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[en] CONTRIBUTIONS ON THE METROLOGICAL EVALUATION OF SATURATED STEAM STERILIZERS / [pt] CONTRIBUIÇÕES À AVALIAÇÃO METROLÓGICA DE ESTERILIZADORES POR VAPOR SATURADO

CARMEN PILAR CASTRO BARRIENTOS 14 November 2012 (has links)
[pt] No Brasil, as Infecções Hospitalares se constituem na principal causa de mortalidade de pacientes internados, gerando grandes prejuízos financeiros. Em 2008, a ANVISA publicou alerta de emergência epidemiológica devido à ocorrência de infecções por micobactérias de crescimento rápido em todas as regiões do país, infecções fortemente relacionadas a falhas nos processos de limpeza, desinfecção e esterilização de produtos médicos. A validação é uma ferramenta da metrologia que possibilita estabelecer se o processo de esterilização é executado de modo eficaz e reprodutível. Na norma ISO/TS 17665-2:2009 sobre validação da esterilização de produtos para saúde, se destacam recomendações de revalidações periódicas, distribuição espacial de sensores térmicos, critérios de aceitação quanto à temperatura calculada a partir da pressão medida na câmara e estimativa de incerteza de medição. Com base nos requisitos, recomendações, orientações e exigências descritas em documentos nacionais e internacionais, no presente trabalho se desenvolvem sistema e procedimento para avaliação da confiabilidade metrológica de esterilizadores por vapor saturado. Com o sistema foram avaliadas quatro autoclaves gravitacionais em uso hospitalar e industrial. Os resultados reforçam a importância de aspectos como: revalidações, condições ambientais e impacto da estabilidade temporal e uniformidade espacial na incerteza global das câmaras. Em todas as autoclaves avaliadas o processo se realizou por vapor superaquecido, que é menos eficiente e não-conforme à ISO 17665. As limitações identificadas corroboram com os novos requisitos da ANVISA (RDC 15:2012), tanto com relação à exigência de avaliações periódicas de esterilizadores, quanto à proibição do uso de autoclaves gravitacionais com capacidade superior a 100 L. / [en] In Brazil, the Hospital Infections are the main cause of mortality during hospitalization, generating huge financial losses. In 2008, ANVISA issued a warning of epidemiological emergency due to the occurrence of infections by rapidly growing mycobacteria in all regions of the country, strongly related to failures in the processes of cleaning, disinfection and sterilization of medical products. Validation is a metrological tool that allows establishing whether the sterilization process developed is running efficiently and with reproducibility. ISO/TS 17665-2:2009, on validation of sterilization products for health, highlights the need of periodic revalidations, measurements of temperature with sensors distributed throughout the chamber volume, specifies acceptance criteria based on measurements of pressure in the internal volume of the chamber (theoretical temperature) and introduces the measurement uncertainty requirement. In this work, based on the requirements and recommendations outlined in national and international documents, a system and procedure are developed for the metrological reliability evaluation of saturated steam sterilizers. With the developed system, four gravitational autoclaves were evaluated. The results reinforce the importance of revalidation, environmental conditions, and the contribution of temporal stability and spatial uniformity in the overall uncertainty of the cameras. All the autoclave process was carried out by means of superheated steam, which is less efficient and non-conform to ISO 17665. The limitations identified corroborate with the recently published requirements of RDC ANVISA 15:2012, concerning both the need of periodic evaluations of sterilizers and the prohibition of the use of gravitational autoclaves with capacity exceeding 100 L.
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Analise do polimorfismo genetico de cepas de Mycobacterium avium isoladas de pacientes atendidos no hospital de clinicas da Unicamp, utilizando a sequencia de inserção IS1245

Panunto, Alessandra Costa 16 May 2002 (has links)
Orientadores : Maria Cecilia Barisson Villares, Marcelo de Carvalho Ramos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T16:41:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Panunto_AlessandraCosta_M.pdf: 12920906 bytes, checksum: 263a29ecfa31e38c1f81b7326d7b06c5 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A tuberculose é a principal causa de morte no mundo entre as doenças infecciosas, produzindo 2 milhões de óbitos ao ano. Estima-se que um terço da população mundial esteja infectada pelo Mycobacterium tuberculosis, ou seja, 1,7 bilhões de pessoas. Em países africanos, o problema da tuberculose e da aids adquiriu proporções de grande magnitude. Em Moçambique, o coeficiente de incidência é de 460 casos/100.000 habitantes/ano, com mortalidade de 129 casos/100.000 habitantes/ano. Este estudo documenta a relevância desse problema. Duzentos e trinta e sete isolados clínicos de Mycobacterium tuberculosis foram caracterizados por IS6110-RFLP e ¿Spoligotyping¿, com o objetivo de avaliar a biodiversidade do bacilo da tuberculose na cidade de Maputo, Moçambique, África, onde há uma elevada incidência de tuberculose. Os resultados obtidos com o uso da técnica IS6110-RFLP exibiram uma considerável variabilidade genotípica, ou seja, cerca de 70,5% dos exemplares analisados corresponderam a genótipos únicos. A interpretação desse achado deveria ser feita juntamente com o estudo epidemiológico clássico, bem como a ampliação do número de casos analisados. Porém, a grande variabilidade genotípica nesse cenário em que a transmissão da doença é intensa, dado o número elevado de casos, indica, provavelmente, a situação endêmica em si, bem como o tempo prolongado em que isso se dá. Além disso, a grande mobilidade interna, ocorrida depois das intensas guerras civis, trazendo para a cidade indivíduos de diversos outros locais, pode também ter contribuído para essa diversidade. Encontramos também uma alta freqüência de cepas com baixo número de cópias (20,2% da IS6110). Todos os isolados foram também submetidos ao ¿Spoligotyping¿. Essa técnica foi mais discriminatória para os isolados com menos de 6 cópias da IS6110 do que o RFLP e menos discriminatório para os isolados com mais de 6 cópias da IS6110. As famílias mais freqüentemente encontradas no conjunto das cepas foram: LAM, EAI, T e Beijing, distribuídas entre os 35 agrupamentos, com 193 isolados. Em ambos os agrupamentos, tanto os derivados da técnica ¿IS6110-RFLP¿, quanto o ¿Spoligotyping¿, não houve nenhuma correlação com a resistência à isoniazida, e mesmo com os isolados multirresistentes / Abstract: Tuberculosis is the leading cause of death among infectious diseases in the world, with approximately two million deaths each year. Among Sub-Saharan African countries, tuberculosis and AIDS represents an enormous problem. In Mozambique, the incidence of tuberculosis is as high as 460 cases/100,000 inhabitants/year, with a mortality rate of 129 people/100,000 inhabitants/year. The present study re-enforces the importance of this problem. A sample of 237 clinical strains of Mycobacterium tuberculosis isolated from HIV-infected patients, living in the city of Maputo, Mozambique, was genotipically characterized by IS6110-RFLP and Spoligotyping. IS6110-RFLP showed a considerable variability (70.5%) corresponding only to genotypes. Limitations in sampling, and scarce epidemiological data, may account for lack of definition of risk factors for TB transmission in this study. A high frequency of strains exhibiting low IS6110 copy number (n=20,2%) was observed. These strains were further genotyped by Spoligotyping. The most frequently found families, characterized with the use of this technique were: LAM, EAI, T and Beijing. These isolates (n=193) could be grouped in 35 clusters. Spoligotyping was more discriminatory for isolates exhibiting less than six IS6110 copies than RFLP. No correlation was found between resistance to INH, or even multidrug-resistance and clustering / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas
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Validação de testes moleculares para detecção de agentes infecciosos direto de amostras clínicas, utilizando a modalidade aberta da plataforma automatizada BD MAX / Molecular test validations for the detection of infectious diseases agents directly from clinical samples using the automated BD MAX open mode platform

Rocchetti, Talita Trevizani [UNIFESP] January 2016 (has links) (PDF)
Submitted by Diogo Misoguti (diogo.misoguti@gmail.com) on 2018-04-18T13:18:24Z No. of bitstreams: 1 Tese-15860.pdf: 879437 bytes, checksum: c869f5350ca0a0b0f13be8ba348f8fa5 (MD5) / Approved for entry into archive by Mariusa Loução (mariusa.loucao@unifesp.br) on 2018-04-18T13:20:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese-15860.pdf: 879437 bytes, checksum: c869f5350ca0a0b0f13be8ba348f8fa5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-18T13:20:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese-15860.pdf: 879437 bytes, checksum: c869f5350ca0a0b0f13be8ba348f8fa5 (MD5) Previous issue date: 2016 / O uso da biologia molecular como ferramenta de diagnóstico microbiológico vem se expandindo no setor da medicina laboratorial. Novas plataformas aparecem com a prerrogativa de facilitar e acelerar o processo de análise. O uso de sistemas automatizados, que realizam extração, amplificação e detecção de ácidos nucleicos dentro da mesma plataforma, permite maior precisão e facilidade ao desenvolvimento de um novo teste por apresentarem todos os processos acoplados e reagentes disponíveis para o processo. Dentre as plataformas automatizadas, uma das que se destacam é o BD Max™ (Becton Dickinson Diagnostics). O sistema BD Max é uma plataforma automatizada aberta, que combina a extração de ácidos nucleicos, PCR (Reação de Polimerização em Cadeia) em tempo real e detecção dentro do mesmo instrumento, oferecendo a opção de usar os testes aprovados pelo Food and Drug Administration (FDA) e também, testes desenvolvidos pelo usuário. Com o objetivo de testar os recursos que a modalidade aberta da plataforma BD Max oferece, foram desenvolvidos três estudos distintos para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos direto de amostras clínicas. Estudo 1: O objetivo deste estudo foi validar um teste multiplex usando a tecnologia PCR em tempo real no sistema aberto BD MAX™, para detectar o complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT), complexo Mycobacterium avium (CMA) e Mycobacterium spp. (PAN) diretamente de amostras clínicas. Quando os resultados do novo teste foram comparados com os resultados da cultura, a reação de PCR apresentou especificidade de 97,1%, 100% e 100% para CMT, CMA e PAN, respectivamente. Estudo 2: O objetivo deste estudo foi validar um teste multiplex usando a tecnologia PCR em tempo real no sistema aberto BD MAX™ para detectar o grupo Mycobacterium abscessus (GMA), complexo Mycobacterium fortuitum (CMF) e Mycobacterium chelonae (MC), diretamente de amostras clínicas. Quando os resultados do novo teste foram comparados com os resultados da cultura, uma concordância de 97%, 100% e 99% para GMA, CMF e MC, respectivamente foi observada. Estudo 3: O objetivo deste estudo foi validar um teste multiplex usando a tecnologia PCR em tempo real no sistema aberto BD MAX™ para detectar e identificar Achromobacter xylosoxidans (AX), Burkholderia cepacia (BC), Pseudomonas aeruginosa (PSA) e Stenotrophomonas maltophilia (SM) diretamente de amostras respiratórias de pacientes portadores de Fibrose Cística (FC). Quando os resultados do novo teste foram comparados com os resultados da cultura, uma alta concordância foi observada entre as duas metodologias. Conclusão: Os 3 testes desenvolvidos provaram ser específicos e sensíveis para detectar por PCR em tempo real microrganismos causadores de infeção direto da amostra clínica. A plataforma automatizada BD Max provou ser uma excelente ferramenta para a realização de testes moleculares automatizados. / The use of molecular biology as a tool for microbiology diagnostic has been expanding in the laboratory routine. Despite of the strong growth of the area, companies can not afford the demand about epidemiological changes around the world and for this reason laboratories opt to develop their own methods. New platforms appear with the prerogative to facilitate and accelerate the analysis process. The use of automated sample-in results-out platforms allows higher precision and facilitates the development of a new test by presenting all attached processes and reagents available for the test. Among platforms that best fits this profile, the BD Max™ (BD Diagnostics) is one of the most used ones. The BD Max system is an automated open platform that combines extraction and real time PCR in the same instrument, offering the option of using tests approved by the FDA or the open platform mode for userdeveloped test. In order to explore the BD Max open mode platform, three differents studies were developed to detect the microorganisms that causes infection directly from clinical samples. Study 1: A multiplex real time PCR was validated on the BD MAX™ open mode system to detect Mycobacterium tuberculosis complex (MTC), Mycobacterium avium complex (MAC) and Mycobacterium spp. (PAN) directly from clinical specimens. When compared to culture results, the new BD MAX PCR test presented specificities of 97.1%, 100% and 100% for MTC, MAC and PAN, respectively. Study 2: A multiplex real time PCR was validated on the BD MAX™ open mode system to detect Mycobacterium abscesses Group (MAG), Mycobacterium fortuitum complex (MFC) and Mycobacterium chelonae (MC) directly from clinical specimens. When compared to culture results, the new BD Max PCR test presented an overall agreement of 97%, 99% and 100% for the detection of MAG, MFC and MC, respectively. Study 3: A multiplex real time PCR was validated on the BD MAX™ open mode system to detect Achromobacter xylosoxidans (AX), Burkholderia cepacia (BC), Pseudomonas aeruginosa (PSA) and Stenotrophomonas maltophilia (SM) directly from clinical specimens collected from Cystic Fibrosis patients. When culture results were compared to the new BD Max PCR test results, a high overall agreement were observed between both methodologies. Conclusion: All 3 tests proved to be specific and sensitive to detect different microorganisms associated with infections, directly from clinical samples. The BD Max proved to be an excellent tool for automated molecular tests.

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