Made available in DSpace on 2015-03-26T13:53:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 446339 bytes, checksum: c80d241c7ba0e6c36aa099cdf1473053 (MD5) Previous issue date: 2009-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The effect of limestone may be limited to the region of its application, due to the low mobility of the products of its dissolution in the soil. Such mobility can be favored by organic acids of low molecular mass, which are released during the mineralization of plant residues. The present work aimed to evaluate the contribution of residues of three forage plant species for the mobility of the products of the dissolution of the limestone applied on the surface. Columns of soil were mounted in PVC tubes with 20 cm of height, in which Brachiaria decumbens cv. Australiano, Melinis minultiflora (molasses grass) and Stylosanthes guianensis var. vulgaris cv. Mineirão were cultivated. After 90 days of growth, limestone was applied (CaCO3 + MgCO3 p.a. with Ca:Mg molar relation of 3:1) on soil surface, according to the following treatments: T1 live plants, in other words, in activity, T2 cut plants and the material of the dried and ground aerial part (< 1 mm) applied on the surface of the soil, T3 cut plants, maintaining only the roots in the soil, T4 application of the material of the aerial part and T5- without application of the plant material, both in non-cultivated columns of soil. Columns without the application of limestone and plant material were also included as the control treatment (T6). Percolations were carried out with water equivalent to a volume of soil pores, determining the concentrations of Ca, Mg, K, inorganic anions (Cl-, CO3 2-, F-, NO3- and SO4 2-,) and organic acids (acetic, butyric, citric, malonic, oxalic and tartaric) in the leachate solutions. In the end of the experiment, the soil columns were separated into segments of 0 - 2,5, 2,5 - 5, 5 - 10, 10 - 15, 15 - 20 cm, in which the contents of Ca2+, Mg2+ and K were determined. It was observed that a higher limestone solubilization occurred in the soil in which plants were maintained alive. There was a distribution of Ca up to 10 cm of depth, regardless of the application of the plant materials. The application of limestone regardless of the application of the plant material promoted more K movement. The application of limestone and plant material of the forage plant aerial parts favored the increase in the lixiviation of Ca, Mg and K and acetic acid. / O efeito do calcário pode limitar-se à região de sua aplicação devido à baixa mobilidade dos produtos da sua dissolução no solo. Esta mobilidade pode ser facilitada por ácidos orgânicos de baixa massa molecular, que são liberados durante a mineralização dos resíduos vegetais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a contribuição de resíduos vegetais de três espécies forrageiras na mobilidade dos produtos da dissolução do calcário aplicado na superfície. Foram montadas colunas de solo em tubos de PVC de 20 cm de altura, nas quais foram cultivadas Brachiaria decumbens cv. Australiano, Melinis minultiflora (capim gordura) e Stylosanthes guianensis var. vulgaris cv. Mineirão. Após 90 dias de crescimento, aplicou-se calcário (CaCO3 + MgCO3 p.a. com relação molar Ca:Mg de 3:1) na superfície do solo de acordo com os seguintes tratamentos: T1 - plantas vivas, ou seja em atividade, T2 - plantas cortadas e o material da parte aérea seco e moído (< 1 mm) aplicado na superfície do solo, T3 - plantas cortadas mantendo-se apenas as raízes no solo, T4 - aplicação do material da parte aérea e T5- sem aplicação do material vegetal, ambos, em colunas de solo não cultivadas. Incluiu-se ainda colunas sem aplicação de calcário e material vegetal como tratamento testemunha (T6). Foram realizadas percolações com água equivalente a um volume de poros do solo determinando-se as concentrações de Ca, Mg, K, ânions inorgânicos (Cl-, CO3 2-, F-, NO3- e SO4 2-,) e ácidos orgânicos (acético, butírico, cítrico, malônico, oxálico e tartárico) nas soluções lixiviadas. Ao final do experimento as colunas de solo foram separadas em seguimentos de 0 a 2,5, 2,5 a 5, 5 a 10, 10 a 15, 15 a 20 cm nos quais determinaramx se os teores de Ca2+, Mg2+ e K. Constatou-se que ocorreu maior solubilização do calcário no solo em que se mantiveram as plantas vivas. Houve distribuição do Ca até 10 cm de profundidade, independente da aplicação ou não dos materiais vegetais. A aplicação de calcário independente da aplicação do material vegetal promoveu maior movimentação do K. A aplicação do calcário e do material vegetal da parte aérea das forrageiras favoreceu maior lixiviação de Ca, Mg e K e do ácido acético. Termos de indexação: calagem superficial, resíduos vegetais, mobilidade de íons, ácidos orgânicos de baixo peso molecular, forrageiras tropicais.

Orientador: Ely Nahas / Banca: Edson Luiz Souchie / Banca: Martha Regina Lucizano Garcia / Resumo: O fósforo (P) é indispensável para todos os organismos e apresenta disponibilidade muito baixa para as plantas. Uma das alternativas para minimizar esse problema está na solubilização de fosfatos insolúveis por microrganismos P-solubilizadores (MSF). A atuação dos MSF têm sido estudada "in vitro" utilizando-se culturas individuais, porém não de forma co-inoculada. Pode se pressupor que em condições naturais deve haver interação entre as espécies. O objetivo deste estudo foi avaliar-se o efeito da co-inoculação de duas espécies de MSF na solubilização de diferentes fontes de P. O fungo Aspergillus niger e a bactéria Burkhoderia cepacia foram crescidos de forma individual e co-inoculados (A niger + B. cepacia) em meio líquido contendo fosfato de cálcio, alumínio ou ferro como fonte de P durante nove dias. O efeito da fonte de carbono (xilose, glicose, sacarose e amido) e da fonte de nitrogênio (cloreto de amônio, glicina, ácido glutâmico e nitrato de sódio) foram avaliados no processo de solubilização. Os fatores que influenciaram direta e indiretamente a solubilização de P como crescimento, acidez e pH, consumo de carbono e atividade enzimática foram avaliados. Quando as fontes de carbono e nitrogênio foram avaliadas, a fonte de P utilizada foi CaHPO4 e os microrganismos foram crescidos durante seis dias. Dentre as fontes de fosfato, o maior crescimento ocorreu com FePO4, a maior quantidade de P solubilizado e atividade de fosfatase ácida foi encontrada com CaHPO4, e a mais alta produção de ácidos e redução do pH foi obtida com AlPO4. A eficiência de solubilização da co-cultura foi sempre maior do que a das culturas individuais em todas as fontes de P. Quando diferentes fontes de carbono foram estudadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Phosphorus is essential for organisms and has very low availability to plants. One alternative to minimize this problem is solubilizing insoluble phosphates forms of P by P-solubilizing microorganisms (PSM). The performance of PSM have been studied "in vitro" using individual cultures, but not in co-culture. It can be assumed that under natural conditions should be interaction between species. The aim of this study was to evaluate the effect of co-inoculation of two species of MPS in to solubilize different sources of P. The fungus Aspergillus niger and Burkhoderia cepacia bacteria were grown individually and co-inoculated (A. niger - B. ceacia) iin liquid medium containing calcium, aluminum or iron phosphate as a source of P for nine days. The effect of carbon source (xylose, glucose, sucrose and starch) and nitrogen source (ammonium chloride, glycine, glutamic acid and sodium nitrate) were evaluated in the process of solubilization. The factors that directly and indirectly influenced the solubilization of P as PSM growth, production of acid, decrease pH, carbon consuption and phosphatase activity were evaluated. When the carbon and nitrogen sources were evaluated, the source of P used was CaHPO4 and MSP were grown for six days. Among the sources of phosphate, the greatest PSM growth was found with FePO4, the largest amount of P solubilized and acid phosphatase activity was found with CaHPO4, and the highest production of acids and pH reduction was obtained with AlPO4. The efficiency of solubilization by co-culture was always greater than that of single cultures in all sources of P. When different carbon sources were studied, the highest rates of CaHPO4 solubilization and PSM growth were observed... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Le but de cette étude est d’évaluer l’utilisation de la chromatographie préparative dans le cadre de la conception d’un procédé de purification d’acides organiques. Les acides principalement étudiés sont les acides lactique et succinique. Ils sont produits par fermentation et utilisés depuis longtemps dans l’industrie comme additifs. Ils sont aussi identifiés comme des molécules plateformes très intéressantes pour le développement de la chimie verte, à partir de carbone renouvelable. En particulier, ils constituent des monomères pour l’industrie des bioplastiques. A la différence des utilisations historiques, ce type d’application requière des niveaux de pureté beaucoup plus importants. Ces puretés sont atteintes via des étapes supplémentaires d’extraction liquide-liquide, de distillation et/ou de cristallisation. Nous avons cherché à évaluer si la mise en œuvre de la chromatographie préparative pouvait permettre d’atteindre les spécifications requises. Pour cela, la chromatographie a été étudiée en détails en tant qu’opération unitaire, afin de mieux comprendre les mécanismes de séparation des composés étudiés et les paramètres de mise en œuvre. Deux types de résine ont été principalement utilisés, une cationique forte et une anionique forte. Dans un premier temps, l’étude thermodynamique de l’adsorption de trois acides organiques en solution pure a été réalisée. Elle a révélé un comportement très différent pour les deux résines : l’adsorption sur la résine cationique forte est assez linéaire alors que sur l’anionique forte, elle est fortement non linéaire et suit un modèle de Langmuir. L’influence de la vitesse sur la forme des pics et donc la dispersion pendant la séparation a ensuite été étudiée. Il a été montré que l’efficacité de la colonne diminue linéairement avec la vitesse d’élution, conformément au modèle de Van Deemter. Il a aussi été mis en évidence que la pente de cette droite est la même à l’échelle laboratoire et sur le pilote à une échelle dix fois plus grande. Elle peut ainsi permettre de prévoir l’évolution de l’efficacité de la colonne au changement d’échelle. Des solutions en mélange synthétiques et réels ont été étudiées, afin d’évaluer l’influence sur la séparation des paramètres opératoires, tels que la charge, la concentration de l’alimentation, le pH… 2 Sur la résine anionique, une première modélisation a été effectuée à partir de ces résultats expérimentaux. Elle a permis de mettre en évidence, qu’un mécanisme d’adsorption de type Langmuir ne suffit pas à expliquer la forme et la position des pics. Nous avons supposé qu’un mécanisme d’échange d’ions de la forme dissociée des acides organiques pourrait aussi entrer en jeu. Cet échange aurait un impact important sur la forme et la position des pics, bien que les acides organiques soient très majoritairement sous leur forme neutre. Les séparations mises en évidence à l’échelle laboratoire ont été validées à l’échelle pilote en chromatographie continue ISMB. Il a été montré que la résine anionique permet d’atteindre une plus grande pureté que la résine cationique avec une productivité similaire. Un procédé complet de purification a pu être testé avec de l’acide succinique, mettant en jeu une acidification par électrodialyse bipolaire, une concentration par osmose inverse, une séparation par chromatographie préparative sur résine anionique forte et une décoloration par nanofiltration. Le produit a ensuite été cristallisé afin de se comparer à un produit industriel. Le produit obtenu est proche des spécifications attendues et est plutôt meilleur que le produit industriel. Une étape supplémentaire d’échange d’ions aurait vraisemblablement permis d’obtenir des cristaux de grade polymère. Nous avons donc montré que la chromatographie a sa place dans un procédé de purification d’acides organiques, dans le but d’obtenir une très haute pureté. / The objective of this study is to evaluate the use of preparative chromatography in the context of the elaboration and optimization of an innovative purification process of organic acids from biotechnology. Lactic and succinic acids were mainly studied. They are produced by fermentation and used in industry as additive, for a long time. They are identified as promising building blocks for green chemistry development, from renewable carbon. In particular, they are monomers for bioplastic industry. Unlike historical utilizations, this new type of application requires much higher purity levels. Those purities are currently obtained by additional purification steps, like liquid-liquid extraction, distillation and/or crystallization. We tried to evaluate if the required specifications may be reached by the implementation of preparative chromatography. For this chromatography was studied in details as unitary operation, in order to better understand separation mechanisms of studied compounds and implementation parameters. Two resin types were mainly used, a strong cationic one and a strong anionic one. Firstly, thermodynamic study of the adsorption of three organic acids in pure solution was performed. It revealed very different performances for both resins: adsorption on strong cationic resin is quite linear, whereas on strong anionic one adsorption is strongly nonlinear and fits with Langmuir model. Elution velocity influence on peak shape and so on dispersion was then studied. Column efficiency decreases linearly with elution velocity, accordingly to Van Deemter model. It was shown that the line slope was identical at lab scale and on a pilot ten times bigger. Then it may be used to predict column efficiency evolution during scale-up. Mixing solutions from synthetic or real origin were studied, to evaluate operational parameter influence on the separation, as load, feed concentration, pH… On the strong anionic resin, a first modeling was developed for experimental results. It highlighted that Langmuir type adsorption mechanism is not able to explain peak shape and position. We supposed that an ion exchange mechanism with the organic acid dissociated part may happen. This exchange may have a significant impact on peak shape and position, even if organic acids are mainly in molecular form, because of a low work pH. 4 Separations established at lab scale were validated at pilot scale in continuous chromatography ISMB. It was demonstrated that the anionic resin allows to reach a higher productivity than the cationic one, with a similar productivity. A complete purification process was tested with succinic acid, using bipolar electrodialysis acidification, reverse osmosis concentration, preparative chromatography separation with a strong anionic resin and nanofiltration discoloration. Product was then crystallized, to be compared to an industrial product. Our crystals were close to waited specifications and relatively better than the industrial ones. An additional ion exchange step could have allows to reach polymer grade. We show that chromatography is useful in an organic acid purification process, in order to reach a very high purity.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-09-10T15:23:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Soares Vieira - 2018.pdf: 5162109 bytes, checksum: 753fa227b88042b5bfa2c68b011d6345 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com), reason: A coleção está errada, pois é Goiânia e você escolheu RC. Caso não tenha como arrumar me devolva que arrumo. on 2018-09-11T11:10:32Z (GMT) / Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-09-18T16:30:12Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Soares Vieira - 2018.pdf: 5162109 bytes, checksum: 753fa227b88042b5bfa2c68b011d6345 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-09-19T12:39:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Soares Vieira - 2018.pdf: 5162109 bytes, checksum: 753fa227b88042b5bfa2c68b011d6345 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-19T12:39:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Soares Vieira - 2018.pdf: 5162109 bytes, checksum: 753fa227b88042b5bfa2c68b011d6345 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Biodiesel production has been increasing every year, which has generated surpluses of glycerin, the main co-product of the transesterification reaction. In the search for applications to this surplus, microbial fermentation has been highlighted as an alternative to add value to this co- product. In this process, microorganisms are used to convert this abundant carbon source into compounds of high economic value, including organic acids and polyols. However, there are still some technological challenges, such as low yield during the fermentation processes and high dependence of new analytical methods, more sensitive and selective, able to identify and quantify the compounds produced. The objective of this work was to establish new analytical methodologies to identify and quantify compounds from bioconversion processes involving the production of organic acids and polyols. To guarantee the quantification of the target compounds, methods based on ultra-high- performance liquid chromatography (UHPLC) were developed and the photodiode array (PDA) and mass spectrometry (MS) detectors were evaluated as alternatives for the monitoring of these two classes of chemical compounds. The analytes investigated in this study were short chain organic acids: citric acid, fumaric acid, glyceric acid, kojic acid, lactic acid, muconic acid, oxalic acid, propionic acid, succinic acid, xylonic acid; and polyols with spatial isomers, including polyols with 4 carbons (C4: erythritol and threitol), 5 carbons (C5: arabitol, ribitol, xylitol), and 6 carbons (C6: dulcitol, iditol, mannitol, sorbitol) and 7 carbons (C7: volemitol). The UHPLC-PDA method developed for the analysis of organic acids was validated by parameters of linearity, limit of detection and quantification, precision and accuracy. The analytical curves showed good linearity with determination coefficients (R²) higher than 0.999 for all organic acids. Precision and accuracy were adequate with intra-day and inter-day variation coefficients below 4.06% and recovery ranged from 94.90% to 109.63%. The developed UHPLC- MS methods presented greater sensitivity and selectivity in the detection of organic acids and polyols, being able to monitor these analytes even in low quantity. The analytical methods developed in this work are crucial tools in the selection or screening of promising microorganisms for low added value substrates conversion and important to optimize biotechnological processes for production of these compounds of interest. / A produção de biodiesel tem aumentado a cada ano, o que vem gerando excedentes de glicerina, principal coproduto do processo de transesterificação. A biotecnologia se destaca como alternativa promissora para agregação de valor à glicerina. Em processos de fermentação, os microrganismos são utilizados para converter essa abundante fonte de carbono em compostos de maior interesse econômico, como ácidos orgânicos e polióis. No entanto, ainda há alguns desafios tecnológicos, como o baixo rendimento dos processos e a falta de métodos analíticos sensíveis e seletivos capazes de identificar e quantificar os compostos produzidos. O objetivo deste trabalho foi estabelecer metodologias analíticas para identificar e quantificar compostos obtidos a partir de processos de bioconversão, tais como ácidos orgânicos e polióis. Para garantir a quantificação destas substâncias-alvo, métodos baseados em cromatografia líquida de ultra-alta eficiência (UHPLC) acoplada aos detectores de arranjo de fotodiodos (PDA) e de espectrometria de massas (MS) foram avaliados como alternativas para o monitoramento dessas duas classes de compostos químicos. Os analitos investigados nesse estudo foram ácidos orgânicos de cadeia curta, incluindo: ácido cítrico, ácido fumárico, ácido glicérico, ácido kójico, ácido lático, ácido mucônico, ácido oxálico, ácido propiônico, ácido succínico, ácido xilônico; e polióis, estereoisômeros contendo 4 carbonos (C4: eritritol e treitol), 5 carbonos (C5: arabitol, ribitol, xilitol), 6 carbonos (C6: dulcitol, iditol, manitol, sorbitol) e com 7 carbonos (C7: volemitol). O método UHPLC-PDA desenvolvido para análise de ácidos orgânicos foi validado pelos parâmetros de linearidade, limite de detecção e quantificação, precisão e exatidão. As curvas analíticas mostraram boa linearidade com coeficientes de determinação (R²) maiores que 0,999 para todos os ácidos orgânicos. A precisão e exatidão demonstraram ser adequadas com coeficientes de variação intra-dia e inter-dia inferiores a 4,06%, e a recuperação variou de 94,90% a 109,63%. Os métodos de UHPLC-MS desenvolvidos apresentaram maior sensibilidade e seletividade na detecção de ácidos orgânicos e polióis, sendo capaz de monitorar esses analitos mesmo eles estando em baixa quantidade. Os métodos analíticos desenvolvidos neste trabalho são ferramentas cruciais na seleção ou triagem dos microrganismos promissores para conversão de substratos de baixo valor agregado e importantes para a etapa de otimização dos processos biotecnológicos de produção desses compostos de interesse.

A presença de Salmonella sp. em suínos ao abate evidencia a necessidade da implantação de programas de controle nas granjas produtoras, tanto pela correção de fatores de risco como pela adoção de medidas auxiliares que contribuam para diminuir o número de animais portadores e excretores da bactéria. O objetivo desse estudo foi testar o efeito da adição de ácidos orgânicos e prebiótico à dieta de suínos infectados experimentalmente por Salmonella Typhimurium. Foram utilizados 46 leitões com 43 dias de idade, distribuídos em blocos casualizados e em quatro tratamentos: T1 – Dieta Basal; T2 - Dieta Basal + Ácido Orgânico Encapsulado; T3 - Dieta Basal + Ácido Orgânico não Encapsulado; T4 - Dieta Basal + Prebiótico (mananoligossacarídeo). As dietas foram administradas aos animais por oito semanas, sendo que após duas semanas todos os animais foram inoculados pela via oral com Salmonella Typhimurium (dia 0PI). Foram realizadas colheitas de sangue (-14, 0, 7, 14, 21, 28 e 35 PI) para pesquisa de IgG anti-Salmonella, e de fezes (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21 e 28) para pesquisa e quantificação de Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus e coliformes totais. No dia 35PI os animais foram eutanaziados e fragmentos de órgãos foram submetidos à pesquisa de Salmonella. Foram coletados segmentos do intestino delgado, de cada animal, para análise de morfometria e pesquisa de IgA de mucosa. Os resultados indicam que a adição de ácidos orgânicos e mananoligossacarídeo na dieta de suínos na fase de crescimento não foi capaz de impedir a infecção dos animais, e a soroconversão foi observada a partir do dia 7PI. Observou-se menor excreção de Salmonella no grupo tratado com mananoligossacarídeo, com diferença estatística no dia 28PI. No dia 35PI, os grupos tratados com ácidos orgânicos e com prebiótico apresentaram menor contagem de Salmonella no conteúdo cecal em um dos blocos do experimento. Apenas na população de Lactobacillus observou-se, em um dos blocos do experimento, aumento significativo nos grupos tratados (T2, T3 e T4) em relação ao grupo controle. Diferenças de morfometria de vilosidades e concentração de IgA na mucosa intestinal não foram observadas entre os grupos. A partir disso, conclui-se que a adição de mananoligossacarídeo na dieta pode contribuir para a menor excreção de Salmonella Typhimurium em suínos. / The presence of Salmonella sp. in pigs at slaughter highlights the need to implement control programs in producing farms, both for the correction of risk factors,and to adoptio measures, which are effective for reducing the number of carrier animals and excretion of the bacteria. The aim of this study was to assess the effect of the addition of organic acids and prebiotic to the diet of pigs experimentally infected with Salmonella Typhimurium. We used 46 piglets, with 43 days old, distributed in a randomized block design with four treatments: T1 - Basal Diet, T2 - BD + Encapsulated Organic Acid, T3 - BD + not Encapsulated Organic acid, T4 - BD + prebiotic (mannanoligosaccharide). The diets were fed to animals for eight weeks, and after two weeks all animals were inoculated orally with Salmonella Typhimurium (day 0 PI). Blood was collected (-14, 0, 7, 14, 21, 28 and 35 PI) for the detection of IgG anti-Salmonella, and feces (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21, 28) for detection and quantification of Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus and Coliforms. On 35PI, the animals were euthanized and organs samples were collected for Salmonella. Segments of the small intestine of each animal for morphometric analysis and mucosal IgA detection. The results indicate that the addition of mannanoligosaccharide and organic acids in the diet of pigs in the growing phase was not able to prevent infection of animals, and seroconversion occurred on the day 7PI. There was a lower excretion of Salmonella in the group treated with mannanoligosaccharides, with no statistical difference in the day 28PI. On day 35PI, the groups treated with both organic acids and prebiotics showed lower counts of Salmonella in cecal contents. A significant increase on the Lactobacillus population was observed in the treated groups (T2, T3 and T4), in are experimental block. No differences in morphology of villi and concentration of IgA in the intestinal mucosa were observed between the groups. We conclude that the addition of mannanoligosaccharides in the diet can contribute to decrease excretion of Salmonella Typhimurium in pigs.

Destaca-se a Salmonella como um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos, devido ao fato de estar amplamente distribuído na natureza, possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e apresentar cepas multiresistentes aos antimicrobianos. Salmonella Enteritidis tornou-se um grande problema de saúde pública no Brasil, a partir da década de 80, quando foi associada a produtos avícolas. Desde 1962, a Salmonella Heidelberg tem sido isolada de aves e produtos derivados e aves no Brasil e tem reconhecida importância para saúde humana e em poedeiras comerciais na América do Norte. O presente trabalho teve por objetivo o estudo de diferentes cepas de Salmonella Heidelberg (SH) em comparação com Salmonella Enteritidis (SE) em pintinhos e frangos de corte no que diz respeito à capacidade de invasibilidade de órgãos, persistência de excreção fecal e alterações na morfometria intestinal. Para o estudo in vivo, 65 isolados de SH foram avaliados quanto à presença dos genes de virulência invA, lpfA e agfA e diferenciados por eletroforese em campo pulsado (PFGE). Outro objetivo foi testar uma mistura de ácidos orgânicos e óleos essenciais no controle de excreção fecal de SE. Duas amostras de SH não relacionadas pelo método de PFGE (SH23 e SH35) e uma cepa de SE padrão foram selecionadas para a inoculação das aves. As três cepas promoveram alteração na medida de vilosidades e criptas dos pintinhos, frente a grupo controle. A cepa SH35 promoveu maior reação inflamatória nos cecos. Ambas as cepas testadas foram capaz de atingir o fígado de pintinhos às 6 horas pós-inoculação. Tanto a SE como a SH demonstram persistência e intermitência de excreção fecal em frangos de corte até os 21dias pós-inoculação. A mistura de ácidos e óleos essenciais foi eficaz na redução da excreção fecal de SE, porém somente com o uso contínuo da mistura na ração. As cepas apresentaram comportamentos diferentes quando inoculadas em frangos de corte e devido à persistência destas nos intestinos dos frangos, prejuízo para as aves podem ocorrer, enquanto a subseqüente contaminação de carcaças, representa risco para a saúde humana. / Salmonella, one of the most important food borne pathogen due to the widely distribution in nature, large number of reservoirs, to show unspecific host serotypes and provide multiresistant strains to antibiotics. Salmonella Enteritidis became a big public health problem in Brasil, since 80’s, when it was correlated with poultry products. Since 1962, Salmonella Heidelberg has been isolated from birds and poultry products in Brazil, with importance in human health and layers in North America. The present work aimed to the study of different strains of Salmonella Heidelberg (SH) and compared with Salmonella Enteritidis (SE) in chicks and broiler chickens with regard to the ability of invasibilidade of organs, persistence of fecal excretion and changes in intestinal morphometry. For the in vivo study, 65 isolates of SH were evaluated for the presence of virulence genes invA, lpfA and agfA and differentiated by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). Another objective was to test a organic acids and essential oils mixture for controlling SE fecal excretion. Two not related SH samples by the method of PFGE (SH23 and SH35) and a standard strain of SE were selected to the poultry inoculation. The three strains promoted changes in the measures of villi and crypts of the chicks intestine, when compared to the control group. The SH35strain promoted greater inflammatory reaction in the caeca. Both strains tested were able to achieve the chicks liver at 6 hours post inoculation. Both strains, SE and SH, showed persistence and intermittence of fecal excretion in broiler chickens until the 21days post-infection. The organic acids and essential oils mix was effective in reducing the SE fecal excretion, but only with the continuous use of the mix added to the feed. The strains showed different behavior when inoculated in broiler chickens, and because of the persistence of these strains in the chickens intestines, injury to birds may occur, while the subsequent carcasses contamination represents risk to human health.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-08T13:14:09Z No. of bitstreams: 1 Whaubtyfran Cabral Teixeira.pdf: 1497967 bytes, checksum: f5ad9149b6e14271f4c7730a6a0bed81 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-08T13:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Whaubtyfran Cabral Teixeira.pdf: 1497967 bytes, checksum: f5ad9149b6e14271f4c7730a6a0bed81 (MD5) Previous issue date: 2015-02-19 / The search for a digestive effectiveness of neonatal causes the birds in eggs supplemental organic acids may be an alternative for an intestinal maturation and increased early weight gain. This study aimed to evaluate the effects of sodium butyrate administration in ovo on hatchability, zootechnical and morphometric aspects of broiler chickens. Therefore, we used 900 eggs arrays of Cobb-500 strain at 36 weeks of age. The project was developed in two stages, the first being the incubation period and the second the initial phase of creation. Incubation was conducted in hatchery Mauricea Food in single stage. Upon the transfer on day 18, the eggs with viable embryos were inoculated with the vaccine and the treatments were: Group 1 - vaccinated egg; Group 2 - immunized egg plus 0.3 ml of sterile water (placebo); Group 3 - egg vaccinated plus 0.3 ml of solution containing 8,0 mg Sodium butyrate at 98% (Sigma-Aldrich). Obtained 89.33% hatching for the control group, 97% hatched for the placebo group and 94.7% in the group consisting of embryos inoculated with 8,0 mg of sodium butyrate. For the evaluation of performance, mixed 360 birds were housed in experimental boxes at the Experimental Station of Small Animal of the UFRPE. The group that received butyrate showed the best result in feed conversion than the others and a lower feed intake, and present a greater feed efficiency and increased absolute weight. Each week until the birds have completed 14 days of age, four animals per experimental plot were weighed, then were euthanized by cervical dislocation, which were collected jejunum fragments. Supplementation in eggs stimulated growth of the heights of the villi of the jejunum, with more significant results for the group receiving butyrate and demonstrating its greatest effect until 7 days old. / A busca pela eficácia digestiva das aves neonatais faz com que a suplementação in ovo com ácidos orgânicos seja uma alternativa para um amadurecimento intestinal e um maior ganho de peso precoce. O presente trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos da inoculação do butirato de sódio in ovo sobre a eclodibilidade, morfometria do jejuno e no desempenho inicial de frangos de corte. Para tanto foram utilizados 900 ovos de matrizes da linhagem Cobb-500 com 36 semanas de idade. O projeto foi desenvolvido em duas etapas, sendo a primeira o período de incubação e a segunda a fase inicial da criação. A incubação foi conduzida no incubatório da Mauricéa Alimentos em máquina de único estágio. No momento da transferência no 18º dia de incubação, os ovos com embriões viáveis foram inoculados com a vacinação e os tratamentos estudados foram: Grupo 1 – Ovo vacinado (controle); Grupo 2 – Ovo vacinado mais 0,3 ml de água esterilizada (placebo); Grupo 3 – Ovo vacinado mais 0,3 ml de solução contendo 8,0 mg de butirato de Sódio a 98% ( Sigma- Aldrich). Obteve-se 89,33% de eclosão para o grupo controle, 97% de eclosão para o grupo placebo e 94,7% para o grupo composto de embriões inoculados com 8,0 mg de butirato de sódio. Para a avaliação do desempenho zootécnico, 360 aves mistas foram alojadas em boxes experimentais na Estação Experimental de Pequenos Animais da UFRPE. O grupo que recebeu o butirato de sódio foi o que apresentou melhor resultado na conversão alimentar em relação aos demais e um menor consumo de ração, além de apresentar uma maior eficiência alimentar e um maior peso absoluto. A cada semana, até as aves completarem 14 dias de idade, quatro aves por parcela experimental foram pesadas, posteriormente foram eutanasiadas por deslocamento cervical, das quais foram coletados fragmentos do jejuno para estudo morfológico e morfométrico. A suplementação in ovo estimulou o crescimento das alturas das vilosidades do jejuno, com resultados mais expressivos para o grupo que recebeu o butirato de sódio e demonstrando seu maior efeito até os 7 dias de idade.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-14T18:15:40Z No. of bitstreams: 1 Erica de Oliveira Silva.pdf: 1403409 bytes, checksum: a688216735ac9dba44682d2f6e21d83a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-14T18:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica de Oliveira Silva.pdf: 1403409 bytes, checksum: a688216735ac9dba44682d2f6e21d83a (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In tropical conditions, the availability of phosphorus (P) in the soil for plants is one of the main limiting factors. One of the alternatives to reduce the cost of fertilization is the use of natural phosphate rock. The activity of phosphate solubilizing microorganisms is critical to use of phosphate fertilizers of low solubility. This work aimed to evaluate the changes introduced in the chemical and biological attributes of a Entisol cultivated with corn, by the application of water-soluble phosphate fertilizer, Gafsa rock phosphate and phosphatic biofertilizers. The experiment was conducted in two stages. The first step was performed to produce biofertilizers and biofertilizers in the second stage that showed better solubilization of phosphorus were used in growing corn in pots in the greenhouse The biofertilizers: poultry manure + Gafsa Phosphate (CA + FG) and bovine manure + Gafsa Phosphate (EB + FG), were produced in plastic pots with a capacity of 1000 mL over a period of 60 days. The experimental design was completely randomized in a 6 x 2 factorial with four replications, six sources of phosphorus: Gafsa Phosphate (FG), simple superphosphate (SS), poultry manure + Gafsa Phosphate (CA + FG), bovine manure + Gafsa Phosphate (EB + FG), poultry manure + single superphosphate (CA + SS), bovine manure + simple superphosphate (EB + SS) and two application forms: Incorporated (I) and surface (S). The parameters evaluated were: dry mass of roots and shoots, chemical characterization of soil and plant, biological indicators of soil phosphatase enzyme activity and identification and quantification of organic acids in the soil and rhizosphere. The results were submitted to analysis of variance and the averages of the data separated by the Scott-Knott test, at 5% probability. The lower content of P in the soil was determined by the addition of FG (8.42 mg kg-1). Fertilization with EB + FG and CA + FG so embedded produced the highest dry matter (MSPA), 10.55 and 9.20 g plant-1. The EB + FG showed the highest values of microbial biomass carbon (C-MBC), total organic carbon (COT) and microbial quotient (qMIC) and lower values of basal respiration (C-O2), metabolic quotient (qCO2), water-soluble carbon (CSA), indicating high stability of the microbial activity. The highest activity of alkaline phosphatase was verified by treating EB + SS, while the highest acid phosphatase activity was verified by treatment with EB + FG. The samples analyzed in the gas chromatograph detected the presence of acetic acid, propionic acid and butyric, with acetic more significant. In samples from the rhizosphere of corn plants were identified three low molecular weight acids, acetic, propionic and butyric acids, but in much higher concentrations than in the soil. / Em condições tropicais, a disponibilidade de fósforo (P) no solo para as plantas é um dos principais fatores limitantes da produção. Uma das alternativas para reduzir o custo com as adubações é o uso de fosfatos de rocha natural. A atividade dos microrganismos solubilizadores de fósforo é fundamental para uma utilização dos fertilizantes fosfatados de baixa solubilidade. Este trabalho teve como objetivo avaliar as alterações promovidas nos atributos químicos e biológicos de um Neossolo Regolítico, cultivado com milho, pela aplicação de fertilizante fosfatado hidrossolúvel, fosfato natural de Gafsa e biofertilizantes fosfatados. O experimento foi conduzido em duas etapas. Na primeira etapa foi realizada a produção de biofertilizantes e na segunda etapa os biofertilizantes que apresentaram melhor solubilização de fósforo foram utilizados no cultivo de milho em vasos, em casa de vegetação Os biofertilizantes: Cama de aviário + Fosfato de Gafsa (CA+FG) e Esterco bovino + Fosfato de Gafsa (EB+FG), foram produzidos em potes plásticos com capacidade de 1000 mL durante um período de 60 dias. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 6 x 2 com quatro repetições, sendo seis fontes de fósforo: Fosfato de Gafsa (FG), Superfosfato simples (SS), Cama de aviário + Fosfato de Gafsa (CA+FG), Esterco bovino + Fosfato de Gafsa (EB+FG), Cama de aviário + Superfosfato simples (CA+SS), Esterco bovino + Superfosfato simples (EB+SS) e duas formas de aplicação: Incorporada (I) e em Superfície (S). Os parâmetros avaliados foram: massa seca de raiz e parte aérea, caracterização química de solo e planta, indicadores biológicos do solo, atividade enzimática de fosfatase e identificação e quantificação dos ácidos orgânicos presentes no solo e na rizosfera. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância, sendo as médias dos dados separadas pelo teste Scott-Knott, ao nível de 5% de probabilidade. O menor teor de P no solo foi determinado pela adição de FG (8,42 mg kg-1). A adubação com EB+FG e CA+FG de forma incorporada proporcionaram as maiores produções de matéria seca de parte aérea (MSPA), 10,55 e 9,20 g planta-1. O EB+FG apresentou os maiores valores de carbono da biomassa microbiana (C-CBM), carbono orgânico total (COT) e quociente microbiano (qMIC) e menores valores de respiração basal (C-O2), quociente metabólico (qCO2), carbono solúvel e água (CSA), indicando alta estabilidade da atividade microbiana. A maior atividade da fosfatase alcalina foi verificada pelo tratamento EB+SS, enquanto que a maior atividade da fosfatase ácida foi verificada pelo tratamento com EB+FG. As amostras de solos analisadas no cromatógrafo gasoso detectaram a presença do ácido acético, butírico e propiônico, sendo o acético mais expressivo. Nas amostras da rizosfera de plantas de milho foram identificados três ácidos de baixo peso molecular, acético, butírico e propiônico, porém em concentrações muito mais elevadas do que no solo.

Orientador: Paula Regina Kuser Falcão / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T04:08:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caminha_IsabelPereira_M.pdf: 3436107 bytes, checksum: b845e4fcef68195720f058be396caa68 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A capacidade de Gluconacetobacter diazotrophicus produzir ácidos orgânicos representa uma das suas potenciais aplicações biotecnológicas. Entretanto, a via metabólica do gluconato é bastante complexa e, muitas vezes, inviável economicamente. Este estudo tem como objetivo buscar uma maneira de otimizar a síntese do produto de interesse. A opção sugerida é alterar as enzimas envolvidas na conversão de gluconato em cetogluconatos, visando aumentar a concentração de ácido glicônico. A mutagênese dirigida é uma técnica utilizada neste tipo de estudo, entretanto, realizar e avaliar diversos tipos de mutações exige grande demanda de tempo e recursos financeiros. A biologia computacional pode ajudar a encurtar o caminho dos processos experimentais, por isto foi utilizada neste estudo. Após uma busca no genoma de G. diazotrophicus, foram selecionadas oito ORFs relacionadas com a produção de ácido glicônico. Como nenhuma delas possui uma estrutura resolvida experimentalmente, foi utilizada uma técnica de predição, a modelagem por homologia, com o objetivo de inferir a respeito do funcionamento de cada proteína. Uma estratégia de substituição de resíduos selecionados por alaninas aliada à modelagem molecular foi utilizada para avaliar o impacto dessa mutação. Um estudo da via metabólica do gluconato em diversos organismos forneceu dados suficientes para eleger os dois melhores alvos para a mutagênese, uma gluconato 5-desidrogenase e uma putativa gluconato quinase, ambas relacionadas com a conversão de ácido glicônico em cetogluconatos. A partir de um estudo do mecanismo catalítico das enzimas, foi possível selecionar os possíveis resíduos críticos para a atividade enzimática. Estes foram substituídos, in silico, por alaninas, e as consequências das alterações foram analisadas. As mutações que acusaram um impacto no funcionamento da enzima foram Arginina 106 e Serina 152 na gluconato 5-desidrogenase, e Histidina 133 na gluconato quinase. Espera-se que, ao substituirmos estes resíduos, o potencial catalítico seja minimizado ou até mesmo inativado, diminuindo a quantidade de gluconato convertido em outros produtos. Estes resultados serão testados experimentalmente por colaboradores. / Abstract: The ability of Gluconacetobacter diazotrophicus to produce organic acids represents one of its potential biotechnological applications. However, the metabolic pathway of gluconate is quite complex and often impracticable economically. This study aims to find a way to optimize the synthesis product of interest. The suggested option is to alter the enzymes involved in the conversion of gluconate into cetogluconates, to increase the concentration of gluconic acid. Site directed mutagenesis is a technique used in this type of study, however, implement and evaluate various types of mutations requires a great deal of time and financial resources. The computational biology can help shorten the path of experimental processes, so it was used in this study. After a search in the genome of G. diazotrophicus, eight ORFs were selected related to the production of gluconic acid. As there is little physical or structural information available for this enzyme, we used a technique of prediction, homology modeling, in order to infer about the function of each protein. A molecular modeling approach with an amino acid replacement by alanines strategy was employed to assess the impact of this mutation. A study of the metabolic pathway of gluconate in several organisms has provided sufficient data to choose the two best targets for mutagenesis, a gluconate 5-dehydrogenase and a putative gluconate kinase, both related to the conversion of gluconic acid in cetogluconates. From a study of the catalytic mechanism of enzymes, it was possible to select any residues critical for enzymatic activity. These were replaced in silico by alanines, and the consequences of changes were analyzed. Detailed analysis of the modeled structures reveals that the mutations that may cause an impact on the functioning of the enzyme were Arginine 106 and Serine 152 in gluconate 5- dehydrogenase, and Histidine 133 in gluconate kinase. It is expected that, in replacing these residues, the catalytic potential is minimized or even inactivated, reducing the amount of gluconate converted into other products. These results will be experimentally tested by collaborators, and once proved right our findings may be applicable in the use of this bacteria in biotechnological processes / Mestrado / Bioinformatica / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientadores: Gabriela Alves Macedo, Wilma Spinosa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-06T19:17:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bellini_MarciaZilioli_M.pdf: 1442214 bytes, checksum: 4ed8ebf75452ab7ccac8bd227633fb41 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O Vinagre, alimento consumido em grande parte do mundo, pode ser produzido a partir de diferentes matérias-primas, desde que o substrato apresente fontes de carboidratos fermentescíveis e alguns micro-nutrientes como vitaminas do complexo B e minerais. As alusões sobre os efeitos medicamentosos do vinagre são inúmeras e pouco comprovadas cientificamente. A literatura sobre o assunto concentra-se basicamente, na Ásia e parte da Europa, principalmente na região do Mediterrâneo onde é muito consumido. Os efeitos benéficos à saúde do consumo moderado de vinho têm sido amplamente estudados nos últimos anos. Estes, têm sido atribuídos principalmente ao conteúdo de polifenóis e da atividade antioxidante deste compostos (Alonso et al., 2004). Produtos derivados do vinho, dentre eles o vinagre, também contém polifenóis e podem possuir uma certa atividade antioxidante, contribuindo igualmente para um efeito protetor do organismo. Além da presença de compostos polifenólicos, o vinagre apresenta uma série de ácidos orgânicos, sendo o principal o ácido acético. Estudos comprovam o efeito bactericida e bacteriostático desses ácidos (Silva et al, 2001), bem como uma elevada atividade antimutagênica (Lankaputra, 1998). O vinagre é um produto de fácil acesso no Brasil, porém pouco valorizado comercialmente devido, em parte, ao desconhecimento do consumidor de suas propriedades funcionais. Isto é um reflexo do pequeno número de pesquisas realizadas no país sobre este tema. Estudos realizados na Europa e Ásia comprovam o grande número de compostos funcionais presentes nos vinagres produzidos nestas regiões, aumentando ainda mais sua importância na dieta local. Apesar do número razoável de estudos sobre vinagre no exterior, a maioria dos dados obtidos nestas pesquisas não pode ser atribuída aos vinagres nacionais, por estarem diretamente relacionados à matéria prima utilizada. Este projeto analisou a atividade antioxidante, conteúdo de fenóis totais, perfil de ácidos orgânicos e seqüestro de radical DPPH de vinagres brasileiros. O perfil de ácidos orgânicos nas amostras analisadas evidenciou a relação direta entre a presença desses ácidos com a matéria-prima fermentada, podendo ser um importante controle na qualidade do produto industrializado. As análises sugeriram que o conteúdo de fenóis totais influi nas propriedades antioxidantes e de seqüestro de radicais livres dos vinagres. Isto é provado nos experimentos usando vinagre de álcool envelhecidos em madeira / Abstract: Vinegar, which can be made from starch or prepared from fermentable raw material, is a widely consumed acid seasoning and contents vitamins, minerals and others nutrients. There is a historical evidence from vinegar medicinal uses due to such physiological functions as digestive, appetite stimulating, exhaustion recovering effects, improve blood fluidity and antimicrobial effects. Since vinegar present a low consume per capta and no nutricional effects recognized in Brazil, there is an interest in study this product in order improve and standardize the production in Brazil. This project was interested in antioxidant activity, total phenolic content, organic acids profile and DPPH radical scavenging properties from brazilian vinegars. The organic acid profile from each sample was determined and can be an important control quality tool to related industries. The analysis suggest that the total phenolic content affect the antioxidative and radical scavenging properties from vinegars. This is proved in the experiment using wood lices to conserve and aging ethanol vinegar / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos