Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Os mastócitos são células provenientes do precursor CD34 da medula óssea, o mastocitoma (MCT) pertence ao grupo das neoplasias de células redondas e possui etiologia desconhecida, é a neoplasia cutânea mais comum em cães, sem predileção por raça, sexo ou idade. Seu comportamento biológico é bastante agressivo e de alta frequência. A graduação histopatológia proposta Patnaik et al., (1984), é o critério mais utilizado para a graduação histopatológica da neoplasia sendo o grau 1 uma neoplasia bem diferenciada, o grau 2 moderadamente diferenciada e o grau 3 pouco diferenciada ou anaplásica. O presente trabalho teve como objetivos a avaliação do ínidice proliferativo e apoptotico dos MCT em lâmina de Microarranjo de tecido (TMA) utilizando a técnica de imunoistoquiímica e TUNEL. Para tal utilizou-se 166 casos de MCT compondo um arranjo em matriz de amostra tecidual, ou tissue microarray (TMA) com 190 amostras, sendo avaliado o padrão de marcação da proteína Kit, a proliferação celular com o anticorpo primário Ki67 e apoptose com o anticorpo primário caspase-3 clivada e pela técnica da Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Mediated dUTP Nick end Labeling Assey (TUNEL). Quando os casos foram avaliados quanto à imunoexpressão de c-KIT, os tumores (únicos e múltiplos) com expressão citoplasmática da proteína KIT tiveram uma taxa proliferativa maior e uma menor taxa apoptótica quando comparados aos com expressão membranosa. Os MCTs grau 3 tiveram um maior índice proliferativo (imunoexpressão de Ki67) quando comparados aos tumores de graus 1 e 2. Não foi observada correlação entre a imunomarcação do anticorpo primário caspase-3 clivada e a técnica de TUNEL, sendo que a técnica de TUNEL se mostrou mais eficaz na avaliação da apoptose que a imunomarcação para caspase-3 clivada / Abstract: Mast cells are from precursor CD34 cells bone marrow, the mast cell tumor (MCT) belongs to the group of round cell malignancies and has unknown etiology, is the most common skin cancer in dogs without distinction of race, sex or age. Its biological behavior is very aggressive and high frequency. The histopathological grading proposal from Patnaik et al., (1984), is the most commonly used criterion for the histopathological grade of the tumor is a tumor grade 1 are well-differentiated, grade 2 are moderately differentiated and grade 3 are poorly differentiated or anaplastic. This study aimed to evaluate the proliferative and apoptotic index of MCT in blade tissue microarray (TMA) using the TUNEL technique and immunohistochemistry. To this end we used 166 cases of MCT composing an tissue microarray (TMA) with 190 samples, and evaluated the pattern of protein labeling kit, cell proliferation, with the primary antibody Ki67 and apoptosis with primary antibody and cleaved caspase-3 by the technique of terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP Nick End Labeling Mediated Assey (TUNEL). When the cases were evaluated for immunoexpression of c-KIT, tumors (single and multiple) with cytoplasmic KIT protein expression had a higher proliferative rate and a lower apoptotic rate when compared to those with membranous expression. Grade 3 MCTs had a greater proliferative index (Ki67 immunostaining) when compared with tumor grades 1 and 2. No correlation was observed between the immunostaining of primary antibody caspase-3 cleavage and TUNEL technique, and TUNEL technique was more effective in assessing apoptosis that immunostaining for cleaved caspase-3 / Mestre

Orientador: Julio Lopes Sequeira / Banca: Sara Maria de Carvalho e Suzano / Banca: Carlos Alberto Hussni / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo avaliar o índice proliferativo das amostras de sarcoide equino pelo método histoquímico de AgNOR e por método imuno-histoquímico pela expressão do Ki-67 (MIB 1); a avaliar o índice apoptótico pela expressão de caspase- 3; e a expressão da p53 mutante e "wild type" no sarcoide equino por meio de método imuno-histoquímico. Além disso, procurou correlacionar esses dados com os tipos clínicos de sarcoide equino, sendo cada amostra classificada clinicamente, segundo Knottenbelt (2005), a partir das descrições recuperadas nos prontuários de registro dos animais e das fichas de diagnóstico dos casos utilizados neste projeto. As amostras utilizadas foram recuperadas do material de arquivo, sendo utilizadas também novas amostras encaminhadas durante o período de realização deste projeto. Desta forma, 41 amostras de sarcoide equino provenientes de 35 equinos. O presente estudo demonstrou que entre os animais portadores de sarcoide equino, excluindo-se os SRD, predominaram àqueles pertencentes às raças Quarto de Milha, Puro Sangue Inglês e Mangalarga, preponderando os machos em relação às fêmeas, sendo que 83% dos animais possuíam menos de dez anos de idade. A localização preferencial das neoplasias na nossa casuística foi na região da cabeça, seguida dos membros e da região peitoral, prevalecendo as lesões únicas e maiores do que quatro centímetros. Dos tipos clínicos de sarcoide equino, o mais frequente entre os animais incluídos neste estudo foi o fibroblástico, seguido dos tipos verrucoso, nodular e misto, sendo o tipo oculto pouco frequente. Os resultados não mostraram diferença significativa quanto a proliferação celular (AgNOR e Ki-67), e quanto ao tipo de marcação da p53 entre os tipos clínicos de sarcoide equino. A expressão da p53... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study has been elaborated to evaluate the proliferative index of equine sarcoid samples by AgNOR methodology and Ki67 immunohistochemical expression; to also evaluate the apoptotic index by caspase-3 immunohistochemical expression, as well as the expression of p53 mutant and "wild type" protein. Moreover, we correlate these data with clinical types of equine sarcoid, according to Knottenbelt (2005), from descriptions recovered of animals data reports and diagnosis files of case studied in this project. Tissue samples were obtained from 35 horses who had their masses submitted to the Pathology Service at São Paulo State University, Botucatu, SP, Brazil, and new clinical cases during the study. Breeds most affected were Quarter Horse, Thoroughbred and Mangalarga. Males were more affected and 83% of the animals were less than ten years old. The preferential location of the tumors in our series was in the head, followed by members and chest area, prevailing single lesions larger than four centimeters. As for the clinical types of equine sarcoid, the most frequent included fibroblast, followed by verrucous, nodular and mixed. The results showed no significant differences in cell proliferation and the type of p53 expression between the clinical types of equine sarcoid. The expression of p53 has demonstrated to be predominantly perinuclear, regardless the clinical type of sarcoid. This location may indicate the functional inactivation of this protein. The expression of caspase- 3 showed that the apoptotic index was higher in fibroblastic and nodular clinical types, and lower in verrucous clinical type. This data can be... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Renee Laufer Amorim / Banca: Sara Maria de Carvalho e Suzano / Resumo: Os linfomas não Hodgkin (LNHs) são as neoplasias hematopoiéticas mais comuns nos cães, sendo o Linfoma Difuso de Grandes Células B (DLBCL) o subtipo mais frequente. Os DLBCLs são neoplasias formadas por células linfoides B com padrão de crescimento difuso e podem apresentar pelo menos cinco variantes. O presente trabalho teve como objetivos traçar o perfil imunoistoquímico dos DLBCLs dos cães, classificá-los de acordo com os critérios estabelecidos pela WHO (2008), WHO veterinária (2002) e Classificação de Kiel e efetuar a avaliação dos anticorpos utilizados pelo método de microarranjo de tecido (TMA), comparando-o com o corte convencional. Foi avaliada a expressão imunoistoquímica de marcadores pan B (CD79a, CD20 e PAX-5); a determinação dos índices proliferativo (Ki-67) e apoptótico (caspase-3) e também da expressão de p53 mutante. Foram observados 24 linfomas centroblásticos monomórficos, 4 imunoblásticos B e 1 centroblástico polimórfico de acordo com a classificação de Kiel. Este perfil é de 25 Linfomas de Grandes Células B Difusos/ DLBCL, NOS variante centroblástica e 4 Imunoblásticos de Grandes Células /DLBCL, NOS variante imunoblástica, pela WHO de 2002 e 2008, respectivamente. Houve marcação em 100%, 75,8% e 58,6% dos casos para o CD79a, CD20 e PAX-5, respectivamente. A mediana de porcentagem de marcação para o Ki-67 e para a caspase-3 foi de 45,9% e 10%, respectivamente. Já a expressão da proteína p53 mutante foi verificada em 16 tumores (55,1%). A análise destes marcadores utilizando-se o TMA resultou em perfil imunofenotípico idêntico e medianas de caspase-3, Ki67 e p53 significativamente semelhantes quando comparadas com o corte convencional. Concluiu-se que em nossas amostras não houve diferença estatística entre os diferentes subtipos histológicos em relação aos índices proliferativo e apoptótico e expressão da p53. Ainda, o TMA é uma técnica adequada para avaliação do... / Abstract: Non Hodgkin lymphomas (LNHs) are the most common hematopoietic tumors of dogs, among which Diffuse Large B Cell Lymphoma (DLBCL) is the most frequent subtype. DLBCLs are tumors composed of lymphoid B cell with a diffuse growth pattern and may present at least five variants. The present work intended to delineate the immunohistochemical profile of canine DLBCL, classify them according to the criteria proposed by WHO (2008); veterinary WHO (2002) and Updated Kiel Classification and also perform the evaluation of the used antibodies on tissue microarray (TMA) method in comparison to conventional histological sections. The immunohistochemical expression of pan B markers (anti CD79a, anti CD20 and PAX-5) was assessed; as well as the determination of proliferation index (Ki-67) and apoptosis (caspase 3) and also the expression of the mutant p53. There were 24 monomorphic centroblastic lymphomas, 4 imunoblastic B and 1 polimorphic centroblastic according to Kiel. That profile is 25 Diffuse Large B Cell Lymphoma/ DLBCL, NOS centroblastic variant and 4 Large Cell Imunoblastic/ DLBCL, NOS imunoblastic variant according to WHO 2002 and 2008 respectively. Immunolabeling was seen in 100%, 75.8% and 58.6% of the cases for CD79a, CD20 and PAX-5 respectively. The immunolabeling median percentage of Ki67 was 45.9% and for caspase-3 it was 10%. The expression of mutant p53 was observed in 16 tumors (55.1%). The analysis of those markers using TMA resulted in identical imunophenotype and significantly similar medians of caspase-3, Ki67 e p53 when compared to conventional sections. In conclusion there was no statistical difference among the histological subtypes regarding proliferation and apoptotic indexes and p53 expression in our samples. Also, TMA is an adequate technique for evaluating imunophenotype, proliferation and apoptotic indexes as well as presence of mutant p53 / Mestre

Neotropical deer have important functions for the sustainability and health of their ecosystem. The investigation of pathological processes and the respective etiologic agents is a critical part of the conservation programs involving these species. In addition, wild animals and in particular deer, play an important role in the transmission and spread of infectious agents, some of them relevant to human health, companion animals and livestock health. The present study describes gross and histological lesions of brown brocket deer BBD (Mazama gouazoubira) and marsh deer MD (Blastocerus dichotomus) from São Paulo state (Brazil), collected during a 21-year period (1995-2015). Major causes of death in MD were respiratory (53.3% 40/75), alimentary (4.0%; 3/75), nutritional (4.0%; 3/75), trauma (4.0%; 3/75) and euthanasia (4.0%; 3/75). In BBD, the main causes of death were respiratory (25.2% 33/131), euthanasia (12.2%; 16/131) and trauma (9.2%; 12/131). This study shows the importance of respiratory disturbances in these two species of South American deer. In this work, despite no etiologic agents were identified, histopathological findings suggest the presence of infectious etiologies including bacterial, viral and fungal. We have described characterized and evaluated pathological processes in function with biological and epidemiological aspects. / Os cervídeos neotropicais desempenham funções de importância para a sustentabilidade e sanidade dos ecossistemas que habitam, e a investigação dos processos patológicos, assim como dos agentes causais envolvidos, é uma parte crítica dos trabalhos de conservação envolvendo estes animais. Além disso, os animais selvagens em geral, e em especial os cervídeos, têm um papel importante na transmissão e disseminação de agentes infecciosos, alguns deles relevantes à saúde humana, para os animais de companhia e de produção. O presente estudo descreveu as características macroscópicas e histológicas dos processos patológicos de duas espécies de cervídeos brasileiros: cervo do pantanal (Blastocerus dichotomus) e veado catingueiro (Mazama gouazoubira) no estado de São Paulo por um período de 21 anos (1995-2015). As principais causas de morte identificadas em cervo do pantanal foram classificadas como: respiratória 53,3% (40/75), nutricional (4,0%; 3/75), trauma (4,0%; 3/75) e eutanásia (4,0%; 3/75). Já em veado catingueiro foram identificadas as seguintes causas: respiratória (25,2%; 33/131), eutanásia (12,2%; 16/131) e trauma (9,2%; 12/131). O presente trabalho detalha a importância do sistema respiratório nestas duas espécies de cervídeos brasileiros. É importante destacar que apesar de não ter identificado agentes etiológicos, os achados histopatológicos são altamente sugestivos de etiologias bacteriana, viral e fúngica. O presente trabalho fornece informações sobre a ocorrência de diversos processos patológicos nestas duas espécies de cervídeos, e sua correlação com o grupo etário, gênero e condição corpórea dos espécimes analisados.

A invasão humana a áreas protegidas tem sido uma fonte crônica de conflito e ameaça à conservação da vida silvestre na Amazônia Brasileira. Em paisagens fragmentadas, os riscos podem se tornar ainda maiores. Neste estudo, estes conflitos são abordados nas Zonas de Proteção de Vida Silvestre da APA do Lago de Tucuruí, na Amazônia Oriental Brasileira. Para acessar tais riscos, entrevistas foram conduzidas com as comunidades ribeirinhas locais. Carnívoros terrestres e marsupiais foram amostrados para investigação de agentes infecciosos. As entrevistas revelaram uma alta taxa de natalidade canina, a prática de caçada dos cães e contato próximo entre carnívoros silvestres e a população humana e seus cães domésticos, identificados como ameaças para a transmissão de doenças. O levantamento de agentes infecciosos nos cães (n=100) revelou resultados sorológicos positivos para Cinomose (27%)Toxoplasmose (82%), Leishmaniose (9.4%) e Leptospirose (10%), negativo para Raiva. Três jaguatiricas foram amostradas e revelaram soropositividade para Toxoplasmose. Marsupiais (n=34) foram soropositivos para a Toxoplasmose (17.6%). A Cinomose representa um risco para a conservação dos carnívoros silvestres da área, e os agentes transmissores de zoonoses identificados possuem potencial impacto sobre a fauna doméstica e silvestre local, e sobre a população humana. / Human encroachment in protected areas has been a longstanding source of social conflict and a threat to wildlife conservation in the Brazilian Amazon. In fragmented landscapes, risks may become even greater. In our study, such issues are addressed at the Zones of Wildlife Protection (ZWPs) of the Tucuruí Lake Protected Area, Eastern Brazilian Amazon. In order to assess these risks, interviews were conducted with the local riparian communities. Domestic and wild carnivore, as well as marsupial species, were sampled for infectious disease investigation. The interviews revealed high dog birth rates, the practice of hunting with dogs and close contact between wild carnivores, the local people and their domestic dogs, as conservation and disease transmission threats. The domestic dog disease survey (n=100) showed positive serological results for Canine Distemper (27%), Toxoplasmosis (80%), Leishmaniasis (9.4%), Leptospirosis (10%), and negative for Rabies. Two ocelots (Leopardus pardalis) were tested and resulted positive for Toxoplasmosis. Marsupial samples (n=34) were positive for Toxoplasmosis (17.6%). Distemper represents a threat to wild carnivores in the area, and the zoonotic agents identified have potential impact on the local wildlife, domestic animal and human populations.

Doenças relacionadas ao manejo estão entre as principais causas de perdas na criação de aves silvestres ou ornamentais em cativeiro. Apesar da urgência em dominar a conservação de espécies em cativeiro, pouco se sabe sobre os fatores limitantes a esses projetos. O objetivo desse trabalho é descrever a ocorrência de enfermidades em aves silvestres em cativeiro, por meio da análise anatomopatológica, microbiológica, molecular, imuno-histoquímica, apresentando os fatores predisponentes observados. Os três artigos apresentados nesse trabalho abordam as causas de perdas em criatórios ou em iniciativas independentes de reabilitação de aves silvestres. O primeiro trabalho discute a casuística de perdas em um plantel de uma diversidade de aves silvestres, incluindo passeriformes, galiformes e musofagiformes. Foram registradas 28 mortes em cinco anos de estudo, em que se constatou que as categorias de maior risco foram as aves jovens e as recém introduzidas, com 40% e 28% das mortes, respectivamente. Além disso, se observou que, quanto à causa, 21% das mortes foram secundárias a infestações parasitárias, e que, excetuando-se três casos de mortes decorrentes de doenças da senescência, todas as demais puderam ser atribuídas a inadequações do manejo. O segundo trabalho relata a ocorrência de um surto de micoplasmose por Mycoplasma gallisepticum afetando 12 perdizes chukar, 12 pavões, 19 galinhas ornamentais e 46 exemplares de quarto espécies de faisões, dentre as quais, 36 aves morreram, em um grande aviário comercial. Em um outro evento no mesmo plantel, foi diagnosticada motalidade de 19 perdizes chukar em um grupo de 27, decorrente de histomoníase. Identificaram-se, em ambos os surtos, falhas na realização de quarentena, administração de anti-helmínticos, vacinação, assim como superlotação e higiene inadequada dos recintos. No último trabalho são apresentados casos de osteodistrofia de origem nutricional em cinco aves de rapina jovens, sendo um urubude- cabeça-preta, um carcará e três suindaras. Todas as aves foram abondonadas pelos pais e mantidas em cativeiro por criadores leigos, que lhes ofertaram exclusivamente carne desossada ou comida caseira. O diagnóstico dos casos apresentados foi baseado no histórico clínico, nos achados de necropsia e histopatologia, aliado a técnicas complementares. Tendo em vista os resultados obtidos, é possível concluir que o diagnóstico de doenças em aves silvestres em cativeiro e a manutenção de registros sanitários dos planteis pode auxiliar na implementação de programas de conservação de aves silvestres bem estruturados e com grandes chances de sucesso. / Management-related diseases are among the main causes of losses in wild or ornamental bird propagatig projects. Despite the urgency in dominate the conservation of species in captivity, still little is known about the limiting factors to these initiatives. The aim of this study is to describe the occurrence of diseases in wild birds in captivity through the anatomopathological, microbiological, molecular and immunohistochemical analysis, relating them to the predisposing factors. The three papers presented in this study address the causes of losses in aviaries or independent wild bird rehabilitation initiatives. The first study discusses the bird losses in a varied flock of wild birds, including passerines, galliformes and musofagiformes. Twentyeight deaths were recorded in five years of study, where the highest risk categories were young and newly introduced birds, with 40% and 28% of deaths, respectively. In addition, it was observed that 21% of the deaths were secondary to parasitic infestations, and that, except for three cases of deaths due to senescence diseases, all the others were attributed to management inadequacies. The second study reports the occurrence of an outbreak of mycoplasmosis by Mycoplasma gallisepticum affecting 12 chukar partridges, 12 peacocks, 19 ornamental chickens and 46 specimens of four species of pheasants, of which 36 birds died in a large commercial aviary. In another event in the same establishment, the morality of 19 chukar partridges was diagnosed in a group of 27, due to histomoniasis. Failure to perform quarantine, administration of anthelmintics, vaccination, as well as overcrowding and inadequate hygiene of the enclosures were identified in both outbreaks. In the last study, five cases of nutritional osteodystrophy in birds of prey are reported in chicks of a black-headed vulture, a caracara and three barn owls. All the birds were abandoned by the parents and kept in captivity by lay creators, who fed them an all-meat diet or homemade food. The diagnosis of all cases presented in this study was based on the clinical history, on necropsy and hitopathology findings, allied to complementary techniques. Considering the results, we conclude that the diagnosis of diseases in wild birds in captivity and to mantain a sanitary record of the flocks can help in the implementation of well planned and successfull wild bird conservation programs.

As doenças infecciosas causam importantes perdas econômicas para a produção avícola e para a criação de aves domésticas de subsistência, exóticas e selvagens. No Brasil, há poucos estudos sobre as doenças infecciosas que acometem as aves, que correlacionem às lesões macroscópicas com o exame histopatológico e a identificação do agente presente nos órgãos lesionados. O objetivo desse estudo foi realizar essa tríade de diagnóstico em doenças infecciosas que acometem as aves de produção e ornamentais. O presente estudo resultou em cinco artigos. O primeiro artigo descreve dois surtos de micoplasmose em galinhas de subsistência utilizando a técnica de imuno-histoquímica (IHQ) como método de diagnóstico da infecção por Mycoplasma gallisepticum. A técnica de IHQ apresentou boa concordância com os sinais clínicos, as lesões anatomopatológicas e os resultados da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. O segundo artigo foi realizado em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose em um estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal. Em todas as aves condenados observou-se lesões macroscópicas e os órgãos mais acometidos foram fígado e sacos aéreos. Histologicamente, os diagnósticos mais frequentes foram hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Desses casos isolou-se E. coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. e Staphylococcus sp. A PCR e a IHQ para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativas. O terceiro artigo descreve um surto de tifo aviário em codornas japonesas, através do isolamento bacteriano, da caracterização anatomopatológica e da IHQ anti-Salmonella. O quarto artigo descreve, através de um estudo retrospectivo, as características anatomopatológicas de 12 casos de clamidiose em psitacídeos e padroniza a técnica de IHQ anti-Chlamydia como método de diagnóstico dessa enfermidade. O quinto artigo relata um caso sistêmico e fatal de toxoplasmose em uma perdiz-da-Califórnia (Callipepla californica), descrevendo as lesões anatomopatológicas, a IHQ anti-Toxoplasma gondii e a genotipagem através da PCR. Portanto, o desenvolvimento de técnicas de diagnóstico que correlacionem as lesões macro e microscópicas com a identificação do agente infeccioso são fundamentais para que as enfermidades nas aves sejam corretamente estudadas e diagnosticadas. / Infectious diseases cause significant economic losses in poultry production and the breeding of domestic birds for subsistence and of exotic or wild birds. In Brazil, there have been few studies on the infectious diseases of birds in which macroscopic lesions have been correlated with histopathological examination and the identification of the agent present in the organs with lesions. The objective of this study was to apply this diagnostic triad to infectious diseases which affect poultry and ornamental birds. The study is reported in a series of five papers. The first paper describes two outbreaks of mycoplasmosis in subsistence farming chickens using the IHC technique as a diagnostic method for infection by Mycoplasma gallisepticum. The IHC technique showed good agreement with the clinical signs, the anatomopathological lesions and the results of the real-time PCR. The second paper describes a study carried out on broiler chickens which were totally condemned due to colibacillosis at an establishment under the control of the Federal Inspection Service. In all of the condemned birds macroscopic lesions were observed and the organs most affected were the liver and air sacs. Histologically, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmocitary tracheitis. From these cases Escherichia coli, Enterococcus sp., Streptococcus sp. and Staphylococcus sp. were isolated. The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. The third paper describes an outbreak of fowl typhoid in Japanese quails, investigated by bacterial isolation, anatomopathological characterization and anti- Salmonella IHC. The fourth paper describes, through a retrospective study, the anatomopathological characteristics of 12 cases of chlamydiosis in psittacidae and standardizes the anti-Chlamydia IHC technique as a diagnostic method for this disease. The fifth paper reports a systemic and fatal case of toxoplasmosis in a Californian quail (Callipepla californica), describing the anatomopathological lesions, the anti- Toxoplasma gondii IHC and the genotyping through PCR. Thus, the development of diagnostic techniques which correlate the macro and microscopic lesions with the identification of the infectious agent are fundamental for diseases in birds to be properly studied and diagnosed.

Doenças relacionadas ao manejo estão entre as principais causas de perdas na criação de aves silvestres ou ornamentais em cativeiro. Apesar da urgência em dominar a conservação de espécies em cativeiro, pouco se sabe sobre os fatores limitantes a esses projetos. O objetivo desse trabalho é descrever a ocorrência de enfermidades em aves silvestres em cativeiro, por meio da análise anatomopatológica, microbiológica, molecular, imuno-histoquímica, apresentando os fatores predisponentes observados. Os três artigos apresentados nesse trabalho abordam as causas de perdas em criatórios ou em iniciativas independentes de reabilitação de aves silvestres. O primeiro trabalho discute a casuística de perdas em um plantel de uma diversidade de aves silvestres, incluindo passeriformes, galiformes e musofagiformes. Foram registradas 28 mortes em cinco anos de estudo, em que se constatou que as categorias de maior risco foram as aves jovens e as recém introduzidas, com 40% e 28% das mortes, respectivamente. Além disso, se observou que, quanto à causa, 21% das mortes foram secundárias a infestações parasitárias, e que, excetuando-se três casos de mortes decorrentes de doenças da senescência, todas as demais puderam ser atribuídas a inadequações do manejo. O segundo trabalho relata a ocorrência de um surto de micoplasmose por Mycoplasma gallisepticum afetando 12 perdizes chukar, 12 pavões, 19 galinhas ornamentais e 46 exemplares de quarto espécies de faisões, dentre as quais, 36 aves morreram, em um grande aviário comercial. Em um outro evento no mesmo plantel, foi diagnosticada motalidade de 19 perdizes chukar em um grupo de 27, decorrente de histomoníase. Identificaram-se, em ambos os surtos, falhas na realização de quarentena, administração de anti-helmínticos, vacinação, assim como superlotação e higiene inadequada dos recintos. No último trabalho são apresentados casos de osteodistrofia de origem nutricional em cinco aves de rapina jovens, sendo um urubude- cabeça-preta, um carcará e três suindaras. Todas as aves foram abondonadas pelos pais e mantidas em cativeiro por criadores leigos, que lhes ofertaram exclusivamente carne desossada ou comida caseira. O diagnóstico dos casos apresentados foi baseado no histórico clínico, nos achados de necropsia e histopatologia, aliado a técnicas complementares. Tendo em vista os resultados obtidos, é possível concluir que o diagnóstico de doenças em aves silvestres em cativeiro e a manutenção de registros sanitários dos planteis pode auxiliar na implementação de programas de conservação de aves silvestres bem estruturados e com grandes chances de sucesso. / Management-related diseases are among the main causes of losses in wild or ornamental bird propagatig projects. Despite the urgency in dominate the conservation of species in captivity, still little is known about the limiting factors to these initiatives. The aim of this study is to describe the occurrence of diseases in wild birds in captivity through the anatomopathological, microbiological, molecular and immunohistochemical analysis, relating them to the predisposing factors. The three papers presented in this study address the causes of losses in aviaries or independent wild bird rehabilitation initiatives. The first study discusses the bird losses in a varied flock of wild birds, including passerines, galliformes and musofagiformes. Twentyeight deaths were recorded in five years of study, where the highest risk categories were young and newly introduced birds, with 40% and 28% of deaths, respectively. In addition, it was observed that 21% of the deaths were secondary to parasitic infestations, and that, except for three cases of deaths due to senescence diseases, all the others were attributed to management inadequacies. The second study reports the occurrence of an outbreak of mycoplasmosis by Mycoplasma gallisepticum affecting 12 chukar partridges, 12 peacocks, 19 ornamental chickens and 46 specimens of four species of pheasants, of which 36 birds died in a large commercial aviary. In another event in the same establishment, the morality of 19 chukar partridges was diagnosed in a group of 27, due to histomoniasis. Failure to perform quarantine, administration of anthelmintics, vaccination, as well as overcrowding and inadequate hygiene of the enclosures were identified in both outbreaks. In the last study, five cases of nutritional osteodystrophy in birds of prey are reported in chicks of a black-headed vulture, a caracara and three barn owls. All the birds were abandoned by the parents and kept in captivity by lay creators, who fed them an all-meat diet or homemade food. The diagnosis of all cases presented in this study was based on the clinical history, on necropsy and hitopathology findings, allied to complementary techniques. Considering the results, we conclude that the diagnosis of diseases in wild birds in captivity and to mantain a sanitary record of the flocks can help in the implementation of well planned and successfull wild bird conservation programs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-05Bitstream added on 2014-06-13T19:45:15Z : No. of bitstreams: 1 cruz_tf_dr_botfmvz.pdf: 667109 bytes, checksum: b54ec5fc8ecf8d9aaadfe47b8708a295 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A quantificação de anticorpos é muito importante para monitoramento sorológico em granjas e associação com proteção contra o circovírus suíno tipo 2 (PCV2). Dessa forma este trabalho teve como objetivo padronizar e aplicar ELISA indireto com anticorpo de captura e utilizá-lo na quantificação de anticorpos contra o PCV2 em soros de suínos. Na padronização, os soros teste e os imunoreagentes básicos, incluindo, anticorpo de coelho anti-PCV2 purificado utilizado como captura e suspensão viral tiveram suas concentrações de uso ótimas determinadas. Aplicou-se o índice ELISA (IE) nos resultados dos soros de suínos para correção de variações entre testes. O teste mostrou-se específico do ponto de vista analítico e com alta reprodutibilidade podendo adequadamente ser utilizado na quantificação de anticorpos em soros de suínos contra o PCV2. Na aplicação, um total de 138 amostras de soros foi testado sendo cinco de porcas na gestação e 133 de leitões nascidos dessas porcas, acompanhados nas fases de maternidade ao crescimento em uma granja comercial com SMDS. Na avaliação da resposta de anticorpos contra o vírus, houve uma diminuição dos anticorpos da maternidade para a creche, coincidindo com o declínio dos anticorpos de origem materna e com a ocorrência da soroconversão simultaneamente com a detecção de PCV no sangue total pela PCR quantitativa. Em dois leitões com alta carga relativa de DNA viral e sinais clínicos sugestivos de SMDS, a quantidade de anticorpos detectada foi extremamente baixa / Antibody quantification is important for serological monitoring in swine herds and association with protection against porcine circovirus type 2 (PCV2). The aim of this work was to standardize and apply indirect trapping ELISA and use it in the quantification of antibodies against PCV2 in sera from pigs. The immunoreagents, including rabbit antibody anti-purified PCV2 used as trapping antibody and viral suspension had their optimum use dilution previously determined. The absorbance index (ELISA Index, EI), was used to determine the antibody concentration in pig serum directed against PCV2. The test showed high analytical specificity and reproducibility. A total of 138 serum samples was tested including five sows in gestation and 133 piglets accompanied by phases from lactation to growth in a commercial swine herd where PCV2 was previously detected. In anti PCV2 antibody response it was observed a decreasing in the phases of lactation to nursery due to decline of maternal antibodies. The seroconversion was concurrent with PCV DNA detection by quantitative PCR in total blood. In two piglets with high relative DNA viral load and compatible clinical signs of PMWS, the anti PCV2 antibody concentration was very low

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-31Bitstream added on 2014-06-13T20:56:04Z : No. of bitstreams: 1 cruz_tf_me_botfmvz.pdf: 332026 bytes, checksum: b36d32d75d346e3063434cff130d4fa5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Vários estudos têm demonstrado a associação entre a maior concentração viral do circovírus suíno tipo 2 (PCV2) detectado por PCR quantitativa com o desenvolvimento de lesões microscópicas típicas da Síndrome da circovirose suína (SCS). Clinicamente, a SCS é caracterizada principalmente pelo emagrecimento progressivo, acompanhado de dispnéia, aumento de tamanho dos linfonodos, palidez e/ou icterícia das mucosas. A diminuição na taxa de crescimento dos leitões acometidos com a síndrome provoca grave prejuízo econômico para o produtor, o que torna a SCS uma das doenças mais importantes para a suinocultura. Assim, com o objetivo de comparar a concentração viral relativa do circovírus suíno (PCV) com o ganho de peso de leitões provenientes de uma granja comercial com SCS, amostras de sangue total, soro e swab nasal foram analisadas por PCR em tempo real com SYBR® Green I e PCR para o circovírus suíno tipo 1 (PCV1), sendo posteriormente, comparadas entre si para determinação de qual amostra seria mais apropriada para a utilização na PCR em tempo real com SYBR® Green I. Foram colhidas 128 amostras de sangue total, 128 de soro e 128 de swab nasal, as quais foram obtidas de 32 leitões acompanhados na maternidade, creche, recria e crescimento. Através da comparação das concentrações virais relativas do PCV entre as amostras, o sangue total mostrou-se mais apropriado para a PCR em tempo real, seguido do soro. Os swabs nasais não foram considerados apropriados para detecção do PCV pela técnica aplicada, pois o PCV detectado pode representar o vírus sendo eliminado nas secreções nasais e/ou uma contaminação do ambiente. Todas as amostras (n = 107) positivas para PCV por PCR em tempo real foram testadas para PCV1 e resultaram negativas. / Several studies have shown the association among the largest viral concentration of Porcine circovirus type 2 (PCV2) detected by quantitative PCR with the development of typical microscopic lesions of Postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Clinically, PMWS is characterized by the progressive weigh loss, accompanied of dyspnea, enlargement of limph nodes, paleness and/or jaundice of the mucous membranes. The reduce growth rate of the pigs affected with the PMWS cause serious economical damage, making this disease as one of the most important for swine producing area. Like this, with the objective of comparing the relative viral concentration of the PCV with the weight gain of piglets of a commercial farm with PMWS, samples of total blood, serum and nasal swab were analyzed by real time PCR using SYBR® Green I and PCR for the PCV1, and were compared later amongst themselves for determination of which sample would be more appropriate for quantitative PCR. A total of 128 samples of total blood, 128 of serum and 128 of nasal swab were collected, which were obtained of 32 piglets accompanied at the nursery, grower, and finisher stage. After analyses, total blood was shown more appropriate for real time PCR, following by the serum. The nasal swabs were not considered appropriate for quantifications of PCV because detected PCV can represent the virus being eliminated in the nasal secretions and/or an environment contamination. All of the samples (n = 107) positive for PCV in real time PCR were also tested in PCR for PCV1 with negative results. The comparison between viral concentrations in blood or serum samples and the weights of the piglets, a negative correlation was observed.