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Adição de paraoxonase-1 durante a maturação oocitária e seu efeito sobre a produção in vitro de embriões bovinos / Effects of the addition of paraoxonase-1 during oocyte maturation on the in vitro production of bovine embryos

Rincón, João Alveiro Alvarado 12 February 2015 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-10T13:31:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Joao_Rincon.pdf: 556226 bytes, checksum: 4a007415811b4e9e1e48111cf2119070 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-10T13:42:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Joao_Rincon.pdf: 556226 bytes, checksum: 4a007415811b4e9e1e48111cf2119070 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T13:42:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Joao_Rincon.pdf: 556226 bytes, checksum: 4a007415811b4e9e1e48111cf2119070 (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Estudos sugerem que a enzima paraoxonase-1 (PON1) pode exercer efeito antioxidante nas membranas celulares, o que poderia melhorar a competência do oócito, principalmente por reduzir o estresse oxidativo. Baseado nisso, objetivou-se avaliar o efeito da adição de diferentes níveis de PON1 recombinante humana (rPON1) ao meio de maturação (MIV), sobre os índices de desenvolvimento embrionário e expressão gênica em oócitos e embriões bovinos. Em 8 repetições, 1600 complexos cumulus oócitos (COCs) foram coletados de ovários bovinos provenientes de abatedouros locais e divididos aleatoriamente em quatro grupos de 50 COCs: 0,0; 0,02; 0,04 e 0,08mg/mL de rPON1 no meio de MIV. A maturação ocorreu em estufa com 5% de CO2 e 39 °C durante 24 horas. Após a seleção espermática, com a utilização do mini percoll®, foi procedida a fecundação (FIV) com concentração de 1x106 espermatozóides/mL. Decorridas 18 horas os prováveis zigotos foram cultivados durante 7 dias no meio de cultivo adicionado de 10% de SFB em condições controladas (5% CO2, 5% O2 e 90%N2) à 39 °C. Foram coletados oócitos desnudos e células do cumulus (600 COCs, 3 repetições) e embriões D7 (8 repetições) para extração de RNA e análise da expressão gênica (Bax, Bcl-2 e MnSOD). A atividade de PON1 foi avaliada às 0 e 24hs de maturação mediante espectrofotometria. A atividade média de PON1 no meio de MIV foi de 2,15±0,38; 15,51±1,48; 30,24±2,96 e 57,94±5,03 U/mL de acordo à adição de rPON1 ao meio de MIV (0; 0,02; 0,04 e 0.08 mg/mL respectivamente). Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de clivagem: 81,7%, 85,1%, 81,0%, 82,5% respectivamente. No entanto, a adição de rPON1 no meio de MIV melhorou o desenvolvimento embrionário de maneira linear (P<0,0001) de acordo com a quantidade de proteína adicionada, resultando na produção de embriões em D7 de 22,1%; 29,2%; 31,7% e 33,8% respectivamente. Além disso, este efeito foi suportado pela correlação positiva entre o nível de rPON1 no meio de MIV e a taxa de blastocisto no D7 (r=0,35; P=0,04). Não foi observada diferença na expressão dos genes avaliados nos oócitos, células do cumulus e embriões. Conclui-se que a adição de rPON1 no meio de MIV tem um efeito positivo na PIV de embriões bovinos, indicando que a PON1 promove uma melhor taxa de desenvolvimento embrionário. / Some studies suggest that the enzyme paraoxonase-1 (PON1) can exert antioxidant effects on cell membranes, thereby improving the competence of the oocyte, particularly by reducing oxidative stress. Based on this, the aim of the current study was to evaluate the effect of different levels of human recombinant PON1 (rPON1) in the maturation medium, on embryo development and gene expression in bovine oocytes and embryos. The study was performed in 8 repetitions, using 1600 cumulus oocyte complexes (COCs) collected from bovine ovaries at local slaughterhouses and divided randomly into four groups of 50 COCs each containing 0.0; 0.02; 0.04 and 0.08 mg/mL rPON1 in the IVM medium. Maturation occurred in the incubator at 5% CO2 and 39 °C for 24 hours. After the sperm selection using the mini Percoll®, IVF was performed with a sperm concentration of 1x106/ml. After 18 hours, presumptive zygotes were cultured for 7 days using IVC medium with the addition of 10% FBS under controlled conditions (5% CO2, 5% O2 and 90% N2) at 39˚C. In addition, denuded oocytes and cumulus cells (600 COCs, 3 repetitions) and D7 embryos (8 repetitions) were collected for RNA extraction and gene expression analysis (Bax, Bcl-2 and MnSOD). PON1 activity was evaluated at 0 and 24 hours of maturation by spectrophotometry. The average PON1 activity in the IVM medium was 2.15±0.38; 15.51±1.48; 30.24±2.96 and 57.94±5.03 U/mL according to the addition of 0.0; 0.02; 0.04 and 0.08 mg/mL of rPON1 in the IVM medium. There was no difference (P>0.05) in cleavage rates among treatments: 81.7%; 85.1%; 81.0%. 82.5% respectively. However, the addition of rPON1 to the IVM medium improved embryo development linearly (P<0.0001), resulting in D7 embryo production of 22.1%, 29.2%, 31.7% and 33.8%, respectively. Moreover, this effect was supported by the positive correlation between the level rPON1 in the IVM medium and the D7 blastocyst rate (r=0.35; P=0.04). There was no difference in gene expression in oocytes, cumulus cells and embryos. Finally, the addition of rPON1 in the IVM medium had a positive effect on the IVP of bovine embryos, indicating that PON1 improves embryo rate.
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Estratégias nutracêuticas no período de transição em bovinos leiteiros e seus efeitos sobre parâmetros metabólicos e fertilidade / Nutraceutical strategies during the transition period in dairy cattle and the effects on metabolic parameters and fertility

Acosta, Diego Andres Velasco 12 January 2016 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-06-07T16:23:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Diego Andres Velasco Acosta.pdf: 1957910 bytes, checksum: 57eabc538f89e509cac0a69175bd4efb (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-08T13:04:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Diego Andres Velasco Acosta.pdf: 1957910 bytes, checksum: 57eabc538f89e509cac0a69175bd4efb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T13:04:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Diego Andres Velasco Acosta.pdf: 1957910 bytes, checksum: 57eabc538f89e509cac0a69175bd4efb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-01-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O balanço energético negativo (BEN) está associado com alterações na fertilidade de vacas leiteiras, portanto diferentes estratégias nutricionais e farmacológicas vêm sendo utilizadas para minimizar os efeitos negativos do BEN, visando aumentar a fertilidade. A aplicação pré-parto de somatotropina recombinante bovina (rbST) pode levar a uma redução da concentração sérica dos ácidos graxos não esterificados (AGNE) e β-hidroxibutirato (BHBA) no período pós-parto. Além disso têm sido demonstrado efeito significativo no desenvolvimento folicular ovariano pós-parto. Da mesma forma, estratégias nutricionais e o manejo da alimentação durante o período pré e pós-parto têm um impacto na saúde, produtividade e fertilidade da vaca leiteira. Estudos recentes mostram que a adição de aminoácidos na dieta durante o período de transição de vacas leiteiras pode ter efeitos benéficos no metabolismo, contribuindo para melhorar a performance reprodutiva. Diante desta problemática, esta tese apresenta três artigos, cujos objetivos foram: 1) determinar o efeito da administração pré-parto de somatotropina em novilhas leiteiras sobre marcadores do BEN, retomada da atividade ovariana e produção de leite. 2) Determinar o efeito da suplementação de metionina e colina protegidas da degradação ruminal, isoladas e em combinação, sobre o potencial esteroidogenico do folículo dominante da primeira onda folicular pós-parto de vacas leiteiras. 3) Determinar o efeito da suplementação de metionina e colina protegidas da degradação ruminal, isoladas e em combinação, sobre o desenvolvimento embrionário e nível de metilação global de DNA do embrião. O tratamento com somatotropina pré-parto em novilhas leiteiras aumentou a concentração de IGF-I intrafolicular e a expressão do receptor de LH e da proteína reguladora aguda da esteroidegênese em células foliculares do folículo dominante da primeira onda pós-parto. Essas mudanças foram associadas a um aumento da concentração de estradiol sérica e intrafolicular, o que pode, potencialmente, aumentar a chance de ovulação da primeira onda folicular pós-parto. Entretanto, somatotropina não afetou outros parâmetros metabólicos e produtivos no período pós-parto recente. A suplementação com metionina, colina ou ambas durante o período de transição parece não ter efeito sobre o desenvolvimento folicular pós-parto da primeira onda em vacas da raça Holandês. No entanto, a suplementação apenas com metionina durante o período de transição aumenta a expressão de 3β-HSD nas células foliculares. Além disso, a suplementação com metionina e colina induziu a uma down regulation dos genes pró-inflamatórios, indicando um menor processo inflamatório nas células foliculares. Em relação ao desenvolvimento embrionário, a suplementação com metionina durante o período de transição reduziu a metilação global do DNA e aumentou o acúmulo de lipídios nos embriões. A utilização de estratégias nutracêuticas durante o período de transição aumentaram o potencial esteroidogenico do folículo dominante da primeira onda folicular pós-parto e aumentou a expressão de genes relacionados a esteroidogenese, assim como uma redução na expressão de genes pró inflamatórios, indicando efeitos benéficos na fertilidade de bovinos leiteiros. Além disso, a suplementação de metionina parece aumentar a capacidade de sobrevivência dos embriões, desde que há fortes indícios de que as reservas lipídicas endógenas servem como um substrato energético. / The negative energy balance (NEB) is associated with changes in the fertility of dairy cows, therefore different nutritional and pharmacological strategies are being used to minimize the negative effects of the NEB in order to increase fertility. Pre-partum recombinant bovine somatotropin (rbST) administration can lead to a reduction in serum non-esterified fatty acids (NEFA) and β-hydroxybutyrate (BHBA) in the postpartum period, in addition to improving postpartum ovarian follicular development. Similarly nutritional strategies during the pre and postpartum period have a positive impact on health, productivity and fertility of dairy cows. Recent studies show that the use of amino acids in the diet during the transition period may have beneficial effects in metabolism. Faced with this problem, this thesis presents three papers whosethe objectives were: 1) Determine the effect of pre-partum administration of somatotropin in dairy heifers on the markers of NEB, resumption of ovarian activity and milk production. 2) Determine the effect of methionine, choline supplementation isolated and in combination on esteroidogenic potential of the fist postpartum dominant follicle. 3) Determine the effect of methionine, choline supplementation isolated and in combination on embryo development and global DNA methylation. Pre-partum somatotropin treatment in dairy heifers increased intrafollicular IGF-I and mRNA expression of LH receptor and steroidogenic acute regulatory protein in follicular cells of the first postpartum dominant follicle. These changes were associated to increased intrafollicular and serum estradiol concentration, which can potentially increase the chance of ovulation of the first postpartum follicular wave. Despite that, somatotropin did not affect other metabolic and productive parameters in the early postpartum period. Supplementing methionine, choline or both during the transition period seemed to have no effect on postpartum follicular development of the first postpartum wave in Holstein cows. However, supplementing methionine, during the transition period increased follicular cells 3β-HSD expression, methionine and choline supplementation also induced a down regulation of pro-inflammatory genes, indicating a lower inflammatory processes in follicular cells. Regarding to embryo development, supplementation of methionine, only during the transition period reduce global DNA methylation, moreover, supplemented methionine increase lipid accumulation in preimplantation embryos. The use of nutraceutical strategies during the transition period increased the steroidogenic potential of the first postpartum dominant follicle and increase the expression of genes related steroidogenesis also a down regulation of proinflammatory genes indicating beneficial effects on fertility in dairy cattle. Moreover, the methionine supplementation seems to impact the preimplantation embryo in a way that enhances its capacity for survival since there is strong evidence that endogenous lipid reserves serve as an energy substrate.
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Uso da lectina do quiabo (Abelmoschus esculentus) como marcador da célula espermática ovina / Use of okra lectin (Abelmoschus esculentus) as a marker of sperm cells ovine

Silva, Alessandra Cardoso 12 February 2016 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-06-22T16:22:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Alessandra_Silva.pdf: 726224 bytes, checksum: 35d9d2757a82d7969035e1b9670f12ef (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-22T20:37:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Alessandra_Silva.pdf: 726224 bytes, checksum: 35d9d2757a82d7969035e1b9670f12ef (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T20:37:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Alessandra_Silva.pdf: 726224 bytes, checksum: 35d9d2757a82d7969035e1b9670f12ef (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / As lectinas estão sendo empregadas como marcadores de superfície na membrana plasmática de espermatozoides devido sua ligação ao sacarídeos das mesmas. O objetivo consiste em buscar a localização de ligação e a colaboração da lectina de quiado (Abelmoschus esculentus) nos espermatozoides de ovinos. A lectina de A. esculentus foi purificada como o descrito em Soares et al. (2012). Foram utilizados 8 ejaculados de carneiros. As amostras foram diluídas em diluente padrão tris-gema acrescida de diferentes concentrações de lectinas conforme o tratamento: T1 –0μg de lectina; T2 1μg de lectina; T3 –3μg de lectina; T4 –5μg de lectina. As amostras foram acondicionadas a 5°C. Para avaliações espermáticas nos períodos 0h, 2hs e 24hs elas eram aquecidas a 37°C. Para as análises de integridade de membrana, mitocôndria, fluidez e ROS, foi utilizada a citometria de fluxo. Para avaliação da cinética dos espermatozoides, foi utilizado o sistema Computer-Assisted Sperm Analysis (CASA). A marcação da lectina na célula espermática foi feita com FITC e observada através do Microscópio Confocal Invertido de Varredura a Laser e observamos que a fluorescência foi detectada na peça intermediária do espermatozoide. Em nenhum período de acondicionamento foi observada diferença em relação a integridade de membrana, mitocôndria e fluidez espermática. No período de 0 h na cinética espermática o deslocamento e a velocidade foram inferiores no T4 do que no T3 (P<0,05). Na avaliação de 2 hs o T2 foi superior aos demais tratamentos no deslocamento e velocidade espermática (P<0,05). Após acondicionamento por 24 h a 5ºC a cinética espermática foi superior no T3 em relação ao T4 não diferindo dos demais tratamentos. Este achado permite que a avaliação seminal possa ser realizada até 24 h sem perdas nas características seminais quando for adicionado com até 3μg de lectina a 5 ºC. Além de evidenciar que seu sítio de ligação é na peça intermediária de espermatozoides ovinos. / The lectins are employeds as surface markers in the plasma membrane of spermatozoa due to its binding to saccharides thereof. The aim is to seek the connection location and the collaboration of the lectin quiado (Abelmoschus esculentus) in sperm sheep. The lectin A. esculentus was purified as described in Smith et al. (2012). 8 ejaculates of ovines were used. The samples were diluted in Tris-egg yolk pattern plus diluent different concentrations of lectins according to treatment: T1 -0μg lectin; T2 1μg lectin; T3 -3μg lectin; T4 -5μg lectin. The samples were stored at 5°C. For reviews on sperm periods 0h, 2h and 24 hours they were heated to 37°C. For the analysis of membrane integrity, mitochondria, fluidity and ROS, we used flow cytometry. To evaluate the kinetics of sperm cells, we used the Computer-Assisted Sperm Analysis system (CASA). The marking of the lectin in the sperm cell was made with FITC and observed by Confocal Microscope Inverted Scanning Laser and observed that the fluorescence was detected in the intermediate part of the spermatozoon. In no conditioning period difference was observed in relation to membrane integrity, mitochondria and sperm flow. At 0 hour period in sperm kinetic displacement and the speed they were lower T4 than in T3 (P <0.05). In the assessment of 2 hours T2 was higher than others in the displacement and sperm velocity (P <0.05). After conditioning for 24 h at 5°C sperm kinetics was higher in T3 compared to T4 not differing from the other treatments. This finding allows that seminal assessment can be made up to 24 hours without loss in the seminal characteristics when added up to 3μg lectin to 5°C. In addition to evidence that its binding site is in the middle piece of sperm ovines.
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Estudo epidemiológico da infecção por Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus em búfalos no estado de Pernambuco

BORGES, Jonas de Melo 20 July 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-02-07T13:04:40Z No. of bitstreams: 1 Jonas de Melo Borges.pdf: 1057256 bytes, checksum: 5a36d4a5894648ecc348d8146d19bca1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T13:04:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jonas de Melo Borges.pdf: 1057256 bytes, checksum: 5a36d4a5894648ecc348d8146d19bca1 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / The objective of this study was to determine the occurrence of infection with Campylobacter fetus subsp. venerealis and Tritrichomonas foetus in buffaloes in the State of Pernambuco, Brazil and identify possible risk factors associated with infection. Biological samples were collected (cervico vaginal mucus and shaved prepucial) of 113 animals, coming from 8 properties in different regions of the state. The biological material collected was transferred into phosphate buffered saline (PBS) and inoculated in the specific transport, Lander for diagnosis of C. fetus subsp. venerealis and Diamond for T. fetus subsequently. For the diagnosis of infection by Campylobacter fetus subsp. venrealis and Tritrichomonas foetus the samples were submitted to Polymerase Chain Reaction ( PCR) grown in Columbia agar plus antibiotics and Diamond, respectively. There was an occurrence of 1.8% (2/113 ; I.C. 0.2 to 6.2 % ) of positive animals in the microbiological examination with confirmation by PCR, for C. fetus subsp. venerealis. It was observed that 100% of positive samples were from two (2) males from the same herd. No animals were positive for T. foetus. It was not possible to identify risk factors associated with infection. This is the first report of infection with C. fetus subsp. venerealis in buffaloes in Brazil. Despite the low occurrence it is recommended that control measures are adopted, in order to prevent the spread of the agent to other herds. / Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência da infecção por Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus em búfalos no Estado de Pernambuco, Brasil e identificar os possíveis fatores de risco associados às infecções. Foram coletadas amostras biológicas (muco cérvico-vaginal e raspado prepucial) de 113 animais, procedentes de 8 propriedades, de diferentes regiões do Estado. O material biológico coletado foi transferido para solução salina tamponada (PBS) e posteriormente inoculado nos meios de transporte específicos, Lander para diagnóstico de C. fetus subsp. venerealis e Diamond para T. foetus. Para o diagnóstico das infecções por Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus as amostras foram cultivadas em meio ágar columbia acrescido de antibiótico e Diamond, respectivamente. Posteriormente as amostras de PBS foram submetidas à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Para pesquisa de C. fetus subsp. venerealis, observou-se uma ocorrência de 1,8% (2/113; I.C. 0,2 – 6,2%) de animais positivos no exame microbiológico com confirmação pela PCR. Em relação à procedência, observou-se que 100% das amostras positivas pertenciam a dois machos do mesmo rebanho. Na pesquisa de T. foetus nenhum animal foi positivo. Não foi possível identificar os fatores de risco associados às infecções. Este é o primeiro registro da infecção por C. fetus subsp. venerealis em búfalos no Brasil. Apesar da baixa ocorrência recomenda-se que medidas de controle sejam adotadas, com o intuito de evitar a disseminação do agente para outros rebanhos.
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Dinâmica folicular de vacas da raça guzerá submetidas a três protocolos de sincronização da ovulação

FRAGA JÚNIOR, Antônio Matos Fraga 08 February 2011 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-07T16:28:31Z No. of bitstreams: 1 Antonio Matos Fraga Junior.pdf: 1236085 bytes, checksum: 13e7f8734f0795648537ab792eac5d87 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T16:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Matos Fraga Junior.pdf: 1236085 bytes, checksum: 13e7f8734f0795648537ab792eac5d87 (MD5) Previous issue date: 2011-02-08 / This study aimed to assess the follicular dynamics of Guzerat cows treated with three protocols for synchronization of ovulation where they used vaginal implant impregnated with progesterone or the Ovsynch protocol, besides the use of estradiol benzoate or GnRH to induce ovulation.There were used 18 PO Guzerat cows, multiparous non-lactating, aging between four and seven years, good body score condition, ranging from 3.0 to 4.0, The animals were kept in extensive management, where the diet provided met the nutritional requirements including protein mineral salt and water "ad libitum". The animals were divided into three groups, in group 1 (n = 6) it was applied at the D0, an intravaginal device CIDR® along with 2 mg of estradiol benzoate, at D8 it was administered 300 mg of a prostaglandin analogue and 300 IU of eCG besides intravaginal device removal, at D9 it was administered 1 mg of estradiol benzoate and at D11 artificial insemination was carried out. In group 2 (n = 6) it was used the same protocols as in group 1 except for the induction of ovulation when it was used 17 mg of a GnRH analogue and at D11 artificial insemination was carried. In group 3 (n = 6) was applied at D0, 200 mg of GnRH analogue, 0.530 mg of prostaglandin analogue at D7, at D9 it was administered 100 mg of GnRH analogue and at D10 artificial insemination was carried. From D0 to D8 animals were examined daily (24/24 h) by transrectal ultrasound .After removal of the implant on D8 in groups 1 and 2 and application of prostaglandin D7 (group 3) animals were assessed four times a day (6/6 hours) until D10 of the Protocol. A new follicular wave emergence for groups 1, 2 and 3 was observed respectively, 2.6 ± 0.16; 2.7 ± 0.18 and 2.9 ± 0.16 days, with no statistical difference (P < 0.05) between groups .There was statistical difference for groups 1, 2 and 3 in the range of wave emergence and ovulation in days, 7.1  0.18; 6.37 0.31; 5.33 0.66, the interval between implant removal and ovulation in hours, 64.2 6.99, 61.0 12.36, interval between the application of inducing ovulation and in hours, 43.6 6.89, 41.0 11.25, 38.2 7.89, greatest diameter of the DF (day 8), 10.71 0.30, 9.41 0.24, 9.75 0.35, greatest diameter of the DF (day 10), 13.1 0.23, 11.7 0.22, 12.0 0.34, Average follicle growth until day 8 - (mm / day), 1.36 0.07, 0.92 0.10, 1.10 0.11, Average follicle growth of 8-10 days - (mm / day), 2.40 0.08, 2.28 0.11, 2.23 0.10 and the percentage of animals that ovulated, 83.34% (5/6) , 66.67% (4/6), 50% (3/6). So the protocols of experimental groups 1 and 2 were moreeffective in promoting the synchronization of ovulation and are indicated to be used in a program of fixed-time artificial insemination in Guzerat cows. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a dinâmica folicular de vacas da raça Guzerá tratadas com três protocolos para sincronização da ovulação onde se utilizaram implantes vaginais impregnados com progesterona ou o protocolo Ovsynch, além da utilização de benzoato de estradiol ou GnRH como indutor da ovulação. Foram utilizadas 18 vacas PO da raça Guzerá, multíparas, não-lactantes, com idades entre quatro e sete anos, escore de condição corporal de 3,0 a 4,0 (escala de 1 a 5). Os animais foram mantidos em regime extensivo, onde a dieta fornecida supriu as exigências nutricionais, receberam sal mineral proteinado e água “ad libitum”. Os animais foram divididos em três grupos, No grupo 1 (n=6) foi aplicado no D0, mesmo dia do dispositivo intravaginal CIRD®, 2 mg de benzoato de estradiol, no dia oito (D8), foram aplicados 0,530 mg de análogo de prostaglandina, 300 UI de eCG e foi retirado o dispositivo intravaginal, no dia nove (D9) foi aplicado 1 mg de benzoato de estradiol. No grupo 2 (n=6) foi aplicado no D0, mesmo dia do dispositivo intravaginal CIRD®, 2 mg de benzoato de estradiol, no dia oito (D8), foram aplicados 0,530 mg de análogo de prostaglandina, 300 UI de eCG IM e foi retirado o dispositivo intravaginal, no dia nove (D9) foi aplicado 17 μg de um análogo do GnRH. No grupo 3 (n=6) foi aplicado no D0, 200 μg de análogo do GnRH, 0,530 mg de análogo da prostaglandina no dia sete (D7) no dia nove (D9) foi aplicado 100 μg de análogo do GnRH. A partir do dia zero até o dia 8 os animais foram examinados diariamente (24/24 h) por via trans-retal com auxílio de ultrassom. Após a retirada do implante no dia 8 (grupos 1 e 2) e aplicação da prostaglandina no dia 7 (grupo 3) os animais foram avaliados 4 vezes por dia (6/6 horas) até o dia 10 do protocolo. Uma nova emergência da onda folicular para os grupos 1, 2 e 3 ocorreu respectivamente, em 2,6 ± 0,16; 2,7 ± 0,18 e 2,9 ± 0,16 dias, não havendo diferença estatística (P <0,05) entre os grupos (Tabela 1). Houve diferença estatística para os grupos 1, 2 e 3 no intervalo entre emergência da onda e ovulação em dias, 7,1  0.18; 6,37 0,31; 5,33 0,66; intervalo entre a retirada do implante e a ovulação em horas, 64,2 6,99; 61,0 12,36; intervalo entre a aplicação do indutor e a ovulação em horas, 43,6 6,89; 41,0 11,25; 38,2 7,89, maior diâmetro do FD (dia 8), 10,71 0,30; 9,41 0.24; 9,75 0,35, maior diâmetro do FD (dia 10), 13,1 0,23; 11,7 0,22; 12,0 0,34; Média de crescimento do folículo até dia 8 – (mm/dia), 1,36 0,07; 0,92 0,10; 1,10 0,11; Média de crescimento do folículo do dia 8-10 – (mm/dia), 2,40 0,08; 2,28 0,11; 2,23 0,10 e na porcentagem de animais que ovularam, 83,34% (5/6), 66,67% (4/6), 50% (3/6). Portanto os protocolos dos grupos experimentais 1 e 2 se mostraram mais eficientes em promover a sincronização da ovulação e são indicados para utilização em programa de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça Guzerá.
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Avaliação de sistemas de inseminação artificial com observação de estro ou em tempo fixo em vacas de corte azebuadas / Evaluation of systems for artificial insemination with observation of estrus or timed artificial insemination in zebu-crossed beef cows

BURGOS, Daniel de Castro 16 February 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T12:21:58Z No. of bitstreams: 1 Daniel de Castro Burgos.pdf: 962079 bytes, checksum: 7910c72572139941c836e667e046d328 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T12:21:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniel de Castro Burgos.pdf: 962079 bytes, checksum: 7910c72572139941c836e667e046d328 (MD5) Previous issue date: 2012-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this experiment was to compare the results of the pregnancy obtained by the association of conventional Artificial Insemination (AI) with synchronized estrus together with GnRH in TAI with those of classical TAI in zebu cows. A total of 677 cows were synchronized with a progesterone vaginal device (P4) and 2 mg of estradiol benzoate (EB) on D1, D7 all cows received 530 μg of PGF2α and D9 implants were removed and all animals received 400 IU of eCG and were evaluated in three experiments divided as follows. In first experiment, 190 cows, without temporarily calf weaning and after removal of devices were divided into three groups: control group called EC received 0.4 mg of estradiol cypionate (EC) and TAI were inseminated 48 hours after removal of devices. The second and third groups did not receive ovulation inductor in removal of devices and were named ESTRUS PLUS GnRH 48 HOURS and ESTRUS PLUS GnRH 54 HOURS. These cows were observed for onset of estrus four times (12, 24, 36 and 48 hours) and those that showed estrus during this period were inseminated by the AM / PM method where estrus in the morning AI late afternoon and estrus in the afternoon with AI on the morning of next day; cows who have not appearing in estrus during this period of 48 hours after devices were removed, received 25 μg of GnRH and were inseminated immediately in the group ESTRUS PLUS GnRH 48 HOURS and 6 hours after application of GnRH cows from ESTRUS PLUS GnRH 54 HOURS were inseminated. In the 2nd experiment 242 cows were subjected to similar protocol, but was held temporarily weaned calves after removal of the implants. At the 3rd experiment 245 cows were subjected to two experimental protocols but using P4 devices previously used. Cows were examined by 5 MHz transrectal ultrasonography 45 days after insemination to detect pregnancy in experiments 1 and 2 and 35 days in experiment 3. In experiment 1, cows received the following pregnancy rates: group EC 58.18%, group ESTRUS PLUS GnRH 48 HOURS 56.21% and group ESTRUS PLUS GnRH 54 HOURS 61.97%. In experiment 2 pregnancy rates were: group EC 57.83%, group ESTRUS PLUS GnRH 48 HOURS 57.50% and group ESTRUS PLUS GnRH 54 HOURS 53.16%. In experiment 3 pregnancy rates were: group EC 57.14%, group ESTRUS PLUS GnRH 48 HOURS 56.10% and group ESTRUS PLUS GnRH 54 HOURS 54.43%. No significant difference were seen (p > 0,05) between the groups. In spite of the protocols showing equivalent results, its costs and labor hamper its use, and the use of classic TAI is simpler and more economically viable. / O objetivo deste experimento foi comparar os resultados de prenhez da associação de Inseminação Artificial (IA) convencional com estro sincronizado acompanhado de IATF utilizando GnRH com os da IATF clássica em vacas azebuadas. Um total de 677 vacas foram sincronizadas com dispositivo de progesterona (P4) e 2 mg de benzoato de estradiol (BE) no D1, no D7 todas receberam 530 μg de PGF2α e no D9 foram retirados os implantes e todos os animais receberam 400 UI de eCG e foram avaliadas em três experimentos divididos da seguinte forma. No 1º experimento 190 vacas, conduzidas sem apartação temporária dos bezerros após a retirada dos dispositivos, foram divididas em três grupos: O grupo controle chamado de CE recebeu 0,4 mg de cipionato de estradiol (CE) e foram inseminadas na IATF 48 horas após a retirada dos dispositivos. O segundo e o terceiro grupos não receberam indutor de ovulação na retirada dos dispositivos e foram chamados de estro mais GnRH 48 horas e estro mais GnRH 54 horas. Essas vacas foram observadas para apresentação de estro por quatro vezes (12, 24, 36 e 48 horas) e as que apresentaram estro neste período foram inseminadas pelo método AM/PM com estro pela manhã inseminação a tarde e estro pela tarde com inseminação na manhã do dia seguinte; as vacas que não apresentaram estro neste período receberam 48 horas após a retirada dos dispositivos, aplicação de 25 μg de GnRH e foram inseminadas imediatamente no grupo estro mais GnRH 48 horas e após 6 horas da aplicação do GnRH foram inseminadas as vacas do lote estro mais GnRH 54 horas. No 2º experimento 242 vacas foram submetidas a protocolo semelhante, porém realizou-se o desmame temporário dos bezerros após a retirada dos implantes. No 3º experimento 245 vacas foram submetidas ao protocolo do experimento 2 porém utilizando dispositivos de P4 anteriormente utilizados. As vacas foram examinadas por ultrasonografia transretal de 5 MHz em 45 dias após as inseminações para detecção de prenhez nos experimentos 1 e 2 e 35 dias no experimento 3. No experimento 1 as vacas obtiveram as seguintes taxas de prenhez: grupo CE 58,18%; grupo estro mais GnRH 48 horas 56,21% e grupo estro mais GnRH 54 horas 61,97%. No experimento 2 os números de gestação foram: grupo CE 57,83%; grupo estro mais GnRH 48 horas 57,50% e grupo estro mais GnRH 54 horas 53,16%. No experimento 3 os números de gestação foram: grupo CE 57,14%; grupo estro mais GnRH 48 horas 56,10% e grupo estro mais GnRH 54 horas 54,43%. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. Apesar dos protocolos se mostrarem equivalentes nos resultados, o aumento do custo e da mão-de-obra dificultam sua utilização, sendo a IATF clássica mais simples e economicamente viável.
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Avaliação de resíduos de antimicrobianos em leite in natura procedente do rebanho bovino leiteiro da microrregião de Garanhuns, Pernambuco

NUNES, Elâne Rafaella Cordeiro 08 February 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T12:45:24Z No. of bitstreams: 1 Elane Rafaela Cordeiro Nunes.pdf: 921731 bytes, checksum: eddcacad472e8bebb52d60738ec901b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T12:45:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elane Rafaela Cordeiro Nunes.pdf: 921731 bytes, checksum: eddcacad472e8bebb52d60738ec901b1 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / The widespread use of antimicrobials for veterinary and human medicine is the main cause of the selection of resistant bacteria. Monitoring antimicrobial use the occurrence of disease and profile of bacterial resistance to antimicrobial assists in policy formulation and solution of public events related to ecological and microbial diseases. The use of these drugs for milking animals may result in residues in milk and favors the selection of bacteria. In the Southeast and South of Brazil there is more research on antimicrobial residues in raw milk. Thus, the objective of this study was to evaluate the frequency of antibiotic residues in raw milk produced in farms located in the microregion of Garanhuns of the state Pernambuco. Like, make a survey of active antimicrobials sold in pharmacies veterinary and human that region. We analyzed 84 samples of milk collected in expansion tanks or drums, coming from 84 herds in 19 counties. In each farm received a questionnaire on milk production, health management and use antimicrobial. The survey of antimicrobials in milk was performed with kit Charm Cowside II®. The results showed that 14.29% of fresh milk were positive for the presence of antimicrobial residues in milk. The only variable significantly associated with the presence of antimicrobial residues in milk was the type of milking (p=0.038) with a predominance of positive results in the technique of milking mechanics the foot. The active principle antimicrobials often used in dairy cattle herd are tetracyclines, aminoglycosides anda penicillins. The presence of antimicrobial residues in fresh milk was detected in over 50% of the municipalities of the region of Garanhuns, PE. The milking technique as well as the hygienic milking may favor the presence of antimicrobial residues in fresh milk. There were differences in the classes of antimicrobials used in the dairy herd in 47.3% of the municipalities. The diagnosis of antimicrobials showed some of the health and economic risks associated with the use of these drugs in dairy cattle herd in the region. And hence the need to implement intervention strategies in order to control the irrational use of these drugs in animals, and the development of research related to antimicrobial efficacy in human and veterinary medicine. / O amplo uso de antimicrobianos na medicina veterinária e humana é a principal causa da seleção de bactérias resistentes a antimicrobianos. Monitorar o uso de antimicrobianos, a ocorrência de doenças e o perfil de resistência bacteriana a estes fármacos auxilia na formulação de política públicas e na elucidação de fatos relacionados a ecologica microbiana e das doenças. No rebanho leiteiro, a utilização desses fármacos pode resultar na presença de resíduos no leite, o que favorece a seleção de bactérias. As pesquisas elaboradas no intuito de detectar resíduos de antimicrobiano em leite in natura estão concentradas nas regiões Sudeste e Sul do país. Desse modo, o objetivo do presente trabalho foi pesquisar resíduos de resíduos de antimicrobianos em leite in natura produzido em propriedades rurais localizadas na microrregião de Garanhuns do Estado de Pernambuco. Foram analisadas 84 amostras de leite coletadas em tanques de expansão ou latões, procedentes de 84 propriedades localizadas em 19 municípios. Em cada propriedade foi aplicado um questionário sobre produção leiteira e manejo sanitário e uso de antimicrobiano. A pesquisa de antimicrobianos no leite foi realizada com o Kit Charm Cowside II®. Os resultados evidenciaram que 14,29% do leite in natura foram positivos para presença de resíduos de antimicrobianos no leite. A única variável de manejo que teve associação significativa com a presença de resíduos de antimicrobianos no leite foi o tipo de ordenha (p=0,038) com predominância de resultados positivos na técnica de ordenha mecânica ao pé. Os princípios ativos de antimicrobianos frequentemente utilizados no rebanho bovino leiteiro da microrregião pertencem à classe das tetraciclinas, aminoglicosídeos e penicilinas. A presença de resíduos de antimicrobianos em leite in natura foi detectada em mais de 50% dos municípios da microrregião de Garanhuns, PE. A técnica de ordenha, assim como o manejo higiênico durante a ordenha pode favorecer a presença de resíduos de antimicrobianos em leite in natura. Houve diferença nas classes de antimicrobianos utilizadas no rebanho leiteiro em 47,3% dos municípios. O diagnóstico sobre os antimicrobianos evidenciou alguns dos riscos sanitários e econômicos associados ao uso destes fármacos no rebanho bovino leiteiro da região. E consequentemente, a necessidade da implantação de estratégias de intervenção, visando controlar o uso irracional desses fármacos nos animais, e a elaboração de pesquisas relacionada à eficácia antimicrobiana na medicina humana e veterinária.
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Estudo in vitro da fertilidade de espermatozoides criopreservados obtidos na cauda do epidídimo de touros

ALMEIDA, Felipe Costa 26 February 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T14:39:09Z No. of bitstreams: 1 Felipe Costa Almeida.pdf: 906567 bytes, checksum: 56e2db3d9385785462dcff3582c0c339 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T14:39:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felipe Costa Almeida.pdf: 906567 bytes, checksum: 56e2db3d9385785462dcff3582c0c339 (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / This work aimed to study fertility of sperm obtained from epididymis tail of Nelore bulls and subjected to cryopreservation in extenders with three different concentrations of glycerol, and stabilization times at 5 °C and antioxidants addition to semen extender. Epididymides were obtained from slaughterhouse up to one hour after the death of the animal, placed in individual plastic bags and transported in box at room temperature (28 °C). At the laboratory, spermatozoa were recovered from epididymis tail using flotation technique and then diluted in Tris-yolk egg. In experiment 1 three concentrations of glycerol (3%, 5% and 7%) was evaluated at different stabilization times (0h, 2h and 4h). In the second experiment was evaluated the effect of adding enzymatic antioxidants in epididymal spermatozoa cryopreservation, resulting in following experimental groups: (Control; CAT 50 and 100 U/mL, and SOD 50 and 100 U/mL) at a concentration of 60 x 106 sperm/mL, packaged in straws (0.25 mL) and frozen in automated system. In both experiments, semen samples were thawed at 37 °C/30 sec was evaluated for plasma membrane integrity (PMi), acrosomal integrity (Aci), mitochondrial membrane potential (MMP) and sperm kinematics. In Experiment 1, PMi and Aci analyzes demonstrated values lower (P<0.05) for glycerol 3%, at stabilization time at 4h compared to other times. In kinematic evaluation, sperm values were lower (P<0.05) for BCF parameter in glycerol 3% and 7% groups at 2h of stabilization time compared to glycerol 5%; for ALH, glycerol 3% group in stabilization time at 4h demonstrated lowest (P<0.05) compared to other groups. Glycerol 5% group, settling time 0h, showed lower values (P <0.05) for the hPMM and Aci parameters, when compared to other groups. For IVF experiment, only glycerol 5% at stabilization time at 4h was used. Forty percents of embryonic viability were obtained from oocytes used. In experiment 2, parameters of MT, MP, VCL, VSL, VAP, STR, ALH and BFC did not differ (P> 0.05) between control and treated groups. However, significant differences (P <0.05) were observed between groups for Linearity (LIN) and oscillation index (WOB), being less than 100 SOD treatment (P<0.05) than other groups. Addition of SOD 100 determined lower (P<0.001) percentages of blastocysts post-cleavage. Based on results of kinematic and in vitro fertilization, it is possible to conclude that spermatozoa cryopreservation obtained from epididymis tail of bulls should be performed using extender with glycerol at 5% of concentration and stabilization time at 5 °C during 4h. Addition of CAT concentrations of 50 and 100 U/mL and SOD at concentration of 50 U/mL did not affect the sperm quality. Addition of SOD at a concentration of 100 U/mL reduces fertility of epididymal sperm after cryopreservation. However, it is noteworthy that sperm obtained from epididymis tail of bulls can be successfully used in IVF programs. / Este trabalho teve como objetivo estudar a fertilidade de espermatozoides obtidos da cauda do epidídimo de touros da raça Nelore e submetidos à criopreservação em diluentes com três diferentes concentrações de glicerol, tempos de estabilização a 5 °C e adição de antioxidantes ao diluidor de sêmen. Os epidídimos foram obtidos em matadouro, até uma hora após a morte do animal, colocados em sacos plásticos individuais e transportados em caixa térmica em temperatura ambiente (28 ºC). No laboratório, os espermatozoides foram recuperados da cauda do epidídimo utilizando a técnica de flutuação e, a seguir, diluídos em Tris-gema. No experimento 1 foi avaliado diferentes concentrações de glicerol (3%, 5% e 7%) em diferentes tempos de estabilização (0h, 2h e 4h). No experimento 2 foi avaliado o efeito da adição de antioxidantes enzimáticos na criopreservação de espermatozoides epididimários, constituindo os seguintes grupos experimentais: (Controle; CAT 50 e 100 U/mL; SOD 50 e 100 U/mL), na concentração de 60 x 106 espermatozoides/mL, acondicionados em palhetas (0,25 mL) e congelados em método automatizado. Em ambos os experimentos, as amostras de sêmen foram descongeladas a 37 °C/ 30 s e avaliadas quanto a integridade de membrana plasmática (iMP), integridade acrossomal (iAc), potencial de membrana mitocondrial (PMM) e cinética espermática. No experimento 1, as análises de iMP e iAc apresentaram valores inferiores (P<0,05) para o glicerol 3%, no tempo de 4h em comparação aos demais tempos de estabilização. Na avaliação da cinética espermática, foram encontrados valores inferiores (P<0,05) para o parâmetro BCF nos tratamentos glicerol 3% e 7%, no tempo de 2h em comparação ao do glicerol 5%; para ALH, o grupo glicerol 3%, no tempo 4h de estabilização apresentou menor valor (P<0,05) em relação aos demais grupos. O grupo glicerol 5%, no tempo de estabilização 0h, apresentou valores inferiores (P<0,05) para os parâmetros de aPMM e iAc, quando comparado aos demais grupos. Para a FIV foi utilizado o grupo glicerol 5%, no tempo de estabilização 4h. Foram obtidos 40% de viabilidade embrionária dos oócitos utilizados. No experimento 2, os parâmetros de MT, MP, VCL, VSL, VAP, STR, ALH e BFC não diferiram (P>0,05) entre o grupo controle e os grupos tratados. Todavia, diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre os grupos para Linearidade (LIN) e no índice de oscilação (WOB), sendo o tratamento SOD 100 inferior (P<0,05) aos demais grupos. A adição de SOD 100 determinou ainda menores (P<0,001) porcentagens de blastocistos pós-clivagem. Com base nos resultados de cinética e fertilização in vitro, é possível concluir que a criopreservação de espermatozoides obtidos da cauda do epidídimo de touros deve ser realizada utilizando diluidor com glicerol na concentração de 5% e tempo de estabilização a 5 °C de 4h. A adição de CAT nas concentrações de 50 e 100 U/mL e SOD na concentração de 50 U/mL não influencia na qualidade espermática. A adição de SOD na concentração de 100 U/mL reduz a fertilidade dos espermatozoides epididimários pós-criopreservação. Todavia, ressalta-se que espermatozoides obtidos da cauda do
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Padronização da técnica de imuno-histoquímica e investigação de componentes desencadeadores da contratura articular em ovinos

SANTOS, Jomel Francisco dos 03 June 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T14:23:37Z No. of bitstreams: 1 Jomel Francisco dos Santos.pdf: 1033055 bytes, checksum: 0882131c9f37caac6cc396d21eb8c175 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T14:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jomel Francisco dos Santos.pdf: 1033055 bytes, checksum: 0882131c9f37caac6cc396d21eb8c175 (MD5) Previous issue date: 2013-06-03 / Joint contractures are a severe complication of joint injuries that can permanently limit the extremity function. Current treatments for contractures in humans have little effect and there is an obvious need for clarification of the pathophysiology of this chronic and disabling dysfunction. Sheep joint is a promising model for the investigation of normal and pathologic states by the similarity with the biomechanics of certain human joints. The aim of this study was to investigate by the techniques of immunohistochemistry and cytochemistry the presence of key components for the development of joint contractures in sheep and to evaluate the potential of this species as an experimental model to study this disease. Therefore, we used 15 knee joint capsules of healthy Santa Inês ewes to identify myofibroblasts and mast cells. For investigation of myofibroblasts was performed immunohistochemical technique. Following histologic routine preparation, the antigen retrieval was performed by heating in citrate, followed by peroxidases blockage, blocking nonspecific protein and then primary antibody was incubated. After the secondary antibody was added to the cuts, and DAB chromogen was added. Slides were counterstained with Harris Hematoxylin and mounted. In cytochemical technique was applied the stain Toluidine Blue to disclosure mast cells. Analysis of the cuts was made under a light microscope. Positive controls of myofibroblasts (ovine cervix) and mast cells (umbilical cord) were stained satisfactorily by the standard techniques. In joint capsules, α-SMA protein was observed in the wall of arteries and rare myofibroblasts were observed in each section, as well as few mast cells were scored. Other studies about ovine joint capsule injuries must be conducted to confirm the presence of myofibroblasts and the development of joint contracture. / As contraturas articulares são complicações severas de doenças articulares que podem limitar permanentemente a função de extremidades. Os tratamentos atuais para contratura em seres humanos têm pouca eficácia e há uma evidente necessidade de esclarecimento sobre a patofisiologia dessa disfunção crônica e incapacitante. A articulação do ovino é um modelo promissor para a investigação dos estados normais e patológicos, pela semelhança com a biomecânica de determinadas articulações humanas. O objetivo deste trabalho foi investigar por meio das técnicas de imuno-histoquímica e citoquímica a presença de componentes-chave para o desenvolvimento da contratura articular na espécie ovina e avaliar a potencialidade desta espécie como modelo experimental para estudo desta patologia. Para tanto, foram utilizadas 15 cápsulas articulares de joelhos de ovelhas Santa Inês sadias para localização de miofibroblastos e mastócitos. Para investigação de miofibroblastos foi realizada a técnica de imuno-histoquímica. Após a preparação para rotina histológica, a recuperação antigênica foi realizada por aquecimento em citrato, seguida pelo bloqueio das peroxidades, bloqueio de proteínas inespecíficas e então, o anticorpo primário foi incubado. Após, o anticorpo secundário foi acrescentado aos cortes, e o cromógeno DAB foi adicionado. As lâminas foram contracoradas com Hematoxilina de Harris e montadas. Na técnica citoquímica, foi aplicada a coloração de Azul de Toluidina para evidenciação dos mastócitos. As análises dos cortes foram feitas em microscópio de luz. Os controles positivos da pesquisa de α-SMA (cérvix ovina) e de mastócitos (cordão umbilical) foram marcados ou corados satisfatoriamente pelas respectivas técnicas. Nas cápsulas articulares, a proteína foi observada na parede de artérias e raros miofibroblastos foram observados em cada corte, assim como poucos mastócitos foram corados. Outros estudos sobre lesões de cápsula articular de ovinos devem ser conduzidos para confirmar a presença de miofibroblastos e o desenvolvimento da contratura articular.
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Aspectos epidemiológicos da infecção pelo Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em rebanhos leiteiros da microrregião de Garanhuns - Pernambuco, Brasil / Epidemiological aspects of infection with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in dairy herds of microregion Garanhuns - Pernambuco, Brasil

SÁ, Luenda de Menezes e 09 February 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T15:10:13Z No. of bitstreams: 1 Luenda de Menezes e Sa.pdf: 4392852 bytes, checksum: 551c75da448596a356470434e8984578 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T15:10:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luenda de Menezes e Sa.pdf: 4392852 bytes, checksum: 551c75da448596a356470434e8984578 (MD5) Previous issue date: 2012-02-09 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Paratuberculosis is a disease that can cause a negative impact on national livestock. In cattle cause chronic intractable diarrhea and granulomatous enteritis, these animals become listless and lose weight gradually, decreasing or ceasing milk production. It is caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP), an alcohol-acid resistant bacilli, resistant to many environments. The objective of this study makes an epidemiological investigation of MAP infections in dairy cattle the microregion of Garanhuns, Pernambuco, Brazil. For this study blood samples were collected from 408 animals from 19 herds in 15 counties of the microregion. Serologic testing was performed by indirect enzyme immunoassay (ELISA) for antibodies against the MAP. A questionnaire was applied to all properties for analysis of risk factors, and collected geographical coordinates through a GPS (Global Position System) device to perform the spatial distribution. The prevalence of MAP infection was 2.7% (11/408, I.C. 1.4 – 4.9). The number of foci was 47.4% (9/19). In logistic regression analysis was identified as a risk factor the annual rate of births over 51 calves / year (O.R. 3.8; I.C. 1.1 – 13.1). In conclusion an MAP infection is spread among the cattle’s herds of microregion Garanhuns, Pernambuco, Brazil, and control measures based or risk factors should be implemented to reduce the number of outbreaks and consequently increase the productivity of herds. / A paratuberculose é uma enfermidade que pode causar um impacto negativo para a pecuária nacional. Nos bovinos apresenta-se sob a forma de diarreia crônica intratável que causa uma enterite granulomatosa, onde os animais tornam-se apáticos e emagrecem progressivamente, diminuindo ou até mesmo cessando a produção leiteira. É causada pelo Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis (MAP), um pequeno bacilo álcool-ácido-resistente, considerado como um dos menores do gênero, extremamente resistente a diversos ambientes. Objetivou-se com esse trabalho realizar um inquérito epidemiológico da infecção pelo MAP em bovinos leiteiros da microrregião de Garanhuns, Pernambuco, Brasil. Para esse estudo foram coletadas amostras sanguíneas de 408 animais, provenientes de 19 rebanhos localizados em 15 municípios da microrregião. O exame sorológico foi realizado por Ensaio Imunoenzimático (ELISA) indireto para detecção de anticorpos frente ao Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Em todas as propriedades, um questionário investigativo foi aplicado para análise dos fatores de risco, e as coordenadas geográficas coletadas através de um aparelho de GPS (Global Position System) para realização da distribuição espacial. A prevalência da infecção pelo MAP foi de 2,7% (11/408; I.C. 1,4 – 4,9). O número de focos foi 47,4% (9/19). Na análise de regressão logística foi identificado como fator de risco a taxa anual de nascimentos superior a 51 bezerros/ano (OR 3,8; I.C. 1,1 – 13,1). Concluiu-se que a infecção pelo MAP encontra-se distribuída entre os rebanhos bovinos leiteiros da microrregião estudada e que medidas de controle baseadas nos fatores de risco devem ser implementadas com o objetivo de reduzir o número de focos e consequentemente aumentar a produtividade dos rebanhos, minimizando assim os prejuízos causados pela enfermidade aos produtores.

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