Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós Graduação em Nutrição Humana, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-01-02T18:05:44Z No. of bitstreams: 1 2017_MarianaVerasOliveiradeCarvalho.pdf: 3509896 bytes, checksum: 2cee42d9739be6f06d545dcc1838446b (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-02T17:18:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MarianaVerasOliveiradeCarvalho.pdf: 3509896 bytes, checksum: 2cee42d9739be6f06d545dcc1838446b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-02T17:18:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MarianaVerasOliveiradeCarvalho.pdf: 3509896 bytes, checksum: 2cee42d9739be6f06d545dcc1838446b (MD5) Previous issue date: 2018-03-02 / A Passiflora setacea é um fruto nativo do cerrado brasileiro. Sua polpa, naturalmente adocicada, pode ser considerada uma boa fonte de compostos bioativos. Diante da crescente demanda nacional e internacional por frutas tropicais, alimentos funcionais e bebidas prontas para o consumo, a polpa de Passilfora setacea se destaca com um grande potencial para a agroindústria. A composição fitoquímica e o perfil sensorial dos frutos são influenciados pelas condições edafoclimáticas como fatores climatológicos e técnicas de gerenciamento do cultivo, tais como os sistemas de condução, sendo os mais utilizados para o cultivo do maracujá os sistemas na forma de espaldeira e latada, onde o fruto é exposto à luz solar de forma distinta, o que pode afetar a sua composição química, uma vez que a luminosidade modula o processo fotossintético. Simultaneamente, fatores ambientais como chuvas, umidade, temperatura e exposição solar podem influenciar a composição química e qualidade sensorial do fruto. Neste sentido, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do sistema de condução (em latada ou espaldeira) e da estação do ano (nos períodos seco e chuvoso) nos compostos bioativos, atividade antioxidante e qualidade sensorial de polpas de Passiflora setacea. Assim, foram analisadas quatro amostras: latada seca (LS), latada chuva (LC), espaldeira seca (ES), espaldeira chuva (EC). Foram analisados compostos fenólicos totais (TP), taninos condensados ou proantocianidinas (PA), flavonoides totais (TF), carotenoides totais, vitamina C e atividade antioxidante total pelos métodos DPPH e FRAP. As Passifloras são ricas em compostos flavonoides. Assim, cinco flavonoides (orientina, isoorientina, vitexina, isovitexina e hesperetina) foram quantificados por HPLC-DAD, utilizando-se curvas de calibração. Foram analisadas ainda a influência do sistema de condução (latada ou espaldeira), estações do ano (condições climáticas em períodos de seca e chuva) na qualidade sensorial dos refrescos preparados com polpas de P. setacea por meio de escala hedônica de nove pontos para aceitação e check all that apply (CATA) como método descritivo. Com relação aos efeitos dos sistemas de condução nos compostos bioativos e atividade antioxidante, observou-se que, para carotenoides e vitamina C, houve diferença significativa entre o sistema de espaldeira e latada, com conteúdo mais elevado em amostras do sistema espaldeira. Já para TP, PA, TF, atividade antioxidante (DPPH e FRAP), não houve diferença significativa entre os tratamentos espaldeira e latada. As estações seca ou chuvosa geraram diferenças significativas entre os conteúdos de flavonoides totais, orientina, isovitexina e hesperetina e atividade antioxidante por FRAP, com concentrações significativamente maiores no ano 2 da estação chuvosa, período de menor luminosidade. Quanto à qualidade sensorial, embora o sistema de condução e a estação do ano apresentem impacto nas variáveis físico-químicas (pH, sólidos solúveis totais e acidez titulável) e fitoquímicas (fenólicos totais e taninos condensados), esses fatores ambientais não influenciaram a aceitação isoladamente. No entanto, houve uma interação entre esses fatores, que deve ser considerada com vista à projeção do mercado. A análise hierárquica de clusters, resultou na formação de dois segmentos de consumidores. Um deles atribuiu altas médias de aceitação para todos as amostras. Este cluster apresentou comportamento neofílico e maior nível de conhecimento e aceitação sobre alimentos funcionais. Já as variáveis de frequência de consumo de maracujá e de produtos alimentares funcionais não diferiu entre os clusters, não se relacionando à aceitação dos néctares de P. setacea. / Passiflora setacea is a native fruit from Brazilian savannah. Its pulp, naturally sweet, can be considered a good source of bioactive compounds. Faced with the growing national and international demand for tropical fruits, functional foods and beverages ready to drink, the Passilfora setacea pulp stands out for its great potential for agroindustry. The sensory quality and phytochemical composition is influenced by environmental factors and management techniques such as climate conditions and training system. Espalier and trellis training systems are the most used in passion fruit crop. In these training systems, the fruit is exposed to sunlight in a different way, which can affect its chemical composition, once luminosity modulates the photosynthetic process. Simultaneously, environmental factors such as rainfall, humidity, temperature and sun exposure can influence the fruit chemical composition and sensorial quality. This work aimed to define the edaphoclimatic conditions that promote greater expression of bioactive compounds and greater acceptance in Passiflora setacea pulps. Thus, the influence of the training system (espalier or trellis) and environmental factors (temperature, precipitation (mm), humidity and sun exposure) in the dry or rainy season were evaluated on the antioxidant capacity and bioactive compounds of the P. setacea pulp. Four samples were analyzed: espalier dry season (ED), espalier rainy season (ER), trellis dry season (TD) and trellis rainy season (TR). Total phenolic compounds (TP), condensed tannins or proanthocyanidins (PA), total flavonoids (TF), total carotenoids, vitamin C and total antioxidant activity by DPPH and FRAP methods were analyzed. Passifloras are rich in flavonoid compounds. Thus, five flavonoids (orientin, isoorientin, vitexin, isovitexin and hesperetin) were quantified by HPLC-DAD, using calibration curves. It were analysed the influence of the training system (trellis or espalier), seasons (climatic conditions in dry and rainy season) the sensory quality by hedonic scale for acceptance and check all that apply (CATA) as a descriptive method of nectars prepared with P. setacea pulps. Regarding the effects of conduction systems on bioactive compounds and antioxidant activity, it was observed that, for carotenoids and vitamin C, there was a significant difference between the espalier and trellis system, with higher contents in samples on espalier system while for TP, PA, TF, antioxidant activity (DPPH and FRAP), there was no significant difference between espalier and trellis treatments. The dry or rainy seasons resulted in significant differences between the contents of total flavonoids, orientin, isovitexin and hesperetina and FRAP antioxidant activity, with significantly higher concentrations in the rainy season of year 2. Regarding the sensory quality, although the conduction system and the season of the year have an impact on the physical-chemical variables (pH, total soluble solids and titratable acidity) and phytochemicals (total phenolics and condensed tannins), these environmental factors did not influence acceptance as isolated factors. However, there was an interaction between these factors, which should be considered with a view to market projection. Hierarchical analysis of clusters resulted in the formation of two consumer segments. One of them attributed high acceptance averages to all samples. This cluster presented neophilic behavior and a higher level of knowledge and acceptance of functional foods. The frequency of consumption of passion fruit and functional food products did not differ among the clusters, and was not related to the acceptance of P. setacea nectars.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-07-20T13:56:51Z No. of bitstreams: 1 2016_MariaDesterroPereiraFerreiraIbiapina.pdf: 1430080 bytes, checksum: 31b869becc5bd3303c3b0cf3bb624a30 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-07-30T12:31:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MariaDesterroPereiraFerreiraIbiapina.pdf: 1430080 bytes, checksum: 31b869becc5bd3303c3b0cf3bb624a30 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-30T12:31:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MariaDesterroPereiraFerreiraIbiapina.pdf: 1430080 bytes, checksum: 31b869becc5bd3303c3b0cf3bb624a30 (MD5) / O gênero Passiflora possui um grande número de espécies que tem uso popular associado a benefícios à saúde, sendo que somente no Brasil são mais de 150 espécies. Entretanto, apesar de tanta riqueza de diversidade e benefícios, apenas o maracujá-amarelo ou azedo (Passiflora edulis Sims.) é cultivada em escala comercial, representando mais de 95% dos pomares, devido à qualidade dos seus frutos, vigor, produtividade e rendimento em suco. Dentre as espécies pouco conhecidas, destaca-se o maracujá-sururuca ou maracujá-do-sono (Passiflora setacea DC). Uma espécie silvestre pouco estudada, especialmente em relação à propagação, germinação e condições de armazenamento, porém, possui potencial para o mercado de fruta in natura e/ou para processamento na forma de sucos ou outro tipo de alimento. Diante do exposto, objetivou-se com este trabalho avaliar a qualidade química e as propriedades antioxidantes de P. setacea sob diferentes doses de adubação potássica. A variedade de P. setacea utilizada no estudo foi a BRS Pérola do Cerrado. O ensaio foi conduzido em vasos de 50 L de volume contendo amostra de solo típico de cerrado. A adubação potássica foi realizada utilizando-se cloreto de potássio, como fonte tradicional de potássio, e duas rochas fontes de potássio. As rochas utilizadas foram biotita xisto, com 3,5% de K2O e fonolito, com 8,0% de K2O. Na adubação com cloreto de potássio, foram adotadas as seguintes doses: 50, 100, 150 e 200 mg de K dm-3. Na adubação com as rochas fontes de potássio foram testadas doses equivalentes a 50 e 100 mg de K dm-3. No tratamento controle não foi realizada adubação potássica. Na avaliação da qualidade de P. setacea analisaram-se a polpa dos frutos e as folhas. Na avaliação da polpa dos frutos foram determinados sólidos solúveis totais, pH, acidez titulável, relação entre sólidos solúveis totais e acidez titulável, coloração, teor de potássio, teor de carotenoides totais, teor de ácido ascórbico, teor de compostos fenólicos, atividade antioxidante in vitro por DPPH e FRAP. Na avaliação das folhas foram determinados a concentração de compostos fenólicos e o atividade antioxidante in vitro por DPPH e FRAP. Avaliou-se o teor de potássio no solo antes da coleta dos frutos e das folhas de tal forma o obter possível correlação com as diferentes variáveis qualitativas analisadas. Adotou-se Delineamento em Blocos Casualizados, sendo 9 tratamento, com quatros blocos. Os resultados foram submetidos à análise de variância e posteriormente ao Teste de Tukey para comparação das médias entre os tratamentos. Realizou-se análise de correlação entre o teor de potássio no solo antes da colheita e as variáveis qualitativas da polpa e das folhas. A qualidade química da polpa e as propriedades antioxidantes de P. setacea não foram influenciadas significativamente pela adubação potássica, exceto pelas variáveis diferença de cor e atividade antioxidante in vitro por FRAP. Com relação às propriedades antioxidantes nas folhas, houve diferença significativa no atividade antioxidante in vitro por FRAP. Quando se analisou possível correlação entre o teor de potássio no solo antes da colheita e as variáveis relacionadas a qualidade de polpa e das folhas não foram obtidos coeficientes significativos, exceto para a variável teor de ácido ascórbico na polpa e atividade antioxidante in vitro por FRAP nas folhas. A partir dos resultados obtidos, nas condições adotadas no trabalho, é possível concluir que, a adubação potássica não afeta as variáveis relacionadas à qualidade química e propriedades antioxidantes da polpa e das folhas de P. setacea. Além disso, as folhas de P. setacea se destacam por apresentar elevado teor de compostos fenólicos totais e potencial antioxidante, podendo ser consideradas importantes alternativas para a indústria química e indústria farmacêutica. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The genus Passiflora has a large number of species that are associated with health benefits, and in Brazil are more than 150 species. However, despite its large diversity and benefits, only the yellow passion fruit (Passiflora edulis Sims.) is cultivated on a commercial scale, representing more than 95% of the orchards due to the quality of its fruit, productivity and the yield of its juice. Among the lesser-known species, there is the sururuca passion fruit or (Passiflora setacea DC). A wild species that is poorly studied, specially in relation to spread, germination and storage conditions, but has potential for fresh fruit market and/or juice processin or a large amount of other type of food. Given the above, the objective of this study was to evaluate chemical and antioxidant properties of P. setacea under different doses of potassium fertilizer. The variety of P. setacea used in the study was the BRS Pérola do Cerrado. The test was conducted in 50L plant vases containing typical Cerrado soil. K fertilization was carried out using potassium chloride as traditional potassium source, and two rocks as potassium sources. The two rocks used were biotite schist with 3.5% of K2O and phonolite with 8.0% K2O. In the fertilization with potassium chloride, the following doses were adopted: 50, 100, 150 and 200 mg of K dm-3. In the fertilization with the two rocks equivalent doses were tested at 50 and 100 mg of K dm-3. In the control treatment, the potassium fertilization was not performed. To evaluate the quality of P. setacea, the pulp of the fruit and the leaves were analyzed. For the pulp, soluble solids, pH, titratable acidity, ratio of total soluble solids and titratable acidity, color, potassium content, total carotenoid content, ascorbic acid content, content of phenolic compounds, antioxidant potential in vitro by DPPH and FRAP were determined. And, for the leaves, the concentration of phenolics and antioxidant activity in vitro by DPPH and FRAP were determined. The potassium content of the soil was evaluated before the harvest of the fruits and leaves so the most possible correlation with the different qualitative variables was obtained. It was adopted the experimental delineation in randomized blocks with 9 treatment and four blocks. The results were submitted to ANOVA and subsequently Tukey test for comparison of means between treatments. It carried out correlation analysis between the content of potassium in the soil before harvest and qualitative variables of the pulp and the leaves. The chemical pulp quality and antioxidant properties of P. setacea were not significantly influenced by potassium fertilization, except for the color and antioxidant potential in vitro by FRAP. Regarding the antioxidant properties in the leaves, there was significant difference in vitro antioxidant capacity by FRAP. When the correlation between the potassium before harvest and the variables related to quality of the pulp and the leaves were analysed, no significant coefficients were not obtained, except for the variable ascorbic acid content in the pulp and antioxidant potential in vitro by FRAP in the leaves. From the results obtained, is possible to conclude that, in general, the potassium fertilization does not affect the variables related to chemical quality and antioxidant properties of the pulp and the leaves of the P. setacea. In addition to that, the leaves of P. setacea stand out by a high content of phenolic compounds and antioxidant potential and may be considered an important alternative for the chemical industry and pharmaceutical industry.

O uso de fitoterápicos é difundido na cultura popular dos países da América do Sul, substancialmente no Brasil. Passiflora edulis Sims (tipo de maracujá) está presente na lista da RENISUS e é uma espécie utilizada para promover a cicatrização de feridas cutâneas, no entanto, a literatura científica é pobre em relação aos mecanismos de ação da planta. Passiflora setacea DC é uma espécie silvestre de maracujá, sendo mais resistente à morte precoce e infecções por patógenos. Para este estudo procedemos à obtenção e fracionamento do extrato hidroetanólico a 60% das partes aéreas (folhas e caules) de Passiflora edulis e Passiflora setacea. Posteriormente, obtivemos o perfil cromatográfico em CCD e CLAE dos extratos e das frações, isolando os compostos majoritários e fizemos a análise da capacidade oxidativa dessas frações. Em uma segunda fase, verificamos a atividade cicatrizante dos extratos e das frações, em ratos, através da análise macroscópica do processo de cicatrização (área e tamanho do ferimento); análise da migração de neutrófilos (em bolsa de ar induzida no dorso dos animais) e mediadores inflamatórios liberados (TNF-α, IL-1&#946 e CINC-2 &#945/&#946) na bolsa de ar induzida. Os caracteres morfoanatômicos apresentados neste trabalho para Passiflora setacea irão contribuir para sua morfodiagnose e principalmente para sua distinção da Passiflora oficial brasileira, Passiflora edulis. A triagem fitoquímica demonstrou a presença de compostos fenólicos, tais como flavonoides e taninos e ausência de alcaloides, cumarinas e saponinas, nas duas espécies, Passiflora edulis e Passiflora setacea, sendo possível a diferenciação das duas espécies por técnica de CCD e CLAE. Na Passiflora setacea foi identificado um pico majoritário que não foi encontrado na Passiflora edulis e que com uso de técnicas de CLAE semi-preparativa, espectroscopia de massas e ressonância magnética nuclear, este composto foi identificado como sendo luteolina-8-C-ramnosil-glicosideo. Todos os resultados observados nas analises biológicas permitem concluir que estas duas espécies de Passifloras têm atividade cicatrizante e anti-inflamatória significativamente diversa dos sistemas empregados como controle e que podem constituir auxiliares importantes no preparo de futuros medicamentos para melhoria do processo de cicatrização. / The use of herbal medicines is widespread in popular culture of the South American countries, substantially in Brazil. Passiflora edulis Sims (passion fruit) is present in the list of RENISUS and is a species used to promote healing of skin wounds; however, the scientific literature is low in relation to the mechanisms of action of the plant. Passiflora setacea DC is a wild species of passion fruit, being more resistant to early death and infection by pathogens. In the first part of this work, we obtained the 60 % extract of aerial parts (leaves and stems), of the two species, made the fractionation and phytochemical screening of Passiflora edulis and Passiflora setacea. We obtained the chromatographic profile of the extracts and fractions on TLC and HPLC, isolating the majority compounds and we made the analysis of the oxidative capacity of these fractions. In a second phase, we verified the healing activity of extract and fractions in rats by macroscopic analysis of the healing process (the area and size of injury); analysis of neutrophil migration (in air bag-induced on the backs of animals) and inflammatory mediators released (TNF-α, IL-1β and CINC-2 &#945/&#946) on the induced air bag. The macro and micro characters presented in this work for Passiflora setacea will contribute to its diagnose and mainly for its distinction of the official Brazilian Passionflower Passiflora edulis. The phytochemical screening demonstrated the presence of phenolic compounds such as flavonoids and tannins and absence of alkaloids, coumarins and saponins in Passiflora edulis and Passiflora setacea, being possible the differentiation of the two species by TLC and HPLC techniques. Passiflora setacea presented by HPLC a major peak that was not found in Passiflora edulis and using semi-preparative HPLC technique, mass spectroscopy and nuclear magnetic resonance, this compound was identified as luteolin-8-C-rhamnosyl-glucoside. All results observed in biological analyses lead to the conclusion that these two species of Passifloras have healing and anti-inflammatory activity significantly diverse from the control systems and they can be important in the preparation of future medications to improve the healing process.

O uso de fitoterápicos é difundido na cultura popular dos países da América do Sul, substancialmente no Brasil. Passiflora edulis Sims (tipo de maracujá) está presente na lista da RENISUS e é uma espécie utilizada para promover a cicatrização de feridas cutâneas, no entanto, a literatura científica é pobre em relação aos mecanismos de ação da planta. Passiflora setacea DC é uma espécie silvestre de maracujá, sendo mais resistente à morte precoce e infecções por patógenos. Para este estudo procedemos à obtenção e fracionamento do extrato hidroetanólico a 60% das partes aéreas (folhas e caules) de Passiflora edulis e Passiflora setacea. Posteriormente, obtivemos o perfil cromatográfico em CCD e CLAE dos extratos e das frações, isolando os compostos majoritários e fizemos a análise da capacidade oxidativa dessas frações. Em uma segunda fase, verificamos a atividade cicatrizante dos extratos e das frações, em ratos, através da análise macroscópica do processo de cicatrização (área e tamanho do ferimento); análise da migração de neutrófilos (em bolsa de ar induzida no dorso dos animais) e mediadores inflamatórios liberados (TNF-α, IL-1&#946 e CINC-2 &#945/&#946) na bolsa de ar induzida. Os caracteres morfoanatômicos apresentados neste trabalho para Passiflora setacea irão contribuir para sua morfodiagnose e principalmente para sua distinção da Passiflora oficial brasileira, Passiflora edulis. A triagem fitoquímica demonstrou a presença de compostos fenólicos, tais como flavonoides e taninos e ausência de alcaloides, cumarinas e saponinas, nas duas espécies, Passiflora edulis e Passiflora setacea, sendo possível a diferenciação das duas espécies por técnica de CCD e CLAE. Na Passiflora setacea foi identificado um pico majoritário que não foi encontrado na Passiflora edulis e que com uso de técnicas de CLAE semi-preparativa, espectroscopia de massas e ressonância magnética nuclear, este composto foi identificado como sendo luteolina-8-C-ramnosil-glicosideo. Todos os resultados observados nas analises biológicas permitem concluir que estas duas espécies de Passifloras têm atividade cicatrizante e anti-inflamatória significativamente diversa dos sistemas empregados como controle e que podem constituir auxiliares importantes no preparo de futuros medicamentos para melhoria do processo de cicatrização. / The use of herbal medicines is widespread in popular culture of the South American countries, substantially in Brazil. Passiflora edulis Sims (passion fruit) is present in the list of RENISUS and is a species used to promote healing of skin wounds; however, the scientific literature is low in relation to the mechanisms of action of the plant. Passiflora setacea DC is a wild species of passion fruit, being more resistant to early death and infection by pathogens. In the first part of this work, we obtained the 60 % extract of aerial parts (leaves and stems), of the two species, made the fractionation and phytochemical screening of Passiflora edulis and Passiflora setacea. We obtained the chromatographic profile of the extracts and fractions on TLC and HPLC, isolating the majority compounds and we made the analysis of the oxidative capacity of these fractions. In a second phase, we verified the healing activity of extract and fractions in rats by macroscopic analysis of the healing process (the area and size of injury); analysis of neutrophil migration (in air bag-induced on the backs of animals) and inflammatory mediators released (TNF-α, IL-1β and CINC-2 &#945/&#946) on the induced air bag. The macro and micro characters presented in this work for Passiflora setacea will contribute to its diagnose and mainly for its distinction of the official Brazilian Passionflower Passiflora edulis. The phytochemical screening demonstrated the presence of phenolic compounds such as flavonoids and tannins and absence of alkaloids, coumarins and saponins in Passiflora edulis and Passiflora setacea, being possible the differentiation of the two species by TLC and HPLC techniques. Passiflora setacea presented by HPLC a major peak that was not found in Passiflora edulis and using semi-preparative HPLC technique, mass spectroscopy and nuclear magnetic resonance, this compound was identified as luteolin-8-C-rhamnosyl-glucoside. All results observed in biological analyses lead to the conclusion that these two species of Passifloras have healing and anti-inflammatory activity significantly diverse from the control systems and they can be important in the preparation of future medications to improve the healing process.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-03-26T11:00:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3298057 bytes, checksum: bdd181d073f1a85e3749db82a19aa1e5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-26T11:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3298057 bytes, checksum: bdd181d073f1a85e3749db82a19aa1e5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo foi desenvolvido com intuito de analisar economicamente a produção do maracujazeiro Pérola do Cerrado, irrigado por gotejamento, em Viçosa, MG, bem como avaliar a influência de lâminas de irrigação e doses de nitrogênio no teor de flavonoides nas folhas e em características da produção. O experimento foi conduzido na Área Experimental de Hidráulica, Irrigação e Drenagem, pertencente ao Departamento de Engenharia Agrícola da Universidade Federal de Viçosa (UFV). O experimento foi instalado em um esquema de parcelas sub-divididas; tendo, nas parcelas, as lâminas de irrigação (L 1 = 40 % da ETc; L 2 = 70 % da ETc; L 3 = 100 % da ETc; e L 4 = 130 % da ETc) e, nas subparcelas, as doses de nitrogênio (D 0 = 0 kg ha -1 ; D 1 = 150 kg ha -1 ; D 2 = 250 kg ha -1 ; e D 3 = 350 kg ha -1 ), no delineamento inteiramente casualizado, com nove repetições. Além do teor de flavonoides totais e produtividade de frutos, foram avaliados os seguintes componentes e características da produção: número de frutos por planta, massa média do fruto, comprimento médio do fruto, diâmetro equatorial do fruto e diâmetro caulinar. O maior teor de flavonoides totais nas folhas do maracujazeiro – 27,83 mg g -1 – foi estimado com aplicação da lâmina de irrigação de 40 %ETc e da dose de 350 kg ha -1 de N. Os teores de flavonoides obtidos nas folhas do maracujazeiro Pérola do Cerrado, em todos os tratamentos, evidenciam o potencial terapêutico dessa cultivar. O número de frutos por planta e o diâmetro caulinar foram influenciados somente pelas lâminas de irrigação. As variáveis massa média do fruto, comprimento médio do fruto e diâmetro equatorial do fruto não foram influenciadas pelas lâminas de irrigação e doses de nitrogênio. A produtividade máxima – aproximadamente 25 ton ha -1 – foi estimada com aplicação da lâmina de irrigação de 90,6 %ETc e dose de 211,76 kg ha -1 de N. O investimento na produção do maracujazeiro Pérola do Cerrado, irrigado por gotejamento, foi viável para todos os tratamentos testados. A maior rentabilidade foi obtida no tratamento L2D2 – correspondente à aplicação da lâmina de irrigação de 70 %ETc e da dose de 250 kg ha -1 de N. / The present study was carried out aiming the economic analyze of production of the passion fruit Pérola do Cerrado, irrigated by drip irrigation, in Viçosa, MG, as well as to evaluate the influence of irrigation depths and nitrogen doses on the content of flavonoids in the leaves and on the characteristics of the production. The experiment was conducted in the Experimental Area of Hydraulics, Irrigation and Drainage, in the Department of Agricultural Engineering of the Federal University of Viçosa (UFV). The experiment was set up in a split-plot design. The plots consisted on the irrigation depths (L1 = 40% of the ETc, L2 = 70% ETc, L3 = 100% ETc, and L4 = 130% ETc), and the nitrogen doses (D0 = 0 kg ha -1 , D1 = 150 kg ha -1 , D2 = 250 kg ha -1 and D3 = 350 kg ha -1 ) were allocated to the subplots. The experiment was conducted in a completely randomized design with nine replicates. Besides the total content of flavonoids and fruit productivity, the following components and production characteristics were also evaluated: the number of fruits per plant, fruit average mass, fruit average length, the equatorial diameter of fruit and the diameter of stem. The highest content of total flavonoids in the leaves (27.83 mg g -1 ) was achieved with the irrigation depth of 40% ETc and the nitrogen dose of 350 kg ha -1 . The content of flavonoids found in the leaves of all treatments evidences the therapeutic potential of the cultivar Pérola do Cerrado. The number of fruits per plant and the diameter of stem were influenced only by the irrigation depths. The average mass of fruits, the length and the equatorial diameter of fruits were not influenced by the irrigations depths and doses of nitrogen. The maximum yield (approximately 25 ton ha -1 ), was achieved with the irrigation depth 90.6 % ETc and the nitrogen dose of 211.76 kg ha -1 de N. The investment in the production of the passion fruit Pérola do Cerrado, irrigated by drip irrigation, was feasible for all the treatments. The highest income was obtained in the treatment L2D2, corresponding to the irrigation depth of 70% ETc and the nitrogen dose of 250 kg ha -1 .

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-04-27T08:33:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-27T08:33:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A aquisição de competência embriogênica por células somáticas é um processo intrigante e necessita da junção de dados genético-moleculares e citológicos para melhor compreensão dos mecanismos e mudanças celulares envolvidas. À vista disso, os objetivos desse trabalho foram isolar e caracterizar o padrão de expressão dos genes SERK e BBM por hibridização in situ durante o processo de embriogênese somática em Passiflora cincinnata, avaliar a responsividade morfogênica in vitro de P. setacea e P. cincinnata submetidas a condições de indução de embriogênese somática, bem como, acompanhar a mobilização de reservas e a expressão dos genes supracitados durante a embriogênese somática. Para tal, a partir de calos embriogênicos de P. cincinnata, com 20 dias em meio de indução (MI), extraiu-se o RNA total e obteve-se o cDNA, o qual serviu como molde para amplificação da sequência codante utilizando-se primers degenerados para SERK e BBM. A responsividade de embriões zigóticos maduros de P. setacea e P. cincinnata foi avaliada mediante o cultivo em meio de indução alternativo constituído por sais MS suplementado com 31,06 μM de Picloram + 2,22 μM de BA + 2,27 μM de TDZ (MIP) + 500 mg L -1 de Extrato de Malte (EM) + 13,77 μM de Espermidina (Spd). Após 30 dias as culturas foram transferidas ao meio de maturação (MM) composto de meio MS acrescido de 1,0% de carvão ativado e ausência de reguladores de crescimento. Amostras com 0, 10, 20 e 30 dias foram coletadas para microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura, testes histoquímicos e hibridização in situ, todas seguindo protocolos específicos. Para visualização da expressão dos genes SERK e BBM foi gerada uma sonda de RNA a partir de um clone sequenciado de P. cincinnata. Para P. setacea utilizou-se uma sonda heteróloga sense e antisense de P. cincinnata. O relacionamento filogenético das sequências isoladas de P. cincinnata comparadas às de outras espécies apontou que as funções das proteínas podem ser conservadas na espécie. Em SERK, o Pc contig1 agrupou-se com membros de SERK1 e SERK2, enquanto o Pc contig2 agrupou-se com membros de SERK3/BAK1. Por sua vez, o Pc contig1 de BBM, agrupou-se com membros de BBM1 e BBM2. A expressão do gene SERK foi constatada em embriões zigóticos e gradualmente diminuída até os 20 dias em MI. Aos 30 dias em MI, embriões somáticos globulares foram intensamente marcados, assim como em embriões com 5 e 40 dias em MM. Transcritos do BBM foram observados em embriões zigóticos, no entanto, a expressão foi cessada no decorrer do desenvolvimento dos embriões somáticos. A expressão foi retomada em embriões somáticos cotiledonares após 40 dias em MM, assemelhando-se ao observado no embrião zigótico. Observou-se que em P. setacea, durante o processo embriogênico, houve formação de protuberâncias que deram origem a zonas pró-embriogênicas, as quais se desenvolveram em embriões somáticos. Já em P. cincinnata houve proliferação das células do meristema fundamental e formação de meristemoides, caracterizando regiões organogênicas. Quando transferidos ao meio de maturação não houve regeneração de plantas a partir de embriões somáticos em P. setacea. Em P. cincinnata houve intumescimento das regiões calejadas e, em alguns casos, formação de primórdios foliares. Quanto à expressão gênica, em P. setacea foi constatada expressão de BBM e SERK em todas as fases analisadas, especialmente em protuberâncias e embriões somáticos formados. P. cincinnata, por sua vez, também apresentou transcritos dos genes BBM e SERK em todas as fases analisadas, sendo intensificado o sinal de hibridização na periferia dos explantes e regiões meristemáticas após 20 dias em MI. P. setacea apresentou corpos proteicos com decréscimo gradativo até os 30 dias em meio de indução. Houve presença de carboidratos e amido no explante e seu decréscimo após 10 dias, e verificou-se a síntese de novo de amido aos 30 dias de indução, quando há formação de embriões somáticos. Não foi verificada a presença de corpos lipídicos durante o processo embriogênico. Já em P. cincinnata, constatou-se corpos proteicos e amido de forma moderada em todas as etapas de desenvolvimento e a presença de carboidratos totais e corpos lipídicos foi averiguada nas fases iniciais de indução. Após 20 dias, houve mobilização dessas substâncias de reserva concomitantemente com a formação e desenvolvimento de meristemoides. Deste modo, sugere-se que a expressão desses genes está associada aos processos de aquisição de competência embriogênica e podem servir como marcadores moleculares desse processo. Os resultados do isolamento e expressão dos genes SERK e BBM em P. cincinnata são inéditos e contribuem para o melhor entendimento dos processos que envolvem a embriogênese somática na espécie. Nosso trabalho apresenta dados inéditos da indução de embriões somáticos em P. setacea e como as espécies estudadas apresentam respostas morfogênicas divergentes quando submetidas ao mesmo meio de indução. E ainda, relatamos à expressão dos genes BBM e SERK e a mobilização de compostos de reserva no decorrer dos eventos morfogênicos in vitro em P. setacea e P. cincinnata. / The acquisition of embryogenic competence in somatic cells is intriguing process and requires both molecular-genetic and cytological knowledge to better understand the mechanisms and cellular changes involved. Based on this, the aim of this study was to isolate and characterize the expression of SERK and BBM genes in somatic embryos of Passiflora cincinnata, as well as to evaluate the morphogenic in vitro response of Passiflora setacea and P. cincinnata somatic embryogenesis inducted and monitoring the reserve mobilization and expression of the these genes during embryogenesis. For this, RNA was extracted and cDNA was obtained from embryogenic calli of P. cincinnata after 20 days in induction medium (IM), which was used as template for the coding sequence amplification with degenerate primers of SERK and BBM. Mature zygotic embryos of P. setacea and P. cincinnata were inoculated on MS medium supplemented with 31.06 μM of picloram + 2.22 μM of benzyladenine + 2.27 μM of thidizuron + 500mg L -1 of malt extract + 13.77 μM of spermidine. After 30 days, the cultures were transferred to the maturation medium (MM), composed of MS medium supplemented with 1 % of activated charcoal without growth regulators. Samples with 0, 10, 20 and 30 days were collected for light microscopy, scanning electron microscopy, histochemical analyzes and in situ hybridization, following specific protocols. A RNA probe from P. cincinnata cDNA was generated to figure out the expression of SERK and BBM genes, whereas to P. setacea a heterologous sense and antisense probe of P. cincinnata was used. The phylogenetic relationship of P. cincinnata isolated sequences compared with other species suggests that the functions of the proteins are preserved. In SERK, the Pc contig1 grouped up with SERK1 and SERK2 members, while the Pc contig2 grouped with SERK3/BAK1 members. On the other hand, the BBM Pc contig1 was grouped with BBM1 and BBM2 members. The expression of SERK gene was found in zygotic embryos and gradually decreased until 20 days in the IM. After 30 days in the IM, globular somatic embryos were intensely marked with the hybridization signal, as well as embryos with 5 and 40 days in the MM. BBM transcripts were observed in zygotic embryos, but the expression was stopped during the somatic embryos development. The expression was resumed in somatic globular embryos after 40 days in the MM, similar to that observed in zygotic embryos. In the second chapter, in P. setacea embryogenesis process, it was observed the formation of lumps that originate pro-embryogenic zones, which developed into somatic embryos. In P. cincinnata a proliferation of the ground meristem cells and meristemoids formation occurred, emphasizing organogenic regions. When transferred to MM, there was no plant regeneration from somatic embryos of P. setacea. In P. cincinnata, swelling of callus regions and, in some cases, formation of leaf primordia was observed. Regarding the gene expression, in P. setacea there was BBM and SERK expression in all stages, especially in lumps and somatic embryos. Also P. cincinnata showed transcripts of BBM and SERK genes in all stages, with intensification of the hybridization signal at the explants edges and meristematic regions after 20 days in the IM. Protein bodies were found in P. setacea, decreasing gradually until 30 days in the IM. Carbohydrate and starch levels decreased after 10 days, but there was de novo synthesis of starch at 30 days of induction, coupled with the somatic embryos formation. No lipid bodies during the embryogenic process were verified. In P. cincinnata protein bodies and starch were moderately present in all development stages whereas carbohydrates and lipid bodies were present only at the early stages of induction. After 20 days, these reserve substances were mobilized, along with the meristemoids formation and development. Therefore, it is suggested that the expression of these genes is associated with embryogenic competence acquisition process and can be a molecular marker of this process. These results of isolation and expression of SERK and BBM genes in P. cincinnata are original and contribute to a better understanding of the processes involving somatic embryogenesis in this species. This work brings a new approach for somatic embryogenesis induction in P. setacea and highlights how these two species show different responses when submitted to the IM. In addition, the expression of the genes BBM and SERK as well as the mobilization of reserve compounds during in vitro morphogenic events in P. setacea and P. cincinnata were related.

Orientador: Glaucia Amorim Faria / Resumo: A passicultura vem sofrendo com patógenos, os quais limitam muito a produtividade e a viabilidade do cultivo de maracujá. Dentre os principais patógenos estão a antracnose (Colletotrichum gloesporioides Penz.), a mancha bacteriana (Xanthomonas campestris pv. passiflorae) e a morte-prematura (Fusarium oxysporum f. passiflorae), esta é a principal doença e gargalo da cultura, limitando o tempo da passicultura de perene para anual. Alternativas que visem a melhoria deste cenário devem ser estudadas, deste modo os objetivos deste trabalho foram: a) avaliar a germinação, contaminação endógena e exógena em sementes de maracujá-azedo comercial (Passiflora edulis f. flavicarpa; b) avaliar o estabelecimento in vitro de Passiflora caerulea, Passiflora foetida e Passiflora tenuifila, através do Teste exato de Fisher, Teste do Qui-Quadrado e Índice Kappa para as variáveis de natureza qualitativas e Teste de Tukey e análise de variância para as quantitativas; c) encontrar o tamanho ótimo de parcelas para experimentos em casa de vegetação com Passiflora setacea e Passiflora alata utilizando o método da máxima curvatura modificado. Conclui-se que na germinação o substrato orgânico pode substituir o meio MS, que a giberelina teve um efeito positivo na germinação e que o melhor tratamento físico de semente foi a escarificação. No estabelecimento, as espécies Passiflora caerulea e Passiflora tenuifila apresentaram melhores resultados que a Passiflora foetida, indicando que se adaptaram melhor ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Passiculture has been suffering with a several pathogens problems, which limit the productivity and viability of the passion-fruit culture. Between the mainly pathogens are the antracnosis (Colletotrichum gloesporioides Penz.), the bacterial spot (Xanthomonas campestris pv. passiflorae) and the premature-death (Fusarium oxysporum f. passiflorae), this one, the mainly bottleneck disease of the crop, limiting time of passiculture from perennial to annual. Alternatives aiming at improving of this scenario must been study, that way the objectives of this study was: evaluate the germination, endogen and hexogen contamination of commercial passion-fruit seed (Passiflora edulis f. flavicarpa) in factorial design of 10x3 (10 substrates and 3 physical treatments); evaluate the in vitro establishment of Passiflora caerulea, Passiflora foetida and Passiflora tenuifila, through Fisher’s Exact Test, Chi-Square Test and Cohen’s Kappa for the qualitative variables and Tukey’s Test and variance analysis for the quantitatives; find the optimum plot sizes for the experiments on green house with Passiflora setacea and Passiflora alata. Concluded that for the germination the organic substrate can substitute the MS medium, that the gibberellin had a positive effect in germination and that the best physical treatments for seed was scarification. In establishment, the species Passiflora caerulea and Passiflora tenuifila shown better results than Passiflora foetida pointing that those one adapts its... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre