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Fabrication and characterisation of affinity-bound liposomes

Tarasova, Anna, Optometry, UNSW January 2007 (has links)
In considering the concept of surface-immobilised liposomes as a drug release system, two factors need to addressed, the interfacial surface density of the liposomes for maximum drug loading and the stability of these liposomes to allow for controlled drug release. This thesis investigates a multilayer system for the affinity immobilisation of liposomes and their stability to various applied stresses. In the work presented here an allylamine monomer was used to create plasma coatings that were stable, thin and amine-rich. The aging studies using AFM showed these films to rapidly oxidise on exposure to water. The freshly deposited films were used for further surface modifications, by the covalent grafting of PEG layers of different interfacial densities under the conditions of varying polymer solvation. The AFM was used to measure the interaction forces between the grafted PEG layers and modified silica interfaces. It was found that the polydispersity of the PEG species resulted in bridging interactions of ???brush???-like PEG layers with the silica surface. These interactions were screened minimised by increasing the ionic strength of the solution. Although the densely grafted PEG layers were found to be highly protein-resistant by the XPS and QCM-D some minor protein-polymer adhesions were observed by the AFM. The densely anchored biotinylated PEG chains served as an optimum affinity platform for affinity-docking of NeutrAvidinTM molecules, which assembled in a rigid, 2-D layer as confirmed by the QCM-D. The submonolayer surface density of NeutrAvidin, as determined by Europium-labelling, was attributed to steric hindrance of the immobilised molecules. The final protein layer enabled specific binding of biotin-PEG-liposomes as a highly dissipative, dense and stable layer verified by tapping mode AFM and QCM-D. We found that these liposomes were also stable under a range of stresses induced by the shearing effects of water, silica probe and HSA layer at increased loads and velocities. The frictional response of the liposome layer also demonstrated the viscoelasticity and stability of these surface immobilised liposomes. Finally, the minimal adhesive interaction forces, as measured by the AFM, demonstrated the repellency of these liposomes to commonly found proteins, such as HSA.
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Contribuição de solutos orgânicos e inorgânicos no potencial osmótico de folhas de atriplex nummularia submetidas ao NaCl, SECA E PEG. / Contribution of organic and inorganic solutes in the osmotic potential of leaves of Atriplex nummularia submitted to NaCl, DROUGHT AND PEG.

Brilhante, Jean Carlos de Araújo January 2006 (has links)
BRILHANTE, J. C. A. Contribuição de solutos orgânicos e inorgânicos no potencial osmótico de folhas de atriplex nummularia submetidas ao NaCl, SECA E PEG. 2006. 195 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-07-15T19:39:06Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_jcabrilhante.pdf: 1463347 bytes, checksum: 7f27bb350d9b7a07d32ec4ecef65c90f (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-07-16T20:06:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_jcabrilhante.pdf: 1463347 bytes, checksum: 7f27bb350d9b7a07d32ec4ecef65c90f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-16T20:06:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_jcabrilhante.pdf: 1463347 bytes, checksum: 7f27bb350d9b7a07d32ec4ecef65c90f (MD5) Previous issue date: 2006 / Uma das características fisiológicas mais importantes das halófitas pertencentes ao gênero Atriplex é a enorme habilidade de acumular solutos orgânicos e inorgânicos com o intuito de se ajustar osmoticamente em condições de elevada salinidade e deficiência hídrica. Contudo estudos compreensivos sobre a contribuição relativa desses solutos inorgânicos e orgânicos no ajustamento osmótico de folhas dessas halófitas ainda são poucos explorados na literatura. Esse trabalho pretende pela primeira vez na literatura fazer um estudo detalhado, da participação e da contribuição relativa da maioria dos solutos orgânicos e inorgânicos no potencial osmótico de folhas de Atriplex nummularia, submetidas a concentrações crescentes de NaCl, ciclos sucessivos de seca e ao polietileno glicol (PEG). Para responder as questões acima mencionadas foram conduzidos três grandes experimentos seqüenciais. No primeiro experimento, mudas de Atriplex nummularia com quatro meses de idade, foram cultivadas em vasos de argila contendo como substrato areia, sendo irrigadas a cada dois dias com solução contendo concentrações crescentes de NaCl (0, 100, 200, 300 e 400 mmol L-1) durante 120 dias. O experimento foi realizado em condições de casa de vegetação. No segundo experimento, mudas de A. nummularia, com idade de 18 meses foram transplantadas para recipientes de polietileno contendo 5.0 kg de vermiculita, em condições de casa de vegetação, onde foram submetidas aos seguintes tratamentos (Controle; seca; NaCl + seca; NaCl) por três ciclos sucessivos de seca-reidratação (3 semanas) seguido de uma recuperação no final do último ciclo (após 48 h). No terceiro experimento, plântulas de A.nummularia, com idade de dois meses foram transplantadas para cultivo hidropônico em vasos plásticos com capacidade para 0,8 em sala de crescimento sob condições controladas onde sofrerão um pré-condicionamento com ou sem NaCl por duas semanas. Após foram submetidas aos seguintes tratamentos (controle; PEG; NaCl; NaCl + PEG). Em conclusão, os resultados da presente investigação demonstram que as plantas de Atriplex nummularia foram capazes de manter o seu crescimento mesmo em condições de alta salinidade, principalmente pela capacidade de manutenção de seu status hídrico. Os resultados também sugerem que a GB é o maior soluto orgânico envolvido com o ajustamento osmótico (AO) do citoplasma e que sua acumulação parece ser uma resposta adaptativa ao estresse provocado pelo NaCl. Em adição, o íons salinos Na+ e Cl- contribuíram para a maioria do AO das folhas submetidas ao NaCl. O impacto relativo do K+ sobre o AO das folhas foi reduzido consideravelmente com o aumento da dose externa de NaCl. Os resultados evidenciam também que o pré-condicionamento com NaCl influenciou positivamente no crescimento de Atriplex nummularia, em condições de seca, evidenciado pelo maior acúmulo de massa seca e melhor status hídrico das folhas. Dentre os solutos inorgânicos analisados, o Na+ e o Cl- foram os que mais contribuíram para a osmorregulação das folhas em condições de deficiência hídrica. Enquanto, GB foi o soluto orgânico mostrou o maior percentual de contribuição para o potencial osmótico. Entretanto os resultados mostraram que o pré-condicionamento das plântulas de Atriplex nummularia com NaCl não foram capazes de atenuar os efeitos induzidos pelo PEG.
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Desenvolvimento de nanobiocompÃsitos para aplicaÃÃo em sistemas de liberaÃÃo controlada de fÃrmacos / Development of biocomposites for application in controlled release drug delivery systems

Elayne ValÃrio Carvalho 29 July 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Nos Ãltimos vinte anos, o campo de biomateriais à base de fosfato de cÃlcio tem crescido rapidamente, desempenhando um papel-chave como substituinte Ãsseo. A hidroxiapatita (HA) apresenta semelhanÃa quÃmica e estrutural com a fase mineral dos ossos e dos dentes, à biocompatÃvel e osteocondutiva, tem excelente afinidade quÃmica e biolÃgica com os tecidos Ãsseos e tem aplicaÃÃes biomÃdicas importantes como preenchimento de defeitos Ãsseos e em âscaffoldsâ na engenharia de tecidos. Nanocristais de HA foram sintetizados com sucesso por co-precipitaÃÃo e via hidrotÃrmica. Para a caracterizaÃÃo estrutural, tamanho e morfologia das fases obtidas foram utilizadas tÃcnicas de DifraÃÃo de Raios-x (DRX), Espectroscopia na RegiÃo do Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), AdsorÃÃo/dessorÃÃo de N2, Potencial Zeta (PZ) e Microscopia EletrÃnica de TransmissÃo (TEM). Estruturas mesoporosas foram obtidas com diÃmetros de poros variando entre 12 e 31 nm. Os nanocristais de HA apresentaram uma morfologia definida, em forma de bastÃo, e foram incorporadas a um polÃmero para formaÃÃo de um âscaffoldâ. A droga sinvastatina (SINV), que influencia a regeneraÃÃo Ãssea quando aplicada localmente, foi associada aos biocompÃsitos obtidos. A caracterizaÃÃo dos âscaffoldsâ foi realizada por Microscopia EletrÃnica de Varredura (MEV). / In the last twenty years, the field of biomaterials based on calcium phosphates has grown rapidly, playing a key role as a bone substituent. Hydroxyapatite has chemical and structural similarity to the mineral phase of bone and teeth, is biocompatible and osteoconductive. It has excellent chemical and biological affinity with the bone tissue and important biomedical applications such as filling bone defects and scaffolds in tissues engineering. Hydroxyapatite nanocrystals were successfully synthesized by co-precipitation and hydrothermal route. X-ray diffraction, Fourier-transform infrared spectroscopy, N2 adsorption/desorption, Zeta Potential and Transmission Electron Microscopy were used to structural characterization, size and morphology of the nanoparticles. Mesoporous structures were obtained with pore diameters ranging from 12 to 31 nm. The nanoparticles showed a rod-shaped mophorlogy and were incorporated into a polymer to form a scaffold. The drug simvastatin, which influences bone regeneration when locally applied, was associated with the biocomposite. The characterization of the scaffolds was performed by Scanning Electron Microscopy.
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Estudo dos efeitos da estrutura química de moléculas poliméricas na interação com nanoporo protéico unitário

BARROS, Sheila de Melo 29 February 2012 (has links)
Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-04-07T13:44:32Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Sheila de Melo Barros.pdf: 1291445 bytes, checksum: db27132996d617b0597281f66a66672b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-07T13:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Sheila de Melo Barros.pdf: 1291445 bytes, checksum: db27132996d617b0597281f66a66672b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / CAPES / Atualmente, um grande número de técnicas encontra-se disponível para a caracterização de polímeros sintéticos, tais como a cromatografia por exclusão molecular (CEM), ressonância magnética nuclear (RMN) e técnicas de caracterização por massa como a ionização/dessorção a laser assistida por matiz (MALDI-TOF). Para a maioria dos polímeros sintéticos com elevada polidispersidade, no entanto, estas técnicas necessitam de outros métodos complementares ou de um tratamento prévio da amostra. Recentemente, foi demostrado que poros de α-hemolisina podem ser usados como um espectrômetro de massas em solução para moléculas de polietilenoglicol (PEG), baseado na interação entre um poro de escala nanométrica e moléculas do analito, onde moléculas poliméricas de diferentes tamanhos no interior do nanoporo promovem diferentes estados de condutância com média característica dos tempos de residência. Neste trabalho a interação entre a Polivinilpirrolidona (PVP) e canais de α-hemolisina na presença de elevada corrente iônica foi utilizada para o desenvolvimento de um novo modelo de espectrômetro de massas para polímeros em espaço confinado, baseado em poros de escala nanométrica. Em nossos experimentos, foi utilizada uma solução banhante de (4M KCl, Tris 5 mM, pH 7,5) e uma amostra polidispersa de PVP de peso médio de 10KDa como analito polimérico. A confecção da bicamada lipídica plana e a inserção do nanoporo unitário na membrana, bem como os registros de correntes iônicas através dos poros, foram obtidos em condições de fixação de voltagem. Os resultados demonstram que poros de α-HL são capazes de detectar a polidispersidade do PVP e discriminar as cadeias moleculares com diferentes tamanhos. Os resultados obtidos com o nanoporo sensor apresentaram dados similares aos obtidos nas análises com o MALDI-TOF convencional. Fornecendo as bases científicas para o desenvolvimento de um espectrômetro de massas a partir do canal unitário uma caracterização em tempo real de polímeros sintéticos em solução.
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Preparação e Caracterização de Nanocápsulas Furtivas e Sítio-específicas Para o Tratamento do Câncer

Ferraz, Milena Sales 02 1900 (has links)
Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-17T15:32:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE MILENA FERRAZ.pdf: 2392331 bytes, checksum: 0f370019507d97e9bd0e3ba3f3322bda (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T15:32:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE MILENA FERRAZ.pdf: 2392331 bytes, checksum: 0f370019507d97e9bd0e3ba3f3322bda (MD5) Previous issue date: 2013-02 / MCTI; CNPq; CAPES; PROPESQ-UFPE / O presente estudo objetivou sintetizar um polímero sítio-específico de ácido d,l-láctico e glicólico (PLGA) conjugado ao polietileno glicol (PEG) e ao folato (FOL), desenvolver nanocápsulas furtivas e sítio-específicas contendo β-lapachona (β-lap), validar um método analítico simples, rápido e específico para quantificação da β-lapachona em plasma de ratos através da cromatografia líquida de alta eficiência e analisar o perfil farmacocinético da β-lap encapsulada em nanocápsulas em comparação ao fármaco livre. Primeiramente, o PLGA-PEG-FOL foi sintetizado com um percentual de conjugação de 97% e caracterizado por espectroscopia ¹H RMN e FTIR. A -lapachona foi encapsulada em nanocápsulas convencionais (NC/lap), PEGuiladas (NC-PEG/lap) e sítio-específicas (NC-FOL/lap), as quais foram preparadas pelo método de deposição interfacial de polímero pré-formado. As nanocápsulas foram caracterizadas por tamanho de partícula, índice de polidispersão, eficiência de encapsulação, potencial zeta e estudo de cinética de liberação in vitro. Os resultados demonstraram que o método de preparação permitiu a formação de nanocápsulas sítio-específicas nanométricas, monodispersas e com uma alta eficiência de encapsulação do fármaco. Uma redução do potencial zeta em módulo foi observada nas NC-PEG/lap e NC-FOL/lap em relação às NC/lap, provavelmente devido à presença do PEG e folato na superfície destes sistemas. Uma liberação de -lapachona em torno de 80% a partir das nanocápsulas foi alcançada em 24 h. No estudo de citotoxicidade celular frente às linhagens celulares KG-1 e HeLa, as nanocápsulas sítio-específicas exibiram um efeito antiproliferativo relevante quanto comparados ao fármaco livre. Para a validação do método analítico, empregou-se cromatografia em fase reversa com fase móvel constituída por mistura de metanol e água (80:20, v/v), a um fluxo de 0,9 mL/min. Os analitos foram detectados por UV a 256 nm. A β-lapachona foi extraída das amostras de plasma após adição de metanol. O tempo de retenção foi de 4,5 min. Este método apresentou linearidade na faixa de concentração entre 0,5-16 g/mL ( r = 0,9996), com limite de quantificação de 0,2 g/mL e exatidão de aproximadamente 100%. O método analítico desenvolvido neste trabalho demonstrou especificidade, linearidade, precisão e exatidão. O perfil farmacocinético das NC-FOL/-lap foi avaliado e comparado ao da -lap livre, após injeção intraperitoneal (i.p.) em ratos. Os parâmetros farmacocinéticos foram estimados por uma abordagem não-compartimental utilizando equações clássicas. Neste estudo, as nanopartículas mostraram alterações significativas no perfil farmacocinético das NC-FOL/-lap. Diante dos resultados obtidos, sugere-se que as nanocápsulas PEGuiladas e sítio-específicas contendo -lapachona poderão proporcionar um maior benefício terapêutico através de sistemas de longa duração e específico para células cancerosas.
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Produção de ß-galactosidase e biomassa por kluyveromyces marxianus sob diferentes condições de cultivo

MARTINS, Danyelly Bruneska Gondim January 2004 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5267_1.pdf: 3744071 bytes, checksum: 7b6206d71da118c5b5587baa7e4fac35 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Kluyveromyces marxianus é uma levedura considerada não-convencional que produz 􀈕-galactosidase, enzima que hidrolisa a lactose em glicose e galactose, e que apresenta grande aplicabilidade industrial, sendo utilizada, principalmente, na redução do teor de lactose do leite e seus derivados destinados a pessoas portadoras de intolerância à lactose. A produção de biomassa e de 􀁅-galactosidase pela linhagem CBS 6556 de K. marxianus foi avaliada sob diferentes condições de cultivo. A atividade da enzima 􀁅- galactosidase não parece ser diretamente afetada pela taxa de oxigênio dissolvido, sendo mais importante a fonte de carbono utilizada. Em relação a fonte de nitrogênio, o aumento da atividade enzimática foi mais alta em meio contendo fosfato de amônia, a 34oC (4517,19 U/mg prot). Todavia, a velocidade específica de crescimento foi mais alta na temperatura de 30ºC nesta mesma fonte de nitrogênio (􀁐=40h-1). O coeficiente de partição da enzima 􀁅-galactosidase produzida em soro de queijo coalho foi avaliado em sistema bifásico aquoso (SBA) polietileno glicol(PEG)/Fosfato de potássio. A partição desta enzima foi afetado tanto pelo tamanho da cadeia do PEG quanto pela concentração dos componentes do sistema. O aumento da concentração do polímero (de 14% para 19,7%) demonstrou exercer grande influência na partição da enzima, resultando em inversão do coeficiente de partição (de K=0,008 para K=2,88) quando PEG 3350 foi utilizado para formar o SBA. A maior seletividade foi encontrada utilizando PEG 3350 (4,96); e a melhor recuperação da atividade enzimática foi obtida na fase superior do sistema PEG 8000/fosfato de potássio (76%).
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The Effect of the Vertical Peg Board on the Performance of Pull-Ups by Elementary-School Boys

Fox, Gloria J. 01 1900 (has links)
The purpose of the study was to determine the effect of the use of the vertical peg board on the performance of the pull-ups by boys in grades five and six in an elementary school in the North Texas area.
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Synthesis and Encapsulation of a New Zinc Phthalocyanine Photosensitizer Into Polymeric Nanoparticles to Enhance Cell Uptake and Phototoxicity

Mehraban, Nahid, Musich, Phillip R., Freeman, Harold S. 24 January 2019 (has links)
Efforts to enhance the utility of photodynamic therapy as a non-invasive method for treating certain cancers have often involved the design of dye sensitizers with increased singlet oxygen efficiency. More recently, however, sensitizers with greater selectivity for tumor cells than surrounding tissue have been targeted. The present study provides an approach to the modification of the known photosensitizer zinc phthalocyanine (ZnPc), to enhance its solubility and delivery to cancer cells. Targeting a photosensitizer to the site of action improves the efficacy of the sensitizer in photodynamic therapy. In this work we used PLGA-b-PEG to encapsulate a new zinc phthalocyanine derivative, 2(3), 9(10), 16(17), 23(24)-tetrakis-(4'-methyl-benzyloxy) phthalocyanine zinc(II) (ZnPcBCH3), to enhance uptake into A549 cells, a human lung cancer cell line. ZnPcBCH3 exhibited the same photochemical properties as the parent compound ZnPc but gave increased solubility in organic solvents, which allowed for efficient encapsulation. In addition, the encapsulated dye showed a near 500-fold increase in phototoxicity for A549 cancer cells compared to free dye.
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Risk Factors for Pneumonia After Percutaneous Endoscopic Gastrostomy

Patel, P. H., Thomas, Eapen 01 January 1990 (has links)
Percutaneous endoscopic gastrostomy (PEG) is currently a popular method of administering enteral feeding. Most of these patients are elderly, debilitated, and chronically ill. They are on a number of medications and have multiple diseases. With impaired consciousness and swallowing disability, these patients are prone to develop pneumonia. In order to identify possible risk factors, we followed 24 men who underwent PEG for the occurrence of pneumonia or until they died. We then analyzed the medical records of these patients for potential risk factors for pneumonia. The presence of esophagitis during PEG placement endoscopy and history of pneumonia prior to PEG were significant risk factors. Advanced age and cerebrovascular accident (CVA) tended to indicate a higher risk of pneumonia. Taking these risk factors into consideration may be beneficial in the management of such patients.
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Peg Solitaire on Graphs

Beeler, Robert A., Paul Hoilman, D. 28 October 2011 (has links)
There have been several papers on the subject of traditional peg solitaire on different boards. However, in this paper we consider a generalization of the game to arbitrary boards. These boards are treated as graphs in the combinatorial sense. We present necessary and sufficient conditions for the solvability of several well-known families of graphs. In the major result of this paper, we show that the cartesian product of two solvable graphs is likewise solvable. Several related results are also presented. Finally, several open problems related to this study are given.

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