Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-12-28T12:22:52Z No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-28T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotextured absorbable tube of poly(lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotextured absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developed, which were characterized in vitro and in vivo biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which 88 rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5), tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: Nanotextured PLGA films, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability in vitro assays (p=0.000). The film containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time, when compared to the film without the drug (p=0.026). In vivo biocompatibility evaluation demonstrated a surrounding tissue to PLGA implants with acute inflammation, which was decreasing the long 90 days evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ? 0.020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p<0.05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90 days autograft group (p= 0.0020). Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. / Introdu??o: Les?es em nervos perif?ricos resultam na perda de fun??o do ?rg?o inervado e raramente apresentam recupera??o sem a interven??o cir?rgica. Uma das formas de reparo ? a t?cnica de tubuliza??o, atrav?s da qual ? poss?vel acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotr?ficos s?o indicados como uma alternativa terap?utica para reconstru??o de nervos perif?ricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorv?vel composto por poli (?cido l?ctico-co-?cido glic?lico), e avaliar seu efeito sem e com incorpora??o de tacrolimus sobre a regenera??o de nervo perif?rico em ratos. Materiais e M?todos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorv?veis de PLGA com e sem incorpora??o de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto ? biocompatibilidade, biodegrada??o e efic?cia como t?cnica de tubuliza??o. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copol?meros sem e com incorpora??o de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ci?tico foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em tr?s grupos conforme o tratamento: enxerto aut?logo (5), tubuliza??o com tubo PLGA (10) e tubuliza??o com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e an?lise histomorfom?trica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou n?o tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p=0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independentemente do tempo, quando comparada ? membrana sem o f?rmaco (p=0,026). Na avalia??o da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflama??o aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avalia??o. Em 7 dias ap?s os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposi??o de col?geno nos dois biomateriais quando comparado aos demais per?odos (p ? 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve m?dia menor em rela??o ? espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto aut?logo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avalia??o funcional da recupera??o do nervo ci?tico de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto aut?logo (em 90 dias | p= 0,0021), com menores ?ndices de fun??o ci?tica. Conclus?o: o presente estudo sugere que a combina??o de PLGA e tacrolimus favoreceu a regenera??o de nervo ci?tico de rato, e esta poder? ser uma potente alternativa para aplica??o cl?nica em les?es de nervos perif?ricos.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-03-17T12:57:37Z No. of bitstreams: 1 DIS_GIOVANNA_RAMOS_GARCEZ_COMPLETO.pdf: 5976123 bytes, checksum: 9c877744ccee252f8823d2473ec77be8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-17T12:57:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_GIOVANNA_RAMOS_GARCEZ_COMPLETO.pdf: 5976123 bytes, checksum: 9c877744ccee252f8823d2473ec77be8 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Peripheral nerve injuries are a common clinical problem and the development of new approaches to assist in its repair has been shown to be a growth area. The use of microstructured channels has been investigated, in order to promote cell growth guided by assisting in the damaged tissue recovery. Biocompatible and biodegradable materials can be applied for the construction of these devices by eliminating the need for a second procedure to remove the implant. This work proposes the preparation of microstructured film along channels aligned with polydimethylsiloxane (PDMS) and blends of polycaprolactone (PCL) and poly (lacticco- glycolic acid) (PLGA) for potential application in peripheral nerve regeneration. PDMS films were prepared by the method of mixing the solution with oligomers based curing agent. Blends of PCL (Mn = 80.00) and PLGA (85:15) with different ratios of PCL / PLGA (100/0, 90/10, 80/20 and 70/30) were prepared by the solvent evaporation method. The mold used to produce the films consisted of channels with different widths (5, 10, 15 and 20 ?m) and constant height (25 ?m). The materials were characterized by Scanning Electron Microscopy (SEM), Infrared Spectroscopy Fourier Transform (ATR / FT-IR), thermal gravimetric analysis (TGA), Atomic Force Microscopy (AFM). To evaluate the degradation time of the films was carried out in vitro degradation test of PCL blends and PCL / PLGA observing weight loss 0.4 to 9.9% until 90 days testing. It was found that the addition of the PLGA PCL is an effective way to control the degradation rate of the blend and there is no significant difference in the degradation of flat and microstructured films. / Les?es no nervo perif?rico s?o um problema cl?nico comum e a constru??o de novos dispositivos para auxiliar no seu reparo tem se mostrado uma ?rea em crescimento. A utiliza??o de condutos microestruturados vem sendo investigada, com o objetivo de promover um crescimento celular guiado, auxiliando na recupera??o do tecido lesado. Materiais biocompat?veis e biodegrad?veis podem ser aplicados para a constru??o destes dispositivos eliminando a necessidade de um segundo procedimento para remo??o do implante. Este trabalho prop?e a prepara??o de filmes microestruturados com canais longitudinalmente alinhados de polidimetilsiloxano (PDMS) e blendas de policaprolactona (PCL) e poli(?cido l?cticoco- glic?lico) (PLGA) para potencial aplica??o em regenera??o de nervo perif?rico. Filmes de PDMS foram preparados pelo m?todo de mistura da solu??o base de olig?meros com agente de cura. Blendas de PCL (Mn = 80,00) e PLGA (85:15) com diferentes raz?es de PCL/PLGA (100/0, 90/10, 80/20 e 70/30) foram preparadas pelo m?todo de evapora??o do solvente. O molde utilizado para produzir os filmes era constitu?do de canais com diferentes larguras (5, 10, 15 e 20 ?m) e altura constante (25 ?m). Os materiais foram caracterizados por Microscopia Eletr?nica de Varredura (MEV), Espectroscopia no Infravermelho por Transformada de Fourier (ATR/FT-IR), An?lise termogravim?trica (TGA), Microscopia de For?a At?mica (AFM). Para verificar o tempo de degrada??o dos filmes foi realizado ensaio de degrada??o in vitro das blendas de PCL e PCL/PLGA, observando-se perda de massa de 0,4-9,9 % at? o per?odo de 90 dias de ensaio. Constatou-se que a adi??o de PLGA ao PCL ? uma forma efetiva de controlar a taxa de degrada??o das blendas e que n?o h? diferen?a significativa entre a degrada??o dos filmes lisos e microestruturados.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 419964.pdf: 1028721 bytes, checksum: 6c934b5641f1910681c7e4e7f278caa4 (MD5) Previous issue date: 2010-01-05 / Prop?s-se neste trabalho avaliar a biocompatibilidade dos mini-implantes ortod?nticos novos e utilizados em tratamento ortod?ntico por meio da aplica??o de testes avaliativos de toxicidade celular in vitro e de libera??o i?nica in vivo. O ensaio de citotoxicidade foi atrav?s da levedura Saccharomyces Cerevisiae que ? um modelo microbiol?gico eucari?tico. Foram realizados testes qualitativos e quantitativos, com a cepa selvagem FF18733 desta levedura. Foram executados testes de exposi??o direta (em meio de cultura YPD l?quido) e testes de exposi??o indireta utilizando: MIs novos, MIs expostos ao fluoreto de s?dio (NaF a 0,0125%, 0,025% e 0,05%), e MIs utilizados in vivo. Foram realizadas fotomicrografias com microscopia eletr?nica de varredura (MEV) nos MIs utilizados in vivo e novos. Como resultado, a cepa selvagem FF 18733 mostrou uma diminui??o de sua sobreviv?ncia nos experimentos de exposi??o direta a um e a dois mini-implantes novos. No entanto, tal sensibilidade n?o se mostrou significativa. Os resultados de exposi??o ? saliva artificial de novos, bem como todos os resultados referentes aos usados, n?o indicaram diferen?as em rela??o aos controles. Da mesma forma, a exposi??o ao NaF n?o induziu, nos MIs, uma corros?o suficiente para causar toxicidade celular significativa nesta levedura. Apesar da corros?o leve apresentada nas fotomicrografias, n?o foram observadas indu??es de perda de viabilidade celular significativas na cepa testada de S. cerevisiae a partir dos componentes da liga (Ti-6Al-4V) dos MIs ortod?nticos. Evidenciou-se, assim, que tais componentes n?o alteram de forma importante o metabolismo da levedura, indicando que os MIs testados tendem a apresentar uma boa biocompatibilidade para uso em cl?nica ortod?ntica. No estudo in situ, o objetivo foi examinar e comparar os n?veis de v?rios ?ons met?licos liberados na saliva de pacientes em tratamento ortod?ntico e que iriam necessitar de tratamento envolvendo o uso de miniimplante. A amostra foi composta por 20 indiv?duos que estavam entre o sexto e o oitavo m?s de tratamento ortod?ntico. A saliva de cada paciente foi coletada em 4 tempos diferentes: antes da inser??o do MI (T1), 10 minutos (T2), 7 dias (T3) e 30 dias (T4) ap?s a instala??o do MI. As amostras salivares foram analisadas atrav?s de espectrometria (ICP- MS - inductively coupled plasma mass spectrometry; e ICP-OES - inductively coupled plasma optical emission spectrometry). A libera??o de nove diferentes ions met?licos foram observados: tit?nio (Ti), zinco (Zn), cromo (Cr), n?quel (Ni), ferro (Fe), cobre (Cu), alum?nio (Al) e cobalto (Co). Os dados foram analisados atrav?s de estat?stica descritiva e testes de normalidade (Shapiro-Wilk). A concentra??o de ions met?licos na saliva nos quatro tempos diferentes de tratamento com MI foi comparado usando o teste de Wilcoxon (&#945;=95%). No tempo T4, houve um aumento quantitativo na concentra??o salivar de Cu, Ti, V, Zn, bem como um decr?scimo quantitativo na concentra??o salivar de Al, Co, Cr, Fe, Ni, quanto comparados ao grupo T1. No entanto, n?o houve diferen?as estatisticamente significativas entre as concentra??es de metais. Logo, pode ser conclu?do que a coloca??o de aparelho ortod?ntico associado ao uso de mini-implante ortod?ntico n?o leva a um aumento, estatisticamente significativo, na concentra??o de ions met?licos na saliva.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 425578.pdf: 1317181 bytes, checksum: b20aaf08d45d26e52a920073367ead4a (MD5) Previous issue date: 2010-01-18 / O objetivo do presente estudo foi avaliar a rea??o tecidual local, em calota craniana de ratos, frente ? implanta??o de discos de poli (?cido L/D-l?ctico) e avaliar a sua toxicidade gen?tica, pela indu??o de micron?cleos em eritr?citos policrom?ticos (EPC) na medula ?ssea de ratos. Foram utilizados 25 ratos Wistar, machos, com 200 e 300 gramas. 20 animais sofreram procedimento cir?rgicos e tiveram os discos implantados, e 5 animais receberam medica??o p?s-operat?ria da mesma maneira, servindo como grupo controle para genotoxicidade. Com uma broca trefina 4,1mm foram realizadas duas ostectomias circulares, uma em cada osso parietal. Na perfura??o direita foi inserido um disco de poli(?cido L/D-l?ctico), e a do lado esquerdo foi preenchida por co?gulo sangu?neo (grupo controle). Os animais foram eutanasiados nos tempos apropriados (15, 30, 90 e 120 dias ap?s a cirurgia), por inala??o de isoflurano. Nos 20 animais operados foi retirada a calota craniana e fixada em formalina tamponada a 10%. As amostras foram submetidas ? descalcifica??o e ap?s emblocados em parafina e submetidos a cortes de 6 &#956;m, no sentido transversal, na por??o de maior di?metro dos discos. As l?minas obtidas foram submetidas ? t?cnica histoqu?mica de colora??o HE. Para avalia??o da genotoxicidade, ambos os f?mures de cada animal foram removidos e o conte?do da medula ?ssea extra?do diretamente sobre uma l?mina com uma gota de soro bovino fetal, e homogeinizada. Com este material foi feito um esfrega?o. As l?minas foram secas, fixadas em metanol e coradas uma l?mina de cada f?mur com Giemsa e a outra com Acridine Orange. Os resultados obtidos foram submetidos a avalia??o estat?stica pela An?lise de Vari?ncia (ANOVA). Na avalia??o histol?gica, no per?odo de 15 e 30 dias, em ambos os grupos o defeito ?sseo foi bem evidenciado, n?o sendo observados neoforma??o ?ssea, epis?dios de reabsor??o ?ssea nem rea??o de corpo estranho. Nos per?odos de 90 e 120 dias, no grupo controle, observou-se neoforma??o nas bordas do defeito. No grupo experimental, houve neoforma??o ?ssea nas bordas do defeito e migrando abaixo do local ocupado pelo disco e aus?ncia de infiltrado inflamat?rio. Quanto a avalia??o de genotoxicidade, n?o foi detectada redu??o significativa (p < 0,05) da frequ?ncia de EPC em rela??o ao controle negativo nem aumento significante (p < 0,05) nos EPC com micron?cleos. Pode-se concluir que o material utilizado neste estudo ? biocompat?vel e bem tolerado pelos tecidos estudados, sendo considerado negativo para mutagenicidade cromoss?mica no ensaio realizado.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 436389.pdf: 2880203 bytes, checksum: 70f9cf1f3dd05a4856e3878cc076250d (MD5) Previous issue date: 2011-12-19 / Dermal fillers are injectable products commonly used in aesthetic medicine with the intention of alleviating face wrinkles and increasing lip volume. This type of treatment, which often replaces traditional surgical procedures such as rhytidectomies, provides satisfactory cosmetic results. It is known, however, that there is a risk of undesired effects at the site of injection of the product or even at a distance. Dental literature reports numerous cases of orofacial injuries caused by the use of dermal fillers, reflecting a new reality in dental surgeons' practice. In this research, 2 of the most commonly used materials for aesthetic purposes by dermatologists and plastic surgeons were injected in rat tongues: 10% polymethylmethacrylate (n=16) and 20mg/mL hyaluronic acid (n=18), compared to an inert solution for control (n=16). After 7, 60 and 90 days, local clinical and histological alterations of each product were analyzed. The following factors were verified: intensity of the inflammatory response in the injection area (hematoxylin and eosin), the amount of newly formed blood vessels and macrophages (immunohistochemistry) and the density of collagen fibers (picrosirius).At the same experimental times, systemic migration of injected substances was observed through microscopic examination of organs of metabolism and excretion (liver and kidney) stained by hematoxylin and eosin. Results showed that both filling materials triggered some kind of local inflammatory response to a greater or lesser degree. In the comparative analysis, it was found that polymethylmethacrylate showed cases of foreign body reaction, while hyaluronic acid demonstrated characteristics suggesting biocompatibility. This research is part of a set of experiments related to the use of facial dermal fillers for aesthetic purposes and it reinforces the need for dental surgeons to identify and manage adverse reactions which may result from such currently widely used treatment. / Os materiais de preenchimento s?o produtos injet?veis utilizados frequentemente na medicina est?tica com a inten??o de atenuar as rugas da face e aumentar o volume dos l?bios. Essa modalidade de tratamento, que muitas vezes substitui procedimentos cir?rgicos tradicionais, como a ritidoplastia, apresenta resultados est?ticos satisfat?rios, embora se saiba da possibilidade de alguns efeitos indesejados ocorrerem no local da implanta??o do produto ou mesmo ? dist?ncia. A literatura odontol?gica relata in?meros casos de les?es buco faciais decorrentes do uso de materiais de preenchimento, refletindo uma nova realidade na pr?tica do cirurgi?o dentista. Nessa pesquisa, 2 dos materiais com finalidade est?tica mais utilizados por dermatologistas e cirurgi?es pl?sticos foram injetados em l?nguas de ratos: polimetilmetacrilato 10% (n=16) e ?cido hialur?nico 20mg/mL (n=18), al?m de uma solu??o inerte para controle (n=16). Ap?s 7, 60 e 90 dias, avaliaram-se as altera??es locais cl?nicas e histol?gicas de cada produto. Foi verificada a intensidade da resposta inflamat?ria na ?rea da inje??o (hematoxilina e eosina), a quantidade de vasos sangu?neos neoformados e de macr?fagos (imunoistoqu?mica) e a densidade de fibras col?genas (picros?rius).Nos mesmos tempos experimentais, a migra??o sist?mica das subst?ncias injetadas foi verificada por meio do exame microsc?pico de ?rg?os de metabolismo e excre??o (f?gado e rim) pela colora??o de hematoxilina e eosina. Os resultados mostraram que os 2 materiais de preenchimento desencadearam, em maior ou menor grau, algum tipo de resposta inflamat?ria local. Na an?lise comparativa, constatou-se que o polimetilmetacrilato demonstrou casos de rea??o a corpo estranho, enquanto o ?cido hialur?nico apresentou caracter?sticas que sugerem biocompatibilidade. Essa pesquisa faz parte de um conjunto de experimentos vinculados ao uso de materiais de preenchimento facial com finalidade est?tica e refor?a a necessidade do cirurgi?o dentista identificar e manejar as rea??es adversas que podem decorrer desse tipo de tratamento amplamente utilizado na atualidade.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448352.pdf: 2234936 bytes, checksum: 8f2dcd05e3619f61d684fbf373e529c4 (MD5) Previous issue date: 2013-03-15 / Objective: To incorporate recombinant human growth hormone in a biodegradable polymer (PLGA) Material and Methods: It was used a blend of two solvents, methanol and dichloromethane in a ratio by weight of 1.5: 5.0 for dissolving the PLGA. Another solution was made with rhGH, zinc acetate and deionized water. The two mixtures were then mixed together under mechanical stirring and poured into silicone molds circular of 01cm in diameter and around 02mm of espessur. This mixture was left in the evaporation chamber of solvent for 48 hours. The matrices were then degraded in vitro in PBS pH 7.4, thermostatted bath. The samples were removed from the bath in the range of 01, 02, 03, 04, 07, 10, 14 days. Was measured weight loss, pH and concentration of hormone released versus time. Results: The concentration of hormone released versus time was increased until the third day. On the fourth day had a fall and on the seventh day there have been increased hormone released by the tenth day, the fourteenth day was falling again. The pH had a sharp drop from 7.4 to 3.2 on the first day and keeping a small drop until the fourteenth day. The mass loss was a gradual loss in relation to time as was to be expected. Conclusion: The PLGA is a good biomaterial for making this type of device. You can incorporate the rhGH this array to get a possible material that may serve as a bone graft. / Objetivo: Incorporar o horm?nio de crescimento recombinante humano em um pol?mero biodegrad?vel o poli ?cido l?ctico glic?lico ( PLGA ) para utiliza??o na ?rea de cirurgia e traumatologia bucomaxilofacial. Materiais e M?todos: Foi utilizada mistura de dois solventes, metanol e o diclorometano numa propor??o em massa de 1,5 : 5,0 para dissolver o PLGA. Foi feita outra solu??o com o rhGH (horm?nio de crescimento humano recombinante), acetato de zinco e ?gua deionizada. As duas misturas foram ent?o misturadas sob agita??o mec?nica e vertidas em moldes de silicone circular de 01cm de di?metro e aproximadamente 02mm de espessura. Essa mistura foi deixada na c?mara de evapora??o de solvente por 48 horas. As matrizes, ent?o, foram degradadas in vitro em PBS (solu??o tamp?o fosfato salino) com pH 7.4, em banho termostatizado. As amostras foram retiradas do banho no intervalo de 01, 02, 03, 04, 07, 10, 14 dias. Foi aferida a perda de massa, varia??o do pH e concentra??o do horm?nio liberado em fun??o do tempo. Resultados: A concentra??o do horm?nio liberado em fun??o do tempo foi aumentando ate o terceiro dia. No quarto dia, houve uma queda e, no s?timo, ocorreu um aumento do horm?nio liberado, estendendo-se at? o d?cimo dia, no d?cimo quarto dia houve queda novamente. O pH teve uma queda brusca de 7.4 para 3.2 no primeiro dia e mantendo uma pequena queda at? o d?cimo quarto dia. A perda de massa foi gradual, em rela??o ao tempo, como j? era esperado. Conclus?o: O PLGA ? um bom biomaterial para esses fins. Revelou-se poss?vel incorporar o rhGH nessa matriz, de modo a, ent?o, desenvolver-se um poss?vel material que sirva como enxerto em tecido ?sseo.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448378.pdf: 1007476 bytes, checksum: 897bb580689b310a7b5b7e858e16467e (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / Objective: This study aimed to verify the process of bone repair biomaterials forward the use of Bio-Oss ?, Osteogen ? and Bone Ceramic ? in an experimental model with defects created in rat femurs through histological analysis, evaluating also the rate of interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6) and TNF-&#945; present in each inflammatory process existing in bone repair.Materials and Methods: 36 Wistar rats aged 8 weeks and about 300 grams underwent surgery femur bone defect creating a 5mm long and 3mm wide to get in medullary tissue. The animals were randomly divided into four groups: Group I - Bio-Oss ? (Geistlich Wolhusen Sons Ltd., Switzerland), Group II - Bone Ceramic ? (Straumann AG, Basel, Switzerland), Group III - Osteogen ? (Impladent Ltd., Hollywood, USA), Group Control - clot. As each group, the femur had their bone biomaterial filled by correspondent, except for the control group that had filled with blood clot. Thirty days after surgery, animals were euthanized and each operated femur removed, decalcified, cut with a microtome and blade made for microscopic histological analysis.Results: In thirty days, no significant difference in bone formation between the groups. However, as the rate of the marking of proinflammatory cytokines, Bio- Oss showed the lowest rate of TNF-&#945; and in only two places a rate slightly. The same occurred with IL-1, but showing slight rate at six sites. Regarding IL-6, the rate was moderate to severe in most sites. The Bone Ceramic showed higher rate of TNF-&#945; in relation to Bio-oss, maintained a balance in relation to IL-1 and similar to IL-6. And Osteogen showed the highest rate of TNF-&#945; and IL-1 and lower IL-6 when compared to Bio-oss and Bone Ceramic.Conclusion: The clinical implications from a study in animal models are controversial, but within the scope of work, a biomaterial with low TNF-&#945; and IL- 1 and moderate content of IL-6 appears to be mature in 30 days , i.e., with optimal histological conditions of bone formation / Objetivo: O presente estudo objetivou verificar o processo de reparo ?sseo frente ? utiliza??o dos biomateriais Bio-Oss?, Osteogen? e Bone Ceramic? em um modelo experimental com defeitos criados no f?mur de ratos, atrav?s de an?lise histol?gica, avaliando tamb?m a taxa de interleucina-1 (IL-1), interleucina-6 (IL-6) e TNF-&#945; presente em cada processo inflamat?rio existente no reparo ?sseo.Materiais e M?todos: 36 ratos da linhagem Wistar com 8 semanas e cerca de 300 gramas foram submetidos ? cirurgia do f?mur criando um defeito ?sseo de 5mm de comprimento por 3mm de largura at? chegar em tecido medular. Os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos: Grupo I - Bio-Oss? (Geistlich Sons Ltd. Wolhusen, Su??a); Grupo II - Bone Ceramic? (Straumann AG, Basel, Su??a); Grupo III - Osteogen? (Impladent Ltd., Hollywood, EUA); Grupo Controle co?gulo. Conforme cada grupo, o f?mur tinha sua medula preenchida pelo biomaterial correspondente, excetuando-se o Grupo Controle que teve preenchimento por co?gulo. Trinta dias ap?s a cirurgia, os animais sofreram eutan?sia e cada f?mur operado removido, descalcificado, cortado em micr?tomo e confeccionado l?mina microsc?pica para an?lise histol?gica.Resultados: Em trinta dias, n?o houve diferen?a significativa na neoforma??o ?ssea entre os grupos. No entanto, quanto ? taxa de marca??o das citocinas pr?-inflamat?rias, o Bio-oss mostrou-se com a menor taxa de TNF-&#945;, sendo em apenas dois s?tios uma taxa leve. O mesmo ocorreu com IL-1, mas mostrando em seis s?tios taxa leve. Em rela??o ? IL-6, a taxa foi de moderada ? severa para a maioria dos s?tios. O Bone Ceramic mostrou taxa mais alta de TNF-&#945; em rela??o ao Bio-oss, manteve um equil?brio em rela??o ? IL-1 e resultados semelhantes ? IL-6. E o Osteogen apresentou a taxa mais alta de TNF-&#945; e IL-1 e mais baixa de IL-6 quando comparado ao Bio-oss e Bone Ceramic.Conclus?o: As implica??es cl?nicas a partir de um estudo em modelo animal s?o controversas, mas dentro do escopo do trabalho, um biomaterial com baixo ?ndice de TNF-&#945; e IL-1 e ?ndice moderado de IL-6 mostra-se maduro em 30 dias, ou seja, com condi??es histol?gicas ideais de neoforma??o ?ssea.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 459060.pdf: 1405009 bytes, checksum: 550db90a424df77982f137b221a18c73 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / The PLGA is a bioabsorbable polymer derived from lactic and glycolic acids which has been used as drug release system . One of the drugs with the potential to use this type of vehicle is the recombinant human growth hormone (rhGH), because it has advantages such as speed up the bone integration process , bone maturation and remodeling around implants, in addition to stimulating osteogenesis. Objective: This study aims to evaluate the matrix degradation of PLGA and rhGH. Materials and Methods: 75:25 (Group I) and 50:50 (Group II): Two ratios of PLGA were used. The matrices were prepared by solvent evaporation technique as it follows: firstly, the PLGA was dissolved in dichloromethane and methanol and then it was mixed with a composed mixture of recombinant human growth hormone, zinc acetate, solution and deionized water. This mixture was poured into silicone circular shape moulds approximately 10 mm diameter which were placed in a solvent evaporation chamber at room temperature, where they were dried by nitrogen gas force action. The control samples were made just dissolving PLGA and pouring it into the silicone moulds. After the drying period, all the samples were weighed on a precision scale. Then, they were immersed in buffer solution and the hydrolytic degradation experiment was investigated and the samples remained for a predetermined period of time. After this process was finished, the solid sample portion was dried and weighed again. The supernatant went through pH analysis and later, by UV-visible absortion spectrophotometry analysis. Results:It was possible to calculate the concentration of rhGH released in the middle through the straight line obtained in a calibration curve.We observed that, from the first to the last day the released rhGH concentration in the medium was higher in Group II. The loss of mass percentage increased over the time in both groups. But this loss of mass was higher in group I compared to Group II. The pH showed a little variation over the time. The average was between 7.5 and 7.9. Conclusion:The matrices which were prepared with PLGA 50:50 showed the best results in relation to the ones prepared with PLGA 75:75.These are some advantages: easy handling, more uniform pores, less bubbles and the growth hormone was released slowly and gradually. / O PLGA ? um pol?mero bioabsorv?vel derivado dos ?cidos l?ctico e glic?lico que tem sido usado como sistema de libera??o de drogas. Uma das drogas com potencial de utiliza??o nesse tipo de ve?culo ? o horm?nio do crescimento humano recombinante (rhGH), pois apresenta vantagens como, por exemplo, acelerar o processo de osteointegra??o, remodela??o ?ssea e matura??o ao redor de implantes, al?m de estimular a osteog?nese. Objetivo: Este trabalho tem por objetivo avaliar a degrada??o de matrizes de PLGA com rhGH. Materiais e M?todos: Foram utilizadas duas propor??es de PLGA: 75:25 (Grupo I) e 50:50 (Grupo II). As matrizes foram confeccionadas por meio da t?cnica de evapora??o de solventes da seguinte forma: primeiramente o PLGA foi dissolvido com diclorometano e metanol e, posteriormente, foi misturado ? uma solu??o composta por horm?nio do crescimento humano recombinante, acetato de zinco e ?gua deionizada. A mistura dessas subst?ncias foi vertida em moldes de silicone de formato circular, com aproximadamente 10 mm de di?metro, os quais foram acondicionados em uma c?mara de evapora??o de solvente, ? temperatura ambiente, onde as matrizes foram secas por meio do arraste for?ado pela a??o de g?s nitrog?nio. As amostras controle, entretanto, foram confeccionadas apenas dissolvendo o PLGA e vertendo-o nos moldes de silicone. Ap?s o per?odo de secagem todas as amostras foram pesadas em uma balan?a de precis?o. Na sequ?ncia, as matrizes foram imersas em solu??o tamp?o e realizou-se o ensaio de degrada??o hidrol?tica, no qual as amostras permaneceram por um per?odo de tempo pr?-determinado. Terminado esse processo, a parte s?lida da amostra foi seca e, novamente, pesada. O sobrenadante, ent?o, passou pela an?lise de pH e pela an?lise de espectrofotometria de absor??o UV-vis?vel. Resultados: Atrav?s da equa??o da reta obtida em uma curva de calibra??o, foi poss?vel calcular a concentra??o do rhGH liberado no meio. Com isso, observou-se que, do primeiro at? o ?ltimo dia a concentra??o de rhGH liberado no meio foi maior no Grupo II. O percentual de perda de massa foi crescente ao longo tempo, em ambos os grupos. Por?m essa perda de massa foi maior no Grupo I, em rela??o ao Grupo II. O pH apresentou pouca varia??o ao longo do tempo. A m?dia ficou entre 7,5 e 7,9. Conclus?o: As matrizes preparadas com PLGA na propor??o 50:50 apresentaram melhores resultados em rela??o ?s matrizes preparadas com PLGA 75:25. Dentre as vantagens, ressaltam-se: maior facilidade de manipula??o, poros mais uniformes, menos bolhas de ar e libera??o do horm?nio do crescimento de forma mais lenta e gradual.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 417400.pdf: 2811701 bytes, checksum: 5158f35c3e12bc29c4d53bf64b684ca5 (MD5) Previous issue date: 2009-08-25 / Introdu??o: H? uma grande necessidade de suprir a demanda por enxertos de pele aut?logos humanos, fundamentais para tratamento de pacientes sujeitos as situa??es particulares como ?lceras, queimaduras, traumas entre outras. Pol?meros naturais e sint?ticos t?m sido desenvolvidos e empregados como biomaterias. A aplica??o de testes visando avaliar o comportamento celular na presen?a do biomaterial in vitro poder? abreviar as etapas necess?rias para atestar sua biocompatibilidade. A an?lise com as metodologias proposta pelas normas da ISO 10993 permite o estabelecimento de uma escala ordenada e racional para a biocompatibilidade dos materiais em fun??o de sua citotoxicidade. Essa padroniza??o poder? auxiliar na compara??o de diversos biomateriais utilizados em estudos e, na produ??o de novas mat?rias, contribuindo para o desenvolvimento da bioengenharia dos tecidos. Os materiais analisados e utilizados como equivalentes de pele humana podem ter sua citotoxicidade mediada por altera??es da fun??o mitocondrial das c?lulas, determinada pelo teste de MTT. Objetivos: (1) Avaliar a citotoxicidade dos extratos dos Equivalentes de Pele Humana (EPH) Veloderm? e Biopiel? no cultivo de fibroblastos da linhagen celular NIH-3T3, atrav?s do teste colorim?trico de MTT; (2) classifica??o dos extratos puros dos EPH atrav?s de escala de citotoxicidade, de acordo com as normas da ISO 10993. Metodologia: Foram utilizados como subst?ncias-teste extratos de Equivalentes de Pele Humana (EPH) Veloderm? (VL) e Biopiel? (BP). Fibroblastos da linhagem NIH-3T3 foram semeados em tr?s placas de cultural de 96 po?os na concentra??o de 4,5 ? 104 c?lulas por po?o. As c?lulas foram cultivadas na presen?a de concentra??es distintas dos extratos das subst?ncias-teste, obtidos segundo as normas da ISO 10993 por 24, 48, e 72 horas para a determina??o do grau de citotoxicidade das subst?ncias-teste quando comparadas ao controle de positivo (CP) e negativo de citotoxicidade (CN), atrav?s do teste de MTT. Resultados: na compara??o entre os Grupos (CN, CP, BP, VL), os dados mostraram que houve diferen?a significativa na citotoxicidade (p<0,001) no CP contra CN, BP e VL dos extratos puros de cultivo, nos diferentes tempos de exposi??o (24, 48 e 72 horas). N?o houve diferen?a significativa da citotoxicidade do Grupo BP e VL contra CN. Houve diferen?a de citototoxicidade (p=0,01) quando extratos de 10% em cultura celular de 48 horas foram usados nos Grupos VL (17,4?1,4) e BP (14,5?0,6). Uma diferen?a tamb?m foi detectada na citotoxicidade (p=0,014) no Grupo BP em 48 horas de cultura, entre o extrato de 10% (14,5?0,6) contra os extratos de 60% (16,7?1,0) e 100% (17,0?1,3). O Grupo VL em cultura de 72 horas mostrou uma diferen?a na citotoxicidade (p=0,041) quando comparados os extratos de 60% (21,3?1,6) e 100% (17,5?2,1). A viabilidade celular dos extratos do Veloderm? e Biopiel? independente do tempo de exposi??o e concentra??o encontraram-se entre 75% e 100% na compara??o com CN. Segundo a classifica??o baseado na ISO 10993, ambos os extratos puros de EPH foram definidos n?o t?xicos (NT). Conclus?o: O conjunto dos resultados sugere alta biocompatibilidade dos EPHs testados; entretanto, o teste colorim?trico de MTT representa uma avalia??o inicial, sendo importante seu papel na racionaliza??o da experimenta??o in vivo e cl?nica dos biomateriais. Esta hip?tese precisa ser confirmada com testes complementares segundo normas da ISO 10993.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-17T20:18:03Z No. of bitstreams: 1 TES_ALEXANDRE_DA_SILVEIRA_GERZSON_COMPLETO.pdf: 8833517 bytes, checksum: b4672493ffabfc3e5c284282aa067e14 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T20:18:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_ALEXANDRE_DA_SILVEIRA_GERZSON_COMPLETO.pdf: 8833517 bytes, checksum: b4672493ffabfc3e5c284282aa067e14 (MD5) Previous issue date: 2016-03-23 / Biomaterials, as an alternative to autogenous bone and other biological tissues, have been widely used in oral and maxillofacial surgery. In this context, a biomaterial that functions as a scaffold (osteoconductor), combined with a growth factor (osteoinductor), would be of great interest for clinical application. Biodegradable polymers used for slow drug release have been investigated, demonstrating good results and interesting potential. Growth hormone (rhGH) may be released by incorporating it into these polymers. This study aimed to evaluate cell adhesion and proliferation of a polymeric biomaterial for slow release of rhGH. PLGA and PLGA/PCL (at a 70/30 ratio of PLGA to PCL) matrices were prepared by the solvent evaporation method, combined or not with GH. The biomaterials were tested for toxicity and cell viability using an MTT assay with NIH3T3 mouse cells (ATCC). Cell toxicity was assessed at 24, 48, 72 hours, and 7 days of biomaterial exposure to culture medium. After were tested?for cell adhesion and proliferation by culture in mesenchymal stem cells derived from Wistar rat bone marrow, DAPI staining, and subsequent cell counting, in addition to scanning electron microscopy. Cell adhesion and proliferation was assessed at 24 and 72 hours of biomaterial exposure to culture medium. All polymers had high cell viability rates. However, from 48 hours onwards, the groups with rhGH-polymer combinations had better results than the polymer groups without association with GH when compared to the control group. At 7 days of culture, only the pure PLGA matrix showed a significant difference from the control group. These results may suggest a preference of cells for the presence of rhGH in the biomaterial in culture medium? especially in the PLGA matrix. GH appeared to contribute to the increase in cell viability observed at some assessment time points, especially when combined with PLGA as compared to pure PLGA. All tested polymers exhibited cell adhesion and proliferation. However, PLGA-based biomaterials, especially when combined with rhGH, showed greater cell proliferation when the difference in growth from 24 to 72 hours was evaluated. rhGH appeared to modify the polymer surface, with increased roughness and microporosity. This feature was more evident in the PLGA+rhGH combination. Further studies are required to clarify this potential for development of new biomaterials. / Biomateriais como alternativas ao osso aut?geno e outros tecidos biol?gicos, s?o muito utilizados no tratamento de pacientes na rotina cir?rgica da regi?o maxilofacial. Neste contexto, um biomaterial com caracter?sticas de arcabou?o (osteocondutor), e associado ? um fator de crescimento (osteoindutor), seria de grande interesse para pesquisa e aplica??o cl?nica. Pol?meros biodegrad?veis, utilizados para a libera??o lenta de medicamentos, vem sendo estudados, demonstrando bons resultados e interessante potencial. o rhGH pode ser liberado atrav?s da sua incorpora??o ? estes pol?meros. Desta forma, se faz necess?rio a avalia??o da biocompatibilidade e toxicidade de um biomaterial polim?rico para libera??o lenta do medicamento. Atrav?s da t?cnica de evapora??o de solvente foram preparados matrizes de PLGA e PLGA/PCL na raz?o 70/30 de PLGA e PCL, respectivamente, associados ou n?o ao rhGH. Os biomateriais foram testados relacionados ? sua toxicidade e viabilidade celular, atrav?s de um ensaio de MTT com c?lulas de camundongo NIH 3T3 ATCC. A avalia??o da toxicidade celular foi realizada nos tempos de 24 horas, 48 horas, 72 horas e 7 dias de exposi??o dos biomateriais com o meio de cultura. Ap?s, os biomateriais foram testados relacionados ? sua ades?o e prolifera??o celular, atrav?s do cultivo em c?lulas-tronco mesenquimais de rato Wistar, com ensaio de colora??o DAPI e posterior contagem celular, al?m de microscopia eletr?nica de varredura. A avalia??o da ades?o e prolifera??o celular foi realizada nos tempos de 24 e 72 horas de exposi??o dos biomateriais com o meio de cultura. Todos os pol?meros testados apresentaram altas taxas de viabilidade celular, por?m, os grupos associados ao rhGH parecem demonstrar melhores resultados do que os grupos de pol?meros sem associa??o ao horm?nio quando comparados ao grupo controle em alguns per?odos do experimento. O que pode sugerir uma prefer?ncias das c?lulas ? presen?a do rhGH no biomaterial presente no meio de cultura, principalmente na matriz de PLGA. Os pol?meros testados, apresentaram ades?o e prolifera??o celular, por?m, os biomateriais ? base de PLGA, principalmente associados ao rhGH pareceram demonstrar maior prolifera??o celular quando avaliada a diferen?a do crescimento de 24 para 72horas. O GH modificou a superf?cie do pol?mero, aumentando a rugosidade e microporosidade. Aspecto visualizado principalmente quando incorporado ao PLGA. Mais estudos s?o necess?rios para verificar alternativas de novos biomateriais para libera??o lenta de f?rmacos.