Orientador: Cassio Odnei Garcia Munhoz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T06:21:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beraldo_LuizFernando_M.pdf: 1150153 bytes, checksum: e36d9ebc0425ffdd1bfe51315122c5c3 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Neste estudo, procurou-se, através do método radioautográfico, observar os efeitos do EDT A a 4,13% e do TCA a 5% sobre as proteínas contidas nas secreções das células acinosas do pâncreas, nas células seromucosas da glândula submandibular e sobre a ultra-estrutura dessas glândulas de camundongos injetados com uma única dose de 3H-glicina e sacrificados uma hora após a injeção. As glândulas de cada animal foram divididas em pequenos fragmentos e estes, separados em 3 grupos: controles (não tratados), tratados pelo TCA e tratados com EDTA. As reações radioautográficas foram quantificadas mediante a contagem de grãos de prata reduzida sobre a secreção localizada na porção apical das células pancreáticas e sobre a secreção das células seromucosas da glândula submandibular. Os dados obtidos após as contagens dos grãos de prata mostraram, após a análise de variânciB, que não há diferenças significantes entre os três grupos. Conclui-se, assim, que tanto o TCA como o EDT A não provocam extrações de proteínas marcadas nas secreções. O TCA tem sobre o EDT A a vantagem de remover os sais minerais num intervalo de tempo mais curto, porém, a obtenção dos cortes semi-fmos no material tratado por ele é bem mais dificil. Ao microscópio eletrônico, o material tratado pelo EDT A apresenta o mesmo aspecto do controle. O TCA, ao contrário, provocou muitas alterações da ultra-estrutura de vários componentes celulares. Ao contrário do EDT A, seu uso como agente desmineralizador de tecidos duros em estudos ultra-estruturais não deve ser recomendado / Abstract: The aim of this study was to observe radioautographicaIly the effects of TCA and EDT A on the secretory proteins of the serous pancreatic cells, on the seromucous submandibular gland cells and on the ultrastructure of these glands of mice sacrificed lh afier the injection of a single dose of 3H-glicine by intracardiac fixation with 4% p-formaldehyde solution. The glands of each animal were divided in smaIl fragments (about lmm3) which were separated in three groups: control (non treated), treated with TCA and 1reated with EDT A. The radioautographic reactions were quantified by counting the reduced silver grains over the secretion of the serous pancreatic and seromucous submandibular gland cells. The counting data, afier statistical variance analysis, showed that both TCA and EDT A did not extract the labelled proteins of the acinar cells secretions of pancreas and submandibular glands. Although TCA removed the mineraIs faster than the EDT A it was more difficult to obtain ul1ra-thin and semi-thin sections in the gland fragments treated with it. Also the staining of the acinar cells with methilene blue was impaired. . The fragments treated by the EDT A did not present significant ul1rastructural differences when compared with controls. The TCA, on the other hand, caused some damage to the fine structure of various cellular components. Therefore, its use as a decalcitier of hard tiSsues on ultrastructural studies should not be recommended. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Coorientador: Yuri Karen Sonzato / Banca: Marcela Marcondes Pinto Rodrigues / Banca: Wellerson Rodrigo Scarano / Banca: Mara Sandra Hoshida / Banca: Sara Maria Zago Nunes / Resumo: Durante a gravidez diabética, a hiperglicemia materna pode prejudicar o desenvolvimento embrionário por uma associação de hipóxia e estresse oxidativo. Deste modo, nossa hipótese é de que a combinação desses mecanismos esteja envolvida no desenvolvimento pancreático alterado. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do estresse oxidativo e hipóxia no organismo materno sobre o desenvolvimento pancreático fetal em condições hiperglicêmicas. Foram utilizados ratos da linhagem Wistar que foram aleatoriamente distribuídos em: Controle (C); Diabete moderado (DM) e Diabete grave (DG). O diabete foi induzido em ratos pela administração de streptozotocin. As ratas foram acasaladas e, no 18º e 21º dias de prenhez, foram avaliados parâmetros como hiperglicemia e marcadores de hipóxia e de estresse oxidativo maternos. Nos mesmos momentos, os fetos foram coletados para análise das ilhotas pancreáticas. Foram encontradas alterações na tríade hormonal (insulina, glucagon e somatostatina) e marcadores de proliferação celular (PDX-1 e ki67) e morte celular (caspase-3). Essas alterações foram mais evidentes nos fetos advindos do grupo diabete grave. Além disso, a morfologia das ilhotas pancreáticas fetais e localização correta das células endócrinas foram claramente alteradas. Também houve correlação positiva entre glicemia, estresse oxidativo e hipóxia no organismo materno dos grupos diabéticos. Estes mecanismos também foram positivamente correlacionados com a redução no número de ilhotas e de células por ilhota nos descendentes. Portanto, a presença de estresse oxidativo e hipóxia, induzidos por alterações glicêmicas maternas, causou prejuízo no desenvolvimento pancreático fetal. Este fato demonstra que é necessário um rígido controle glicêmico materno para prevenir complicações embriofetais e perinatais / Abstract: In diabetic pregnancy, hyperglycemia may impair embryonic development by a combination of hypoxia and oxidative stress. Therefore, we hypothesized that a combination of these factors was involved in the impaired pancreatic development in the offspring. Thus, the objective of the present study was to evaluate maternal oxidative stress and hypoxia status on fetal pancreatic development in hyperglycemic conditions. Wistar rats were randomly assigned into three groups: control (C); mild diabetes (MD) and severe diabetes (SD). Diabetes was induced by the beta-cytotoxic drug (streptozotocin) in rats. The female rats were mated and at days 18 (early period of maximum fetal development) and 21 (at term) of pregnancy the maternal hyperglycemia, hypoxia and oxidative stress markers were evaluated. In the fetus, the pancreatic islets were analyzed. The results showed alterations in pancreatic hormone triad (insulin, glucagon and somatostatin), beta cell marker (PDX-1), proliferation (ki67) and apoptosis (caspase-3), which were more pronounced in the SD group. Furthermore, the morphology of the fetal pancreatic islets was clearly changed. There was a positive correlation between blood glucose, oxidative stress and hypoxia of the mothers and the reduction in the number of islets and number of cells per islet in the fetuses from the diabetic groups. Therefore, oxidative stress and hypoxia induced by maternal hyperglycemia led to impairment of fetal pancreatic development. These observations indicate that a rigid glycemic control in diabetic pregnancy is required to prevent the embryofetal and perinatal complications / Doutor

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Objetivo: Investigar o efeito das soluções de Euro-collins e Belzer na perfusão sequencial do pâncreas durante a preservação. Métodos: Foram utilizados 45 ratos Wistar-EPM. Os animais foram distribuídos em 4 grupos, de acordo com a solução utilizada para preservação: Grupo Soro Fisiológico (SF) - pâncreas perfundido e preservado em soro fisiológico; Grupo Euro-Collins (C) pâncreas perfundido e preservado com solução de Euro-Collins; Grupo Belzer (B) pâncreas perfundido e preservado em solução de Belzer e Grupo Euro-Collins/Belzer (CB) - pâncreas perfundido com solução de Euro-Collins e Belzer em partes iguais e seqüencialmente e preservado em solução de Belzer. Após a perfusão, os animais tiveram o pâncreas ressecado e preservado com a solução destinada em 4° C. Dosagens de amilase em 12, 24, 36 e 48 horas foram realizadas no líquido de preservação. Após a última dosagem a peça foi submetida à análise histológica. Foi realizado estudo estatístico a partir dos resultados. Resultados: Os grupos SF e C foram os que apresentaram os maiores valores de amilase ao longo do tempo, sendo superiores e diferentes dos grupos B e CB (p=O,05). Os grupos B e CB apresentaram valores de amilase similares até o período de 24 I horas. A análise histológica demonstrou significância estatística em relação à necrose de ilhotas e edema tecidual. Os grupos B e CB mostraram-se similares I histologicamente (p=O,OO1) e diferentes dos grupos SF e C. Conclusões: A aplicação das soluções de Euro-collins e Belzer de modo seqüencial mostrou-se eficaz na preservação do pâncreas de ratos até o período de 24 horas. / Objective: Investigate the effect of Euro-collins and Belzer solution in the sequential perfusion of the pancreas, during the preservation period. Methods: Forty five Wistar-EPM rats were used. The animals were distributed in 4 groups, according to the solution used during preservation: Saline solution (SF), pancreas perfused and preserved with saline solution; Euro-collins group (C), pancreas perfused and preserved with euro-collins solution; Belzer group (B) pancreas perfused and preserved with belzer solution; Euro-collins/Belzer group (CB), pancreas perfused with euro-collins and belzer solutions in equal parts and sequentially and preserved with Belzer solution. After the perfusion, the animals had their pancreas resected and preserved according to the destinated solution in 4º C. Amilase dosages after 12, 24, 36 e 48 hours were performed in the preservation solution. After last dosage, the pancreas was submitted to histological analysis. Statistical analysis was done. Results: SF and C groups presented the higher amilase levels in the preserving solution during all periods, being superior to C and CB groups (p=0,05). Amilase levels were similar in b and CB groups until 24 hours (p=0,05). Histological analysis was statistically significant for pancreas islet cells and tecidual edema. Groups B and CB were histologically similar (p=0,001) and different from groups SF and C. Conclusions: The use of Euro-collins and Belzer solution sequentially showed to be effective in pancreas preservation in rats until 24 hours. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T19:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_SilviaCristinaCrepaldi_D.pdf: 4970540 bytes, checksum: caabd222e7acbf570b4567612f3ce6fe (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo aprofundar os conhecimentos sobre os mecanismos celulares envolvidos na maturação do acoplamento estímulo-secreção de insulina na fase de vida perinatal; e da função do lactogênio PRL neste processo. Para tanto, ilhotas de ratos neonatais foram mantidas em cultura durante períodos de tempo diferentes, recebendo ou não tratamento hormonal diário. À seguir, analisamos a expressão dos transportadores de glicose, a permeabilidade ao cálcio e a secreção de insulina estimulada por substâncias diferentes. Os dados obtidos nos indicam que em ilhotas neonatais o tratamento crônico com PRL e a concentração de glicose no meio de cultura, modulam o aumento na expressão do GLUT2. A expressão do GLUTl não é alterada pela PRL ou pela glicose. A permeabilidade ao 45Ca²+ é modificada após o tratamento prolongado com PRL, aproximando-se ao padrão do adulto. A PRL induz aumento no conteúdo de insulina e maturação da resposta secretória estimulada por glicose e aminoácidos. A maturação da resposta secretória estimulada por glicose é potencializada pelo tempo de tratamento hormonal. O tratamento com PRL parece não atuar nos mecanismos envolvidos na modulação muscarínica embora induza maturação no sistema PKC. O tempo de cultura "per se" induz uma maturação parcial da resposta secretória de insulina. A cultura por período de tempo prolongado torna as células B mais sensíveis à estimulação por Leu ou Arg. Finalmente, a comparação dos dados obtidos após cultura durante 7 ou 19 dias, indica que o tratamento prolongado com PRL atua em etapas importantes do mecanismo de secreção de insulina, favorecendo o acoplamento entre o metabolismo do nutriente, a despolarização da membrana da célula B, a elevação na concentração citosólica de Ca²+ e a resposta secretória. Portanto, ilhotas neonatais cultivadas em presença de PRL durante 19 dias, adquirem uma resposta secretória de insulina mais próxima ao padrão do adulto. Estes dados reforçam a importância da PRL no processo de maturação da resposta secretória de insulina, das células B-pancreáticas, na fase perinatal e sugerem um efeito tempo-dependente na ação do hormônio / Abstract: Maturation of the glucose sensing mechanism in mammals occurs during the perinatal life period. In rats, the poor secretory response to glucose obselVed during fetal period is rapidly converted to an adult response in few days after birth. This poor secretory response is ascribed to an uncoupling between glucose stimulation and membrane depolarization resulting in the opening of an insufficient number of voltage-sensitive Ca2+ -channels, and an impaired increase in cytosolic Ca²+ concentration. The obselVed uncoupling in fetal and neonatal islets seems to be also consequence of a reduced A TP generation by B cells. Growth and differentiation of the endocrine pancreas are controlled by many factors including the somatolactogenic hormones, especially prolactin (pRL). The present work aimed at investigating the cellular mechanisms envolved in the maturation of stimulus-response coupling of insulin secretion in the perinatal life phase and the functions of PRL in this processo For this purpose, islets trom neonatal rats were kept in culture during differents periods of time receiving or not daily hormonal treatment. Glucose transporter expression (GLUTI and GLUT2), Ca²+ membrane permeability and insulin secretion were analysed in these cultured neonatal islets. The PRL treatment and the glucose concentration in the culture medium affect GLUT2 expression. GLUTI expression is not modified by PRL or glucose. After prolonged PRL treatment 45Ca permeability in the neonatal islets are cio ser to that obselVed in adult islets. PRL induces increase in the insulin total content and accelerates the maturation of secretory response stimulated by glucose and aminoacids in a time-dependent fashion. The maturation of secretory response stimulated by glucose is accelerated by time of PRL treatment. The PRL treatment does not affect mechanisms controled by muscarinic receptors in B-cells. The PRL treatment induces maturation in the PKC system. The culture time "per se" induces partial maturation of insulin secretion response. B cells submited to prolonged period of culture become more sensitive to Leu or Arg stimulation. Finally, data obtained after culture during 7 or 19 days, show that a prolonged PRL treatment influence important steps of the insulin secretion mechanisms, favouring the coupling among nutrient metabolism, membrane B cell despolarization, increase in the [Ca²+]i and increase secretory response. Therefore, neonatal islets cultured in the presence of PRL during 19 days acquire an insulin response to the nutrients elo ser to the adult pattem. These data reinforce the importance of PRL in the maturation process of insulin secretion response by pancreatic B cells during the perinatal life period and suggest an effect time-dependent in the hormonal action / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T09:57:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendonca_AnaCristinadosSantos_M.pdf: 2984469 bytes, checksum: 05ad25856a10ccc3e82024835a6de424 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este trabalho objetivou avaliar a maturação do sistema secretor de insulina em ratos, através de um estudo, temporal da resposta secretória frente a diferentes estímulos. Para isso, fragmentos de pâncreas - (0,5 à 1 mm3) de fetos e neonatos e ilhotas adultas, foram incubados por 1 hora à ¿37 GRAUS C¿ em atmosfera de 95% 'O IND. 2¿ /5% 'C¿O IND. 2¿. As incubações foram realizadas em. solução de Krebs-Ringer contendo diferentes concentrações de glicose,potássio, teofilina e carbamilcolina. Após o período de incubação, a insulina secretada no meio, bem como, a extraída dos fragmentos de pâncreas ou de ilhotas isoladas, foram medidas por radioimunoensaio, sendo a secreção expressa como percentagem do conteúdo total de insulina ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aim of this work was to study, in rats, the maturation process of the secretory response of insulin following several stimuli. For that, pieces of pancreas (0,5-1 mm3) from rat fetuses and newborns or isolated adults islets, were incubated for 1 .hour at ¿37 GRAUS C¿ in 95% 'O IND. 2¿ /5% 'C¿O IND. 2¿ atmosphere with differents concentrations of glucose, potassium;. theophylline and carbamylcholine. Following the incubation,. the insulin secreted into the medium and extracted from the tissues, were measured hy radioimmunoassay,and were expressed as percentage of total insulin content ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T20:11:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arantes_VanessaCristina_M.pdf: 2202517 bytes, checksum: 96df5e7928eb9ee77b90e029f2b8e569 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Em animais, a desnutrição intra-uterina exerce efeitos marcantes sobre o desenvolvimento fetal e pós-natal. Além disso, baixo peso ao nascer está associado à secreção alterada de insulina, resistência à insulina e área diminuída da ilhota pancreática. Neste trabalho, verificamos a expressão do fator de transcrição PD X-I, a área da ilhota e a secreção de insulina em ilhotas de ratos neonatos e recém-desmamados (28 dias de vida), mantidos durante o período fetal e da lactação com uma dieta normoprotéica (17% de proteína) ou hipoprotéica (6% de proteína). Esses parâmetros também foram avaliados em ratos com 28 dias, recuperados da desnutrição intra-uterina. Após o desmame, a secreção de insulina em ilhotas isoladas em resposta 2,8 e 16,7 mmol/L de glicose foi reduzida em ratos desnutridos. Ao nascer e após 28 dias, a área da ilhota e a expressão protéica do PDX-1 também foram diminuídas, enquanto os níveis de mRNA em ilhotas de ratos desnutridos recém desmamados foram semelhantes aos níveis encontrados em ratos controles. A expressão protéica do PDX-1 e a área da ilhota, bem como a secreção de insulina, foram restauradas em ratos recuperados, enquanto o mRNA do PDX-l foi maior do que em ratos controles. Esses resultados sugerem associação entre expressão protéica do PDX-l diminuída, redução no tamanho da ilhota e secreção diminuída de insulina em ratos desnutridos. A reintrodução de dieta normal, logo após o nascimento, restaurou todos os parâmetros avaliados / Abstract: Intra-uterine and early postnatal malnutrition has profound consequences on fetal and postnatal development, both in humans and animals. In addition, low birth weight has been reported to be associated with impaired insulin secretion, insulin resistance and diminished area of pancreatic islets. To assess the expression of the transcription factor pancreatic and duodenal homeobox gene 1 (PDX-l) in pancreatic B-cells, and to examine the islet area and glucose-induced insulin secretion by islets from rats maintained on a low protein diet. PDX-l expression and islet area were assessed in rats maintained on a low (6%) or normal (17%) protein diet during fetal life. PDX-I protein and rnRNA levels, as well as insulin secretion and islet area were also measured after 28 days of life in normal, 10w protein, and recovered rats which received a normal protein diet after birth. Insulin secretion by isolated islets in response to 2.8 and 16.7 mmol glucose/L was reduced in 28-day-old low protein rats (P < 0.0001). At birth and after 28 days of life, the islet area and PDX-l protein expression were also reduced (P < 0.01). In contrast, PDX-l rnRNA levels in islets from 28-day-old low protein rats was similar to normal rats. PDX-l protein expression in B cells, the area of islets and insulin secretion were restored in recovered rats, whereas PDX-l rnRNA was higher than normal rats (P < 0.05). These results suggest a link between diminished PDX-l protein expression, a reduction in islet area and impaired insulin secretion in low protein rats. The reintroduction of a normal diet early in life restored islet area and cell physiology / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Sergio de Albuquerque / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:08:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Burgos_ValdeliceOliveira_M.pdf: 11459665 bytes, checksum: 9acb93c0b764a639f8b47c37f73bb667 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Nas pesquisas clínicas a respeito da fisiopatologia da doença de Chagas, cada vez mais vem ganhando corpo a idéia de que os portadores desta moléstia apresentam o que poderia definir-se como uma dificuldade do organismo doente em manter a homeostase através da regulação de suas funções, quer sejam motoras, secretoras ou metabólicas. Uma das principais causas, relacionadas à diversidade de alterações anatomopatológicas que o parasito T. cruzi promove no hospedeiro está diretamente ligada às características morfológicas da cepa, que podem apresentar um tropismo tecidual diferenciado. As formas largas de T. cruzi apresentam miotropismo e tropismo glandular. Os parâmetros foram avaliados em ambos os sexos na fase aguda, analisando comparativamente a parasitemia, a histopatologia, a morfometria (cariometria e análise de superfície) do pâncreas. O modelo experimental utilizado foi o camundongo albino (Mus musculus) da linhagem Swiss, machos e fêmeas. O inóculo empregado foi de 2 x 104 formas tripomastigotas sanguícolas da cepa RAL, e em dias pré-determinados 3º, 6º, 8º, 10º, 12º, 14º e 16º dias experimentos, os animais foram sacrificados e retirados o sangue e amostras do pâncreas, para as dosagens da glicemia e das enzimas lipase e amilase (total). O pico parasitemico ocorre em dias diferentes, no 12Q (pico parasitemico para as fêmeas), e 14Q (pico parasitemico para os machos), com um aumento apreciável do número de parasitas para os machos. Ao comparar as iIhotas pancreáticas dos grupos infectados com os grupos controles de ambos os sexos, houve uma atrofia nas células a e hipertrofia nas células ß das iIhotas pancreáticas de ambos os sexos dos grupos infectados. Entretanto, os ácinos pancreáticos das fêmeas infectadas demonstraram uma maior hipertrofia , já em relação a glicêmica houve uma redução significativa em relações a ambos os sexos. Houve redução do peso nos grupos infectados em relação ao grupo controle, entretanto mais significativa no grupo macho infectado. Contudo, a amilase não apresentou variações significativas entre os grupos infectadas machos e fêmeas, mas quanto ã lipase houve uma variação significativa entre os grupos machos e fêmeas, mas não significativas entre grupos infectados e controles do mesmo sexo. Observando todos os aspectos avaliados, verificou-se que no presente trabalho ocorreram alterações bioquímicas e histológicas do pâncreas de animais infectados com a cepa RAL de T. cruzi. A cepa RAL de T. cruzi apresenta um comportamento atípico em relação às outras cepas estudadas e descritas na literatura, promovendo alterações pancreáticas mais intensas nos animais fêmeas que nos machos / Abstract: Searching the physiopatology of Chagas' disease in clinical researches, the idea that the bearers of this disease present what could be defined as a difficulty of the sick organism in maintaining the homeostasis through the regulation of their functions as motive, secretors or metabolic. One of the main causes related to the diversity of anatomopathological alterations that the parasite T.cruzi promotes in the host is direct/y linked to the morphologic characteristics of strains the that can show a tissular differentiated tropism. The parameters were evaluated in both sexes were in the acute phase, analyzing the comparative parasitemia, histopathology, and morfometry (cariometric and surface analysis) of the pancreas. The experimental model used was the both sexes of albino mouse (Mus musculus) of the lineage Swiss. RAL strain of T .cruzi was used with the inoculum of 2 x 104 blood trypomastigotes forms. In pre-determined days the animals were killed being pancreas and blood collected for the evaluation of glycemy, enzymes lipase and amylase (total). The high parasitemy happens in different days, being in the 12° for the females, and the 14° for the males with an appreciable increasing of the parasites number for the males. When comparing the pancreatic islets of the infected groups with the control groups of both sexes, there was an atrophy in a-cells and hypertrophy in ß-cells of the pancreatic islets of both sexes of the infected groups, however, the pancreatic acids of infected females demonstrated a larger hypertrophy, and a glycemic reduction only accentuated in relation to the infected males. Amylases didn't show significant variations among the groups infected (males and females), but the lipases had a significant variation among the male and female groups, but no significant between infected groups and controls of the same sex. Observing all the appraised aspects in the present work we noted biochemical alterations and histological destruction of the pancreatic gland of animals infected with the T.cruzi RAL strain. The T .cruzi RAI,. strain presents an atypical behavior in relation to the other studied strains- described in the literature, promoting more intense pancreatic alterations in the female animals that in males / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador : Carlos Eduardo Negreiros de Paiva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T07:03:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_Auria_D.pdf: 2611580 bytes, checksum: a23ee1d5a5d9fb30d1e3244a1aa211fb (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Neste estudo, o pâncreas fetal de rato, cultivado, foi utilizado como órgão doador para o tratamento diabetes induzido por aloxana. O efeito deste tratamento foi comparado entre dois grupos experimentais: 1. doadores e receptores com um coeficiente de parentesco 37.5%, obtidos por endocruzamento de ratos da linhagem Wistar; 2. doadores e receptores sem grau de parentesco, da mesma linhagem. Os primeiros foram chamados de grupo "isogênico" e os outros, de grupo alogênico. Os pâncreas fetais foram enxertados em sítios intramusculares. O efeito desses enxertos sobre o estado diabético dos receptores foi avaliado, morfológica e fisiologicamente, após 30 dias de acompanhamento, e os resultados obtidos foram os seguintes: Quanto ao aspecto morfológico, apenas os enxertos "isogênicos" foram facilmente encontrados e a seguir examinados ao microscópio comum. Estes pareceram bem estabelecidos, com aglomerados de células ß, vascularização intrínsica sem aparente infiltração de células mononucleadas ou fibrose intersticial. Quanto ao aspecto funcional verificamos também, que os ratos do grupo "isogênico" responderam satisfatoriamente aos enxertos, pois recuperaram seu peso médio inicial apresentando uma diferença de apenas -5.9+-35,1g(P>0,05) significativa à 5% entre o peso mé- após os 30 dias de transplante. Quanto à glicemia média o"isogênico" apresentou uma redução significativa de -180.17+ - 110mg% (p < 0.001) após transplantes. No concernente ao grupo alogênico ocorreu o oposto, isto é, houve incremento significativo de 12,5mg% de glicemia (p < 0.001). Em resumo esse trabalho fala a favor de que fetos semelhantes de alto coeficiente de parentesco numa geração. poderão ser utilizados corno modelo de transplantes / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Resumo: Objetivo: Avaliar os marcadores de glicemia, proliferação e estresse oxidativo de ratas com diabete moderado submetidas ao exercício físico (natação) de intensidade moderada durante a prenhez. Método: Foram utilizadas ratas da linhagem Wistar. O diabete moderado foi induzido em recém-nascidos (RN) fêmeas no primeiro dia de vida (100 mg de Streptozotocin®/kg de peso corpóreo, via subcutânea). Para compor o grupo não diabético, os RN receberam o veículo em volume e período similares ao grupo diabético. Na fase adulta, todos os animais foram submetidos ao acasalamento e, confirmada a prenhez, foram distribuídos em quatro grupos: não diabético não exercitado, não diabético exercitado, diabético não exercitado e diabético exercitado. As ratas dos grupos submetidos à natação de intensidade moderada durante a prenhez carregaram cargas equivalentes a 4% do peso corpóreo. No 18º dia de prenhez, as ratas foram anestesiadas e mortas para análise do desempenho reprodutivo, marcadores bioquímicos e de estresse oxidativo e análises morfométrica e imunoistoquímica do pâncreas materno. Resultados: A natação alterou o metabolismo glicêmico de forma positiva e melhorou a capacidade de defesa antioxidante em ratas não diabéticas, contribuindo para o bom desempenho reprodutivo materno. Em animais diabéticos, a natação não alterou a função pancreática, aumentou danos musculares, diminuiu a defesa antioxidante, causou estresse oxidativo, mas não causou prejuízo ao desenvolvimento fetal. Conclusão:... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate glycemic, proliferation and oxidative stress markers in moderate diabetic rats submitted to moderate intensity swimming during pregnancy. Methods: Wistar rats were used. At birth, female rats were assigned either to control or diabetic group (100 mg of streptozotocin/Kg, subcutaneously). At adulthood, the female rats were mated and confirmed the pregnancy, were divided into four groups: nondiabetic non exercised, nondiabetic exercised, diabetic non exercised and diabetic exercised. The exercised groups carried loads equivalent to 4% of body weight. The rats were used for analysis of reproductive performance, oxidative stress biochemical markers and morphometric and immunohistochemical analysis of endocrine pancreas. Results: Swimming altered carbohydrate metabolism positively and improved the antioxidant defense in nondiabetic rats, which contributes to good maternal reproductive performance. In diabetic animals, swimming did not affect pancreatic function, increased muscle damage, decreased antioxidant defense, but did not cause damage to fetal development. Conclusions: Therefore, swimming moderate exercise was beneficial to nondiabetic rats. This same exercise conditions established for healthy animals, however, should not be applied to diabetic rats because it have different responses presented in our study after the implementation of the exercise. / Mestre

Adenocarcinoma pancreático é um tumor maligno com mau prognóstico, e por isso há necessidade de aperfeiçoamento ou criação de novas estratégias terapêuticas. A vacinação baseada em DCs é uma das abordagens mais promissoras, uma vez que as DCs são as células apresentadoras de antígenos (APCs) mais potentes e centrais para a indução e manutenção de uma resposta imune. Entretanto, em pacientes com câncer, a geração e a função de DCs podem ser deficientes, impondo um obstáculo para o sucesso de seu uso. Neste trabalho, nós descrevemos a geração in vitro de DCs a partir de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) obtidas de pacientes ictéricos com câncer de pâncreas e, também, o efeito do plasma ictérico (PI) sobre as culturas de DCs de doadores saudáveis. PBMCs foram separadas do sangue obtido de 22 pacientes e 22 doadores saudáveis. Células aderentes foram cultivadas com GM-CSF e IL-4 (50ng/mL) por 7 dias. No 5o dia, TNF-<font face=\"symbol\">a (50ng/mL) foi adicionado para a maturação das DCs. Culturas foram realizadas em 10% PI ou plasma normal (PN). Células não aderentes foram coletadas no 7o dia, marcadas com anticorpos monoclonais anti-CD86, CD11c, CD14 e HLA-DR e analisados por citometria de fluxo. Células de pacientes, cultivadas em 10% de PI, quando comparadas com células de doadores saudáveis, cultivadas em 10% PN, apresentaram expressão reduzida (p<0,05) de CD86 e HLADR. É interessante observar que células geradas de PBMCs de pacientes não expressaram CD11c, diferente das células derivadas de doadores saudáveis. A presença de PI nas culturas dos doadores saudáveis causou uma significante diminuição na porcentagem de expressão de células HLA-DR+, CD11c+, CD86. Finalmente, quando PBMCs de pacientes foram cultivadas em PN, houve um aumento na expressão de HLA-DR e CD86 (p<0,05). Os ensaios de proliferação demonstraram também que as células de pacientes ictéricos tiveram capacidade aloestimuladora de linfócitos reduzida, quando comparada a de células de doadores saudáveis. Estes dados indicam uma alteração importante na capacidade das células de pacientes se diferenciarem em DCs in vitro, um fenômeno que parece depender tanto de fatores solúveis presentes no plasma e sobre as próprias células. / Pancreatic adenocarcinoma (PAdc) is an aggressive malignancy with poor prognosis, urging for improved or new therapeutic strategies. DC-based vaccination is one of such promising approaches. DC are the most potent antigen-presenting cells and central to the induction and maintenance of an immune response. However, in cancer patients DC generation and function may be deficient, imposing an obstacle to the success of their use. Here, we describe the in vitro generation of DC from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) obtained from jaundiced patients with PAdc and, also, the effect of jaundiced plasma (JP) in the phenomenon. PBMC were separated from blood obtained from 10 patients and 10 healthy controls over a density gradient. Adherent cells were cultured with GM-CSF and IL-4 (50ng/mL) for 7 days. On the 5th day, TNF-<font face=\"symbol\">a (50ng/mL) was added for DC activation. Cultures were performed in 10% JP or normal plasma (NP). Non-adherent cells were harvested at day 7, labeled with FITC- or PE-conjugated monoclonal antibodies against CD86, CD11c, CD14, HLA-DR and analyzed by flow cytometry. Patients\' cells, cultured in 10% JP, compared to healthy donors\' cells, cultured in 10% NP, had a significantly (p<0.05) lower expression of CD86 and HLA-DR. It is noteworthy that cells generated from patients\' PBMC did not express CD11c, while from those derived from healthy donors\' cells did so. The presence of JP in healthy donors\' cells cultures caused a significant decrease in the percentage of HLA-DR+, CD11c+ and CD86+ cells. Finally, when patients\' PBMC were cultured in NP, a significant increase in HLA-DR and in CD86 expression occurred. MLR assays also demonstrated that cells from jaundice patients had decreased capacity to stimulate alloestimulation of lymphocytes when compared to healthy donors. These data indicate a significant alteration in the patients\' PBMC ability to differentiate into DC in vitro, a phenomenon that seems to depend both on soluble factors present in plasma and on the cells, themselves.