Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-01-13T11:52:09Z No. of bitstreams: 1 2013_HerdsonRenneydeSousa.pdf: 2689685 bytes, checksum: 872d1a2ad8abc84c2d12fe88886b1e2c (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-01-13T14:43:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_HerdsonRenneydeSousa.pdf: 2689685 bytes, checksum: 872d1a2ad8abc84c2d12fe88886b1e2c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-01-13T14:43:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_HerdsonRenneydeSousa.pdf: 2689685 bytes, checksum: 872d1a2ad8abc84c2d12fe88886b1e2c (MD5) / Introdução: o grupo de Imunologia Molecular/UnB já produziu anticorpos recombinantes e humanizados de interesse comercial como o anti-CD18, anti-CD3, ou acadêmico como o anti-Z22,assim como fatores plasmáticos humanos. Os vetores de expressão utilizados contêm o promotor de CMV-IA. O objetivo desse trabalho foi explorar regiões formadoras de Z-DNA, e testar diretamente o papel do anticorpo estabilizador de Z-DNA (antiZ22NLS - Z22) no efeito transcricional do promotor CMV modificado (zCMV-IA). Material e Métodos: O primeiro passo foi reconstruir o cassete de expressão dos vetores tradicionais utilizados nesse trabalho, pCO e pCO?600. Para isso, fusionamos o gene GFP ao anticorpo recombinante aCD3. Os passos seguintes foram a introdução de sequências formadoras de Z-DNA (Z1, Z3 e Z4) e controles não formadores de Z-DNA (Z2 e Z5) a montante do promotor CMV-IA. Resultados e Discussão: foram construídos 10 vetores de expressão: 5 construções pCO (pZ1, pZ2, pZ3, pZ4 e pZ5) e 5 construções pCO?600 (?Z1, ?Z2, ?Z3, ?Z4 e ?Z5); transfecção de células CHO-K1 com as construções utilizando Lipofectamina LTX na proporção 1:1 de DNA e reagente LTX; Por fim co-transfecção de células com cada vetor de expressão e vetor pMacZ22NLS e como controle de cada vetor de expressão também foi feita transfecção com vetor pMac vazio. Em comparação aos controles em todas as construções a presença do pMacZ22 NLS aumentou a eficiência de transfecção. Através de citometria de fluxo se verificou aumento da MFI no gate das células GFP+ em até 25 % quando foi co-transfectado vetor com anti-Z-DNA. Conclusão: foi mostrado o papel de anti Z22 como indutor e estabilizador de Z-DNA e seu efeito facilitador da transcrição. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Recombinant antibodies are now a reality in therapeutics. But its production is still a challenging issue. We have been developing expression vectors for heterologous expression of recombinant antibodies based on the CMV promotor. We had previously shown that a Z-DNA forming region upstream the promotor/enhancer enhances luciferase expression in a repórter vector. The aim of this study was to explore Z-DNA forming regions, and directly test the role of a Z-DNA stabilizing antibody on a modified CMV promoter (zCMV). Material and Methods: Initially, the GFP gene was fused with a recombinant antibody anti-CD3 and the fusion cassette was introduced in both pCO and pCO?6OO. Then we introduced the Z-DNA forming sequences (Z1, Z3 and Z4) and control sequences (Z2 and Z5) upstream of the CMV promoter. CHO cells were transfected using Lipofectamine LTX 1:1, DNA and LTX reagent. To provide the trans acting anti-Z-DNA antibody, we cotransfect cells with the vector pMACZ22NLS, that produces a scFv of the anti-Z-DNA mAb Z22 fused to a nuclear localization signal (Intrabody). Flow cytometry was use to follow GFP expression. Results and Discussion: 10 expression vectors were constructed: 5 pCO constructs (pZ1, pZ2, pZ3, pZ4 and pZ5) and 5 pCO?600 constructs (AZ1, AZ2, AZ3, AZ4 and AZ5); The constructions with Z-DNA forming sequences showed an improvement of expression of the reporter gene when compared to the control sequences. Moreover the co-transfection with the anti-Z-DNA vector enhances the MFI of gated GFP+ cells by 25%. Conclusion: The Z-DNA forming sequences improve heterologous gene expression and the presence of anti-Z-DNA in trans was shown to enhance the Z-DNA effect probably due to a stabilization effect.

Tese (doutorado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2009. / Submitted by samara castro (sammy_roberta7@hotmail.com) on 2011-04-07T18:47:06Z No. of bitstreams: 2 2009_JuliaSoniaAmpuero.pdf: 15052956 bytes, checksum: 6bed1f9a5fbec7544dd71bcacdfbdfe6 (MD5) 2009_JuliaSoniaAmpuero.pdf: 15052956 bytes, checksum: 6bed1f9a5fbec7544dd71bcacdfbdfe6 (MD5) / Rejected by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br), reason: Item está com dois arquivos iguais em anexo. Favor remover um. on 2011-04-14T23:56:21Z (GMT) / Submitted by samara castro (sammy_roberta7@hotmail.com) on 2011-04-27T17:43:24Z No. of bitstreams: 1 2009_JuliaSoniaAmpuero.pdf: 15052956 bytes, checksum: 6bed1f9a5fbec7544dd71bcacdfbdfe6 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-05-21T00:52:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_JuliaSoniaAmpuero.pdf: 15052956 bytes, checksum: 6bed1f9a5fbec7544dd71bcacdfbdfe6 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-21T00:52:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_JuliaSoniaAmpuero.pdf: 15052956 bytes, checksum: 6bed1f9a5fbec7544dd71bcacdfbdfe6 (MD5) / Foi desenvolvido, um ensaio clínico randomizado aberto para estimar a eficácia e segurança de uma dose de 5mg/kg/dia por 20 dias de antimoniato-N-metil-glucamina, no tratamento da leishmaniose cutânea (LC) por L. (V.) braziliensis, comparada com a dose padrão de 15mg/kg/dia por 20 dias (ClinicalTrials.gov número NCT00317980). Entre janeiro de 2006 e janeiro de 2007 foram incluídos 280 pacientes entre 7 e 50 anos de idade, de ambos os sexos com diagnóstico clínico e laboratorial de LC. Os pacientes foram alocados de maneira randômica, 140 pacientes em cada grupo de tratamento. Todos apresentavam até nove lesões cutâneas ulceradas com duração entre duas a 20 semanas. A cura clínica foi definida como a epitelização total de todas as lesões com ausência completa de eritema, edema, descamação e adenite ou linfangite regional, três meses após a finalização do tratamento. Segundo a análise por protocolo (180 pacientes), o coeficiente de incidência de cura foi 8,8% para o grupo que recebeu 5 mg/kg/d, e de 20,2% para o grupo que recebeu 15 mg/kg/d com uma diferença de risco de 11,4% (limite superior do IC95% unicaudal = 20,3). Na análise por intenção de tratar (280 pacientes), observou-se um coeficiente de incidência de cura de 9,3% para o grupo que recebeu dose baixa, e de 18,6% para o grupo que recebeu 15 mg/kg/d, com uma diferença de risco de 9,3% (limite superior do IC95% unicaudal = 16,2). A dose de 5 mg/kg/d mostrou ser inferior à dose de 15 mg/kg/d quando aplicado o teste de não inferioridade, comparando com a diferença proposta a priori de 15% para definir a dose baixa como não inferior. Os pacientes que receberam 15 mg/kg/d experimentaram maior quantidade de eventos adversos comparado com os pacientes que receberam dose baixa de antimonial. Não foi evidenciado desenvolvimento de lesões mucosas com dois anos de seguimento. Os pacientes que utilizaram dose baixa tiveram maior coeficiente de incidência de falhas entre os primeiros 20 a 40 dias de seguimento pós- tratamento, 28,6% (IC95% 20,0 a 38,5) versus 7,9% (IC95% 3,5 a 14,9) no grupo que recebeu 15 mg/kg/d (p < 0,001). Foram encontradas como variáveis preditoras de falha precoce a utilização da dose baixa, ser de sexo feminino, ter lesões localizadas na região de cabeça e pescoço e a presença de parasitos intestinais no momento do diagnóstico de leishmaniose. Em conclusão o coeficiente de incidência de cura da dose baixa foi consideravelmente inferior à dose de 15 mg/kg/dia, e a quantidade de eventos adversos foi maior no grupo que recebeu a dose padrão. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / A randomized open-label clinical trial was conducted to assess the efficacy and safety of an intravenous dose of 5 mg/kg/day antimony-N-methyl-glucamine for 20 days compared with the conventional dose of 15mg/kg/day for 20 days for treatment of cutaneous leishmaniasis (CL) associated with L. (V.) braziliensis infection. This trial was registered with clinicaltrials.gov, number: NCT00317980. From January 2006 to January 2007 were enrollment 280 patients aged 7 to 50 years old, of both sexes with clinical and laboratory diagnosis of CL. The volunteers were randomly assigned to one of the two treatment groups. All patients presented with up to nine ulcerated cutaneous lesions with less than twenty weeks of disease evolution. Clinical cure was defined as complete healing of the lesions defined as complete epithelization plus absence of erythema, oedema, flaking, and regional adenitis or lymphangitis, three months after finishing the exposure to the drug. According to the per-protocol analysis (180 patients) the cure rate was 8.8% and 20.2% for the group receiving 5 mg/kg/d and 15mg/kg/d respectively, and the cure rate difference was 11.4% (upper limit of a 1-sided 95% IC = 20.3). The intention-to-treat analysis (280 patients) showed effectiveness rate of 9.3% and 18.6% for the group receiving 5 mg/ kg/d and 15mg/kg/d respectively, and the cure rate difference was 9.3% (upper limit of a 1-sided 95% IC = 16.2), confirming the findings of the per-protocol analysis. The dose of 5mg/kg/d was shown to be inferior than 15 mg/kg/d when the non-inferiority test was applied compared to the proposed a priori difference of 15%. Patients who received the 15 mg/kg/d dose experienced more adverse events compared with patients who received the low dose schedule. By the end of the second year of follow-up there were no patients diagnosed with mucosal disease. Patients who received low dose had a higher failure rate between the first 20 to 40 days of followup, 28.6% (95% CI 20.0 to 38.5) versus 7.9% (CI 95% 3.5 to 14.9) in the group receiving 15 mg/kg/d (p < 0.001). Risk factors for early treatment failure identified in the final multivariate model were: exposition to the low dose schedule, to be female, to have lesions in the head and neck and the presence of intestinal parasites at the time of diagnosis of leishmaniasis. In conclusion, the incidence rate of cure of low dose was significantly lower than 15 mg/kg/d, and the number of adverse events was higher in the group receiving the standard dose.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Leishmania braziliensis is the main causative agent of American cutaneous leishmaniasis in Brazil. Altough L. braziliensis infection is self-limited it is distinguished by its latency and chronicity and can persist in mice and patients even after spontaneous clinical cure or treatment. Little is known about the persistence feature in L. braziliensisâ infection in humans and mice. Thereby, the aim of this study was to characterize the parasiteâs persistence in the murine model. The parasite load, lesion thickness and pattern of cytokines and chemokines involved in persistence were evaluated through BALB/c mice infection with a L. braziliensis strain and observation for 90 days after infection. The results showed that parasites gradually disappear in the footpad, while the parasite load was sustained in the draining lymph node until 90 days post-infection (p.i). In the footpad, TNF-&#945; expression was higher at 30 days p.i, followed by the decrease in parasite load and lesion thickness in the site. IL-10 and TGF-&#946; were more expressed at first and decreased after 30 days of infection. A higher concentration of TNF-&#945; and IFN-&#947; was observed at 15 and 30 days post-infection in the draining lymph node, while IL-4 was significantly increased at 15 days post-infection, and IL-10 and TGF-&#946; were the predominant cytokines after 90 days of infection. CCL2, CCL3, CXCL1 e CXCL10 were expressed in the footpad, with a peak at 30 days p.i. and reduction at 60 days. In the draining lymph node, CCL2 and CXCL10 presented a low expression at first, increasing to a peak at 45 days p.i., while CCL3 was more expressed at 30 days p.i., the same period of the maximum lesion thickness. In our work, we observed that Leishmania persists in draining lymph nodes, while CCL2, CXCL10, IL-10 and TGF-&#61538; are significantly expressed/produced. These results indicate that these citokynes act synergistically, which can determinate parasite persistence in the draining lymph node. / A infecÃÃo por Leishmania braziliensis se distingue por sua latÃncia e cronicidade, podendo persistir em camundongos e nos pacientes apÃs a cura clÃnica espontÃnea ou apÃs o tratamento. A persistÃncia da infecÃÃo por L. braziliensis ainda tem sido pouco estudada, seja em humanos, seja em modelos experimentais. O objetivo deste trabalho, portanto, foi caracterizar a persistÃncia da infecÃÃo por L. braziliensis utilizando o modelo murino. Foram avaliados em diferentes tempos a espessura da lesÃo, a carga parasitÃria e o padrÃo de citocinas e quimiocinas envolvidas no processo. Para isso, camundongos BALB/c foram infectados com uma cepa de L. braziliensis e acompanhados por 90 dias. Os resultados mostraram que os parasitos desapareceram gradativamente da pata, enquanto nos linfonodos a carga parasitÃria se manteve, mesmo 90 dias pÃs-infecÃÃo (p.i.). Houve pouca expressÃo de IFN-&#947; nas patas durante os perÃodos analisados, enquanto a expressÃo de TNF-&#945; apresentou-se alta aos 30 dias de infecÃÃo. IL-10 e TGF-&#946; apresentaram maior expressÃo inicialmente e regrediram a partir de 30 dias p.i. Quanto Ãs quimiocinas, observou-se expressÃo de CCL2, CCL3, CXCL1 e CXCL10 nas patas; aos 30 dias todas as quimiocinas apresentaram mÃxima expressÃo, e diminuÃram no 60o dia p.i. AtravÃs de detecÃÃo por ELISA no linfonodo de drenagem, observou-se um pico de concentraÃÃo de TNF-&#945; aos 15 dias e de IFN-&#947; aos 30 dias pÃs-infecÃÃo, o que precedeu a reduÃÃo na espessura da lesÃo e diminuiÃÃo da carga parasitÃria na pata. IL-4 foi predominante aos 15 dias p.i., tendo sua concentraÃÃo muito diminuÃda aos 30 dias; a partir desse perÃodo a citocina foi pouco detectada. JÃ a concentraÃÃo de IL-10 e TGF-&#946; manteve-se alta e estÃvel, a partir dos 30 dias p.i. Nos linfonodos, a expressÃo de CCL2 e CXCL10 aumentou gradativamente, atingindo pico aos 45 dias p.i., enquanto a expressÃo de CCL3 apresentou pico aos 30 dias p.i., regredindo depois. Em conclusÃo, os parasitos persistem no linfonodo de drenagem em perÃodos crÃnicos de infecÃÃo, quando CCL2, CXCL10, IL-10 e TGF-&#61538; continuam sendo expressos/produzidos em quantidade. O quadro observado sugere um equilÃbrio entre essas citocinas, o que pode ser determinante para a persistÃncia do parasito no linfonodo.

Neonatal sepsis is one of the most important cause of death of the newborn admitted to the Intensive Care Units; hence, the identification of the prognostic factors of this disease becomes very relevant in the follow up and evaluation of the patients. The aim of this study was to evaluate the hematological parameters and the lymphocyte subpopulations of the newborn with sepsis; in order to identify those parameters that may correlate with the onset of this neonatal disease. Twenty one newborns admitted to the ICU of the Albert Sabin Childrenâs Hospital, and a group of 10 healthy newborns from the Obstetric Center of the Angeline General and Maternity Hospital, were studied. In the two groups, red cells, hematocrit, hemoglobin, platelets, total and differential leukocytes, absolute and relative T and B cells; as also the blood PCR values in the septic newborn, were determined. In addition, NK, B, TCD4+ and TCD8+ cell numbers were evaluated by immunophenotyping, using their respective markers CD56, CD19, (CD3 + CD4) and (CD3 + CD8). The data were expressed as variation and mean &#61617; SD, and analyzed by Studentâs T test, at the significance level of p = 0.05. Significant differences were not observed between septic and non-septic newborn, in the mean values of the parameters: red cells, hematocrit, hemoglobin, platelets, total lymphocytes, and T, B, T CD4+, TCD8+ lymphocytes. Total leukocyte counts were elevated in septic newborns (18.080 &#61617; 9.210/ÂL in septic patients, against 12.040 &#61617; 3.980/ÂL in controls; the difference between the means significant, p = 0.0166); due, principally, to increase of circulating polymorphic neutrophils. PCR levels were elevated in newborns with fatal sepsis; as compared to those of septic newborns who responded to treatment (fatal sepsis: 38,00 &#61617; 13,15 mg/L; non-fatal sepsis: 13,00 &#61617; 8,83 mg/L â the differencea between the means highly significant, p < 0,01). The NK cells were highly significantly reduced in septic newborns (80 &#61617; 80/ÂL; v 250 &#61617; 220/ÂL dos controles; p = 0,0041). Of the septic cases, the mean NK values for those who responded to treatment was 32 &#61617;20/ÂL; against 120 &#61617; 80,90/ÂL for those with fatal sepsis. Both these values were below that of the control group; but the difference between the means of the two subgroups of the septics was significant (p = 0,0124). These results suggest that NK cells were reduced significantly in septic newborn; irrespective of their response to treatment, or not. However, the true significance of the oscillation of NK cell numbers in neonatal sepsis could not be evaluated in this study, because of the small numbers of septic newborns available for the subgroups under study. Investigations with much larger number of cases of septic newborns could better define the real role of NK cells in sepsis and its evolution to fatality. / A sepse neonatal à uma das mais importantes causas de Ãbito de recÃm-nascidos (RNs) internados nas Unidades de Tratamento Intensivo (UTI). Deste modo, torna-se relevante a identificaÃÃo de fatores prognÃsticos no acompanhamento e avaliaÃÃo desses pacientes. O objetivo deste estudo à determinar os valores hematolÃgicos e as sub-populaÃÃes dos linfÃcitos dos RNs sÃpticos, procurando identificar aqueles parÃmetros que correlacionem com a incidÃncia e evoluÃÃo da sepse no RN. A populaÃÃo analisada foi constituÃda por 21 RNs sÃpticos admitidos na CTI do Hospital Infantil Albert Sabin (HIAS) e um grupo controle de 10 RNs saudÃveis do Centro ObstÃtrico do Hospital Geral e Maternidade Angeline (HGMA). Foram avaliados nos RNs dos dois grupos (casos e controles), as contagens de hemÃcias, hematÃcrito, hemoglobina, plaquetas, contagens total e diferencial de leucÃcitos, e contagens absolutas e relativas dos linfÃcitos T e B; alÃm dos valores de PCR nos RNs sÃpticos. Adicionalmente, foram avaliados os linfÃcitos nulos (NK), cÃlulas B, TCD4+ e TCD8+, pelo mÃtodo de imunofenotipagem, utilizando-se os marcadores CD56, CD19, (CD3+CD4) e (CD3+CD8) respectivamente. Os resultados foram expressos em variaÃÃo e mÃdia &#61617; DP, e avaliados pelo teste T, ao nÃvel de significÃncia de p = 0,05. NÃo foram constatadas diferenÃas estatÃsticamente significantes, entre RNs sÃpticos e nÃo sÃpticos, quanto aos valores de hemÃcias, hematÃcrito, hemoglobina, plaquetas, linfÃcitos totais, e cÃlulas T, B, T CD4+ e TCD8+. A contagem de leucÃcitos totais se mostrou elevada em RNs sÃpticos, 18.080 &#61617; 9.210/mm3, contra 12.040 &#61617; 3.980/ÂL nos controles (valores mÃdios significativamente diferentes, p = 0.0166), devido, principalmente, ao aumento de neutrÃfilos circulantes. Os valores de PCR dos RNs que foram ao Ãbito estavam elevados, em comparaÃÃo aos valores dos sÃpticos que responderam ao tratamento (sÃpticos que foram a Ãbito: 38,00 &#61617; 13,15 mg/L; sÃpticos que responderam ao tratamento: 13,00 &#61617; 8,83 mg/L â a diferenÃa entre as mÃdias altamente significativa (p < 0,041). Os linfÃcitos NK apresentaram uma diminuiÃÃo significativa no grupo de RNs sÃpticos (80 &#61617; 80/ÂL; v 250 &#61617; 220/ÂL dos controles; p = 0,0041). Dos sÃpticos, o valor mÃdio dos casos que responderam ao tratamento foi de 32 &#61617;20,00/ ÂL; contra 120 &#61617; 80,90/ÂL para sÃpticos que foram a Ãbito. Ambos os valores se situam abaixo do valor para o grupo controle, porÃm a diferenÃa entre as mÃdias desses dois subgrupos de sÃpticos à significativa (p = 0,0124). Esses dados mostram que os NK dos sÃpticos apresentam valores significativamente abaixo dos controles, independente da resposta desses ao tratamento. PorÃm, o real significado da oscilaÃÃo dos valores de NK entre os sÃpticos que responderam ao tratamento e os que foram a Ãbito, nÃo pÃde ser avaliado devido aos pequenos nÃmeros de RNs que compuseram esses grupos de estudo. InvestigaÃÃes com maior nÃmero de casos de sepse podem melhor definir a possÃvel relaÃÃo da cÃlula NK com a evoluÃÃo e o Ãbito do recÃm-nascido com sepse.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A hansenÃase à uma doenÃa crÃnica granulomatosa com alta infectividade, porÃm baixa patogenicidade, causada pelo Mycobacterium leprae. Este estudo teve como objetivo descrever as subpopulaÃÃes de linfÃcitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotÃxicos (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) e T Natural killers -NKT (CD3+ CD16+ CD56+) em pacientes com formas reacionais de hansenÃase, comparÃ-los com os que nÃo apresentaram formas reacionais de hansenÃase e diferenciar as alteraÃÃes linfocitÃrias entre os pacientes com o reaÃÃo tipo 1 e tipo 2. Participaram do estudo 71 pacientes (47 homens), dos quais 37 pacientes apresentaram formas reacionais de hansenÃase (R+), sendo 3 antes do tratamento multidrogaterapia- MDT (An), 9 durante a MDT (Du) e 25 apÃs a MDT (Ap). Os 34 pacientes restantes nÃo apresentaram formas reacionais (R-), desses, 5 ainda nÃo haviam iniciado a MDT (An), 8 estavam em tratamento MDT (Du) e 21 jà haviam terminado a MDT (Ap). Foi utilizada citometria de fluxo para a quantificaÃÃo dos linfÃcitos e o programa Graph Pad Prisma 4.0 para as anÃlises estatÃsticas. NÃo foram observadas diferenÃas significativas nos linfÃcitos na comparaÃÃo entre os grupos de pacientes com e sem reaÃÃo, porÃm foi encontrada reduÃÃo das cÃlulas NK no subgrupo R+/Ap, quando comparado ao R-/Ap (p= 0,0228) e nos linfÃcitos NKT tambÃm houve reduÃÃo do subgrupo R-/Ap comparado ao R-/An (p< 0,05). Quanto à forma reacional (tipo 1, tipo 2 ou mista), foi observado aumento da populaÃÃo de cÃlulas CD19+ nas formas mistas. / Leprosy is a granulomatosic chronic disease which is highly infectious but has low pathogeticity and is caused by the Mycobacterium leprae. This study aims at describing the lymphocytes subsets T total (CD3+), T helper (CD4+), T cytotoxic (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) and T natural killers -NKT (CD3+ CD16+ CD56+) in patients with leprosy reactions, compare them with the ones who did not show leprosy reactions and differentiate the alterations of lymphocyte between the patients with type 1 and type 2 reactions. We used flow cytometry to quantify the lymphocytes and the Graph Pad Prism 4.0 program for the statistical analysis. We formed subgroups according to the presence (R+) or not (R-) of reaction and the period in which the patient was concerning to the multidrug therapy (MDT): before (An), during (Du) and after (Ap). We did not observe any significant differences in the lymphocytes between the groups with and without reaction, but we observed a decreased NK count in the R+/Ap subgroup when compared to the R-/Ap (p= 0,0228) and a decreased NKT count in the R-/Ap subgroup when compared to R-/An X (p< 0,05). Regarding to the reactional forms (type 1, type 2 or mixed), we observed an increase of the CD19+ cell population in the mixed forms

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / In the state of Cearà dengue cases has been reported since 1986, with frequent epidemics and high mortality. Thus, the aim of this study was to describe the age distribution of dengue cases recorded in the state of Cearà between 2001-2011. We conducted a retrospective study of cases of dengue in the state of CearÃ, using secondary data obtained from the Department of Health of Cearà and the Central Public Health Laboratory. We used data recorded in the Information System for Notifiable Diseases (SINAN) and Hospital Information System (SIH). In the age distribution of cases, it was considered ranges of < 9 years, 10-19, 20-59 and &#8805; 60 years. We included all cases reported in SINAN with early symptoms of 1 January 2001 to 31 December 2011. For DHF cases, all fulfilled the criteria for DHF cases of WHO. The average number of confirmed cases was 27,541 cases, ranging from 3,094 in 2004 to 55,074 in 2011. There was a significant increase in the number of confirmed cases in < 9 years regarding to number of hospitalizations, number of DHF cases and number of deaths. Between the years 2003-2006, the DENV-3 serotype was predominant. Between 2007 and 2009 the DENV-2 serotype was predominant. In 2010 and 2011, the DENV-1 serotype was predominant. In 2003 the incidence of DHF was higher in the group &#8805; 60 years (5.134/100.000 inhabitants). In 2007, with the return of DENV-2 serotype circulation, the incidence was higher among children <10 years (4.884/100.000 inhabitants), significantly increasing. The coefficient of hospitalization increased in all age groups, but in children < 9 years, this increase was more significant, from 0,050 / 1,000 in 2001 to 1.431/1.000 in 2011. It can be concluded that despite the greater number of cases have affected initially the adult population in recent years, with the simultaneous circulation of four serotypes, severe cases have occurred most often in children this change in the age profile of cases, possibly influenced by the reintroduction of the DENV-2 serotype, contributed to the increase in mortality from dengue. It is necessary to prepare the Assistance to early diagnose cases in the child population and consequently prevent deaths. / No estado do CearÃ, casos de dengue vÃm sendo notificados desde 1986, com epidemias frequentes e elevada letalidade. O objetivo deste trabalho foi descrever a distribuiÃÃo etÃria dos casos de dengue registrados no estado do CearÃ, no perÃodo de 2001 a 2011. Realizou-se estudo descritivo e retrospectivo sobre os casos de dengue notificados no Estado, atravÃs de dados secundÃrios obtidos na Secretaria Estadual de SaÃde do Cearà e LaboratÃrio Central de SaÃde PÃblica. Foram utilizados dados registrados no Sistema de InformaÃÃo de Agravos de NotificaÃÃo (SINAN) e Sistema de InformaÃÃo Hospitalar (SIH). A distribuiÃÃo etÃria dos casos considerou faixas de < 9 anos, 10 a 19, 20 a 59 e &#8805; 60 anos. Foram incluÃdos todos os casos registrados no SINAN, com inÃcio de sintomas de 1 de janeiro de 2001 a 31 de dezembro de 2011. Para os casos de FHD, os mesmos cumpriram com os critÃrios de definiÃÃo de casos de FHD da OMS. A mÃdia do nÃmero de casos confirmados foi de 27.541 casos, variando entre 3.094 em 2004 e 55.074 em 2011. Houve um aumento importante em relaÃÃo ao nÃmero de casos confirmados na faixa etÃria de < 9 anos, no nÃmero internaÃÃes, no nÃmero de casos de FHD e no nÃmero de Ãbitos. Nos anos de 2003 a 2006 predominou o sorotipo DENV-3. Entre 2007 e 2009 predominou o sorotipo DENV-2. Em 2010 e 2011 predominou o sorotipo DENV-1. Em 2003 a incidÃncia de FHD foi maior na faixa etÃria &#8805; 60 anos (5.134/100.000 habitantes). Em 2007, com o retorno da circulaÃÃo do sorotipo DENV-2 a incidÃncia foi maior entre crianÃas < 9 anos (4.884/100.000 habitantes), aumentando de forma significativa. O coeficiente de internaÃÃo aumentou em todas as faixas etÃrias, mas nas crianÃas < 9 anos esse aumento foi mais significativo, passando de 0,050/1.000 em 2001 para 1.431/1.000 em 2011. Pode-se concluir que apesar do maior nÃmero de casos ter acometido inicialmente a populaÃÃo adulta, nos Ãltimos anos, com a circulaÃÃo simultÃnea de quatro sorotipos, os casos graves tÃm ocorrido com maior frequÃncia na populaÃÃo infantil. Essa mudanÃa no perfil etÃrio dos casos, possivelmente influenciada pela reintroduÃÃo do sorotipo DENV-2, contribuiu para o aumento na letalidade por dengue. à preciso preparar a assistÃncia para diagnosticar precocemente os casos na populaÃÃo infantil e consequentemente evitar Ãbitos.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Visceral Leishmaniasis (VL) is a public health problem worldwide. The urban transmission of Leishmania infantum (L. infantum) has been growing the prevalence of asymptomatic carriers of this parasite in large center. Occurrence of L. infantum transmission by blood transfusion has been reporting around the world, therefore it is important to evaluate the possibility of blood products as a potential risk for Leishmania transmission in endemic urban center. The aim of this study was to determine the prevalence of asymptomatic carriers of L. infantum among blood donors of Hemocenter of CearÃ. It was used buffy coat of 438 blood donors, from May through November 2011. The positive samples for HIV, Hepatitis B and C, syphilis, HTLV, and Chagasâ disease were excluded from the study, resulting in 351 samples. The peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and plasma were separated through Histopaque centrifugation. For detection of the parasite, PBMC were used to perform the microculture in NNN medium and conventional PCR. Anti-leishmanial antibodies were detected through ELISA. The prevalence of L infantum in blood donors of asymptomatic carriers was high (16.5%), with 43 (12.2%) by serology and 15 (4.3%) by PCR. The DNA sequencing confirmed to be the genus Leishmania in 6 samples analyzed. Promastigote was not detected in micro cultures. The risk of LV transmission by blood transfusion exists. In Brazil, the blood banks do not performed routine screening for Leishmania, thus, the recommendation to include screening for Leishmania or the use of pathogen inactivation technology appears to be essential in endemic areas of VL. / A Leishmaniose Visceral (LV) à considerada um problema de saÃde pÃblica mundial. Com a urbanizaÃÃo da Leishmania infantum (L. infantum), tem sido mais crescente o nÃmero de portadores assintomÃticos, em grandes centros. Em diversos lugares do mundo, tem sido relatada a ocorrÃncia de transmissÃo de L. infantum por transfusÃo sanguÃnea, como nas Ãreas de transmissÃo, os portadores assintomÃticos representam um grande contingente, à importante avaliar a possibilidade dos hemoderivados serem um risco em potencial, para a transmissÃo sanguÃnea de Leishmania. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalÃncia de infecÃÃo assintomÃtica por L. infantum em doadores de sangue do Hemocentro do CearÃ. Para estabelecer a prevalÃncia de LV entre doadores de sangue, foi avaliado creme leucocitÃrio de 438 doadores de sangue, de maio a novembro de 2011. As amostras positivas para HIV, Hepatite B e C, SÃfilis, HTLV I e II e DoenÃa de Chagas, na triagem do Hemoce, foram excluÃdas do estudo nos resultados finais, resultando um numero amostral de 351. As amostras foram centrifugadas em HistopaqueÂ, para separaÃÃo das cÃlulas mononucleares do sangue perifÃrico (CMSP) e do plasma. As CMSP foram utilizadas para a realizaÃÃo de microculturas, em meio NNN, e tambÃm para o PCR convencional. O plasma foi utilizado para a sorologia anti-Leishmania por ELISA, empregando o antÃgeno de promastigotas de L. chagasi. A prevalÃncia de doadores assintomÃticos foi de 16,5%, sendo 43 (12,2%) pela sorologia e 15 (4,3%) pelo PCR. Foi realizado o sequenciamento do DNA de parte das amostras positivas no PCR. Destes, 6 amostras foram sequenciados o DNA e todas confirmaram ser do gÃnero Leishmania. NÃo foi isolado promastigota de nenhuma cultura. A possibilidade de risco de transmissÃo de LV por transfusÃo existe. Nos bancos de sangue do Brasil nÃo à realizada triagem de rotina para Leishmania, deste modo, parece ser essencial à recomendaÃÃo de incluir a triagem para Leishmania, nos bancos de sangue de Ãreas endÃmicas de LV.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common malignancy of childhood. It is a hematologic malignant neoplasm derived from undifferentiated young lymphoid lineage cells that accumulate and replace the normal population of blood cells. The Aurora kinase genes A, B and C are involved in cell cycle and encode proteins of great importance in the regulation of the mitosis process - separation of sister chromatids during metaphase / anaphase. The aim of this study was to evaluate the AURKA and AURKB genes in pediatric patients with ALL-B treated at Hospital Infantil Albert Sabin (HIAS). This was a cross-sectional, observational and analytical study and 30 patients were enrolled. The sex, age, and laboratory data profile were obtained from medical records of patients diagnosed at HIAS. The analysis of mutations in AURKA and AURKB genes was performed by the fluorescence in situ hybridization technique (FISH) using probes specific for each gene. Statistical analysis was performed using GraphPad Prism 5 and used 5% significance level for all tests. Of all children 53.33% were male and 46.67% female, with age ranging from 1 to 16, and average of 7.1 years. Using the FAB classification, 86.67% of patients had ALL-L1 and 13.33% had ALL-L2. According to the EGIL classification, 33.33% were pre-B ALL and 66.67% were common ALL. The mean hemoglobin levels, hematocrit, white blood cells and platelet counts were, respectively, 7.50 g/dL, 22.80%, 69.494/mm3 and 56.439,64/mm3. 73.33% of the children studied had some type of numerical or structural karyotipic abnormality. Regarding the risk classification, 26.67% were favorable, 40% intermediate and 33.33% unfavorable risk. Patients with unfavorable karyotype had a higher white blood cell count (p = 0.0025), and the analysis of other parameters was not significant. Monosomy and polysomy of AURKA gene and polysomy of AURKB gene were observed. Some kind karyotypic change was observed in approximately 50% of cases, the more frequent change was in AURKB. Most patients with abnormal AURKB gene presented a favorable karyotype, and white blood cell and platelet counts less altered. The study of AURKA and AURKB genes showed that these genes may be markers of genomic instability and that AURKB seems more involved in the pathogenesis of childhood ALL, being also a good prognostic factor. / A leucemia linfÃide aguda (LLA) à a neoplasia mais frequente na infÃncia. à uma neoplasia hematolÃgica maligna derivada de cÃlulas linfocitÃrias indiferenciadas com acÃmulo de cÃlulas jovens e substituiÃÃo da populaÃÃo normal de cÃlulas sanguÃneas. Os genes Aurora quinase A, B e C estÃo envolvidos no ciclo celular e codificam proteÃnas de grande importÃncia na regulaÃÃo do processo de mitose - separaÃÃo das cromÃtides irmÃs durante a metÃfase/anÃfase. O objetivo desse estudo foi avaliar os genes AURKA e AURKB em pacientes pediÃtricos portadores de LLA-B tratados no Hospital Infantil Albert Sabin (HIAS). Tratou-se de um estudo transversal, observacional e analÃtico. A amostra utilizada no estudo foi de 30 pacientes. O perfil de sexo, idade e dados laboratoriais foi obtido em prontuÃrios dos pacientes e no serviÃo de diagnÃstico do HIAS. A anÃlise de mutaÃÃes nos genes AURKA e AURKB foi pela tÃcnica de FluorescÃncia por HibridizaÃÃo in Situ (FISH), com o uso de sondas especÃficas para cada gene. A anÃlises estatÃstica foi realizada no GraphPad Prism 5 e teve nÃvel de significÃncia de 5% para todos os testes. Do total de crianÃas 53,33% foram do sexo masculino e 46,67% do sexo feminino, com faixa de idade variando de 1 a 16 anos, e mÃdia de 7,1 anos. Quanto a classificaÃÃo FAB, 86,67% dos pacientes eram portadores de LLA-L1 e 13,33% de LLA-L2. Na classificaÃÃo EGIL, 33,33% eram LLA prÃ-B e 66,67% eram LLA-comum. Os valores mÃdios de hemoglobina, hematÃcrito, leucÃcitos e plaquetas foram, respectivamente, 7,50 g/dL, 22,80%, 69.494/mm3 e 56.439,64/mm3. O cariÃtipo de 73,33% das crianÃas estudadas apresentou algum tipo de alteraÃÃo numÃrica ou estrutural. Em relaÃÃo à classificaÃÃo de risco, 26,67% foram favorÃveis, 40% intermediÃrios e 33,33% desfavorÃveis. Na relaÃÃo entre parÃmetros hematolÃgicos e classificaÃÃo de risco, pacientes com cariÃtipo desfavorÃvel apresentaram leucometria mais elevada (p=0,0025), as anÃlises com os outros parÃmetros nÃo foram significantes. No estudo de AURKA e AURKB foi possÃvel observar monossomia e polissomia do gene AURKA e polissomia do gene AURKB. Dos pacientes com algum tipo de alteraÃÃo no cariÃtipo, foi observada alteraÃÃo em algum dos genes em aproximadamente 50% dos casos, sendo a alteraÃÃo no AURKB mais frequente. A maioria dos pacientes com alteraÃÃo no gene AURKB apresentou cariÃtipo favorÃvel, assim como leucometria e contagem de plaquetas menos alteradas. O estudo dos genes AURKA e AURKB mostrou que esses genes podem ser iniciadores no processo de instabilidade genÃmica das cÃlulas leucÃmicas e que a AURKB parece estar mais envolvida na patogÃnese da LLA infantil, assim como fator de bom prognÃstico.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Wound healing is a complex and dynamic process involving an integrated action of several cell types, extracellular matrix and soluble mediators such as cytokines, which serve to recover the integrity of damaged anatomical structure. Natural products are the basis for many biotechnological inputs, as they are biologically active compounds with great potential for therapeutics and can provide molecular basis for many drugs in the clinics. Combretum leprosum Mart. is a native species of Caatinga, important biome in the Brazilian semiarid region, being popularly used in Brazil for the treatment of many diseases such as skin diseases. This study aimed to investigate the pro-healing potential of the ethanol extract (EECL) and the bioactive triterpene 3&#946;, 6 &#946;, 16 &#946;-trihydroxylup-20 (29) ene (CLF-1) isolated from leaves of C. leprosum. Cell migration assay was performed using fibroblasts, which were treated with CLF-1 (1.75 Âg / ml and 2.5 Âg / ml) and analyzed after 0, 6 and 24 hours. Skin wounds (1 cm2) were induced in the dorsal region of mice (n = 30) and were treated with daily topical application (100Âl) according to the group: saline, EECL (100&#956;g / ml) and CLF-1 (100&#956;g / ml) for 12 days. The results showed that CLF-1 did not show toxicity to fibroblasts and further increased cell proliferation and migration so that a significant increase on injury closing percentage was observed using both concentrations (1.75 mg / ml vs 2.5 mg / mL,) compared to control (p <0.05). Within 24 hours, there was also a significant increase in the rate of migration comparing CLF-1 at 2.5 ug / ml and control group (p<0.05). For the in vivo analysis, on the 2nd post surgical day (PS), the lesions treated with EECL and CLF-1 showed moderate presence of vessels in granulation tissue progressing to the dermis, as well as a slight inflammatory infiltrate. It was also observed that, on the 7th PS day, the animals treated with CLF-1 showed moderate angiogenesis, whereas animals treated with saline showed cell proliferation and migration into the wound. Furthermore, on the 12th day PS, the animals treated with EECL and CLF-1 showed complete closing of the injury, while those receiving saline exhibited open wounds. Thus, it was concluded that EECL and CLF-1 showed pro-healing effects, as well as a possible anti-inflammatory action and additional research is needed to elucidate its mechanisms in the wound healing process. / A cicatrizaÃÃo cutÃnea à um processo complexo e dinÃmico que envolve uma aÃÃo integrada de vÃrios tipos celulares, matriz extracelular e mediadores solÃveis como citocinas, que tem por finalidade a recuperaÃÃo da integridade da estrutura anatÃmica danificada. Produtos naturais sÃo a base para diversos insumos biotecnolÃgicos, pois sÃo compostos biologicamente ativos com grande potencial terapÃutico, e que podem formar bases moleculares para muitas drogas em uso clÃnico. Combretum leprosum Mart. à uma espÃcie nativa da Caatinga, bioma importante na regiÃo do semiÃrido brasileiro, sendo esta espÃcie popularmente utilizada no Brasil para o tratamento de diversas doenÃas, tais como doenÃas de pele. O presente estudo investigou o potencial prÃ-cicatrizante do extrato etanÃlico (EECL) e do triterpeno bioativo 3&#946;, 6 &#946;, 16 &#946;-trihydroxylup-20 (29)-eno (CLF-1) isolado das folhas de C. leprosum. Para isto, o ensaio de migraÃÃo de cÃlulas foi realizado com fibroblastos, que foram pÃs tratados com CLF-1 (1,75 &#956;g/mL e 2,5 &#956;g/mL) e analisados em 0, 6 e 24 horas. Feridas cutÃneas (1 cm2) foram realizadas na zona dorsal de camundongos (n=30) e em seguida foram tratadas com uma aplicaÃÃo tÃpica diÃria (100 &#956;l) de acordo com o grupo: salina, EECL (100&#956;g/mL) e CLF-1 (100&#956;g/mL) durante 12 dias. Os resultados demonstraram que CLF-1 nÃo apresentou toxicidade aos fibroblastos e, ainda, em 6 horas estimulou a proliferaÃÃo e migraÃÃo celular, de modo que observou-se um aumento significativo na porcentagem de fechamento em ambas concentraÃÃes (1,75 &#956;g/mL e 2,5 &#956;g/mL) em relaÃÃo ao controle (p<0,05). Em 24 horas, verificou-se tambÃm aumento significativo na taxa fechamento quando comparado CLF-1 2,5 &#956;g/mL em relaÃÃo ao controle (p<0,05). Na avaliaÃÃo in vivo, observou-se no 2 dia pÃs cirÃrgico (P.C.), que as lesÃes tratadas com EECL e CLF-1 mostraram presenÃa moderada de vasos no tecido de granulaÃÃo, progredindo na derme, bem como apresentaram um leve infiltrado inflamatÃrio. Observou-se, ainda, que no 7 dia P.C. os animais tratados com CLF-1 demonstraram moderada angiogÃnese, enquanto que os animais tratados com salina apresentaram proliferaÃÃo e migraÃÃo celular em direÃÃo ao leito da ferida. Ademais, no 12 dia P.C., os animais tratados com EECL e CLF-1 apresentaram o fechamento completo da lesÃo, enquanto os que receberam salina, apresentaram, ainda, feridas abertas. Desta forma, foi possÃvel concluir que o EECL e o CLF-1 apresentaram efeitos prÃ-cicatrizante, bem como uma possÃvel aÃÃo anti-inflamatÃria e investigaÃÃes adicionais sÃo necessÃrias para elucidar o mecanismo de aÃÃo no processo de cicatrizaÃÃo cutÃnea.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Leishmania braziliensis from antimony-resistant patient is able to induce high levels of IL-4 and Arginase in mice, contributing to the increased virulence of the strain and the severity of the disease. CXCL10 is a chemokine that recruits and activates Th1 cells, NK, macrophages, dendritic cells and lymphocytes B. The objective of this study was to evaluate in vivo the effect of CXCL10 in the infection by strain of L. braziliensis refractory to treatment with antimony. BALB/c mice (n=64) were infected intradermally in the right ear 107 promastigotes (20 Âl), and after appearance of lesions (5 week), the animals were divided into four groups (16/group): 1. Control untreated; 2.Glucantime (100mg/kg/day, I.M.); 3.CXCL10 (100 ng/10&#956;L, I.M.); 4.Glucantime+CXCL10 (100ng/10ÂL+100mg/kg/day, I.M.). The animals were treated for 7 days, followed by weekly measurements of lesions, and were euthanized in the first and fourth week post-treatment (w.p.t) for the evaluation of some parameters: parasite burden (lesions, and draining lymph node-LN), production of the cytokines IFN-&#947;, IL-4, IL-10 and TGF-&#946; (LN) and histological changes (lesions). The results showed CXCL10 and Glucantime induced, early as the first s.p.t., non-ulcerated lesions that regressed significantly (0.35  0.07, 0.047  0.27, p <0.05) compared to controls (0.63  0.12) and Glucantime (0.56  0.12). This was associated with a significant decrease in parasite load observed in CXCL10 and CXCL10 + Glucantime groups, in the lymph node (1.17x103  0.85x103, 2.05x103  1.50x103, respectively) compared to control (3.2x104  1.97x104) and Glucantime (1.18x105  1.12x105). Regarding to cytokines, CXCL10 treated animals showed high levels of IFN-&#947;, IL-10 and TGF-&#946;, and low IL-4 production. In contrast, was observed in the control and Glucantime groups increased production of IL-4. These data also corroborate the histopathological findings showing that animals treated with CXCL10, with or without Glucantime, showed a non-exacerbated inflammation, with absence of necrosis, lower parasitism, granulomas and cellular infiltrate with more activated macrophages, many lymphocytes and few plasma cells, compared to control and Glucantime. In conclusion, CXCL10 and the association CXCL10+Glucantime induced minor injuries, lesions non-ulcerated, with decreased earlier parasite load, leading to the resolution of the disease through an immune response with high IFN-&#947; and low IL-4 production, and with the control of inflammation mediated by IL-10 and TGF-&#946;. / Leishmania braziliensis proveniente de paciente resistente ao antimÃnio à capaz de induzir altos nÃveis de IL-4 e de Arginase em camundongos, contribuindo para a maior virulÃncia da cepa e gravidade da doenÃa. CXCL10 à uma quimiocina que recruta e ativa cÃlulas Th1, NK, macrÃfagos, cÃlulas dendrÃticas e linfÃcitos B. O objetivo deste trabalho foi avaliar in vivo o efeito de CXCL10 na infecÃÃo por cepa de L. braziliensis refratÃria ao tratamento com antimÃnio. Camundongos BALB/c (n=64) foram infectados por via intradÃrmica na orelha direita, 107 promastigotas (20ÂL) e apÃs o aparecimento das lesÃes (5a sem), os animais foram divididos em quatro grupos (16 animais/grupo): 1. Controle nÃo tratado; 2. Glucantime (100mg/kg/dia, I.M); 3. CXCL10 (100ng/10ÂL, I.M.); 4. Glucantime+CXCL10 (100ng/10ÂL + 100mg/kg/dia, I.M.). Os animais foram tratados por 7 dias, acompanhados com medidas semanais das lesÃes e eutanasiados na 1 e 3 semanas pÃs-tratamento (s.p.t.) para a avaliaÃÃo de alguns parÃmetros: carga parasitÃria (lesÃes e linfonodo de drenagem-LN), produÃÃo das citocinas IFN-&#947;, IL-4, IL-10 e TGF-&#946; (linfonodo) e alteraÃÃes histolÃgicas (lesÃes). Os resultados mostraram que CXCL10 e CXCL10+Glucantime induziram, jà a partir da 1a s.p.t, lesÃes nÃo ulceradas e que regrediram significativamente (0,35Â0,07; 0,047Â0,27; p<0,05), quando comparado ao Controle (0,63Â0,12) e ao Glucantime (0,56Â0,12). Isso foi relacionado com a importante diminuiÃÃo da carga parasitÃria observada nos grupos CXCL10 e CXCL10+Glucantime, no LN (1,17x103  0,85 x 103; 2,05x103  1,50x103, respectivamente) quando comparado ao Controle (3,2x104  1,97x104) e ao Glucantime (1,18x105  1,12x105). Em relaÃÃo Ãs citocinas, o tratamento com CXCL10 mostrou altas concentraÃÃes de IFN-&#947;, IL-10 e TGF-&#946;, e baixa produÃÃo de IL-4. Em contrapartida, nos grupos Controle e Glucantime, foi observada maior produÃÃo de IL-4. Esses dados corroboram tambÃm com os achados histopatolÃgicos que mostraram que os animais tratados com CXCL10, associado ou nÃo ao Glucantime, apresentaram uma inflamaÃÃo nÃo exacerbada, com ausÃncia de necrose, menor parasitismo, presenÃa de granulomas e infiltrado celular com mais macrÃfagos ativados, muitos linfÃcitos e poucos plasmÃcitos, em relaÃÃo ao Controle e ao Glucantime. Em suma, CXCL10 e a associaÃÃo CXCL10+Glucantime induziram lesÃes menores, nÃo ulceradas, com diminuiÃÃo da carga parasitÃria mais precocemente, conduzindo à resoluÃÃo da doenÃa atravÃs de uma resposta imunolÃgica com alta produÃÃo de IFN-&#947; e baixa produÃÃo de IL-4, e controle da inflamaÃÃo modulado por IL-10 e TGF-&#61538;.