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Aislamiento y purificación de membranas apicales y basales de trofoblasto equino (Equus caballus)

Hidalgo Moreno, Eduardo January 2004 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La placenta es el principal órgano de intercambio de nutrientes y productos de desecho entre la madre y el feto. De su normal desarrollo y funcionamiento depende el éxito de la gestación. Si bien la placenta puede considerarse fundamentalmente similar a otros epitelios como el intestinal y renal, ésta presenta algunas características anatómicas e histológicas sinciciales que la diferencian de otros epitelios. Se estandarizó un protocolo de aislamiento de membranas apicales y basales de trofoblasto equino, a partir de una misma placenta en forma simultánea. Esto minimiza las variaciones intrínsecas debido al origen diverso de las membranas analizadas. Las placentas se obtuvieron del Haras Fina Sangre de Carrera (“El Sheik” y “Santa Eladia”, ambos ubicados en la Región Metropolitana). Inmediatamente después, se realizó la purificación de la membrana apical y basal de trofoblasto equino, mediante un método que incluyó centrifugaciones diferenciales, precipitación de membranas con cloruro de magnesio y purificación de membranas utilizando gradiente de sacarosa. La calidad, en cuanto a pureza, se determinó con marcadores bioquímicos específicos tanto de membrana apical y basal Se trabajó con un total de ocho placentas. El tejido fue sometido a dos procedimientos alternativos procesando la membrana corioalantoidea por corte (I) (n=5) o raspado (II) (n=3). En ambos casos las muestras fueron tomadas de las zonas cercanas al cordón umbilical, las que presentaron mayor desarrollo microcotiledonario. El rendimiento de la preparación en términos de recuperación de proteínas obtenidas por (I) y (II), fue para la fracción microsomal apical (fma) de 1,22 % ± 0,10 y de 4,34 % ± 0,73, respectivamente; en tanto que para la fracción microsomal basal (fmb) fue de 0,47% ± 0,13 y 1,65% ± 0,29. El rendimiento de las fracciones puras apicales (PA) fue de 0,046% ± 0,04 y de 0,18% ± 0,01, en tanto el rendimiento de la fracción basal pura (PB) fue de 0,081% ± 0,01 y 0,073% ± 0,01, respectivamente. A fin de asegurar la pureza de las vesículas obtenidas, se midió la actividad enzimática de marcadores específicos para la membrana apical y basal del trofoblasto equino (fosfatasa alcalina y unión de ligandos específicos a receptores -adrenérgicos), respectivamente. La actividad específica de fosfatasa alcalina (UI/ mg prot) se midió por un método comercial, con valores para la fracción microsomal apical (fma) obtenida por (I) y (II), de 80,8 ± 18,05 (I) y de 159,04 ± 15,5 (II). En tanto, para la fracción microsomal basal (fmb) los valores obtenidos fueron 19,7 ± 5,0 (I) y 30,7 ± 3,1 (II), respectivamente. La actividad de fosfatasa alcalina de las fracciones pura apical (PA) que se obtuvo por cortado y raspado fue de 91 ± 6, (I) y 174 ± 8,2 (II), en tanto que la fracción pura basal (PB) arrojó los valores de 15 ± 1,5 y 12 ± 0,1 respectivamente. En tanto el enriquecimiento de la fracción pura apical (PA) que se obtuvo fue de 4,6 ± 0,1 y 5,0 ± 0,1 veces, y para la fracción pura basal (PB) los valores de enriquecimiento fueron de 0,8 ± 0,01 y 0,3 ± 0,05 veces respectivamente. La unión de dihidroalprenolol tritiado a receptores β-adrenérgicos no arrojó un resultado concluyente respecto a la distribución diferencial de dicho marcador en las membranas apical y basal purificadas. Sin embargo, la escasa contaminación de la membrana basal con fosfatasa alcalina es un buen indicador de la calidad de dichas membranas y de la eficiencia del gradiente de sacarosa utilizado para purificar la fracción microsomal basal. Estos datos indican que el rendimiento del método de purificación por raspado es mayor que cuando el procesamiento del tejido se realiza inicialmente por cortado. La actividad y el enriquecimiento de fosfatasa alcalina también respaldan esta conclusión. Con el desarrollo de este método de purificación se ha dado un primer paso para la obtención de membranas apicales y basales de placentas de tipo epiteliocorial, lo que permitirá, posteriormente, aplicar el protocolo de aislamiento en placentas de camélidos sudamericanos, cuyas características fisiológicas son relevantes para el estudio de gestaciones bajo condiciones de hipoxia. / The placenta is the main organ of exchange of nutrients and waste products between the mother and the fetus in mammalian species. Although the placental epithelium can be considered fundamentally similar to other epithelia, it displays particular anatomical and histological characteristics in both the human and equine placenta, such as its syncytitial nature. The study of transport functions between mother and fetus in these cases necessarily involves the study of such functions in the polarized apical (mother-facing) and basal (fetal-facing) plasma membranes. In this study, a protocol for simultaneous apical and basal membrane isolation in equine trophoblast was standardized. A total of n=8 placentas were obtained from two Thoroughbred Race Horse Haras (El Sheik and Santa Eladia, both located in the Metropolitan Region of Chile). Immediately after birth, the equine placenta was transported to the laboratory on ice to begin the purification protocol, which included two alternative methods for tissue collection followed by differential centrifugations, precipitation of basal membranes with magnesium chloride, and membrane purification using sucrose gradients. Initial tissue collection was done either by chopping the placental tissue (villous tissue adhered to chorioallanthoid membrane) in small pieces (method I; n=5) or by scraping the villous tissue from the chorioallanthoid membrane (method II; n=3). Specific biochemical markers for apical and basal membranes were used to determine purified fraction purity and contamination. The yield of the preparation in terms of protein recovery obtained by method I and method II for the apical microsomal fraction (fma) was of 1.22%±0.10 and 4.34%±0.73, respectively, whereas for the basal microsomal fraction (fmb) the yield was of 0,47% ±0.13 and 1.65%±0.29, respectively. The protein recovery for the purified apical fraction (PA) for method I and method II was of 0.046%± 0,04 and 0.18%± 0,01, respectively, whereas the protein recovery for the purified basal fraction (PB) was of 0.081%± 0,01 and 0,073% ±0.01, respectively. Specific markers for apical membrane (enzymatic activity of alkaline phosphatase) and basal membrane (substrate binding to -adrenergic receptors) of trophoblast were measured in both the apical and basal fractions to determine their degree of purity and cross-contamination. Measurements of specific activity for alkaline phosphatase (UI/mg prot) were of 80.8± 18,05 for method I and 159.04±15.5 for method II in the apical microsomal fraction (fma), and of 19.7±5.0 for method I and 30,7 ± 3,1 for method II in the basal microsomal fraction (fmb). Alkaline phosphatase activity in the purified apical fraction (PA) was of 91 ± 6,3 for method I and 174 ±8.2 for method II, whereas in the purified basal fraction (PB) values were of 15 ±1.5 for method I and 12 ±0.1 for method II. Enrichment of alkaline phosphatase activity in the PA fraction was of 4,6 ±0.1 fold for method I and 5.0±0.fold 1 for method II, and of 0.8±0.01 fold for method I and 0,3 ±0.05 fold for method II in the PB fraction. Substrate binding to β-adrenergic receptors did not show conclusive results with respect to the differential distribution of this marker in purified apical and basal membranes. Nevertheless, the little contamination of the basal membrane with alkaline phosphatase is a good indicator of the quality of these purified membranes. The exposed data indicate more efficient membrane purification when using method II than when using method I. The activity and the enrichment of alkaline phosphatase also endorse this conclusion. The development of this method of simultaneous isolation of apical and basal trophoblast plasma membranes is a first approximation for the study of transport functions in placentas of the epitheliocorial type. This may allow, in the future, the use of such protocol in placentas of South American camelids, whose physiological characteristics are excellent for the study of gestations under conditions of hypoxia
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Arquitetura e estrutura da placenta equina durante a gestação

Souza, Andreza Morais de January 2014 (has links)
A placenta equina é do tipo epiteliocorial microcotiledonária difusa. Os macrovilos coriônicos iniciais começam a se desenvolver e interdigitar no endométrio após os 40 dias de gestação. Muitos estudos descrevem os aspectos do desenvolvimento da placenta, porém em estágios iniciais os dados de microscopia eletrônica de varredura (MEV) são escassos. O objetivo do presente estudo foi descrever algumas das mudanças ocorridas no córion em desenvolvimento durante a gestação. A estrutura microcotiledonária foi estudada no período desde os 62 dias de gestação até próximo ao parto, por MEV e microscopia óptica. As amostras foram coletadas em um abatedouro comercial de equinos. Foram obtidos 28 fetos, os quais foram mensurados quanto ao comprimento (cm) equivalente à distância cefalococcígea (CR) e as idades gestacionais (IDG) estimadas foram: 62, 85, 110, 118, 136, 149, 185, 222, 230, 250 e >300 dias. Nossos resultados revelaram aos 62 dias a presença de macrovilos redondos, os precursores dos microcotilédones, difusamente localizados na superfície coriônica e próximos um do outro. Aos 85 dias de gestação, a superfície coriônica tornara-se ondulada e as microvilosidades foram reconhecíveis. E aos 110 dias, as aréolas foram facilmente identificadas entre os conjuntos vilosos, os quais passaram a ser mais alongados, mas ainda não ramificados. Com 149 dias as vilosidades mostraram as ramificações primárias das hastes que eram curtas até então. Os vilos estão organizados em tufos reunidos para formar a estrutura microcotiledonária. Muitas vilosidades individuais alongadas estão presentes junto daquelas com múltiplas ramificações a partir dos 185 dias; a maioria deles ramificada em "Y". As microvilosidades promoveram ramificações secundária (aos 222 dias) e terciária (aos 250 dias). Além disso, a presença de histotrofo em muitas amostras ao longo da gestação e a formação de novas microvilosidades foram notados mesmo em estágios finais da gestação, sugerindo o desenvolvimento contínuo de células coriônicas, numa clara resposta à continua demanda nutricional do feto em crescimento. / The equine placenta is diffuse epitheliochorial microcotyledonary type. The initial chorionic macrovilli begins to develop and interdigitate in the endometrium after 40 days of pregnancy. Many studies described aspects of placental development; however, on early stages scanning electron microscopy (SEM) data are scant. The aim of present study was to describe some of the changes occurred in a developmental chorion during gestation. The microcotyledon structure was studied in the period since 62 days of gestation until close to term, by SEM and light microscopy. The samples of chorioallantois were collected from 28 mixed breed mares in a commercial equine abattoir. The estimated gestational ages of each sample were 62, 85, 110, 118, 136, 149, 185, 222, 230, 250 and >300 days. Our results revealed round macrovilli, or the forerunners of microcotyledons, diffusely located and close to one another. They are a shallow cluster like a pile of chorionic protruded cells at 62 days of pregnancy. On the 85th day, the chorionic surface becomes undulated and the microvilli are recognizable. They increased in height and begun to acquire single branch appearance. At 110 days the areole are easily recognized between the pools of villi. These are now higher than earlier, still unbranched and present folding of chorionic surface. The single villi promote primary branching as short rods until 149 days. They are located as tufts gathered together and begin to form the microcotyledon. Many elongated single villi are apposed to multibranched ones from the 185 days; most of them branched in a “Y” shape. The microvillus promote secondary (at 222 days) and tertiary (at 250 days) branching. In addition, histotrophe was identified in many samples throughout gestation and new microvilli were noticed even at latter stages of gestation, suggesting the continuous development of chorionic cells into brand new villus, a clear response to the demand of continues fetus growth.
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Avaliação da associação células-tronco mesenquimais de placenta humana em biomateriais baseados em celulose bacteriana

Heck, Diana January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento / Made available in DSpace on 2013-06-25T19:02:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 311324.pdf: 1922838 bytes, checksum: d61fe3294c5ed4d8db715894bb7fa6c8 (MD5) / As células-tronco mesenquimais (CTMs) são amplamente estudadas por apresentarem potencial de auto-renovação e multidiferenciação, além de possibilidade de isolamento a partir de diversos tecidos. A placenta humana representa uma fonte de CTMs abundante, acessível e livre de questionamentos éticos. O comportamento celular está intimamente ligado ao microambiente tridimensional que as cercam no tecido nativo. Em vista disso, biomateriais vêm sendo desenvolvidos na tentativa de mimetizar in vitro esta complexidade tecidual. O hidrogel de celulose bacteriana (HCB), em particular, tem atraído grande interesse devido a sua nanoestrutura, biocompatibilidade e propriedades mecânicas. Por outro lado, a hidroxiapatita (HAp), tem sido usada como um biomaterial promissor para engenharia de tecido ósseo, devido a sua biocompatibilidade e propriedades osteoindutoras. O plasma rico em plaquetas (PRP) mostra-se como uma interessante fonte de fatores de crescimento a ser aplicada com biomateriais. O presente trabalho teve como objetivo principal, avaliar a interação e viabilidade de células-tronco mesenquimais derivadas da placenta humana (CTMPs) em HCB e em um compósito HCB-HAp, bem como analisar a influência do PRP na viabilidade e proliferação das CTMPs. Para isto, isolamos uma população de CTMPs, com morfologia, imunofenótipos e capacidade de diferenciação características de CTMs. Os HCBs foram produzidos por bactérias Gluconacetobacter hansenii cultivadas em um meio de cultivo apropriado e sob circunstâncias estáticas. A interação célula-HCB foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia confocal. Os resultados revelaram que as CTMPs apresentam capacidade de aderir ao HCB, porém a interação foi superficial, apresentando pequena capacidade de migração para o interior do biomaterial. Compósitos HCB-HAp foram produzidos através da síntese biomimética de HAp, por imersão dos HCB já sintetizados em soluções de cálcio e fosfato, alternadamente. Foram testados compósitos com cinco concentrações de HAp. A microestrutura e a composição química dos compósitos foram verificadas por MEV e EDS e revelaram o aumento da deposição dos cristais de HAp ao longo dos ciclos. A interação célula-compósito foi verificada por MEV e microscopia confocal, assim como no HCB, a interação foi superficial. O aumento da concentração de HAp nos compósitos prejudicou a adesão e as células tenderam a formar agregados nos compósitos com maior concentração de HAp. Dentre os compósitos, o HCB-HAp1(com apenas um ciclo de deposição de HAp) foi considerado o ideal para estudos futuros. Os efeitos do PRP foram analisados sobre a viabilidade e proliferação celular e demonstrou ter efeito dependente da concentração utilizada, sendo 2% a concentração que mostrou aumento na proliferação celular. Desta forma, concluímos que, para ambos biomateriais, melhorias relacionadas à microestrutura e porosidade devem favorecer migração das CTMPs ao interior do hidrogel e, mediante a estas melhorias, a associação do compósito HCB-HAp1 com CTMPs e PRP, deve formar um sistema de cultivo tridimensional promissor para estudos em engenharia de tecido ósseo. / Mesenchymal stem cells (MSCs) are widely studied due to their self-renewal anddifferentiation potential, in addition to the possibility of isolation from several tissues.The human placenta represents an abundantsource of MSCs, readily accessible and free of ethical questions. The unique cell behavior is closely related to the specialized, three-dimensional microenvironment that immediately surrounds them in native tissue. Inthis way, biomaterials are being developed in an attempt to mimic thiscomplexity in vitro.In particular, bacterial cellulose hydrogel (BCH)has attracted great interest due toits unique nanostructure, biocompatibility and good mechanical properties. On the otherhand, the hydroxyapatite (HAp) has been used as a ubiquitous biomaterial in bone tissue engineering due to its biocompatibility and osteoinductive properties. The platelet rich plasma (PRP) appears as an interesting source of growth factors that may be used together with biomaterials. In this study we evaluated the interaction and viability of human placenta derived mesenchymal stem cells (PMSCs) cultured in BCH and BCH-HAp composite, and analyzed the influence of PRP on the viability and proliferation of PMSCs. We isolate a population of PMSCs with morphology, immunophenotypes and differentiation ability, characteristics of MSCs.The BCHs were producted by Gluconacetobacter hansenii bacteria grown in a suitable culture medium under static conditions. The cell-BCH interaction was analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and confocal microscopy. The results revealed that the PMSCs present the ability to adhere to BCH, but the interaction was superficial, presenting low ability to migrate into the biomaterial. BCH-HAp composites were producted by the HAp biomimetic synthesis, by immersing the synthesized BCH in calcium and phosphate solutions. Composites with five concentrations of HAp were tested. The microstructure and chemical composition of the composites were observed by SEM and EDS and revealed increased deposition of HAp crystals along the cycles. The cell-composite interaction was observed by SEM and confocal microscopy and, even as in HCB, the interaction was superficial. The increase of HAp concentration impaired the cell adhesion and the cells tended to form aggregates in the composites with higher HAp concentration. Among the composites, the BCH-HAp1 (with just one HAp deposition cycle) was considered ideal for future studies. The PRP effects were analyzed on cell viability and proliferation and demonstrate to have a concentration-dependent effect. The higher increase in cell proliferation was achieved with 2% PRP. Thus, we conclude that, for both biomaterials improvements related to the microstructure and porosity would be favorable to the PMSCs migration. By these improvements, the association of the composite HCB-HAp1 with CTMPs and PRP must form a promising three-dimensional culture system for studies in bone tissue engineering.
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Células binucleadas trofoblásticas: efeito dos seus produtos de secreção na produção de Prostaglandina F2'alfa' e avaliação da expressão gênica relativa de lactogênio placentário e fator de crescimento endotélio vascular em placentas bovinas

Landim Júnior, Lorivaldo Paz [UNESP] 27 January 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-01-27Bitstream added on 2014-06-13T19:45:13Z : No. of bitstreams: 1 landimjunior_lp_dr_jabo.pdf: 646488 bytes, checksum: 161e7cdad2a76d414639bfa36165023e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Devido às elevadas perdas gestacionais verificadas nas fases embrionária e fetal, principalmente em animais produzidos in vitro (TN e/ou FIV), o presente trabalho avaliou, por RIE, a participação dos produtos secretados pelas BNCs na síntese in vitro de PGF2alfa pelas células BEND e constatou que o meio condicionado, na presença de PDBu, determinou o aumento da produção de PGF2alfa (de 435,84a para 1323,94b pg/mL; p<0,05), mas não na ausência de PDBu (19,01a; 15,08a; 16,83a e 23,10a pg/mL; respectivamente para MCSS; 1:25; 1:50 e 1:100; p<0,05), indicando a participação destes produtos na modulação da síntese de PGF2alfa, provavelmente na etapa da enzima PKC. A expressão gênica relativa de LP e VEGF foi avaliada pela técnica de PCR em tempo real, em placentas de animais TN e FIV, comparados a animais MN e, embora haja uma tendência de .down-regulation. para o VEGF (-1,41a e .0,72a; respectivamente para TN e FIV, p<0,05) não se verificou diferença na expressão entre os grupos. Quanto ao LP, também não foi verificada diferença na sua expressão, embora haja uma tendência numérica de .up-regulation. em TN (+0,11) e .down-regulation. em FIV (-3,18). Estes dados confirmam a capacidade de modulação de síntese de PGF2alfa pela BNC, bem como a não diferença na expressão gênica relativa de VEGF e LP em placentas de animais TN e FIV, quando comparados à MN. / Due to the high pregnancy failures during foetal and embryo stages, mainly in in vitro produced-animals (by NT and/or IVF), this work evaluated the BNCs products on in vitro PGF2alpha synthesis, by RIA, from BEND cells and showed that the conditioned medium, with PDBu, increased the PGF2alpha synthesis (from 435.84a to 1323.94bpg/mL, p<0.05), but not without PDBu (19.01a; 15.08a; 16.83a and 23.10a pg/mL; respectively to MCSS; 1:25; 1:50 and 1:100; p<0.05), showing the function of these cellular products on PGF2alpha synthesis modulation, probably at PKC level. The PL and VEGF relative gene expression were evaluated, by Real Time PCR, in NT and IVF placentas, compared to AI placentas and, although there was a tendency for VEGF to be down-regulated (-1,41a and .0,72a; respectively to TN and IVF, p<0,05), no differences between groups were observed. In relation to LP gene expression, although there was a tendency for upregulation in NT group (+0.11) and down-regulation in IVF (-3.18), no statistical differences were shown also. These data shown the modulation capacity on PGF2alpha synthesis by BNC, as well the no differences on relative gene expression of VEGF and PL in NT and FIV placentas, when compared to IA placentas.
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Proliferação celular em gestações naturais e de conceptos bovinos transgênicos e clonados, que expressam a proteína fluorescente verde (GFP)

Oliveira, Fernanda Paes de [UNESP] 10 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:41Z : No. of bitstreams: 1 000843813.pdf: 1500567 bytes, checksum: 2816e72bf804aaefb588c0028a1aa523 (MD5) / Para o crescimento placentário e a nutrição fetal, altas taxas de crescimento e diferenciação celular são necessárias para um balanço adequado entre proliferação e morte celular das células placentárias. Estas células possuem propriedades específicas em relação a suas funções metabólicas, endócrinas e angiogênicas, sendo fundamentais para o desenvolvimento do concepto ao longo da prenhez. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de proliferação celular em placentônios provenientes de conceptos bovinos transgênicos clonados (n=5) e de inseminação artificial (IA) (n=18), nos períodos de 60 e 90 dias de gestação, que tiveram seu desenvolvimento interrompido e houve a recuperação do útero gestante. As amostras de placentônio foram recortadas e fixadas em solução aquosa de paraformoldeído a 4% em tampão fosfato de sódio (PBS) a 0,1M pH 7.4, para verificação da morfologia, e realização da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados obtidos foram comparados entre bovinos clonados transgênicos e de IA. Em todos os grupos e períodos gestacionais, o epitélio fetal apresentou marcação positiva para proliferação celular. Aos 60 dias a marcação positiva no epitélio uterino das gestações manipuladas foi pouco evidente em relação às de gestações naturais. Por sua vez aos 90 dias a imunorreatividade dos placentônios dos conceptos clonados, foi muito intensa não só no epitélio, mas também no tecido conjuntivo fetal, fato não observado na gestação natural, onde a reação positiva foi pouco evidente no tecido conjuntivo fetal. Neste estudo foi demonstrado um possível desequilíbrio nos padrões de proliferação celular nos conceptos bovinos clonados transgênicos, pois no início da gestação (60 dias) apresentaram menor atividade proliferativa e aos 90 dias um aumento, podendo ser este fato um dos fatores que levam às anormalidades placentárias. Desse modo os resultados da verificação.. / For the placental growth and fetal nutrition, high rates of growth and differentiation are necessary for a proper balance between proliferation and cell death of placental cells. These cells have specific properties in relation to its metabolic, endocrine and angiogenic function and they are fundamental to the development of the fetus throughout pregnancy. In this study, the occurrence of cell proliferation was assessed in placentomes by cloned transgenic bovine conceptuses (n=5) and by artificial insemination (AI), in the 60 and 90 days of gestation, and they development were interrupted and recovering the pregnant uterus. The samples were cut and fixed in paraformaldehyde 4% aqueous solution in sodium phosphate buffer (PBS) 0.1M at pH 7.4, for verification of the morphology and performing immunohistochemistry. The results were compared with bovine cloned and AI. The reults obtained were compared between transgenic cloned bovine conceptuses and AI. In all groups and gestational periods, the fetal epithelium presents positive labeling to cell proliferation. In 60 days gestation the positive labeling of the manipulated gestations was less evident in relation to the natural gestations. On the other hand, in 90 days gestation the immunoreactivity of the placentomes of the cloned conceptuses was more intense, not just in the epithelium, but also in the fetal connective tissue, fact not observed in the natural gestation, were the positive reaction was less evident in the fetal connective tissue. In this study was noted a possible imbalance in the patterns of the cell proliferation in the transgenic cloned bovine conceptuses, because in the early gestation (60 days) they presented a lesser proliferative activity, and in the 90 days a increase, may be this fact one of the factors leading to placental abnormalities. Therefore, the results of verification of cell proliferation and understanding are important for the understanding of possible fails...
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Influência da quimioterapia para neoplasia trofoblástica gestacional sobre a gravidez: resultados maternos e perinatais /

Braga Neto, Antônio Rodrigues. January 2007 (has links)
Resumo: Objetivo. Avaliar a influência da quimioterapia no resultado da primeira gravidez após a neoplasia trofoblástica gestacional (NTG). Pacientes e Métodos. Trata-se do estudo observacional restropsectivo e comparativo, realizado em 3590 pacientes acompanhadas com doença trofoblástica gestacional (DTG) no centro de NTG da Santa Casa Misericórdia do Rio de Janeiro, entre janeiro de 1960 e dezembro de 2005. Destas 867 reternaram grávidas e tiveram seus resultados obstétricos e perinatais confrontados entre grupos que cursaram com remissão espontânea (RE) e NTG, subgrupos de pacientes com NTG que engravidaram com menos de 6 meses, entre os 6 e 12 meses e com mais de 12 meses da última sessão de quimioterapia, e que receberam quioterapia por agente único (NTG-M) ou multiplos agentes (NTG-P)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective. To evaluate the influence to chemoterapy on the results of the first pregnancy after gestational trophoblastic neoplasia (GTN). Patients and methods. It is an obsrvational, retrospective and comparative study comprising 3590 patients followed for gestational trophoblastic disease (GTD) at Santa Casa de Misericórdia do Rio de Janeiro GTN Center between January 1960 and December 2005... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Izildinha Maestá / Coorientador: Odair Carlito Michelin / Banca: Luiz Camano / Banca: Paulo Belfort / Mestre
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Influência da quimioterapia para neoplasia trofoblástica gestacional sobre a gravidez: resultados maternos e perinatais

Braga Neto, Antônio Rodrigues [UNESP] 28 February 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:35:50Z : No. of bitstreams: 1 braganeto_ar_me_botfm_prot.pdf: 602090 bytes, checksum: f38c1cdc313cf9ea229f0e479bcde7c3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) / Objetivo. Avaliar a influência da quimioterapia no resultado da primeira gravidez após a neoplasia trofoblástica gestacional (NTG). Pacientes e Métodos. Trata-se do estudo observacional restropsectivo e comparativo, realizado em 3590 pacientes acompanhadas com doença trofoblástica gestacional (DTG) no centro de NTG da Santa Casa Misericórdia do Rio de Janeiro, entre janeiro de 1960 e dezembro de 2005. Destas 867 reternaram grávidas e tiveram seus resultados obstétricos e perinatais confrontados entre grupos que cursaram com remissão espontânea (RE) e NTG, subgrupos de pacientes com NTG que engravidaram com menos de 6 meses, entre os 6 e 12 meses e com mais de 12 meses da última sessão de quimioterapia, e que receberam quioterapia por agente único (NTG-M) ou multiplos agentes (NTG-P)... / Objective. To evaluate the influence to chemoterapy on the results of the first pregnancy after gestational trophoblastic neoplasia (GTN). Patients and methods. It is an obsrvational, retrospective and comparative study comprising 3590 patients followed for gestational trophoblastic disease (GTD) at Santa Casa de Misericórdia do Rio de Janeiro GTN Center between January 1960 and December 2005... (Complete abstract click electronic access below)
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Identificação precoce de neoplasia trofoblástica pós-molar pela curva de regressão normal da gonadotrofina coriônica humana

Delmanto, Lúcia Regina Marques Gomes [UNESP] 19 January 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-01-19Bitstream added on 2014-06-13T19:56:27Z : No. of bitstreams: 1 delmanto_lrmg_me_botfm_prot.pdf: 1711857 bytes, checksum: 2ec370367716e8bbe7aaf35d7c70e19a (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) / Objetivo: avaliar a utilidade da curva de regressão normal da gonadotrofina coriônica humana no diagnóstico de neoplasia trofoblástica pós molar (NTG). Metodologia: Foi construída curva de regressão normal considerando-se a média e o limite superior de confiança a 95% dos valores quinzenais de -hCG sérico de 80 pacientes com mola hidatiforme completa (MHC) e remissão espontânea. Nesta curva de regressão normal foram identificados o primeiro valor de -hCG acima do limite superior de confiança a 95% das 25 pacientes com MHC e evolução para NTG. Curvas individuais das 105 pacientes foram estabelecidas e analisadas sobre a curva de regressão normal, verificando-se o comportamento destas curvas. Os valores de 3-hCG que excederam o limite superior da curva normal foram considerados anormais. Resultados: As 25 pacientes que desenvolveram NTG pós-molar tiveram desvio da curva de regressão normal de 3-hCG em 3,84 l 2,57 semanas, enquanto platô ou ascensão ocorreu em 8,40 l 2,94 semanas, pós-esvaziamento uterino, com diferença significativa (p< 0,001). Do total de 25 pacientes com MHC e evolução para NTG, 20 (80%) apresentaram valores de -hCG acima do limite superior da curva de regressão normal dentro de quatro semanas, pós-esvaziamento uterino, enquanto nenhuma apresentou platô ou ascensão. Em seis semanas pós esvaziamento uterino, 23 pacientes com NTG (92%) apresentaram valores anormais, acima do limite superior da curva de regressão normal, enquanto somente 11 (44%) mostraram evolução com platô ou ascensão. Houve diferença no comportamento das curvas individuais dos dois grupos quando analisadas sobre a curva de regressão normal. Conclusões: A identificação de pacientes com MHC e evolução para NTG é mais rápida através da curva de regressão normal de 3-hCG, comparada ao platô ou ascensão. A curva de regressão normal de -hCG é útil no diagnóstico precoce de NTG pós molar. / To evaluate the usefulness of the normal 3-human chorionic gonadotrophin (p-hCG) regression curve in the diagnosis of post-molar trophoblastic neoplasia (PMTN). Methods: The normal regression curve was constructed by taking into account the mean and the 95% confidence limit of the bi-weekly values of serum 3-hCG from 80 patients with uneventful complete hydatidiform mole. In this normal regression curve, the first í3-hCG value over the 95% confidence upper limit of the 25 patients with complete hidatidiform mole (CHM) and the development to PMTN were identified. Individual curves of the 105 patients were established and analyzed over the normal regression curve, and the behavior of such curves was analyzed. The 3-hCG values exceeding the upper limit of the normal curve were regarded as abnormal. Results: The 25 patients who developed PMTN showed a devíance in the -hCG normal regression curve in 3.84 l 2.57 weeks while the plateau or increase occurred in 8.40 l 2.94 weeks after evacuation with a significant difference (p< 0.001). Of the total of 25 patients with CHM and development to PMTN, 20 (80%) showed -hCG values over the normal regression curve upper limit within four weeks postevacuation while none showed a plateau or increase. In six weeks post-uterine emptying, 23 patients with PMTN (92%) showed abnormal values over the normal regression curve upper limit while only 11(44%) showed development with a plateau or increase. A difference was noted in the behavior of indívidual curves in the two groups when they were analyzed over the normal regression curve. Conclusions: The identification of patients with CHM and development to PMTN is quicker when using the -hCG normal regression curve as compared to the plateau or increase. The -hCG normal regression curve is useful in the early diagnosis of post-molar NTG.
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Morfologia da placenta e interação materno-fetal em jumentas (Equus asinus) da raça Pêga

Toledo, Carmen Zilda Pereira de [UNESP] 27 November 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-27Bitstream added on 2014-06-13T19:30:08Z : No. of bitstreams: 1 toledo_czp_me_jabo.pdf: 2114280 bytes, checksum: 3353189f0d92e6cea2a99b3bf82c63cc (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Objetivou-se com este estudo analisar a morfologia placentária de fêmeas asininas, espécie, cuja importância no meio rural é de inestimável valor, sendo poucas as informações detalhadas sobre sua placenta, “órgão” imprescindível à viabilidade fetal e a interação materno-fetal, mediante estudo macroscópico, microscópico e de microscopia eletrônica de varredura, os quais, exceto a macroscopia, foram realizados também na interação materno-fetal (útero-placentária). Para tanto, utilizaram-se onze fêmeas desta espécie e foram colhidas 11 placentas logo após a parição a campo, no instante de sua liberação, além de fragmentos de uma placenta oriunda de uma dessas 11 fêmeas, que teve sua gestação acompanhada por duas vezes. Assim, na primeira delas realizou-se operação cesariana e fragmentos da interação materno-fetal foram colhidos; parte deles fixados para posterior processamento usual em histologia e, outra parte, fixada e processada para análise à microscopia eletrônica de varredura. Sua segunda gestação foi acompanhada até o momento da parição e a liberação da placenta após parto normal, sendo colhida na íntegra. Após a colheita, as onze placentas foram pesadas, analisadas macroscopicamente e alguns fragmentos placentários fixados para subseqüente processamento usual em histologia; outros fragmentos foram fixados convenientemente para posterior processamento à microscopia eletrônica de varredura. Das peças analisadas e das preparações microscópicas e ultraestruturais, foram realizadas fotografias, fotomicrografias e ultrafotografias para a documentação. Verificou-se que o valor médio dos pesos dos jumentos, como os pesos das placentas, em relação aos neonatos foi de 8.36.1.10 e 13,18% respectivamente... / The objective of this study was analyzing the placental morphology of female asinines, species whose importance in the rural area is priceless, being little the detailed information about their placenta, vital “organ” to fetal viability and maternal fetal interaction, upon macroscopic, microscopic study, and scanning electron microscopy, which, except the macroscopy, were performed also in the maternal fetal interaction (placental-uterus). Therefore, eleven females of this species were used and eleven placentae were collected right after the calving down at field, in the instant of their release, besides the placenta fragments of one of these eleven females, which had its gestation followed-up twice. Thus, in the first of them, a caesarian operation was performed and fragments of the maternal fetal interaction were collected; part of them fixed for future usual processing in histology and, the other part, fixed and processed for analyses to scanning electron microscopy. Its second gestation was followed up until the moment of calving and the liberation of the placenta after the normal calving, being collected at full. After being collected, the eleven placentae were weighed, analyzed macroscopically and some placental fragments fixed for later usual processing in histology; other fragments were fixed conveniently for future processing to scanning electron microscopy. Among the analyzed pieces and the microscopic and ultra structural preparations, photographs, photomicrographs and ultra photographs were taken for the documentation. It was found that the average weights of the donkeys, as the weights of the placentae, in relation to the neonates were 8.36.1.10 and 13.18% respectively... (Coplete abstract click electronic access below)
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Avaliação da concentração de lactato sérico, glicemia e hemogasometria de ovelhas, cordeiros recém-nascidos e placenta / Measuring serum lactate, glycemic and hemogasometry levels in newborn sheep, lambs as well as their placenta

Silva, Leticia Peternelli da [UNESP] 08 July 2016 (has links)
Submitted by LETÍCIA PETERNELLI DA SILVA null (leticia_pet@hotmail.com) on 2016-09-01T02:41:16Z No. of bitstreams: 1 Tese - artigo - normas.pdf: 1349068 bytes, checksum: 7473c5323f7fbbfa52f7fcc109996b31 (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: A data que consta na capa e folha de rosto do trabalho deve ser a mesma da data de defesa. Corrija estas informações e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-09-01T19:44:13Z (GMT) / Submitted by LETÍCIA PETERNELLI DA SILVA null (leticia_pet@hotmail.com) on 2016-09-05T12:04:59Z No. of bitstreams: 1 Tese - artigo - normas final repositorio.pdf: 1348614 bytes, checksum: 5f17938083a99a0a93594c335f2506c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-05T14:59:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_lp_dr_bot.pdf: 1348614 bytes, checksum: 5f17938083a99a0a93594c335f2506c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-05T14:59:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_lp_dr_bot.pdf: 1348614 bytes, checksum: 5f17938083a99a0a93594c335f2506c8 (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / Os principais desafios da transição fetal-neonatal são a estabilização do equilíbrio ácido-básico, glicemia e oxigenação ao longo das primeiras 24 horas de vida. Falhas nessa adaptação são a maior causa de morte nesse período e os estudos de viabilidade neonatal tem se concentrado nas avaliações destas variáveis. O objetivo do presente estudo foi avaliar a correlação da lactatemia materna, placentária e neonatal em ovinos ao nascimento e, ainda, observar o comportamento do lactato, glicemia e hemogasometria nas primeiras 24 horas de vida do neonato. Para tanto, as avaliações foram realizadas ao nascimento (M1), quatro (M2), oito (M3), 12 (M4) e 24 (M5) horas após. A lactatemia neonatal se mostrou próxima à placentária (p=0,991) diferindo significativamente da materna (p=0,011), o que sugere uma influência da produção de lactato pela placenta como parte da lactatemia neonatal ao nascimento. Ao longo das 24 horas de vida foi possível notar a depuração de lactato pelo organismo do neonato, aproximando assim dos valores de referência para a espécie. A glicemia dos neonatos se manteve em níveis acima dos descritos pela literatura (50,176 ± 21,007 mmol/L) ao nascimento e a elevação se mostrou constante ao longo das avaliações. Na hemogasometria foi possível observar discreta acidose metabólica, com normalização já nas primeiras quatro horas e estabilização completa do equilíbrio ácido-básico ao final das 24 horas de vida. / Newborn animals, between their fetal and newborn transition period, usually face several challenges in the first 24 hours after birth; acid-base balance issues as well as glycemic levels and oxygenation problems are quite usual. Difficulties to overcome such issues have caused several deaths among newborns. Therefore, studies have been carried out in order to evaluate such issues. The main purpose of this study was to evaluate the correlation between the mother´s lactatemia, presence of lactate in the blood, in the placenta as well as in the newborn, moreover, the study measured the lactate, glycemic and hemogasometry levels during the first 24 horas after birth. Tests were carried out right after birth (M1), four (M2), eight (M3), 12 twelve (M4) and 24 (M5) hours after birth. Lactatemia levels were quite similar to the placental levels (p=0,991) which, in turn, were significantly different from the mother´s (p=0,011). Results showed, shortly after birth, a lactate production influence in the placenta as part of the lactatemia issue. Along the first 24 hours after birth, the study showed lower levels of lactate in newborns; levels were closer to the normal index levels found in such animals. Glycemic level results found after birth were higher than the levels published in medical journals (50,176 ± 21,007 mmol/L); high levels remained steady. Regarding hemogasometry results, tests showed slight metabolic acidosis, normal levels were found in the first 24 hours after birth; basic-acid was completely stable at the end of the 24 hours after birth.

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