20 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work was carried out in three different areas of Universidade Federal de São Carlos. We studied the Geometridae associated to Rapanea umbellata (Mart.) Mez, 1902 (Myrsinaceae). The samples were collected at each two weeks, during the period of October of 2005 to april of 2007. It was used the method of entomological umbrella. The larvae were grown in the laboratory, using the host plant as food. Rapanea umbellata had the first register as plant hostess of Geometridae in the present study. It occured 14 species of Geometridae arranged in 11 genus, seven genus of Hymenoptera Parasitica and one Diptera. The common species that occured was Phrygionis polita (Cramer, 1780), whose relative abundance was 48,9%. Other Geometridae recordered were: P. paradoxata (Guenée, [1858]), Argyrotome melae (Druce, 1892), Opisthoxia sp. Hübner, [1825], Pero refellaria (Guenée, [1858]), Glena bipennaria (Guenée, [1858]), G. unipennaria (Guenée, [1858]), Hymenomima amberia (Schaus, 1901), Iridopsis chalcea (Obertür, 1883), Ischnopteris miseliata (Guenée, [1858]), Patalene Herrich-Schäffer, [1854], Oxydia apidania (Cramer, [1779]), O. vesulia (Cramer, [1779]), Prochoerodes tetragonata (Guenée, [1958]). The Hymenoptera parasitoids were: Euplectrus Nestwood, 1832 (Eulophidae), Charops Homgren, 1859 (Ichneumonidae), Hyposoter Foerster, 1869 (Ichneumonidae), Mesochorus Gravenhorst, 1829 (Ichneumonidae), Diolcogaster Asmed, 1900 (Braconidae), Hymenochaonia Dalla Torre, 1898 (Braconidae), Glyptapanteles Ashmed, 1905 (Braconidae). The density of larvae shows two peaks, one at the dry season and one at the raining season. In the same time occurs the smaller percentage of parasitism. The cycle of development of Phrygionis polita was studied, being the first description of the immature stages of a species of the Palyadini tribe. / Este trabalho foi realizado em três diferentes áreas da Universidade Federal de São Carlos. Foram estudados os Geometridae associados à Rapanea umbellata (Mart.) Mez, 1902 (Myrsinaceae). As coletas foram realizadas quinzenalmente, durante o período de outubro de 2005 a abril de 2007 por meio de guarda-chuva entomológico. As larvas coletadas foram criadas em laboratório, utilizando a planta hospedeira para alimentá-las. Rapanea umbellata teve o primeiro registro como planta hospedeira de Geometridae no presente estudo. Ocorreram 14 espécies de Geometridae distribuída em 11 gêneros, 7 gêneros de Hymenoptera Parasitica e um Diptera Tachinidae. Dentre as espécies de Geometridae, a mais comum, com densidade relativa de 48,9%, foi Phrygionis polita (Cramer, 1780) Outros geometrídeos registrados foram: P. paradoxata (Guenée, [1858]), Argyrotome melae (Druce, 1892), Opisthoxia sp. Hübner, [1825], Pero refellaria (Guenée, [1858]), Glena bipennaria (Guenée, [1858]), G. unipennaria (Guenée, [1858]), Hymenomima amberia (Schaus, 1901), Iridopsis chalcea (Obertür, 1883), Ischnopteris miseliata (Guenée, [1858]), Patalene Herrich- Schäffer, [1854], Oxydia apidania (Cramer, [1779]), O. vesulia (Cramer, [1779]), Prochoerodes tetragonata (Guenée, [1958]). Os parasitóides Hymenoptera foram: Euplectrus Nestwood, 1832 (Eulophidae), Charops Homgren, 1859 (Ichneumonidae), Hyposoter Foerster, 1869 (Ichneumonidae), Mesochorus Gravenhorst, 1829 (Ichneumonidae), Diolcogaster Asmed, 1900 (Braconidae), Hymenochaonia Dalla Torre, 1898 (Braconidae), Glyptapanteles Ashmed, 1905 (Braconidae). A densidade de larvas apresentou dois picos, um na estação seca e um na estação chuvosa. Nesta mesma época, ocorreram as menores porcentagens de parasitismo. O ciclo de desenvolvimento de Phrygionis polita foi estudado, sendo a primeira descrição dos estágios imaturos de uma espécie da tribo Palyadini.

Contributing to the butterflies diversity knowledge from Estacional Decidual Forest of Rio Grande do Sul State, a systematic survey was carried out in two localities of the Municipal District of Frederico Westphalen: Villa Faguense Municipal Park and Schöenstatt Sanctuary, from March 2005 to April 2006. In 140 hours of sampling, were registered 3129 individuals distributed in 174 species. Of the sampled species, 56,32% belong to the Nymphalidae family (12 subfamilies), 19,54% to Hesperiidae (2 subfamilies), 6,32% to Papilionidae (1 subfamily), 8,05% to Pieridae (3 subfamilies), 6,32% to Lycaenidae (2 subfamilies) and 3,45% to Riodinidae (1 subfamily). Ten species sampled were still no published for the State: Euptoieta hegesia (Cramer, 1779), Dynamine athemon (Linnaeus, 1758), Myscelia orsis (Drury, 1782), Pareuptychia summandosa (Gosse, 1880), Taygetis laches marginata (Staudinger, 1887), Yphthichoides castrensis (Schaus, 1902), Caligo eurilochus brasiliensis (Felder, 1826), Urbanus doryssus albicuspis (Herrich-Schaffer, 1869), Eurybia pergaea (Geyer, 1832), Lemonias zygia (Hübner, 1807). The Shannon-Wiener diversity index was higher in Villa Faguense Municipal Park, place less disturbed, and smaller in Schöenstatt Sanctuary. The Simpson and Berger-Parker dominance indexes had been more representative in Schöenstatt Sanctuary, with higher number of abundant species, and less representative in Villa Faguense Municipal Park. Among the species captured 131 (75.29%) are accidental, 25 (14.37%) are accessory and 18 (10.34%) are constant species. / Contribuindo para o levantamento sistemático e o conhecimento de borboletas da Floresta Estacional Decidual de Frederico Westphalen, foram realizadas saídas de campo mensais em duas localidades no Município, entre março de 2005 e abril de 2006. Em um total de 140 horas de amostragem, foram registrados 3129 indivíduos distribuídos em 174 espécies. Destas, 56,32% das espécies pertencem à família Nymphalidae (12 subfamílias), 19,54% Hesperiidae (2 subfamílias), 6,32% Papilionidae (1 subfamília), 8,05% Pieridae (3 subfamílias), 6,32% Lycaenidae (2 subfamílias) e 3,45% Riodinidae (1 subfamília). Foram registradas 10 espécies de borboletas ainda não publicadas para o Estado: Euptoieta hegesia (Cramer, 1779), Dynamine athemon (Linnaeus, 1758), Myscelia orsis (Drury, 1782), Pareuptychia summandosa (Gosse, 1880), Taygetis laches marginata (Staudinger, 1887), Yphthichoides castrensis (Schaus, 1902), Caligo eurilochus brasiliensis (Felder, 1826), Urbanus doryssus albicuspis (Herrich-Schaffer, 1869), Eurybia pergaea (Geyer, 1832), Lemonias zygia (Hübner, 1807). O ìndice de Diversidade de Shannon-Wiener foi maior no Parque Municipal da Vila Faguense, local menos perturbado, e menor no Santuário de Schöenstatt. Os índices de dominância de Simpson e Berger-Parker, por sua vez, foram mais representativos no Santuário de Schöenstatt, com maior número de espécies abundantes, e menos representativos no Parque Municipal da Vila Faguense. Foram registradas em Frederico Westphalen 131 (75,29%) espécies acidentais, 25 (14,37%) espécies acessórias e 18 (10,34%) espécies constantes.

A influência antrópica em habitats naturais pode causar perda e fragmentação florestal. Esse processo altera a quantidade de espécies, comprometendo a conservação biológica. Os efeitos da fragmentação dependem, dentre outras características, da conectividade entre os remanescentes. A conectividade funcional depende de como um organismo percebe e responde à estrutura da paisagem. Entender os fatores que determinam a qualidade da matriz para os organismos e entender o movimento animal são etapas essenciais para guiar iniciativas de conservação em paisagens fragmentadas. Como as borboletas são indicadas para o monitoramento ambiental, a partir da caracterização do movimento de indivíduos da espécie de borboletas Heliconius erato, foi possível inferir a respeito da sua capacidade de percepção e analisar a conectividade funcional da paisagem estudada. O estudo foi realizado na porção norte do município de Batatais, no interior do estado de São Paulo. Foi realizada a translocação de 78 indivíduos para a matriz a diferentes distâncias em relação a floresta e observado o seu caminho de retorno para a floresta. A taxa de retorno dos indivíduos translocados ao fragmento em função da distância foi avaliada pela análise de sobrevivência de Cox em conjunto com a razão entre os indivíduos que retornaram pela quantidade total por distância. A tortuosidade dos trajetos foi avaliada através da análise de Passos Aleatórios Correlacionados em conjunto com a razão entre a distância efetiva e a soma dos comprimentos para cada trajetória. Foi realizada uma análise de variância para avaliar se há diferenças de tortuosidade entre as distâncias. Para relacionar esse índice com a distância à floresta foram utilizados modelos lineares generalizados. Esses modelos foram comparados através do AICc. A orientação dos ângulos foi analisada através de estatística circular com teste de Rayleigh, teste-V e histogramas. Conforme aumenta a distância, diminui a quantidade de indivíduos que retornam à floresta. A taxa de retorno cai pela metade na distância de 150m. A partir da análise de Cox notou-se que a distância influencia a taxa de retorno dos indivíduos em conjunto com a tortuosidade e o local de soltura. A hora do dia e o local de soltura explicaram a variação na tortuosidade. A análise dos ângulos demonstrou que a partir de 150m os voos se tornam aleatórios. Dessa forma, para garantir a conservação do gênero Heliconius em paisagens agrícolas que incluem cultivos estruturalmente distintos dos fragmentos florestais é necessário manter uma distância de no máximo 100 metros entre os fragmentos. / The anthropic influence on natural habitats may cause forest loss and fragmentation. This process changes species richness, compromising their conservation. The effects of forest fragmentation depend, among other factors, on the functional connectivity, namely on how an organism perceives and responds to the landscape structure. Understanding the factors that determine the quality of the matrix for the organisms and understanding animal movement are essential steps to guide conservation initiatives on fragmented landscapes. Therefore, from the movement characterization of the butterfly species Heliconius erato, which is indicated as a good surrogate for environmental monitoring, it was possible to infer about its perception capacity and to analyze landscape functional connectivity for this species. The study was conducted in the Northern region of Batatais, São Paulo. The translocation of 78 Heliconius erato individuals was conducted to non-forested matrix at different distances from forest patches and their paths back to the forest were actively recorded. The rate of return of the translocated individuals to their original forest patch as a function of the distance was evaluated with Cox survival analysis together with the ratio between the individuals which returned and the total amount per distance. Path tortuosity was measured through the Correlated Random Walk analysis together with the ratio between the effective distance and the sum of lengths for each path. An ANOVA was conducted to check for tortuosity differences between distances. To relate this index with the distance to the forest, generalized linear models were used. These models were compared through AICc. The angles orientation was analyzed through circular statistics with Rayleigh test, V-test and histograms. As distance increased the number of individuals returning to the forest decreased. The return rate dropped to 50% at 150m. Through Cox analysis it was noted that the distance together with tortuosity and release site influenced the return rate. The time of the day and the release site explained the tortuosity range. Angle analysis showed that as further than 150m the flights become random. Therefore, to ensure the conservation of the Heliconius genus in agricultural landscapes that include structurally distinct crops from forest fragments it is important to maintain a 100m mean inter-patch distance.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-05-24T18:44:26Z No. of bitstreams: 2 Ana Cláudia Malagutti Corsato.pdf: 1319419 bytes, checksum: c4de080588607227096826021e800839 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T18:44:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Ana Cláudia Malagutti Corsato.pdf: 1319419 bytes, checksum: c4de080588607227096826021e800839 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-05 / The Diatraea saccharalis is the pest responsible for a great economic loss to the cultivation of sugar cane. As well as others members of Lepidoptera order, the D. saccharalis has a fast and efficient immune innate response, characterized by primary defense barrier, cellular immune response and humoral immune response. The antimicrobial peptides (AMPs) are included in humoral immune response that show cationic and amphiphilic characteristics besides its low molecular weight, what makes them potentially therapeutic agents. In this study were analyzed proteins with low molecular weight differently expressed in the hemolymph of D. saccharalis, after the interval of six and twelve hours of humoral immune response induction with different microorganisms compared to non-challenged worms (control). The 5th instar worms were divided in groups (n= 50) and submitted to six and twelve hours of septic challenges: control (group 1), challenged by Bacillus subtilis ATCC 6623 (group 2), challenged by Escherichia coli ATCC 11229 (group 3), and challenged by Beauveria bassiana 88 strain (group 4). In each worm was inoculated a known concentration of microorganism, and after the established time, the hemolymph was collected. The low molecular weight proteins were obtained submitting each hemolymph sample to an extraction solution containing Methanol, Acetic Acid and Water. After that, the protein extracts were concentrated in columns and protein dosage was realized in 280 nm. About 500 μg of proteins were submitted to two-dimensional electrophoresis (2-DE). The spots were excised from gels, digested with Tripsin and submitted to MALDI-ToF/ToF type mass spectrometry. The identification of protein orthologs was realized using the obtained data against the data available on the MASCOT online server (Matrix science), with the database (NCBI and Swiss rot) specified for Drosophila melanogaster and an internal database of Lepidoptera. The TagIdent tool was utilized for searching proteins through their molecular weight and isoelectric point. It was possible to identify eighteen proteins, of which twelve demonstrated to be involved with immune response in D. saccharalis. The six hours septic challenge with B. subtilis was responsible for modification of expression of Peptidoglycan recognition protein (PGRP), for increase of expression of Chitin-binding protein and for induction of expression of proteins like the Attacin-A and the Serine-protease inhibitor-like. The six hours septic challenge with E. coli increased the expression of a putative defense protein. The twelve hours septic challenge using B. subtilis and E. coli were responsible for increase of expression of Lysozyme. The six hours septic challenge with B. bassiana induced of expression of a Cecropin A2 and a Drosomycin-like. On the order hand, after twelve hours of fungal challenge, there was the induction of expression of multifunctional protein Apolipophorin-3. It was concluded that the septic challenge with different microorganisms were capable of change the expression of some proteins involved in the immune response in D. saccharalis, significant for understanding this process as well as for pointing the substances with antimicrobial functions. / A Diatraea saccharalis é a praga responsável por grandes perdas econômicas à cultura da cana-de-açúcar. Assim como outros integrantes da ordem Lepidoptera, a D. saccharalis possui resposta imunológica inata rápida e eficiente, constituída por barreira primária de defesa, resposta imune celular e resposta imune humoral. Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) são parte da resposta imune humoral que apresentam características catiônicas e anfifílicas, além de sua massa molecular baixa, o que os tornam potenciais agentes terapêuticos. Neste estudo foram analisadas proteínas com baixa massa molecular, diferencialmente expressas na hemolinfa da D. saccharalis, após os intervalos de 6 e 12 horas de indução da resposta imune humoral com diferentes microrganismos em comparação às lagartas não desafiadas (controle). As lagartas em 5º instar foram divididas em grupos (n= 50) e submetidas a desafios sépticos de 6 e 12 horas: controle (grupo 1), desafiadas por Bacillus subtilis ATCC 6623 (grupo 2), desafiadas por Escherichia coli ATCC 11229 (grupo 3) e desafiadas por Beauveria bassiana cepa 88 (grupo 4). Em cada lagarta foi inoculada uma concentração conhecida do microrganismo e, após o tempo estabelecido, a hemolinfa foi coletada. As proteínas de baixa massa molecular foram obtidas submetendo cada amostra de hemolinfa a uma solução de extração contendo Metanol, Ácido Acético e Água. Posteriormente, os extratos proteicos foram concentrados em colunas e a dosagem proteica realizada em 280 nm. Aproximadamente 500 μg de proteínas foram submetidas à eletroforese bidimensional (2-DE). Os spots foram retirados dos géis, digeridos com Tripsina, e submetidos à espectrometria de massas do tipo MALDI-ToF/ToF. A identificação das proteínas ortólogas foi realizada utilizando os dados obtidos contra os dados disponíveis no servidor online MASCOT (Matrixscience), especificando a base de dados (NCBI e Swissprot) para Drosophila melanogaster e um banco interno de Lepidoptera. A ferramenta TagIdent foi utilizada para a busca de proteínas por meio de suas massas moleculares e ponto isoelétrico. Foram identificadas dezoito proteínas, das quais doze se mostraram envolvidas com a resposta imune em D. saccharalis. O desafio séptico de 6 horas com B. subtilis foi responsável pela alteração na expressão da proteína de reconhecimento de peptideoglicano (PGRP), pelo aumento da expressão da proteína ligadora de quitina e pela indução da expressão de proteínas como a Atacina-A e a proteína inibidora de serino-protease. O desafio imunológico de 6 horas com E. coli levou ao aumento da expressão de uma provável proteína de defesa. Os desafios de 12 horas utilizando as bactérias B. subtilis e E. coli se mostraram responsáveis pelo aumento da expressão da Lisozima. O desafio de 6 horas com B. bassiana causou indução da expressão de uma Cecropina A2 e uma possível Drosomicina. Por sua vez, após o desafio fúngico de 12 horas, houve a indução da expressão da proteína multifuncional Apolipoforina-3. Concluiu-se que desafios sépticos com diferentes microrganismos foram capazes de alterar a expressão de algumas proteínas envolvidas na resposta imune em D. saccharalis, importantes para o entendimento deste processo e também para o apontamento de substâncias com funções antimicrobianas.

The past two decades have witnessed an unprecedented decline in Lepidopteran species, with more than a third of the UK’s butterflies now either considered threatened, or already lost from the country. The vulnerable marsh fritillary, Euphydryas aurinia, after a long term loss in the UK of 73% in abundance, has become an almost iconic species as the target of many well-funded conservation projects across the UK. Despite extensive ecological studies, populations of E. aurinia are shown in Chapter 2 to still be declining in south-west UK even after recommended management strategies have been implemented. This necessitates the need for prompt research beyond that of management requirements and butterfly habitat preferences. In Chapter 3, microsatellite markers (EST-SSRs) were developed for E. aurinia and using these markers in Chapter 4, it is shown that E. aurinia populations in southern UK and Catalonia, Spain, are severely genetically differentiated at all geographical scales, and genetically depauperate, causing huge concerns for the conservation of this enigmatic and ecologically important species. Dispersal is fundamental to metapopulation existence and survival. Phosphoglucose isomerase (PGI – an enzyme in the glycolysis pathway) is a well-endorsed candidate gene for dispersal, extensively studied in the Glanville fritillary (Melitaea cinxia) and Orange Sulphur (Colias eurytheme). In Chapter 5, an analysis across 27 sites in the UK discovered six non-synonymous SNPs (single nucleotide polymorphisms) within PGI. A single charge-changing SNP of interest showed no evidence of balancing selection, contrary to findings in M. cinxia, instead appearing to be neutral when analysed alongside microsatellite markers developed in Chapter 3. No link was found between genotype and flight, morphology or population trend. These findings challenge the emerging perspective that PGI could be used as an adaptive molecular marker for arthropods. Wolbachia are endosymbiotic bacteria capable of dramatically altering the reproductive system of their host. In Chapter 6, a PCR-based diagnostic in conjunction with MLST (multi-locus sequence typing) identified 100% prevalence of a single strain of Wolbachia across all sampled E. aurinia populations in the UK. Total prevalence suggests that Wolbachia probably has little phenotypic impact on its host, but the potential impacts of this endosymbiont on uninfected populations should be considered during any management plans for the conservation of E. aurinia. Current management plans will need to incorporate all areas of research, from basic ecological requirements to molecular adaptation and unseen manipulators of host biology, to be able to fully and effectively conserve declining fragmented species.

Fall cankerworm (FCW) outbreaks have recently increased in frequency and intensity in the mid-Atlantic region of the United States, especially around cities of Charlotte, NC and Richmond, VA. This study evaluated the effects of two landscape features associated with urbanization, impervious surface and forest cover, on population patterns of FCW and its parasitoids across eastern Virginia. Forest cover was positively related to parasitism rates while impervious surface was positively related to FCW abundance, suggesting that FCW outbreaks may be amplified in urban areas. FCW abundance declined over the two-year period of this study, but parasitism rate increased at most sites. Parasitism was highest at sites that experienced FCW outbreaks first, indicating that parasitoid populations are responding to moth abundances. It remains to be seen whether this outbreak was an aberrant occurrence, or represents a regime shift to more frequent defoliation in Virginia, similar to that in North Carolina urban areas.

Apesar do grande conhecimento de borboletas no RS, as borboletas frugívoras ainda exirem regiões pouco exploradas, principalmente em áreas de Pampa. As borboletas desta guilda se alimentam de frutas fermentadas, exsudatos de plantas, fezes e carcaças. Assim, destacam-se em estudos de monitoramento ambiental, pois podem ser capturadas com armadilhas com iscas, o que possibilita a amostragem simultânea com esforço padronizado em diferentes áreas e meses do ano. Todavia, não é claro qual a efetividade da isca utilizada na amostragem destas borboletas. O Parque Estadual de Itapuã (PEI) é uma das Unidades de Conservação de maior importância no RS. Está sob domínio do bioma Pampa e caracteriza-se pelo encontro de Formações Pioneiras com Floresta Estacional. O presente trabalho visou descrever a assembleia de borboletas frugívoras ocorrentes no PEI e verificar a atratividade de diferentes iscas na captura destas borboletas. As amostragems foram com armadilhas com iscas atrativas e foram divididas em dois módulos, conforme os objetivos. Para estudar a diversidade de borboletas frugívoras do PEI, foram selecionadas duas trilhas, em cada uma das seguintes formações: Mata Mista (FMM), Mata Higrófila (FMH) e Mata de Restinga (FMR). Nestas foram colocadas duas unidades amostrais (UA) com cinco armadilhas cada. A isca utilizada foi de banana fermentada com caldo de cana. As amostragens ocorreram duas vezes por estação, entre outubro de 2012 e setembro de 2013. Com intensidade amostral de 1440 armadilhas-dia foram registrados 854 indivíduos em 32 espécies. A compilação com registros de outros estudos totalizam 44 espécies de frugívoras para o PEI. As estimativas analíticas de Chao2 e Jackknafe2 indicaram que a riqueza da comunidade amostrada deve estar entre 47 e 52 espécies. A compilação com registros de outros estudos totalizam 44 espécies de frugívoras para o PEI. As estimativas analíticas de Chao2 e Jackknafe2 indicaram que a riqueza da comunidade amostrada deve estar entre 47 e 52 espécies. FMM foi mais rica (S=27) e a abundância (N=510) foi significativamente maior (p< 0,0001) do que as registradas em FMH (S= 22 e N= 207) e FMR (S= 20 e N= 137). O inverno foi significativamente menos rico e abundante do que o verão e a primavera em todas as formações vegetais. FMH e FMR apresentaram assembleias significativamente diferentes (p=0.0218). Satyrinae foi a subfamília mais rica e mais abundante seguida por Biblidiane, Charaxinae e Nymphalinae. Três espécies foram muito abundantes – Yphthimoides ordinaria Freitas, Kaminski & Mielke, 2012, Paryphthimoides poltys (Prittwitz, 1865) e Paryphthimoides phronius (Godart, 1824). Para testar o efeito das iscas, foram dispostos 36 UAs com duas armadilhas cada. Utilizou-se as iscas: banana com caldo de cana fermentados (banana), butiá fermentado (nativa) e fezes humanas (fezes). Em cada amostragem, a localização das iscas ao longo da trilha foi sorteada, com finalidade de minimizar o efeito do local sobre a isca. As armadilhas foram colocadas na Estrada de acesso à Praia de Fora, mensalmente de janeiro a maio de 2013. No teste das iscas, registrou-se 207 indivíduos em 22 espécies. A isca de fezes foi significativamente menos rica (S=6, p< 0,0003) e abundante (N= 13, p< 0,0005) que as iscas de banana (S= 17, N= 97) e nativa (S=18, N=97). Satyrinae foi significativamente mais abundante (p< 0,001) na isca nativa e Biblidinae foi mais abundante (p< 0,001) na isca de fezes. A análise de associação indicou que a abundância das espécies foi significativamente diferentes entre as iscas (χ2 = 87,92; df = 42, p= 0,0013). Na isca nativa, Carminda paeon e Yphthimoides ordinaria, foram significativamente mais capturadas. Na isca de fezes, Diaethria clymena e Eunica eburnea foram capturadas significativamente mais do que o esperado. Assim, é importante em amostragem de borboletas frugívoras, considerar que riqueza, abundância e composição de espécies podem variar entre diferentes iscas, podendo levar a erros na descrição de padrões de diversidade da comunidade. Ressalta-se a grande carência de conhecimento sobre a composição da dieta da guilda de borboletas frugívoras.