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Caracteriza??o parcial e atividades farmacol?gicas do extrato rico em polissacar?deos sulfatados da angiosperma marinha Halodule wrightii

Silva, Juliana Maria Costa da 25 November 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaMCS.pdf: 573830 bytes, checksum: 9b4db031d8ca76bd1eed966ee42dfb5b (MD5) Previous issue date: 2008-11-25 / Sulfated polysaccharides (PS) are biomolecules with a great biotechnological potential. There are few data about PS from high plants. In addition, pharmacological activities of PS from plants have not been carrying out. The aim of this work was extract PS from the angiosperm Halodule wrightii and study their anticoagulant and antioxidant activities. Histological analysis showed the presence of the PS manly in the roots. A polysaccharide-rich extract was obtained from H. wrightii by proteolysis followed by methanol and TCA precipitation. Chemical, infra-red analysis and agarose gel electrophoresis in 1.3 diaminopropane acetate buffer confirmed the presence of sulfated polysaccharides made by glucose, galactose, xylose and sulfate residues in the proportion 1: 0,9: 1: 1. In addition polyacrilamide electrophoresis have shown that extract is mainly compose by 11kDa sulfated polysaccharides. Pharmacological analysis have shown total antioxidant capacity (CAT) that resulted in 15,21 μg for equivalent of ascorbic acid, scavenging activity of the DPPH radical with 41,36 % of scavenging, activity of reducing power with the maximum of 0,290 nm (50 % of vitamin C activity) and scavenging activity superoxide radical (O2-) with a maximum of 32,23 %. Chelating activity of metal less than 4% and scavenging activity of the radical hydroxyl (OH-) less than 2%. Time of activated partial tromboplastin (aPTT) doubling the time of coagulation from 20μg of and protrombin time (PT) was not present. The data indicate that PS from Halodule wrightii could be considered for future applications in medicine, food production or cosmetic industry / Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o biomol?culas com um grande potencial biotecnol?gico por apresentarem uma diversidade estrutural e farmacol?gica muito grande. Poucos s?o os relatos da exist?ncia destes pol?meros em vegetais superiores, al?m disso, ainda n?o se tem relatos da identifica??o de atividades antioxidantes e anticoagulantes com PS extra?dos destes vegetais. Com o intuito de verificar a presen?a destes polissacar?deos em angiospermas marinhas conhecidas popularmente como capim do mar, foi coletada a esp?cie marinha Halodule wrightii. As por??es vegetativas (folha, caule e raiz) n?o foram separadas sendo preparado inicialmente um extrato denominado de extrato bruto (EB). Ap?s descontamina??o prot?ica o material obtido foi chamado de extrato de polissacar?deos totais (EPT). A presen?a destes polissacar?deos foi investigada e confirmada por an?lises qu?micas, espectroscopia de infravermelho e eletroforese em gel de agarose sendo denominados de extrato rico em polissacar?deos sulfatados (EPS). A an?lise histol?gica da localiza??o dos PS resultou na presen?a destes polissacar?deos principalmente na epiderme da por??o vegetativa raiz. As an?lises qu?micas mostraram que os polissacar?deos contem glicose, galactose, xilose e sulfato na propor??o de 1: 0,9: 1: 1 e massa molecular de aproximadamente 11 kDa. Os grupos sulfatos est?o provavelmente ligados principalmente em C2 de um monossacar?deo. Testes de atividade antioxidante demonstraram que os PS de H. wrightii n?o apresentaram resultado para o teste de capacidade antioxidante total pelo m?todo CAT. Desta forma foi utilizada a atividade de seq?estro do radical DPPH indicado na literatura por dosar a capacidade antioxidante total que resultou em 41,36%. O seq?estro do ?on super?xido tamb?m foi realizado e resultou em 32,23% assim como o poder redutor que equivaleu a 50% da atividade da Vit. C. N?o houve atividade de seq?estro do radical hidroxila assim como atividade quelante de metal. O teste de atividade anticoagulante (aPTT) mostrou que EPS dobra o tempo de coagula??o com 20 ug, que ? apenas 2,5 vezes a quantidade da Clexane? (heparina de baixo peso molecular). Para o tempo de protrombina (PT) H.wrightii n?o apresentou atividade. Os dados indicam que EPS possuem um potencial biotecnol?gico anticoagulante e antioxidante e que futuras an?lises se fazem necess?rias para confirmarem esse potencial
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An?lises estruturais e atividades biol?gicas de exopolissacar?deo extra?do do fungo comest?vel pleurotus Sajor-Caju e de seu derivado sulfatado quimicamente.

Telles, Cinthia Beatrice da Silva 11 February 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CinthiaBST.pdf: 1239764 bytes, checksum: b0f986e10d6574ec55e837255b634b41 (MD5) Previous issue date: 2010-02-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The exopolysaccharides are extracellular compounds produced by some species of fungi and bacteria. It is suggested that these molecules, even when in the form of complex polysaccharide-peptide, are the main bioactive molecules of many fungus. Some of the biological activities displayed by these compounds can be accentuated and others may arise when you add chemically polar or nonpolar groups to polysaccharides. The fruiting body of Pleurotus sajor-caju produces a heteropolysaccharide with antineoplastic and antimicrobial activity, but other biological activities of this polymer have not been evaluated. In this work the exopolysaccharide of Pleurotus sajor-caju was sulfated chemically and structurally characterized. We also evaluated the antiproliferative, antioxidant and anticoagulant activities from native exopolysaccharide (PN) and its sulfated derivated (PS). Polyacrylamide gel electrophoresis, infrared spectroscopy and nuclear magnetic resonance (??C) proved successful in sulfation of PN to obtain PS. Analysis by gas chromatography-mass spectroscopy showed that PN and PS are composed of mannose, galactose, 3-O-methyl-galactose and glucose in proportion percentage of 44,9:16,3:19,8:19 and 49, 7:14,4:17,7:18,2, respectively. The percentage of sulfate found in PS was 22.5%. Antioxidants assays revealed that the sulfation procedure affects differently the activities of exopolysaccharides, while the total antioxidant capacity, the scavenging activity of superoxide radical and ferric chelating were not affected by sulfation, on the other hand the chemical modification of PN enhanced the scavenging activity of hydroxyl radical and reducing power. PS also showed anticoagulant activity in a dose-dependent manner and clotting time was 3.0 times higher than the baseline value in APTT at 2 mg/mL. The exopolysaccharide not presented antiproliferative activity against HeLa tumor cells, but PS affects the cellular proliferation in a time-dependent manner. After 72 h, the inhibition rate of PS (2.0 mg/mL) on HeLa cells was about 60%. The results showed that PN sulfation increase some of their activities. / Os exopolissacar?deos s?o compostos extracelulares produzidos por algumas esp?cies de fungos e bact?rias. ? sugerido que estas mol?culas, inclusive quando na forma de complexo polissacar?deo-pept?deo, s?o as principais mol?culas bioativas de v?rios fungos. Muitas das atividades biol?gicas apresentadas por esses compostos podem ser acentuadas e outras podem surgir quando se adiciona quimicamente aos polissacar?deos grupamentos polares ou apolares. O corpo de frutifica??o de Pleurotus sajor-caju produz um heteropolissacar?deo com atividade antioneopl?sica e antimicrobiana, contudo outras atividades biol?gicas desse pol?mero ainda n?o foram avaliadas. Neste trabalho o exopolissacar?deo de Pleurotus sajor-caju foi sulfatado quimicamente e caracterizado estruturalmente. Tamb?m foram avaliadas as atividades antiproliferativa, antioxidante e anticoagulante do exopolissacar?deo nativo (PN) e de seu derivado sulfatado (PS). Eletroforese em gel de agarose, espectroscopia de infravermelho e resson?ncia magn?tica nuclear (??C) comprovaram o sucesso na sulfata??o de PN para a obten??o de PS. An?lise por cromatografia gasosa acoplada a espectroscopia de massa mostrou que PN e PS s?o constitu?dos de manose, galactose, 3-O-metil-galactose e glicose na propor??o percentual de 44,9:16,3:19,8:19 e 49,7:14,4:17,7:18,2, respectivamente. O percentual de sulfato encontrado em PS foi de 22,5%. Testes antioxidantes revelaram que o processo de sulfata??o influencia de forma diferente nas atividades do exopolissacar?deo. Enquanto a capacidade antioxidante total, a capacidade de seq?estro de radical super?xido e a quela??o f?rrica n?o foram influenciadas pela sulfata??o, essa potencializou a atividade seq?estradora de radicais hidroxila e o poder redutor do exopolissacar?deo. Ap?s o processo de sulfata??o o exopolissacar?deo passou a apresentar atividade anticoagulante de forma dose-dependente, triplicando o tempo de coagula??o em rela??o ao controle numa concentra??o de aproximadamente 2 mg/mL. O exopolissacar?deo n?o apresentou atividade antiproliferativa frente ?s c?lulas tumorais HeLa, por?m ap?s sulfata??o ele passou a apresentar essa atividade de forma tempo- ependente, chegando a inibir em 60% a taxa de prolifera??o das c?lulas com 2 mg/mL, ap?s 72 h de exposi??o. Os resultados aqui obtidos mostraram que a sulfata??o do exopolissacar?deo potencializou algumas de suas atividades.
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Efeito da salinidade da ?gua do mar no rendimento, composi??o e atividades biol?gicas de fra??es polissacar?dicas da Chlorophyta Caulerpa cupressoides var. flabellata

Costa, Mariana Santana Santos Pereira da 19 March 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Santana Santos Pereira da Costa_DISSERT.pdf: 1585088 bytes, checksum: 3aeda3818f245371875985348e34059a (MD5) Previous issue date: 2010-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds sulfated polysaccharides have been described as having various pharmacological activities. However, nothing is known about the influence of salinity on the structure of sulfated polysaccharides from green seaweed and pharmacological activities they perform. Therefore, the main aim of this study was to evaluate the effect of salinity of seawater on yield and composition of polysaccharides-rich fractions from green seaweed Caulerpa cupressoides var. flabellata, collected in two different salinities beaches of the coast of Rio Grande do Norte, and to verify the influence of salinity on their biological activities. We extracted four sulfated polysaccharides-rich fractions from C. cupressoides collected in Camapum beach (denominated CCM F0.3; F0.5; F1.0; F2.0), which the seawater has higher salinity, and Buzios beach (denominated CCB F0.3; F0.5; F1.0; F2.0). Different from that observed for other seaweeds, the proximate composition of C. cupressoides did not change with increased salinity. Moreover, interestingly, the C. cupresoides have high amounts of protein, greater even than other edible seaweeds. There was no significant difference (p>0.05) between the yield of polysaccharide fractions of CCM and its CCB counterparts, which indicates that salinity does not interfere with the yield of polysaccharide fractions. However, there was a significant difference in the sulfate/sugar ratio of F0.3 (p<0.05) and F0.5 (p<0.01) (CCM F0.3 and CCB F0.5 was higher than those determined for their counterparts), while the sulfate/sugar ratio the F1.0 and F2.0 did not change significantly (p>0.05) with salinity. This result suggested that the observed difference in the sulfate/sugar ratio between the fractions from CCM and CCB, is not merely a function of salinity, but probably also is related to the biological function of these biopolymers in seaweed. In addition, the salinity variation between collection sites did not influence algal monosaccharide composition, eletrophoretic mobility or the infrared spectrum of polysaccharides, demonstrating that the salinity does not change the composition of sulfated polysaccharides of C. cupressoides. There were differences in antioxidant and anticoagulant fractions between CCM and CCB. CCB F0.3 (more sulfated) had higher total antioxidant capacity that CCM F0.3, since the chelating ability the CCM F0.5 was more potent than CCB F0.5 (more sulfated). These data indicate that the activities of sulfated polysaccharides from CCM and CCB depend on the spatial patterns of sulfate groups and that it is unlikely to be merely a charge density effect. C. cupressoides polysaccharides also exhibited anticoagulant activity in the intrinsic (aPTT test) and extrinsic pathway (PT test). CCB F1.0 and CCM F1.0 showed different (p<0,001) aPTT activity, although F0.3 and F0.5 showed no difference (p>0,05) between CCM and CCB, corroborating the fact that the sulfate/sugar ratio is not a determining factor for biological activity, but rather for sulfate distribution along the sugar chain. Moreover, F0.3 and F0.5 activity in aPTT test was similar to that of clexane?, anticoagulant drug. In addition, F0.5 showed PT activity. These results suggest that salinity may have created subtle differences in the structure of sulfated polysaccharides, such as the distribution of sulfate groups, which would cause differences in biological activities between the fractions of the CCM and the CCB / Polissacar?deos sulfatados de algas marinhas t?m sido descritos por apresentarem diversas atividades farmacol?gicas. No entanto, nada se sabe a respeito da influ?ncia da salinidade da ?gua do mar na estrutura de polissacar?deos sulfatados de algas verdes e nas atividades farmacol?gicas por eles desempenhadas. Por isso, objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito da salinidade da ?gua do mar no rendimento e na composi??o de fra??es polissacar?dicas da alga verde Caulerpa cupressoides var. flabellata, coletada em duas praias de diferentes salinidades do litoral do Rio Grande do Norte, bem como verificar se as altera??es provocadas pela salinidade se refletiriam em atividades biol?gicas das fra??es. Extraiu-se quatro fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados da C. cupressoides coletada na praia de Camapum (denominado CCM F0.3, F0.5, F1.0, F2.0), a qual a ?gua tem maior salinidade, e na praia de B?zios (denominados CCB F0.3; F0.5, F1.0, F2.0). Diferente do observado para outras algas, a composi??o centesimal da C. cupressoides n?o se alterou em fun??o desta crescer em ambiente de maior da salinidade. Al?m disso, interessantemente, a C. cupressoides t?m altas quantidades de prote?nas, maior at? do esp?cies de algas comest?veis. N?o houve diferen?a significativa (p> 0,05) entre o rendimento das fra??es polissacar?dicas da CCM e das suas correlatas na CCB, o que indica que a salinidade n?o interfere no rendimento das fra??es polissacar?dicas. No entanto, houve uma diferen?a significativa na raz?o sulfato/a??car da F0.3 (p <0,05) e F0.5 (p <0,01) (a raz?o sulfato/a??car da CCM F0.3 e da CCB F0.5foram maiores do que suas correlatas), enquanto a raz?o sulfato/a??car da F1.0 e F2.0 n?o se alterou significativamente (p> 0,05) com a salinidade. Este resultado sugere que a diferen?a observada na raz?o sulfato/a??car entre as fra??es da CCM e CCB, n?o ?, meramente, fun??o da salinidade, mas provavelmente est? relacionada com a fun??o biol?gica destes biopol?meros nas algas marinhas. Al?m disso, a varia??o de salinidade entre os locais de coleta n?o influenciou a composi??o monossacar?dica, a mobilidade eletrofor?tica ou os espectros de infravermelho das fra??es polissacar?dicas, demonstrando que a salinidade n?o altera a composi??o de polissacar?deos sulfatados de C. cupressoides. Houve diferen?as nas atividades antioxidantes e anticoagulantes entre a CCM e CCB. CCB F0.3 (mais sulfatada) apresentou maior capacidade antioxidante total que CCM F0.3, j? a habilidade quelante da CCM F0.5 foi mais potente que a CCB F0.5 (mais sulfatada). Estes dados indicam que, provavelmente, as atividades biol?gicas das fra??es polissacar?dicas da CCM e CCB dependem do padr?o de distribui??o espacial dos grupos sulfatos no pol?mero e que n?o ?, meramente, um efeito da densidade de carga. Polissacar?deos de C. cupressoides tamb?m exibiram atividade anticoagulante na via intr?nseca (aPTT) e via extr?nseca (teste PT). CCB F1.0 e CCM F1.0 mostraram diferen?as significantes (p <0,001) no aPTT, j? F0.3 e F0.5 n?o mostraram diferen?a (p> 0,05) entre a CCM e CCB, corroborando o fato de que a raz?o sulfato/a??car n?o ? um fator determinante para a atividade biol?gica, mas sim, a distribui??o do sulfato ao longo da cadeia do polissacar?deo. Al?m disso, F0.3 e F0.5 apresentaram atividade no teste de aPTT semelhante a clexane?, medicamento anticoagulante. Adicionalmente, as F0.5 mostraram atividade no PT. Estes resultados sugerem que a salinidade pode ter criado sutis diferen?as na estrutura dos polissacar?deos sulfatados, como por exemplo, na distribui??o dos grupos sulfatos, o que ocasionaria as diferen?as nas atividades biol?gicas entre as fra??es da CCM e da CCB
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Fucana ativa via das Map quinases e inibe a prolifera??o de c?lulas de ov?rio de hamster chin?s (CHO)

Nobre, Leonardo Thiago Duarte Barreto 08 July 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeonardoTDBN_DISSERT_parcial.pdf: 2023324 bytes, checksum: af543040ab580eb729ea0ba7ac05cd5a (MD5) Previous issue date: 2011-07-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Fucan is a term used to denominate L-fucose rich sulfated polysaccharides. The fucans have been studied due their pharmacological activities like antithrombotic, antiproliferative and antioxidant. We have extracted three fucan fractions from the brown seaweed Spatoglossum schr?ederi. These fucans were denominated Fuc B 1, Fuc B 1.5 and Fuc B 2. The chemical analyzes show that the fucans have very similar composition as demonstrated by agarose electrophoresis gel, sugar and sulfate content. The antiproliferative effect was determined by MTT and BrdU methodologies in CHO cells. The inhibition of proliferation effect of the three fractions was about 40%. Therefore this we proceed just with the Fuc B 2 due the higher yield. There is no apoptosis indication using the anexin V/propidium iodide test. We found a cell cycle phase G1 arrest. The western blotting show that the PKC; pFAK; pERK 1/2 are activated when the cells were treated with fucans. The treatement with inhibitor of MAPK PD98059 extinguished the fucan effect. These results indicates that fucan act by the ERK pathway inducing the cell death. / Fucana ? um termo utilizado para denominar polissacar?deos sulfatados ricos em L-Fucose. As fucanas t?m sido estudadas devido suas atividades farmacol?gicas: antitromb?tica, antiproliferativa e antioxidante. N?s extra?mos tr?s fra??es de fucanas da alga Spatoglossum schr?ederi. Essas fucanas, denominadas de Fuc B 1, Fuc B 1.5 e Fuc B 2, apresentam uma composi??o muito similar como demonstrado pela eletroforese em gel de agarose, e conte?do de a??car e sulfato. O efeito antiproliferativo foi determinado pelas metodologias de MTT e BrdU em c?lulas CHO. O efeito na inibi??o da prolifera??o das tr?s fra??es foi de cerca de 40%. Assim, procedemos somente com a Fuc B 2 devido seu maior rendimento. N?o houve indica??o de apoptose usando a marca??o com anexina V-FITC/ Iodeto de Prop?deo. Identificamos uma parada na fase G1 do ciclo celular. Os ensaios de western blotting mostraram que PKC, pFAK e pERK 1/2 s?o ativadas quando as c?lulas s?o tratadas com Fuc B. O tratamento com o inibidor de MAPK PD98059 aboliu o efeito da fucana. Esses efeitos indicam que a fucana age via ERK para inibir a prolifera??o das c?lulas.
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Caracteriza??o f?sico-qu?mica e a??es farmacol?gicas hepatoprotetora, antiinflamat?ria, pr?-angiog?nica, antioxidante e anticoagulante da fra??o rica em fucana 0,8FRF 0,8 da alga marrom Lobophora variegata

Will, Luiza Sheyla Evenni Porf?rio 21 December 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LuizaSEPW_DISSERT.pdf: 2731256 bytes, checksum: a154afda557a95d39d943b76672810db (MD5) Previous issue date: 2012-12-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / This study examines the physical and chemical composition and the pharmacological effects of brown seaweed FRF 0.8 Lobophora variegata. Fractionation of the crude extract was done with the concentration of 0.8 volumes of acetone, obtaining the FRF 0.8. The physicochemical characterization showed that it was a fucana sulfated. Anti-inflammatory activity was assessed by paw edema model by the high rates of inhibition of the edema and the best results were in the fourth hour after induction (100 ? 1.4% at the dose of 75 mg / kg) and by the strong inhibitory activity of the enzyme myeloperoxidase (91.45% at the dose of 25 mg / kg). The hepataprote??o was demonstrated by measurements of enzymatic and metabolic parameters indicative of liver damage, such as bilirubin (reduction in 68.81%, 70.68% and 68.21% for bilirubin total, direct and indirect, respectively at a dose of 75 mg / kg), ALT, AST and &#947;-GT (decrease of 76.93%, 44.58% and 50% respectively at a dose of 75 mg / kg) by analysis of histological slides of liver tissue, confirming that hepatoprotective effect the polymers of carbohydrates, showing a reduction in tissue damage caused by CCl4 and the inhibition of the enzyme complex of cytochrome P 450 (increasing sleep time in 54.6% and reducing the latency time in 71.43%). The effectiveness of the FRF 0.8 angiogenesis was examined in chorioallantoic membrane (CAM) of fertilized eggs, with the density of capillaries evaluated and scored, showing an effect proangig?nico at all concentrations tested FRF (10 mg- 1000 mg). The FRF showed antioxidant activity on free radicals (by inhibiting Superoxide Radical in 55.62 ? 2.10%, Lipid Peroxidation in 100.15 ? 0.01%, Hydroxyl Radical in 41.84 ? 0.001% and 71.47 Peroxide in ? 2.69% at concentration of 0.62 mg / mL). The anticoagulant activity was observed with prolongation of activated partial thromboplastin time (aPTT) at 50 mg (> 240 s), showing that its action occurs in the intrinsic pathway of the coagulation cascade. Thus, our results indicate that these sulfated polysaccharides are an important pharmacological target / Este estudo analisa a composi??o f?sico-qu?mica e os efeitos farmacol?gicos da FRF 0,8 da alga marrom Lobophora variegata. O fracionamento do extrato bruto foi feito com a concentra??o de 0,8 volumes de acetona, obtendo a FRF 0,8. A caracteriza??o f?sico-qu?mica mostrou que se tratava de uma fucana sulfatada. Foi verificada a atividade antinflamat?ria pelo modelo de edema de pata, atrav?s das altas taxas de inibi??o do edema e os melhores resultados foram na quarta hora ap?s a indu??o (100 ? 1,4% com a dose de 75 mg/kg) e pela forte atividade inibidora da enzima mieloperoxidase (91,45% com a dose de 25 mg/kg). A hepataprote??o foi demonstrada pelas dosagens de par?metros metab?licos e enzim?ticos indicativos de dano hep?tico, como bilirrubina (redu??o em 68,81%, 70,68% e 68,21% para bilirrubinas total, direta e indireta, respectivamente na dose de 75 mg/kg), ALT , AST e &#947;-GT (diminui??o em 76,93%, 44,58% e 50%, respectivamente na dose de 75 mg/kg), pela an?lise das l?minas histol?gicas do tecido hep?tico, que confirmam esse efeito hepatoprotetor dos pol?meros de carboidrato, mostrando uma redu??o no dano tecidual causado por CCl4, e pela inibi??o do complexo enzim?tico do citocromo P 450 (aumentando o tempo de sono em 54,6% e reduzindo o tempo de lat?ncia em 71,43%). A efic?cia sobre a angiogenese da FRF 0,8 foi examinada na membrana corioalant?ica (CAM) de ovos fertilizados, com a densidade dos capilares avaliadas e pontuadas, mostrando um efeito proangig?nico em todas as concentra??es de FRF testadas (10 &#956;g-1000 &#956;g). A FRF apresentou a??o antioxidante sobre radicais livres (inibindo o Radical Super?xido em 55,62?2,10%, Peroxida??o Lip?dica em 100,15?0,01%, Radical Hidroxila em 41,84?0,001% e Per?xido em 71,47?2,69%, todos na concentra??o de 0,62 mg/mL). A atividade anticoagulante foi verificada com o prolongamento do tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT) a 50 &#956;g (>240 s), mostrando que sua a??o ocorre na via intr?nseca da cascata de coagula??o. Sendo assim, nossos resultados indicam que estes polissacar?deos sulfatados constituem um importante alvo farmacol?gico
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Identifica??o e avalia??o de propriedades de polissacar?deos sulfatados de diferentes fontes naturais que possibilitem sua aplicabilidade biotecnol?gica

Santos, Nednaldo Dantas dos 19 March 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NednaldoDS_TESE.pdf: 2321205 bytes, checksum: c08caa8155a3fd7b840048363939c371 (MD5) Previous issue date: 2012-03-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Sulfated polysaccharides (SP) are widely distributed in animals and seaweeds tissues. These polymers have been studied in light of their important pharmacological activities, such as anticoagulant, antioxidant, antitumoral, anti-inflammatory, and antiviral properties. On other hand, SP potential to synthesize biomaterials like as nanoparticules has not yet been explored. In addition, to date, SP have only been found in six plants and all inhabit saline environments. However, the SP pharmacological plant activities have not been carrying out. Furthermore, there are no reports of SP in freshwater plants. Thus, do SP from marine plants show pharmacological activity? Do freshwater plants actually synthesize SP? Is it possible to synthesize nanoparticles using SP from seaweed? In order to understand this question, this Thesis was divided into tree chapters. In the first chapter a sulfated polysaccharide (SPSG) was successfully isolated from marine plant Halodule wrightii. The data presented here showed that the SPSG is a 11 kDa sulfated heterogalactan contains glucose and xylose. Several assays suggested that the SPSG possessed remarkable antioxidant properties in different in vitro assays and an outstanding anticoagulant activity 2.5-fold higher than that of heparin Clexane? in the aPTT test; in the next chapter using different tools such as chemical and histological analyses, energy-dispersive X-ray analysis (EDXA), gel electrophoresis and infra-red spectroscopy we confirm the presence of sulfated polysaccharides in freshwater plants for the first time. Moreover, we also demonstrate that SP extracted from E. crassipes root has potential as an anticoagulant compound; and in last chapter a fucan, a sulfated polysaccharide, extracted from the brown seaweed was chemically modified by grafting hexadecylamine to the polymer hydrophilic backbone. The resulting modified material (SNFuc) formed nanosized particles. The degree of substitution for hydrophobic chains of 1H NMR was approximately 93%. SNFfuc-TBa125 in aqueous media had a mean diameter of 123 nm and zeta potential of -38.3 ? 0.74 mV, measured bydynamic light scattering. Tumor-cell (HepG2, 786, H-S5) proliferation was inhibited by 2.0 43.7% at SNFuc concentrations of 0.05 0.5 mg/ mL and RAEC non-tumor cell line proliferation displayed inhibition of 8.0 22.0%. On the other hand, nanogel improved CHO and RAW non-tumor cell line proliferation in the same concentration range. Flow cytometric analysis revealed that this fucan nanogel inhibited 786 cell proliferation through caspase and caspaseindependent mechanisms. In addition, SNFuc blocks 786 cell passages in the S and G2-M phases of the cell cycle / Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o amplamente distribu?dos em animais e tecidos de algas. Estes pol?meros t?m sido estudados em fun??o da import?ncia de suas atividades farmacol?gicas, tais como: anticoagulante, antioxidante, antitumoral, anti-inflamat?ria e as propriedades antivirais. Contudo, o potencial dos PS para sintetizar biomateriais, tais como nanopart?culas, ainda ? pouco explorado. At? ent?o, os PS s? foram encontrados em seis plantas e todas habitam ambientes salino. N?o havendo relatos de PS em plantas de ?gua doce. O que nos levou aos seguintes questionamentos: Os PS extraidos de vegetais marinhos n?o apresentam atividades farmacol?gicas? Os vegetais de ?gua doce realmente sintetizam PS? ? poss?vel sintetizar nanopart?culas utilizando PS a partir de algas marinhas? Para melhor entender as quest?es, esta tese foi dividida em tr?s cap?tulos. No primeiro cap?tulo, um polissacar?deo sulfatado (SPSG) foi isolado a partir de um vegetal marinho Halodule wrightii. Os dados aqui apresentados mostram que o SPSG ? uma heterogalactana sulfatada de 11 kDa constituida de glucose e xilose. Os ensaios realizados sugerem que o SPSG possue propriedades antioxidantes not?veis em diferentes ensaios in vitro e uma excelente actividade anticoagulante de 2,5 vezes mais elevadas do que a de heparina Clexane ? no teste APTT. No cap?tulo seguinte, utilizando ferramentas diferentes, tais como an?lises qu?micas e histol?gicas, an?lise de dispers?o de raios-X (EDXA), eletroforese em gel e espectroscopia de infra-vermelho,confirmamos, em primeira m?o, a presen?a de polissacar?deos sulfatados em vegetais de ?gua doce. Al?m de demonstrarmos que o PS extra?do a partir da raiz de E. crassipes tem potencial como um composto anticoagulante.No ?ltimo cap?tulo uma fucana, um polissac?rido sulfatado, extra?do a partir de uma alga marrom, foi quimicamente modificada por adi??o de hexadecilamina ? cadeia principal do pol?mero hidrof?lico. O material resultante (SNFuc) forneceu part?culas nanom?tricas. O grau de substitui??o para as cadeias hidrof?bicas de 1H RMN foi de aproximadamente 93%. SNFuc em meios aquosos tinha um di?metro m?dio de 123 nm e potencial zeta de -38,3 ? 0,74 mV. Os ensaios com c?lulas tumorais (HepG2, 786, H-S5) demonstrou a ocorr?ncia de uma inibi??o que variou de 2,0-43,7% em concentra??es diferentes de SNFuc (0,05-0,5 mg / mL) resultado semelhante foi obtido com a RAEC monstrando uma inibi??o entre 8,0-22,0%. Por outro lado, o nanogel estimulou a prolifera??o de linhagens celulares n?o tumorais como CHO e RAW nas mesmas concentra??es. An?lise por citometria de fluxo revelou que este nanogel de fucana inibiu a prolifera??o celular de 786 por mecanismos dependentes e independentes de caspases. Al?m disso, bloqueou a passagens da c?lula 786 na fase S e G2-M do ciclo celular / 2020-01-01

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