A aplicação de tratamentos não-térmicos têm se mostrado eficiente na inibição de bactérias como Salmonella spp e Escherichia coli. A manga é uma fruta de consumo nacional que possui grande potencial de exportação. Entretanto, surtos de doenças transmitidas por alimentos relacionados a essa fruta provocaram desconfiança sobre o grau de segurança alimentar oferecido pelo produto. O objetivo deste trabalho foi determinar a radiorresistência das bactérias Escherichia coli, Salmonella poona e Alicyclobacillus acidoterrestris na polpa de manga através do cálculo do valor D10 e conhecer o efeito da radiação gama sobre as características organolépticas de polpa de manga. Foi também estabelecido o perfil microbiológico de polpas de manga congeladas disponíveis no mercado utilizando métodos convencionais de plaqueamento e Número Mais Provável (NMP). As polpas contaminadas experimentalmente com as bactérias citadas acima foram irradiadas com doses de 0, 1, 2, 3, 4 e 5 kGy, em fonte de 60Co. A análise sensorial foi feita utilizando dose de 5 kGy, aplicando o teste triangular e o teste de aceitação com escala hedônica. Os resultados deste trabalho mostram que a qualidade das polpas de manga comercializadas não é satisfatória de acordo com os padrões estabelecidos pela lei brasileira e pela literatura, mostrando a necessidade da implantação de outras ferramentas para se alcançar níveis de qualidade aceitáveis. Os valores de D10 obtidos se situaram entre 1,01 e 1,09kGy para E. coli ATCC 8739, entre 0,6 e 0,98kGy para S. poona e entre 0,72 e 0,88kGy para A. acidoterrestris respectivamente. A análise sensorial mostrou que a dose de 5kGy alterou as características sensoriais da polpa de manga. Entretanto, quando a polpa irradiada foi utilizada como ingrediente, o produto obteve boa aceitação nos atributos de aparência geral, sabor e aroma. / The application of non-thermal treatments has proven effective in inhibiting bacteria such as Salmonella and Escherichia coli. Mango is a fruit of national consumption with a great exportation potential. Meanwhile, outbreaks of foodborne disease related to mango consumption caused mistrust on the degree of food security offered by the product. The objective of this work was to establish the radioresistance of bacteria Escherichia coli, Salmonella Poona and Alicyclobacillus acidoterrestris on the mango pulp by the calculation of the D10 values and to know the radiation effect on the sensory characteristics of the fruit pulp. The microbiological profile of frozen mango pulp available at the local market was also established using conventional methods of plating and Most Probable Number (MPN). The pulps experimentally inoculated with the bacteria listed above were irradiated with doses of 0, 1, 2, 3, 4 and 5kGy in a 60Co source. The sensory analysis was performed using a dose of 5 kGy, using the triangular test and the test of acceptance with hedonic scale. The results of this study show that the quality of mango pulp sell in the local market is not satisfactory in accordance with the standards established by the Brazilian law and the literature, showing the need of using other tools to achieve acceptable levels of quality. The D10 values obtained are in the range of 1.01 and 1.09kGy for E. coli ATCC 8739, 0.60 and 0.98kGy for S. poona and 0.72 e 0.88kGy for A. acidoterrestris respectively. The triangular test showed that a 5kGy radiation dose changed the sensory characteristics of mango pulp. Nevertheless, sensory analysis of a food product prepared with the irradiated pulp obtained good acceptance in the attributes of global appearance, flavor and aroma. .

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-04-04T16:10:19Z No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-04-10T11:35:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T11:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / A Análise proteômica de diferentes condições clínicas da polpa dentária humana pode fornecer informações globais sobre mecanismos de patogenicidade e interações multifatoriais existentes entre microrganismos e o tecido pulpar humano. Assim, o objetivo do estudo foi analisar de forma qualitativa proteínas presentes no tecido pulpar em condições clínicas de polpa normal, pulpite irreversível e necrose com lesão periapical visível radiograficamente. Para isso, três réplicas biológicas, contendo pool de 5 dentes, para cada condição clínica foram avaliadas. A extração proteica foi realizada utilizando solução de lise e sonicação, para quantificação foi realizado o método de Bradford. A identificação proteica foi realizada utilizando nanoUPLC-MS/MSE, os dados obtidos foram processados e comparados a um banco de dados com auxílio do software ProteinLynx Global Server (PLGS). A partir dessa análise, um total de 508 proteínas foram identificadas. Entre essas, 75 foram avaliadas de forma exclusiva em polpa normal, 59 no diagnóstico de pulpite e 120 em necrose.Observou-se a presença de proteínas comuns aos diferentes diagnósticos clínicos, sendo 72 destas identificadas nos quadros de polpa normal e de pulpite irreversível, 36 nos quadros de pulpite e necrose, 37 nos quadros de polpa normal e necrose e 109 proteínas foram encontradas de forma semelhante em todos os grupos. No quadro de pulpite foram identificadas predominância das proteínas com função relacionada ao metabolismo e vias de energia, apoptose e maior diversidade de proteínas relacionadas a resposta imune em relação ao quadro clínico de polpa normal. No diagnóstico de necrose com lesão periapical foram identificadas predominância de proteínas relacionadas as funções de crescimento celular, metabolismo de proteínas, transporte, resposta imune, assim como proteínas envolvidas na comunicação, sinal de transdução e adesão celular, em relação ao diagnóstico clínico de pulpite irreversível. Desta forma, o presente estudo conclui que uma mudança no perfil de proteínas relacionadas ao processo imune pode ocorrer, conforme ocorre o agravamento da doença. Além disso, a identificação de proteínas de cada diagnóstico clínico pode contribuir para evolução de estudos relacionado ao processo patogênico pulpar e estudos regenerativos. / The proteomic analysis of different clinical conditions of the human dental pulp can provide global information on mechanisms of pathogenicity and multifactor interactions between microorganisms and human pulp tissue. The objective of this study was to qualitatively analyze the proteins present in pulp tissue under clinical conditions of normal pulp, irreversible pulpitis and necrosis with periapical lesion visible radiographically. For this, three biological replicates of pool containing 5 teeth for each clinical condition was evaluated. Protein extraction was performed using lysis solution (20 mM Tris-HCl pH 8.3, 1.5 mM KCl, 10 mM DTT, 1 mM PMSF 0.1%) and sonication for one minute with alternating cycles. Afterwards, quantification was performed using the Bradford method. The protein identification was performed using nanoUPLC-MS / MSE, the obtained data were processed and compared to a database with the aid of ProteinLynx Global Server (PLGS) software. From this analysis, a total of 508 proteins were identified. Among these, 75 were evaluated exclusively in normal pulp, 59 in the diagnosis of pulpitis and 120 in necrosis. It observed the presence of proteins found similarly between groups, of which 72 were identified between the normal pulp and irreversible pulpitis, 36 in the pulp and necrosis groups, 37 in the normal group and necrosis, and 109 proteins were found in a similar way in All groups. It was observed that from the normal pulp-to-pulpitis table a greater identification of proteins with function related to metabolism and energy pathways, apoptosis and greater diversity of proteins related to immune response was found. From the diagnosis of irreversible pulpitis to periapical lesion necrosis observed an increase in the diversity of proteins involved in cell growth processes, protein metabolism, transport, immune response, as well as proteins involved in communication, transduction signal and cell adhesion. In this way, this work offers complementary and innovative data regarding pulp proteins, since it can lead to advances in the area of tissue regeneration, as well as knowledge of pulp pathogenesis.

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Ana Claudia Pavarina / Banca: Renata Garcia Fonseca / Banca: André Luis Fraga Briso / Banca: Adriano Fonseca de Lima / Resumo: Nesta pesquisa, foram analisadas a eficácia clareadora, citotoxicidade e características fenotípicas de células pulpares expostas a protocolos de clareamento de consultório experimentais. No primeiro estudo, discos de esmalte/dentina foram submetidos a 6 sessões clareadoras, caracterizadas por 1 ou 3 aplicações de peróxido de hidrogênio (H2O2) a 35% ou 17,5%, por 5 ou 15 min, ou de peróxido de carbamida (PC) a 37%, por 10 ou 20 min. A alteração de cor (E) e quantificação da difusão de H2O2 (violeta leuco-cristal/peroxidase) foram avaliadas. Todos os protocolos testados promoveram alteração significativa de cor associados a redução na difusão de H2O2; no entanto, o gel com PC apresentou os piores resultados (Traço de Pilai; Bonferroni/p<0,05). Apenas os protocolos 35% H2O2/ 1x 15 e 3x 5 min, 17,5% H2O2/ 3x 15 min e 37% PC/ 3x 20 min apresentaram valores de E similares ao protocolo tradicional (35%/ 3x 15 min) em até 6 sessões de clareamento (ANOVA; SNK e Tamhane/p>0.05). No segundo estudo, foi avaliada a citotoxicidade trans-amelodentinária causada pela aplicação de protocolos experimentais usando 35% H2O2/ 1x 15 e 1x 5 min e 17,5% H2O2/ 3x 15, 1x 15 e 1x 5 min. O protocolo 35% H2O2/ 3x 15 min foi empregado como controle positivo. Os discos de esmalte/dentina foram adaptados em dispositivos trans-well, os quais foram posicionados sobre células odontoblastóides (MDPC-23) e cultura primária de células pulpares humanas (HDPCs) previamente semeadas. A viabilidade (MTT) e morfologia celular (MEV) foram avaliadas imediatamente e 72 h pós-clareamento, bem como o estresse oxidativo e lesão à membrana celular (microscopia de fluorescência). Todos os protocolos experimentais avaliados reduziram significativamente o dano celular quando comparados ao controle positivo (Kruskal-Wallis; Mann-Whitney/p<0,05). Esta redução foi tempo/concentração dependente. As células expostas aos protocolos com o gel contendo 17,5% de... / Abstract: In this study, the bleaching effectiveness, cytotoxicity and phenotypic characteristic of dental pulp cells exposed to experimental in-office bleaching protocols were analyzed. In the first study, enamel/dentin discs were subjected to 6 bleaching sessions, composed by 1 or 3 applications of a 35%- or 17.5%-H2O2 (hydrogen peroxide) gel, during 5 or 15 minutes, or by a 37%-CP (carbamide peroxide) gel, applied for 10 or 20 minutes. Color change (E) and H2O2 diffusion (leucocrystal violet/ peroxidase) were analyzed. All the tested protocols promoted significant color alteration and reduction of H2O2 diffusion; however, the CP gel presented the worst results (Pillai's trace/ Bonferroni test; p<0.05). Only the protocols 35%-H2O2/ 1x 15, 35%-H2O2/ 3x 5 min, 17.5%-H2O2/ 3x 15 min and 37%-CP 3x 20 min presented similar E values than traditional protocol (35%-H2O2/ 3x 15 min) up to 6 sessions (ANOVA; SNK and Tamhane tests/p>0.05). In the second study, the trans-enamel and trans-dentinal cytotoxicity on dental pulp cells of selected experimental bleaching protocols (35%-H2O2/ 1x 15 and 1x 5 min; 17.5%-H2O2/ 3x 15, 1x 15 and 1x 5 min) were tested. The protocol 35%-H2O2/ 3x 15 min was considered as the positive control group. The enamel/dentin discs were adapted to trans-wells devices, which were positioned over odontoblast-like cells (MDPC-23) and primary culture of human dental pulp cells (HDPCs) previously seeded on culture plates. The cell viability (MTT) and morphology (SEM) were evaluated immediately and 72 h post-bleaching, as well as oxidative stress and cell membrane damage (fluorescence microscopy). The experimental protocols promoted significant minimization of cell damage, for all evaluated parameters, when compared to positive control, in a time/concentration fashion (Kruskal-Wallis; Mann-Whitney/ p<0.05). Cells exposed to protocols with the 17.5%-H2O2 gel presented cell recovery capability in around 50% three days after bleaching... / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-02-23T14:18:11Z No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-02-25T14:42:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-02-25T14:42:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Para o procedimento de capeamento pulpar direto, a Odontologia utiliza materiais sintéticos com o objetivo de manter a vitalidade do tecido pulpar e substituir a estrutura mineralizada perdida por cárie ou trauma. O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações ocorridas no tecido pulpar e a formação de estrutura mineralizada formada em resposta a diferentes materiais em dentes cultivados ex vivo. Dentes terceiros molares humanos (n=45) em fase de formação radicular, com o objetivo de comparar a resposta do tecido pulpar ao capeamento direto utilizando diferentes materiais odontológicos: agregado trióxido mineral, hidróxido de cálcio, cimento de óxido de zinco-eugenol e cimento de ionômero de vidro. As amostras foram cultivadas após exposição pulpar por 1, 14 e 28 dias e em seguida foram processadas para análise histológica. Tipo de inflamação e sua intensidade, hiperemia, necrose, camada de células odontoblásticas, continuidade e espessura da estrutura mineralizada formada foram analisados. Os grupos não se diferiram estatisticamente quanto aos aspectos da resposta pulpar avaliados, nem em relação a espessura da estrutura mineralizada formada. Porém os grupos tratados com hidróxido de cálcio e cimento de ionômero de vidro apresentaram formação de estrutura mineralizada completa após 14 dias, ao contrário dos outros materiais utilizados. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Direct pulp capping is the use of a biocompatible material on pulp that has been exposed during removal of caries or by traumatic injuries. This study was based on an ex vivo entire tooth culture model of human immature third molars. Direct pulp capping was made in 45 teeth third molars, using calcium hydroxide, mineral trioxide aggregate, zinc oxide eugenol cement and glass-ionomer cement. Then the pulp response and the mineralized tissue were analyzed, after 1, 14 and 28 days of culture, but in the parameters’ analyzed there weren´t difference between the odontologic materials.

Os efeitos pulpares da movimentação dentária induzida foram analisados na microscopia óptica, em 49 primeiros molares superiores de ratos. o aparelho ortodôntico consistiu em uma mola fechada ancorada aos incisivos superiores, movimentando mesialmente o primeiro molar superior esquerdo. Dez animais foram considerados controle, sem movimentação dentária induzida; os demais foram divididos em grupos de acordo com o período de observação após a movimentação: 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias. A eficiência da força e comprovação do movimento dentário teve como parâmetros as alterações periodontais, incluindo-se hialinização segmentar, reabsorção óssea frontal e a distância e a reabsorção radicular. no complexo dentinopulpar não foi observada qualquer alteração morfológica que indicasse efeito da movimentação dentária induzida. / The effects of induced tooth movement on the pulp of Wistar rats were analyzed through light microscopy in 49 first upper molars. The orthodontic appliance consisted of a coil spring moving the fist left molar foreword supported by the incisor. The sample was divided into 4 groups according to the period of observation. the control group consisted of 10 animals without any orthodontic movement. the other 39 rats were evaluated after: 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days of dental movement. The efficiency of induced tooth movement was verified trough the expected classic periodontal phenomena, such as segmental hyalinization of the ligament, bone resorption and even dental resorption, due to intense forces on the distal root. the dentin-pulp complex did not demonstrate any morphological alteration which indicated effects of induced tooth movement.

Os efeitos pulpares da movimentação dentária induzida foram analisados na microscopia óptica, em 49 primeiros molares superiores de ratos. o aparelho ortodôntico consistiu em uma mola fechada ancorada aos incisivos superiores, movimentando mesialmente o primeiro molar superior esquerdo. Dez animais foram considerados controle, sem movimentação dentária induzida; os demais foram divididos em grupos de acordo com o período de observação após a movimentação: 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias. A eficiência da força e comprovação do movimento dentário teve como parâmetros as alterações periodontais, incluindo-se hialinização segmentar, reabsorção óssea frontal e a distância e a reabsorção radicular. no complexo dentinopulpar não foi observada qualquer alteração morfológica que indicasse efeito da movimentação dentária induzida. / The effects of induced tooth movement on the pulp of Wistar rats were analyzed through light microscopy in 49 first upper molars. The orthodontic appliance consisted of a coil spring moving the fist left molar foreword supported by the incisor. The sample was divided into 4 groups according to the period of observation. the control group consisted of 10 animals without any orthodontic movement. the other 39 rats were evaluated after: 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days of dental movement. The efficiency of induced tooth movement was verified trough the expected classic periodontal phenomena, such as segmental hyalinization of the ligament, bone resorption and even dental resorption, due to intense forces on the distal root. the dentin-pulp complex did not demonstrate any morphological alteration which indicated effects of induced tooth movement.

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-24Bitstream added on 2015-03-03T12:06:55Z : No. of bitstreams: 1 000806133_20170324.pdf: 140907 bytes, checksum: 0ba659401532fff209a6102e8fc44a64 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-24T12:04:48Z: 000806133_20170324.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-24T12:05:40Z : No. of bitstreams: 1 000806133.pdf: 822748 bytes, checksum: 5b6c25b2031807f8f6201589e0848466 (MD5) / Os objetivos deste estudo foram o isolamento e diferenciação de células da polpa (hDPCs) e do folículo (hDFCs) dentário de terceiros molares humanos e utilização para avaliação da citotoxicidade e bioatividade de novos cimentos endodônticos. (Capítulo 1) - Após a obtenção das culturas primárias foram realizados os ensaios vermelho de Alizarina, atividade da enzima fosfatase alcalina (ALP). A expressão gênica de proteína morfogenética óssea (bmp7), sialofosfoproteína dentinária (dspp) e alp foi avaliada. Os ensaios de bioatividade demonstraram maior atividade para hDPCs, além de maior expressão de dspp e alp; a expressão de bmp7 foi semelhante nas duas linhagens. Conclui-se que hDPCs demonstram maior capacidade de diferenciação em células com potencial de mineralização, quando comparadas com hDFCs. (Capítulo 2) – Foram utilizadas linhagens primárias (hDPCs e hDFCs), em comparação com linhagens imortalizadas (células osteoblásticas humanas Saos-2, e do ligamento periodontal de ratos mPDL) para análise dos materiais: 1) Cimento Portland branco (CP); 2) MTA; 3) CP/ óxido de nióbio microparticulado (Nb2O5?); 4) CP/ óxido de nióbio nanoparticulado (Nb2O5n). A citotoxicidade foi avaliada pelos ensaios MTT e Azul de Trypan e a bioatividade pela atividade da ALP. Viabilidade celular foi observada em todas as linhagens; e a atividade de ALP apresentou maior resposta na linhagem Saos-2. Conclui-se que as diferentes linhagens celulares são similares para avaliação da citotoxicidade; entretanto, para avaliação da bioatividade o uso de uma linhagem celular osteoblástica é mais indicado. Além disso, observa-se que materiais à base de Nb2O5? e Nb2O5n mostram potencial como radiopacificador alternativo no MTA. / The aims of this study were to isolate and differentiate pulp (hDPCs) and follicle (hDFCs) cells obtained from human third molars and to use them in cytotoxicity and bioactivity assays of new dental materials. (Chapter 1) - After obtaining the stem cultures, Alizarin Red, alkaline phosphatase (ALP) activity and gene expression by Real Time PCR of bone morphogenetic protein (BMP7), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and ALP were performed. The bioactivity asssays showed greater activity for hDPCs, and increased expression of dspp and alp; the expression of bmp7 was similar in both cell lines. We conclude that hDPCs demonstrate greater ability to differentiate into cells with mineralization potential when compared with hDFCs. (Chapter 2) - stem lineages (hDPCs and hDFCs) were used, compared to immortalized lineages (human osteoblastic cells Saos-2, and periodontal ligament of mice cells mPDL) for analysis of the following materials: 1) white Portland cement (PC); 2) MTA; 3) C/ microparticulated of niobium oxide (Nb2O5?); 4) CP/nanoparticulated niobium oxide (Nb2O5n). Cytotoxicity was performed by MTT and Trypan Blue assays and bioactivity by ALP activity assay. Cell viability was observed in all cell lines, and ALP activity showed greater response in Saos-2. We conclude that the different cell lines are similar in cytotoxicity, however, to evaluate the bioactivity, using an osteoblastic cell line is more appropriate. Moreover, it is observed that materials based on Nb2O5? and Nb2O5n show potential for alternative use to MTA.

O mirtilo (blueberry, do inglês) é uma espécie frutífera nativa do Hemisfério Norte que é rica em pigmentos antociânicos - substâncias de alto poder antioxidante e preventivas de doenças degenerativas. O objetivo principal deste trabalho foi estudar a influência de diferentes formas de processamento do mirtilo a fim de preservar o seu conteúdo de antocianinas. Para tanto se estudou primeiramente a estabilidade das antocianinas frente ao tratamento térmico e determinou-se a sua cinética de degradação em sucos de mirtilo. Os resultados mostraram que a degradação de antocianinas de mirtilo seguiu uma cinética de reação de primeira ordem e que a variação nas constantes de taxa de degradação em função da temperatura obedeceu à relação de Arrhenius. Os valores de t1/2 variaram de 180,5 a 5,1 h em temperaturas variando de 40 a 80 °C e a energia de ativação (Ea) calculada foi de 80,42 kJ.mol-1. Um segundo estudo foi conduzido a fim de avaliar diferentes alternativas tecnológicas para a extração do suco de mirtilo frente à recuperação de compostos antociânicos. Foram testados quatro métodos de extração: centrifugação, desintegração, arraste a vapor e extração enzimática. O suco extraído com o auxílio de enzimas apresentou a maior recuperação de compostos antociânicos (superior a 30%) o que motivou tratamentos com diferentes preparados enzimáticos comerciais. A enzima NZ103 (Novozymes®) foi a que apresentou melhor desempenho e a condição ótima de seu emprego foi otimizada: temperatura de extração em 50 °C e concentração da enzima NZ103, diluída em 100 vezes, de 2%. Foi investigada a atividade da enzima polifenoloxidase (PPO) em polpas de mirtilo frente ao tratamento térmico. Observou-se que com temperaturas mais amenas de tratamento térmico (próximas a 40 °C) a enzima possuía os maiores valores de atividade; em contrapartida, ao se elevar a temperatura para valores superiores a 80 °C atividade da enzima apresentou-se praticamente nula. A otimização do binômio tempo e temperatura para a polpa do mirtilo resultou em um tratamento térmico a 80 °C durante 219 segundos implicando nas melhores condições para reduzir a atividade da enzima. Outra enzima responsável pela degradação das antocianinas do suco durante o processamento, reconhecida como sendo uma das mais estáveis ao calor e utilizada como um indicador para os tratamentos térmicos é a peroxidase (POD). A redução da atividade de POD foi investigada utilizando membranas de ultrafiltração de 10, 30 e 50 kDa. A retenção das antocianinas foi inferior com a membrana de 50 kDa, com uma média de retenção de 16% e foi observado que, em geral, quanto maior a massa molar de corte da membrana e a temperatura, menor a retenção. A atividade POD nos tratamentos a 50°C foi reduzida independentemente da membrana utilizada; porém para os tratamentos a 30 e 40°C, essa atividade foi reduzida em 97,5 e 96,2% para as membranas de 10 e 30 kDa, respectivamente. Outro estudo foi conduzido com o propósito de minimizar as perdas e a geração de resíduos: a recuperação das antocianinas contidas no bagaço (que contém cerca de 70% das antocianinas do fruto) gerado na produção do suco. O bagaço foi submetido à extração de antocianinas com solventes orgânicos com vistas ao seu aproveitamento pela indústria de alimentos. Para tanto foram determinadas as condições ótimas de pH e razão etanol/água para a extração de antocianinas a partir do bagaço de mirtilo empregando a metodologia de superfície de resposta. Os resultados mostraram que a melhor condição para a extração de antocianinas monoméricas do bagaço de mirtilo foi para pH de 2,75 e 60% de etanol com 521 mg de cianidina-3-glicosídeo/100 g de bagaço. Para a extração das antocianidinas observouse que uma concentração de 60% de etanol e o pH de 3,40 otimizam a extração. As agliconas peonidina e malvidina necessitaram de uma maior concentração de solvente e pH para a sua extração em relação as demais. No entanto, a aplicação desse extrato etanólico diretamente em alimentos é limitada pela presença de solvente orgânico e pela instabilidade das antocianinas ao calor, variações de pH e à luz. Visando minimizar estes efeitos, foi conduzido um estudo propondo a microencapsulação das antocianinas extraídas do bagaço de mirtilo via liofilização. Para tanto foram testados três diferentes agentes encapsulantes: maltodextrina (MD), carboximetilcelulose (CMC) e hidroximetilpropilcelulose (HPMC). A morfologia das micropartículas produzidas, visualizadas por microscopia eletrônica de varredura, apresentaram estruturas irregulares e semelhantes, o que é típico dos pós preparados por liofilização. Os microparticulados apresentaram boa velocidade de dissolução em água e fotoestabilidade das antocianinas, apresentado um tempo de meia vida superior a 38 dias. Um último estudo de aplicação da polpa de mirtilo para a produção de diferentes formulações de purê a partir do uso de hidrocolóides e açúcares incentivou os estudos que possibilitaram o conhecimento reológico destas formulações que serão úteis para o dimensionamento de equipamentos e desenvolvimento de produtos. / Blueberry is a native fruit of the Northern Hemisphere which is rich in anthocyanin pigments - substances of high antioxidant capacity and preventive of degenerative diseases. The main objective of this study was to evaluate the influence of different methods of blueberry processing in order to maintain the anthocyanins content. To achieve this objective several studies were carried out, firstly the stability of anthocyanins and their degradation kinetics in blueberry juice were investigated. The results showed that the degradation of the anthocyanins from blueberries follows a first order kinetic reaction and it dependence on temperature follows the Arrhenius relationship. Values of t1/2 ranging from 180.5 to 5.1 h at temperatures ranging from 40 to 80 °C were obtained, and the activation energy (Ea) was 80.42 kJ.mol-1. A second study was conducted to evaluate different technological alternatives for the extraction of blueberry juice. Four methods were tested: centrifugation, disintegration, steam distillation, and enzymatic extraction. The juice extracted with enzymes showed the highest anthocyanin recovery (above 30%), which motivated tests with different commercial enzyme preparations. Among the enzymes tested, the enzyme NZ103 (Novozymes®) showed the best performance and the excellent conditions of its use were optimized: extraction temperature of 50 °C and enzyme NZ103 concentration of 2%. Another study was carried out to evaluate the activity of polyphenoloxidase (PPO) in the blueberry pulp during thermal treatment. It was observed that at lower temperatures (close to 40 °C) the enzyme has the highest activity values, however, by raising the temperature to above 80 °C enzyme activity was practically null. The optimization of time and temperature for the blueberry pulp led to thermal treatment of 80 °C during 219 seconds, resulting in the best condition to reduce enzyme activity. Another enzyme responsible for anthocyanin degradation during juice processing, one of the most heat stable enzymes and widely used as an indicator of thermal treatments, is the peroxidase (POD). The reduction of POD activity was investigated using ultrafiltration membranes with molecular weight cut off (MWC) of 10, 30 and 50 kDa. The anthocyanins retention was lower with the 50 kDa membrane, with an average of 16% retention and was observed that, in general, the lower the MWC and temperature, the greater was the retention. The POD activity in the treatments at 50°C was reduced regardless of the membrane used; but for the treatments at 30 and 40°C, this activity was reduced by 97.5 and 96.2% for the 10 and 30 kDa membrane, respectively. Another study was conducted in order to minimize losses and waste generation: the pomace (which contains about 70% of the anthocyanins of the fruit), generated in the production of juice underwent the extraction of anthocyanins with organic solvents to be used by the food industry. The optimum conditions of pH and the ethanol/water ratio for extraction of anthocyanins from the blueberry pomace were determined using the response surface methodology. Results showed that the best condition for the extraction of monomeric anthocyanins present in the blueberry pomace was at pH 2.75 and 60% ethanol, with 521 mg of cyanidin-3-glucoside/100 g of pomace. For the extraction of anthocyanidins, it was observed that a concentration of 60% ethanol and pH of 3.40 was the best condition to optimize extraction. The extraction of aglycones peonidin and malvidin was better a higher concentration of solvent and higher pH values. However, application of ethanol extract directly in food is limited by the presence of organic solvent and the anthocyanins lower stability towards heat and light. In order to minimize these effects, there was another study proposing the microencapsulation of anthocyanins extracted from blueberry pomace by freezedrying. Therefore, we tested three different coating agents: maltodextrin (MD) carboxymethylcellulose (CMC) and hydroxypropylmethylcellulose (HPMC). The microparticles morphology, visualized by scanning electron microscopy, showed irregular structures, which is typical of the powders prepared by freezedrying. The microcapsules showed good solubility and anthocyanins stability toward light, presented a half-life exceeding 38 days. Finally, a study related with an application of blueberry pulp was developed, to produce different formulations of purees from the use of hydrocolloids and sugars. The influence of temperature, xanthan gum and fructose addition on rheological behavior in steady state of blueberry puree was evaluated. The xanthan gum appears as a determinant variable for the viscosity of the puree. In the range of additive concentrations studied, the obtained statistical models could be used for the development of formulations with specified viscosity, constituting a useful tool for modeling and design of unit operations related to blueberry puree production.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-16T19:43:50Z No. of bitstreams: 1 Daniele Pinheiro de Freitas Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente....pdf: 2028523 bytes, checksum: cd8d31def021492a032a820714bfde3d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-16T19:43:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniele Pinheiro de Freitas Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente....pdf: 2028523 bytes, checksum: cd8d31def021492a032a820714bfde3d (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Terapia celular é o conjunto de métodos e abordagens tecnológicas com a utilização de células no tratamento de doenças. A terapia com células-tronco tem despertado grande interesse na comunidade científica devido à capacidade que essas células indiferenciadas têm de preservar sua própria população e de se diferenciar em células dos diversos tecidos. Encontrar a fonte de célula-tronco apropriada para uso terapêutico depende de diversos fatores, como a sua capacidade de proliferação e estabilidade citogenética, assim como suas características fenotípicas e seu potencial de diferenciação. A epilepsia é uma desordem neurológica que acomete de 1 a 3% da população mundial. É caracterizada pela presença de crises espontâneas recorrentes (CER) e possui seu tratamento clínico baseado no emprego de drogas anti-epilépticas (DAES). O uso de células tronco apresenta-se como uma alternativa ao tratamento desta patologia. Este trabalho tem como objetivos caracterizar as células-tronco mesenquimais de polpa de dente decíduo humano e avaliar seu papel terapêutico no modelo de epilepsia do lobo temporal induzido por lítio-pilocarpina em ratos Wistar. As células da polpa de dente humano utilizadas nesse estudo foram submetidas à avaliação fenotípica, do seu potencial de diferenciação, e da estabilidade cromossômica. Para verificar os efeitos terapêuticos das células-tronco de polpa de dente em modelo experimental de epilepsia os animais foram divididos nos seguintes grupos: SE-salina (n=10), que no transplante recebeu solução salina; SE-CDLH1 (n=13) que recebeu células-tronco de polpa de dente humano (107 células/animal), SE-CMO (n=8) que recebeu células mononucleares de medula óssea (107 células/animal) e o grupo controle (n=10) que não foi submetido ao status epilepticus (SE). As células foram transplantadas por via intraperitoneal. Foram realizadas análises, em diferentes espaços de tempo para avaliar migração celular por imunofluorescência e as crises espontâneas recorrentes. Para avaliar alterações de memória foi estudado o desempenho dos animais no labirinto aquático de Morris (LAM). As CDLH1 apresentaram estabilidade cromossômica (até a 8ª passagem); características imunofenotípicas de células mesenquimais, com alta expressão de CD105, CD73, CD 44, CD90, CD166, CD54, OCT-4, e STRO-1; capacidade de diferenciação nas linhagens adipogênicas, osteogênicas e condrogênicas. As CDLH1 migraram para o cérebro e baço dos ratos. Dos resultados terapêuticos observou-se a redução das crises espontâneas recorrentes nos animais tratados após 30 dias do SE e transplante, mas as células não foram capazes de bloquear essas crises (observado 60 dias pós-SE). Obtendo-se os mesmos resultados com o transplante de CMO. Já no estudo da memória não houve diferença estatística na latência de escape nos animais dos grupos epilépticos (tratado e não-tratado). Os animais do grupo controle (não epiléptico), apresentaram retenção de memória em relação aos animais dos grupos SE-salina e SE-CDLH1. Novos estudos devem ser realizados para que se possa estabelecer a utilização ideal das células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente humano em relação às necessidades terapêuticas da epilepsia. / Cell therapy is the set of methods and technological approaches to the use of cells in treating diseases. The stem cell therapy has aroused great interest in the scientific community due to the capacity of these undifferentiated cells in preserving its own population and to differentiate into cells of various tissues. Finding the source of stem cells suitable for therapeutic use depends on various factors such as their ability to proliferate and cytogenetic stability, as well as their phenotypic characteristics and their potential of differentiation. Epilepsy is a neurological disorder that affects 1-3% of world population. It is characterized by recurrent spontaneous seizures (RSS) and has its medical treatment based on use of antiepileptic drugs (AEDs). The use of stem cells is an alternative treatment for this pathology. This work aims to characterize the mesenchymal stem cells from human deciduous dental pulp and evaluate its therapeutic role in the model of temporal lobe epilepsy induced by lithium-pilocarpine in rats. The cells of the human dental pulp used in this study were subjected to phenotypic analysis of their potential of differentiation and chromosomal stability. To verify the therapeutic effects of stem cells from dental pulp in experimental epilepsy, the animals were divided into the following groups: SE-Saline (n = 10) transplanted with saline; SE-CDLH1 (n = 13) who received stem cells from human dental pulp (107 cells / animal), SE-CMO (n = 8) who received bone marrow mononuclear cells (107 cells / animal) and the control group (n = 10) who did not undergo status epilepticus (SE). The cells were transplanted by intraperitoneal route. Analyses were performed in different time to assess cell migration by immunofluorescence and recurrent spontaneous seizures. To evaluate changes in memory we studied the performance of the animals in the Morris water maze, after cell transplantation. Stem cells analyzed showed chromosomal stability (up to 8th passage); immunophenotypic characteristics of mesenchymal cells with high expression of CD105, CD73, CD 44, CD90, CD166, CD54, OCT-4, and STRO-1; ability to differentiate into adipogenic, osteogenic and chondrogenic lineages. The CDLH1 migrated throughout the brain and spleen of mice. The therapeutic results observed the reduction of recurrent spontaneous seizures in treated animals after 30 days of transplantation and SE, but cells were not able to block these seizures (observed 60 days post-SE). The same results were obtained with the transplantation of BMC. In the study of memory there was no statistical difference in escape latency of the epileptic groups (treated and untreated). Animals of control group (non epileptic) showed memory retention in comparison to groups saline-SE and SE-CDLH1. Further studies should be conducted so that we can determine the optimal use of mesenchymal stem cells derived from human dental pulp in relation to the therapeutic needs of the epilepsy.

DIAS, Françoise Parahyba. Estudo do hidróxido de cálcio associado ou não à clorexidina como medicação intracanal de dentes permanentes necrosados. 2010. 67 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-08T14:02:58Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T13:38:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T13:38:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) Previous issue date: 2010 / Aware that the main objective of endodontic treatment is the removal of microorganisms and the prevention of re-infection inside the root canal, and that the infections are polymicrobial and difficult to eliminate, the biomechanical preparation is essential for disinfection, though it is unable to eradicate all microorganisms. The intracanal medication is used as an adjunct to treatment, reducing the endodontic microbiota, and favoring the repair of periapical lesions. However, this dissertation consists of two papers and it is proposed, through a written review, to examine and discuss the intracanal medications most frequently used at present in endodontics - calcium hydroxide and chlorhexidine. Further, through research, to evaluate the antibacterial effect of biomechanical preparation and a calcium hydroxide based paste containing or not 2% chlorhexidine, as intracanal medication in the treatment of necrotic teeth after trauma, as well as to verify the presence of the microorganisms Fusobacterium nucleatum and black-pigmented bacilli inside the root canal of teeth. According to the inclusion criteria, the sample consisted of 14 incisors necrotic after trauma. The microbiological samples were acquired before (S1) and after biomechanical preparation (S2), after intracanal medication (S3) and 72 hours after removal of medication (S4). Selected at random, eight patients used calcium hydroxide as intracanal medication and six patients the calcium hydroxide based paste containing 2% chlorhexidine. The samples were collected sequentially, inserting three sterile absorbent paper cones with a diameter compatible with the root canal, and after a minute the paper points were removed and placed in a tube containing a reduced transport fluid, and sent to the laboratory for microbiological evaluation. The results were analyzed by the Friedman, Conover-Inman and Kruskal-Wallis tests (p <0.05). Microorganisms were found in 100 % of root canals in the initial samples (S1), while in S2 were detected in only 3 out of the 14 samples (21.4 %), resulting in a reduction in the number of colony forming units, a statistically significant result (p <0.001) between S1 and S2. No statistically significant reduction was observed when comparing S2 with S3, S2 with S4, and S3 with S4, regardless of the medication used. It was found that in S1, there was a predominance of Gram-positive cocci - 8 out of 14 (57.1 %) and Gram-negative cocci - 9 out of 14 (64.3 %). In S2 only Gram-positive bacterial morphotypes were detected, in 3 out of 14 samples (21.4 %) of Gram-positive cocci and 2 out of 14 (14.3%) of Gram-positive bacilli. The microorganisms Fusobacterium nucleatum found in 8 of the 14 samples (57.1%) and the black-pigmented bacilli found in 3 of the 14 (21.4%) of the initial samples, and were found in only one out of 6 (16.1%) samples taken after the use of calcium hydroxide. It was concluded that mechanical preparation of necrotic teeth after trauma, using 2.5% NaOCl, plays its role in significantly reducing the microbiota of root canals, but the calcium hydroxide, or the calcium hydroxide based paste containing 2% chlorhexidine, have a limited antibacterial effect, not being able to prevent the re-growth of bacteria after its use as an intracanal medication. / Ciente de que o principal objetivo do tratamento endodôntico consiste na eliminação de microorganismos e evitar a reinfecção dentro do canal radicular, e que as infecções são polimicrobianas e difíceis de serem eliminadas, o preparo biomecânico além de ser primordial para a desinfecção, é incapaz de erradicar todos os microorganismos. Então, utiliza-se da medicação intracanal como coadjuvante ao tratamento, reduzindo a microbiota endodôntica e favorecendo o reparo da lesão periapical. Contudo, esta dissertação é constituída de dois artigos e propõe-se, mediante uma revisão de literatura, apresentar e discutir as medicações intracanais mais utilizadas atualmente na Endodontia – hidróxido de cálcio e clorexidina, e, por meio de uma pesquisa, avaliar o efeito antibacteriano do preparo biomecânico e de uma pasta à base de hidróxido de cálcio associada ou não à clorexidina a 2 %, como medicação intracanal, no tratamento de dentes necrosados após trauma, bem como verificar a presença dos microorganismos Fusobacterium nucleatum e bacilo pigmentado negro no interior do canal radicular desses dentes. De acordo com os critérios de inclusão, a amostra constituiu-se de 14 incisivos necrosados após trauma. As coletas microbiológicas foram adquiridas após a abertura coronária (C1), preparo biomecânico (C2), medicação intracanal (C3) e 72h depois da retirada da medicação (C4). Mediante sorteio, oito pacientes utilizaram como medicação intracanal o hidróxido de cálcio e seis pacientes a pasta de hidróxido de cálcio associada à clorexidina a 2 %. As coletas foram realizadas introduzindo sequencialmente três cones de papel absorvente estéril, de diâmetro compatível com o do canal radicular, no interior deste por aproximadamente um minuto e transferidas para um tubo contento um fluido reduzido para transporte e levadas ao laboratório para processamento microbiológico. Os resultados foram avaliados pelos testes Friedman, Conover-Inman e Kruskall-Wallis (p<0.05). Os microorganismos foram encontrados em 100 % dos canais radiculares, das amostras iniciais (C1), enquanto na C2 foram detectados em apenas 3/14 (21.4 %) das amostras, resultando numa redução do número de unidades formadoras de colônias, estatisticamente significante (p<0.001) entre C1 e C2. O mesmo não ocorreu quando comparados C2 com C3, C2 com C4 e C3 com C4, independentemente da medicação. Foi constatada em C1 a predominância de cocos Gram-positivos (8/14) e negativos (9/14), representando 57.1 % e 64.3 %, respectivamente. Na C2 só foram detectados morfotipos bacterianos positivos, num total de 3/14 (21,4 %) de cocos Gram-positivos e 2/14 (14.3 %) de bacilos Gram-positivos. O microorganismo Fusobacterium nucleatum e o bacilo pigmentado negro foram observados em 8/14 (57.1 %) e 3/14 (21.4 %), respectivamente, das amostras iniciais, sendo apenas o primeiro encontrado em 1/6 (16.1 %) amostras, após a utilização do hidróxido de cálcio. Concluiu-se que o preparo biomecânico de dentes necrosados após trauma, utilizando NaOCl a 2.5 %, desempenha seu papel em reduzir significantemente a microbiota dos canais radiculares, porém o hidróxido de cálcio ou a sua associação com clorexidina a 2 % possuem efeito antibacteriano limitado, não sendo capazes de prevenir o recrescimento de bactérias após seu uso como medicação intracanal.