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Din?mica das c?lulas T auxiliares foliculares nas infec??es virais : foco em V?rus Sincicial Respirat?rioGassen, Rodrigo Benedetti 26 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-26 / Introduction: Viruses cause diseases in humans and can cause epidemics and pandemics leading to death of thousands of people. When a virus infects the body, the immune system is activated to control the infection. The primary response against viruses consist mainly of cytotoxic CD8+ T cells and antibodies produced by B cells, however, both B and CD8 + T cells require auxiliary CD4 + T cells to generate an effective response. The production of antibodies needs a specific type helper cells, CD4 + follicular T cells (TFH). Both responses can generate memory, so in a second infection by the same virus strain can respond more efficient way.
In these next two articles we discuss the TFH cell function towards viral response. First we produced an article that reviews all studies that performed a connection between this cell population and different viruses, such as HIV, HBV, EBV, LCMV and influenza. We next present an original article trying to unravel the mechanism by which the Respiratory Syncytial Virus (RSV) inhibits adequate humoral immune responses. Antibodies generated in RSV infections often have low affinity and little neutralizing activity, resulting in the accumulation of inflammatory immune complexes in the lower airways of children under 2 years of age. RSV can lead to death by bronchiolitis and pneumonia in approximately 50% of cases and increases the chance of developing asthma later in life. The TFH cells play an important role in helping B cells for class switching and the production of high affinity immunoglobulin.
Objective: To understand the immunological mechanisms related to TFH cells in viral responses and investigate the mechanisms underlying the effect of RSV in decreasing antibody efficiency.
Methods and Results: In the first article we reviewed Medline / Pubmed for original articles published from 2008 to 2014, using the terms "TFH" and "Virus" together. In the second article was conducted original research with animal models, focused on determining the interaction of RSV with the TFH cells. In our model, RSV was able to increase the amount of TFH cells in vitro, promoting their proliferation (Ki67) and death (Annexin-V). In vivo, RSV did not induce an increase in germinal centers and decreased the amount of IgG antibodies. We observed that RSV was capable of PD-L1 induction in dendritic cells as well in B cells. Conclusion: TFH cells are crucial for anti-viral humoral responses. Different types of viruses interact through varied mechanisms with the immune system. Our results suggest that the RSV induces PD-L1 in dendritic cells and B cells, and may be able to cause death by apoptosis in TFH cells, reducing the size of germinal centers and decreasing the amount of antibodies / Introdu??o: Os v?rus que causam doen?as em humanos podem causar epidemias e pandemias levando ? morte de milhares de pessoas. Quando um v?rus infecta o organismo, o sistema imunol?gico ? ativado para tentar controlar essa infec??o. A principal resposta contra v?rus em geral consiste em c?lulas T CD8+ citot?xicas e os anticorpos produzidos por c?lulas B. Contudo, tanto as c?lulas B como as T CD8+ necessitam de c?lulas auxiliares T CD4+ para uma resposta eficiente, sendo que a produ??o de anticorpos precisa de um tipo especifico de c?lulas auxiliares, as c?lulas T CD4+ foliculares (TFH). Ambas as respostas podem gerar mem?ria, assim em uma segunda infec??o pela mesma cepa viral podemos responder de maneira mais eficaz.
Nesses dois artigos seguintes discutiremos a fun??o de c?lulas TFH na resposta viral. Primeiramente temos um artigo que revisa todos os estudos que conseguiram fazer uma liga??o entre essa popula??o celular e v?rus diversos, como HIV, HBV, EBV, LCMV e Influenza. Ap?s temos um artigo original tentando desvendar o mecanismo pelo qual o V?rus Sincicial Respirat?rio (RSV) inibe uma resposta imunol?gica humoral adequada. Anticorpos gerados em infec??es pelo RSV frequentemente possuem baixa afinidade e pouco poder de neutraliza??o, gerando ac?mulo de imunocomplexos inflamat?rios nas vias a?reas inferiores em crian?as at? os 2 anos de idade. Isso pode levar ? morte por bronqueolite e pneumonia em cerca de 50% dos casos, e aumenta a chance de desenvolvimento de asma na vida adulta. As c?lulas TFH tem um importante papel na ajuda ?s c?lulas B, para a produ??o de anticorpos de alta afinidade, e troca de classe de imunoglobulinas.
Objetivo: Entender os mecanismos imunol?gicos relacionados ?s c?lulas TFH nas respostas virais e descobrir como o RSV diminui a efici?ncia dos anticorpos.
M?todos e Resultados: No primeiro artigo foi realizada uma revis?o nas bases de dados Medline/Pubmed por artigos originais publicados no per?odo de 2008 a 2014, utilizando os termos ?TFH? e ?Virus? juntos. J? no segundo artigo foi realizada uma pesquisa original com modelo animal, focada em determinar a intera??o do RSV com as c?lulas TFH. O RSV foi capaz de aumentar a quantidade de c?lulas TFH in vitro, aumentando tamb?m sua prolifera??o (Ki67) e morte (Anexina-V), diminuindo o tamanho dos centros germinativos in vivo e diminuindo a quantidade de anticorpos IgG contra ovalbumina. In vitro, o RSV induziu PD-L1 em c?lulas B e em c?lulas dendr?ticas.
Conclus?o: As c?lulas TFH s?o de fundamental import?ncia para a resposta humoral viral. Diferentes tipos de v?rus t?m formas peculiares de interagir com o sistema imune e assim com as c?lulas TFH, como podemos notar no artigo de revis?o. Os resultados do artigo original sugerem que o RSV pode comprometer a fun??o de c?lulas TFH ao induzir PD-L1 em c?lulas dendr?ticas e c?lulas B, impedindo o desenvolvimento do centro germinativo e diminuindo a quantidade de anticorpos.
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Artrite reumat?ide como modelo de imunossenesc?ncia prematuraPetersen, Laura Esteves 27 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-27 / The rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease, besides the physical damage, the RA has been associated with premature aging of the immune system (immunosenescence) and age-related morbidities, including a decline in cognitive functioning. Factors such as chronic inflammation and the use of glucocorticoids (GCs) for a long time, both related to RA, are potential mechanisms involved in cognitive dysfunction in the general population. Experimental studies have shown the beneficial contribution of immune cells on the central nervous system (CNS). Moreover, disorders, such as mild cognitive impairment and Alzheimer s disease, exhibit alterations in peripheral lymphocytes subtypes. Based on this, here we explore the relationship between cognitive function, disease activity score (DAS-28) and lymphocytes subsets in RA. Thirty patients with RA and 19 healthy controls, which did not differ significantly in sex, age and schooling were recruited in this study. Cognitive function (MMSE, logic and working memory), stress and depression were assessment through interviews where specific clinical questionnaires were applied. Lymphocytes were isolated from mononuclear cells of peripheral blood (PBMCs) and immuphenotyped by flow cytometry to investigate the following lymphocytes subsets: B cells, activated T cells, na?ve/memory T cells, regulatory FoxP3+ T cells, IL-17+ cells, natural killer (NK) cells, and senescence-associated CD28- T cells. RA patients had a lower cognitive performance on the MMSE, logical and working memory compared to healthy controls. Though, all individuals in both groups had a score higher than the cutoff point established by the MMSE. The time use of GC and the C-reactive protein (CRP) levels did not correlated with cognitive assessment. Patients had an increased proportions of regulatory T cells, na?ve CD4+ T cells and senesce-associated T cells (CD28-), but lowered percentages of B and memory CD8+ T cells compared to healthy controls. Early activated T cells (CD3+CD69+) and CD8+CD28- T cells were found negatively associated with cognition. Concluding, patients with RA have a lower cognitive performance compared to healthy controls. GC and CRP were not correlated with memory; however expansions of activated and senescence-associated T cells were correlated with poor memory performance. / A artrite reumatoide (AR) ? uma doen?a autoimune, que al?m da presen?a de danos f?sicos, tem sido associada com o envelhecimento prematuro do sistema imune (imunossenesc?ncia) e morbidades relacionadas ? idade, incluindo decl?nio no funcionamento cognitivo. Fatores como a inflama??o cr?nica e o uso de glicocorticoides (GCs), ambos relacionados a AR, s?o potenciais mecanismos envolvidos com a disfun??o cognitiva na popula??o geral. Estudos experimentais tem revelado a contribui??o ben?fica das c?lulas imunol?gicas sobre o sistema nervoso central (SNC). Al?m disto, patologias como o dano cognitivo leve e doen?a de Alzheimer apresentam altera??es nos subtipos linfocit?rios perif?ricos. Com base nisto, neste trabalho nos exploramos as rela??es entre fun??o cognitiva, score de atividade da doen?a (DAS-28), e subtipos linfocit?rios na AR. Trinta pacientes com AR e dezenove controles saud?veis, que n?o diferiram significativamente em rela??o a sexo, idade e escolaridade, foram recrutados neste estudo. A fun??o cognitiva (mini-exame do estado mental - MMSE, mem?ria l?gica e mem?ria de trabalho), estresse e depress?o foram avaliados atrav?s de entrevistas onde foram aplicados question?rios cl?nicos espec?ficos. Os linf?citos foram isolados das c?lulas mononucleares do sangue perif?rico (PBMCs), e imunofenotipados por citometria de fluxo para investigar a presen?a dos seguintes subgrupos: c?lulas B, c?lulas T ativadas, c?lulas T naive/mem?ria, c?lulas T regulat?ria (reg) CD4+FoxP3+, c?lulas IL-17+, c?lulas natural killer (NK), e c?lulas T CD28- associadas a senesc?ncia. Os pacientes com AR tiveram um desempenho cognitivo inferior no MMSE, mem?ria l?gica e mem?ria de trabalho se comparado a controles saud?veis. Embora todos os indiv?duos, de ambos os grupos, tiveram uma pontua??o superior ? estabelecida pelo cutoff do MMSE. O tempo de uso de GCs e os n?veis de prote?na C - reativa (PCR) n?o se correlacionaram com avalia??o cognitiva. Os pacientes tem aumento nas propor??es de c?lulas Treg, c?lulas T CD4+ naive e c?lulas T associadas a senesc?ncia (CD28), mas baixas porcentagens de c?lulas B e c?lulas T CD8+ de mem?ria do que controles saud?veis. C?lulas T rec?m ativadas e c?lulas T CD8+CD28- foram negativamente associadas com a cogni??o. Concluindo, pacientes com AR tem um desempenho cognitivo inferior se comparado a controles saud?veis. GCs e PCR n?o se correlacionaram com mem?ria, no entanto, expans?o da popula??o de c?lulas T ativadas e c?lulas T associadas ? senesc?ncia foram correlacionadas com performance de mem?ria.
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Aspectos da prolifera??o celular na infec??o por HTLV-I e sua rela??o com o quadro cl?nico e a sensibilidade aos glicocortic?idesPillat, Micheli Mainardi 30 April 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-04-30 / Linf?citos de pacientes infectados com o v?rus linfotr?pico de c?lulas T humanas tipo I (HTLV-I) podem apresentar anergia a estimula??o e simultaneamente resist?ncia relativa ao efeito imunossupressor dos glicocortic?ides (GCs). Isto sugere que estas vari?veis s?o influenciadas por vias de sinaliza??o em comum. As quinases ativadas por mit?genos (MAPKs), subtipos de linf?citos e citocinas s?o candidatos potenciais para estes efeitos. Portanto, neste trabalho n?s avaliamos o envolvimento das (i) MAPKs p38 e ERK, (ii) subpopula??es de linf?citos (iii) e citocinas na anergia e na imunomodula??o induzida por GCs. Vinte e um portadores assintom?ticos (AC), dezenove pacientes com mielopatia associada ao HTLV-I / paraparesia esp?stica tropical (HAM/TSP) e vinte e um indiv?duos controles n?o infectados fizeram parte deste estudo. As c?lulas mononucleares do sangue perif?rico destes indiv?duos foram isoladas e mantidas em cultura para a avalia??o da prolifera??o e da sensibilidade a dexametasona. A express?o das fosfo-MAPKs, dos marcadores extracelulares e das citocinas foi avaliada por citometria de fluxo. Pacientes HAM/TSP apresentaram uma raz?o p38/ERK elevada que influenciou na baixa resposta aos mit?genos e na alta sensibilidade aos GCs nestes indiv?duos. Eles tamb?m apresentaram propor??es elevadas de c?lulas T ativadas e reguladoras CD8+CD28- que correlacionaram-se negativamente com as respostas aos mit?genos. Esses resultados sugerem que muitos mecanismos podem estar envolvidos na imunomodula??o relacionada a infec??o pelo HTLVI e na altera??o da sensibilidade aos GCs.
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A??o antiinflamat?ria, imunomoduladora e citot?xica do composto RDV 8Azambuja, Marcos Schuch de 27 August 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-08-27 / A proposta deste estudo foi avaliar o efeito antiinflamat?rio, imunomodulador e citot?xico do composto derivado de 4-tioxopirimidinas denominado RDV 8. Para investigar o efeito antiinflamat?rio usou-se o modelo de pleurisia induzida por carragenina em ratos, onde foram avaliados os par?metros da fase aguda da inflama??o. No modelo in vitro foi utilizado o m?todo de cultura de c?lulas mononucleares de sangue perif?rico (PBMCs) humano, tanto para investigar a a??o citot?xica quanto o efeito imunomodulador do RDV 8. No modelo in vivo foram utilizadas 30 ratas Wistar divididas em grupos controle e experimental. Meia hora (30min) ap?s a inje??o intraperitonial de RDV 8 (3,0 mg/kg) a carragenina (0.2mL) foi injetada na cavidade pleural para causar inflama??o. Ap?s 4 horas o volume de exudato, leuc?citos totais e contagem diferencial, concentra??o de prote?nas e ?xido n?trico (NO) foram mensurados no liquido pleural aspirado. No modelo de cultura de c?lulas foram utilizadas c?lulas mononucleares de 6 indiv?duos saud?veis, na faixa entre 17 e 40 anos. Estas c?lulas foram distribu?das em 11 grupos, 5 para avalia??o citot?xica e 6 para investiga??o imunomoduladora. Ap?s 96 horas (4 dias) as c?lulas foram contadas e retirados seus sobrenadantes, a fim de avaliar as concentra??es de interleucinas-1 (IL-1) e (IL-6) e a prote?na-1 quimioatraente de mon?citos (MCP-1 ou CCL2). Na pleurisia o RDV 8 reduziu significativamente (P<0,05) todas as vari?veis inflamat?rias exceto o numero de c?lulas polimorfonucleares (PMNs). Em nenhum dos testes de citotoxicidade ocorreu morte celularsignificativa nas concentra??es utilizadas, mas nos testes de imunossupress?o houve uma significante (P<0,05) imunossupress?o (antilinfoprolifera??o), diminui??o de MCP-1 e aumento da IL-6 na concentra??o de 0,1μg/mL. Esses resultados indicam uma a??o antiinflamat?ria e imunomoduladora do RDV 8, n?o apresentando a??o citot?xica nas concentra??es utilizadas nos experimentos.
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An?lise de par?metros imunol?gicos em mulheres com transtorno bipolar tipo I, eut?micasPrado, Carine Hartmann do 30 March 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-03-30 / Bipolar Disorder (BD) is a complex, multifactorial and chronic psychiatic illness. It is characterized by alternating cycles of mania and depression, with periods of remission or euthymia. Several studies have suggested a direct interaction between nervous, endocrine and immune systems in the pathophysiology of BD. An immune activation, as evidenced by increased plasma levels of proinflammatory cytokines, has been frequently reported in BD. However, the majority of the studies have mainly investigated mania and depression phases, and very few studies have been developed with euthymic patients. In this study, we investigated cellular and molecular mechanisms potentially involved in the inflammatory process in BD, including various lymphocytes subtypes and intracelular pathways of lymphocyte activation. Twentyseven euthymic female subjects with BD type I and 24 age- and sex-matched controls were recruited in this study. Lymphocytes were isolated and stimulated in vitro to assess Th1/Th17/Th2 cytokines (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-17, IFN-ע and TNF-?) and expression of mitogen-activated protein kinases (MAPKs). The expression of MAPKs (p-oERK and p38), lymphocyte subtypes and cytokines were assessed by flow cytometry. All cytokines assessed were found elevated in bipolar disorder compared with healthy controls. In particu-lar, it was evidenced a bias to a Th1 inflammatory profile in BD. Interestingly, we observed a significant reduction (-56%) of regulatory T cells (CD4+CD25+Foxp3+) and expansion (43%) of CD8+ regulatory T cells (CD8+CD28-) in BD. The lymphocytes of BD patients showed an significant increase in p-ERK in relation to p-p38, indicating lymphocyte activation. Our data suggest that multiple molecular and cellular mechanisms contribute to the immunological imbalance observed in BD / O Transtorno Bipolar (TB) ? uma doen?a psiqui?trica cr?nica, complexa e multifatorial, caracterizada por ciclos alternados de mania e depress?o, intercalados com per?odos de remiss?o ou eutimia. Diversos estudos v?m demonstrando associa??es entre sistema nervoso, end?crino e imunol?gico na patofisiologia do TB. Uma ativa??o imune, evidenciada por n?veis plasm?ticos aumentados de citocinas pr?-inflamat?rias, tem sido freq?entemente relatada no TB. No entanto, a maioria dos estudos refere-se principalmente ?s fases de mania e depress?o, e poucos estudos foram desenvolvidos na fase de eutim?a. Neste estudo, investigamos mecanismos celulares e moleculares potencialmente envolvidos no fen?meno inflamat?rio no TB, incluindo diversos subtipos linfocit?rios e vias intracelulares de ativa??o linfocit?ria. Vinte e sete pacientes mulheres com TB I eut?micos e 24 controles saud?veis pareados por sexo e idade foram recrutadas neste estudo. Os linf?citos foram isolados e estimulados in vitro para avaliar as citocinas Th1/Th17/Th2 (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-17, IFN-ע e TNF-?) e express?o de prote?nas cinases ativadas por mit?geno (MAPKs). A express?o das MAPKs (p-ERK e p-p38), subtipos linfocit?rios e citocinas foram avaliados por citometria de fluxo. Todas as citocinas avaliadas encontraram-se elevadas nos bipolares em compara??o com controles sau-d?veis. Em particular, foi evidenciado um vi?s para um perfil Th1 (inflamat?rio) no TB I. Interessantemente, observamos uma redu??o significativa (-56%) de c?lulas T regulat?rias (CD4+CD25+Foxp3+) e expans?o (43%) de c?lulas T CD8+ regulat?rias (CD8+CD28-) no TB. Os linf?citos dos pacientes bipolares apresentaram um aumento significativo de p-ERK em rela??o a p-p38, indicando uma ativa??o linfocit?ria. Concluindo, nossos dados sugerem que m?ltiplos mecanismos celulares e moleculares contribuem para um desequil?brio imune observado no TB
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Interleucinas no fluido do sulco gengival humano em resposta a aplica??o de for?aAllgayer, Susiane 12 March 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-14T20:09:46Z
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Previous issue date: 2015-03-12 / Tooth movement in response to orthodontic forces is results from remodeling changes that affect the periodontal ligament and the bone surrounding teeth. This movement may be faster or slower depending on the physical characteristics of the force applied and the biological response induced, and is characterized by zones of compression and tension on the periodontal ligament. Knowledge about the tissue changes generated in this process is essential to plan the movement of teeth and their adjoining structures into a new position without any damage to tissues. In this study, the literature was reviewed to improve our understanding of the cellular, biochemical and molecular phenomena that affect the structures of the periodontal ligament (PL), as well as the alveolar bone surrounding the tooth and involved in the tooth movement that is induced in the process. The purpose of our systematic review was to evaluate studies about cytokines in gingival fluid (GF) during orthodontic treatment, summarize the patterns of cytokine regulation that have been more frequently studied and discuss their clinical implications. Additionally, we investigated changes in immunological and bone modulators in response to the application of orthodontic forces. For that purpose, GF of teeth that were involved in maxillary expansion was evaluated qualitatively to measure interleukin concentrations and their predictive value as a market of inflammatory response intensity and bone turnover during orthodontic movement. The purpose of this investigation was to evaluate whether the force applied on the PL during maxillary expansion affected the composition of the gingival crevicular fluid (GCF), specifically the level of IL-17 on the sides where tension and compression were applied. GCF samples were collected from the mesiobuccal and mesiolingual areas of 32 molars of 16 patients aged 7 to 14 years who had to undergo maxillary expansion. These patients started orthodontic treatment sometime between 2012 and 2013 at the School of Dentistry of the Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul (PUCRS), Porto Alegre, Brazil. Metal bands were placed around the permanent maxillary first molars to hold a modified Hyrax expander. One of the investigators collected clinical data about the sites listed above during activation of the expander. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect interleukin levels. The sites were examined to measure IL-17 before the device was placed and at 1, 7 and 14 days of active use of the expander. The forces applied resulted in an increase in IL-17 expression in periodontal tissues one day after the application of tension and compression at both measurement sites. IL-17 levels tended to be higher (p ? 0.05) seven days after the Hyrax screw was activated. From that time to the fourteenth day, there was a tendency to a decrease in IL-17 levels (p ? 0.05). We concluded that there was an increase in IL-17 expression at both tension and compression sites in response to force application. / O movimento dent?rio promovido por for?as ortod?nticas ? baseado em altera??es remodeladoras que ocorrem no ligamento periodontal e no osso que circundam os dentes. Este movimento pode ocorrer de forma mais r?pida ou lenta, dependendo das caracter?sticas f?sicas da for?a aplicada e da resposta biol?gica induzida e ? caracterizado por cria??o de zonas de compress?o e tens?o no ligamento periodontal. O conhecimento das altera??es teciduais geradas ? essencial para o planejamento do movimento do dente e de suas estruturas anexas para uma nova posi??o, sem danos aos tecidos. Neste estudo, uma revis?o de literatura teve como objetivo possibilitar a compreens?o dos fen?menos celulares, bioqu?micos e moleculares que ocorrem nas estruturas do ligamento periodontal (PDL) e, tamb?m do osso alveolar ao redor do dente e que est?o envolvidos na movimenta??o dent?ria induzida. A revis?o sistem?tica teve como objetivo avaliar estudos sobre citocinas no fluido gengival (GCF) durante o tratamento ortod?ntico, resumindo os padr?es de regula??o das citocinas mais estudadas e explorar suas implica??es cl?nicas. Al?m disso, foram investigadas altera??es dos moduladores imunol?gicos e ?sseos em resposta a aplica??o da for?a ortod?ntica. Para tanto o fluido gengival de dentes submetidos ao procedimento de expans?o maxilar foi avaliado qualitativamente verificando concentra??es de interleucinas e seu valor preditivo como marcador da intensidade da resposta inflamat?ria e turnover ?sseo na movimenta??o ortod?ntica. O objetivo da investiga??o foi avaliar se a for?a aplicada sobre o ligamento periodontal durante a expans?o maxilar se reflete na composi??o do Fluido do Sulco Gengival (FSG), mais especificamente no n?vel de interleucina IL-17 dos lados de tens?o ou compress?o. As amostras do FSG foram coletadas das regi?es mesiovestibulares e m?siopalatinas de 32 molares de 16 pacientes com idade entre 7 a 14 anos, que tinham necessidade de expans?o maxilar. Estes pacientes iniciaram o tratamento ortod?ntico durante o per?odo compreendido entre 2012 e 2013, na Faculdade de Odontologia da Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul (PUCRS). Eles receberam an?is nos primeiro molares permanentes superiores para a confec??o de um aparelho disjuntor de Hyrax modificado. Os dados cl?nicos foram coletados por um investigador nas regi?es supracitadas durante o per?odo de ativa??o do aparelho. Empregando-se o ensaio imunoenzim?tico (ELISA) foram detectados os n?veis da interleucina. Os locais foram analisados para IL-17 antes da coloca??o do aparelho, 1, 7 e 14 dias de uso ativo do aparelho. As for?as empregadas resultaram em um aumento da express?o de IL-17 nos tecidos periodontais ap?s um dia de aplica??o em ambos os lados, de tens?o e compress?o. Os n?veis de IL-17 tenderam a ser maiores (p ? 0,05) ap?s sete dias de ativa??o do parafuso. Deste momento, at? o d?cimo quarto dia, observou-se uma tend?ncia para diminui??o dos n?veis de IL-17 (p ? 0,05). Concluiu-se que houve um aumento na express?o de IL-17 em ambos os locais, de tens?o e compress?o, em resposta ? aplica??o de for?a.
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Perfil de risco imunol?gico de idosas com c?ncer de mamaVollbrecht, Betina 02 March 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-07-01T12:16:16Z
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Previous issue date: 2015-03-02 / The elderly population is now the fastest growing in the world. The immune system becomes compromised with age, being less effective in fighting malignancies. An amended fee of CD8 T cells, increased compared to CD4 cells (usually more frequent in the blood) defines the concept of immune risk profile in the elderly (less than 1 ratio). In this research, we studied the immunological profile of 58 women with breast cancer, determining the ratio of CD4+/CD8+ in peripheral blood. We compare this link into groups according to age of the patient (less or more than 60 years), lymph node involvement, tumor size, the immunohistochemical profile, and the occurrence of adverse events (local recurrence, axillary recurrence and metastasis). The ratio of CD4+ /CD8+ lymphocytes average was 1.87 (1.1 to 3.32), therefore, no patient had a concept immune risk profile. Comparing the groups according to age, the presence of lymph node metastases, tumors smaller or higher than 2 cm, were no statistically significant differences. However, the CD4 / CD8 ratio in patients positive for human epidermal growth factor (HER-2 / neu) was higher than in samples of patients with hormone receptor positive carcinoma and Her-2 / neu negative (p = 0.036 ). As far as was possible to search, these are the first data on CD4+ and CD8 T+ cells specifically in a population with breast cancer. The increase in the number of CD4+/CD8+ current evidenced in these women with Her-2 carcinoma / neu positive, seems to signal an activation of the immune system in women with poor prognosis of tumors. / A popula??o de idosos ? hoje a que mais cresce no mundo. O sistema imune torna-se comprometido com a idade, sendo menos eficaz no combate a neoplasias malignas. Uma taxa alterada de c?lulas T CD8 positivo (CD8+), aumentada em rela??o ?s c?lulas CD4 positivo (CD4+) (normalmente mais freq?entes no sangue) define o conceito de perfil de risco imunol?gico no idoso (rela??o menor que 1). Nesta pesquisa, estudamos o perfil imunol?gico de 58 mulheres com c?ncer de mama, determinando a rela??o das c?lulas T CD4+/CD8+ no sangue perif?rico. Comparamos esta rela??o em grupos conforme a idade da paciente (menos ou mais que 60 anos), o comprometimento linfonodal, o tamanho do tumor, o perfil imunohistoqu?mico, e a ocorr?ncia de eventos adversos (recidiva local, axilar e met?stases). A propor??o de linf?citos T CD4+/CD8+ m?dia foi 1,87 (1,1 a 3,32), portanto, nenhuma paciente apresentou por conceito perfil imunol?gico de risco. Comparando os grupos conforme a idade, a presen?a de met?stases linfonodal, tumores menores verso maiores que 2cm n?o houveram diferen?as estatisticamente significativas. No entanto, a rela??o CD4+/CD8+ em pacientes positivos para o fator de crescimento epid?rmico humano (Her-2/neu) foi mais elevada do que em amostras de pacientes com carcinomas receptor hormonal positivos e Her-2/neu negativo (p=0,036). Tanto quanto foi poss?vel pesquisar, estes s?o os primeiros dados sobre c?lulas T CD4+ e CD8+ especificamente em uma popula??o com c?ncer de mama. O aumento do n?mero de linf?citos T CD4+/CD8+ circulante evidenciado nestas mulheres com carcinoma Her-2/neu positivo, parece sinalizar uma ativa??o do sistema imunol?gico em mulheres com tumores de pior progn?stico.
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An?lise da express?o de fatores de transcri??o caracter?sticos de TH1, TH2, TH17 e TREG em c?lulas TCD4+ de crian?as asm?ticasAra?jo, Patr?cia Dias de 31 March 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-08-13T20:17:59Z
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Previous issue date: 2015-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Asthma is a disease that affects most children, characterized by inflammation and airway hyperresponsiveness. Asthma has two main phenotypes depending on the presence of atopy. In addition to Th2 cells, Th17 cells, Th1 and Treg cells are involved in disease pathology by secreting cytokines. CD4 T cells have plasticity, which are influenced by environmental and genetic factors.
Aim: To assess the phenotypic profile of CD4 T cells in asthmatic children of school age, with or without the presence of atopy and healthy controls and correlate the data with disease severity. In addition, analyze cells expressing more than one transcription factor in the blood of atopic asthmatic children to D.pteronyssinus stimulating mononuclear cells with DerP1 protein.
Methods: This was a cross-sectional case-control study, where 8-14 years-old asthmatic and healthy children were recruited of public schools in Porto Alegre/RS. Mononuclear cells were isolated by Histopaque peripheral blood of children and cultured with anti-CD3/CD28 or DerP1 protein. After 24 hours the cells were stained with antibodies specific for transcription factors for analysis of Th2, Th17, Th1 and Treg cells by flow cytometry. Moreover, it was analyzed in plasma allergen-specific IgE specific.
Results: The results showed that children with asthma have a higher frequency of CD4+ GATA-3+ compared to controls. Frequency of CD4+GATA-3+ROR?t+ cells correlated with disease severity, except with severe therapy resistant asthma (STRA). Atopic patients showed a higher proportion of co-expressing more than one transcription factor cells compared to non-atopic individuals. Stimulation with DerP1 protein enhances the frequency of CD4 + Foxp3 +ROR?t+ compared with the control and stimulation with anti-CD3/ CD28.
Conclusion: In general, the results presented in this thesis allowed us to conclude that the allergens play an important role in the development of cells expressing more than one transcription factor in atopic patients. In addition, our study was the first to demonstrate that STRA children have a distinct expression profile of regulatory transcription factors of CD4 T cells Th1, Th2, Th17 and Treg compared to other severity levels of the disease. / Introdu??o: A asma ? uma doen?a prevalente em crian?as, tendo como principal caracter?stica a inflama??o e hiperresponsividade das vias a?reas. Al?m das c?lulas Th2, as c?lulas Th17, Th1 e Treg s?o envolvidas na patologia da doen?a pela fun??o que elas e as citocinas por elas secretadas exercem. A asma apresenta dois fen?tipos principais, os quais dependem da presen?a de atopia. As c?lulas TCD4 apresentam plasticidade, que s?o influenciadas por fatores ambientais e gen?ticos.
Objetivos: Avaliar o perfil fenot?pico de c?lulas TCD4 de crian?as em idade escolar asm?ticas, com ou sem a presen?a de atopia e de controles saud?veis. Correlacionar os dados obtidos com a severidade da doen?a. Al?m disso, avaliar as c?lulas que co-expressam mais de um fator de transcri??o no sangue de crian?as asm?ticas at?picas para D.pteronyssinus estimulando as c?lulas com a prote?na Derp1.
Materiais e m?todos: Este foi um estudo transversal caso-controle, onde crian?as de 8 a 14 anos foram recrutadas de escolas p?blicas de Porto Alegre/RS, asm?ticas e controles. As c?lulas mononucleares foram isoladas por Histopaque do sangue perif?rico destas crian?as e colocadas em cultura com anti-CD3/CD28 ou com prote?na Derp1. Ap?s 24hs as c?lulas foram marcadas com anticorpos espec?ficos para os fatores de transcri??o para an?lise do perfil Th2, Th17, Th1 e Treg por citometria de fluxo. Al?m disto, foi analisado no plasma a IgE espec?fica para um painel de alergenos.
Resultados: Os resultados obtidos mostraram que as comparado com os controles. As c?lulas duplo-positivas CD4+GATA-3+ROR?t+ correlacionaram com o grau de severidade da doen?a, exceto com asma severa de dif?cil controle (ADC). Pacientes at?picos apresentaram uma propor??o maior de c?lulas co-expressando mais de um fator de transcri??o comparados com indiv?duos n?o-at?picos. Estimula??o de c?lulas provenientes de pacientes at?picos com a prote?na Derp1 aumenta a frequ?ncia de c?lulas CD4+Foxp3+ROR?t+ quando comparados com o controle e estimula??o com anticorpos anti-CD3 e anti-CD28.
Conclus?o: De uma maneira geral, os resultados apresentados nesta tese nos permitem concluir que os al?rgenos desempenham um papel importante no desenvolvimento das c?lulas que expressam mais de um fator de transcri??o em pacientes at?picos. Al?m disso, nosso estudo foi o primeiro a demonstrar que crian?as com ADC apresentam um perfil distinto de express?o de fatores de transcri??o reguladores de c?lulas TCD4 do tipo Th1, Th2, Th17 e Treg quando comparado com crian?as com doen?a menos severa.
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Avalia??o de mecanismos relacionados com a diferencia??o de C?lulas T CD8 de mem?ria durante a infec??o pelo v?rus sincicial respirat?rioFreitas, Deise do Nascimento de 29 July 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-10-28T21:42:44Z
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Previous issue date: 2015-07-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction : Respiratory Syncytial Virus (RSV) is a major cause of viral lower respiratory tract infection in children under two years of age. Memory CD8 T cell response to VSR does not provide an efficient and long-lasting immune response, so there are recurrent infections throughout life. The role of mTOR (mammalian target of rapamycin) and the purinergic receptor P2X7 in the memory CD8 T cell response during RSV infection has not been investigated. Objectives : To analize the effect of rapamycin on dendritic cells (DCs) during RSV infection, as well as to evaluate the role of P2X7 purinergic receptor in CD8 memory T cells response during RSV infection. Methodology : Bone marrow derived dendritic cells (BMDCs) differentiated from C57BL/6 P2X7-/- and C57BL/6 mice were infected with VSR virus and used to activate T cells purified from C57BL/6 P2X7-/- and C57BL/6 mice in vitro for 96 hours. In addition, BMDCs differentiated from C57BL/6 mice received 20ng/ml rapamycin during 1h prior infection. The following parameters were evaluated: BMDC cell death by apoptosis, memory cells markers by flow cytometry and RNA viral quantitation was performed by real time PCR. Results : Rapamycin treatment in RSV infected BMDCs decreases the frequency of CD8+CD44high cells and increases the level of viral RNA in DCs, but the rapamycin does not affect the viability of the infected dendritic cells. Furthermore, when BMDCs were treated with rapamycin, an increase of BMDC survival occurred, depending on the contact with the T cells. The absence of purinergic receptor P2X7 in T cells leads to a decrease in the frequency of CD8+CD122+KLRG1-, however the absence of purinergic receptor in infected BMDCs increases the frequency of CD8+CD122+ KLRG1- T cells. Conclusion : Our study suggests that P2X7 receptor is involved in memory CD8 T cell response. In addition our data indicated that mTOR inhibition increases the survival of BMDCs in a mechanism dependent on T-cell contact and also suggests that rapamycin treatment on dendritic cells during VSR infection affect CD8 T cell differentiation. / Introdu??o : O V?rus Sincicial Respirat?rio (VSR) ? um dos principais causadores de infec??o viral do trato respirat?rio inferior em crian?as menores de dois anos de idade. A resposta de c?lulas T CD8 de mem?ria para VSR n?o apresenta uma resposta imune eficiente e duradoura, por isso s?o recorrentes as infec??es durante a vida. At? o momento n?o se tem o conhecimento sobre o envolvimento do mTOR (mammalian target of rapamycin) e do receptor purin?rgico P2X7 na resposta de c?lulas T CD8 de mem?ria durante a infec??o de VSR. Objetivos : Investigar o efeito da rapamicina nas c?lulas dendr?ticas (DCs) durante a infec??o viral, bem como, avaliar o efeito do receptor purin?rgico P2X7 nas c?lulas dendr?ticas (DCs) infectadas com o v?rus VSR na resposta de c?lulas T CD8 de mem?ria. Metodologia : C?lulas dendr?ticas diferenciadas de medula ?ssea (BMDCs) de camundongos C57BL/6 P2X7-/- e C57BL/6 infectadas com VSR foram utilizadas para ativar c?lulas T purificadas de camundongos C57BL/6 P2X7-/- e C57BL/6 durante 96 horas. Al?m disso, um grupo de BMDCs de camundongos C57BL/6 recebeu 20ng/mL de rapamicina durante 1h antes da infec??o. As DCs foram marcadas para investiga??o de morte celular por apoptose, as c?lulas T marcadas para an?lise c?lulas de mem?ria e a quantifica??o do RNA viral foi realizada atrav?s de PCR em tempo real. Resultados : O tratamento com o inibidor de mTOR nas BMDCs infectadas pelo VSR diminuiu a gera??o de c?lulas T CD8+ CD44high e aumentou os n?veis de RNA viral nas DCs, por?m a rapamicina n?o influenciou a viabilidade das c?lulas dendr?ticas infectadas. Quando as BMDCs foram tratadas com rapamicina, houve um aumento de sobreviv?ncia das c?lulas, dependente do contato com as c?lulas T. Na aus?ncia do receptor purin?rgico P2X7 nas c?lulas T, ocorreu uma diminui??o na frequ?ncia das c?lulas T CD8+CD122+KLRG1-, entretanto a aus?ncia do receptor purin?rgico nas BMDCs infectadas aumentou a frequ?ncia destas c?lulas T CD8+CD122+KLRG1-. Conclus?o : Nosso estudo sugere que o receptor P2X7 est? envolvido na resposta de c?lulas T CD8 de mem?ria durante a infec??o pelo VSR. Al?m disso, sugere-se que as c?lulas dendr?ticas tratadas com rapamicina durante a infec??o com VSR prejudica a diferencia??o de c?lulas T CD8.
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An?lise da presen?a da invers?o da raz?o CD4:CD8 em idosos e seu perfil celular e bioqu?micoM?ller, Guilherme Cerutti 29 July 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-11-05T12:26:05Z
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Previous issue date: 2015-07-29 / Aging has been associated with increased generation of free radicals as well as immunosenescence. Previous studies have identified older individuals with inverted T CD4:CD8 cell ratio and increased immunity to cytomegalovirus (CMV). Here, we investigated markers of oxidative stress and antioxidant defences in older individuals with inverted CD4:CD8 T-cell ratio. From 421 healthy community-dwelling older adults recruited, 61 subjects were identified with inverted CD4:CD8 T-cell ratio. Older individuals with a CD4:CD8 ratio < 1 had increased levels of plasma advanced oxidation protein products (AOPP) and Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP), but reduced levels of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) as compared to subjects with normal CD4:CD8 T-cell ratio. The CMV IgG serology was negatively correlated with CD4:CD8 ratio. These markers were more evident among elderly men than women. Our data suggest a close relationship between chronic CMV infection and oxidative profile in older individuals in the midst of its influence on the peripheral T-cell subsets. / O envelhecimento tem sido associado com o aumento da gera??o de radicais livres, bem como com a imunossenesc?ncia. Estudos anteriores j? haviam identificado os idosos que apresentavam a invers?o da raz?o CD4:CD8 e a sorologia mais acentuada para citomegalov?rus (CMV). Aqui, investigamos marcadores de estresse oxidativo e as defesas antioxidantes em idosos com a rela??o invertida entre as c?lulas T CD4 e CD8. De um total de 421 idosos recrutados na comunidade, 61 sujeitos foram identificados com a invers?o da raz?o CD4:CD8. Os idosos com CD4:CD8<1 tinham n?veis aumentados de produtos proteicos de oxida??o avan?ada (AOPP) e atividade antioxidante total pelo m?todo de redu??o do ferro (FRAP) no plasma, mas n?veis reduzidos de subst?ncias reativas ao ?cido tiobarbit?rico (TBARS), em compara??o com indiv?duos com raz?o CD4:CD8 normais. A sorologia para CMV (IgG) foi negativamente correlacionada com a raz?o CD4:CD8. Estes marcadores foram mais evidentes entre os homens do que as mulheres idosas. Nossos dados sugerem uma estreita rela??o entre a infec??o por CMV cr?nica e perfil oxidativo em indiv?duos mais velhos no meio de sua influ?ncia sobre os subtipos de c?lulas T perif?ricas.
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