Orientador: Glauco Issamu Miyahara / Coorientador: Cáris Maroni Nunes / Banca: Cristiane Fumiko Furuse / Banca: João Paulo de Carli / Resumo: O líquen plano caracteriza-se como uma doença inflamatória crônica mucocutânea relativamente comum na população. Possui etiologia incerta, sendo possivelmente associado a fatores genéticos, psicológicos e infecciosos, dentre os quais o último vem ocupando um maior destaque devido a uma possível correlação com o vírus do papiloma humano (HPV) e com o Epstein-Barr vírus (EBV). O HPV possui alguns tipos considerados oncogênicos associados ao câncer de colo de útero e fortemente associado ao carcinoma espinocelular (CEC) de orofaringe. O EBV pertence à família herpesvirus humano e está relacionado com o carcinoma nasofaríngeo, linfoma de Burkitt e linfoma não-Hodgkin e sua possível relação com o CEC vem sendo estudada. O objetivo deste estudo foi detectar a presença do DNA do HPV e do EBV em amostras de tecido fresco, plasma sanguíneo, saliva e células esfoliadas orais, extraídas de um grupo pareado por sexo e idade de pacientes portadores de líquen plano bucal (LPB) e de um grupo de pacientes sem lesões de LPB, além de correlacionar as variáveis epidemiológicas dos grupos estudados com a presença viral e verificar se as fontes materiais testadas por este estudo são fontes viáveis para detecção do HPV e do EBV. Foram avaliados 24 pacientes portadores de LPB (Grupo caso) e 17 pacientes sem lesões de LPB (Grupo controle). A extração de DNA das amostras foi realizada após confirmar a presença e integridade do DNA. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística (Teste exato de Fisher e Teste do Qui-Quadrado Mantel-Haenszel, ambos, com nível de significância de 5%). A nPCR foi utilizada para detecção do HPV e do EBV. Obteve-se a positividade viral para o HPV em 41,7% das amostras teciduais, em 12,5% das amostras de células esfoliadas e em nenhuma amostra de plasma sanguíneo e saliva dos pacientes do Grupo / Abstract: Lichen planus is characterized as a chronic inflammatory mucocutaneous disease relatively common in the population. It has uncertain etiology, possibly associated with genetic, psychological and infectious factors. The infectious factor has excelled due the possible correlation of lichen planus with human papilloma virus (HPV) and Epstein-Barr virus (EBV). HPV has some types considered oncogenic, associated with cervical cancer and strongly associated with squamous cell carcinoma (SCC) of oropharynx. EBV belongs to human herpesvirus family and is associated with nasopharyngeal carcinoma, Burkitt's lymphoma and non-Hodgkin lymphoma. Its possible relation to SCC has been studied. The aim of this study was to detect the presence of the DNA of the HPV and EBV in fresh tissue samples, blood plasma, saliva and oral exfoliated cells extracted from a group of patients with oral lichen planus (OLP) paired by age and gender and from a group of patients without OLP lesions, and also correlate the epidemiological variables of the studied groups with the viral presence and verify that the source materials tested in this study are viable for HPV and EBV detection. It was evaluated 24 patients with OLP (Case group) and 17 patients without OLP lesions (Control group). DNA extraction of samples was performed after confirming the presence and integrity of DNA. The results were subjected to statistical analysis (Fisher's exact test and Mantel-Haenszel 19 chi-square test, both with a significance level of 5%). The nPCR was used to detect the presence of HPV and EBV. Was obtained the viral positivity for HPV in 41.7% of tissue samples and in 12.5% of exfoliated cells samples. No samples of blood plasma and saliva were positive in the Case group. On the other hand, the Control group / Mestre

Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Mariangela Esther Alencar Marques / Banca: João Manuel Grisi Candeias / Banca: Gisele Alborghetti Nai / Banca: Silvio Santana Dolabella / Resumo: Introdução: A infecção por genótipos de alto risco doPapilomavírus Humano (HPV) está associada ao desenvolvimento das lesões cervicais pré-invasivas e do carcinoma cervical invasor. A carga viral e o estado físico desses genótipos de HPV são considerados importantes biomarcadores para a progressão dessas lesões. A resposta imune do hospedeiro tem um papel importante na história natural da infecção pelo HPV na cérvice uterina como, por exemplo, a persistência viral e o desenvolvimento do câncer cervical. As citocinas são os principais mediadores desta resposta imune e são capazes de regular a transcrição do HPV dependendo do padrão de resposta ao qual estão associadas. O padrão Th1 contribui para o desenvolvimento da imunidade celular contra a infecção pelo HPV e está relacionado com clearance dessa infecção.Por outro lado, o padrão Th2 está associado com a persistência viral da infecção e com a progressão das lesões cervicais. A maioria dessas infecções provavelmente envolve um balanço entre osperfis Th1 e Th2 da resposta imune. Objetivo: Avaliar a concentração de IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-e INF- na secreção e no soro e a intensidade da imunomarcação destas citocinas nas biópsias cervicais. Além disso, determinar a carga viral e o estado físico do HPV16 em mulheres portadoras de lesão intraepitelial escamosa de baixo grau (LIEBG), lesão intraepitelial escamosa de alto grau (LIEAG), carcinoma cervical invasor (CCI) e no grupo controle.Pacientes e Métodos: Foram incluídas no estudo 109 mulheres com diagnóstico histopatológico de LIEBG (n=16), LIEAG (n=40), CCI (n=13) e 40 mulheres sem alterações histopatológicas na biópsia do colo do útero (grupo controle), atendidas no Ambulatório de Ginecologia Preventiva do Hospital Amaral Carvalho, Jaú, SP. As concentrações das diferentes citocinasno soro e na secreção cervical foram determinadas por ensaio imunoenzimático... / Abstract: Introduction: Infection with high-risk genotypes of the human papillomavirus (HPV) is associated with the development of preinvasive cervical lesions and invasive cervical carcinoma. The viral load and physical state of HPV genotypes are considered important biomarkers for lesion progression. The immune response has an important role in the natural history of HPV infection in the uterine cervix, as, for example, the viral persistence and the development of cervical cancer. Cytokines are the main mediators of this immune response and they regulate the HPV transcription depending on the response pattern to which they are related. The Th1 pattern contributes to the development of cellular immunity against HPV infection and its clearance. On the other hand, Th2 pattern is associated with the persistence of viral infection and the progression of cervical lesions. Most of these infections probably involves a balance between Th1 and Th2 immune response profiles.Objective: To evaluate the concentration of IL-1 β, IL-4, IL-6, IL-10,TNF-and INF-in secretionand serum and also to assess the immunostaining intensity of these cytokines in cervical biopsies.Moreover, the present study aimed to determine the viral load and physical state of HPV16 in women with low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL), high-grade squamous intraepithelial lesion (HSIL), invasive cervical carcinoma (ICC) and also in the control group.Patients and Methods: This study included 109 women with histopathologic diagnosis of LSIL (n=16), HSIL (n=40), ICC (n=13) and 40 women with no pathological changes on cervix biopsy (control group) attended in Preventive Gynaecological Ambulatory at the Amaral Carvalho Hospital, Jaú, São Paulo, Brazil. Cytokine concentrationwas determined in serum and cervical secretion by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunohistochemistry was used to evaluate the immunostaining intensity of cytokines in biopsy ... / Doutor

O estresse oxidativo reflete um desequilíbrio na manutenção do estado redox intracelular que pode resultar no acúmulo de espécies oxidantes. Nestas condições, estas espécies podem gerar danos na estrutura/função do DNA, disfunções mitocondriais, alterações no enovelamento de proteínas, peroxidação de lipídeos, dentre outros danos. Assim, o estresse oxidativo pode contribuir para diversas condições patológicas, como por exemplo, câncer, desordens neurológicas, aterosclerose, diabetes e asma. A infecção persistente por papilomavírus humano (HPV) de alto risco está etiologicamente associada ao câncer de colo uterino, uma das principais causas de morte por câncer em mulheres no mundo todo. Além disso, esses vírus estão associados a uma porcentagem relevante de cânceres de pênis, vulva, ânus e cabeça e pescoço. Em células infectadas por HPV de alto risco oncogênico, o estresse oxidativo resultante do metabolismo anormal dos queratinócitos e a resposta inflamatória crônica não efetiva, podem contribuir no processo de transformação celular. Além disso, a presença das oncoproteínas E6 e E7 interfere nos mecanismos de reparo de lesões em DNA, favorecendo o acúmulo de mutações. Ainda mais, a instabilidade genômica promovida pelo estresse oxidativo, pode favorecer a integração do HPV no genoma das células infectadas, principal causa da persistência viral e progressão de lesões ao câncer. A proteína superóxido dismutase 2 (SOD2) contribui com a homeostase celular ao catalisar a dismutação de radicais ânion superóxido em oxigênio e peróxido de hidrogênio, prevenindo a inativação direta de biomoléculas. Em estudos anteriores, observamos que o aumento do transcrito de SOD2 está associado à resistência ao efeito antiproliferativo do fator de necrose tumoral (TNF) em células imortalizadas por HPV. Além disso, mostramos que existe uma correlação direta entre o aumento dos níveis da proteína SOD2 e a severidade de lesões da cérvice uterina. Finalmente, identificamos SOD2 como um marcador preditivo independente de metástases linfonodais inguinais em pacientes com carcinoma de pênis. No entanto, o papel desta proteína na patogênese associada ao HPV não tem sido estudado em profundidade. O presente estudo visa determinar o envolvimento de SOD2 no processo de transformação celular mediado por HPV e seu valor como marcador preditivo de patologias associadas a este vírus / Oxidative stress reflects a redox imbalance in the cell in favor of oxidant species, which may result in DNA damage, mitochondrial dysfunction, protein misfolding and lipid peroxidation, among others. As a result, oxidative stress is thought to contribute to diverse pathologies such as cancer, neurological disorders, atherosclerosis, diabetes and asthma. Persistent infection with high risk human papillomavirus (HPV) types is etiologically associated with cervical cancer, one of the leading causes of cancer related female death worldwide. Moreover, HPV infection is associated with a significant percentage of penile, vulvar, anal and head and neck carcinomas. In cells infected with high-oncogenic risk HPV types the oxidative stress generated by the abnormal keratinocytes metabolism and non-efficient chronic inflammatory response may contribute to the cellular transformation process. Furthermore, expression of E6 and E7 oncoproteins interferes with several DNA repair mechanisms, favoring the accumulation of mutations. Moreover, genomic instability promoted by oxidative stress may favor HPV integration in host cell genome, the main cause of viral persistence and of precursor lesions progression to cancer. The protein superoxide dismutase 2 (SOD2) contributes to cellular homeostasis by catalyzing radical super anion dismutation in oxygen and oxygen peroxide preventing the direct inactivation of biomolecules. In previous studies we observed that SOD2 mRNA upregulation is associated with the resistance to tumor necrosis factor (TNF) antiproliferative effect in HPV-immortalized cells. Besides, we showed the existence of a direct correlation between increased SOD2 protein expression and cervical lesions severity. Finally, we identified SOD2 as an independent predictive marker of inguinal lymph node metastases in patients with penile carcinomas. However, the role of this protein in HPV-associated pathologies has not been investigated in depth. The goal of this study is to determine the involvement of SOD2 in HPV-mediated cell transformation and its value as a predictive marker in pathologies caused by this virus

Orientador: Luiz Carlos Zeferino / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-28T09:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CamposTeixeira_CirbiaSilva_M.pdf: 1128371 bytes, checksum: f7ee3c8128bb7ec40c81ec62521ca6bf (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: O câncer cérvico-uterino é causado pelo HPV e a vacinação contra este vírus poderá alterar a prevalência destes na população. Objetivo: avaliar o impacto da vacinação contra HPV na detecção dos diferentes tipos de HPV no período de 12 anos pós-vacinação. Métodos: Em 2001, 91 mulheres do Centro de Campinas para estudos clínicos com a vacina contra HPV-16/18 da GSK, receberam três doses da `vacina¿ contra HPV ou de placebo (Al[OH]3) de forma randomizada e duplo-cega. Elas foram seguidas e realizaram testes de HPV (SPF-10 LiPA) em amostras cervicais coletadas semestralmente até 2010. Informações epidemiológicas, reprodutivas e comportamentais foram obtidas em 2001, 2005, 2010. Em 2012, este estudo local, as participantes retornaram, atualizaram suas informações e coletaram nova amostra, testada por CLART-HPV2 test. Os resultados disponíveis foram agrupados com total de 1492 testes de HPV. Foi analisada a proporção de mulheres com detecção de HPV, por agrupamento viral, a ocorrência de infecção persistente por seis meses (IP6m) por um mesmo HPV de alto risco (HR-HPV) e a relação com idade, novo parceiro sexual nos últimos 12 meses, uso de contraceptivo hormonal ou de preservativos, tabagismo, tipo de vacinação e o tempo decorrido. A análise estatística foi realizada por momento e evolutiva em 12 anos e comparados com a vacina recebida. A análise utilizou os testes x2, exato de Fisher, Mann-Whitney, GEE (equações de estimativa generalizada) e odds ratio com intervalo de confiança de 95% e p<0.5 para significância estatística. Resultados: Os grupos de mulheres `vacinadas¿ e `placebo¿ não apresentaram diferenças na idade e fatores de risco relacionados à aquisição de HPV. Não foi observada diferença na detecção de HPV por momento de coleta da amostra nos 12 anos, avaliados por vacina recebida (53% se vacina contra HPV vs. 47,4% se placebo, p=0,90). Também não houve diferenças significativas para os agrupamentos de HR-HPV, HR-HPV não-HPV16/18, HPV-16/18 e HPV de baixo risco (LR-HPV). Na análise longitudinal a detecção de DNA-HPV apresentou uma tendência de aumento com o tempo para HR-HPV não-HPV16/18 (p=0,03), e de menor detecção de HPV-16/18 (p=0,05) e LR-HPV (p=0,04). Apenas para os HPV-16/18 esta diminuição esteve associada com a vacinação prévia (p=0,05). O uso regular de contraceptivo hormonal esteve associado com 2,4 vezes mais de detecção de LR-HPV (p=0,03), sem relação com a vacinação. Houve 44 episódios de IP6m de HR-HPV, sendo duas vezes mais frequentes em mulheres tabagistas (p=0,03), mas sem relação com a vacinação. Foi observada uma redução, embora não significativa, de IP6m de HR-HPV nas mulheres vacinadas ao longo do tempo (OR=0,68; 95% CI: 0,36-1,28; p=0,23). Conclusões: Não houve diferença na proporção de mulheres com detecção de HPV de qualquer tipo, HR-HPV não-HPV16/18, HPV-16/18 e LR-HPV em relação à vacinação contra HPV-16/18 ou com placebo, em avaliações repetidas por 12 anos. Nas avaliações longitudinais houve uma tendência de menor detecção de HPV-16/18 e menos casos de IP6m por um mesmo HR-HPV detectados nas mulheres previamente vacinadas contra HPV-16/18 / Abstract: Introduction: The cervix cancer is caused by HPV and the vaccination in population base against this virus can change their prevalence. Objective: To assess the impact of HPV vaccination in the detection of different types of HPV in 12-years post-vaccination period. Methods: In 2001, 91 women from Campinas Centre started their participation in clinical trial with HPV-16/18 vaccine (GSK) and received three doses of the HPV vaccine or placebo (Al [OH] 3) in a randomized and double-blinded study. They were followed and performed HPV testing (SPF-10 LiPA) in cervical samples collected every six months, until 2010. Information epidemiologic, reproductive and behavioral was obtained in 2001, 2005 and 2010. In 2012, the participants were invited to return in a local study, when the information were updated and a new cervix sample was collected and tested by CLART-HPV2 test. The available results were gathered with a total of 1492 HPV tests. We analyzed the proportion of women with HPV detection by virus group, the occurrence of 6-month persistent infection (6MPI) by the same high-risk HPV (HR-HPV) and the relationship with age, new sexual partner in the last 12 months, use of hormonal contraception or condoms, smoking, type of vaccination and over 12 years. The statistical analysis was performed by moment of sample collection and longitudinally for 12-year period studied and compared by vaccination performed in 2001. The analysis used the tests chi-square, Fisher's exact, Mann-Whitney, GEE (generalized estimating equations) and odds ratios with 95% confidence interval and p<0.5 for statistical significance. Results: the women from groups 'vaccinated' and 'placebo' did not differ in age and risk factors related to the HPV acquisition. There was no difference in HPV detection by time of sample collection for over 12 years, according to the received vaccine (53% for HPV vaccine vs. 47.4% for placebo, p=0.90). There were also no significant differences for HPV groupments, HR-HPV, HR-HPV non-HPV16/18, HPV-16/18 and low risk HPV (LR-HPV). The longitudinal analysis of DNA-HPV detection showed an increasing trend over time for HR-HPV non-HPV16/18 detection (p=0.03), and a decreasing trend for detection of HPV-16/18 (p=0.05) and LR-HPV (p=0.04). Just for HPV-16/18 the decrease trend was associated with prior HPV vaccination (p=0.05). Regular use of hormonal contraceptive was associated with 2.4 times more LR-HPV detection (p=0.03), but unrelated to vaccination. There were 44 episodes of HR-HPV 6MPI, and their occurred twice more if the women smokes (p=0.03), but unrelated to vaccination. The HR-HPV 6MPI over the 12-year studied had a decreasing pattern in HPV vaccinated women, although not significant (odds ratio=0.68, 95% CI: 0.36 - 1.28; p=0.23). Conclusions: There was no difference in the proportion of women with detection of HPV (any type), HR-HPV non-HPV16/18, HPV-16/18 and LR-HPV in relation to vaccination against HPV-16/18 or placebo in repeated cervix samples for 12 years. In the longitudinal assessments there was a decreasing trend for detecting HPV-16/18 and less episodes of 6MPI of the same HR-HPV in women previously vaccinated against HPV-16/18 / Mestrado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Mestra em Ciências da Saúde

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Christiane Pienna Soares / Banca: Rubens Rodrigues dos Santos Júnior / Banca: Luís Carlos Spolidório / Resumo: O câncer de laringe é a segunda neoplasia mais comum da região de cabeça e pescoço em todo o mundo. Além dos fatores de risco como fumo e consumo de àlcool, o desenvolvimento do câncer de laringe parece estar associado à infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV). As moléculas HLA-G e HLA-E são moléculas HLA de classe I não- clássicas, que desempenham um papel no estabelecimento da manutenção da tolerância imunológica através da inibição de funções de células imunocompetentes. O presente estudo tem como objetivo avaliar a expressão de HLA-G e HLA-E pela técnica imunohistoquímica em biópsias laríngeas de 109 pacientes, 27 lesões benignas (papiloma laríngeo), 17 lesões pré- malignas (displasia leve, moderada ou acentuada), 10 carcinomas in situ de laringe, 27 carcinomas invasores sem metástase, 28 carcinomas invasores com metástase. Além das biópsias avaliadas, também foram analisadas 28 linfonodos cervicais dos pacientes com metástases. A molécula de HLA-G foi detectada em 45% das biópsias analisadas. Dentre os diferentes graus histológicos, a expressão da molécula HLA-G aparece aumentada nas lesões benignas, lesões pré- malignas e carcinomas in situ de laringe, e essa expressão diminui nos carcinomas invasores sem metástase, carcinomas invasores com metástase e nos linfonodos. HLA-E foi detectado em 62,04% das lesões como um todo, havendo um aumento da expressão de HLA-E nas lesões invasivas e nos linfonodos. Esta molécula parece estar associada com a instalação do carcinoma laríngeo. A freqüência do DNA do HPV foi baixa, sugerindo que o câncer de laringe esteja associado a outros fatores de risco. / Abstract: Laryngeal carcinoma is a second common malignant tumor of the head and neck around the world. Besides well-established risk factors like smoking and alcohol abuse, the development of laryngeal carcinoma is associated with human papillomavirus (HPV) infection. HLA-G and HLA-E are two non-classical class I molecules. Their antigens play a role in the establishment and maintenance of immune tolerance by inhibiting the functions of immunocompetent cells. The aim of the present retrospective study was to determine the expression of HLA-G and HLA-E immunoperoxidase in laryngeal biopsies from 109 patients, 27 in benign lesions (laryngeal papillomas), 17 premalignant lesions (low, moderate or severe dysplasia), 10 in situ laryngeal carcinomas, 27 laryngeal carcinomas without metastases, 28 laryngeal carcinomas with metastases. Besides all biopsies evaluated, were also analyzed 28 biopsies of patients with cervical lymph node metastases. The HLA-G molecule was detected in 45% of biopsies analyzed. Among the different histological grades, the expression of HLA-G molecule is increased in benign lesions, premalignant lesions and in situ laryngeal carcinomas, and this expression decreases in invasive carcinoma without metastasis, invasive carcinoma with metastasis and lymph nodes. HLA-E was detected in 62.04% of the lesions as a whole, with increased expression of HLA-E in invasive lesions and lymph nodes. This molecule seems to be associated with the installation of laryngeal carcinoma. The frequency of HPV DNA was low, suggesting that cancer of the larynx is associated with other risk factors. / Mestre

Orientador: Mariângela Esther Alencar Marques / Coorientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Gisele Alborghetti Nai / Banca: Rozany Mucha Dufloth / Resumo: A incidência do adenocarcinoma do colo do útero (AC) está aumentando em muitos países. A associação entre a infecção pelo Papillomavirus Humano (HPV) e o AC ainda permanece incerta. A imunoistoquímica pode auxiliar no diagnóstico nos casos duvidosos, pois algumas condições benignas reativas podem mimetizar processos neoplásicos. Marcadores como bcl-2, Ki-67 e proteína p16INK4A (p16) já foram descritos para ajudar nas dúvidas relacionadas ao epitélio glandular cervical. Trabalhos recentes demonstraram a importância da adição da marcação da proteína Ciclina D1 ao painel imunoistoquímico. A Ciclina D1 é uma proteína sensor chave e integrador dos sinais extracelulares nas células em início até meados da fase G1 do ciclo celular, sendo importante na regulação da proliferação e diferenciação celular. Foram estudados 74 casos de biópsias com diagnóstico de adenocarcinoma de colo do útero, sendo 24 de adenocarcinoma cervical in situ e 50 de adenocarcinoma cervical invasor. No grupo controle, foram incluídas 79 biópsias de colo do útero que continham endocérvice normal ou em condições benignas reativas. A pesquisa de HPV nas biópsias foi realizada pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os primers específicos (MY09/11 e GP5+/GP6+) e a genotipagem foi realizada empregando-se a técnica de PCR Multiplex utilizando primers específicos para os genótipos 6, 16, 18 e 33. A imunoistoquímica foi realizada nos 74 casos com diagnóstico de adenocarcinoma cervical (tipo in situ e invasor) para os marcadores Ciclina D1, proteína p16, Ki-67 e bcl-2 e em 79 casos controle para a Ciclina D1. O DNAHPV foi observado em 100% dos casos de adenocarcinoma cervical. O genótipo mais frequente foi o HPV18. A Ciclina D1 se apresentou negativa nos casos da doença e positiva nos casos benignos e reativos. O painel imunoistoquímico associando Ciclina D1, p16 e Ki-67 pode ser ferramenta útil na ... / Abstract: The incidence of cervical adenocarcinoma (AC) is increasing in many countries. The association between Human Papillomavirus (HPV) infection and the AC remains uncertain. Immunohistochemistry may help in the diagnosis in doubtful cases, because some benign reactive conditions can mimic neoplastic processes. Markers such as bcl-2, Ki-67 and protein p16INK4A (p16) have been described to assist with questions related to cervical glandular epithelium. Recent studies have shown the importance of adding protein labeling Cyclin D1 into immunohistochemical panel. The Cyclin D1 protein is a key sensor and integrator of extracellular signals into cells in early to mid G1 phase of the cell cycle, which is important in the regulation of cell proliferation and differentiation. We studied 74 patients with biopsy diagnosis of adenocarcinoma of the cervix, 24 of cervical adenocarcinoma in situ and 50 invasive cervical adenocarcinoma, The control group included 79 cervical biopsies containing endocervix normal or benign reactive conditions. The research of HPV in biopsies was performed by the polymerase chain reaction (PCR) using specific primers (MY9/11 and GP5 + / GP6 +) and genotyping was carried out using the Multiplex PCR using primers specific for genotypes 6, 16, 18 and 33. Immunohistochemistry was performed in 74 cases diagnosed with cervical adenocarcinoma (type in situ and invasive) for markers Cyclin D1, p16, Ki-67 and bcl-2, and 79 cases control for Cyclin D1. The HPV DNA was observed in 100% of cases of cervical adenocarcinoma. The most common genotype was HPV18. The Cyclin D1 was found negative in cases of illness and positive in benign and reactive samples. The immunohistochemical panel associating Cyclin D1, p16 and Ki-67 may be useful tool in the characterization and diagnosis of cervical adenocarcinoma / Mestre

Orientador: Silvia Regina Rogatto / Banca: Fabíola Encinas Rosa / Banca: Luiz Paulo Kowalski / Resumo: Os relatos em literatura que relacionam preditores biológicos de resposta à radioterapia e ou quimioterapia em carcinomas de orofaringe (CEO) são limitados e a maioria se baseia em grupos de tumores de diferentes sítios anatômicos. Os objetivos deste estudo foram investigar marcadores biológicos que poderiam atuar como potenciais preditores de resposta à quimioterapia de indução seguido de radioterapia, e associá-los com o padrão de infecção pelo HPV e dados clínico-patológicos. Trinta e sete casos de CEO foram avaliados quanto à infecção pelo HPV, 32 casos para alterações no número de cópias (CNAs) por CGH-array e 22 casos tiveram seu perfil de expressão gênica avaliado em relação ao tecido normal e adjacente da orofaringe. O subtipo HPV16 foi o mais prevalente entre eles (8/37), seguido do HPV18 (2/37) e HPV26 (2/37) e HPV16/18 (1/37). As análises de CGH-array foram realizadas na plataforma 4x180k (Agilent). A análise dos dados foi realizada usando o programa Nexus Copy Number v5.0 (Biodiscovery) e seguido de comparação com o Database of Genomic Variants. Foram identificadas 3222 alterações no número de cópias genômicas (CNAs) com prevalência de perdas heterozigotas (46,6%), seguida de ganhos (40,7%), alto nível de ganhos (7,9%) e perdas homozigotas (4,8%). As alterações mais frequentes envolveram ganhos em 3q, 5p, 8q, 9q e 11q e perdas em 3p, 5q, 8p, 9p e 18q. Os casos HPV negativos (20) apresentaram um maior número de CNAs (média 117 CNAs/caso) comparadas aos pacientes HPV positivos (12), os quais apresentaram um perfil genômico menos complexo (média 73 CNAs/caso). Foram identificadas regiões genômicas capazes de diferenciar os tumores HPV positivos e negativos (P<0,05), entre elas as perdas em 7q22.1 e 14q12 presentes exclusivamente nos tumores HPV... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There are few reports relating biological predictors of response to radiotherapy and or chemotherapy in oropharyngeal squamous cell carcinomas (OSCC), and most of them are based on different head and neck anatomical sites. The aims of this study were to investigate biological markers that could act as potential predictors of response to chemotherapy of induction followed by radiotherapy, and its association with HPV infection and clinicopathological data. Thirty-seven OSCC were evaluated for HPV genotyping, 32 cases for copy number alterations (CNAs) by array CGH and 22 cases were investigated by large scale transcription analysis. The subtype HPV16 was the most prevalent among them (8/37), followed by HPV18 (2/37) and HPV26 (2/37), and HPV16/18 (1/37). The array CGH analysis were performed using the 4x180k platform (Agilent). Data analysis were done by Nexus Copy Number v5.0 (Biodiscovery) software and compared with Database of Genomic Variants. A total of 3222 copy number alterations (CNAs) were identified with a prevalence of heterozygous loss (46.6%), followed by gains (40.7%), high level of gains (7.9%) and homozygous loss (4.8%). The most frequent gains involved 3q, 5p, 8q, 9q and 11q and losses on 3p, 5q, 8p, 9p and 18q. The HPV-negative cases (20) showed a higher number of CNAs (average 117 CNAs/case) compared to HPV-positive cases (12), which showed a less complex genomic profile (in average 73 CNAs/case). Genomic regions were able to differentiate between HPV positive and negative cases (P<0.05), including losses on 7q22.1 and 14q12, which were detected exclusively in HPVpositive tumors (P=0.044). A comparative analysis between the cases treated with carboplatin associated with RT (22 cases) was done aiming to identify chromosomal regions that could... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Thesis (Ph.D. in Molecular Biology) -- University of Colorado Denver, 2007. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 96-117). Free to UCD affiliates. Online version available via ProQuest Digital Dissertations;

Reproduction de : Thèse doctorat : Médecine. Sciences de la vie et de la santé : Reims : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. p.128-157.

Diss. (sammanfattning) Umeå : Univ., 2007. / Härtill 4 uppsatser.