Orientador: Marcia Nasser Lopes / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Banca: André Luiz Meleiro Porto / Resumo: Este trabalho teve como principal objetivo a obtenção de substâncias bioativas produzidas pelo fungo endofítico C80, pertencente à família Phaeosphaeriaceae, isolado da alga marinha Bostrychia radicans. O crescimento do endófito em escala ampliada foi realizado em meio sólido de arroz, modo estático e temperatura ambiente por 28 dias. O extrato em AcOEt produzido a partir deste cultivo foi fracionado através de técnicas cromatográficas, levando ao isolamento de seis substâncias: 7-hidroxi-3-(1-hidroxietil)-5-metoxi-3,4-dimetilisobenzofuran-1(3H)-ona (1), 3,7-dihidroxi-5-metoxi-3,4-dimetilisobenzofuran-1(3H)-ona (2), 7-hidroxi-3-(1,2-dihidroxietil)-5-metoxi-3,4-dimetilisobenzofuran-1(3H)-ona (3 e 4), 4,8-dihidroxi-6-metoxi-4,5-dimetil-3-metilenoisocroman-1-ona (5) e 8-hidroxi-6-metoxi-4,5-dimetil-3-metilenoisocroman-1-ona (6). Estas substâncias foram identificadas por análises espectroscópicas e espectrométricas como sendo policetídeos aromáticos, e então encaminhadas para ensaio citotóxico. Visando a mudança na produção metabólica do fungo, assim como na atividade biológica dos extratos brutos, foram realizados estudos da influência da composição do meio de cultura e do tempo de cultivo. Para a variação de composição, foram utilizados meios comerciais (CBD, Malte, Nutriente e arroz) e meios comerciais modificados com nitrato de amônio ou água do mar. Nenhuma alteração foi observada no perfil cromatográfico e nem na atividade citotóxica dos extratos. A variação do tempo de cultivo foi feita em meio sólido de arroz, com extrações em 10, 20, 30 e 40 dias de cultivo. Neste intervalo de tempo monitorado, a proporção dos metabólitos mudou consideravelmente, uma vez que os compostos majoritários no extrato de 10 dias estavam praticamente ausentes em 40 dias / Abstract: The aim of this study was to obtain bioactive compounds produced by the endophytic fungus C80, belonging to the family Phaeosphaeriaceae, isolated from the marine algae Bostrychia radicans. This endophyte was cultivated in rice solid medium (large scale) in static mode at room temperature for 28 days. After addition of ethyl acetate, broth and mycelia were separated by filtration and the solvent was removed under vacuum to furnish the crude extract. The ethyl acetate extract was fractionated by using different chromatographic techniques resulting in the isolation of six compounds: 7-hydroxy-3-(1-hydroxyethyl)-5-methoxy-3,4-dimethyl-isobenzofuran-1(3H)-one (1), 3,7-dyhydroxy-5-methoxy-3,4-dimethylisobenzofuran-1(3H)-one (2), 7-hydroxy-3-(1,2-dihydroxyethyl)-5-methoxy-3,4-dimethylisobenzo-furan-1(3H)-one (3 e 4), 4,8-dihydroxy-6-methoxy-4,5-dimethyl-3-methyleneiso-chroman-1-one(5) e 8-hydroxy-6-methoxy-4,5-dimethyl-3-methyleneisochroman-1-one (6), which were identified as aromatic polyketides by using spectroscopic and spectrometric analysis and submitted to cytotoxicity assay. In addition, C80 was cultivated in different culture media at different periods of time to evaluate its chemical diversity and metabolites production. The cultures were undertaken using PDB, Malt, Nutrient and Rice media with or without the addition of ammonium nitrate or sea water. These procedures didn't change the metabolic production and cytotoxicity. The role of time was undertaken only for rice media at 10, 20, 30 and 40 days of incubation. In this time the proportion of the metabolites has changed considerably, since the major compounds in the extract of 10 days, were practically absent in 40 days / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Ciências Animais, 2014. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2014-10-08T13:36:15Z No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-16T19:18:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T19:18:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Objetivou-se com esse trabalho avaliar o efeito in vitro de metabólitos secundários de plantas no volume de metano (VCH4), degradabilidade in vitro da matéria seca (DIVMS), volume de metano por grama de matéria seca degradada (VCH4/DIVMS), concentração de nitrogênio amoniacal (N-NH3) e ácidos graxos voláteis (AGV). Foram realizados três experimentos, conduzidos no Laboratório Química Analítica de Plantas (LQAP) da Embrapa Cerrados. O meio de cultura foi preparado seguindo-se as recomendações de Theodorou et al. (1994). A mensuração dos gases produzidos foi realizada às 6 e às 24 horas após o início dos experimentos, pelo deslocamento de água medido pelo aparato de vasos comunicantes. DIVMS foi determinada às 24 h. Amostras de Brachiaria brizantha cv. Marandu e concentrado foram pesadas na relação 80:20 em sacos F57 da Ankom ® e foram usadas como tratamento controle (TC) para os experimentos 1 e 2. Para o experimento 3, somente amostras de B. brizantha cv. Marandu foram usadas como controle (TC). O delineamento foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e três repetições e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. No experimento 1 foi avaliado duas doses (0,3 e 0,6 mL/L de solução) de óleo essencial de alho (A3, A6), canela (C3, C6) e orégano (O3, O6) e duas doses (300 e 600 mg/L de solução) de timol (T3, T6) e resveratrol (R3, R6) em pó. Para VCH4 todos os tratamentos diferiram (P<0,05) de TC, reduzindo o volume produzido. R6 não diferiu (P>0,05) de TC para DIVMS, sendo que todos os outros tratamentos aumentaram (P<0,05) DIVMS. A relação VCH4/DIVMS foi reduzida (P<0,05) com a adição dos metabólitos. A concentração de N-NH3 não foi alterada por nenhum dos metabólitos avaliados. As concentrações dos ácidos acético, propiônico e soma AGV não foram alteradas pelo tratamento R3, tendo todos os outros reduzido (P<0,05) a concentração de ambos os ácidos, o que evidencia o efeito antimicrobiano dos óleos essenciais sobre os micro-organismos ruminais. No experimento 2 foram avaliadas as combinações entre 300 e 600 mg/L de resveratrol com 0,6 mL/L dos óleos essenciais de alho (R3A6, R6A6), canela (R3C6, R6C6) e orégano (R3O6, R6O6), e 600 mg/L de timol (R3T6, R6T6). Também foi avaliada a dose de 0,6 mL/L de todos os metabólitos sem associação com resveratrol (A6, C6, O6, T6, R6) e a menor dose de resveratrol (R3). O VCH4 e a DIVMS reduziram (P<0,05) em relação à TC para todos os tratamentos combinados ou não com o resveratrol, mas não houve efeito (P>0,05) para os tratamentos R3 e R6. O VCH4/DIVMS também foi reduzido (P<0,05) em relação à TC para todos os tratamentos. A concentração de N-NH3 foi reduzida (P<0,05) para os tratamentos R6, R6A6 e R6T6. Os tratamentos A6, C6, O6 e R3C6 aumentaram (P<0,05) a concentração de N-NH3. Não houve efeito, em relação à TC, na concentração de acetato, butirato e soma de AGV para os tratamentos combinados com o resveratrol, à exceção de R3C6, indicando que tais aditivos podem ser usados para melhorar a eficiência do uso da dieta de ruminantes com efeito tóxico sobre os micro-organismos metanogênicos. O experimento 3 avaliou o efeito de extratos de plantas do cerrado, barbatimão e sucupira, nos mesmo parâmetros citados acima. Amostras de Brachiaria brizantha foram usadas como controle (Br). As doses avaliadas foram 100, 200, 300, 400 e 600 mg/L de solução para barbatimão (B100, B200, B300, B400 e B600) e para sucupira (S100, S200, S300, S400 e S600). Para VCH4, B300, B600, S300 e S400 mg/L, diferiram (P<0,05) de Br. Nenhum tratamento teve influência na DIVMS. A relação VCH4/DIVMS aumentou (P<0,05) em 33,8% para S300. A concentração de N-NH3 aumentou (P<0,05) para S400 e S600 Em relação a concentração do AGV, B100 e S300 mg/L reduziram (P<0,05) a concentração de ácido acético, porém S400 aumentou (P<0,05) em 21% a concentração desse ácido. Os tratamentos não diferiram estatisticamente de Br para o ácido propiônico. Os tratamentos reduziram (P<0,05) a concentração de ácido butírico entre 37,6 e 76,4%. A soma de AGV também reduziu significativamente (P<0,05) para todos os tratamentos com extrato de barbatimão e sucupira, a exceção do tratamento S400. Os tratamentos com extrato de barbatimão provocaram queda na produção de CH4, porém reduziram a SAGV, o que mostra que tal extrato, nas doses avaliadas, não é recomendado para melhorar a eficiência de uso da dieta por bovinos. Os tratamentos com extrato de sucupira apresentaram variação nos resultados dos parâmetros avaliados nesse experimento. Mais estudos devem ser realizados para elucidar os efeitos desse extrato sobre os parâmetros de fermentação ruminal. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to evaluate in vitro effect of plant secondary metabolites on the volume of methane (VCH4), in vitro dry matter degradability (IVDMD), volume of methane per gram of degraded dry matter (VCH4/IVDMD), ammonia concentration (N-NH3) and volatile fatty acids (VFA). The incubation medium was prepared following the recommendations of Theodorou et al. (1994). In vitro gas production was performed by the use of a simple apparatus for measuring gas production through communicating vessels and methane concentration was determined by gas chromatography. IVDMD were determined at 24 h. Samples of Brachiaria brizantha and concentrate were weighed in the ratio 80:20 into Ankom® filter bags (F57) and were used as the control treatment (TC) for experiments 1 and 2. For experiment 3 only B. brizantha was used as control (Br). In Experiment 1 it was evaluated two doses (0.3 and 0.6 mL/L solution) of cinnamon (C3, C6), garlic (A3, A6) and oregano (O3, O6) essential oils and two doses (300 and 600 mg/L solution) of, thymol (T3, T6) and resveratrol (R3, R6) powder. All treatments differed (P<0.05) from TC for VCH4, reducing the volume produced. R6 did not differ (P>0.05) for IVDMD compared to TC, but all the others treatments increased (P<0.05) IVDMD. The VCH4/IVDMD ratio was reduced (P<0.05) with the addition of the secondary metabolites. N-NH3 concentration was not altered by any of the metabolites evaluated. The concentrations of acetic, propionic and total VFA acids were not altered by treatment R3, while all others reduced (P<0.05) the concentration of both acids, which shows the antimicrobial effect of essential oils on rumen microorganisms. In experiment 2, the combinations between 300 and 600 mg/L of resveratrol with 0.6 mL/L of cinnamon (R3C6, R6C6), garlic (R3A6, R6A6) and oregano (R3O6, R6O6) essential oils and with 600 mg/L thymol (R3T6, R6T6) were evaluated. 0.6 mL/L of all metabolites without association with resveratrol (A6, C6, O6, T6, R6) and the lowest dose of resveratrol (R3) were also evaluated. The VCH4 and IVDMD decreased (P<0.05) compared to TC for all treatments combined or not with resveratrol, but there was no effect (P>0.05) for R3 and R6 treatments The VCH4/IVDMD was also reduced (P<0.05) compared to TC for all treatments. The N-NH3 concentration was reduced (P<0.05) for R6, R6A6 and R6T6 treatments. The C6, A6, O6 and R3C6 treatments increased (P<0.05) the concentration of N-NH3. Compared to TC, there was no effect in acetate, butyrate and the sum of VFA concentrations combined with resveratrol, with the exception of R3C6 treatments, indicating that such additives can be used to improve efficiency of feed utilization by ruminants, with toxic effect on the methanogenic microorganisms. Experiment 3 tested doses were 100, 200, 300, 400 and 600 mg/L of solution for barbatimão (B100, B200, B300, B400 and B600) and sucupira (S100, S200, S300, S400 and S600). Treatments B300, B600, S300 and S400 mg/L differed (P<0.05) from Br to VCH4. IVDMD was not affected. The VCH4/DIVMS ratio increased (P<0.05) in 33.8% for S300. The N-NH3 concentration increased (P<0.05) to S400 and S600. S300 and B100 reduced (P<0.05) acetic concentration, however S400 increased (P<0.05) in 21% the concentration of this acid. The treatments did not differ statistically from Br to propionic acid. The treatments reduced (P<0.05) butyric acid concentration from 37.6 to 76.4%. The sum of VFA also reduced (P<0.05) for both barbatimão and sucupira treatments, except to S400 treatment. Treatments with barbatimão extract caused decreased in CH4 production, but reduced SVFA, which shows that this extract in the doses evaluated, it is not recommended to improve the efficiency of use of the diet for cattle. Treatment with extract sucupira showed variation in the results of the parameters evaluated in this experiment. More studies should be conducted to elucidate the effects of this extract on ruminal fermentation.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2015. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-04-27T18:35:44Z No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-05-04T12:11:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-04T12:11:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) é uma espécie extremamente polífaga, se alimenta das mais diferentes culturas de interesse econômico e tem grande adaptabilidade às várias condições climáticas consideradas uma praga de importância. Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria cosmopolita que expressa diversas proteínas durante seus estágios de crescimento que possuem atividade entomopatogênica, podendo atuar como importante agente de controle biológico, além de ser capaz de colonizar o interior das plantas promovendo o seu crescimento. Com a necessidade de se conhecer cada vez mais e explorar as potencialidades deste microrganismo o estudo objetivou selecionar 100 estirpes de Bacillus thuringiensis com toxicidade para Helicoverpa armigera e potencial para promoção de crescimento vegetal. Das estirpes avaliadas 23 apresentaram 100% de mortalidade para H. armigera, sendo quinze pertencentes às subsp. kurstaki, aizawai, tolworthi, fokuokaensis, sotto, morrisoni, thuringiensis e oito não sorotipadas. As estirpes apresentam perfil proteíco de 130 e 65 kDa, sendo que algumas apresentaram apenas uma das proteínas e fragmentos de DNA de tamanho esperado para a detecção dos genes cry1 e cry2. Na detecção da capacidade de promoção de crescimento in vitro, nenhuma estirpe apresentou a capacidade de produção de sideróforos, solubilização de fosfatos e fixação biológica de nitrogênio. Na produção de AIA todas as estirpes foram positivas e a quantidade variou de 1,17 μg mL-1 (estirpe S93) a 7,44 μg mL-1 (estirpe S1983). Das 100 estirpes analisadas 45 apresentaram amplicons esperados para todos os genes avaliados, sendo que 71 estirpes apresentaram amplicons de tamanhos esperados para o gene fosfatase ácida, 57 foram positivos para os genes sideróforos. Os genes envolvidos nas rotas de biossíntese do hormônio AIA se mostraram mais frequentes em estirpes de Bt, sendo que das estirpes analisadas 91 foram positivos para a presença do gene ipdC, 97 para o genes iam1 e 93 para o gene iam2. B. thuringiensis pode ser utilizado no controle de H. armigera e possui potencial como inoculante para a promoção de crescimento vegetal, abrindo novas perspectivas para o uso agronômico. / Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) is an extremely polyphagous species, feeding from different types of crops with economic importance and has great adaptability to various climatic conditions, considered an important pest. Bacillus thuringiensis is a cosmopolitan bacteria that express different proteins during their growth stages with entomopathogenic activity, and may act as an important biological control agent, besides being capable to colonize the interior of plants, promoting its growth. To know more and explore the potentials of this microorganism, the aimed of this work to select 100 strain of Bacillus thuringiensis wich toxicity to Helicoverpa armigera and potential for plant growth promotion. 23 strains showed 100% the mortality against H. armigera, of which fifteen belonged to subsp. kurstaki, aizawai, tolworthi, fokuokaensis, sotto, morrisoni, thuringiensis and eight without serotype. Some strains exhibited the profile of 130 and 65kDa, other showed just one of the proteins and the amplicons with the expected size of cry1 and cry2 gene. In vitro detection of growth promotion capability, showed that no strain had the siderophore production capability, phosphate solubiliation and biological fixation of nitrogen. All strains tested were capable of produce IAA, and the amount varied from 1,17 μg mL-1 (S93 strain) to 7,44 μg mL-1 (1983 strain). 45 of the 100 analyzed strains showed the expected amplicons for all the studied genes, 71 strains showed the expected amplicon size for the acid phosphatase gene, 57 were positive for siderophore gene. The genes involved in the biosynthesis of IAA hormone were more frequents in Bt strains, 91 strains were positive for the presence of ipdC gene, 97 were positive for iam1 gene, and 93 for iam2 gene. B thuringiensis can be used in biological control against H. armigera and has a great potencial to promote plant growth, creating new perspectives for agronomic use.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-12T13:58:24Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Graciely Gomes Corrêa.pdf: 2438516 bytes, checksum: a95852e5811a7fda5cb9187fdec3ccc8 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T13:58:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Graciely Gomes Corrêa.pdf: 2438516 bytes, checksum: a95852e5811a7fda5cb9187fdec3ccc8 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / CNPQ; CAPES / O bioma Caatinga é o principal ecossistema da Região Nordeste que apresenta características peculiares devido ao seu clima quente e seco, típico do semi-árido. As actinobactérias de regiões de condições extremas são importantes em decorrência dos mecanismos de adaptação que estimulam a produção de novos compostos com potencial biotecnológico. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi isolar e identificar actinobactérias da rizosfera da Caatinga, além de determinar a atividade antimicrobiana. O isolamento dos micro-organismos rizosféricos foi realizado pela técnica de diluição seriada, utilizando diferentes temperaturas e meios de cultura. Foram realizados testes antimicrobianos para seleção de actinobactérias com atividade para bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos. No ensaio primário em blocos de gelose, foi selecionada a actinobactéria que apresentou melhor resultado no ensaio primário e, em seguida, realizado o ensaio secundário (fermentação), utilizando os meios MPE, M1, ISP3 e Ciclamicina. A partir da fermentação da actinobactéria selecionada, no melhor meio de produção e tempo de fermentação, foram realizados experimentos de extração do princípio bioativo da biomassa e do líquido metabólico, em diferentes pHs. Em seguida, foi determinada a concentração mínima inibitória (CMI) do extrato bruto, da biomassa e do líquido metabólico. A identificação das actinobactérias foi realizada pela técnica do microcultivo e análise molecular. Foram isoladas 96 actinobactérias, das quais 68% (65) foram oriundas da temperatura de 37° C e 46% (48) provenientes do meio de cultura HV-ágar. No ensaio em bloco de gelose, 55% (53) dos isolados apresentaram atividade contra pelo menos um dos micro-organismos testados. Após este ensaio, a actinobactéria 74 (HT 1A+17) foi selecionada para os testes secundários por apresentar excelentes halos de inibição frente às bactérias Gram positivas. Esta linhagem foi identificada como Sreptomyces sp. através de testes moleculares e verificou-se que o meio MPE foi o melhor para a produção do biocomposto em 72 horas de fermentação, os melhores solventes foram acetona e hexano, ambos em pH 7,0, para extração da biomassa e do líquido metabólico, respectivamente. O isolado 74 (HT 1A+17) apresentou resultados promissores na produção do composto bioativo e estudos mais detalhados deverão ser realizados para melhor caracterização.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:02:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1650_1.pdf: 2864470 bytes, checksum: ead5bc5b55399ccb1759ea9a797634be (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A bananeira (Musa spp.) está presente em todas as regiões tropicais e subtropicais, sendo a banana a fruta mais conhecida e cultivada. No Brasil a bananicultura é atividade de importância econômica e social. O fungo endofítico habita o interior dos tecidos aéreos do hospedeiro, pelo menos durante uma fase do seu ciclo de vida, desempenhando variadas e estreitas relações ecológicas, sem demonstrar sintomas visíveis. Com o objetivo de isolar, identificar e avaliar o potencial antagônico dos fungos endofíticos de folhas de bananeiras contra os fitopatógenos Cladosporium musae, Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Colletotrichum musae, Deightoniella torulosa, Pseudocercospora musae e Mycosphaerella musicola, através de testes in vitro, foram realizadas quatro coletas seguindo-se de isolamento e identificação de fungos endofíticos de folhas sadias (nova, intermediária e velha) de quatro cultivares de bananeira ( Pacovan , Nanicão , Prata-Anã e Maçã ), do município de Belo Jardim/Pernambuco, no período chuvoso e de estiagem. No total, foram identificadas 40 espécies de fungos endofíticos originadas de 751 colônias a partir de 1728 discos foliares. Apresentaram maior frequência de ocorrência em relação ao número de unidades formadoras de colônias: Acremonium polychoroma, Alternaria alternata, Cladosporium cladosporioides, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum. musae, Deightoniella torulosa, Fusarium solani, Nigrospora oryzae, Nodulisporium gregarium, Paecilomyces lilacinus, Pestalotiopsis maculans, Guignardia musae. A maior frequência de colonização por fungos endofíticos foi verificada em folhas velhas, no cultivar Pacovan . Maiores índices de frequência foram registrados no período chuvoso. Nigrospora oryzae, Pestalotiopsis maculans e Nodulisporium gregarium apresentaram mais eficiência nos testes de antagonismo in vitro contra os fitopatógenos testados

Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Resumo: O gênero Croton, um dos maiores da família Euphorbiaceae, é conhecido pela sua riqueza de metabólitos secundários de origem terpênica, como os clerodânicos. No entanto, estudos recentes apontam para a presença de uma classe de compostos que vem ganhando visibilidade e interesse dos cientistas e de indústrias farmacêuticas, os peptídeos cíclicos. Os peptídeos naturais, especialmente aqueles de natureza cíclica e de baixo peso molecular (orbitídeos), constituem uma classe de moléculas promissoras para a identificação de novos hits e leads de fármacos. Nessa perspectiva, esse trabalho trata do estudo de duas espécies da Mata Atlântica: Croton floribundus e Croton campanulatus na busca por peptídeos cíclicos, mais precisamente por orbitídeos. Assim sendo, inicialmente investigou-se em pequena escala folhas e caules de ambas as espécies, raiz da espécie C. floribundus e látex da espécie C. campanulatus e após essas análises preliminares selecionou-se a raiz da de C. floribundus e o látex de C. campanulatus para dar continuidade com os estudos. O processo de extração das substâncias de interesse da raiz foi feito por maceração hidroetanólica e do látex, por partição líquido-líquido com acetato de etila. Em seguida esses extratos foram submetidos à cromatografia em coluna, empregando octadecilsilano (C18) como fase estacionária para a obtenção das frações contendo peptídeos. O processo de purificação dessas frações foi feito por HPLC em modo analítico e preparativo que permitiu o is... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Croton genus, the largest of the Euphorbiaceae family, is known for its richness of secondary metabolites of terpenic origin, such as the clerodanic ones. However, recent studies point to the presence of a class of compounds that has gained visibility and interest from scientists and pharmaceutical industries, the cyclic peptides. Natural peptides, especially those of a cyclic and low molecular weight nature (orbitides), represent a class of promising molecules for identification of hits and leads in drug discovery. In this perspective, this research deals with the study of two species from the Atlantic Forest: Croton floribundus and Croton campanulatus in the search for cyclic peptides, more precisely for orbitides. Thus, leaves and stems of both species, root from C. floribundus and latex from C. campanulatus were investigated in a small scale, and after these preliminary analyzes, the C. froribundus’ root and the latex from C. campanulatus were selected to continue the studies. The extraction process of the root's compounds of interest was performed by hydroethanolic maceration, while the latex extraction consisted by liquid-liquid partition with ethyl acetate. Then, these extracts were submitted to a chromatographic column using octadecylsilane (C18) as a stationary phase to obtain fractions containing peptides. The fractions purification process was carried out by analytical and preparative HPLC, which allowed the isolation of 2 compounds from C. campanulatus and 4 c... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Lucinéia Dos Santos / Resumo: A geração de resíduos nas diversas atividades humanas tem sido tema central em discussões sobre sustentabilidade ambiental, com destaque para os resíduos agroindustriais. Sabe-se que a partir de tecnologias verdes, os resíduos de biomassa apresentam grande potencial para impulsionar a produção sustentável e gerar produtos químicos de alto valor agregado. O Cerrado é considerado o bioma mais ameaçado no Brasil e no mundo, devido à expansão das fronteiras agrícolas com subsequentes perdas de espécies vegetais nativas. Entretanto, ainda hospeda 4600 espécies endêmicas, que merecem ser preservadas, como Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), mais conhecido como pequizeiro. Dentro desse contexto, a realização de estudos de prospecção química e farmacológica do resíduo da polpa do pequi, visando o desenvolvimento de fitoprodutos, abre a possibilidade de uso dessa matéria-prima na fabricação de produtos de alto valor agregado, permitindo que sua valorização econômica resulte no equilíbrio entre sua produção agrícola e a proteção do meio ambiente. Diante do que foi exposto, este trabalho teve por objetivo desenvolver metodologias verdes para identificar os metabólitos secundários presentes no extrato hidroetanólico da torta (resíduo) da polpa do pequi, a partir do resíduo obtido no processo de extração de seu óleo, e também no fitocosmético à base deste extrato. Ademais, avaliar a toxicidade in vitro deste extrato e do fitocosmético. Em relação à toxicidade in vitro, o extrato n... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The generation of waste in the various human activities has been the central theme in discussions on environmental sustainability, with emphasis on agroindustrial waste. It is known that from green technologies, biomass residues have great potential to boost sustainable production and generate high added value chemicals. The Cerrado is considered the most threatened biome in Brazil and the world, due to the expansion of agricultural borders with subsequent losses of native plant species. However, it still hosts 4600 endemic species that deserve to be preserved, such as Caryocar brasiliense Camb., better known as pequizeiro. In this context, the study of chemical and pharmacological prospecting of the pequi pulp residue, aiming at the development of plant products, opens the possibility of using this raw material in the manufacture of products with high added value, allowing that its economic appreciation results in the balance between the agricultural production and the environment protection. In view of the foregoing, this work aimed to develop green methodologies to identify the secondary metabolites present in the hydroethanolic extract of the pequi pulp residue, from the residue obtained in the extraction process of its oil, as well as in phytocosmetic with a base of this extract. In addition, to assess the in vitro toxicity level of this extract and of this phytocosmetic in order to confirm its safety. In relation to in vitro toxicity, the extract did not cause rupture o... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Giuseppina Pace Pereira Lima / Resumo: A família Bignoniaceae é constituída por espécies que estão espalhadas por diversos locais do globo terrestre, porém no Brasil é mais encontrada nas regiões de cerrado, Mata Atlântica e região Amazônica. Dentro dessa grande família, podemos destacar a Spathodea campanulata, uma espécie com característica peculiar, pois apresenta atividade inseticida e medicinal, dependendo do órgão vegetal utilizado. Atualmente indústrias e empresas de diversas áreas, desde alimentícias até agronegócios, vêm investindo em estudos para identificação e extração de compostos vegetais com bioatividade, uma vez que podem ser benéficos a saúde humana e menos agressivos ao meio ambiente quando comparados com os químicos sintéticos. Devido à atual demanda por estudos de espécies vegetais capazes de produzir compostos bioativos e as características da espécie Spathodea campanulata, o estudo teve como objetivo avaliar o potencial inseticida do néctar de Spathodea campanulata sobre os insetos Euschistus heros, Helicoverpa zea e Anticarsia gemmatalis. Também foram analisadas a capacidade antioxidante das flores, folhas e néctar da espécie, por meio de testes antioxidantes (ORAC, DPPH e FRAP) e quantificação de compostos fenólicos e carotenóides por HPLC. Os testes inseticidas demonstraram significativa atividade tóxica do néctar de S.campanulata sobre os insetos Euschistus heros (Fabr.), Helicoverpa zea (Boddie) e Anticarsia gemmatalis (Hübner). Posterior análise do néctar por SDS-PAGE e 2D-P... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The family Bignoniaceae consists of species that are spread several parts of globe, but in Brazil is most commonly found in areas of Cerrado, Atlantic Forest and Amazon. Within this big family we can highlight the Spathodea campanulata, a species with peculiar characteristic, it has insecticidal and medicinal activity, depending on the plant organ used. Nowadays industries and companies from different fields, they have been investing in studies for the identification and extraction of plant compounds with bioactivity, since they can be beneficial to human health and less harmful to the environment when compared to synthetic chemicals. Due to the present demand for studies of plant species capable of producing bioactive compounds and characteristics of Spathodea campanulata, the study aimed to evaluate the insecticidal potential of specie's nectar on Euschistus heros, Helicoverpa zea e Anticarsia gemmatalis. It also analyzed capacity antioxidant of flowers, leaves and nectar of species by antioxidant tests (ORAC, DPPH e FRAP) and quantification of phenolic compounds and carotenoids by HPLC. The insecticidal tests showed significant toxic activity of nectar on insects Euschistus heros (Fabr.), Helicoverpa zea (Boddie) and Anticarsia gemmatalis (Hübner). Later analysis of the nectar by SDS-PAGE and 2D-PAGE revealed a set of "spots" that can be proteins or even peptides responsible for insecticidal activity. In the oxidant tests, TBARS and Albumin degradation oxidative test, were... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientadora: Angela Regina Araujo / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Adriana Aparecida Lopes / Banca: Luiz Alberto Beraldo de Moraes / Resumo: Fungos são organismos que podem ser encontrados nos mais diversos habitats e constituem um dos maiores grupos sobre a Terra. Em particular, os fungos endofíticos associados a espécies vegetais, são excelentes produtores das mais diversas classes de metabólitos secundários, sendo uma fonte promissora e racional na obtenção de protótipos para os mais diversos usos terapêuticos. Os endófitos do gênero Xylaria pertencentes à família Xylareaceae, constituem um grupo de espécies que produzem substâncias que apresentam as mais diversas atividades biológicas como antitumorais, antibióticas, entre outros. Dentro deste contexto, neste trabalho avaliamos a produção de griseofulvina, um metabólito secundário produzido por Xylaria spp., e de utilização na terapêutica animal e humana. Também foi realizado o estudo químico e biológico de sete espécies diferentes de fungos endofíticos do gênero Xylaria. Estes foram cultivados em meios líquidos comerciais (MDB, Czapek, YM, EM e Nutrient) e sólidos (arroz e milho) para obtenção dos extratos brutos, totalizando 49 extratos. Cinco evidenciaram a produção de griseofulvina e foram submetidos a análises por RMN de 1H e CLAE-DAD para a detecção e quantificação desta substância, respectivamente. O fungo que apresentou maior produção de griseofulvina foi o Xylaria sp., codificado como PR-03 e cultivado em Czapek. Neste meio foi realizado o estudo de aplicação de estímulos, tais como agitação e luz, utilizando planejamento experimental visando a maximi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fungi are organisms that can be found in a diversit y of habitats and constitute one of the largest groups on Earth. In p articular, the endophytic fungi associated with plant species are excellent p roducers of several classes of secondary metabolites, as well a promising ratio nal source in obtaining prototypes for several therapeutic effects. Endophy tes of the genus Xylaria belong to Xylareaceae family, are a group of specie s that produce substances with potential biological activities, including ant itumoral, antibacterial, among others. In this context, this study evaluated the optimal condictions of griseofulvin-producing endophytic fungus from Xylaria spp., for application in animal and human therapy. It was als o conducted chemical and biological study of seven different species of endophytic fungi of the genus Xylaria . The fungal strain was cultivated in commercial li quid (Potato Dextrose Broth, Czapek, Yeast Medium, Malt Extract and Nutrient) and solid media forms (rice and corn) to obtain the crude ext racts (n= 49). Five samples showed griseofulvin production and were an alyzed by 1 H NMR and HPLC-DAD for the detection and quantification of th e substance, respectively. The fungus that showed higher product ion of griseofulvin was Xylaria sp., encoded as PR-03 and cultured in Czapek. In t his environment, the experiments design under light and shaker induc ed stimulus were performed in order to improve the production of the substance. It was observed a significant increase of production under both conditions. At the same time, all the extracts were submetted to bioas says for evaluation of antitumor, antifungal, and acetylcholinesterase act ivities. Two extracts that revealed promising chemical and biological profiles were subjected to chromatographic fractionation for isolation and ide ntification of substances. Two compounds had their structures determined or el... / Doutor

Orientadora: Angela Regina Araujo / Banca: Novaldo Borale / Banca: Geraldo Humberto Silva / Resumo: O fungo endofítico P. stromaticum isolado dos frutos maduros da espécie vegetal E. jambolana foi cultivado em escala ampliada no meio líquido de Malte por 28 dias a 25 oC no modo estático e, no meio sólido de milho tipo canjica por 21 dias a 25 oC no modo estático. Após 28 dias de crescimento no meio líquido, este foi submetido a sucessivas extrações com acetato de etila (AcOEt), que após evaporado forneceu o extrato bruto de Malte AcOEt. O meio sólido, após 21 dias de cultivo, foi extraído com metanol, seguido de filtração e evaporação fornecendo o extrato bruto metanólico. Este foi submetido à partição líquido/líquido com acetato de etila e água, sendo que a fração AcOEt foi evaporada fornecendo o extrato bruto AcOEt. Este foi particionado com acetonitrila e hexano, e após evaporação dos solventes forneceu os extratos acetonitrila (ACN) e hexânico do meio sólido. O extrato ACN do meio sólido passou por novas partições com acetonitrila e hexano, por apresentar ácidos graxos ainda, fornecendo o extrato bruto de milho NP (novas partições). O extrato bruto de Malte AcOEt, foi fracionado em coluna de bancada, sendo coletadas 11 frações (Fr-1 Ps Ma a Fr-11 Ps Ma). Já o extrato bruto de milho NP sofreu partição utilizando-se cartucho de C18, com base em seu cromatograma, resultando em 6 frações (Fr-1 Ps Milho a Fr-6 Ps Milho). Das 6 frações obtidas do extrato de milho NP, escolheu-se trabalhar com a primeira, a qual sofreu partição no CLAE-DAD preparativo, resultando em 8 frações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The endophytic fungus P. stromaticum isolated from the ripe fruits of the E. jambolana was cultivated in large scale in the malt liquid medium for 28 days at 25 oC in the static mode and in the solid medium of hominy corn for 21 days at 25 oC in static mode. After 28 days of growth in the liquid medium, it was made successive extractions with ethyl acetate (EtOAc). The organic layer was evaporated affording the crude extract of Malt EtOAc. The solid medium, after 21 days of cultivation, was extracted with methanol, followed by filtration and evaporation to give the crude methanolic extract. This was subjected to the liquid/liquid partition with EtOAc and H2O, being this EtOAc fraction evaporated giving the crude EtOAc extract. After that, the extract was partitioned with acetonitrile and hexane, and after the evaporation of the solvents provided the acetonitrile (ACN) and hexane extracts from the solid medium. The ACN extract of the solid medium was partitioned again with ACN and hexane, due the remaining fatty acid, providing the corn crude extract NP (new partitions). The crude extract of Malt EtOAct was fractionated in a chromatographic column, resulting in11 fractions (Fr-1 Ps Ma to Fr-11 Ps Ma). The crude extract of corn NP was fractionated by solid phase extraction in reverse phase (C18), based on its chromatogram, resulting in 6 fractions (Fr-1 Ps Corn to Fr-6 Ps Corn). Among the corn fractions collected, it was chosen the fraction Fr-1 Ps Corn to the chemical studies. This fraction was fractionated by preparative HPLC-DAD resulting in 8 fractions. The crude extract of Malt EtOAc and its fraction and the crude extract of corn NP, were submitted to the chemical evaluation by 1H NMR and biological against the phytopathogenic fungus Cladosporium sphaerospermum (and in the case of corn to C. cladosporioides as well). Besides, anticolinesterasic activity was made, the crude... / Mestre