Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-10-10Bitstream added on 2014-06-13T20:24:31Z : No. of bitstreams: 1 pretel_h_dr_arafo.pdf: 3205750 bytes, checksum: ce5e74583f1240f03a35e00b3edb32bb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O estudo investigou os efeitos da radiação eletromagnética não ionizante emitidos pelos diodos LASER com comprimento de onda no espectro 688 ηm e 785 ηm, e diodo LED 635 ± 10 ηm, associados ao capeamento direto com hidróxido de cálcio em exposições pulpares mecânicas. Avaliou-se assim em dentes de macacos-prego a resposta pulpar baseado na morfologia das células pulpares, no processo inflamatório local, na formação da barreira mineralizada, e na organização do tecido pulpar nos diferentes grupos estudados. Discutiu-se também as diferentes fontes de emissão de radiação eletromagnética comparando os resultados obtidos de estimulação pulpar com os diodos LASER e LED, os quais apresentam energia coerente e não-coerente, respectivamente. Os resultado mostraram uma estimulação em todos os grupos irradiados com melhores resultados para o estímulo com LASER, quando comparado ao grupo tratado isoladamente com hidróxido de cálcio. Concluímos assim que a estimulação de energia eletromagnética LASER e LED associado ao capeamento pulpar direto com hidróxido de cálcio apresentou aceleração no processo de reparação tecidual. Porém, há necessidade de novos estudos com diferentes parâmetros de irradiação a fim de se obter protocolos cada vez mais eficientes para o estudo dos efeitos da luz sobre o processo de reparação pulpar. / The aim of this study was to compare the effects of non-ionizing electromagnetic radiation emitted by LASER diodes 688 ηm and 785 ηm, and LED diode 635 ± 10 ηm associated to direct pulp capping with calcium hydroxide in traumatic pulp exposures were investigated. Based on pulp cells morphology, on the local inflammatory process, on mineralized barrier formation and on pulp tissue organization, the pulp response in capuchin monkey teeth was evaluated in different groups. It was also discussed the different electromagnetic radiation emission sources effects comparing the obtained results of pulp stimulation with diodes LASER and LED, which present coherent and non-coherent energy respectively. Stimulation was observed in all irradiated groups, being the best results achieved with LASER stimulation, when compared to the group treated only with calcium hydroxide. Thus, it is concluded that the electromagnetic LASER and LED energy stimulation associated with calcium hydroxide direct pulp capping accelerated the tissue repair process. However, further studies with different stimulation parameters in order to obtain increasingly efficient protocols to study light effects on pulp repair are necessary.

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Banca: Marcelo Gianini / Resumo: No clareamento dental caseiro são utilizados géis clareadores contendo baixas concentrações de peróxido de carbamida (PC). Entretanto, o componente ativo responsável pelo clareamento é o peróxido de hidrogênio (H2O2), o qual pode se difundir através do esmalte e dentina e causar efeitos tóxicos sobre células pulpares. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade trans-amelodentinária de géis clareadores à base de PC sobre células odontoblastóides MDPC- 23 após diferentes tempos de contato dos produtos com o esmalte, bem como o efeito do clareamento na estrutura dental. Para avaliação da citotoxicidade, discos de esmalte/dentina obtidos de incisivos bovinos foram adaptados em câmaras pulpares artificiais. Géis clareadores com 10% ou 16% de PC foram aplicados por 8 horas diárias sobre a superfície de esmalte pelos períodos de 1, 7 ou 14 dias. Os extratos (meio de cultura + produtos do gel clareador que se difundiram através do esmalte/dentina) foram aplicados por 1 hora sobre as células em cultura, sendo realizada avaliação do metabolismo celular pelo teste do MTT (α=5%; Anova um critério e teste de Tukey), e da morfologia celular por MEV. Para avaliação das alterações estruturais do esmalte, foi realizada mensuração da microdureza Knoop (α=5%; Anova dois critérios e teste de Tukey) em blocos de esmalte (50g/15s) antes do clareamento e nos períodos de 1, 7 e 14 dias, bem como avaliação da morfologia superficial por MEV. Os resultados não demonstraram diferença significante para o metabolismo celular entre o grupo controle e nos grupos onde foi aplicado o gel com PC a 10% (p>0.05). Já para os grupos clareados com 16% de PC, foi observado diferença significante nos períodos de 1, 7 e 14 dias quando comparados ao grupo controle (p<0.05). Não houve diferença significante quando se comparou os grupos 10% e 16% de PC em todos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The home bleaching technique uses gels with low concentrations of carbamide peroxide (CP). However, the hydrogen peroxide is the active component and can difuse by enamel and dentine to cause toxic effects on pulp cells. The purpose of this study was to evaluate the trans-enamel and transdentinal cytotoxicity of bleaching gels based on carbamide peroxide (CP) on odontoblast-like cells after different contact times of the products with enamel, and the effects of bleaching on the tooth structure. To analyze the citotoxicity, enamel/dentine discs were obtained from bovine incisors and placed in artificial pulp chambers. Bleaching gels containing 10% or 16% CP were applied for 8 hours/day on the enamel side of the discs during periods of 1, 7 or 14 days. The extracts (culture medium plus bleaching gel products that diffused through the discs) were collected and applied on previously cultured MDPC-23 cells for 1 hour. Cell metabolism was evaluated by the MTT assay (α=0.05; one-way ANOVA and Tukey's test), and the cell morphology was analysed by SEM. To evaluate the structural changes on the enamel, the Knoop microhardness was analized (α=0.05; two-way ANOVA and Tukey's test) on enamel blocks (50g/15s) before and after 1, 7 and 14 applications of bleaching agent, and the morphological surface was analized by SEM. There were no significant difference (p>0.05) for cell metabolism between the controls and the groups bleached with 10% CP gel. In the groups bleached with 16% CP gel, however, cell metabolism decreased significantly (p<0.05) at 1, 7 and 14 days. There was no significant difference (p>0.05) among 1, 7 or 14 applications of the gels for either of the CP concentrations. The microhardness for the groups bleached with 10% CP gel have difference with the control group after 7 and 14 applications. For the groups bleached with 16% of CP, significant difference was observed in all periods... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-05-31Bitstream added on 2014-06-13T20:17:12Z : No. of bitstreams: 1 aranha_amf_me_arafo.pdf: 2216887 bytes, checksum: 9d8c11a616cef00be35afe6f01cc901d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade in vitro de cimentos de ionômero de vidro modificados por resina para forramento, quando submetidos a diferentes tempos de fotoativação, utilizando cultura de células imortalizadas de linhagem odontoblástica (MDPC-23). Foram confeccionados 40 espécimes de cada material experimental (Fuji Lining LC e Vitrebond). Filtros de papel embebidos com 5æL de PBS ou com 5æL de HEMA puro foram usados como controle negativo e positivo (n = 10), respectivamente. Quatro diferentes tempos de fotoativação foram avaliados: ausência de fotoativação, metade do tempo recomendado pelo fabricante (15s), tempo recomendado pelo fabricante (30s) e uma vez e meia o tempo recomendado pelo fabricante (45s). Os espécimes foram posicionados em compartimentos de recipientes plásticos para cultura de células e, 1 mL do meio de cultura DMEM suplementado, contendo cerca de 3 X 104 células MDPC-23/cm2 foi introduzido em cada um dos mesmos. Em seguida, estes foram mantidos por 72 horas em estufa com 100% de umidade à 37ºC, com 5% de CO2 e 95% de ar. A citotoxicidade foi avaliada por meio do teste de viabilidade celular (teste do MTT) e da análise da morfologia celular pela microscopia eletrônica de varredura. A análise estatística determinou que o Fuji Lining LC apresentou menor citotoxicidade que o Vitrebond (p<0,05) e ambos os materiais proporcionaram uma redução no metabolismo celular de 9,3% e 80,7%, respectivamente. A citotoxicidade do Fuji Lining LC aumentou acentuadamente na ausência de irradiação pela luz, entretanto o mesmo não foi observado para o Vitrebond. O tempo de fotoativação não exerceu influência na toxicidade de ambos os cimentos para forramento quando estes foram aplicados sobre a cultura de células da linhagem odontoblástica- MDPC-23. / The aim of this in vitro study was to evaluate the cytotoxicity of resin-modified glass-ionomer lining cements submitted to different light-curing times, applied to an immortalized odontoblast-cell line. Forty round-shaped specimens of each experimental material (Fuji Lining LC and Vitrebond) were prepared. Sterilized filter papers soaked with either 5æL of PBS or 5æL of pure HEMA were used as negative and positive control (n = 10), respectively. Four different light-curing times were evaluated: no light activation, light activation for half of the time recommended by the manufactures (15s), manufacturersþ recommended time (30s) and light activation for 1.5 times the manufacturersþ recommended time (45s). The specimens were placed into wells of 24-well dishes and odontoblast-like cells MDPC-23 were plated at 3 X 104 cells/cm2 in each well. Culture medium (DMEM) with 10% of fetal bovine serum, supplemented with penicillin, streptomycin and glutamine was used. Finally, the well dishes were maintained for 72 hours in a humidified incubator at 37ºC, with 5% of CO2 and 95% air. The cytotoxicity was evaluated by the test of cellular viability, Methyltetrazolium assay (MTT) and the cell morphology was assessed using a scanning electron microscope (SEM). The statistical analysis determined that Fuji Lining LC was less cytotoxic than Vitrebond (p <0,05) and both materials provided a reduction in the cellular metabolism of 9,3% and 80,7%, respectively. The cytotoxicity of Fuji Lining LC remarkably increased in the absence of light activation, while the same was not observed for Vitrebond. The length of light curing (15s, 30s and 45s) did not influence the toxicity of both lining materials when applied on a odontoblast-cell line-MDPC-23.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-02-24Bitstream added on 2014-06-13T20:56:55Z : No. of bitstreams: 1 souza_ppc_me_arafo.pdf: 243435 bytes, checksum: 28d373d64f165dedc9e32182238f196c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo teve como objetivo geral utilizar células da linhagem MDPC-23 em testes de citotoxicidade de materiais e na investigação dos efeitos de proteínas bioativas no estímulo da síntese de componentes da matriz dentinária. Os objetivos específicos foram avaliar o efeito citotóxico de soluções utilizadas na lavagem de paredes cavitárias e de materiais dentários recomendados para aplicação em dentina sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Também foi intuito avaliar o efeito do concentrado de proteínas extraídas da dentina de coelho sobre a expressão de genes específicos. Este trabalho, apresentado na forma de três artigos científicos, utilizou a técnica de MTT para avaliar o efeito citotóxico de soluções de CLX em variadas concentrações sobre as células MDPC-23. Esta técnica foi utilizada também para a investigação do efeito citotóxico de três diferentes cimentos de ionômero de vidro modificados por resina: Vitrebond (VB); Vitremer (VM); e RelyX Luting Cement (RX), associada ao teste de implantação destes materiais resinosos no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos. A expressão dos genes que codificam para colágeno tipo-1 e fibronectina nas células expostas ao concentrado de proteínas extraídas da dentina de coelhos foi avaliada por RT-PCR. Os resultados demonstraram que a CLX é citotóxica às células da linhagem MDPC-23 de maneira dose-dependente. Também foi demonstrado que os cimentos de ionômero de vidro são biocompatíveis ao tecido conjuntivo subcutâneo de ratos, apesar de apresentarem diferentes graus de citotoxicidade sobre as células odontoblastóides. As proteínas bioativas extraídas da dentina de coelhos apresentaram efeito estimulatório na expressão de genes que codificam para colágeno tipo-1 e fibronectina. Pode-se concluir que as células MDPC-23 são um modelo que pode ser utilizado nos testes de... . / The general aim of this in vitro and in vivo study was to evaluate the cytotoxicity of rinsing solutions and dental materials as well as to determine the expression of genes related with the dentinogenesis. The specific objectives were to evaluate the cytotoxicity effects of rinsing solutions used to clean cavity walls and dental materials used to restore dental cavities. The effects of EDTA soluble dentin proteins (members of TGF-â superfamily) on specific gene espression was also evaluated. For this porpose three scientific papers were prepared: 1) MTT assay was employed to investigate the cytotoxic effects of different concentrations of chlorhexidine to MDPC-23 cells as well as to; 2) to determine the cytotoxicity of three different resin-modified glass-ionomer cements (RMGIC): Vitrebond (VB); Vitremer (VM); and RelyX Luting Cement (VM). The results of this in vitro study was compared to the in vivo study in which RMGICs were implanted into the connective tissue of rats; 3) Type-1 collagen and fibronectin gene expression on cells exposed to EDTAsoluble dentin proteins was assessed by means of semi-quantitative RT-PCR. The results demonstrated that chlorhexidine is cytotoxic to MDPC-23 cells in a dose-dependent way. It was also demonstrated that RMGICs are biocompatible following implantation into surgical pockets prepared in the dorsal connective tissue of rats in spite of the different degrees of in vitro cytotoxicity presented by these materials to MDPC-23 cells. The stimulatory effects of the bioactive molecules on the expression of the genes that encodes to type-1 collagen and fibronectin was clearly demonstrated. Based on the experimental conditions, it was concluded that MDPC-23 cells are suitable model to be used on cytotoxicity tests of dental materials and rinsing solutions as well as to evaluate the dentinogenesis mechanisms.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-01Bitstream added on 2014-06-13T20:17:13Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_cf_me_arafo.pdf: 444703 bytes, checksum: 9ede9f0590ee9d328107f7e49cda8549 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O laser de baixa intensidade, também conhecido como laser terapêutico, tem sido recomendado para uma variedade de procedimentos clínicos, dentre eles o tratamento da hipersensibilidade dentinária. Pesquisas in vivo, onde dentes foram tratados com laser, demonstraram aumento na síntese de matriz de dentina e menor intensidade na reação inflamatória pulpar. Entretanto, o mecanismo que rege este processo permanece desconhecido. Mediante ao exposto, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar, in vitro, o metabolismo (MTT assay), expressão de fosfatase alcalina e síntese de proteínas quando células de linhagem odontoblástica MDPC-23 foram submetidas à irradiação com laser de baixa intensidade. A expressão dos genes que codificam para colágeno tipo-1 (Col-I) e fibronectina (FN) foi analisada por meio de RT-PCR. Para isto, células foram previamente cultivadas em placas de Petri (15.000 células/cm2) e submetidas a condições de estresse pelo período de 12 horas. Subseqüentemente, 6 aplicações do laser em parâmetros específicos foram realizadas em intervalos de 12 horas. Como grupo controle foi utilizado células não irradiadas. Tanto os valores do MTT quanto os níveis de proteína total não apresentaram valores estatisticamente diferentes daqueles observados para o grupo controle. Em contrapartida, as células irradiadas reduziram sua atividade de fosfatase alcalina. Os resultados de RT-PCR demonstraram haver uma tendência à redução específica, porém não estatística, na expressão dos genes avaliados após irradiação das células. Desta maneira, foi possível concluir, dentro das condições experimentais, que os parâmetros do laser de baixa intensidade utilizados na presente pesquisa não influenciaram o metabolismo celular, porém reduziram discretamente a expressão de algumas proteínas específicas. / Low-level laser therapy (LLLT), also referred to as therapeutic laser, has been recommended for a wide array of clinical procedures, among which the treatment of dentinal hypersensitivity. In vivo studies in which teeth were treated with LLLT have demonstrated an increase in dentin matrix synthesis and lower intensity of pulp inflammatory reaction. However, the mechanism that guides this process remains unknown. Therefore, the objective of this study was to evaluate in vitro the effects of LLL irradiation on cell metabolism (MTT assay), alkaline phosphatase (ALP) expression and total protein synthesis. The expression of genes that encode for collagen type-1 (Col-I) and fibronectin (FN) was analyzed by RT-PCR. For such purposes, odontoblast-like cell line (MDPC-23) was previously cultured in Petri dishes (15,000 cells/cm2) and submitted to stress conditions during 12 h. Thereafter, 6 applications with a monochromatic near infrared radiation (GaAlAs) set at predetermined parameters were performed at 12-h intervals. Non-irradiated cells served as a control group. Neither the MTT values nor the total protein levels of the irradiated group differed significantly from those of the control group (Mann-Whitney test; p>0.05). On the other hand, the irradiated cells showed a decrease in ALP activity (Mann-Whitney test; p<0.05). RT-PCR results demonstrated a trend to a specific reduction in gene expression after cell irradiation, though not significant statistically (Mann- Whitney test; p>0.05). It may be concluded that, under the tested conditions, the LLLT parameters used in the present study did not influence cell metabolism, but reduced slightly the expression of some specific proteins.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:51:30Z : No. of bitstreams: 1 huck_c_me_arafo.pdf: 1252085 bytes, checksum: 4404e50a78d5f2b1ee7cc3f93a760e73 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo da presente pesquisa foi avaliar in vitro os efeitos citotóxicos de diferentes concentrações de um agente clareador de ativação dual à base de peróxido de hidrogênio, sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para isso, 50 discos de dentina com 0,5mm de espessura, obtidos de dentes terceiros molares humanos íntegros, foram tratados com EDTA 0,5 M, pH 7,4 por 1 minuto, sendo a condutância hidráulica (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) determinada para cada um deles. Estes discos foram distribuídos em 5 grupos de acordo com os valores de permeabilidade. Os discos de dentina adaptados a um dispositivo metálico foram autoclavados, posicionados de maneira invertida (superfície pulpar dos discos voltados para cima) em recipientes plásticos de 24 compartimentos (wells). Então, 5 x 104 células MDPC-23/cm2 foram semeadas em cada compartimento. Após 72 horas de incubação na temperatura de 37º C, 5% de CO2 e 95% de ar, os dispositivos com os discos foram invertidos nos compartimentos, de tal maneira que os materiais experimentais pudessem ser aplicados (2 trocas de 15 minutos cada) sobre a superfície oclusal dos discos, caracterizando os 164 seguintes grupos experimentais: G1: H2O2 7,5%; G2: H2O2 20%; G3: H2O2 35%; e G4: gel base (sem o H2O2). No grupo controle (G5) os discos não foram tratados. Após esta etapa do experimento, o metabolismo das células MDPC-23 que permaneceram aderidas à superfície pulpar dos discos de dentina foi avaliado pela técnica de MTT. A morfologia das células e dentina tratada com os agentes experimentais foram avaliadas em microscopia eletrônica de varredura. A análise estatística de Kruskal-Wallis demonstrou que as três concentrações do agente clareador à base de H2O2 causaram intenso efeito citotóxico sobre as células MDPC-23. As concentrações de 7,5%, 20% e 35% de H2O2 aplicadas sobre os discos de dentina com 0,5mm... . / The aim of this in vitro study was evaluate the transdentinal effects of an experimental bleaching agent with different concentration of hydrogen peroxide on the immortalized odontoblast-cell line MDPC-23. Fifty dentin disks, 0.5mm thick, cut from extracted non-carious permanent third human molar were conditioned for 1 minute with 0.5M EDTA, pH 7.4 and the hydraulic conductance (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) was determined. The dentin discs were adapted to a metallic device which were sterilized and placed in wells of 24-well dishes (the pulpal surface of the discs remained in up position). Then, the cells were plated (5 x 104 cells/cm2) on the pulpal surface of the discs and incubated for 72 hours at 37oC, with 5% CO2 and 95% air. The metallic devices with the adapted dentin discs were inverted into the wells in such way that the experimental bleaching agents were applied on the oclusal surface of the discs for 30 minutes (2 changes of 15 minutes). The different concentration of H2O2 present in the bleaching agent gave rise to the following experimental groups: G1: 7.5% H2O2; G2: 20% H2O2; G3: 35% H2O2; and G4: 0% H2O2. In control group the dentin discs were not 167 submitted to treatment. The metabolism of MDPC-23 cells which remained attached to the pulpal surface of the discs was evaluated by the methyltetrazolium assay (MTT) and the cell and dentin morphology was assessed under scanning electron microscope (SEM). The statistical analysis of Kruskal-Wallis determined that the experimental bleaching agent caused an intense cytotoxic effects on the MDPC-23 cells. This experimental agent containing H2O2 at 7.5%; 20%; and 35% concentration decreased the cell metabolism by 62.65%; 62.28%; and 65.69%, respectively. The complementary statistical test of Mann-Withney demonstrated no difference between groups 1 and 2. The bleaching agent with... (Complete abstract, click electronic address below).

Orientador: Marcelo Rocha Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T18:41:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guimaraes_GustavoNarvaes_D.pdf: 3246599 bytes, checksum: 781e1f21b54daff1efa5c67e98bb5e59 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O hormônio paratireóideo (PTH) é o principal regulador da homeostasia dos íons minerais, cálcio e fosfato, no organismo, exercendo um papel chave no desenvolvimento e homeostase dos tecidos mineralizados. Recentemente nós demonstramos que durante a formação do incisivo de camundongos, a administração intermitente de PTH causou um aumento da taxa de aposição dentinária e resultou em mudanças nas propriedades mecânicas e materiais da dentina formada. Com isso, os estudos apresentados aqui se propuseram a investigar: 1) Os efeitos da exposição transiente (1 ou 24h/ciclo) ou contínua (48h) ao hPTH(1-34) na deposição mineral, na expressão gênica de Fosfatase Alcalina (ALP), Metaloproteinase 2 (MMP2), Biglican (BGN) e Colágeno tipo I (COL1), e na atividade de MMP2 e ALP em odontoblastos MDPC-23; 2) A participação das vias de sinalização dependentes de proteína quinase A (PKA) e proteína quinase C (PKC) na resposta proliferativa e apoptótica de odontoblastos MDPC-23 a diferentes tempos de exposição ao hPTH(1-34) (1, 24 ou 48 horas); 3) O efeito do tratamento do hPTH(1-34) na espessura dos cristais minerais formados durante a odontogênese de incisivos de camundongos. 4) Os efeitos da administração intermitente de hPTH(1-34) na dentinogênese terciária em camundongos. Os resultados mostram que a exposição transiente ao PTH diminuiu a deposição mineral e atividade de ALP. Já as expressões gênicas de ALP, BGN e COL1 estavam aumentadas no grupo 24h/ciclo, enquanto que o grupo Contínuo apresentou um aumento da expressão gênica de BGN e COL1. Também, os níveis de MMP2 secretados estavam aumentados no grupo 1h/ciclo e diminuídos no grupo Contínuo. A exposição ao PTH modula a resposta proliferativa e apoptótica de odontoblastos MDPC-23 de uma maneira dependente do tempo. Além disso, a via PKA atua na resposta a curta exposição ao PTH (1h), mantendo os níveis de proliferação e apoptose das células, enquanto que a via PKC é ativada nos tempos mais longos de exposição (24 e 48hs) levando a um aumento da apoptose e redução da proliferação celular. A administração intermitente de PTH não alterou a espessura dos cristais minerais da dentina de incisivos em formação e nem a quantidade de dentina terciária reacional em molares de camundongos. No entanto, o tratamento com PTH aumentou a concentração de zinco e diminuiu a concentração de cálcio na dentina de molares normais e em molares com indução de dentinogênese terciária. Com isso, pode-se concluir que o hPTH (1-34) modula a mineralização, apoptose e proliferação de odontoblastos MDPC-23 de maneira dependente do tempo, e que as vias de sinalização dependentes de PKA e PKC participam da resposta proliferativa e apoptótica. Além disso, nos modelos utilizados, a administração intermitente de PTH não teve efeito na espessura de cristais da dentina de incisivos, e também não demonstrou ser capaz de aumentar a formação de dentina terciária reacional em molares de camundongos / Abstract: Parathyroid hormone (PTH) is the major regulator of the calcium and phosphate ions in and plays a key role in the development and homeostasis of mineralized tissues. Recently we demonstrated that during the formation of the incisor of mice, intermittent PTH administration caused an increase of dentin apposition rate and it was associate to changes in the composition and in the mechanical properties of the formed dentin. Thus, the studies presented here were designed to investigate: 1) The effects of transient exposure (1 or 24h/cycle) or continuous (48h) to hPTH (1-34) in the mineral deposition and in the gene expression of alkaline phosphatase (ALP), metalloproteinase 2 (MMP2), Biglican (BGN) and type I collagen (COL1), and activity of MMP2 and ALP in odontoblast-like cells (MDPC-23); 2) The involvement of signaling pathways dependent of protein kinase A (PKA) and protein kinase C (PKC) in the proliferative and apoptotic response of MDPC-23 at different times of exposure to hPTH (1-34) (1, 24 or 48 hours); 3) The effect of the hPTH (1-34) treatment on the thickness of mineral crystals formed during dentinogenesis of the mice incisors. 4) The effects of intermittent hPTH (1-34) administration on the tertiary dentinogenesis in mice molars. The results showed that the transient exposure to PTH decreased the mineral deposition and ALP activity. The gene expressions of ALP, COL1 and BGN were higher in the group treated with PTH for 24h/cycle, while the PTH continuous administration group (48h) showed an increase in gene expression of COL1 and BGN. Also, the levels of secreted MMP2 were increased in 1h/cycle and decreased in the Continuous group (48h). The exposure to PTH modulates apoptotic and proliferative response of MDPC-23 in a time-dependent manner. Furthermore, the PKA pathway operates in response to short-term exposure to PTH (1h), maintaining levels of proliferation cell and apoptosis, whereas the PKC pathway is activated in longer exposure times (24 and 48h) leading to an increase apoptosis and decreased cell proliferation. The intermittent PTH administration did not change the thickness of the dentin mineral crystals of the incisors mice, and did not alter the deposition volume of the reactional tertiary dentin in the mice molars. However, treatment with PTH increased the concentration of zinc and decreased calcium concentration in normal dentin of molars with or without induction of tertiary dentinogenesis. Thus, it can be concluded that hPTH (1-34) modulates the mineral deposition, proliferation and apoptosis of the odontoblasts MDPC-23 in a time-dependent manner, and the signaling pathways PKA and PKC dependent participate of that proliferative and apoptotic response. Furthermore, in the models used here, the intermittent administration of PTH did not affect the thickness of the incisor dentinal crystals, and also not shown to be able to enhance the formation of reactional tertiary dentin in molar mice / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-23Bitstream added on 2014-06-13T19:20:24Z : No. of bitstreams: 1 mendonca_aam_dr_arafo.pdf: 4133222 bytes, checksum: f9bc8aa3130de1ab931f42b45220c045 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade do cimento de ionômero de vidro modificado por resina (CIVMR) sobre células odontoblastóides MDPC- 23 cultivadas sob discos de dentina com ou sem smear layer de diferentes espessuras. Além disto, o estudo também investigou se a permanência ou a remoção da smear layer poderia interferir na resistência de união do material com o substrato dentinário. Para isto, 40 discos de dentina com espessura de 0,4mm foram obtidos de terceiros molares humanos hígidos. Após limpeza das superfícies dos discos com ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA, pH 7.2), medidas de condutância hidráulica foram realizadas como forma de padronização da permeabilidade entre os discos. Lixas d’água de granulação 180 e 600 foram utilizadas para a formação da smear layer espessa e delgada, respectivamente. Desta forma, a distribuição dos discos de dentina resultou nos seguintes grupos controle e experimentais: G1M - grupo controle; G2M – Smear layer Espessa + CIVMR; G3M – Smear layer Delgada + CIVMR; G4M – Smear layer Espessa Removida + CIV; G5M – Smear layer Delgada Removida + CIVMR. Após divisão e posicionamento dos discos em câmaras pulpares artificiais, 50.000 células odontoblástóides MDPC-23 foram cultivadas sobre sua superfície pulpar. Decorridos 48 horas do cultivo, o CIVMR VitrebondTM foi aplicado sobre a superfície oclusal dos mesmos discos de dentina com ou sem smear layer. Após 24 horas, o metabolismo das células foi determinado através da avaliação da atividade da desidrogenase succínica (MTT assay). A morfologia celular foi analisada em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Para avaliação da resistência adesiva, outros 40 terceiros molares com dentina oclusal exposta tiveram o VitrebondTM aplicado dentro das mesmas condições já descritas (com ou sem smear layer). Os grupos experimentais... / The objective of present study was to evaluate the cytotoxicity of a resin-modified glass-ionomer cement (RMGIC) on odontoblast-like cells MDPC-23 plated under dentin discs when smear layer with different thickness was removed or not. In addition, it was also investigated whether presence or not of the smear layer could change in the bond strength of material on dentin substrate. Forty dentin discs with 0.4 mm thickness were obtained from caries and restoration free human third molars. The hydraulic conductance of all dentin discs was evaluated. One hundred eighty and 600-grit silicon carbide paper were employed to created thick and thin smear layer, respectively. Thereby, the distribution of dentin disc revealed the following experimental e control groups: G1M – control group; G2M – thick smear layer + RMGIC; G3M – thin smear layer + RMGIC; G4M – Thick smear layer Removed + RMGIC; G5M – Thin smear layer Removed + RMGIC. After adapting the dentin discs in artificial pulp chambers, the odontoblast like cells MDPC-23 (50.000 cells) were plated on the pulpal surface of these discs and incubated for 48 hours. Then the RMGIC VitrebondTM was applied on the oclusal surface of the dentin discs with or without smear layer. After 24h incubation, the cell metabolism was determined through evaluation of succínic desidrogenase enzime (MTT assay). The cell morphology was investigated by scanning electronic microscopy (SEM). To evaluate bond strength, VitrebondTM was applied on the oclusal dentin surface of 40 human third sound molars treated as previously reported (with or not smear layer of different thickness). The experimental and control groups were determined: G1R – Thick smear layer + EDTA + RMGIC; G2R - Thin smear layer + EDTA + RMGIC; G3R - Thick smear layer + RMGIC; G4R - Thin smear layer + RMGIC. Each specimen characterized by the VitrebondTM applied on the exposed and treated... (Complete abstract click electronic access below)