Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-30Bitstream added on 2014-11-10T11:58:13Z : No. of bitstreams: 1 000793372.pdf: 8302397 bytes, checksum: b24614d836856c5c7d6b0efae7133732 (MD5) / Espécies da família Brassicaceae fazem parte da alimentação básica mundial. Suas características nutricionais mostram altos teores de vitaminas, fibras, minerais, fenóis, flavonóides, ácido hidroxicinâmico, açúcares solúveis, ácidos graxos e carotenoides, além de substâncias secundárias como glucosinolatos que, atualmente, são reconhecidos pelas propriedades antioxidantes e anticancerígenas. A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella, é um dos principais fatores limitantes deste cultivo no mundo, devido aos sérios danos que causa às plantas, depreciando o produto e ocasionando grandes perdas nos campos de produção, portanto, o conhecimento do desenvolvimento deste inseto em diferentes cultivares é importante para que se possa determinar aquelas menos propícias para o inseto. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi verificar se houve influência do substrato alimentar das lagartas (variedades de Brassicaceae) no desenvolvimento de P. xylostella, ao longo de 18 gerações. Os insetos foram criados em 3 variedades/cultivares de importância comercial para a região nordeste do Estado de São Paulo: Brassica oleracea var. acephala - couve Manteiga hibrida HS-20, Brassica oleracea var. italica - brócolis Piracicaba e Brassica oleracea var. capitata - repolho Bob Cat. A cada 3 gerações aspectos biológicos do inseto criado nos diferentes substratos de alimentação foram avaliados em ensaios de laboratório. As características biológicas analisadas foram: consumo foliar, período larval, viabilidade de larvas, período pupal, viabilidade de pupas, peso pupal, razão sexual, número de ovos por fêmea, fertilidade de ovos, longevidade de machos e longevidade de fêmeas. Os resultados foram submetidos a análise fatorial comparando-se gerações e cultivares. Os parâmetros biológicos de P. xylostella demonstraram que repolho foi o menos consumido e o que apresentou ... / Species of Brassicaceae family are part of the global food base. Nutritional characteristics of brassics show high levels of vitamins, fiber, minerals, phenols, flavonoids, hydroxycinnamic acid, soluble sugars, fatty acids and carotenoids, and secondary substances such as glucosinolates that are currently recognized by the antioxidant and anti-carcinogenic effects. The diamondback moth, Plutella xylostella, is one of the main limiting factors of this crop in the world, due to the serious damage that cause to plants, depreciating the product and causing serious reductions in the field production. The knowledge of the biology of this insect in different cultivars is important so that you can determine those less favorable to the pest development and reproduce. In this context, the objective of this study was to evaluate the influence of the larvae food substrate (Brassicaceae’s varieties) in the P. xylostella development over 18 generations. Insects were reared on 3 comercial varieties/cultivars of importance to the northeastern of Sao Paulo State: Brassica oleracea var. acephala - kale Manteiga hibrida HS-20, Brassica oleracea var. italica - broccoli Piracicaba and Brassica oleracea var. capitata - cabbage Bob Cat. Every 3 generations the biological aspects of P. xylostella were evaluated in laboratory trials. The biological parameters evaluated were: leaf consumption, larval period, larval viability, pupal period, pupal viability, pupal weight, sex ratio, number of eggs per female, egg fertility, and longevity of males and females. The results were analysed comparing generations and cultivars. The biological parameters of P. xylostella showed that cabbage cultivar was less consumed and the larval period was longer while the pupal period was shorter. However, the low initial performance of this cultivar was being improved over the generations, matching the others in the latest generations ...

Orientador: Antonio Carlos Busoli / Coorientador: Marcos Doniseti Michelotto / Banca: Julio Cesar Guerreiro / Banca: José Roberto Scarpellini / Banca: Raphael de Campos Castilho / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Resumo: A lagarta do cartucho Spodoptera frugiperda é a principal praga da cultura do milho nas regiões tropicais e subtropicais do continente americano. Dentre os métodos mais utilizados para o controle desta praga no Brasil, destaca-se o uso de plantas geneticamente modificadas a partir da inserção de um gene da bactéria Bacillus thuringiensis que confere a planta a expressão de proteínas com ações inseticidas. No entanto, durante dois ou três anos estas tecnologias reduziram o grau de supressão às lagartas, principalmente pelo uso continuo e inadequado da tecnologia. O objetivo deste trabalho foi estudar em condições de campo, o comportamento de híbridos de milho Bt frente ao ataque de lepidópteros, como a S. frugiperda e Helicoverpa zea, em quatro regiões produtoras de milho do estado de São Paulo, bem como estudar em condições de laboratório a biologia comparada de populações de S. frugiperda coletadas nestas regiões. Os experimentos de campo foram realizados no período da segunda safra de milho, no ano de 2014, nas regiões do Médio Paranapanema, Centro Norte, Noroeste e Norte do estado de São Paulo, onde foram utilizados 25 cultivares de milho com expressão de diferentes proteínas inseticidas. Para o estudo de biologia comparada foi realizada a coleta de lagartas nas quatro regiões do estado, as lagartas foram enviadas ao laboratório de Manejo Integrado de Pragas da FCAV-Unesp onde foram realizados os experimentos com folhas de híbridos de milho de diferentes tecnologias. Os re... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fall armyworm Spodoptera frugiperda is the major pest of corn in tropical and subtropical regions in the American Continent. Among the most used methods to control this pest in Brazil, it highlights the use of genetically modified plants from the insertion of a Bacillus thuringiensis gene that confers to the plant the expression of proteins with insecticidal actions. However, after two or three years these technologies reduce the degree of suppression of larvae, mainly due to the continuous and inadequate use of the technology. The objective of this work was to study in field conditions, the behavior of Bt corn hybrids against lepidopteran attacks as S. frugiperda and Helicoverpa zea in four corn-producing regions of São Paulo State, as well as to study in laboratory conditions the comparative biology of populations of S. frugiperda collected in these regions. Field experiments were carried out during the second corn season in 2014 in the regions of Médio Paranapanema, Centro Norte, Noroeste and Norte of São Paulo State where were used 25 corn cultivars with the expression of different insecticidal proteins. To the comparative biology study, the larvae were collected in the four regions of the state, the larvae were sent to Integrated Pest Management Laboratory of FCAV-Unesp where the experiments were carried out with leaves of corn hybrids of different technologies. The results of field experiments demonstrate that the insecticidal protein VIP3Aa20 presents a high level of suppression on the populations of S. frugiperda and H. zea, in addition, the corn hybrids that express the insecticidal protein Cry1F were the most susceptible against the attack of these two pests. Through the results obtained from the experiments of comparative biology, it was verified that the insecticidal protein VIP3Aa20 provided 100% of mortality of la... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: Os principais componentes do feromônio sexual de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794), a broca da cana, (Z,E)-9,11-hexadecadienal e (Z)-11-hexadecenal, foram identificados e quantificados em quatro populações do Brasil e uma população da Colômbia utilizando GC-EAD, GC-MS e GC. Três razoes distintas entre os compostos foram observadas; 9:1, 6:1 e 3:1. O componente majoritário, Z,E)-9,11-hexadecadienal, apresentou concentração que variou de 6,8 a 21,9 ng glândula-1. No caso do (Z)-11- hexadecenal, a concentração variou de 1,7 a 6,5 ng glândula-1. Vinte e cinco sequências do citocromo oxidase II de D. saccharalis foram analisadas, apresentando variação intraespecifica baixa, sendo representadas por onze haplótipos. O mais freqüente foi representado pelos espécimes dos estados brasileiros de São Paulo, Paraná e Pernambuco. Os espécimes colombianos apresentaram a maior divergência genética. Os valores de variabilidade genética entre os espécimes foram coincidentes com aqueles obtidos nas análises dos extratos do feromônio sexual. Estes resultados evidenciam uma variação na composição do feromônio e uma co-variação nos haplótipos das populações de D. saccharalis estudadas. Análises dos extratos de feromônio sexual de fêmeas de D. saccharalis obtidos de fêmeas virgens 2 ou 3 dias de idade evidenciaram a presença de quatro componentes EAD - ativos. Os componentes do eromônio sexual de D. saccharalis foram identificados via GCMS e co-injeção com padrões sintéticos. Dois novos componentes minoritários, hexadecanal e (Z)-9-hexadecenal, foram identificados. Também foram descritos neste estudo o (Z,E)- 9,11-hexadecadienal e o (Z)-11-hexadecenal. A razão apresentada entre os quatro componentes, (Z,E)-9,11-hexadecadienal, hexadecanal, (Z)-11-hexadecenal e (Z)-9- hexadecenal, foi de 17:1,4:1:1, respectivamente. Neste trabalho também foram avaliadas as expressões das proteínas ligantes de feromônio, PBP, presentes em machos e fêmeas de D. saccharalis expostos a iferentes condições de luz; fotofase contínua e fotoregime de 12h de fotofase e 12 h de escotofase. Também foi avaliado o padrão de expressão das PBPs em ambos os sexos. Os extratos de proteína total dos tecidos foram analisados empregando eletroforese em SDS-PAGE, mostrando uma separação uniforme das subunidades de proteína. A expressão da proteína imunorreativa BmoriPBP foi negativa nas pernas de ambos os sexos. Por outro lado, a expressão foi positiva nas antenas de machos e fêmeas. Os machos apresentaram duas bandas expressas com massas molares de aproximadamente 15 kDa e 18 kDa, cada uma delas. Para as fêmeas, no entanto, uma única banda foi observada, com massa molar aparente de 15 kDa. O presente estudo confirmou a independência da expressão das PBP para a D. saccharalis, em relação às condições de fotoperíodo. Finalmente, aspectos como início, duração e padrão temporal de chamamento, e número de vezes de exposição da glândula produtora de feromônio de Diatraea indigenella Dyar & Heinrich, 1927 (Lepidoptera: Crambidae) foram observados durante sete escotofases. O comportamento de chamamento ocorreu desde a emergência das fêmeas com um decréscimo no número de vezes que a glândula era exposta e na duração após a sexta escotofase. A maior porcentagem de fêmeas chamando se deu seis horas após o início da escotofase. O principal componente do feromônio sexual foi identificado a partir de extratos obtidos de fêmeas virgens utilizando GC-EAD, GC-MS e bioensaios em olfatômetro. O componente majoritário foi identificado como (Z,E)-9,11-hexadecadienal (Z9,E11-16:Ald). Foram ainda observados dois componentes minoritários ativos frente a antenas de machos. A concentração do (Z9,E11-16:Ald) variou de 2,53 to 13,7 ng glândula-1, sendo o maior valor detectado na sexta hora da escotofase. Embora os tempos de retenção dos dois compostos minoritários presentes no extrato tenham sido estimados pelas respostas observadas no EAD, as suas estruturas químicas não foram onfirmadas devido às baixas concentrações nos extratos. Bioensaios empregando olfatômetro mostraram que os extratos obtidos das glândulas e o componente majoritário atraíram 86% e 68% dos machos, respectivamente, quando testados individualmente contra hexano. Porém, uma atração significativa (77%) foi observada quando os extratos de glândula foram avaliados versus o padrão sintético do componente majoritário.

Resumo: O gênero Memphis (Nymphalidae: Charaxinae: Anaeini) compreende 113 taxa em 63 espécies, sendo o mais numeroso em espécies, na extensão da distribuição geográfica dentre os gêneros da tribo Anaeini, e em espécimes depositados em coleções científicas. As espécies pertencentes a este gênero apresentam variadas formas e padrões de coloração, e muitas delas possuem taxonomia confusa pela considerável variação intraespecífica e dimorfismo sexual. São lepidópteros de vôo rápido e alto, habitantes de copas de árvore e geralmente só observados quando descem próximo ao solo para se alimentar de matéria orgânica em decomposição e excrementos de animais. Espécies atualmente em Memphis foram descritas ou combinadas, no decorrer da história, com uma diversidade de nomes genéricos causando grande divergência entre a composição do gênero, assim como de aceitação e estrutura dos gêneros Anaea, Annagrapha, Cymatogramma, Fountainea e Rydonia. Historicamente, sinonímias e mudanças de categoria taxonômicas vêm sendo realizadas sem embasamento filogenético. Em vista da confusão na sistemática em Memphis, o presente estudo testou a relação entre os taxa através das metodologias cladísticas e probabilística, a partir de matrizes de dados morfológicas e moleculares, abarcando representantes de onze grupos de espécies previamente propostos e de espécies de outros gêneros de Anaeini, Preponini e Prothoini, aprimorando a classificação a partir dos resultados obtidos. A amostragem incluiu todas as espécies de Memphis atualmente reconhecidas, exceto M. viloriae, conhecida apenas do exemplar tipo. Uma matriz com 239 caracteres para 85 terminais foi construída através de estudo da morfologia de estágios imaturos, imagos de ambos os sexos, e caracteres comportamentais. Estes dados foram analisados através da metodologia cladística utilizando o critério da parcimônia com pesagens igual e implícita. Adicionalmente, 658 pares de base do gene citocromo oxidade, subunidade I, foram obtidos para 81 terminais e analisados através da máxima verossimilhança e análise bayesiana; e uma matriz combinada de ambos os conjuntos de dados, com 879 caracteres e 85 terminais foi analisada através da análise bayesiana. Os resultados das análises baseadas na morfologia e em dados combinados suportam o monofiletismo da maior parte dos gupos de espécies previamente propostos e dos gêneros Annagrapha, Cymatogramma, Fountainea, Memphis e Rydonia, com o reconhecimento de um novo gênero com duas espécies, Gênero Novo otrere comb. nov. e Gênero Novo hirta comb. nov. O relacionamento entre os gêneros recuperado pela análise com pesagem implícita é a seguinte: (((Prothoe) (Archaeoprepona (Prepona Agrias)) ((Zaretis Siderone) (Hypna (Consul (Anaea (Polygrapha (Fountainea (Cymatogramma ((Gen. Nov. otrere Gen. Nov. hirta) ((Rydonia Annagrapha) Memphis))))))))))). A análise combinada recupera uma topologia semelhante, porém com menor resolução e diferenças no posicionamento dos gêneros Rydonia, Annagrapha e o Gênero Novo. Nas análises somente com dados moleculares, a maioria dos grupos de espécies é recuperado como monofilético, porém, devido à baixa resolução dos nós internos, o monofiletismo não é recuperado para todos os gêneros propostos. Os resultados das análises filogenéticas suportam a aceitação dos gêneros Annagrapha, Cymatogramma e Rydonia, novas sinonímias, estados revalidados, estados novos, combinações revalidadadas, combinações novas, um gênero novo e uma subespécie nova de F. halice. São fornecidas diagnoses, re-descrições, descrições dos estágios imaturos, dados de distribuição e comentários taxonômicos para cada um dos gêneros reconhecidos. Em Fountainea são alocadas as seguintes espécies: F. centaurus, F. cratais stat. rev., F. eurypyle, F. glycerium, F. halice, F. johnsoni stat. rev., F. nessus, F. nobilis, F. rayoensis stat. rev., F. ryphea, F. sossipus, F. titan stat. rev.; em Cymatogramma, C. appias comb. rev., C. arginussa comb. rev., C. artacaena comb. rev., C. centralis comb. rev., stat. rev., C. glauce comb. rev., C. hedemanni comb. rev., C. herbacea comb. rev., C. juliani comb. rev., C. lankesteri comb. rev., stat. rev., C. lemnos comb. rev., C. neidhoeferi comb. rev., C. perenna comb. rev., C.pithyusa comb. rev., C. praxias comb. rev., C. verticordia comb. rev., C. xenippa comb. rev., C. xenocles comb. rev.; em Annagrapha, A. anna comb. rev., A. aureola comb. rev., A. dia comb. rev., A. elina comb. rev., stat. rev., A. polyxo comb. rev.; em Rydonia, R. falcata comb. rev., R. pasibula comb. rev., R. wellingi comb. nov.; no gênero novo, Gen. Nov. otrere comb. nov. e Gen. Nov. hirta comb. nov.; e em Memphis, M. acidalia, M. alberta, M. ambrosia, M. anassa, M. aulica, M. basilia, M. beatrix, M. boliviana, M. catinka, M. cerealia, M. cleomestra, M. cluvia, M. editha, M. forreri, M. grandis, M. gudrun stat. rev., M. iphis, M. laertes, M. laura, M. leonida, M. lineata, M. lorna, M. lyceus, M. maria, M. montesino, M. mora, M. moruus, M. nenia, M. offa, M. phantes, M. philumena, M. phoebe stat. rev., M. polycarmes, M. proserpina, M. pseudiphis, M. salinasi, M. viloriae.

Orientador: Sergio Antonio De Bortoli / Coorientador: Alessandra Marieli Vacari / Banca: Santin Gravena / Banca: Pedro Takao Yamamoto / Resumo: Espécies da família Brassicaceae fazem parte da alimentação básica mundial. Suas características nutricionais mostram altos teores de vitaminas, fibras, minerais, fenóis, flavonóides, ácido hidroxicinâmico, açúcares solúveis, ácidos graxos e carotenoides, além de substâncias secundárias como glucosinolatos que, atualmente, são reconhecidos pelas propriedades antioxidantes e anticancerígenas. A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella, é um dos principais fatores limitantes deste cultivo no mundo, devido aos sérios danos que causa às plantas, depreciando o produto e ocasionando grandes perdas nos campos de produção, portanto, o conhecimento do desenvolvimento deste inseto em diferentes cultivares é importante para que se possa determinar aquelas menos propícias para o inseto. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi verificar se houve influência do substrato alimentar das lagartas (variedades de Brassicaceae) no desenvolvimento de P. xylostella, ao longo de 18 gerações. Os insetos foram criados em 3 variedades/cultivares de importância comercial para a região nordeste do Estado de São Paulo: Brassica oleracea var. acephala - couve Manteiga hibrida HS-20, Brassica oleracea var. italica - brócolis Piracicaba e Brassica oleracea var. capitata - repolho Bob Cat. A cada 3 gerações aspectos biológicos do inseto criado nos diferentes substratos de alimentação foram avaliados em ensaios de laboratório. As características biológicas analisadas foram: consumo foliar, período larval, viabilidade de larvas, período pupal, viabilidade de pupas, peso pupal, razão sexual, número de ovos por fêmea, fertilidade de ovos, longevidade de machos e longevidade de fêmeas. Os resultados foram submetidos a análise fatorial comparando-se gerações e cultivares. Os parâmetros biológicos de P. xylostella demonstraram que repolho foi o menos consumido e o que apresentou ... / Abstract: Species of Brassicaceae family are part of the global food base. Nutritional characteristics of brassics show high levels of vitamins, fiber, minerals, phenols, flavonoids, hydroxycinnamic acid, soluble sugars, fatty acids and carotenoids, and secondary substances such as glucosinolates that are currently recognized by the antioxidant and anti-carcinogenic effects. The diamondback moth, Plutella xylostella, is one of the main limiting factors of this crop in the world, due to the serious damage that cause to plants, depreciating the product and causing serious reductions in the field production. The knowledge of the biology of this insect in different cultivars is important so that you can determine those less favorable to the pest development and reproduce. In this context, the objective of this study was to evaluate the influence of the larvae food substrate (Brassicaceae's varieties) in the P. xylostella development over 18 generations. Insects were reared on 3 comercial varieties/cultivars of importance to the northeastern of Sao Paulo State: Brassica oleracea var. acephala - kale Manteiga hibrida HS-20, Brassica oleracea var. italica - broccoli Piracicaba and Brassica oleracea var. capitata - cabbage Bob Cat. Every 3 generations the biological aspects of P. xylostella were evaluated in laboratory trials. The biological parameters evaluated were: leaf consumption, larval period, larval viability, pupal period, pupal viability, pupal weight, sex ratio, number of eggs per female, egg fertility, and longevity of males and females. The results were analysed comparing generations and cultivars. The biological parameters of P. xylostella showed that cabbage cultivar was less consumed and the larval period was longer while the pupal period was shorter. However, the low initial performance of this cultivar was being improved over the generations, matching the others in the latest generations ... / Mestre

Orientador: Alcebiades Ribeiro Campos / Banca: Marineide Rosa Vieira / Banca: Luciana Cláudia Toscano Maruyama / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a resistência de cultivares de amendoim a Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). O trabalho foi dividido em duas etapas, sendo que na primeira avaliou-se a atratividade e a não-preferência alimentar, com e sem chance de escolha, de lagartas recém-eclodidas em folhas de sete cultivares de amendoim. Utilizaram-se cultivares de amendoim de hábitos de crescimento ereto (IAC Tupã, Iapar 25 (Tição) e IAC-Tatú-ST) e rasteiro (IAC 505, IAC-Caiapó, IAC Runner 886 e Cavalo Amarelo). No teste de atratividade utilizou-se um sistema de arena em placas de Petri com 20 cm de diâmetro e com dez repetições. Para cada repetição (arena) foram liberadas 20 lagartas recém- eclodidas de S. frugiperda, avaliando o número total de lagartas atraídas pelos discos foliares dos cultivares aos 5, 10, 15, 20, 25, 30 e 60 minutos. Para a avaliação de não-preferência alimentar, no teste com chance de escolha, os procedimentos e os cultivares utilizados foram os mesmos adotados no teste de atratividade. No teste, sem chance de escolha, os cultivares foram individualizados em placas de Petri de 6,0 cm de diâmetro e seu interior foram liberadas 20 lagartas recém-eclodidas por repetição, com 10 repetições. Na avaliação, contou-se o número total de lagartas que estavam se alimentando nos discos foliares dos cultivares após 24 horas da liberação. Na segunda etapa foi realizado estudos da biologia de S. frugiperda em seis cultivares de amendoim. As lagartas recém-eclodidas foram alimentadas com folhas dos seguintes cultivares: IAC-Caiapó, Runner IAC 886 e IAC 505 (hábitos de crescimento rasteiro), e Iapar 25 (Tição), IAC-Tatú-ST e IAC Tupã (de hábitos de crescimento ereto). Assim, 30 lagartas por cultivar, provenientes de ovos obtidos em laboratório, foram mantidas em placas de Petri... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to study the resistance of peanut cultivars to Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). The study was divided into two parts: in the first we evaluated, in free-choice and no-choice tests, the attractiveness and non- preference for feeding of newly-hatched caterpillars on leaves of seven peanut cultivars. Peanut cultivars upright growth habit (IAC Tupã, Iapar 25 (Tição) and IAC-Tatú-ST) and runner growth habit (IAC 505, IAC-Caiapó, Runner IAC 886 and Cavalo Amarelo) were evaluated. An arena system was used in the attractiveness test, consisting of Petri dishes (20 cm diameter), with ten replicates. Twenty newly-hatched S. frugiperda caterpillars were released for each replicate (arena); counts were obtained for the total number of caterpillars attracted to the leaf discs of the various cultivars at 5, 10, 15, 20, 25, 30, and 60 minutes. In the free-choice test to evaluate non-preference for feeding, the same procedures and cultivars used in the attractiveness test were adopted. In the no- choice test the materials were individualized in Petri dishes (6.0 cm diameter); twenty newly-hatched caterpillars per replicate were released into the dishes, with 10 replicates. The test was evaluated by counting the total number of caterpillars feeding on the leaf discs of the various cultivars 24 hours after release. In the second part of the investigation we conducted studies on the biology of S. frugiperda on six peanut cultivars. Newly-hatched caterpillars were fed leaves of the following peanut cultivars: IAC-Caiapó, Runner IAC 886 and IAC 505 (runner growth habit), Iapar 25 (Tição), IAC-Tatú-ST and IAC Tupã (upright growth habit). Thirty caterpillars per cultivar, resulting from eggs obtained in the laboratory, were maintained in individualized Petri dishes (6.0 cm diameter and 2.0 cm in height) until pupation. The pupae were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-08Bitstream added on 2014-06-13T18:39:34Z : No. of bitstreams: 1 queiroz_ms_me_ilha.pdf: 369335 bytes, checksum: d91c6e5e65859485d1981b56241d3d31 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo estudar a resistência de cultivares de amendoim a Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). O trabalho foi dividido em duas etapas, sendo que na primeira avaliou-se a atratividade e a não-preferência alimentar, com e sem chance de escolha, de lagartas recém-eclodidas em folhas de sete cultivares de amendoim. Utilizaram-se cultivares de amendoim de hábitos de crescimento ereto (IAC Tupã, Iapar 25 (Tição) e IAC-Tatú-ST) e rasteiro (IAC 505, IAC-Caiapó, IAC Runner 886 e Cavalo Amarelo). No teste de atratividade utilizou-se um sistema de arena em placas de Petri com 20 cm de diâmetro e com dez repetições. Para cada repetição (arena) foram liberadas 20 lagartas recém- eclodidas de S. frugiperda, avaliando o número total de lagartas atraídas pelos discos foliares dos cultivares aos 5, 10, 15, 20, 25, 30 e 60 minutos. Para a avaliação de não-preferência alimentar, no teste com chance de escolha, os procedimentos e os cultivares utilizados foram os mesmos adotados no teste de atratividade. No teste, sem chance de escolha, os cultivares foram individualizados em placas de Petri de 6,0 cm de diâmetro e seu interior foram liberadas 20 lagartas recém-eclodidas por repetição, com 10 repetições. Na avaliação, contou-se o número total de lagartas que estavam se alimentando nos discos foliares dos cultivares após 24 horas da liberação. Na segunda etapa foi realizado estudos da biologia de S. frugiperda em seis cultivares de amendoim. As lagartas recém-eclodidas foram alimentadas com folhas dos seguintes cultivares: IAC-Caiapó, Runner IAC 886 e IAC 505 (hábitos de crescimento rasteiro), e Iapar 25 (Tição), IAC-Tatú-ST e IAC Tupã (de hábitos de crescimento ereto). Assim, 30 lagartas por cultivar, provenientes de ovos obtidos em laboratório, foram mantidas em placas de Petri... / This study aimed to study the resistance of peanut cultivars to Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). The study was divided into two parts: in the first we evaluated, in free-choice and no-choice tests, the attractiveness and non- preference for feeding of newly-hatched caterpillars on leaves of seven peanut cultivars. Peanut cultivars upright growth habit (IAC Tupã, Iapar 25 (Tição) and IAC-Tatú-ST) and runner growth habit (IAC 505, IAC-Caiapó, Runner IAC 886 and Cavalo Amarelo) were evaluated. An arena system was used in the attractiveness test, consisting of Petri dishes (20 cm diameter), with ten replicates. Twenty newly-hatched S. frugiperda caterpillars were released for each replicate (arena); counts were obtained for the total number of caterpillars attracted to the leaf discs of the various cultivars at 5, 10, 15, 20, 25, 30, and 60 minutes. In the free-choice test to evaluate non-preference for feeding, the same procedures and cultivars used in the attractiveness test were adopted. In the no- choice test the materials were individualized in Petri dishes (6.0 cm diameter); twenty newly-hatched caterpillars per replicate were released into the dishes, with 10 replicates. The test was evaluated by counting the total number of caterpillars feeding on the leaf discs of the various cultivars 24 hours after release. In the second part of the investigation we conducted studies on the biology of S. frugiperda on six peanut cultivars. Newly-hatched caterpillars were fed leaves of the following peanut cultivars: IAC-Caiapó, Runner IAC 886 and IAC 505 (runner growth habit), Iapar 25 (Tição), IAC-Tatú-ST and IAC Tupã (upright growth habit). Thirty caterpillars per cultivar, resulting from eggs obtained in the laboratory, were maintained in individualized Petri dishes (6.0 cm diameter and 2.0 cm in height) until pupation. The pupae were... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Renato Assis de Carvalho / Resumo: Chrysodeixis includens (Walker) e Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) são consideradas pragas de grande importância na cultura da soja, enquanto Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) é considerada importante na cultura do milho no Brasil Central. Para o controle bem-sucedido dessas pragas usando plantas Bt, bem como o desenvolvimento de estratégias do manejo de resistência, é essencial conhecer a movimentação do estágio larval desses insetos. O estudo foi conduzido dentro de gaiolas teladas (3,00 x 3,00 x 1,80 m), a fim de evitar infestações naturais. As lagartas foram liberadas em uma planta localizada no centro das gaiolas. As lagartas e as injurias foram observadas a fim de registrar a posição na planta e a localização na gaiola. Lagartas de C. includens e H. armigera apresentaram movimentação entre as plantas de soja, enquanto lagartas de D. saccharalis praticamente se mantiveram nas plantas onde houve a liberação. Com isso, a adoção de mistura de sementes não Bt e Bt para o estabelecimento de refúgio em cultivos Bt pode ser adequado apenas para D. saccharalis. / Abstract: Chrysodeixis includens (Walker) and Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) are considered pests of great importance in soybean crop, while Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) is considered important in maize crop in the Brazilian Central region. For the successful control of these pests using Bt plants as well as development of resistance management strategies, it is essential to know the larval stage movement of these insects. The study was carried out inside saran cages (3.00 x 3.00 x 1.80 m), in order to avoid natural infestation. Larvae were released in a plant located in the center of the cages. Larvae and injuries were observed in order to register the position in the plant and the location in the cage. Larvae of C. includens e H. armigera moved between soybean plants, whereas D. saccharalis practically remained in the plants where they were released. Thus, the adoption of non-Bt and genetically modified seed mixture for refuge establishment in Bt crops may be suitable only for D. saccharalis. / Mestre

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Agda Paula Facincani / Banca: Paula Cristina Brunini Crialesi Legori / Banca: Juliana Regina Rossi / Resumo: As proteínas Vip3Aa e Cry1Ia apresentam potencial no controle de lepidópteros-praga e surgem como alternativa promissora no manejo da resistência de pragas as proteínas Cry1A, que tem sido altamente utilizada na formulação de bioinseticidas comerciais à base de Bacillus thuringiensis (Bt) e em plantas transgênicas. Assim sendo, o presente trabalho teve como objetivo a clonagem e expressão das proteínas Vip3Aa42, Vip3Aa43 e Cry1Ia10 em Escherichia coli, a fim de se analisar a correlação entre a união aos receptores por meio de análises de competição entre as diferentes toxinas Vip3Aa e a toxina Cry1Ia10, e a toxicidade a lepidópteros-praga, inferindo-se quais as combinações que poderiam ser utilizadas na produção de plantas transgênicas, contendo múltiplos genes, as quais vêm sendo empregadas para contornar a evolução da resistência dos insetos às toxinas Bt. Para tanto, os genes vip3Aa e cry1Ia10 foram clonados no vetor pET SUMO, expressos em E. coli e a toxicidade das proteínas foram testadas em bioensaios com lagartas neonatas de Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis e Heliothis virescens. As BBMVs ("Brush Border Membrane Vesicles") foram preparadas a partir dos intestinos das três espécies e ensaios de competição homóloga e heteróloga foram realizados. As proteínas Vip3Aa42 e Vip3Aa43 apresentaram toxicidade para S. frugiperda e A. gemmatalis. Já a proteína Cry1Ia10 apresentou toxicidade apenas para A. gemmatalis e, as proteínas não se mostraram tóxicas para H. virescens. Os ensaios de ligação às BBMVs demonstraram que as proteínas Vip3Aa42, Vip3Aa43 e Cry1Ia10 se unem aos receptores presentes no intestino médio de forma efetiva nas três espécies e que, portanto, houve correlação entre a toxicidade e a união aos receptores para as populações de S. frugiperda e A. gemmatalis, porém para H. virescens não houve relação entre a toxicidade e a união aos receptores. Sendo assim ... / Abstract: Vip3Aa and Cry1Ia proteins have potential in control of Lepidopteran pest and emerge as a promising alternative in the pest resistance management the Cry1A proteins, which has been highly used in the formulation of commercial insecticides based on Bacillus thuringiensis (Bt) and in transgenic plants. Therefore, this study aimed to cloning and expression of Vip3Aa42, Vip3Aa43 and Cry1Ia10 proteins in Escherichia coli, in order to analyze the correlation between the binding to receptors through competition assays between the different Vip3Aa toxins and toxin Cry1Ia10, and toxicity to lepidopteran pests inferring up which combinations that could be used to produce transgenic plants containing multiple genes, which have been used to circumvent the development of insects resistance to Bt toxins. Therefore, vip3Aa and cry1Ia10 genes were cloned into the pET SUMO vector, expressed in E. coli and toxicity of proteins were tested in bioassays with neonate larvae of Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis and Heliothis virescens. The BBMVs (Brush Border Membrane Vesicles) were prepared from the gut of the three species, and homologous and heterologous competition assays were performed. The Vip3Aa42 and Vip3Aa43 proteins were toxic to S. frugiperda and A. gemmatalis. Already Cry1Ia10 protein showed toxicity only for A. gemmatalis and proteins were not toxic to H. virescens. Binding assays to BBMVs demonstrated that Vip3Aa42, Vip3Aa43 and Cry1Ia10 proteins binding effectively to receptors present in the midgut in three species and, therefore, was correlation between toxicity and the binding to receptors for the populations of S. frugiperda and A. gemmatalis, but for H. virescens there was no relationship between toxicity and the binding to receptors. Thus, the combination of Cry1Ia10 and Vip3Aa42 or Vip3Aa43 proteins is indicated for the production of biological insecticidal, as well as for the production of transgenic plants to circumvent ... / Doutor

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Vivian Boter Bergamasco / Banca: Sonia Marli Zingaretti / Banca: Odair Aprecido Fernandes / Banca: Ana Maria Guidelli Thuler / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a toxicidade e a interação entre proteínas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab e Vip3Aa em lagartas neonatas de Anticarsia gemmatalis, Chrysodeixis includens e Spodoptera frugiperda. Lisados das proteínas foram utilizados em bioensaios com lagartas neonatas para determinar a CL50 e CL90 das proteínas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab e Vip3Aa e realizar experimentos histopatológicos. Ensaios de competição, entre as proteínas Cry1, Cry2 e Vip3 biotiniladas, foram realizados com as proteínas das vesículas de membrana da microvilosidade apical do intestino médio ("Brush Border Membrane Vesicles" - BBMV) das lagartas. Foi feita a purificação de receptores para toxina Cry1Ac a partir da BBMV de A. gemmatalis e C. includens por afinidade seguida da identificação das proteínas ligantes. As toxinas Cry1A e Cry2A demonstraram maior toxicidade para A. gemmatalis e C. includens que a proteína Vip3Aa, porém o inverso foi observado em S. frugiperda. As lagartas da espécie A. gemmatalis se mostraram mais suscetíveis as proteínas testadas do que as de S. frugiperda e C. includens. As espécies diferiram também quanto ao tipo de interação entre as toxinas. Enquanto para S. frugiperda e C. includens, as interações foram sinérgicas, para A. gemmatalis foram predominantemente antagônicas. As proteínas se uniram aos receptores presentes nas BBMV de S. frugiperda, A. gemmatalis e C. includens, permitindo inferir sobre a presença e ausência de comp... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to study the toxicity and interaction between Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab and Vip3Aa proteins in neonate larvae of Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis and Chrysodeixis includens. Lysates containing proteins were used in bioassays for the determination of LC50 and LC90 of the Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Aa, Cry2Ab and Vip3Aa proteins. Histopathological experiments were realized with A. gemmatalis, C. includens (fed with Cry1Ac and Vip3Aa) and S frugiperda (fed with Cry1Ab and Vip3Aa). Competition assays, among biotinylated Cry1, Cry2 and Vip3 proteins, were performed with brush border membrane vesicles (BBMV) proteins from A. gemmatalis, C. includens and S. frugiperda. Purification of Cry1Ac receptors from A. gemmatalis and C. includens BBMV was performed by affinity followed by identification of binding proteins. The Cry1A and Cry2A toxins demonstrated higher toxicity to A. gemmatalis and C. includens than the Vip3Aa protein, but the inverse was observed to S. frugiperda. A. gemmatalis larvae were more susceptible as Cry and Vip proteins than as S. frugiperda and C. includens. Species differed about type of protoxins interaction. While for S. frugiperda and C. includens, the protoxins showed as synergistic interactions, for A. gemmatalis they were predominantly antagonistic. It was possible to infer about presence and absence of competition of the receptors in the BBMV from S. frugiperda, A. gemmatalis and C. includens. Histopathological changes as vacuolization and disruption were observed in the intestine from S. frugiperda larvae, fed with Cry1Ab and Vip3Aa and A. gemmatalis and C. includens, fed with Cry1Ac and Vip3Aa. Putative receptors were to identified from A. gemmatalis and C. includens to Cry1Ac toxin. The combination of Cry and Vip proteins, as well as helping to manage resistance and can increase toxicity through synergistic acti... (Complete abstract electronic access below) / Doutor