VASCONCELOS, Thiago Brasileiro de. Efeitos antiespasmódico e miorrelaxante do ß-Citronelol em músculo liso traqueal de ratos : potencial ação na hiperreatividade após desafio antigênico e elucidação do mecanismo de ação. 2013. 119 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-04-10T12:06:23Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_tbvasconcelos.pdf: 2853478 bytes, checksum: fd84b6f4b086a9590b739082501a6d0a (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-04-10T12:07:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_tbvasconcelos.pdf: 2853478 bytes, checksum: fd84b6f4b086a9590b739082501a6d0a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-10T12:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_tbvasconcelos.pdf: 2853478 bytes, checksum: fd84b6f4b086a9590b739082501a6d0a (MD5) Previous issue date: 2013 / The β-citronellol is an alcoholic monoterpene of natural occurrence that is found in several essential oils, including the citronella oil (obtained from Cymbopogon winterianus). In general, it is widely used as insect repellent. Recently this molecule has been studied as antibacterial, antifungal, antispasmodic, hypotensive and vasorelaxant agent. We aimed to study the effects of β-citronellol on smooth muscle contractility of rat airways. The animals were divided in four groups namely Control, Sensitized, Challenged and Treated. Isometric recordings were obtained from isolated preparations from tracheal tissues cut as rings. Inhalation of β-citronellol (300 µM) before antigen (ovalbumin, OVA) challenge prevented development of tracheal hyperreactivity in response to K+ or ACh in tissues of OVA-sensitized animals. In vitro, the cumulative addition of β-citronellol (10 to 1000 µM) did not change basal tone in tracheal smooth muscle preparations. In tracheal rings pre-contracted with K+ or acetylcholine (ACh), the addition of β-citronellol fully relaxed (p < 0.001, Two-Way ANOVA, Holm-Sidak) tracheal rings with IC50 values of 120.44 [73.29 – 197.91] µM for K+ and 211.10 [114.13 - 390.46] µM for ACh. The relaxing effect of β-citronellol was not altered (p > 0.05, Mann-Whitney test) after treatment with propranolol, N (G)-nitro-L- arginine methyl ester (L-NAME), tetraethylammonium (TEA), methylene blue, sodium orthovanadate, capsazepine, indomethacin and A-967079. Experiments performed in Ca2+ depleted medium containing EGTA revealed that low concentrations of β-citronellol preferentially inhibited contractions induced by recruiting Ca2+ influx via voltage-operated channels (VOC), although at higher concentrations it could also inhibit either on contractions evocked with receptor-operated (ROC) or store-operated (SOC) pathways. Such effect was supported by the more pronounced inhibitory effects of β-citronellol (p < 0.001, Two-Way ANOVA, Holm-Sidak) against contractions promoted in tracheal tissues maintained in Ba2+-containing medium. β-Citronellol also decreased the contractions induced by electrical field stimulation. These results suggest that β-citronellol has antispasmodic and myorelaxant properties on airway smooth muscle, which could be partly related to its ability in inhibiting the electromechanical coupling. / O β-citronelol é um álcool monoterpênico de ocorrência natural em vários óleos essenciais como o óleo de citronela (obtido de Cymbopogon winterianus), de ampla utilização popular por suas propriedades repelentes de insetos. Recentemente, a esta molécula tem sido atribuídas outras propriedades que envolvem atividade antibacteriana, antifúngica, antiespasmódica, hipotensora e vasorrelaxante. Sendo assim, objetivamos estudar suas possíveis ações no comportamento motor do músculo liso do sistema respiratório de ratos Wistar. Os animais considerados nesse estudo foram divididos em 04 grupos: controle, sensibilizado, desafiado e tratado, em seguida, registros isométricos, in vitro, foram obtidos a partir de anéis isolados de traqueia. A inalação de β-citronelol (300 µM) preveniu a hiperreatividade traqueal mediante a adição de K+ ou ACh em animais submetidos a um modelo de asma, no entanto, a adição cumulativa de β-citronelol (10 a 1000 µM), na cuba para órgãos isolados, não produziu alteração significativa das preparações mantidas sob tônus basal. Em preparações de traqueia mantidas contraídas, a adição de β-citronelol relaxou total e significativamente (p < 0,001; Two-Way ANOVA, seguido do teste Holm-Sidak) os anéis de traqueia, com CI50 de 120,44 [73,29 - 197,91] µM para o K+ e 211,10 [114,13 – 390,46] µM para a ACh, e esse efeito não foi alterado (p > 0,05; Teste de Mann-Whitney) após o tratamento com Propranolol, L-NAME, TEA, Azul de Metileno, Ortovanadato de Sódio, Capsazepina, Indometacina e A-967079. Em experimentos realizados com a remoção do Ca2+ e contendo EGTA, o β-citronelol inibiu a contração mediante a entrada de Ca2+ preferencialmente em canais VOC, mas em altas concentrações, pôde atuar também nos canais ROC e SOC, esse efeito foi mais pronunciado (p < 0,001; Two-Way ANOVA, seguido do teste Holm-Sidak) na contração promovida pela adição de Ba2+, demonstrando uma maior especificidade em atuar nos canais de Ca2+ operados por voltagem do tipo L. O β-citronelol também foi capaz de diminuir a contração induzida pela estimulação elétrica. Esses resultados demonstram que o β-citronelol caracteriza-se como uma substância antiespasmódica e miorrelaxante do músculo liso respiratório, e esse efeito está parcialmente relacionado à sua capacidade de reduzir principalmente o acoplamento eletromecânico.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. / Made available in DSpace on 2012-10-17T12:19:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T19:23:58Z : No. of bitstreams: 1 170789.pdf: 19642286 bytes, checksum: 9524d54ee3758c77930c7b3cbf84d713 (MD5) / A musculatura lisa presente no saco herniário de hérnias inguinais do tipo indireta de pacientes adultos do sexo masculino foi estudada quanto a prevalência em seus três terços e a relação com o tempo, lado e tamanho da hérnia, bem como a idade do paciente e seu índice de massa corpórea, visando descobrir situações que tornem o saco herniário mais ou menos apto para sua utilização como reforço da parede posterior. Ocorreram diferenças histológicas significavas apenas em sacos herniários muito pequenos, que não apresentaram musculatura lisa. Concluímos que todos os sacos herniários de hérnias inguinais do tipo indireta podem ser utilizados no estudo da validade da técnica proposta por Lázaro da Silva.

BRITO, T. S. Atividade vasorrelaxante do 2-nitro-1-fenil-1-propanol em preparações vasculares isoladas de ratos. 2015. 108 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2015-11-05T13:50:43Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_tsbrito.pdf: 2302175 bytes, checksum: 7172b4cc84d7726d7a04784392130264 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2015-11-05T13:50:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_tsbrito.pdf: 2302175 bytes, checksum: 7172b4cc84d7726d7a04784392130264 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-05T13:50:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_tsbrito.pdf: 2302175 bytes, checksum: 7172b4cc84d7726d7a04784392130264 (MD5) Previous issue date: 2015-09-01 / 2-Nitro-1-phenyl-1-propanol (NPP) is a nitro-alcohol used as a chemical intermediate in the synthesis of ephedrine and norephedrine, sympathomimetic agonists. Its chemical structure resembles the norephedrine, with replacement of the NH2 group by NO2. The presence of the nitro group led us to consider that this compound is able of produce vasodilatory effect, since it was demonstrated in a previous study the vasodilator actions of the nitro compound 1-nitro-2-phenylethane, resulting from stimulation of the guanylate cyclase-cGMP pathway. Our aim was to characterize the effect of on rat isolated vessels. Isometric contractions of isolated rings of thoracic aorta or 2nd-3rd generation branchs mesenteric artery of Wistar rats were recorded by data acquisition system. Cyclic nucleotide levels were measured by ELISA. Signals of strength and calcium fluorescence were simultaneously captured in confocal microscope connected to the data acquisition system. On isolated aorta with intact endothelium, NPP relaxed preparations contracted with phenylephrine (1 µM), K+ (60 mM) or U-46619 (0.3 µM) with EC50 of 30.2 [25.5 - 35.7], 31.8 [27.1 - 37.3] and 28.5 [23.1 - 35.2] µM, respectively. Conversely, in mesenteric vessels, NPP relaxed preparations contracted with phenylephrine (10 µM), K+ (60 mM) or U-46619 (1 µM) with EC50 of 0.41 [0.31 - 0.55], 0.16 [0.10 - 0.24] and 15.1 [10.4 - 24.4] µM, respectively, showing higher potency of NPP in these tissues. The extracellular K+ concentration increase produced gradual decrease in the relaxant effect of the NPP in mesenteric vessels. Pre-treatment with TEA had no effect in the relaxant effect of NPP in aortic rings, however, pretreated mesenteric vessels with TEA, BaCl2, CsCl ou apamin responded less to NPP. Pre-treatment with indomethacin, glybenclamide, 4-aminopyridine or L-NAME did not affect the vasorelaxant effect of the NPP in either aorta or mesenteric vessels. However, its potency was significantly reduced by ODQ (guanylate cyclase inhibitor), MDL-12,330A (adenylate cyclase inhibitor), H-89 (PKA inhibitor) or bisindolylmaleimide IV (PKC inhibitor) pre-treatment. NPP inhibited the vasoconstriction induced by Ca2+ in aorta pre-contracted with phenylephrine or K+, an effect prevented by pretreatment with ODQ or MDL-12,330A. Furthermore, NPP showed a tendency to increase the levels of cAMP and cGMP in aortic rings. The vasorelaxant activity of the NPP was higher in the presence of Y-27632, a Rho- kinase inhibitor. In mesenteric vessels, NPP inhibited both the strength and the calcium fluorescence intensity, indicating that this compound is able to decrease the cytosolic concentration of this ion. So, NPP has vasodilatory action with higher potency in mesenteric vessels. The mechanisms involved in it effect appear to involve the participation of cyclic nucleotides, the control of Ca2+ influx and the regulation of sensitivity of contractile filaments to Ca2+. Moreover, evidences support that the opening of potassium channels is involved in it effect in mesenteric vessels, but not in aortic. / 2-Nitro-1-fenil-1-propanol (NFP) é um nitro-álcool utilizado como intermediário químico na síntese de norefedrina e efedrina, agonistas simpatomiméticos. Sua estrutura química assemelha-se com a da norefedrina, com substituição do grupo NH2 pelo NO2. A presença do grupo nitro nos levou a hipótese deste composto ser capaz de produzir efeito vasodilatador, visto que foi demonstrada em estudo prévio a ação vasodilatadora do nitrocomposto 1-nitro-2-feniletano, resultante da estimulação da via guanilil ciclase-GMPc. Assim, nosso objetivo foi caracterizar o efeito do NFP em preparações vasculares isoladas de ratos. Contrações isométricas de anéis isolados da aorta torácica ou de ramos de 2ª-3ª geração da artéria mesentérica de ratos Wistar com ou sem endotélio funcional foram registradas por sistema de aquisição de dados. Níveis de nucleotídeos cíclicos foram medidos por ELISA. Sinais de fluorescência ao Ca2+ e de força foram capturados simultaneamente em microscópio confocal acoplado a sistema de aquisição de dados. Em anéis de aorta isolada com endotélio intacto, NFP relaxou preparações contraídas com fenilefrina (1 µM), K+ (60 mM) ou U-46619 (0,3 µM) com CE50 de 30,2 [25,5 - 35,7], 31,8 [27,1-37,3] e 28,5 [23,1-35,2] µM, respectivamente. Por outro lado, em vasos mesentéricos, NFP relaxou as preparações contraídas com fenilefrina (10 µM), K+ (60 mM) ou U-46619 (1 µM) com CE50 de 0,41 [0,31-0,55], 0,16 [0,10-0,24] e 15,1 [10,4-24,4] µM, respectivamente, indicando maior potência do NFP nesses tecidos. O aumento da concentração extracelular de K+ produziu diminuição gradual do efeito relaxante do NFP em vasos mesentéricos. O pré-tratamento com TEA não afetou o efeito relaxante do NFP em anéis de aorta, contudo, vasos mesentéricos pré-tratados com TEA, BaCl2, CsCl ou apamina responderam menos ao NFP. Pré-tratamento com indometacina, glibenclamida, 4-aminopiridina ou L-NAME não alterou seu efeito relaxante em ambas as preparações. Em contrapartida, sua potência foi significativamente reduzida pelo tratamento prévio com ODQ (inibitor de guanilil ciclase), MDL 12,330A (inibitor de adenilil ciclase), H-89 (inibitor de PKA) ou bisindolilmaleimida IV (inibitor de PKC). NFP inibiu a vasoconstrição induzida por Ca2+ em aorta pré-contraída com fenilefrina ou K+, efeito prevenido pelo pré-tratamento com ODQ ou MDL-12,330A. Além disso, NFP apresentou uma tendência para o aumento dos níveis de GMPc e AMPc em anéis de aorta. A atividade vasorrelaxante do NFP foi maior na presença do Y-27632, inibidor de Rho-cinase. Em vasos mesentéricos, NFP inibiu simultaneamente a força e a intensidade de fluorescência ao Ca2+, indicando que este composto é capaz de diminuir a concentração citossólica deste íon. Portanto, NFP possui ação vasodilatadora de maior potência em vasos mesentéricos. Os mecanismos envolvidos em seu efeito parecem envolver a participação dos nucleotídeos cíclicos, o controle do influxo de Ca2+ e a regulação da sensibilidade dos filamentos contráteis ao Ca2+ e o controle do influxo de Ca2+. Além disso, evidências apontam que a abertura de canais para potássio parece estar envolvida no seu efeito em vasos mesentéricos, mas não em aórticos.

JUCÁ, Davi Matthews. Efeitos do óleo essencial do Eucalyptus tereticornis e dos constribuintes 1, 8-Cineol, a-Pineno e ß-Pineno na motilidade do músculo liso gastrintestinal de ratos. 2012. 86 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-11-13T10:56:16Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmjucá.pdf: 1587812 bytes, checksum: 5dac5ea588e3b4d00701abb98be3a772 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-11-13T10:56:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmjucá.pdf: 1587812 bytes, checksum: 5dac5ea588e3b4d00701abb98be3a772 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-13T10:56:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmjucá.pdf: 1587812 bytes, checksum: 5dac5ea588e3b4d00701abb98be3a772 (MD5) Previous issue date: 2012 / The monoterpenes 1,8-cineole, α-pinen and β-pinene are constituents commonly found in several essential oils obtained from plants in Brazilian northeast such as “malva-santa” and “eucalipto” (Essential Oil of Eucalyptus tereticornis - EOET), which are used in folk medicine to treat respiratory and gastrointestinal dysfunctions. Myorelaxant actions are due to the presence of these constituents in their essential oils. The present work aimed to further study the pharmacological effects of these compounds, as well as the EOET, on smooth muscle gastrointestinal contractility and the prokinetic effect in rats. Wistar rats (200-250 g) were used, sacrificed by cervical dislocation. Strips were carefully obtained from gastric fundus, duodenum and ileum, and were maintained in normal Tyrode‟s solution. Isometric contractions were recorded through force transducers coupled to a computerized data acquisition system. Solutions containing 1,8-cineolo, α-pinene or β-pinene were prepared with Tween 80 (final concentration ≤ 0,2% v/v). Solely used, EOET, 1,8-cineole, α-pinene or β-pinene decreased duodenal basal tonus. In basal tone of gastric fundus isolated strips, EOET and 1,8-cineole had relaxant effect, while α-pinene and β-pinene had contractile effect. This contractile effect of α-pinene and β-pinene in isolated strips of gastric fundus is due to possible interference with IP3-dependent mechanism and independent of the muscarinic receptor activation and a central action in the activation of nicotinic receptors, in the same way, the duodenal smooth muscle relaxant effect is mediated by possible interference with the cellular mechanisms mediated by the formation of IP3. Moreover, as shown above, in the rat ileum, monoterpenes activate capacitative Ca2+ entry to intracellular milieu after Ca2+ stores depletion. The α-pinene and β-pinene also accelerated intestinal transit and reduced gastric compliance. Our data show that OEET has prokinetic properties in rats, which may be attributable to the contrasting effects induced by α-pinene and β-pinene, corroborating data presented previously (Jucá, 2007). / O 1,8-cineol, o α-pineno e β-pineno são monoterpenos constituintes do óleo essencial de plantas encontradas no Nordeste do Brasil como a “malva-santa” e o “eucalipto” (Óleo Essencial do Eucalyptus tereticornis - OEET) que, na medicina popular, são usadas no tratamento de distúrbios intestinais e respiratórios. As ações miorrelaxantes desses óleos essenciais são atribuídas à presença desses monoterpenos. Nosso objetivo foi estudar mais detalhadamente os efeitos desses constituintes, assim como o do OEET, sobre a contratilidade do músculo liso gastrintestinal e sobre o efeito procinético em ratos. No presente estudo, foram usados ratos Wistar machos (180-250g) sacrificados por deslocamento cervical. Tiras de duodeno, íleo e fundo de estômago foram cortados e mantidos em solução de Tyrode normal. As contrações isométricas foram registradas através de transdutores de força conectados a sistema computadorizado. Soluções contendo o 1,8-cineol, o α-pineno ou β-pineno foram preparadas em Tween 80 (concentração final ≤ 0,2% v/v). Usados isoladamente, o OEET, o 1,8-cineol, o α-pineno e β-pineno diminuíram o tônus basal em tiras de duodeno. Em tônus basal de tiras isoladas de fundo gástrico, o OEET e o 1,8-cineol possuíram efeito miorrelaxante, enquanto o α-pineno e o β-pineno possuíram efeito contrátil. Esse efeito contrátil do α-pineno e do β-pineno em tiras isoladas de fundo gástrico é por possível interferência com o mecanismo dependente de IP3 e independe da ativação local do receptor muscarínico e de uma ação central na ativação de receptores nicotínicos, da mesma forma, o efeito miorrelaxante na musculatura lisa duodenal é mediado por possível interferência com os mecanismos celulares mediados pela formação de IP3. Além disso, como demonstrado anteriormente, em íleo de rato, esses monoterpenos provavelmente ativam as vias de entrada de Ca2+ para a célula em situações de depleção dos estoques intracelulares. Em estudos de retenção fracional de corante no trato gastrintestinal, o OEET, o 1,8-cineol, o α-pineno e o β-pineno promoveram a aceleração do esvaziamento gástrico. O α-pineno e β-pineno também aceleraram o trânsito intestinal e reduziram a complacência gástrica. Os nossos dados mostram que OEET possui propriedades pró-cinéticas, que podem ser atribuíveis aos efeitos contrastantes induzidos por α-pineno e β-pineno, corroborando com dados apresentados anteriormente (Jucá, 2007).

JUCÁ, Davi Matthews. Propriedades farmacológicas dos monoterpenos a- e ß-pineno no músculo liso gastrintestinal de ratos : efeito miorrelaxante e pró-cinético. 2007. 89 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-21T14:12:36Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_dmjucá.pdf: 1118400 bytes, checksum: a39695339fb5ce861aedea6409b8caef (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-21T16:27:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_dmjucá.pdf: 1118400 bytes, checksum: a39695339fb5ce861aedea6409b8caef (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-21T16:27:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_dmjucá.pdf: 1118400 bytes, checksum: a39695339fb5ce861aedea6409b8caef (MD5) Previous issue date: 2007 / The monoterpenes α- and β-pinene are constituents commonly found in several essential oils obtained from plants in Brazilian northeast such as “malva-santa” and “eucalipto”, which are used in folk medicine to treat respiratory and gastrointestinal dysfunctions. Myorelaxant actions are due to the presence of these constituents in their essential oils. The present work aimed to further study the pharmacological effects of these compounds on smooth muscle gastrointestinal contractility as well as on liquid gastric emptying in rats. Wistar rats (200-250 g) were used, sacrificed by cervical dislocation. Strips were carefully obtained from gastric fundus, duodenum and ileum, and were maintained in Tyrode’s solution. Isometric contractions were recorded through force transducers coupled to a computerized data acquisition system. Solutions containing α- or β-pinene were prepared with Tween 80 (final concentration ≤ 0,2% v/v). Solely used, α- or β-pinene decreased duodenal basal tonus with IC50 value corresponding to 655.1 µM and 810.2 µM, respectively. Submaximal contractions induced by K+ (60 mM, K60) or acetylcholine (ACh, 3 µM) were inhibited, in a concentration-dependent manner (p < 0.001, ANOVA), with IC50 values of 790.0 [580.2-1007.4] e 760.0 [650.6-870.8] µM, respectively to α-pinene and 770.1 [500.3-1180.5] e 620.7 [520.9-750.2] µM, respectively to β-pinene. In tissues pre-treated with α- (1 mM) or β-pinene (1 mM) in medium without Ca2+ with EGTA (0.2 mM), ACh (3 µM)-induced phasic contractions were inhibited from 18.4 ± 3.3% to 7.7 ± 1.5% and 5.0 ± 1.2% of K60, respectively. In tissues maintained under Ca2+-free conditions (in medium containing EGTA 0.2 mM) and in presence of K+ (60 mM) or ACh (3 µM), tonic contractions induced by Ca2+ addition were reduced from 50.2 ± 3.3% and 53.9 ± 5.2%, respectively to values corresponding to 10.6 ± 2.6 % and 24.4 ± 4.1 % to experiments with α-pinene and 6.6 ± 1.1 % and 10.9 ± 3.5 % to experiments with β-pinene, respectively. In tissues pre-treated with α- (1 mM) or β-pinene (1 mM), ACh (60 µM)-induced tonic contractions, in verapamil (3 µM)-containing medium, were inhibited from 29.0 ± 4.1 % to 10.6 ± 2.7 % and 12.5 ± 2.2 % of the K60, respectively. The caffeine (20 mM)-induced contractile response in normal Tyrode’s solution was potentiated from 47.8 ± 3.2 % to 72.1 ± 9.0 and 88.8 ± 10.6 % of the control response in virtue of α- (1 mM) or β-pinene (1 mM) presence, respectively. In EGTA-containing Ca2+-free medium, the contractile response to caffeine was reduced to 9.5 ± 3.5%. Under these conditions, and in presence of α- (1 mM) or β-pinene (1 mM), this response was not significantly altered, with values corresponding to 7.2 ± 2.2 e 4.7 ± 1.3 %, respectively. In verapamil- and EGTA-containing Ca2+-free medium, after depletion of the intracellular Ca2+ stores by CCh (100 µM), the contractions induced by Ca2+ addition were potentiated by the presence of α- (1 mM) or β-pinene (1 mM) from 30.7 ± 2.1 % to 80.6 ± 4.7 and 51.3 ± 7.6 %, respectively (p < 0.05, Bonferroni’s test). In gastrointestinal dye fractional retention studies, α- or β-pinene increased the rat liquid gastric emptying. On the other hand, they did not alter the ACh-induced contractions on gastric fundus strips. Our study firstly shows that, both α- and β-pinene have prokinetic properties in rats. In isolated tissues, they did not affect cholinergic contractions on gastric fundus strips, but are myorelaxant compounds on rat duodenal preparations, probably by an interference with cellular mechanisms mediated by IP3 release. Moreover, α- and β-pinene activate capacitative Ca2+ entry to intracellular milieu after Ca2+ stores depletion. / α- e β-pineno são monoterpenos constituintes do óleo essencial de plantas encontradas no Nordeste do Brasil como a malva-santa e o eucalipto que, na medicina popular, são usadas no tratamento de distúrbios intestinais e respiratórios. As ações miorrelaxantes desses óleos essenciais são atribuídas à presença de α- e de β-pineno. Nosso objetivo foi estudar mais detalhadamente os efeitos desses constituintes sobre a contratilidade do músculo liso gastrintestinal e sobre o esvaziamento gástrico de líquido em ratos. No presente estudo, foram usados ratos Wistar machos (200-250g) sacrificados por deslocamento cervical. Tiras de duodeno, íleo e fundo de estômago foram cortados e mantidos em Tyrode. As contrações isométricas foram registradas através de transdutores de força conectados a sistema computadorizado. Soluções contendo α- ou β-pineno foram preparadas em Tween 80 (concentração final ≤ 0,2% v/v). Usados isoladamente, α- e β-pineno diminuíram o tônus basal em duodeno com CI50 de 655,1 e 810,2 µM, respectivamente. Contrações submaximais induzidas por K+ (60 mM, K60) ou acetilcolina (ACh, 3 µM) foram inibidas, de maneira concentração-dependente (p < 0,001, ANOVA), com valores de CI50 correspondentes a 790,0 [580,2-1007,4] e 760,0 [650,6-870,8] µM, respectivamente, para o α-pineno e 770,1 [500,3-1180,5] e 620,7 [520,9-750,2] µM para o β-pineno, respectivamente. Em preparações pré-tratadas com 1 mM de α- ou β-pineno, a contração fásica induzida por ACh (3 µM) em meio sem Ca2+ contendo EGTA (0,2 mM) foi reduzida de 18,4 ± 3,3 % para 7,7 ± 1,5 % e 5,0 ± 1,2 % da contração K60, respectivamente. A contração tônica induzida por adição de Ca2+ (2 mM) em preparações mantidas na presença de K+ (60 mM) ou ACh (3 µM), em meio sem Ca2+ contendo EGTA (0,2 mM), foi reduzida de 50,2 ± 3,3 % e de 53,9 ± 5,2 % para 10,6 ± 2,6 % e 24,4 ± 4,1 % pelo α-pineno e 6,6 ± 1,1 % e 10,9 ± 3,5 % pelo β-pineno, respectivamente. Em preparações pré-tratadas com 1 mM de α- ou β-pineno, a contração tônica induzida por ACh (60 µM) em Tyrode normal contendo verapamil (3 µM) foi reduzida de 29,0 ± 4,1 % para 10,6 ± 2,7 % e 12,5 ± 2,2 % da K60, respectivamente. A resposta contrátil induzida pela cafeína (20 mM) em Tyrode normal foi potencializada de 47,8 ± 3,2 % para 72,1 ± 9,0 e 88,8 ± 10,6 % da resposta controle pelo pré-tratamento da preparação com α- ou β-pineno, respectivamente. Em meio sem Ca2+ com EGTA, a resposta contrátil da cafeína (20 mM) foi reduzida para 9,5 ± 3,5 %. Sob essa condição e, na presença de α- ou β-pineno, a resposta não foi alterada significativamente, correspondendo a 7,2 ± 2,2 e 4,7 ± 1,3 %, respectivamente. Após esgotamento dos estoques intracelulares com CCh (100 mM), a contração induzida por adição de Ca2+ (2 mM), em meio sem Ca2+ com EGTA (0,2 mM) e verapamil (3 µM), foi potencializada pela adição prévia de α- ou β-pineno de 30,7 ± 2,1 % para 80,6 ± 4,7 e 51,3 ± 7,6 %, respectivamente (p < 0,05, teste de Bonferroni). Em estudos de retenção fracional de corante no trato gastrintestinal, o α- e o β-pineno aumentaram o esvaziamento gástrico, porém, a contratilidade induzida por ACh (3 µM) em tiras de fundo de estômago in vitro não foi alterada pela presença prévia de α- e β-pineno. O presente trabalho demonstra, pela primeira vez, que os monoterpenos α- e β-pineno apresentam efeito procinético em ratos. Em tecidos isolados, não afetam a contração colinérgica em tiras de estômago, mas apresentam atividade miorrelaxante em tecido duodenal, por provável interferência com os mecanismos celulares mediados pela formação de IP3. Além disso, como demonstrado em íleo de rato, esses monoterpenos provavelmente ativam as vias de entrada de Ca2+ para a célula em situações de depleção dos estoques intracelulares.

MAGALHÃES, Patrícia Andréa da Fonseca. Efeitos inibitórios da sertralina no sistema urinário de ratos. 2010. 138 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-08T13:46:14Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_pafmagalhães.pdf: 1917042 bytes, checksum: d6e3be6faa44e16a9d51f088fad3afa1 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:53:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_pafmagalhães.pdf: 1917042 bytes, checksum: d6e3be6faa44e16a9d51f088fad3afa1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:53:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_pafmagalhães.pdf: 1917042 bytes, checksum: d6e3be6faa44e16a9d51f088fad3afa1 (MD5) Previous issue date: 2010 / Sertraline, a drug belonging to the family of selective serotonin reuptake inhibitors, is used in antidepressant therapy, and has good tolerance with low incidence of side effects. Here we have characterized the pharmacological effects of sertraline on the pattern of voiding anesthetized rats, on the renal functional parameters of isolated rat kidney and on the contractile parameters of isolated bladder and mesenteric smooth muscle. In vitro, strips of urinary bladder and rings of mesenteric artery were kept in physiological solution aerated with 95% O2 - 5% CO2, pH 7.4, 37°C, for the record of isometric muscle contractions. We also used isolated rat kidney perfused with modified Krebs-Henseleit solution containing 6% bovine albumin (37°C, 95% O2 - 5% CO2). In vivo, urinary bladder of anesthetized rats was continuously infused with saline at room temperature (23°C) via an infusion pump set to flow 0.06 mL/min and urinary parameters were evaluated after administration of sertraline. In these experiments, sertraline (20 mg/kg, i.v.) significantly increased voiding frequency (control = 0.16 ± 0.02 urination/min to 0.70 ± 0.09 urination/min), basal pressure of filling (control = 4.18 ± 2.11 cmH2O to 25.38 ± 3.03 cmH2O) and maximum bladder pressure reached during the bladder contractions (control = 25.78 ± 2.11 cmH2O to 40.88 ± 3.03 cmH2O). In isolated kidneys, previous administration of sertraline (30 µM) inhibited the changes promoted by phenylephrine (10-4 M) in perfusion pressure (PP; 178.31 ± 21.68 mmHg to 105.40 ± 14.46 mmHg), renal vascular resistance (RVR, 6.82 ± 0.99 mmHg/mL.g-1.min-1 to 4.32 ± 0.55 mmHg/mL.g-1.min-1), urinary flow (UF; 0.43 ± 0.15 mL.g-1.min-1 to 0.08 ± 0.03 mL.g-1.min-1) and the rate of glomerular filtration rate (GFR, 1.60 ± 0.40 mL.g-1.min-1 to 0.32 ± 0.17 mL.g-1.min-1). In isolated strips of rat urinary bladder, sertraline inhibited, in a concentration-dependent manner, the contractions induced by 60 mM K+ or 3 µM carbachol (CCh) with IC50 of 21.0 [15.8 to 28.0] µM and 22.8 [12.9 to 40.4] µM, respectively. Added to the plateau of a steady state contraction induced by K+ (60 mM) or CCh (1 µM), sertraline produced relaxing effect, in a concentration-dependent manner, with IC50 of 94.3 [42.2 to 146.4] µM and 67.8 [20.1 to 115.5] µM, respectively. In rings of mesenteric artery stimulated by K+ (60 mM) or PHE (60 µM) in medium without Ca2+ with EGTA (0.5 mM), sertraline (100 µM) inhibited contractions induced by Ca2+ from 124.1 ± 8.1% to 48.3 ± 14.0% and 74.8 ± 13.5% to 35.9 ± 9.4% respectively. In conclusion, sertraline increased the urinary frequency voiding in anesthetized rats, inhibited the changes induced by PHE in isolated kidney and its effects probably are caused by its vascular antispasmodic actions. This hypothesis was confirmed by the inhibitory effects on bladder smooth muscle strips and mesenteric artery rings, which are promoted by a possible interference of sertraline with the Ca2+ influx through plasmalemmal channels, which may be receptor- or voltage-operated Ca2+ channels. / Sertralina, fármaco pertencente à família dos inibidores seletivos da recaptação de serotonina, é preferencialmente utilizada na terapêutica antidepressiva, possuindo boa tolerância com baixa incidência de efeitos colaterais. Neste trabalho, caracterizamos os efeitos farmacológicos da sertralina sobre o padrão miccional de ratos anestesiados, em parâmetros funcionais de rim isolado de ratos Wistar e em parâmetros contráteis de músculo liso vesical e vascular isolados de ratos. In vitro, preparações de músculo liso vesical e artéria mesentérica, foram mantidas em solução nutridora aerada com 95% O2 – 5% CO2, pH 7,4, 37°C, para registro isométrico das contrações musculares. Usamos também rim isolado de rato, perfundido com solução de Krebs-Henseleit modificada contendo 6% de albumina bovina (37°C, 95% O2 – 5% CO2). In vivo, a bexiga de rato anestesiado foi continuamente infundida com salina à temperatura ambiente (23°C) através de bomba de infusão ajustada para fluxo de 0,06 mL/min e foram avaliados os parâmetros miccionais após administração de sertralina. Nestes experimentos, a sertralina (20 mg/kg, i.v.) aumentou significativamente a frequência miccional (controle = 0,16 ± 0,02 micções/min para 0,70 ± 0,09 micções/min), a pressão basal de enchimento (controle = 4,18 ± 2,11 cmH2O para 25,38 ± 3,03 cmH2O) e a pressão intravesical máxima alcançada durante as contrações miccionais (controle = 25,78 ± 2,11 cmH2O para 40,88 ± 3,03 cmH2O). Em rim isolado, a administração prévia de sertralina (30 µM) inibiu as alterações promovidas pela fenilefrina (10-4 M) na pressão de perfusão (PP; 178,31 ± 21,68 mmHg para 105,40 ± 14,46 mmHg), na resistência vascular renal (RVR; 6,82 ± 0,99 mmHg/mL.g-1.min-1 para 4,32 ± 0,55 mmHg/mL.g-1.min-1), no fluxo urinário (FU; 0,43 ± 0,15 mL.g-1.min-1 para 0,08 ± 0,03 mL.g-1.min-1) e no ritmo de filtração glomerular (RFG; 1,60 ± 0,40 mL.g-1.min-1 para 0,32 ± 0,17 mL.g-1.min-1). Em tiras isoladas de bexiga de rato, a sertralina inibiu, de maneira dependente de concentração as contrações induzidas por K+ 60 mM ou carbacol (CCh) 3 µM com CI50 de 21,0 [15,8 – 28,0] µM e 22,8 [12,9 – 40,4] µM, respectivamente. Adicionada no estado estacionário da contração induzida por K+ (60 mM) ou CCh (1 µM), a sertralina produziu efeito relaxante de maneira dependente de concentração com CI50 de 94,3 [42,2 - 146,4] µM e 67,8 [20,1 - 115,5] µM, respectivamente. Em anéis de artéria mesentérica estimulados por K+ (60 mM) ou fenilefrina (PHE, 60 µM) em meio sem Ca2+ com EGTA (0,5 mM), a sertralina (100 µM) inibiu as contrações induzidas por Ca2+ de 124,1 ± 8,1% para 48,3 ± 14,0% e 74,8 ± 13,5% para 35,9 ± 9,4%, respectivamente. Em suma, a sertralina aumentou a frequência miccional em ratos anestesiados, inibiu as alterações induzidas por PHE em rim isolado sendo seus efeitos provavelmente causados por sua ação antiespasmódica vascular. Essa hipótese foi confirmada pelos efeitos inibitórios em tiras de músculo liso vesical e em anéis de artéria mesentérica, sendo estes promovidos por provável interferência da sertralina com o influxo de Ca2+ pela membrana plasmática seja por canais operados por receptor ou por canais voltagem-dependentes.

SIQUEIRA, Rodrigo José Bezerra de. Efeitos farmacológicos do álcool sesquiterpênico (-)-a- bisabolol em preparações isoladas de músculo liso vasculares e não-vasculares. 2011. 165 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-10-01T16:41:00Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_rjbsiqueira.pdf: 4059695 bytes, checksum: dd3a5241af117ecd8d603ea70d443537 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-10-04T13:46:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_rjbsiqueira.pdf: 4059695 bytes, checksum: dd3a5241af117ecd8d603ea70d443537 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-04T13:46:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_rjbsiqueira.pdf: 4059695 bytes, checksum: dd3a5241af117ecd8d603ea70d443537 (MD5) Previous issue date: 2011 / In this in vitro study the effects of the monocyclic sesquiterpene alcohol (-)-α-bisabolol on the contractile behavior of rat and mouse smooth muscle preparations were investigated. Under resting tonus, (-)-α-bisabolol relaxed duodenal smooth muscle preparations, whereas it showed biphasic effects in other smooth muscles, contracting endothelium-intact aortic rings and urinary bladder strips at the concentration range of 30 - 300 µM, and relaxing these tissues at higher concentrations. When applied on the steady state of sustained contractions, (-)-α-bisabolol showed only relaxing properties. It preferentially relaxed contractions induced electromechanically by a high extracellular concentration of K+ than those induced pharmacomechanically by adding phenylephrine or carbachol in the bath chamber. The pharmacological potency of (-)-α-bisabolol was variable being higher in mesenteric vessels, whereas it exerted relaxing activity with lesser potency on tracheal or colonic tissues. Tissues possessing spontaneous activity were also differentially influenced by (-)-α-bisabolol that completely decreased spontaneous contractions in duodenum whereas increased their amplitude in urinary bladder. The (-)-α-bisabolol showed more pronounced inhibitory effects on the concentration-effect curves induced by calcium or barium when constructed in presence of an agent producing eletromecanic coupling. The vasodilatory effect of (-)-α-bisabolol in aortic rings did not involve a role of endothelial factors or of potassium channels. In aortic preparations under calcium free conditions (-)-α-bisabolol augmented the phasic contractions induced by caffeine. In vivo, (-)-α-bisabolol attenuated the increased responses of carbachol in tracheal rings of ovalbumin-sensitized rats challenged with ovalbumin, but was without effect in the decreased responsiveness of urinary bladder strips in animals submitted to ifosfamide treatment. In summary, (-)-α-bisabolol is characterized as a biologically active substance on smooth muscle. At least part of the underlying mechanism involved in the (-)-α-bisabolol -induced inhibitory actions is related to its ability in reducing electromechanical coupling. / Nesse estudo in vitro foram investigados os efeitos do álcool sesquiterpênico monocíclico (-)-α-bisabolol no comportamento contrátil de preparações isoladas de músculo liso de ratos e camundongos. Na tensão basal, o (-)-α-bisabolol (1 – 1000 µM) induziu relaxamento em preparações duodenais, mas exibiu efeitos bifásicos em outros tecidos, contraindo preparações de aorta com endotélio e de bexiga urinária na faixa de concentração entre 30-300 µM e relaxando as mesmas preparações em concentrações maiores. Quando aplicado após indução de pré-contração sustentada, o (-)-α-bisabolol apresentou apenas propriedades relaxantes. Esse sesquiterpeno relaxou preferencialmente as contrações induzidas eletromecanicamente por uma elevada concentração extracelular de potássio em comparação com as induzidas de modo farmacomecãnico pela adição de fenilefrina ou carbacol na câmara isolada. A potência farmacológica do (-)-α-bisabolol foi maior em vasos mesentéricos e menor em preparações isoladas de traquéia e cólon. Os tecidos que apresentaram atividade espontânea também foram influenciados de forma diferenciada pelo (-)-α-bisabolol, que aboliu as contrações espontâneas em tecidos duodenais e aumentou a amplitude das mesmas em preparações de bexiga urinária. O (-)-α-bisabolol apresentou efeitos inibitórios mais pronunciados para as curvas concentração-efeito obtidas para o cálcio e o bário em presença de agente indutor de acoplamento eletromecânico. O efeito vasodilatador do (-)-α-bisabolol em anéis de aorta não depende de fatores endoteliais e canais para potássio. Em preparações de aorta o (-)-α-bisabolol potencializou a contração fásica induzida pela cafeína em meio sem cálcio. Quando administrado in vivo, o (-)-α-bisabolol atenuou a resposta exacerbada ao carbacol observada em preparações de traquéia de ratos sensibilizados e desafiados com ovalbumina. Entretanto, esse sesquiterpeno não alterou a responsividade contrátil diminuída observada em preparações de bexiga urinária de camundongos tratados com ifosfamida. Em termos gerais, o (-)-α-bisabolol apresenta-se como uma substância biologicamente ativa no músculo liso. O mecanismo subjacente envolvido nas ações inibitórias do (-)-α-bisabolol está parcialmente relacionado à sua habilidade em reduzir o acoplamento eletromecânico.

OLIVEIRA, D. M. N. Efeitos da acidose extracelular na contratilidade de tecidos gastrintestinais de ratos. 2015. 110 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-01-25T13:55:08Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_dmnoliveira.pdf: 2106894 bytes, checksum: d9c0a1b97228b9eb264648792d79ec28 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-01-25T13:55:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_dmnoliveira.pdf: 2106894 bytes, checksum: d9c0a1b97228b9eb264648792d79ec28 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-25T13:55:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_dmnoliveira.pdf: 2106894 bytes, checksum: d9c0a1b97228b9eb264648792d79ec28 (MD5) Previous issue date: 2015-09-18 / Previamente foi sugerido que a acidemia, provocada por uma sessão de exercício físico agudo, seria responsável por induzir retardo no esvaziamento gástrico de líquidos, assim como diminuir a resposta contrátil em tecidos isolados de fundo de estomago, em ratos. No presente trabalho, estudamos os efeitos in vitro da acidose extracelular em tecidos gastrintestinais de ratos. Os registros isométricos foram obtidos a partir de tiras isoladas de fundo de estômago e segmentos de duodeno em preparações para órgãos isolados através de sistema de aquisição de dados. A acidose extracelular (pH 6,0) diminuiu a resposta contrátil de forma significativa (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) em tecidos de fundo de estômago, evocadas por acoplamento farmacomecânico por carbacol (CCh) e serotonina (5-HT), com respostas máximas de (148.1 ± 12.5% vs 212 ± 11.6%) para o CCh e (76.3 ± 8% vs 105.6 ± 8.4%) para a 5-HT. Já em tecidos isolados de duodeno, em meio acidificado, também estimulados por CCh e 5-HT, não foram encontradas diferenças nas respostas contráteis (P>0,05). Em meio ácido (pH 6,0), a contração máxima dos tecidos de fundo de estômago pela entrada de Ca2+ via canais ROCC (Canais para cálcio operados por receptor), ativados por CCh (1µM), foi reduzida de forma significativa (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) em comparação com seu controle (56.6±9.3% vs 93.8±11.5%, respectivamente). Entretanto, quando os canais ROCC foram ativados por CCh (30 µM), diminuições significativas das respostas foram encontradas apenas quando o Ca2+ foi adicionado nas concentrações de 2 e 5 mM (21.9 ± 6.6%; 84.2 ± 15.3%) vs (89.3 ± 15.5%; 150.6 ± 18.6%), respectivamente. Em experimento adicional, a acidose extracelular (pH 6,0) reduziu as respostas contráteis de tecidos de fundo de estômago pela entrada de Ca2+ através dos canais SOCC (Canais para cálcio operados por estoque), com diferenças significativas (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) quando o Ca2+ foi adicionado nas concentrações de 2 e 5 mM (24.5 ± 10.1% e 82.1 ± 13.9%) vs (66 ± 12.9% e 125.3 ± 12.7%), respectivamente. O presente estudo demonstrou que a acidose extracelular diminuiu a resposta contrátil nos tecidos gastrintestinais de forma seletiva, visto que apenas os tecidos de fundo de estômago foram afetados. E ainda, que essa diminuição na contratilidade pareceu ser devida, pelo menos em parte, a uma diminuição na captação de Ca2+ do meio extracelular por canais para cálcio ativados por transdução de sinal intracelular.

CARVALHO, Marcos Fiuza de. Análise do efeito de inibidores de fosfodiesterase do tipo 5 e agonistas beta adrenergicos em parametros urodinamicos de camundongos utilizando modelo experimental de hiperatividade detrusora. 2015. 51 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T15:41:19Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T16:09:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T16:09:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_mfcarvalho.pdf: 1241642 bytes, checksum: 64103057c08598098ba4fe542a194bf8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Pharmacological treatment of detrusor overactivity (DO) has been classically done with antimuscarinics. Recently new pharmacological agents or association of drugs have been used to treat DO. One of them are the beta3 agonists. Beta 3 agonists increase intracellular cyclic adenosine monophosphate (cAMP) through adenylyl cyclase pathway. cAMP induces detrusor smooth muscle (DSM) relaxation. Phosphodiesterase type 5 inhibitors (PDE-5i) like tadalafil also cause DSM relaxation through nitric oxide/cyclic guanosine monophosphate (NO/cGMP) pathway. Besides the above mechanisms it has been hypothetized that association of beta 3 agonists with PDEi may cause more pronounced DSM relaxation. As a consequence, the principal aim of this in vivo experimental study was to evaluate the impact of association of PDE-5i (tadalafil) and beta3 agonist (BRL 37344) on DO. Thirty mice were randomized into five groups: Control (n=6); L-Ng-Nitroarginine methyl ester hydrochloride (L-NAME) (n=6); L-NAME /tadalafil (n=6); L-NAME / BRL 37344 (n=6); L-NAME/ tadalafil / BRL 37344 (n=6). L-NAME was used to experimentally cause DO on mice by NO deprivation. All animals were submitted to urodynamic studies and the following parameters were evaluated: non-voiding contractions (NVC); frequency of micturition cycles (FM). It was considered as detrusor overactivity the increase in the number of NVC and FM. Comparisons between five groups of treatment were made by analysis of variance (ANOVA) associated with Tukey test. L-NAME Group (4.33 ±2.58) increased the number of NVC compared to Control Group (1,50±0,55). L-NAME/Tadalafil (2.00±1.10), L-NAME/BRL 37344 (1,50±1,52) and L-NAME/Tadalafil/BRL37344 (2,00±1,26 ) Groups decreased number of NVC compared to L-NAME Group (p<0.05). However, co-administration of Tadalafil/BRL 37344 was not more effective than administration of Tadalafil or BRL 37344 alone (Figure 1). L-NAME Group (2,18±0,68) increased the number of FM compared to Control Group (0,69±0,56). L-NAME/Tadalafil (0,97±0,71), L-NAME/BRL 37344 (0,92±0,38) and L-NAME/Tadalafil/BRL 37344 (1,05±0,44) Groups decreased number of FM compared to L-NAME Group (p<0,05). However, co-administration of Tadalafil/BRL 37344 was not more effective than administration of Tadalafil or BRL 37344 alone. Both Tadalafil and BRL 37344 improved DO. Nonetheless, association of tadalafil and BRL 37344 has not an additive effect on DO. / Tratamento farmacológico da hiperatividade detrusora (HD) tem sido classicamente feito com antimuscarínicos. Recentemente novos agentes farmacológicos ou associação de drogas tem sido usados para tratar HD. Um deles são os beta3 agonistas. Beta3 agonistas aumentam a adenosina monofosfato cíclica intracelular (AMPc) através da via da adenilato ciclase. AMPc induz o relaxamento do músculo liso detrusor (MLD). Inibidores da fosfodiesterase tipo 5 (iPDE-5) como a tadalafila também causam relaxamento do MLD através da via do óxido nítrico/guanosina monofosfato cíclico (NO/GMPc). Além dos mecanismos acima tem-se feito a hipótese que a associação dos beta 3 agonistas com iPDE pode causar relaxamento pronunciado do MLD. Como consequência, o principal objetivo deste estudo experimental in vivo foi avaliar o impacto da associação dos iPDE (tadalafila) e beta 3 agonista (BRL 37344) na HD. Trinta camundongos foram randomizados em cinco grupos: Controle (n=6); L-Ng-Nitroarginine methyl ester hidroclorido (L-NAME) (n=6); L-NAME/Tadalafila (n=6); L-NAME/BRL 37344 (n=6); L-NAME/Tadalafila/BRL 37344 (n=6). L-NAME foi usado para causar experimentalmente HD nos camundongos pela depleção de NO. Todos animais foram submetidos a estudos urodinâmicos e os seguintes parâmetros foram avaliados: non-voiding contractions (NVC); frequência de micção (FM). Foi considerada como hiperatividade detrusora o aumento no número de NVC e FM. Comparações entre os cinco grupos de tratamento foram feitos pela análise de variância (ANOVA) associados com o teste de Tukey. O Grupo L-NAME (4,33 ±2,58) aumentou o número de NVC comparado ao Grupo Controle (1,50 ±0,55). Os Grupos L-NAME/Tadalafila (2.00±1.10), L-NAME/BRL 37344 (1,50±1,52) e L-NAME/Tadalafila/BRL37344 (2,00±1,26 ) diminuiram o número de NVC comparado com o Grupo L-NAME (p<0,05). Porém a co-administração de Tadalafila/BRL 37344 não foi mais efetiva que a administração de Tadalafila ou BRL 37344 sozinhos. O Grupo L-NAME (2,80 ± 0,68) aumentou o número de FM comparada ao Grupo Controle (0,69 ±0,56). Os Grupos L-NAME/Tadalafila(0,97±0,71), L-NAME/BRL 37344(0,92 ±0,38) e L-NAME/Tadalafila/BRL 37344 (1,05 ±0,44) diminuiram o número de FM comparado com o Grupo L-NAME (p<0,05). Porém a co-administração da Tadalafila/ BRL 37344 não foi mais efetiva que a administração de Tadalafila e BRL 37344 sozinhos. Ambos Tadalafila e BRL 37344 melhoraram a HD. Porém, a associação de Tadalafila e BRL 37344 não teve efeito aditivo na hiperatividade detrusora.

Es fundamental, de cara a poder tratar las enfermedades que afectan al aparato digestivo, conocer, entre otras cosas, los neurotransmisores que están implicados en la relajación de la musculatura lisa intestinal. Actualmente, está bastante aceptado que los principales neurotransmisores inhibitorios implicados en esta relajación en la mayorías de mamíferos son el óxido nítrico y el ATP o un nucleótido relacionado. Sin embargo, el papel de ambos en el tubo digestivo humano y la implicación de cada uno de ellos es todavía desconocido. Además, la mayoría de los estudios previos se han realizado con fármacos poco selectivos lo que imposibilita el conocimiento y la caracterización de los receptores implicados en la relajación de origen purinérgico.Por tanto los objetivos de esta tesis doctoral han sido:El estudio de la neurotransmisión inhibitoria no adrenérgica no colinérgica (NANC), no nitrérgica en el colon humano. Caracterización de los receptores implicados en la relajación purinérgica del colon humano. Estudiar el mismo mecanismo en otras áreas del tracto gastrointestinal y otras especies. Caracterización de la neurotransmisión purinérgica en el intestino delgado de cerdo. Estudiar la co-transmisión funcional entre NO y ATP en el colon humano y establecer la función de cada uno de estos neurotransmisores. El estudio de otros posibles neurotransmisores inhibitorios como el sulfhídrico (H2S) y su vía de acción en el colon humano y de otras especies.Para llevar a cabo estos objetivos se han utilizando, principalmente, las técnicas de baño de órganos y de microelectrodos, que permiten la caracterización in Vitro de las vías inhibitorias, incluyendo la identificación de los neurotransmisores, los receptores y las vías intracelulares implicadas en la interacción neuromuscular. Además se han utilizado de forma complementaria otras técnicas como la inmunohistoquímica. Además y a modo de colaboración externa hemos incluido el estudio de los receptores purinérgicos en neuronas del plexo mientérico de cobayo (técnica de medida de calcio con Fluo-4) y hemos caracterizado el efecto del sulfhídrico en segmentos intestinales donde se preserva el circuito nervioso responsable de la peristalsis.Los resultados obtenidos mediante estas técnicas han demostrado que: El receptor purinérgico responsable de la relajación intestinal (colon humano e intestino delgado de cerdo) es el P2Y1. Este receptor media el componente rápido del potencial de unión neuromuscular y de la relajación mecánica correspondiente a este fenómeno eléctrico. La relajación a nivel del colon humano responde, probablemente, a un mecanismo de co-transmisión entre ATP (a través de receptores P2Y1) y óxido nítrico. El ATP es responsable de la relajación fásica, mientras que el NO sería responsable de la relajación tónica. El sulfhídrico causa relajación de la musculatura lisa intestinal a través de canales de potasio de baja conductancia sensibles a apamina y canales de potasio sensibles a ATP. El conocimiento de los receptores y los mecanismos implicados en la relajación intestinal puede contribuir en un futuro a diseñar estrategias terapéuticas en alteraciones motoras ocasionadas por patologías en el tracto gastrointestinal humano.