Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_12057_Dissertação_Dalila Avila Silva.pdf: 1086948 bytes, checksum: 30b541bd3051003faada33f9146bf6e5 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / A Osteogênese Imperfeita (OI) é uma doença que ocorre devido à desordem generalizada do tecido conjuntivo causando principalmente fragilidade óssea. Essa desordem, na maioria das vezes, é causada por mutações nos genes produtores das cadeias do colágeno tipo I, COL1A1 ou COL1A2, embora mutações em novos genes envolvidos na via do metabolismo ósseo têm sido constantemente descobertas. Atualmente, existem 17 genes relacionados com esta doença. Um deles é o gene IFITM5, ainda pouco caracterizado na maioria das populações. Por possuir vários genes causadores de OI, o Next Generation Sequencing (NGS), uma técnica de sequenciamento em larga escala, tem sido amplamente utilizada. Contudo, as mutações identificadas por NGS precisam ser validadas para dar confiabilidade aos resultados. Assim, este trabalhou visou identificar mutações no gene IFITM5 e validar mutações identificadas por NGS nos genes COL1A1 e COL1A2 para caracterizar o padrão de mutações nestes genes em pacientes do Espírito Santo. Este estudo contou com uma amostra inicial de 31 pacientes que foram previamente analisados para outros genes. Desta amostra, 8 indivíduos que apresentaram resultados moleculares inconclusivos foram estudados para o gene IFITM5. Foi detectada a presença da mutação c.-14C>T em um paciente. Esta mutação ocorre na região 5-UTR do gene e é recorrente em várias populações do mundo. A validação de mutações foi realizada em 16 indivíduos que apresentaram alterações genéticas nos genes COL1A1 ou COL1A2 detectadas por NGS. Apenas uma das sequências identificadas por NGS não foi validada. Este estudo confirmou que mutações no gene COL1A1 e COL1A2 são encontradas, em aproximadamente 75% dos pacientes, enquanto que no gene IFITM5 são encontradas mutações em, aproximadamente, 3% dos pacientes com OI do Espírito Santo. Esses resultados poderão auxiliar no desenvolvimento de estratégias de diagnóstico molecular mais eficientes para esta doença.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:57:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9964_STEFANI GRACE DA SILVA MORAES.pdf: 1810074 bytes, checksum: cb58d55640e9d3d71136c5408507d4e7 (MD5) Previous issue date: 2018-02-20 / A cafeína é substância capaz de atuar sobre metabolismo lipídico, resultando em maior oxidação do tecido adiposo. Neste trabalho foi avaliado o uso da cafeína na alimentação do hibrido Tambacu (fêmea do Colossoma macropomum X macho do Piaractus mesopotamicus) e Tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) sobre o rendimento e composição da carcaça. Foram realizados dois experimentos no Instituto Federal de Ciência e Tecnologia do Espírito Santo-campus-Alegre, com duração de 35 dias cada. Ambos os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado (DIC), com quatro tratamentos T1=0,00; T2=0,16; T3=0,32 e T4=0,48g de cafeína/kg de ração e cinco repetições, com dez animais cada. Foram utilizadas dietas isoproteicas 32% de proteína bruta. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 20 unidades experimentais constituída por tanques redes de 1 m³, dotados de comedouros e tampas. Durante o período experimental, os peixes receberam ração três vezes ao dia (08 hs:00 min; 12hs:00 min; 16hs:00 min), sendo ofertado 2% da biomassa dos animais. As variáveis utilizadas para quantificar o efeito dessas substâncias foram: rendimento e composição química da carcaça. Durante o período experimental também foram analisadas as características físico-química da água. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a cafeína pode ser adicionada na ração para Tambacu e Tilápia do Nilo, nas doses de 0,14g/Kg de ração, por até 14 dias e 0,16g/Kg de ração, no período de 16 dias, respectivamente.

Submitted by carla santos (biblioteca.cp2.carla@bahiana.edu.br) on 2018-08-23T19:05:31Z No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) / Approved for entry into archive by JOELMA MAIA (ebmsp-bibliotecacp2@bahiana.edu.br) on 2018-08-24T14:27:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-24T14:27:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) Previous issue date: 2017-09-22 / Introdu????o: Estudo observacionais apontam que mulheres em uso de contraceptivo oral combinado (COC) apresentam triglicer??deos de jejum e lipemia p??s-prandial mais elevados do que as que n??o usam. Esses mesmos estudos levantam a hip??tese de que isso se deve a diminui????o da produ????o e a????o da lipase lipoprot??ica. Por consequ??ncia, aventa-se a hip??tese de que mulheres em uso de contraceptivo oral apresentem diminui????o da sensibilidade insul??nica, j?? que, a insulina ?? o horm??nio que estimula a atividade e produ????o da lipase lipoproteica. Objetivo: Testar hip??tese de que existe diferen??a entre a sensibilidade insul??nica de mulheres que utilizam e n??o utilizam COC, bem como verificar se existe associa????o entre os ??ndices do HOMA-IR e HOMA-?? e o perfil lip??dico de jejum dessas mulheres. M??todos: Ap??s o c??lculo amostral, foram inclu??das 44 mulheres divididas igualmente entre os grupos. Inclu??das mulheres, idade entre 19 e 30 anos, eutr??ficas, que utilizavam ou n??o utilizavam COC, com triglicer??deos de jejum abaixo de 150mg/dL e irregularmente ativas. Exclu??das mulheres com comprometimento hep??tico, pancre??tico ou renal, em uso de corticoides, hipolipemiante, anabolizantes ou suplementos alimentares, fumantes, com diagn??stico de hipo ou hipertieroid??smo ou s??ndrome do ov??rio polic??stico. A amostra foi dividida em dois grupos: grupo COC (GCOC) formado por mulheres em uso de COC e grupo sem COC (GSCOC) formado por mulheres que n??o utilizam nenhum m??todo contraceptivo a base de horm??nios. Ap??s jejum de 12h foram coletados 5ml de sangue para dosagem do perfil lip??dico, da insulina e da glicemia. Posteriormente calculado com esses valores o HOMA-IR e HOMA-??. Estat??stica: Utilizado o Mann-Withney bidirecional para compara????o dos valores do HOMA-IR e HOMA-?? entre os grupos. Utilizado o teste de Sperman para verificar a correla????o entre as vari??veis do perfil lip??dico e o HOMA-IR e HOMA-??. Posteriormente foi realizada a an??lise multivariada, entrando no programa as vari??veis que apresentaram correla????o positiva com o HOMA-IR e HOMA-??. Resultados: A m??dia de idade, ??ndice de massa corporal, glicemia, insulina respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 23??1,3 vs 23??2,0 anos; 22??1,4 vs 22??1,0 kg/m2; 86??8,8 vs 84??7,9 mg/dL; 10.2??4.4 vs 6.4??2.9 uM/L. A m??dia das vari??veis do perfil lip??dico: triglicer??deos, colesterol total, LDL e HDL respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 88??72 vs 49??40mg/dL (p??0,01); 207??38 vs 183??30mg/dL (p=0,02); 134??36 vs 125??27mg/dL (p=0,34); 54??13 vs 48??11mg/dL (p=0,10). A m??dia do HOMA-IR e HOMA-?? respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 1,6 (1,1 ??? 2,5) vs 1,2 (0,9 ??? 1,5) (p=0,03); 207 (116 ??? 241) vs 101 (86 ??? 132) (p??0,01). Observada correla????o linear moderada e positiva entre o HOMAIR-IR e o colesterol total (r=0,34 e p=0,02). J?? na an??lise de correla????o do HOMA-?? verificou-se correla????o o linear moderada e positiva com os triglicer??deos (r=0,41 e p??0,01), com o colesterol total (r=0,40 e p??0,01) e com a LDL (r=0,30 e p=0,04). Quando realizada a an??lise de associa????o linear multivariada, verificou-se signific??ncia de associa????o independente entre o uso de COC e o HOMA-?? com raz??o de chance de 8,15 para um intervalo de confian??a de (1,02 - 64,94) e p=0,04. Conclus??o: Mulheres que utilizam COC apresentam HOMA-IR e HOMA-?? maior que mulheres que n??o utilizam COC. Isso sugere que essas mulheres apresentam menor sensibilidade insul??nica, o que corrobora com as altera????es lip??dicas encontradas nessa popula????o.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4550_1.pdf: 1556901 bytes, checksum: 7211d60fc3190af07041b1ecd6e03ea5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / O polifosfato inorgânico (PoliPi) é um homopolímero formado por unidades repetitivas de fosfato, unidas através de ligações fosfoanidrídicas, .descoberto há mais de cem anos. Esta molécula é ubiquitária na natureza, sugerindo o envolvimento do PoliPi em importantes processos metabólicos celulares. Os fungos são organismos de grande interesse prático e científico, por apresentarem grande potencial de aplicação em várias áreas da biotecnologia. Apesar da grande importância do PoliPi a via fisiológica de produção, assim como sua função não estão totalmente esclarecidas, principalmente em seres eucariotos. Neste trabalho foram avaliados os aspectos bioquímicos e fisiológicos da acumulação de PoliPi em dez amostras de Cunninghamella elegans. Os experimentos foram realizados de acordo com um planejamento fatorial de dois níveis (22) sem ponto central. Os resultados obtidos demonstraram que a concentração de glicose no meio de cultura e a temperatura de cultivo influenciam significativamente o processo de acumulação de PoliPi. O planejamento fatorial permitiu a modelagem matemática do acúmulo de PoliPi para cada amostra testada. C. elegans UCP 542 apresentou o maior rendimento na acumulação de PoliPi, correspondendo a 5.77 μg de Pi/mg. Observou-se que o PoliPi é acumulado durante todas as fases de crescimento de C. elegans, sendo a fração álcali-solúvel produzida em maior quantidade. A atividade das fosfatases ácida e alcalina foi detectada em todas as amostras, contudo não observou-se uma correlação com o processo de acumulação de PoliPi. Todas as amostras de C. elegans testadas demonstraram habilidade em acumular PoliPi, destacando-se C. elegans 542, que demonstrou grande potencial de utilização em processos biotecnológicos

Orientador: José Antonio Rocha Gontijo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T07:06:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelotto_JoaoBatista_D.pdf: 34170334 bytes, checksum: 36ae378e1f61326531b076b34ae09e4b (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O papel do SNC no controle da homeostase hidrosalina tem sido demonstrado por diversos estudos. Recentemente, várias evidências têm sugerido que a insulina pode exercer influência na modulação de várias funções cerebrais, tais como regulação da ingestão de alimentos, das funções reprodutiva e cardiovascular. Entretanto, são escassos os dados disponíveis abordandoo efeito da insulina injetada no SNC sobre o manuseio renal de sódio. Assim, nós hipotetizamos que uma possível ação central da insulina pode modular a atividade nervosa renal, levando a mudanças na excreção urinária de sódio. Com a finalidade de testar essa hipótese nós investigamos os efeitos da injeção aguda de insulinano ventrículo cerebral lateral sobre o manuseio tubular de sódio em ratos não anestesiados, não restritose desnervados e seus controles.Para examinar a influênciada desnervação renal durante a injeção aguda de insulina, os animais foram randomicamente separados em 4 grupos: 1. Ratos NDX (solução salina0,15M NaCI);2. Ratos NDX (injeçãoicv de insulina);3. Ratos DNX (injeção insulina) e 4. Ratos NDX (injeção sc de insulina). Nesses experimentos nós demonstramos que a injeção central de insulina produziu substancial e dose dependente aumento da excreção urinária de sódio(0,042?g.?l-0,042µg.µl-1:1189 ±308 ? % .min.; 0,42 µg.µl-1:1461± 594 ? % .min.e 4,2 µg.µl-1: 2055 ± 411 L % .min.) e potássio (0,042µg.µl-1:649 ±100 ? % .min.; 0,42 µg.µl-1: 671±175 ? % .min. e 4,2 µg.µl-1: 669 ±70 ? % .min.), confirmando a hipótese de que a insulina, centralmente administrada,induz excreção renal de íons, pelo menos em parte relacionada a mudanças na atividade nervosa renal. Em adição, nós mostramos que a natriurese promovida pela insulina ocorreu por aumento da rejeição pós proximal de sódio (FEPPNa),sem alteração da filtração glomerular(CCr)e proporcional a carga filtrada de sódio. Assim, nós observamos que o aumento da excreção de sódio e potássio deve ser devido a inabilidadedos túbulos renais em manusear eletrólitos,associada a quebra do balanço glomérulo-tubular.A administração de leptina icv não promoveu modificação em qualquer parâmetro funcionalavaliado. Entretanto, quando a leptina foi injetada associada à insulina no ventrículo lateral, o efeito na excreção urinária de sódio apresentou aumento ou diminuição nas doses de 0,3 3 ?g, respectivamente. Tendo em vista os dados apresentados,pode-se sugerir que um possível erro na sinalização eferente periventricular deve ter contribuído para as disfunções observadas.Novos estudos são necessários para elucidar esse envolvimento neuro hormonal na interação insulina-cérebro-rim / Abstract: The role of the central nervous system in the control of hydrosaline homeostasis has ben strikingly demonstrated by several studies. In recent times growing evidence has suggested that insulin may exert influence in the modulation of many brain functions, such as food intake regulation, reproductive function and cardiovascular function. However, there are no available data examining the central nervous system effect of insulin administration on renal sodium handIing. Also, we have hypothesized that a possible central insulin action may modulate the renal nerve activity, consequently changing the urinary sodium excretion. In order to test this hypothesis we investigated the effects of acute lateral cerebral ventricle insulin injection on tubule sodium handling of unanesthetized, unrestrained renal-denervated rats and their sham operated controIs. To examine the influence of renal denervation during i.c.v. administration of insulin rats were randomly assigned to one off our groups: (1) sham-operated Í.c.v. 0.15M NaCI injected, (2) sham-operated i.c.v. insulin-injected, (3) renal-denervated i.c.v. insulin-injected and (4) subcutaneously insulin-injected. In the current studies we demonstrated that centrally administered insulin produced substantial and dose-related increase in the urinary output of sodium (0.042µg.µl-1: 1189:808 ?%.min., 0.42 µg.µl-1: 1461± 594 ? %.min., and 4.2 µg.µl-1: 2055 ± 411? %.min.), and potassium (0.042µg.µl-1: 649 ±100 ?%.min., 0.42vg.µl-1: 671±175 ? %.min., and 4.2µg.µl-1: 669 ± 70 ? %.min.), confirming the hypothesis that centrally administered, insulin-induced renal ion excretion is, at least in part, related to changes in renal nerve activity. In oodition, we showed that insulin-induced natriuresis occurred by increasing post-proximal tubule sodium rejection (FEPPNa),despite an unchanged glomerular filtration rate (Ccr) and proportionate to the sodium 1000 filtered. Thus, the observed increase in renal sodium and potassium excretion may be due to the inability of renal tubules to handIe the electrolytes, with a promoted disruption in glomerotubular balance. Together, these findings may suggest that a possible misleading of periventricular efferent neural signalizing may contribute to renal, hemodynamic and peripheral metabolic dysfunction. Further studies are required to investigate this neurohumoral involvement in functional insulin-brain-kidneyinteraction / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T04:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MarcioPereirada_D.pdf: 4499897 bytes, checksum: ca6b7ea82771a3d1c8e260487fa8d105 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A exposição de animais homeotérmicos à baixa temperatura promove alterações fisiológicas que refletem o desvio do fluxo de energia para a produção de calor. A perda do controle coordenado sobre a ingestão alimentar e o gasto energético constitui mecanismo central no desenvolvimento da obesidade, um dos mais prevalentes problemas de saúde pública da atualidade. Uma vez que, sob exposição ao mo, alta ingestão alimentar está associada à elevada termogênese, perda de peso e baixos níveis de insulina, utilizou-se uma analise por cDNA- macroarray visando a identificação de proteínas hipotalâmicas que fossem moduladas em resposta à exposição ao mo (4°C). Esta análise revelou um aumento na expressão do neuropeptídeo orexigênico MCH (hormônio de concentração da melanina) em ratos expostos ao mo. Para avaliar o efeito da hiper-expressão hipotalâmica do MCH sobre a temperatura corpórea, a ingestão de alimentos e a variação de peso corpóreo em ratos expostos ao mo, foi utilizado um oligonuc1eotídeo antisense específico para bloqueio da síntese protéica de MCH, o qual não alterou a ingestão alimentar nem a temperatura corporal desses animais. Tal bloqueio promoveu queda significativa no peso corporal dos mesmos, bem como redução no glicogênio hepático e gordura epididi.ma4 aumento relativo na gordura corporal, hipertrofia do tecido adiposo marrom com aumento na expressão de UCPI (proteína desacopladora mitocondriall) neste tecido, além de aumento no consumo da massa corporal isenta de gordura. Deste modo, o aumento na expressão hipotalâmica de MCH em ratos expostos ao mo parece participar do processo que permite a utilização eficiente de energia para produção de calor durante a adaptação termogênica ao mo. Na parte final deste estudo avaliou-se o papel do MCH sobre produção e ação periférica da insulina e sobre etapas intermediárias fundamentais na transdução do sinal molecular deste hormônio em animai_ mantidos em temperatura ambiente. O estímulo com MCH exógeno promoveu aumento nos níveis de glicose tanto em condições basais quanto durante o GTT, sem alteração nos níveis de insulina, enquanto o tratamento com oligonucleotídeo antisense não alterou estes parâmetros. Assim, o tratamento com MCH parece contribuir para um comprometimento da resposta funcional à insulina. O tratamento com MCH induziu redução na ativação da Akt em músculo, sem modificação na resposta molecular à insulina nos demais tecidos, sugerindo que o MCH per se, e através de um efeito central, possa atuar de maneira primária sobre a modulação na ação periférica da insulina, por mecanismos que exerçam interferência na sinalização da insulina em tecidos chave na captação de glicose. O tratamento com MCH promoveu ainda redução na fosforilação da ERK induzida por insulina em tecido adiposo branco, enquanto o tratamento com oligonuc1eotídeo antisense MCH levou a um aumento na sua fosforilação em tecido adiposo marrom. Os resultados aqui apresentados trouxeram importantes informações não apenas no que se refere ao controle da ingestão alimentar e termogênese como também no controle central da ação periférica da insulina. Por fim, os resultados apresentados revelam o papel do neurotransmissor MCH como potencial alvo terapêutico na terapia da obesidade e diabetes mellitus tipo2 / Abstract: The exposure of homeothermic anima1_ to cold environment leads to physiological adaptations that are require to maintain a stable body temperature. Among these adaptations, the increase of food consumption accompanied by weight loss reflects the deviation of energy flow toward heat production. Loss of coordinator control of food ingestion and energy expenditure represents a central mechanism in the development of obesity, one of the most prevalent public health problems at the present time. Because, under cold exposure, high food consumption is association with increased thermo genesis, weight loss and decreased insulin and leptin levels, an analysis of cDNA-macroarray was employee to identify hypotha1amic proteins that are modulator in response to cold exposure (4°C). The cDNA macroarray ana1ysis, confumed by RT-PC_ mnnunoblot, and RIA, revealed that the hypotha1amic expression of the appetite-stimulating neuropeptide, meJanin-concentrating hormone (MCR), was increased by exposure of rats to cold enviromnent. To investiga te effects of elevation MCH hypoth_1::tmic expression on body temperature, food ingestion and body weight variation in cold exposed rats, a MCH antisense oligonucleotide was used to inlnoit MCH synthesis. The inhibition of hypotha1amic MCH expression in cold exposed rats promotion no changes in food intake and body temperature. However, MCH inanition 100 to a significant drop in body weight, which was accompaniOO by decreased liver glycogen and epididymal fat, increased relative body fat, increased absolute and relative interscapuJar brown adipose tissue mass, increased uncoupling protein 1 expression in brown adipose tissue and increased consumption oflean body mass. Thus, increased hypothalamic MCH expression in rats exposed to cold may participate in the process that allows for efficient use of energy to heat production during thermogenic adaptation to cold. In the second part of this work the effect of intracerebro ventricuJar infusion of MCH and antisense oligonucleotide to MCH was evaluatOO upon peripheral glucose homeostasis, insulin action and key steps of the insulin signal transduction pathway in liver, skeletal muscle, white and brown adipose tissues in rats maintainOO in thermoneutrality. MCH but not antisense oligonucleotide MCH treatment 100 to significant increase of glucose levels during a glucose tolerance test, no changes in insulin levels were detected. MCH treatment promotion a significant reduction of Akt serine phosphorylation in skeletal muscle and reduction of ERK tyrosine phosphorylation in white adipose tissue. On the other band, antisense oligonucleotide MCH treatment promotion mcreased ERK tyrosme phosphorylation m brown adipose tissue. The present study provides evidence that MCH participates m the central control of energy expenditure and potentially affects insulin action m peripheral tissues. This data supports the role of MCH as a candidate target for therapy m obesity and diabetes mellitus / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Laercio Luis Vendite / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Matematica, Estatistica e Computação Científica / Made available in DSpace on 2018-07-21T03:25:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leckar_HamiltonFaria_D.pdf: 3108709 bytes, checksum: a7f01446388f08097019085aa9a1c63f (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed / Doutorado / Doutor em Matemática Aplicada

Orientador : Antonio Ari Gonçalves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T04:50:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_EuniceCristinada_M.pdf: 4590949 bytes, checksum: 83772618bb2bea2c5231f7ccade889d6 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Introdução: O armazenamento e a mobilização das reservas energéticas podem ser afetadas por muitos fatores, tais como: exercício e doenças. O treinamento promove adaptações que melhoram a utilização das reservas metabólicas e preserva o armazenamento de glicogênio no fígado e nos músculos. Doenças, como diabetes diminui a habilidade do organismo em manter o armazenamento de glicogênio. Em estudos anteriores, nós mostramos que o exercício regular e a droga anti-hiperglicemiante,. metformina; trouxeram benefícios a ratos diabéticos: Objetivo: Dessa forma, o objetivo deste trabalho é estudar os efeitos do treinamento e da metf6rmina, uma droga anti-hiperglicemiante; sobre a insulina plasmática e os parâmetros metabólicos (glicemia, ácidos graxos livres, triglicerídeos e glicogênio) de ratos diabéticos. Método: Antes de receberem a injeção de aloxana (40mg/kg peso corpóreo), os ratos foram adaptados à natação (i: 2f39 ¿t -Os ratos dos grupos",reinado Diabetes (TE)t11 = 6 Treinado Diabetes Metformina-LT-8F / Abstract: Introduction:.. Storage ar1d-. _ation..of- fue_-reserves-.is- affeeted-by-l1'tSfty-f_ors, such as, exercise and diseases. So, training adaptation improves the utilization of metabolic reserves and-preservestfteglyeegeA- cententin liver- and-muscles: _ the other hand, diabetes decreases the glycogen stores in many tissues. In previous work, we have-shown that regutar exereise-afld-the-aftti-hyperglycemie dr-t:Jg-,metfOfJ11"" (M) were beneficial to diabetic rats. Aim:-. For. that-reasons, tRis-W6fk-sWdy- tfte-effeets-of-training and-ef. metformifr,. an-_ntihyperglycemic drug, on plasmatic insulin and some metabolic parameters such as glucose; free fatty acids;trigtyeeftdes-a_en-iftdiabetic rats: Methods: Before made diabetics byalloxan (40 mg/kg body weigh), rats were adapted to'SWimming-(i: 28° C): The--groups. Trainedtfk-:n=--5; :r-rained Metformin lTMt--n=4, Trained.Diabetes (TO )n-= 6-Hlfaffled--Diabetes Metfermin (TDM / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Ricardo Della Coletta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T05:46:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bufalino_Andreia_M.pdf: 1848465 bytes, checksum: e05d7021dc64d36ed2556bd7fc4b97fd (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A fissura labial e/ou palatina (FL/P) não-sindrômica é uma malformação congênita do lábio e/ou palato com alta frequência na população brasileira. A etiologia das fissuras é complexa e conta com a participação de fatores genéticos e ambientais. Inúmeros estudos demonstraram que variantes polimórficas das enzimas relacionadas ao metabolismo do ácido fólico podem ser importantes fatores de risco materno para o nascimento de uma criança FL/P não-sindrômica. O objetivo deste estudo foi estudar a influência do consumo de suplementos vitamínicos durante o primeiro trimestre de gravidez e comparar a frequência alélica e genotípica de 4 genes (MTHFR, MTHFD1, MTR e RFC1) que codificam enzimas da via metabólica do ácido fólico entre mães de indivíduos portadores de FL/P não-sindrômicas (grupo experimental) e mães de indivíduos clinicamente normais (grupo controle). Amostras de DNA de 184 mães do grupo controle e de 106 mães do grupo experimental foram genotipadas por reação em cadeia da polimerase associada à análise de polimorfismo de fragmentos de restrição enzimática (PCR-RFLP). A ausência de suplemento vitamínico durante o primeiro trimestre de gravidez aumentou de forma discreta (aproximadamente em 0,4 vezes) o risco de uma mulher ter um filho com FL/P não-sindrômica. Dos 15 polimorfismos analisados neste estudo, 2 apresentaram diferenças entre os grupos. No polimorfismo rs2274976 do gene MTHFR, o alelo A e o genótipo GA ocorreram em uma frequência significantemente maior no grupo experimental que no grupo controle (p<0,000001), aumentando em aproximadamente 6 vezes o risco de uma mãe ter um filho com FL/P não-sindrômica. O genótipo AA no lócus polimórfico rs2236225 do gene MTHFD1 foi significantemente mais prevalente no grupo experimental comparado com o grupo controle (p=0,02). A presença deste genótipo aumentou em aproximadamente 2 vezes o risco de uma mãe ter um filho com FL/P não-sindrômica. Análise multivariada demonstrou que estes fatores contribuíram de maneira independente para a etiologia das FL/P não-sindrômicas. O presente estudo demonstra que os polimorfismos rs2274976 do gene MTHFR e rs2236225 do gene MTHFD1 e a suplementação vitamínica durante o primeiro trimestre de gravidez estão associados ao desenvolvimento de FL/P não-sindrômicas na população brasileira. Este estudo corrobora com evidências prévias que demonstraram a influência de fatores ambientais e genéticos na etiopatogenia das FL/P não-sindrômicas. / Abstract: Nonsyndromic cleft lip with or without cleft palate (CL/P) is a congenital malformation of the lip and/or palate with elevating frequency in the Brazilian population. The etiology of the nonsyndromic CL/P is complex and both environmental and genetic factors play important roles. Several studies demonstrated that polymorphisms in the folic acid metabolic enzymes may be important maternal risk factor for the birth of a child with nonsyndromic CL/P. The aim of this study was to determine the influence of the multivitamin supplements during the first trimester of pregnancy and to compare the allele and genotypic frequencies of 4 genes (MTHFR, MTHFD1, MTR and RFC1) that encode enzymes of the acid folic metabolic pathway between mothers of nonsyndromic CL/P patients (experimental group) and mothers of clinically normal children (control group). DNA samples from 184 mothers of the control group and from 106 mothers of the experimental group were genotyped by polymerase chain reaction associated with reaction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). The lack of multivitamin supplementation during the pregnancy first trimester increased in approximately 0.4-fold the maternal risk of a nonsyndromic CL/P child. Two out of 15 polymorphisms showed differences between groups. In rs2274976 MTHFR polymorphism, allele A and genotype GA occurred in a significantly higher frequency on experimental group when compared to control group (p<0.000001), rising in approximately 6 times the risk of a mother giving birth to a nonsyndromic CL/P child. Genotype AA in the rs2236225 MTHFD1 polymorphic locus was significantly more prevalent in experimental group than in control group (p=0.02). This genotype raised in approximately twice the risk of a mother giving birth to a nonsyndromic CL/P child. Multivariate analysis demonstrated that those factors contributed in an independent manner to nonsyndromic CL/P etiology. The present study shows that rs2274976 MTHFR and rs2236225 MTHFD1 polymorphisms, as well as the multivitamin supplementation during the first trimester of pregnancy, are associated with the development of nonsyndromic CL/P in the Brazilian population. This study corroborates with previous evidences demonstrating the influence of environmental and genetic factor on etiopathogenesis of the nonsyndromic CL/P. / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Apesar do amplo e histórico uso de produtos da biodiversidade brasileira com fins medicinais, pouco se sabe sobre o destino destes produtos após a sua absorção no organismo; quais são os produtos de metabolismo formados, sua toxicidade e cinética de eliminação. Neste trabalho foi estudado o metabolismo in vitro do diterpeno ácido caurenoico. Este terpeno está amplamente distribuído no reino vegetal tendo sua ocorrência destacada em dois dos maiores produtos fiterápicos consumidos pela população brasileira: o óleo de copaíba (Copaifera ssp.) e o xarope de guaco (Mikania glomerata e Mikania leavigata). Entre as principais reações do metabolismo em humanos, as reações de oxidação mediadas pelo citocromo P450(CIP450) têm um papel chave na detoxificação de xenobióticos. O objetivo deste trabalho foi estudar modelos biomiméticos in vitro das reações realizadas pelo CIP450 utilizando metaloporfirinas e reagentes de salen como catalisadores. Foram empregados sete catalisadores em meio homogêneo: Cloreto de 5,10,15,20-tetraquis(pentafluorofenil)porfirina ferro e manganês III (FeTFPP) e (MnTFPP), Cloreto de 5,10,15,20-tetraquis(2,6-diclorofenil)porfirina ferro e manganês III (FeTDCPP) (MnTDCPP), Cloreto de (R,R)-(-)N,N\'-bis(3,5-di-terc-butil-salicilideno)- 1,2-diaminociclo-hexil manganês III (R-Salen), Cloreto de (S,S)-(-)N,N\'-bis(3,5-di-tercbutil- salicilideno)-1,2-diaminociclo-hexil manganês III (S-Salen) e o Cloreto de 5,10,15,20- tetraquis(fenil)porfirina ferro III (FeTPP). Como doadores de oxigênio foram avaliados o iodosilbenzeno (PhIO), peróxido de hidrogênio (H2O2), terc-butil-hidroperóxido (TBHP) e (ácido 3-cloro-peroxibenzoico (MCPBA). Nos sistemas estudados foi observada a formação predominante de três produtos de oxidação: Um derivado epoxidado, um mono- e um di-hidroxilado, que tiveram sua estrutura proposta com base na análise do seu perfil de fragmentação em espectrometria de massas e comparação com dados previamente publicados na literatura. Foi observado que a natureza do oxidante influencia de forma mais pronunciada tanto a reatividade como a formação dos produtos. Foram avaliados também os catalisadores FeTFPP e o cloreto de 5,10,15,20-tetraquis-(4-N-metilpiridil)porfirina ferro III( FeTMPyP) imobilizados em suportes inorgânicos. A utilização destes catalisadores imobilizados resultou na maior reatividade do ácido caurenoico com a formação dos mesmos três produtos, mas em maior proporção em relação ao substrato. Por fim, foi realizada a catalise em meio biológico utilizando microssomas de ratos. Neste sistema foi gerado somente um produto que apresentou espectro de massas e tempo de retenção similar ao derivado di-hidroxilado obtido nas reações que utilizaram metaloporfirinas. Este trabalho trouxe evidências da rota de metabolismo de um importante produto natural, além de reforçar a capacidade de metaloporfirinas em realizar catálises biomiméticas, que serão úteis para a geração de metabólitos de fase um para estudos pré-clínicos. / In spite of the widespread and historical use of products of the Brazilian biodiversity for medical purposes, little is known about the fate of these products after their absorption into the organism; which are the products of metabolism, their toxicity and elimination kinetics. In this master thesis the in vitro metabolism of the diterpene kaurenoic acid was studied. This terpene is widely spread in the plant kingdom. Its presence can especially be highlighted in two of the most consumed phytotherapeutics by the brazilian population: the copaíba oil (Copaifera ssp.) and the guaco syrup (Mikania glomerata and Mikania leavigata. Among the principal metabolic reactions in humans, the oxidation reactions catalyzed by cytochrome P450 (CYP450) have a key role in the detoxification of xenobiotics. The objective of this thesis was the study of in vitro biomimetic models of the reactions carried out by CYP450 using metalloporphyrins and salen catalysts as analogs of the CYP450. Seven catalysts were applied in a homogeneous medium: 5,10,15,20-tetrakis(pentafluorophenyl)porphyrin iron and manganese III chloride (FeTFPP) and (MnTFPP), 5,10,15,20-tetrakis(2,6-dichlorophenyl)porphyrin iron and manganese III chloride (FeTDCPP) and (MnTDCPP), (R,R)-(-)N,N-bis(3,5-di-tertbutylsalicylidene)- 1,2-diaminocyclohexyl manganese III (R-Salen) chloride, (S,S)-(-)N,Nbis( 3,5-di-terc- butylsalicylidene)-1,2-diaminocyclohexyl manganese III (S-Salen) chloride and 5,10,15,20-tetrakis(phenyl)porphyrin iron III chloride (FeTPP). As oxygen donors iodosylbenzene (PhIO), hydrogen peroxide (H2O2), tert-butyl hydroperoxide (TBHP) and metachlorperoxybenzoic acid (MCPBA) have been tested. In the majority of the systems the formation of three predominant oxidation products was observed: An epoxidated, a mono- and a dihydroxylated derivative, of which the chemical structure was proposed based on the analysis of the mass spectrometric fragmentation pattern. It was observed that the nature of the oxidant influences more markedly the reactivity as well as the formation of the products. The catalysts FeTFPP and 5,10,15,20-tetrakis- (4-N-methyl pyridine)porphyrin iron III chloride (FeTMPyP) immobilized with inorganic supports were assessed as well. Using these immobilized catalysts, a higher proportion of oxidation products of the kaurenoic acid was observed. Finally, the oxidation of kaurenoic acid was assessed using rat microsomes. In this system only one product was produced that showed a similar mass spectrum and retention time as the dihydroxylated derivative obtained in the reactions using metalloporphyrins.This thesis showed evidences of the route of metabolization of an important natural product, and additionally reinforces the capacity of metalloporphyrins in attaining biomimetic catalysis.