La mise au point et la validation d’une méthode de dosage par CLHP des alcaloïdes majoritaires (cépharanthine,xylopinine, tétrahydropalmatine) de Stephania rotunda sont réalisées. La méthode est appliquée au dosage des alcaloïdesdans différentes parties de la plante. Le tubercule est la drogue végétale la plus riche en alcaloïdes majoritaires, enparticulier en cépharanthine (1%). Le dosage des alcaloïdes majoritaires des tubercules d’origine différente est effectué.La cépharanthine est beaucoup plus concentrée dans le tubercule de Pailin (1,9%). La comparaison de la compositionchimique du tubercule cultivé et sauvage montre des résultats proches. L’isolement de huit alcaloïdes est effectué parChromatographie Flash. Leur structure est déterminée par SM et RMN. La cépharanthine, la xylopinine, latétrahydropalmatine, la palmatine et la roémérine précédemment décrites sont réisolées. La pseudopalmatine, lastéphanine et la vireakine, alcaloïde nouveau, sont décrites pour la première fois dans la plante. L’étude pharmacologiquede S. rotunda montre que la majorité des extraits testés (76%) présentent in vitro une activité antiplasmodiale intéressantesur la souche W2 de Plasmodium falciparum avec une CI50 < 5 μg/ml. La cépharanthine et la pseudopalmatine sont lesalcaloïdes les plus actifs avec une CI50 de 0,7 et 1 μg/ml, respectivement. Les effets sur la croissance in vitro de la soucheW2, des associations alcaloïdes/alcaloïdes et alcaloïdes/molécules antimalariques de référence sont testés. L’étude in vitrodu métabolisme hépatique de la cépharanthine montre la présence d’un métabolite principal M1 cytochrome dépendant.Une importante variabilité inter-individuelle de la formation de M1 est observée. L’étude de la variabilité inter-sexemontre qu’il n’y a pas de différence significative entre homme et femme. Les études in vitro de différentes espècesanimales indiquent une variabilité inter-espèces. L’enzyme responsable de la formation du métabolite M1 est déterminée.Le CYP3A4 est très fortement impliqué dans la métabolisation de la cépharanthine. Enfin, la détermination structurale dumétabolite majoritaire M1 a été réalisée par CDI-SM/SM. Cette étude nous a permis de conclure que la structure dumétabolite M1 correspond à un composé N-déméthylé. / An HPLC method is developed and validated for the simultaneous determination of major alkaloids: cepharanthine,xylopinine, tetrahydropalmatine in tuber of Stephania rotunda Lour. The validated method was successfully applied toquantify the three alkaloids in various parts of the plant. The higher content of major alkaloids, in particularcepharanthine (1%), is found in the tuber of this plant. The major alkaloids of tubers from different regions aredetermined. The cepharanthine is concentrated in tuber of Pailin (1.9%). The comparison of the chemical composition ofcultivated and wild tubers shows similar results. Eight alkaloids were isolated from S. rotunda using FlashChromatography. Their structures are elucidated by MS and NMR. Cepharanthine, xylopinine, tetrahydropalmatine,palmatine and roemerine previously described are reisolated. Pseudopalmatine, stephanine, and vireakine (newaporphine alkaloid) are described for the first time in the plant. Pharmacological study of S. rotunda shows that themajority of extracts (76%) exert in vitro antiplasmodial activity against a chloroquine resistant strain of Plasmodiumfalciparum (W2) with IC50 < 5 μg/ml. Cepharanthine and pseudopalmatine display significative activity with IC50 valuesof 0.7 and 1 μg/ml, respectively. Isobol experiments are performed with W2 strain by combination of alkaloids/alkaloidsand alkaloids/antimalarial reference molecules. In vitro metabolism study of cepharanthine using human liver microsomesshows the cytochrome-dependant formation of a major metabolite M1. Enzymatic kinetics were investigated with pooledhuman liver microsomes to determine Michaelis-Menten constants. Important inter-individual variability of cepharanthinemetabolism is observed. In vitro studies indicate an important inter-species variability. The enzyme responsible for theformation of M1 metabolite is investigated. This study shows that CYP3A4 is involved in the metabolism of thecepharanthine. The structure of M1 metabolite, identified by CDI-MS/MS, corresponds to a N-desmethyle derivative ofcepharanthine.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:27:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2088_1.pdf: 518424 bytes, checksum: ad434d0173e0f680a4332d1b48b5d660 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / O Brasil encontra-se em uma importante fase no uso de medicamentos fitoterápicos, que passam a ter que satisfazer os mesmos critérios de eficácia e segurança exigidos para os medicamentos convencionais, obtidos por síntese. O registro de medicamentos fitoterápicos (BRASIL, 2004) estabelece o controle de qualidade da matéria-prima vegetal como pré-requisito essencial para a obtenção de fitoterápicos com reprodutibilidade de ação. Uma das dificuldades de se desenvolver fitoterápicos que apresentem estas características de reprodutibilidade lote a lote da ação terapêutica é a variabilidade na concentração de marcadores, decorrente dos efeitos de sazonalidade no cultivo das plantas. O presente trabalho estuda a relação existente entre algumas variáveis que podem estar relacionadas com a variação da quantidade de óleo essencial da espécie Plectranthus amboinicus (Lour) Spreng cultivada, através do monitoramento do óleo essencial por cromatografia à gás. Foram conduzidos experimentos que tiveram o objetivo de avaliar a maior concentração de óleo essencial sob diferentes condições de adubação (adubo orgânico, adubo mineral 1 e adubo mineral 2), irrigação (irrigação diária e irrigação alternada), incidência solar (direta e indireta), horário de coleta (7h, 12h e 16h) e idade da planta (60, 90, 120 e 150 DAP), em diferentes ciclos vegetativos (1 e 2). Nas diferentes condições de adubação, foi verificado que no ciclo1 o adubo orgânico obteve melhor desempenho e no ciclo 2 a adubação mineral 1 foi superior. A irrigação alternada e a incidência solar direta demonstraram ser a melhor condição nos dois ciclos. No ciclo 1 o melhor horário de coleta foi o das 7h, já no ciclo 2 o melhor horário foi o das 16h. A concentração de óleo essencial variou nos diferentes estágios de desenvolvimento da planta, tendo sido obtido os melhores índices aos 60 DAP no ciclo 1 e 2

O presente trabalho foi conduzido na escarpa sul da Serra da Mantiqueira, com o objetivo de reverter os danos ambientais causados pelo rompimento de uma adutora de água localizada a 1.700 m de altitude. Esse acidente resultou na formação de uma cicatriz na floresta da encosta, com supressão do solo e da vegetação. Para reverter os processos erosivos formados no local foi desenvolvida uma nova técnica utilizando quatro barreiras formadas por mudas de Bambusa mutiplex (Lour.), com o intuito de desviar as águas e favorecer a regeneração da vegetação. Para contenção de duas ravinas, denominadas de menor e maior, colmos de bambu (Bambusa sp) foram plantados em consórcio com B. multiplex. O projeto foi monitorado por 18 meses e sua avaliação se fez por meio de observações de campo e preenchimento de ficha técnica. Posteriormente, os dados foram aplicados a uma adaptação da Matriz de Leopold composta por cinco aspectos monitorados: erosão, regeneração da vegetação, sucesso do plantio de bambu, conservação das estruturas e funcionalidade, nos quais se procurou avaliar a eficiência das intervenções com o bambu. O resultado da Matriz possibilitou classificar qualitativa e quantitativamente as intervenções, obtendo-se cinco níveis de classificação. As Barreiras I, II e IV foram classificadas como sendo de muita alta eficiência e, a Barreira III, como de alta eficiência. A contenção da ravina maior foi classificada como média eficiência e, da menor, como de muito alta eficiência. / This work was carried out in southern escarpment of the Serra Mantiqueira, city of Pindamonhangaba within an area adjacent to the Plateau of Campos do Jordão, in São Paulo state, Brazil, and claimed as a result to reverse environmental damage caused by the rupture of an adductor of water located at 1700 m altitude. This accident resulted in the formation of a scar in the hillside forest, with its removal of soil and vegetation. To reverse the erosion processes created at the site a new technique was developed using four barriers formed by seedlings of Bambusa mutiplex (Lour.) in order to divert the waters and promote the regeneration of vegetation. For containment of two ravines, called lower and higher, stalks of bamboo (Bambusa sp.) were installed on the walls of the ravines with intercropped planting of seedlings B. multiplex. The project was monitored for 18 months and its evaluation was done through observations of field and fill in sheet. Subsequently, the data were applied to an adaptation of the Leopold Matrix composed of five monitored aspects: erosion, regeneration of vegetation, the success of bamboo plantation, preservation of the structures and functionality, which sought to evaluate the effectiveness of interventions with the bamboo. The result of the classification matrix enabled the qualitative and quantitative interventions, resulting in five levels of classification. The barriers I, II and IV were classified as being of very high efficiency, and the Barrier III as a high efficiency. The containment of the higher ravine was classified as medium average efficiency, the lower, as a very high efficiency.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6107_1.pdf: 1993827 bytes, checksum: 57964eaf0cd07177a75eab4b10b74b15 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng (Lamiaceae) é uma planta herbácea nativa da Ásia Oriental e encontra-se distribuída por toda a América. No Brasil, é conhecida como hortelã da folha grossa, hortelã da folha graúda, malvariço e mundialmente como orégano, sendo utilizada popularmente como analgésica, antiinflamatória e antimicrobiana. Esta pesquisa avaliou o perfil fitoquímico e as ações toxicológicas, microbiológicas e farmacológicas (atividade antineoplásica e antiinflamatória, em roedores) do resíduo do extrato hidroalcoólico das folhas de P. amboinicus. No estudo fitoquímico constatou-se a presença de flavonóides (quercetina e luteolina, rutina), terpenos, derivados cinâmicos, monoterpenos (carvacrol, timol), triterpenos ( sitosterol e amirina) e esteróides. No ensaio de toxicidade aguda do extrato foram verificadas reações estimulantes seguida por reações depressoras sobre Sistema Nervoso Central. Não houve óbitos em nenhuma das doses testadas (a maior dose 3.800 mg.kg-1 por via intraperitoneal e 4.000 mg.kg-1 por via oral) descartando uma possível DL50. Nos ensaios microbiológicos foi verificado uma forte ação antimicrobiana do extrato em bactérias gram-positivas, principalmente Staphylococcus aureus resistente a Meticilina (MRSA), onde a concentração inibitória mínima oscilou entre 18.7 e 9.3 mg.ml-1 do referido extrato. A ação do extrato sobre a cinética bacteriana (curva de mortalidade) sugere uma ação tanto bactericida como bacteriostática, variando conforme concentração do extrato. Em bactérias gram-negativas e fungos leveduriformes não foram constatadas ações do extrato. Para a atividade antiinflamatória utilizou-se o modelo do edema de pata induzido por carragenina. Foram administradas as doses crescente de 150, 250 e 350 mg.kg-1 do extrato por via oral e intraperitoneal. Nos ensaios antiinflamatórios por via oral não foram observados diminuições nos edemas, porém, nas administrações intraperitoneais, foram verificadas diminuições significativas do edema em todas as doses testadas. Nos ensaios de atividade antineoplásica, foram utilizados os modelos experimentais de Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich. Nos grupos tratados com o extrato foram averiguadas diminuições na média dos pesos dos tumores em todas as doses administradas por via intraperitineal (100, 150, 250 e 350 mg.kg-1), exceto na dose 350 mg.kg-1, no modelo de Carcinoma de Ehrlich, que apresentou uma ação carcinogênica

Abstract Plant Growth Regulator Sprays and Girdling: Potential Horticultural Techniques to Increase Fruit Retention and Yield of Longan (Dimocarpus longan Lour.) Trees in California Leila Graves June 2009 The longan is a subtropical fruit tree whose popularity is growing quickly among American consumers, and thus, could become a lucrative niche market for California growers. Trees planted as part of an initial variety trial conducted in commercial California orchards are beginning to bear fruit. However, fruit retention and yields are low due to excessive abscission during early fruit set. Horticultural techniques, such as plant growth regulator (PGR) sprays and girdling, often increase fruit retention and yield of fruit tree crops, though effects are typically dependent on treatment timing and PGR concentration. The objective of this study was to identify PGR and girdling techniques that result in increased longan fruit retention. The experiment was conducted in a commercial orchard using a randomized complete block design with whole-tree experimental units and five replications per treatment. Treatments included foliar applications of two synthetic auxins, 1-naphthaleneacetic acid (NAA) at 20, 60, or 100 ppm or 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) at 5, 25, or 45 ppm, each applied during early or late fruit set. Girdling was also conducted at early or late fruit set, for a total of 15 treatments, including an untreated control. Factors examined at harvest included fruit number and mass per inflorescence and individual fruit mass and diameter. During the on-crop year, a significant increase in the number and mass of fruit per inflorescence was observed in response to 25 ppm 2,4-D applied at late fruit set, as compared to the control. Despite this increase in fruit number, 25 ppm 2,4-D applied at late fruit set did not result in decreased diameter and mass of individual fruit. Late fruit set applications of 25 ppm 2,4-D appear to mitigate the effects of alternate bearing in the off-crop year. Fruit abscission during early and/or late fruit set decreased in response to 5 ppm 2,4-D at early fruit set, 25 or 45 ppm 2,4-D at early or late fruit set, or 100 ppm NAA at early fruit set. Fruit loss occurred as a result of Santa Ana winds during both growing seasons. Neither leaf nor fruit nutrient concentrations of treated trees were significantly different from that of untreated controls. Results indicate that properly-timed PGR applications have the potential to be used commercially to increase yield and profit to longan growers in California.

No / Buddlejol (1), a new sterol, has been isolated from the ethyl acetate soluble fraction of the antispasmodic plant Buddleja asiatica along with stigmasterol (2), lignoceric acid (3), taraxerol (4) and alpha-amyrin (5), respectively. The structure of Buddlejol (1) was established as (24S)-stigmast-5,22-diene-7 beta-ethoxy-3 beta-ol by spectral analysis and comparison with closely related structures. Buddlejol revealed to be a competitive inhibitor of chymotrypsin with the Ki value of 10.60 A mu M as indicated by Lineweaver-Burk and Dixon plots and their re-plots against its chymotrypsin inhibition assay, while the other compounds showed less inhibitory potential. The bioassay-guided isolation was stimulated by the preliminary cytotoxic screening of various fractions of B. asiatica.