Orientador: Pedro de Magalhães Padilha / Resumo: O peixe é uma importante fonte de proteínas de alto valor biológico, vitaminas e minerais. Porém, este alimento é também uma das principais vias de exposição humana a contaminantes tóxicos como o metilmercúrio (MeHg). Assim a sua acumulação no peixe pode predispor sérios riscos para a saúde humana. As altas concentrações de mercúrio encontrados em solo, sedimentos, peixes e humanos na Amazônia brasileira têm sido estudados intensamente pela comunidade científica nas últimas décadas, procurando-se elucidar os mecanismos de toxicidade das espécies mercuriais. As espécies mercuriais ligam-se preferencialmente às proteínas. Podendo significar que a fração biodisponível das espécies mercuriais nas diferentes espécies de peixes pode ser dependente da forma como estas estão ligadas a essas proteínas. Portanto esta proposta de trabalho buscou otimizar procedimentos eletroforéticos por 2D-PAGE para fracionamento e identificação de proteínas responsáveis pelo transporte de mercúrio em amostras de tecido muscular e hepático de peixes coletados no reservatório da Usina Hidrelétrica de Jirau – no rio Madeira; utilizando o método de espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS), para determinação de mercúrio nos tecidos e spots proteicos obtidos; avaliou o estresse oxidativo dos peixes contaminados com mercúrio por meio das atividades das enzimas catalase (CAT), glutationa peroxidase (GSH-Px) e superóxido dismutase (SOD), bem como das concentrações de hidroperóxido de lipí... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientadores: Marco Aurelio Zezzi Arruda, Claudio Eduardo Muller Banzato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sussulini_Alessandra_D.pdf: 1708235 bytes, checksum: 9eb972af4e73014944c3fe61c3ed86d5 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O transtorno afetivo bipolar é uma doença psiquiátrica caracterizada por alterações de humor marcantes, oscilando entre episódios de mania e depressão, que afeta entre 1 a 3% da população mundial. Os mecanismos em nível molecular deste transtorno, assim como de seu tratamento com lítio, que é o medicamento mais utilizado, ainda não são estabelecidos. Assim sendo, o objetivo deste trabalho de Tese consistiu em explorar biomarcadores potenciais (metabólitos, proteínas e íons metálicos livres ou ligados a proteínas) para o transtorno afetivo bipolar e seu tratamento com lítio. Para isso, foi realizada a comparação dos perfis metabonômicos (utilizando espectroscopia de ressonância magnética nuclear de hidrogênio e análise quimiométrica), proteômicos (utilizando eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida e diferentes técnicas de espectrometria de massas molecular) e metalômicos (utilizando espectrometria de massas com fonte de plasma indutivamente acoplado) de amostras de soro sangüíneo de pacientes com transtorno afetivo bipolar utilizando o lítio (n = 15) ou outras drogas excluindo o lítio (n = 10) e de indivíduos saudáveis (n = 25). A análise metabonômica indicou os lipídeos como sendo os metabólitos mais afetados na presença do transtorno afetivo bipolar e do tratamento com lítio, o que corroborou com os resultados da análise proteômica, onde a apolipoproteína A-I foi uma das proteínas que sofreu maior alteração em seus níveis, sendo subexpressa em pacientes bipolares, independentemente do tratamento, porém apresentando uma restauração ao nível do grupo controle após o tratamento com lítio. As análises ionômicas apontaram As, B, Cl, Cr, Fe, K, Li, Mg, P, S, Se, Si, Sr e Zn como os íons livres diferenciais e as análises metaloproteômicas apontaram, principalmente, Ca, Co, Fe, K, Mg, Mn, Na, Ti e Zn ligados a proteínas como sendo os metais que sofreram as maiores alterações na presença do transtorno afetivo bipolar e de seu tratamento com lítio. Dentre as proteínas ligadas a metais que apresentaram diferenças entre os grupos estudados em termos de metais ligados, destacam-se a apolipoproteína A-I, a transtiretina e a vitronectina, que haviam sido identificadas previamente nas análises proteômicas por apresentarem alterações em suas expressões. A partir destes estudos, foi possível identificar, de maneira exploratória, moléculas diferenciais que podem orientar futuros estudos envolvendo os mecanismos patofisiológicos do transtorno afetivo bipolar e de ação terapêutica de drogas como o lítio, bem como na descoberta de biomarcadores para a doença e/ou seu tratamento com lítio / Abstract: Bipolar disorder is a psychiatric illness characterized by marked mood changes, oscillating between mania and depression episodes, which affects 1-3% of the worldwide population. Molecular level mechanisms of this disorder, as well as of its treatment with lithium, which is the most widely used medication, are not yet known. Thus, the aim of this work consisted in explore potential biomarkers (metabolites, proteins, metal ions free or bounded to proteins) for bipolar disorder and its treatment with lithium. For this purpose, it was performed the comparison of metabonomic (using hydrogen nuclear magnetic resonance spectroscopy and chemometric analysis), proteomic (using 2-D gel electrophoresis and different molecular mass spectrometry techniques), and metallomic (using inductively coupled plasma mass spectrometry) profiles for blood serum samples of bipolar disorder patients treated with lithium (n = 15) or other drugs than lithium (n = 10) and healthy individuals (n = 25). Metabonomic analyses indicated lipids as the most affected metabolites in the presence of bipolar disorder and of lithium treatment, which corroborated with the results of proteomic analyses, where apolipoprotein A-I was one of the proteins that showed highest alterations in its levels. It was downregulated in bipolar disorder patients, independently of the treatment, but showed a level restored to that of the control group after lithium treatment. Ionomic analyses detected As, B, Cl, Cr, Fe, K, Li, Mg, P, S, Se, Si, Sr e Zn as differential free ions, and metalloproteomic analyses detected mainly Ca, Co, Fe, K, Mg, Mn, Na, Ti and Zn bound to proteins as being the metals that presented highest alterations in the presence of bipolar disorder and lithium treatment. Among the metal-binding proteins that indicated differences between the studied groups, apolipoprotein A-I, transthyretin and vitronectin, which were previously identified in the proteomic analyses, are highlighted. With the studies described in this research work, it was possible to identify, in an exploratory way, differential molecules that can guide future studies on the patophysiological mechanisms of bipolar disorder or terapeutic action pathways of drugs like lithium, as well as on the discovery of biomarkers for the illness and/or its treatment with lithium / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientadores: Marco Aurélio Zezzi Arruda, Ljubica Tasic / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-23T02:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mataveli_LidianeRaquelVerola_D.pdf: 1935019 bytes, checksum: 059066ee53b01850e2858460ba23617e (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Este trabalho consistiu em estudos de metalômica comparativa de sementes de soja transgênica (T) e não-transgênica (NT). Para tanto, as sementes de soja T e NT foram comparadas, em um primeiro, momento levando-se em conta: concentração total dos elementos, comportamento dos elementos durante extração utilizando-se fracionamento sequencial, e bioacessibilidade dos elementos após procedimento de digestão gastrointestinal simulada (in vitro). As análises preliminares foram feitas utilizando-se ICP-MS com analisador de massas quadrupolar, e as análises posteriores utilizando espectrometria de massas de alta resolução com plasma acoplado indutivamente (HR-ICP-MS). Foram determinados 25 elementos em concentrações variando de ng g até %. Foi observado que as sementes de soja T e NT exibem diferenças estatisticamente significantes nas concentrações de Cu, Fe e Sr, sendo os dois primeiros apresentando maiores concentrações na semente T, e, o último, com maior concentração nas sementes de soja NT. Estes resultados também se refletiram nos conteúdos desses elementos em extratos aquosos e resíduos obtidos por meio de fracionamento sequencial. Ainda, os experimentos de bioacessibilidade realizados mostraram que as frações bioacessíveis de Cu, Fe, e outros elementos (Mn, S, Zn) contribuíram em maior porcentagem para a concentração total dos elementos nas sementes de soja T do que para as sementes de soja NT. Posteriormente, foi dada continuidade aos estudos utilizando cromatografia líquida bidimensional off line para as amostras de sementes de soja, sendo a primeira dimensão constituída de cromatografia de exclusão por tamanho (SEC,) e a segunda dimensão constituída de cromatografia de troca aniônica (AEX). Na primeira dimensão cromatográfica foram identificadas três frações contendo metais por meio da hifenação SEC-ICP-MS: a primeira correspondendo a massas molares entre 38,1 e 181,1 kDa, a segunda correspondendo a massas molares entre 8,2 e 17,2 kDa, e a terceira fração correspondendo a massas molares entre 0,4 e 3,8 kDa. As três frações identificadas foram separadas, liofilizadas, e separadas novamente utilizando a cromatografia de troca aniônica. Foram detectados metais em todas as frações separadas por SEC: três sub-frações da primeira fração, uma sub-fração na segunda fração e três sub-frações na terceira fração. Os eluatos foram coletados, liofilizados, digeridos e levados ao espectrômetro de massas com fonte de ionização por electrospray (ESI-MS) para identificação de proteínas. Foram identificadas 33 e, entre elas, duas proteinas previamente relacionadas a metais foram encontradas: seed lipoxygenase 1 e b-conglycinin. Após a separação na segunda dimensão cromatográfica, as sub-frações resultantes foram liofilizadas e submetidas a uma terceira dimensao de separacao, utilizando a eletroforese em gel de poliacrilamida unidimensional (SDS-PAGE). As bandas obtidas por SDS-PAGE foram recortadas e digeridas a fim de analisar os metais presentes nas mesmas, destacando os resultados obtidos para Fe, onde o mesmo foi quantificado nas bandas da sub-fração onde o pico deste elemento foi encontrado nas análises por AEX-ICP-MS. Ainda, as bandas foram digeridas tripticamente a fim de identificar as proteínas presentes, e, novamente, proteínas associadas a metais foram identificadas: chain A lipoxygenase-3 (Soybean) complex with 13(S)-hydroperoxy- 9(Z),11(E)-octadecadienoic acid; beta-amylase [Glycine max]; seed lipoxygenase-1, lipoxygenase [Glycine max], seed lipoxygenase-2 (PISUM SATIVUM) e beta-conglycinin / Abstract: This work consisted of comparative metallomics studies of transgenic (T) and nontransgenic (NT) soybean seeds. To that end, T and NT seeds were compared at first taking into account: the total concentration of the elements, the elements behavior during extraction using sequential fractionation, and bioacessibility of the elements after simulated gastrointestinal digestion procedure (in vitro). Preliminary analyzes were done using ICP-MS with quadrupole mass analyzer, and the subsequent analysis using high-resolution inductively coupled plasma mass spectrometry, (HR-ICP-MS). 25 elements were determined at concentrations ranging from 1 ng g up to %. It was observed that T and NT soybean seeds exhibit statistically significant differences in the concentrations of Cu, Fe and Sr, the first two having higher concentrations in the T seeds, and the last with the highest concentration in soybeans NT. These results were also reflected in the contents of these elements in aqueous extracts and residues obtained through sequential fractionation. Also, the contributions of bioaccessible fractions of Cu, Fe and other elements (Mn, S, Zn) to the total content of the elements in T soybean seeds were higher than those found in NT soybean seeds. Subsequently, studies were continued using bidimensional liquid chromatography, the first dimension consisting of size exclusion chromatography (SEC) and the second dimension of anion exchange chromatography (AEX). In the first chromatographic dimension three fractions containing metals were identified using hyphenation SEC-ICP-MS, the first corresponding to molar masses between 38.1 and 181.1 kDa, the second corresponding to molar masses between 8.2 and 17.2 kDa and the third fraction corresponding to molar masses between 0.4 and 3.8 kDa. The three identified fractions were separated and lyophilized, and again separated using anion exchange chromatography (AEX). Metals were found in all the separated fractions by SEC: three sub-fractions of the first fraction, a subfraction in the second fraction and three sub-fractions in the third fraction. These peaks were collected, lyophilized, digested and taken to the mass spectrometer for protein identification. 33 proteins were identified, and, among them, two proteins previously related to metals were found: seed lipoxygenase 1 and b-conglycinin. After chromatographic separation in the second dimension, the resultant subfractions were lyophilized and subjected to a third separation dimension using onedimensional polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). After the separation, the bands were cut out and digested to examine the metals contained therein, highlighting the results obtained for Fe, which was quantified in the bands of the sub-fraction where the peak of the element is found in the analysis by ICP-AEX - MS. Also, the bands were digested triptically to identify the proteins, and once again proteins associated to metals were identified: 3-lipoxygenase A chain (Soybean) complex with 13 (S)-Hydroperoxy-9 (Z), 11 ( E)-octadecadienoic acid, beta-amylase [Glycine max]; seed lipoxygenase-1, lipoxygenase [Glycine max] seed lipoxygenase-2 (Pisum sativum) and beta-conglycinin / Doutorado / Quimica Analitica / Doutora em Ciências

Orientador: Marco Aurélio Zezzi Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-26T13:29:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LopesJunior_CiceroAlves_D.pdf: 12621993 bytes, checksum: d178a6c055fde0c86926a36f0e49390c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A busca para melhor entender a participação de elementos químicos no metabolismo de um organismo exige uma abordagem integrada entre as áreas da ciência devido à elevada envolvida complexidade. Esta Tese compreende o estudo realizado integrando as abordagens iônomicas, metalômicas e proteômicas para avaliar possíveis alterações no metabolismo do girassol (Helianthus annuus L.), mediante o desenvolvimento das plantas sob diferentes condições de irrigação com cádmio. Inicialmente, o estudo revelou que o girassol apresenta elevada resistência à contaminação com cádmio, sendo possível inferir, pela primeira vez, que o nível fitotóxico deste elemento para o organismo estudado é ca. 2,3 mg g-1. Um estudo ionômico desenvolvido empregando a técnica de ICP-MS foi realizado para avaliar a distribuição de vários elementos nas diferentes partes das plantas, buscando obter correlações com os processos biológicos exibidos pelas plantas durante o plantio. O estudo mostrou que os girassóis acumulam cádmio preferencialmente nas raízes, no entanto, ca. 65 ± 7% do total captado é translocado para as partes aéreas, fato que resulta na diminuição do transporte de ferro, cobre, magnésio e manganês para as folhas das plantas, sugerindo que há competição entre os elementos. Assim, pôde-se correlacionar a falta de tais nutrientes à clorose foliar exibida pelas plantas do grupo Cd-superior. O emprego da técnica de 2D-DIGE combinada a técnica de nESI-Q-TOF, também apresenta destaque na pesquisa, complementando os dados obtidos no estudo ionômico, por meio da identificação de proteínas nas folhas dos girassóis. As sementes das plantas Cd-tratadas apresentaram teor de cádmio superior ao recomendado pela FAO e OMS (0,1 mg/kg), sendo consideradas impróprias para o consumo humano. O protocolo de digestão in vitro revelou que as maiores concentrações deste elemento estão nas frações bioacessíveis das sementes. Na avaliação dos extratos protéicos das sementes empregando a hifenação SEC-ICP-MS foi identificado que o cádmio interage com moléculas de massa moleculares variando entre 70 a 0,7 kDa. Por fim, o teste de germinação evidenciou que o nível de cádmio acumulado nas sementes interfere no seu desenvolvimento / Abstract: The search for better understand the involvement of chemical elements in the metabolism of an organism requires an integrated approach between the areas of science due to the high complexity involved. This Thesis comprises study integrating ionomic, metallomic and proteomic approaches to evaluate possible changes in the metabolism of sunflower (Helianthus annuus L.), through the development of plants under different irrigation conditions with cadmium. First, the study showed that the sunflower presents high resistance to cadmium contamination, being possible infer, the first time, that the phytotoxic level of this element to the plant especies is ca. 2.3 mg g-1. An ionomic study carried out using an ICP-MS, it was performed to evaluate the distribution of various elements in different plant parts, seeking to obtain correlations with biological processes exhibited by plants during planting. The study showed that cadmium sunflowers accumulate preferentially in roots, but ca. 65 ± 7% of the total absorbed was translocated to the aerial parts, which it has resulted in decreased transport of iron, copper, magnesium and manganese to the leaves, suggesting that there is competition between the elements. Thus, the lack of such nutrients correlated to leaf chlorosis exhibited by plants of Cd-higher group. The application of the technique of 2D-DIGE combined technique nESI-Q-TOF, also features highlighted in the research, supplementing the data obtained in the ionomic study through the identification of proteins in the leaves of sunflowers. The seeds of Cd-treated plants presented higher levels of cadmium than recommended by FAO and WHO (0.1 mg kg-1), being considered unsuitable for diet human. The protocol of in vitro digestion showed that higher concentrations of this element are on bioacessible fractions of the seed. In the assessment of protein extracts of the seeds using the SEC-ICP-MS coupled, it was identified that cadmium interacts with molecules of molecular mass ranging from 70 to 0.7 kDa. Finally, the germination test reaveled that the level of cadmium accumulated in seeds interfere in its development / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2016-11-30T18:10:51Z No. of bitstreams: 1 MARIA ROSA CERBINO.pdf: 2627014 bytes, checksum: 98680184bb60e636de01507e3f1eeec4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-30T18:10:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIA ROSA CERBINO.pdf: 2627014 bytes, checksum: 98680184bb60e636de01507e3f1eeec4 (MD5) Previous issue date: 2016-04-12 / Mercury is a potentially toxic element with a wide distribution on the Amazonian environment. This metal is dangerous and responsible for environmental contaminations and human intoxications as it is capable to biomagnifications and bioaccumulate throughout the food chains becoming the main way of exposing the riverine Amazonian communities to methylmercury to whom the main diet is fish. Therefore, studies related to mercury toxicity are of fundamental importance to health and life quality of the Amazonian communities. This study aimed to detect and evaluate possible proteic biomarkers of mercury toxicity in samples of human milk collected in riverine populations of Madeira and Negro rivers in the Brazilian Amazon. Initially total mercury was determined in the hair of breast feeding women to identify who were contaminated with mercury followed by the obtaining of the proteome of milk samples by two-dimensional electrophoresis (2D PAGE) after precipitation of proteins in half acetone. On the proteic spots obtained in the process of protein fractionation of milk samples, detection of mercury was carried out by atomic absorption spectrometry in graphite furnace(GFAAS), where the results showed that mercury was bonded in proteins of molecular weight around 14-26 kDa. The concentration determination of total mercury by GFAAS was also carried out with milk in natura, lyophilized milk and the proteic pellets aiming a mass balance of mercury related to the concentration of this element on milk and pellets. The measurements of mass balance permitted to observe that, in relation to the milk samples from Madeira River, about 85 to 95%of the mercury present in the lyophilized milk is on the proteic fraction. In relation to the breastfeeding women of the Negro River, about 50% of the total mercury is bound in the proteic fraction and the difference of 51% might be bound to the lipidic fraction. However, more studies in this line of research need to be pursued to achieve more robust conclusions. / O mercúrio é um elemento potencialmente tóxico com ampla distribuição no ambiente amazônico. Este metal é perigoso e responsável por contaminações ambientais e intoxicações humanas, já que é capaz de biomagnificar e bioacumular através das cadeias alimentares, tornando-se assim a principal via de exposição às comunidades amazônicas ribeirinhas do metilmercúrio, cuja dieta é baseada em peixes. Sendo assim estudos relacionados à toxicidade do mercúrio são de fundamental importância para a saúde e a qualidade de vida das comunidades amazônicas. Este estudo buscou detectar e avaliar possíveis biomarcadores proteicos da toxicidade do mercúrio em amostras de leite materno coletadas de populações ribeirinhas do rio Madeira e do rio Negro, na Amazônia brasileira. Inicialmente, determinou-se mercúrio total no cabelo das lactantes para identificar quais estavam contaminadas com mercúrio, em seguida obteve-se o proteoma das amostras de leite por eletroforese bidimensional (2D-PAGE) após precipitação das proteínas em meio acetônico. Nos spotsproteicos obtidos no processo de fracionamento das proteínas, nas amostras leite, foram feitas determinações de mercúrio por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS), onde os resultados mostraram que o mercúrio se encontra ligado em proteínas de massa molecular na faixa de 14-26 kDa. A determinação da concentração de mercúrio total por GFAAS foi feita também no leite in natura, leite liofilizado e nos pelletsproteicos, com o objetivo de se fazer um balanço de massa de mercúrio em relação à concentração deste elemento no leite e pellets. As medidas de balanço de massa permitiram observar que, em relação às amostras de leite do rio Madeira, cerca de 85 a 95% do mercúrio presente no leite liofilizado encontrase na fração proteica. Em relação às lactantes do rio Negro, cerca de 50% do mercúrio total está ligado na fração proteica e a diferença de 51% pode estar ligado na fração lipídica. Contudo, mais estudos nesta linha de pesquisa devem ser desenvolvidos, para que se possam ter conclusões mais robustas.

Orientador: Ricardo de Oliveira Orsi / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de suplementação com fonte de ferro inorgânico na qualidade da geleia real produzida por abelhas A. mellifera, por meio de análises proteômicas. Foram utilizadas 12 colônias de abelhas A. mellifera africanizadas, alimentadas com xarope de açúcar (proporção de 1:1 de água e açúcar cristal) suplementado ou não com sulfato ferroso heptahidratado (contendo 20% de ferro), nas concentrações de 0, 25, 50 e 100 mg L-1. A produção de geleia real foi realizada por meio da técnica de transferência de larvas, colhida, armazenada em vials estéreis e mantidas sob congelamento. Eletroforese bidimensional (2D-PAGE) foi usada para fracionamento das proteínas da geleia real e o ferro quantificado por técnica de espectroscopia de absorção atômica de chama (FAAS), com identificação das proteínas por Espectrometria de massas com ionização por eletrospray (ESI-MS/MS). Os resultados foram avaliados por ANOVA, seguido do teste de Tukey para verificar diferenças entre as médias (P<0,05). Observou-se que a suplementação da dieta com o mineral ferro afetou o teor proteico e o número de spots em quase todos os tratamentos e meses analisados. Observa-se ainda que a dieta contendo 100 mg L-1 de Fe apresentou maior numero de spots contendo este mineral, bem como no abdome das abelhas. As principais proteínas contendo Fe foram classificadas como do grupo MRJPs (Major Royal Jelly Proteins). Os resultados encontrados mostram que o ferro influência na qualidad... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Marco Aurélio Zezzi Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-22T00:56:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MarceloAnselmoOseasda_D.pdf: 21762318 bytes, checksum: 0f395a27c9b28a3d7414579ff560bd4a (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Inúmeros trabalhos envolvendo uma nova área de estudos denominada metalômica destacam a necessidade de melhor compreender a interação entre íons metálicos e proteínas. Esta Tese empregou o girassol (Helianthus annuus L.), uma planta da família das oleaginosas que apresenta uma relevante importância econômica na produção de óleo vegetal, bem como em processos de fitorremediação, em um estudo metalômico para avaliação de possíveis alterações na expressão de proteínas mediante o desenvolvimento das plantas irrigadas com íons selenito ou zinco. Inicialmente, o estudo avaliou quatro diferentes métodos para a adequada para extração e separação de proteínas das folhas de girassol empregando a técnica de eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida (2DPAGE), sendo que o melhor procedimento consistiu na extração empregando tampão na presença de fenol. A posterior caracterização das proteínas, nos spots proteicos, empregando espectrometria de massas também foi conduzida evidenciando, pela primeira vez para o organismo estudado, a expressão de 12 novas proteínas. Um estudo ionômico foi desenvolvido para avaliar a distribuição destes elementos nas diferentes estruturas das plantas, buscando correlação com os processos biológicos que estariam ocorrendo nos girassóis. O estudo revelou uma correlação entre o nível de selênio e enxofre nas plantas sugerindo a incorporação do selênio em aminoácidos utilizados para síntese de proteínas. O emprego da técnica de ablação a laser acoplada ao espectrômetro de massas com plasma acoplado indutivamente (LA-ICP-MS) também apresenta destaque na pesquisa, complementando os dados obtidos no estudo ionômico, por meio da identificação de selênio nos spots proteicos extraídos das folhas dos girassóis e separadas por 2D-PAGE. Desenvolveu-se também desenvolver um método para análise quantitativa direta e simultânea de selênio e enxofre nas folhas das plantas empregando a hifenação LA-ICP-MS, buscando correlação entre os dois elementos / Abstract: Several papers highlight a new research area called metallomic, and points out the necessity to better understand the relationship between metallic ions and proteins. This Thesis has employed the sunflower (Helianthus annuus L.), which is considered an oilseed plant with significant economical importance for the production of vegetal oil, and also used in fitoremediation processes, to carry out a metallomic study focused on the evaluation of possible changes in proteins expression due to the irrigation of the plants with selenite or zinc ions. Initially, the study evaluated four different methods for the adequate extraction and separation of sunflower leaf proteins using the two-dimensional gel electrophoresis (2DPAGE) technique and the best result was obtained using a phenol based extraction procedure. Further protein characterization in protein spots were carried out using mass spectrometry and revealed for the first time for the studied organism, the expression of 12 new proteins. An ionomic study was also developed to investigate the distribution of these elements in the different structures of the plants, looking for the correlation of obtained data with biological processes that could be occurring in the sunflowers. The study showed a correlation between selenium and sulfur levels, suggesting the incorporation of selenium into amino acids used for the synthesis of proteins. The application of laser ablation technique coupled to the inductively coupled plasma mass spectrometer (LA-ICP-MS) has also been highlighted in this research, complementing the results obtained in the ionomic study through the identification of selenium in sunflower leaves protein spots. In addition, it was evaluated an analytical procedure for the direct and simultaneous quantitative determination of selenium and sulfur in the leaves of the plants using LA-ICP-MS, searching for a correlation between both elements / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências