Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-07-07T13:31:06Z No. of bitstreams: 1 471664 - Texto Completo.pdf: 1025603 bytes, checksum: cc2bf12cfe7084c63f710f9fd2c36364 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-07T13:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 471664 - Texto Completo.pdf: 1025603 bytes, checksum: cc2bf12cfe7084c63f710f9fd2c36364 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / The repair of injured peripheral nerves is one of the most difficult tasks in neurosurgery. Among the techniques used is distinguished using the artificial tube for nerve guidance during the regeneration process. The preparation of composites based on biodegradable polymers and conducting polymers related to growth factors, have been proposed as a promising approach for improving regeneration of injured peripheral nerves. However, it should be considered that during the regeneration process is necessary to have a control over the dosage and the time of release of the drug in question not to jeopardize the recovery process.In this work were based membranes prepared PLGA (lactic-co-glycolic poly-acid), polypyrrole (PPy) and Tacrolimus as a growth factor. Was reported as a factor of the process of degradation and the relationship between the composition of membrane PLGA / PPy / Tacrolimus with the release of the drug in the first days of incubation. It was found that membranes with higher PLGA thicker, resulting in a lower weight loss and delayed release of Tacrolimus. In this work PLGA membranes containing search polypyrrole nanofibers (PPy) and Tacrolimus, as a growth factor, were prepared by the solvent evaporation method. The process of degradation and drug release were assessed 28 days of incubation. It was observed that membranes with a higher concentration of PLGA. / A repara??o de nervos perif?ricos lesionados ? uma das tarefas mais dif?ceis na neurocirurgia. Entre as t?cnicas utilizadas destaca-se a utiliza??o de tubos artificiais para orientar o nervo durante o processo de regenera??o. A prepara??o de comp?sitos baseados em pol?meros biodegrad?veis e pol?meros condutores, associados a fatores de crescimento, t?m sido proposta como uma abordagem promissora para melhorar a regenera??o de nervos perif?ricos lesionados. Por?m, deve ser considerado que durante o processo de regenera??o ? necess?rio ter um controle sobre a dosagem e o tempo de libera??o do f?rmaco em quest?o para n?o prejudicar o processo de recupera??o.Assim, neste trabalho foram preparadas membranas baseadas em PLGA (poli-?cido l?ctico-co-glic?lico), polipirrol (PPy) e Tacrolimus como fator de crescimento. Foi avaliado o processo de degrada??o e a rela??o entre a composi??o de membranas de PLGA/PPy/Tacrolimus com a libera??o do f?rmaco nos primeiros dias de incuba??o. Foi verificado que membrana com maior quantidade de PLGA, mais espessa, resultou numa menor perda massa e retardou a libera??o do tacrolimus. Neste trabalho de pesquisa membranas de PLGA contendo nanofibras de polipirrol (PPy) e Tacrolimus, como fator de crescimento, foram preparadas por meio da metodologia da evapora??o do solvente. O processo de degrada??o e a libera??o do f?rmaco foram avaliados durante 28 dias de incuba??o. Foi observado que membranas com uma maior concentra??o do PLGA.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-12-28T12:22:52Z No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-28T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotextured absorbable tube of poly(lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotextured absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developed, which were characterized in vitro and in vivo biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which 88 rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5), tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: Nanotextured PLGA films, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability in vitro assays (p=0.000). The film containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time, when compared to the film without the drug (p=0.026). In vivo biocompatibility evaluation demonstrated a surrounding tissue to PLGA implants with acute inflammation, which was decreasing the long 90 days evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ? 0.020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p<0.05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90 days autograft group (p= 0.0020). Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. / Introdu??o: Les?es em nervos perif?ricos resultam na perda de fun??o do ?rg?o inervado e raramente apresentam recupera??o sem a interven??o cir?rgica. Uma das formas de reparo ? a t?cnica de tubuliza??o, atrav?s da qual ? poss?vel acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotr?ficos s?o indicados como uma alternativa terap?utica para reconstru??o de nervos perif?ricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorv?vel composto por poli (?cido l?ctico-co-?cido glic?lico), e avaliar seu efeito sem e com incorpora??o de tacrolimus sobre a regenera??o de nervo perif?rico em ratos. Materiais e M?todos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorv?veis de PLGA com e sem incorpora??o de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto ? biocompatibilidade, biodegrada??o e efic?cia como t?cnica de tubuliza??o. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copol?meros sem e com incorpora??o de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ci?tico foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em tr?s grupos conforme o tratamento: enxerto aut?logo (5), tubuliza??o com tubo PLGA (10) e tubuliza??o com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e an?lise histomorfom?trica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou n?o tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p=0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independentemente do tempo, quando comparada ? membrana sem o f?rmaco (p=0,026). Na avalia??o da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflama??o aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avalia??o. Em 7 dias ap?s os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposi??o de col?geno nos dois biomateriais quando comparado aos demais per?odos (p ? 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve m?dia menor em rela??o ? espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto aut?logo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avalia??o funcional da recupera??o do nervo ci?tico de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto aut?logo (em 90 dias | p= 0,0021), com menores ?ndices de fun??o ci?tica. Conclus?o: o presente estudo sugere que a combina??o de PLGA e tacrolimus favoreceu a regenera??o de nervo ci?tico de rato, e esta poder? ser uma potente alternativa para aplica??o cl?nica em les?es de nervos perif?ricos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 419178.pdf: 2007989 bytes, checksum: be7bf028f4f59c8aac1c686ee0ecf9f8 (MD5) Previous issue date: 2009-03-04 / Introdu??o: O tratamento de les?es com perda dos nervos perif?ricos ? ainda um problema n?o resolvido. Na ?rea de pesquisa experimental, modelos animais com perdas nervosas de grande porte t?m sido usados com o objetivo de estudar o efeito de sust?ncias promotoras da regenera??o axonal adicionadas dentro de sistemas de tubuliza??o. Como medida de regenera??o nervosa, o efeito funcional ? considerado como o mais importante o ?ndice funcional da marcha, ou Sciatic Function Index (SFI), ? o m?todo mais utilizado nas les?es de nervo ci?tico em ratos; seu uso, por?m, tem sido questionado em modelos de transec??o nervosa (neurotmese). O objetivo do presente trabalho experimental ? estudar o desempenho do SFI, em um modelo de transec??o e perda de grande porte (12 mm) em nervo ci?tico de ratos, com o fim de verificar se a utiliza??o do SFI ? uma ferramenta confi?vel para diferenciar padr?es de recupera??o funcional e regenera??o nervosa ap?s perdas segmentares de grande porte em ratos. M?todos: Foram utilizadas 30 f?meas de ratos Wistar, adultos, isog?nicos, divididos em 5 grupos, nos quais se realizou uma perda de 12 mm do nervo ci?tico direito. Posteriormente, tal perda foi reparada com auto-enxerto ou com tubo de silicone preenchido com uma matriz de fibrina, onde se adicionaram c?lulas mononucleares de medula ?ssea (CMMO), fator de crescimento neural (NGF) ou uma combina??o destes. O ?ndice funcional da marcha (SFI) foi medido entre as 5? e 16? semanas ap?s a cirurgia. Resultados: Do total de ratos tratados com tubo, 21 dos 24 animais falharam em reconstituir nervo no tubo (87,5%). Os tr?s animais em que se evidenciou crescimento de nervo dentro do tubo n?o mostraram diferen?as no SFI em rela??o aos outros em que n?o cresceu nervo. Todos os animais com tubuliza??o mostraram aus?ncia de recupera??o funcional no SFI durante o seguimento. Depois de 16 semanas, a m?dia do SFI? DP dos 4 grupos com tubo foi -77,88 ? 8,3, obtendo valores significativamente piores aos obtidos com auto-enxertos, com m?dia SFI ?DP, -56,97?12,71, com valor p=0,003. Ainda que a diferen?a tenha sido significativa, o grupo com auto-enxerto apresentou uma melhoria limitada: 43% do valor considerado normal, ap?s 16 semanas de observa??o. Discuss?o: As diferen?as do SFI encontradas entre os grupos com aus?ncia de efeito (tubo) e o melhor efeito poss?vel (auto-enxerto) foi significativa (p=0,003); por?m, a baixa precis?o da estimativa e a baixa amplitude de valores encontrada entre eles determinam um m?todo com baixo poder. Conclus?es: O ?ndice funcional da marcha (SFI) n?o ? um m?todo adequado para avaliar regenera??o nervosa ap?s les?es com perda segmentar de 12 mm em nervo ci?tico de rato, por ter um baixo poder para detectar verdadeiras diferen?as.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 425158.pdf: 11914614 bytes, checksum: 29f6d6040ca6890ce0661b03ef053975 (MD5) Previous issue date: 2009-03-31 / A presente pesquisa teve por objetivo investigar a regenera??o do nervo ci?tico de ratos ap?s crioterapia com nitrog?nio l?quido. Para isso, foram empregados 54 ratos da linhagem Wistar, machos, adultos jovens. A amostra foi distribu?da, aleatoriamente, em nove grupos de seis animais, submetidos a acesso cir?rgico do nervo ci?tico, seguido de crioterapia, les?o de esmagamento ou aus?ncia de manipula??o do nervo (grupo-controle). An?lises da marcha, eletroneuromiogr?fica e histomorfom?trica foram realizadas nos per?odos de 15, 30 e 70 dias de p?soperat?rio. Houve altera??o morfofuncional significativa nos grupos esmagamento e crioterapia nos primeiros 15 dias. Aos 30 dias, melhora da marcha foi observada, mas a perda funcional ainda se mostrou significativa. No tempo de 70 dias, n?o foi mais observada diferen?a significativa da an?lise da marcha entre os grupos controle, esmagamento e crioterapia. Na eletroneuromiografia, a amplitude do potencial de a??o teve valores pr?ximos de zero no grupo esmagamento aos 15 e 30 dias, e valores nulos para o grupo crioterapia nos mesmos per?odos. No grupo crioterapia, a mensura??o da lat?ncia do potencial de a??o n?o foi poss?vel aos 15 e 30 dias, o que sugere valores muito elevados. J? aos 70 dias, foram observados valores significativamente superiores aos dos grupos controle e esmagamento. Na histomorfometria, os grupos submetidos ?s les?es de esmagamento e congelamento apresentaram n?mero total e densidade de fibras mielinizadas significativamente maiores, cujos valores foram mais elevados aos 30 dias, sendo os do grupo crioterapia significativamente superiores aos dos grupos esmagamento e controle. Os grupos esmagamento e crioterapia exibiram aumento do di?metro axonal e da espessura da bainha de mielina com o passar do tempo, por?m esses n?o alcan?aram os valores do grupo-controle. Os resultados obtidos permitem concluir que a les?o causada pela aplica??o direta da crioterapia com nitrog?nio l?quido sobre o nervo ci?tico de ratos caracteriza-se como axoniotmese, cujo dano ? revers?vel.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 443023.pdf: 2231703 bytes, checksum: 8fa714244d8e44469edc5dc83e9b3038 (MD5) Previous issue date: 2012-08-29 / Injuries to the peripheral nervous system present a challenge for regenerative medicine. The study investigated the effects of platelet-rich plasma (PRP) and erythropoietin (EPO), alone or in combination, in the regeneration of peripheral nerve in rats. The work was developed in three phases using 70 rats. The first phase, evaluated the platelet concentration and growth factors production/release (TGF-&#946;, PDGF, VEGF and &#945;&#946;) in three protocols for obtaining PRP (A, B and C) obtained by aortic or cardiac puncture. Cardiac puncture in association with A protocol showed the best results. In the second stage, using best results methods at the first stage, was produced two PRP concentrations (1,000,000 and 2,000,000 platelets.&#956;l-1; PRP1 and PRP2, respectively) for applying in the rats sciatic nerve. Comparison of concentrations with autologous nerve graft (ANG) and saline solution (SS) groups showed benefits in the use of PRP2. In the third phase (same experimental model) were added PRP2 + EPO and EPO groups. The animals of phases 1 and 2 were evaluated by walking track test and histomorphometric analysis (toluidine blue) and showed benefits in autologous nerve graft (ANG) with respect to tubulization (independent of regenerative factor). For tubularized animals, the study showed advantages for PRP and EPO simultaneous use followed by EPO group. Finally, it was observed that PRP 2,000,000 platelets.&#956;l-1 has beneficial effects when compared to PRP 1,000,000 platelets.&#956;l-1 for peripheral neuroregeneration rats. / Les?es ao sistema nervoso perif?rico representam um desafio para a medicina regenerativa. O estudo objetivou conhecer os efeitos do plasma rico em plaquetas (PRP) e da eritropoietina (EPO), isolados ou combinados, na regenera??o do nervo perif?rico de ratos. O trabalho desenvolveu-se em tr?s etapas utilizando 70 ratos. A primeira fase avaliou a concentra??o plaquet?ria e produ??o/libera??o de fatores de crescimento (TGF-&#946;, PDGF-&#945;&#946; e VEGF) em tr?s protocolos de obten??o do PRP (A, B e C) obtidos por pun??o a?rtica ou card?aca. A pun??o card?aca em associa??o com protocolo A gerou os melhores resultados. Na segunda fase, usando os m?todos com melhores resultados na primeira etapa, produziram-se duas concentra??es de PRP (1.000.000 e 2.000.000 plaquetas. &#956;l-1; PRP1 e PRP2, respectivamente) para aplica??o no nervo ci?tico tubulizado de ratos. Compara??o das concentra??es entre si e com grupos auto enxerto (AE) e solu??o fisiol?gica (SF) evidenciaram benef?cios no uso de PRP2. Na terceira fase (mesmo modelo experimental), foram adicionados os grupos EPO e EPO+PRP2. Os animais das fases 1 e 2 foram avaliados por teste de marcha e histomorfometria (azul de toluidina) e demonstraram que o auto enxerto apresentou benef?cios sobre a tubuliza??o (independente do fator regenerativo utilizado). Para os animais tubulizados, o estudo demostrou melhores resultados para o uso simult?neo de PRP e EPO, seguido do grupo EPO. Finalizando, observou-se que a aplica??o de PRP na concentra??o de 2.000.000 plaquetas.&#956;l-1 em compara??o com 1.000.000 platelets.&#956;l- 1 apresentou vantagens para neuroregenera??o perif?rica de ratos.