Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4161.pdf: 684753 bytes, checksum: d519f39da2a77bd47497fe13ed1e52cc (MD5) Previous issue date: 2012-12-12 / Studies have shown that situations of anxiety/fear can inhibit nociception and serotonin (5-HT) has antinociceptive effect in the brain structures such as the periaqueductal gray matter (PAG). This work aimed to evaluate the effect of anxiety/fear in nociception-induced model of sciatic nerve constriction (CNC), and infused intra-ventrolateral PAG (PAGvl) of 8-OH-DPAT (5- HT1A agonist), nociception and anxiety/fear datas. Male mice, Swiss albino (n = 7-15/group) were exposed to the real rat (RR) and toy rat (TR), for registration of nociception (total scratching) and anxiety/fear [total entries (TE), percentage of protected entries (% PE) and time spent (% PT) in the apparatus and behaviors of self-cleaning, rearing and total immobility (s)], as well as tests of mechanical and termic hyperalgesia. Experiment 1, performed without drug administration, showed that animals with CNC had an increase in total scratching compared to SHAM group being, this index decreased by exposure to RR. It also showed an increase in % PE and % PT in animals exposed to RR. In Experiment 2, the 8-OH-DPAT (5.6 nmol/0.1 μl) intra- PAG of mice with CNC, decreased levels of anxiety (TE, % PE, and % PT) only in animals exposed to RR, without decreasing the indices in SHAM animals. The 10 nmol/0.1 μl dose takes effect only in increased % PT and immobility time in animals exposed to TR. None doses of 8- OH-DPAT was able to modify the nociceptive response (scratching and frequency of mechanical and thermal hyperalgesia tests). Together, we conclude that exposure of mice to the predator (rat) produced increased anxiety/fear in both SHAM or CNC mice, and reduction measures of nociception only in CNC animals. The 5-HT1A receptor agonist in 5.6 nmol dose, intra-PAGvl, produced anxiolytic effects in CNC mice without altering the levels of pain, while the 10 nmol dose effects produced suggestive nociception increased. Thus, these results support the involvement of the 5-HT1A receptors in modulating responses PAGvl anxiety/fear and nociception evaluated in rodents. / Estudos têm demonstrado que situações de ansiedade/medo podem inibir a nocicepção e que a serotonina (5-HT) possui efeito antinociceptivo em estruturas do encéfalo, como a substância cinzenta periaquedutal (SCP). Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da ansiedade/medo na nocicepção, induzida pelo modelo de constrição do nervo ciático (CNC), e da infusão intra-SCP ventrolateral (SCPvl) do 8-OH-DPAT (agonista dos receptores 5-HT1A), nos dados de nocicepção e ansiedade/medo. Camundongos machos, suíço-albino (n= 7-15/grupo), foram submetidos à exposição ao rato verdadeiro (RV) e de brinquedo (RB), para registro da nocicepção (total de coçar) e da ansiedade/medo [total de entradas (TE), porcentagens de entradas (%EP) e de tempo gasto no compartimento protegido (%TP) do aparato e comportamentos de auto-limpeza, levantar e total de imobilidade (s)], bem como aos testes de hiperalgesia mecânica e térmica. O Experimento 1, realizado sem administração de drogas, mostrou que os animais com CNC apresentaram aumento do total de coçar em relação ao grupo SHAM sendo, este índice, reduzido pela exposição ao RV. Mostrou também aumento das %EP e %TP nos animais expostos ao RV. No Experimento 2, o 8-OH-DPAT (5,6 nmol/0,1 μl) injetado na SCP de camundongos com CNC diminuiu os índices de ansiedade (TE, %EP e %TP), apenas nos animais expostos ao RV, sem diminuir estes índices nos animais SHAM. A dose de 10 nmol/0,1 μl produziu efeito apenas em relação ao aumento da %TP e tempo de imobilidade, nos animais expostos ao RB. Nenhuma das doses de 8-OH-DPAT foi capaz de modificar a resposta nociceptiva (freqüência de coçar e testes de hiperalgesia mecânica e térmica). Em conjunto, concluímos que a exposição do camundongo ao predador (rato) produziu aumento da ansiedade/medo em ambos os camundongos, SHAM e CNC e redução das medidas de nocicepção apenas nos animais com CNC. O agonista dos receptores 5-HT1A, na dose de 5,6 nmol, intra- SCPvl produziu efeito ansiolítico nos camundongos com CNC, sem alterar os índices de dor, enquanto a dose de 10 nmol produziu efeitos sugestivos de aumento de nocicepção. Desta forma, estes resultados fortalecem a participação dos receptores 5-HT1A da SCPvl na modulação das respostas de ansiedade/medo e na nocicepção avaliadas em roedores.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissLMR.pdf: 1079083 bytes, checksum: d28dd712f6bcac0f6d9cf20755b176fb (MD5) Previous issue date: 2006-11-10 / It is well known that the previous experience to the elevated plus-maze (EPM) increases the avoidance of rodents to the open arms and impairs the anxiolytic-like effect of benzodiazepines in a subsequent exposure to the EPM, a phenomenon known as "one trial tolerance" (OTT). This study investigated the effects of intra-periaqueductal gray matter (PAG) infusions of midazolam (MDZ) in EPM-naïve and EPM-experienced mice. The antiaversive effects of MDZ were also evaluated after prior injection of flumazenil, a benzodiazepine receptor antagonist, into to same midbrain site. Test videotapes were scored for conventional measures of anxiety (% open arm entries and % open arm time) and locomotor activity (frequency of closed arm entries), as well as a range of ethological measures related to risk assessment (e.g. stretch attend postures; head dips, etc). In EPMnaïve mice, intra-PAG infusions of MDZ increased % open arm entries (2.26 nmol) and % open arm time (2.26 and 30 nmol). These effects were observed in the absence of significant changes in locomotor activity, indicating a selective anxiolytic-like effect of MDZ. The antiaversive effects of MDZ were completely blocked by prior injection of flumazenil (16 nmol) into the same midbrain site, and did not alter any behavioral measures per se. In EPMexperienced mice, intra-PAG infusion of MDZ did not modify any behavioral measures. Taken together, present results demonstrates that GABA-benzodiazepine receptor complex located within the PAG plays a role on anxiety modulation in EPM-naïve mice as well as indicates its involvement in the OTT phenomenon. / Sabe-se que a experiência prévia ao labirinto em cruz elevado (LCE) aumenta a esquiva de roedores aos braços abertos e compromete o efeito ansiolítico de benzodiazepínicos em uma exposição subseqüente ao aparelho, um fenômeno conhecido como one trial tolerance (OTT). Este estudo avaliou os efeitos da administração do benzodiazepínico midazolam (MDZ) na substância cinzenta periaquedutal (SCP), estrutura pertencente ao sistema encefálico de defesa, na ansiedade de camundongos sem (ingênuos) e com experiência prévia ao LCE. O envolvimento de receptores benzodiazepínicos nos efeitos antiaversivos do MDZ foi avaliado com a administração combinada com o flumazenil, antagonista desses receptores. Foram avaliadas medidas convencionais de ansiedade (% entradas e % tempo gasto nos braços abertos do LCE), atividade locomotora (freqüência de entradas nos braços fechados) e medidas etológicas associadas à avaliação de risco (exemplo, mergulhos e esticadas do corpo). Em animais ingênuos, a infusão intra-SCP de midazolam (2,26nmol) aumentou a % entradas e % tempo gasto nos braços abertos, sem alterar as medidas de avaliação de risco. Entretanto, a dose de 30 nmol de midazolam aumentou o total de entradas, as entradas e a % tempo gasto nos braços abertos do LCE, e diminuiu comportamentos de avaliação de risco como porcentagem de mergulhos. Esses efeitos foram observados na ausência de mudanças significativas na atividade locomotora, indicando seletividade do efeito ansiolítico do MDZ. A administração intra-SCP de flumazenil (16 nmol) bloqueou os efeitos ansiolíticos do midazolam (30 nmol), sem alterar as medidas comportamentais de ansiedade nem a atividade locomotora, quando administrado isoladamente. Em contraste, a infusão intra-SCP de MDZ, nas duas doses, não modificou nenhuma das medidas comportamentais de ansiedade em camundongos reexpostos ao LCE. A ausência do efeito ansiolítico do MDZ durante a reexposição ao LCE sugere que os receptores GABA-benzodiazepínicos localizados na SCP perdem, de alguma maneira, sua ação em atenuar os comportamentos defensivos no LCE. Em conjunto, o presente estudo destaca a participação de mecanismos GABA-benzodiazepínicos da SCP tanto no modulação da ansiedade quanto no fenômeno da OTT em camundongos expostos ao LCE.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1714.pdf: 585887 bytes, checksum: 00ad5bead95ebda8051d22469232ae8a (MD5) Previous issue date: 2008-02-21 / Universidade Federal de Minas Gerais / The aim of the present study was to evaluate the effects of L-Histidine (a histaminergic precursor) on anxiety and memory retrieval in mice using the elevated plus maze (EPM). The test was performed on two consecutive days. On the first day (T1), the animals received an i.p injection of saline (SAL) or L-Histidine (LH), 40 minutes before the test at dose of 200mg/kg and 500mg/kg. The following experimental groups were formed: SALSAL (n=10-11); SAL-LH (n=10-10); LH-SAL (n=10-13) and LH-LH ( n=10-15). Testing begun by placing the subjects on the central platform of the maze facing an open arm and test sessions were 5 min in duration. A similar procedure was carried out for animals in the retest condition (T2) (i.e prior maze experience). During the test we analyzed behavioural parameters that comprised both conventional and ethological measures. All sessions were video-recorded by a camera positioned above and ~50 ° to the maze. Conventional measures were the frequencies of total, open (OAE) and closed arm entries, time spent in open (OAT) and closed (CAT) and central parts (CT) of the maze, and its respectively percentage %OAT, %CAT and %TC. Ethological measures comprised frequency scores for rearing; head-dipping (Dip) and stretched-attend postures (SAP). No significant differences were found, at the 200mg/kg dose, in open arm entries (Kruskall-Wallis; P= 0,1537) and open arm time (Kruskall-Wallis; P=0,824;), and at 500mg/kg dose no significant differences were observed in OAE and OAT [F(1,48)= 43,56; 13,01, p< 0,05, respectively) between the Sal-Sal and LH-LH groups in T1, indicating that L-histidine had no anxiolytic effect. At 200mg/kg dose a decreased of OA entries was observed for the SAL-SAL (Wilcoxon; P=0,017823), SAL-LH (Wilcoxon; P=0,00021) and LH-SAL (Wilcoxon; P=0,007) groups and in the OA time only for the SAL-SAL (Wilcoxon, P=0,0166) and SAL-LH (Wilcoxon; P=0,0284) groups. At the highest dose the LH-Sal group reduced open arm time and entries ([F(1,48)= 13.01 and 43.56; p<0.05) on the second trial, indicating that acquisition and storage was not affected by LH. Further, the LH-LH group did not reduce exploration time of the open arms during re-exposure, in both days indicanting an inability to evoke memory. No alteration in the locomotor activity represented by CAE was observed (p>0,05). Regarding a ethological behaviors, in both doses, the frequencies of Dipping was decreased (p<0,05) in the reexposure. In both treatment, the LH-LH group did not reduce the ratio of SAP during the retest, indicative of failure to evoke memory (p<0,05). Therefore, our results indicating that LH did not show anxiolitic effects but induces a state-dependent memory retrieval deficit in mice / O presente trabalho teve como objetivo verificar o efeito da L-Histidina sobre a ansiedade e a evocação da memória em camundongos reexpostos ao labirinto em Cruz Elevado (LCE). O teste foi realizado em dois dias consecutivos. No primeiro dia (T1) os animais receberam injeção i.p. de salina (SAL) ou L-Histidina (LH) (nas doses de 500mg/kg e 200mg/kg) 40 minutos antes da realização do teste, de acordo com os seguintes grupos experimentais: SAL-SAL (n=10-11); SAL-LH (n=10-10); LHSAL (n=10-13); LH-LH (n=10-15). Em T1 os animais foram colocados no centro do LCE com a face voltada para o braço aberto e tiveram cinco minutos para livre exploração. Em T2 os animais foram reexpostos ao LCE sob as mesmas condições experimentais acima descritas. Todas as sessões de teste foram gravadas por uma câmera posicionada acima e a aproximadamente 50° do labirinto. Durante o teste foram analisadas medidas espaços temporais (número de entradas nos braços abertos (EBA) e fechados (EBF); tempo gasto nos braços abertos (TBA), fechados (TBF) e no centro (TC), e suas respectivas porcentagens - %TBA, %TBF e %TC). As medidas etológicas compreenderam as freqüências de esticar, mergulho e levantar. Não houve diferenças significativas entre os grupos SAL-SAL e LH-LH na dose de 200mg/kg nas EBA (Kruskal-Wallis; p= 0,1537) e TBA (Kruska-Wallis; p= 0,824) e na dose 500mg/kg, também, não houve diferença significativa nas EBA e TBA (F3, 48= 1.39; p>0,05) e TBA (F3,48=1,37; p>0,05) observada entre os grupos Sal-Sal e LH-LH em T1, indicando que a LH não apresentou efeito ansiolítico nas doses estudadas. Na dose de 200mg/kg ocorreu uma diminuição das EBA para os grupos SAL-SAL (Wilcoxon; P= 0,017823), SAL-LH (Wilcoxon; P= 0,00021) e LH-SAL (Wilcoxon; P= 0,007) e no TBA somente para os grupos SAL-SAL (Wilcoxon; P= 0,0166) e SAL-LH (Wilcoxon; P= 0,0284). Na maior dose foi observado que o grupo LH-SAL reduziu as EBA e TBA [(F(1.48) = 13.01 e 43.56; p < 0.05, respectivamente] em T2, indicando que a aquisição e o armazenamento da memória não foram afetados pela LH. Além disso, o grupo LH-LH não reduziu as EBA e o TBA (p>0.05), durante a reexposição, em ambos os tratamentos propostos. Todos os resultados acima descritos foram observados sem alterações na atividade locomotora representada pelas EBF (p>0,05). A análise dos comportamentos etológicos revelou que em ambas as doses, a freqüência de mergulhar diminuiu durante a reexposição (p< 0,05). E em ambos os tratamentos, o grupo LH-LH não reduziu a freqüência de esticar (p< 0,05) indicando um déficit para evocar a memória. Nossos, resultados indicam que a LH não apresenta efeito ansiolítico mas induz déficit estado dependente na evocação da memória em camundongos

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:18:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4093.pdf: 1119616 bytes, checksum: e2ff33f63d45e943c166e8047c606c07 (MD5) Previous issue date: 2012-01-27 / Universidade Federal de Minas Gerais / This study investigated the role of H1 amygdala receptors in state-dependent memory deficits induced by L-histidine (LH).To address this question, we investigated the effects of H1 antagonist chlorpheniramine (CPA) microinjected into the amygdala on anxiety and emotional memory retrieval in mice submitted to the EPM. Experimental subjects were 117 adult male Swiss mice weighing 25-32g at testing. Tests using an elevated plus-maze (EPM) were performed on two consecutive days: Trial 1 (T1) and Trial 2 (T2). Before each trial, mice were intraperitoneally (IP) injected with LH (500mg/kg), a histaminergic precursor. Two hours later, they were microinjected with chlorpheniramine (CPA; 0.016, 0.052, or 0.16 nmol/ 0.1 &#956;l), or saline (SAL) into the amygdala, and five minutes later reexposed to the EPM. For each CPA dose administered, the animals were randomly assigned to four groups based on drug treatment: control (i.p injection and i.a SAL), LH-SAL (i.p injection LH and i.a SAL), SAL-CPA (i.p injection SAL and i.a CPA) and LH-CPA (i.p injection of LH and i.a CPA). The data were analyzed using two-way analysis of variance (ANOVA) and Fisher LSD tests. IP injection of LH and microinjection of CPA into the amygdala did not induce significant T1 differences between groups for percentages of open arm entries (%OAE) or open arm time (%OAT) (ANOVA, p > 0.05), which indicated that the drugs did not affect anxiety. In T2, the control group and the groups that received IP injection of SAL and an 0.016- or 0.052-mnol infusion of CPA (SAL-CPA) demonstrated significant reductions in open arm exploration (%OAE and %OAT) (p < 0.05), suggesting a retrieval of aversive information concerning the open arms. Importantly, the LH groups that received an injection of SAL (LH-SAL) or CPA (LH-CPA) did not exhibit decreased open arm activity; no significant differences in %OAE and %OAT (p > 0.05) were observed between T1 and T2, suggesting that the LH-induced deficit in emotional memory retrieval was not reversed by CPA injection. Furthermore, animals that received IP injections of SAL and 0.16 nmol infusion of CPA (SAL-CPA) did not exhibit decreased open arm exploration in T2 compared to T1 (p > 0.05). No significant changes were observed in the number of enclosed arm entries (EAE), an EPM index of general exploratory activity. Taken together, these results suggest that the H1 receptors in the amygdala are not implicated in anxiety-like behaviors but are involved in emotional memory deficits induced by the T1/T2 EPM protocol in mice. / O objetivo do presente estudo foi investigar o papel dos receptores histaminérgicos H1 sobre o déficit de evocação da memória emocional induzido pela Lhistidina. Para essa investigação, foi verificado o efeito da Clorfeniramina (CPA), antagonista H1, administrada na amídala, sobre a ansiedade e a evocação da memória emocional em camundongos submetidos ao labirinto em cruz elevado (LCE). Foram utilizados 117 camundongos machos da cepa Suíço-Albino, pesando entre 25 e 32 g. O teste comportamental foi realizado em dois dias consecutivos: teste 1 (T1) e teste 2 (T2). Em ambos os dias, as drogas foram administradas pré-teste. Os animais receberam injeção intraperitoneal (i.p) de Lhistidina (LH), precursor histaminérgico, na dose de 500mg/kg, e duas horas depois receberam injeções na amídala (i.a) de SAL ou CPA, nas doses de 0,016nmol/0,1 &#956;l; 0,052nmol/0,1&#956;l e 0,16 nmol /0,1&#956;l. Após cinco minutos da injeção central os animais foram expostos ao LCE. Para cada dose de CPA administrada os animais foram divididos aleatoriamente em 4 grupos experimentais de acordo com o tratamento farmacológico: controle (injeção i.p SAL e i.a SAL); LH-SAL (injeção i.p LH e i.a SAL); SAL-CPA (injeção i.p SAL e i.a CPA); LH-CPA (injeção i.p LH e i.a CPA). Os dados foram analisados usando a ANOVA de duas vias e o teste post hoc de Fisher LSD. A injeção i.p de LH e a infusão de CPA não induziram diferenças significativas entre os grupos em T1 para as medidas de ansiedade (%entradas nos braços abertos, %EBA; % tempo gasto nos braços abertos, %TBA), nas diferentes doses de CPA utilizadas (ANOVA, p > 0.05), indicando que as drogas não induziram efeitos nas medidas de ansiedade. Em T2 houve uma redução significativa na exploração dos braços abertos (%EBA e %TBA) em relação a T1, para os grupos controle e SAL-CPA nas doses de CPA de 0,016 nmol e 0,052 nmo/0,1 &#956;l (p < 0,05), sugerindo uma evocação da aprendizagem aversiva relacionada aos braços abertos. Os grupos LH que receberam infusão de SAL (LH-SAL) ou CPA (LH-CPA) não diminuíram significativamente as %EBA e %TBA (ANOVA, p > 0,05) nas três doses de CPA. Adicionalmete, na maior dose de CPA (0,16 nmol/0,1 &#956;l), apenas o grupo controle diminuiu as %EBA e %TBA (p < 0,05) em T2. Não houve mudanças significativas nas entradas dos braços fechados (EBF) (ANOVA, p > 0,05), medida representativa da atividade locomotora dos animais. Nossos resultados sugerem que a L-histidina e os receptores H1 presentes na amídala não participam dos estados de ansiedade, mas estão envolvidos no comprometimento da memória emocional em camundongos reexpostos ao LCE.