Las enfermedades virales afectan tanto la calidad como la productividad de la vid, causando variados síntomas. Grapevine Fan Leaf Virus (Virus de la Hoja en Abanico de la Vid, GFLV) produce moteado y deformación de hojas, deformación de sarmientos, cuaja deficiente y maduración desuniforme.En Chile, la incidencia de este virus llega al 0,2%, mientras que las pérdidas en el rendimiento se han estimado hasta en un 12%. Puesto que los virus son de difícil estudio, se hace necesario el uso de métodos eficaces de mantención en laboratorio de este tipo de patógenos con fines de investigación, siendo el cultivo de callos infectados una de las técnicas empleadas. Para establecer un medio de cultivo adecuado para mantener GFLV sobre callo de vid Cabernet Sauvignon, se realizaron dos ensayos. El primero para establecer la combinación de fitohormonas que induce el mayor crecimiento, y el segundo para determinar la mantención del virus en el callo después de un tiempo en cultivo in vitro. Se indujo el crecimiento de callo en un medio MS suplementado con 2,4-D (0,1; 0,5; 1,0 y 2,0 ppm) y BA (0,5; 1,0 y 2,0 ppm). El cultivo se mantuvo por 8 semanas. En el segundo ensayo, trozos de láminas infectadas con GFLV se colocaron sobre el medio que promovió el mayor crecimiento y se verificó la presencia de GFLV durante 8 semanas mediante test ELISA. El crecimiento de los callos fue afectado principalmente por la concentración de 2,4-D, a mayor concentración, mayor crecimiento del callo. A mayor concentración de 2,4 D también se observa un marcado efecto del BA: concentraciones bajas de este regulador hormonal logran el mayor desarrollo de callo. 0,5 ppm de BA combinado con 1 y 2 ppm de 2,4-D presentaron el mayor crecimiento. Los callos infectados con GFLV presentaron un aspecto compacto y pardeado. La absorbancia observada en callos de 2 a 8 semanas fue al menos tres veces superior a la de tejido in vitro e in vivo infectados con GFLV, y más de 18 veces superior al control negativo, no existiendo diferencia significativa entre la absorbancia de los callos positivos al virus. Finalmente, se determinó que la carga viral de los callos no disminuyó al transcurrir el tiempo, por lo que se presume que el virus se multiplica junto con las células del callo. / Diseases caused by viruses affect the quality and the productivity of grapevine causing several symptoms. Grapevine Fan Leaf Virus (GFLV) produces mottling and deformed leaves and shoots, fruit dropping and uneven ripening. Since the study of the viruses is very difficult, it is necessary an effective method of maintenance of this type of pathogens in laboratory with investigation aims, being the culture of infected callus one of the employed techniques. Two trials were made in order to establish a proper culture medium for maintaining GFLV on callus tissue of Cabernet Sauvignon grapevine. The first one was targeted to establish the growth regulator’s combination which induces the highest growing ratio. The second trial was focused on the long term maintenance of the virus within the callus. The callus growth was induced on MS medium suplemented with 2,4-D (0,1; 0,5; 1,0 and 2,0 ppm) and BA (0,5; 1,0 and 2,0 ppm). The culture was kept for 8 weeks. In the second trial, leaves sections infected with GFLV were placed on the medium that promoted the highest growth and the presence of GFLV was verified by ELISA test during the mentioned period.. The callus growth prooved to be influenced mainly by 2,4-D. A direct relation exists between the increasing 2,4-D concentration and the callus growth. At a higher concentration of 2,4-D a noticeable effect of the concentration of BA is also observed: low concentrations of this hormonal regulator result in a higher development of callus. 0,5 ppm of BA in combination with 1 and 2 ppm of 2,4-D displayed the highest growth. The infected calli with GFLV showed a brownish and compact aspect of the tissue. The absorbance measured in calli from 2 to 8 weeks was at least three times superior than the one of in vitro and in vivo tissue infected with GFLV, and 18 times superior than the negative control. A significant difference between the absorbance of the positive calli to the virus does not exist. Finally, the virus presence is not affected on long term culture, therefore it is presumed that the virus multiplies simultaneously to callus growth.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Sanidad Vegetal

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Fruticultura

No disponible a texto completo / Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Sanidad Vegetal / En este trabajo se evaluó el efecto de azufre (Azufre floable AN 600, 600 g/ hL), aceite mineral (Purespray 22E, 1,5%) y spinosad (Entrust*, 20 g/ hL) sobre Pseudaphycus flavidulus y Cryptolaemus montrouzieri bajo condiciones de laboratorio. Los productos fueron aplicados usando dos modalidades: aspersión con Torre de Potter a 15 lb/in2 durante 25 segundos e inmersión por 5 segundos en la solución insecticida. Se empleó un diseño de aleatorización completa con 4 tratamientos, 4 repeticiones por tratamiento y 25 individuos por unidad experimental. Se evaluó la mortalidad al día 1, 3 y 7 post aplicación. Los valores expresados en porcentaje se normalizaron mediante la transformación angular de Bliss y luego se sometieron a Andeva y prueba de Snk para separación de medias. El estudio determinó que azufre, aceite y spinosad asperjados sobre P. flavidulus, tienen un efecto significativo en la mortalidad de la microavispa, mientras que en la modalidad de inmersión los insecticidas produjeron la mortalidad de la totalidad de los individuos al no tener el intercambio gaseoso necesario para su sobrevivencia. En el caso de C. montrouzieri el producto asperjado que más afecta la mortalidad de este depredador es el azufre, seguido por spinosad. En cambio, en la modalidad de inmersión es el aceite el tratamiento que produce el efecto más negativo seguido por el azufre. / This work evaluated the effect of sulphur (Flowable Sulphur AN 600, 600 g/hL), mineral oil (Purespray 22E, 1,5%) and spinosad (Entrust*, 20 g/hL) on Pseudaphycus flavidulus and Cryptolaemus montrouzieri under laboratory conditions. Products were applied using two methods: spraying with potter tower at 15 lb/in2 for 25 seconds and immersion for 5 seconds in the insecticide solution. A complete randomize design with 4 treatments, 4 repetitions per treatment and 25 individuals per experimental unit was used. Mortality was evaluated at 1, 3 and 7 day post application. Values expressed in percentage were normalized by Bliss angular transformation and then subjected to Andeva and Snk test for mean separation. The study suggested that sulphur, mineral oil and spinosad sprayed on P. flavidulus have a significant effect on the mortality of the wasp, meanwhile, in the immersion method the insecticides produce the mortality of all the wasps since they didn’t had the gas exchange necessary for their survival. For C. montrouzieri the sprayed product that most affect is sulphur followed by spinosad. In the immersion method the treatment that produces the most negative effect on the predator is mineral oil followed by sulphur.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención Sanidad Vegetal / Se evaluó el período de protección de phosmet (Imidan 70WP), acetamiprid (Mospilan SP) y metidation (Supracid 40WP) para Cydia pomonella en manzanos variedad Pink lady en precosecha. Se realizó la aplicación el 25 de abril del 2011 con una motopulverizadora y a los 7, 14, 21 y 28 días post-aplicación se cosecharon 100 frutos por cada tratamiento los cuales fueron infestados en el laboratorio con una larva neonata de C. pomonella por fruto. La evaluación del daño se realizó a los 7 días después de la infestación. Se utilizó un diseño de bloques aleatorizados con 5 tratamientos, 4 repeticiones y 25 manzanas por unidad muestral. Los resultados expresados en % de frutos dañados fueron normalizados mediante la transformación angular de Bliss, y sometidos a ANDEVA y a la prueba de comparación múltiple de Tukey. De acuerdo a las condiciones en que se realizó el estudio metidation obtuvo un mayor control de las larvas seguido por phosmet a 130 g/hL y acetamiprid, por ultimo phosmet a 80g/hL. Con una exigencia de control del 99% se concluyó que acetamiprid (Mospilan SP) a 40 g/hL presentó un período de protección no superior a 7 días, metidation (Supracid 40WP) a 100 g/hL y phosmet (Imidan 70WP) a 80 y 130 g/hL presentaron un período de protección entre 7 a 14 días. / The protection period aforded by phosmet (Imidan 70WP), acetamiprid (Mospilan SP) and metidation (Supracid 40WP) against Cydia pomonella to ‘Pink Lady’ apple trees was assessed at preharvest. Applications were carried out with a motorized sprayer and at 7, 14, 21 and 28 post-application days 100 fruits per treatment were harvested and later infested at the laboratory with one first instar larva per fruit. Damage evaluation was carried out 7 days after each infestation. A randomized block design with 5 treatments, 4 replications and 25 apples per experimental unit was used. Results expressed in percent of damaged fruits were normalized by means of Bliss angular transformation and subjected to ANOVA and Tukey’s multiple range test. According to the experimental conditions methidathion got more control of the larvae followed by phosmet 130 g/hL and acetamiprid, finally phosmet at 80 g/hL. With a 99% control requirement, it was concluded that treatments with acetamiprid (Mospilan SP) at 40 g/hL presented a protection period not beyond 7 days. Metidation (Supracid 40 WP) at 100 g/hL, while phosmet (Imidan 70WP) at 80 and 130 g/hL, respectively, afforded protection of 7 to 14 days.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Sanidad Vegetal / En marzo de 2009 se estudió el efecto residual de acetamiprid (Mospilan a 0,5 g·L-1), phosmet (Imidan 70 WP a 1 g·L-1), clorpirifos (Lorsban 75 WG a 0,8 g·L-1) y pyriproxyfen (Admiral 10 EC a 0,6 mL·L-1), sobre la fijación y desarrollo de ninfas de escama de san José en manzanas Fuji. Se realizaron dos estudios. El primero asperjando los árboles, con énfasis en los frutos, en un huerto comercial. El segundo, por inmersión de los frutos en laboratorio. Cada ensayo estuvo compuesto de cuatro tratamientos insecticidas más un testigo aplicado sólo con agua. En el estudio en campo, una vez aplicados los insecticidas, se colectaron 6 manzanas los días 0, 5, 10, 15 y 20 después de la aplicación, las que se llevaron al laboratorio en contenedores enfriados. Luego se infestaron con 100 ninfas móviles y se mantuvieron durante 20 días en una cámara con condiciones controladas a 26+/-1°C, 50+/-10% HR y fotoperíodo de 16:8. En el segundo estudio se colectaron manzanas no tratadas con insecticidas y se infestaron con 150 ninfas migratorias. Después de 48 horas, con las ninfas ya fijadas y en el estado de gorrita blanca, se sumergieron durante 5 segundos en cada tratamiento. Posteriormente, los frutos se mantuvieron en cámara durante 3 semanas en condiciones similares al estudio de campo. Finalmente se determinó el porcentaje de ninfas fijadas y ninfas de segundo estado. Los resultados, expresados en porcentajes y normalizados mediante transformación angular de Bliss, se sometieron a ANDEVA y prueba de Duncan para separar promedios, cuando las diferencias fueron significativas (α ≤0,05). Se constató que los tratamientos logran disminuir la fijación y desarrollo de las ninfas, respecto al testigo, efecto que disminuye en el tiempo. En el ensayo de campo, acetamiprid logro el mejor control tanto para la fijación como el desarrollo, mientras que en el laboratorio, sólo logró impedir el desarrollo más no la fijación. Clorpirifos fue eficiente en laboratorio, sin embargo, en campo su efecto residual fue muy breve. Phosmet tuvo buen efecto residual, pero bajo control tanto en la fijación como en el desarrollo. Pyriproxyfen no impidió la fijación de ninfas, pero sí limitó su desarrollo, acorde a su modo de acción. / In march 2009 it was studied the residual effect of acetamiprid (Mospilan at 0,5 g·L-1), phosmet (Imidan 70 WP at 1 g·L-1), chlorpyrifos (Lorsban 75 WG at 0,8 g·L-1) and pyriproxyfen (Admiral 10 EC at 0,6 mL·L-1), over settlement and development of nymphs of San Jose Scale in Fuji apples. Two studies were carried out. The first was performed by spraying the trees with focus on the fruits, in a commercial orchard. The second one consisted of fruits immersion (dipping) in the laboratory. Each trial consisted of four treatments, one for each insecticide and a control applied with water only. In the field study, after application of insecticides, 6 fruits were collected at 0, 5, 10, 15 and 20 days after the insecticides were applied, which were transported in a cooled container. These were infested with 100 crawlers and were kept in a breeding chamber during 20 days at 26 +/-1º C, 50 +/-10 % RH and 16:8 photoperiod. In the second study untreated with insecticides apples were collected and were infested with 150 crawlers. After 48 hours, with crawlers already settled and at white cap stage, the apples were immersed during 5 seconds in each treatment. Later, the fruits were kept inside a breeding chamber during 3 weeks in similar conditions to the field study. Finally the percentage of settled and second stage nymphs were determinate. The values were expressed in percentage, standardized according Bliss angular transformation and submitted to ANOVA and Duncan test for means separation, when the differences were significant (α ≤0,05). It was found that treatments are able to decrease the settlement and development of nymphs in relation to control, an effect that decreases over time. In the field study, acetamiprid got the best control both settlement and development, while in laboratory, only got was prevent the development but not the settlement. Chlorpyrifos was efficient in laboratory, however, in field, has a very short residual effect. Phosmet has a good residual effect, but low control both settlement and development. Pyriproxyfen did not prevent the settlement of the nymphs, but limited its development, in accordance to its mode of action.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención Fruticultura / En la temporada 2011/2012, se estudió el efecto del aceite mineral (Purespray 15 E 0,5%, 0,7% y 1%) y el extracto de linaza (BIOIL spray 0,5%, 0,7% y 1%) en la fijación de ninfas de escama de San José, Diaspidiotus perniciosus (Comstock) en cerezas variedad Santina. Las aplicaciones se realizaron en un huerto comercial perteneciente a la Agrícola Río Cipreses ubicado en la comuna de Requinoa, VI región del Libertador Bernardo O´Higgins. La infestación con ninfas de Escama de San José se realizó en el laboratorio de Entomología Frutal “Luciano Campos Street” de la Facultad de Ciencias Agronómicas de la Universidad de Chile, a los 5, 10 y 15 días post aplicación. En cada oportunidad se cosecharon 8 frutos por repetición de cada tratamiento, para luego infestarlos con 15 ninfas. Las evaluaciones se realizaron a los 5 días post infestación, contabilizándose el número de ninfas vivas fijadas que continuaron su desarrollo, luego de dicho periodo. Se utilizó un diseño completamente aleatorizado, con 7 tratamientos, 4 repeticiones, siendo la unidad experimental el árbol. Los resultados expresados en porcentaje se normalizaron mediante la transformación angular de Bliss y posteriormente se sometieron a un análisis de varianza y a la prueba de rango múltiple de Tukey. Se concluyó que las aplicaciones de BIOIL spray en todas sus concentraciones, no constituyeron una barrera efectiva para la fijación de las ninfas de escama de San José en la fruta, teniendo un comportamiento similar al testigo. Sin embargo, las aplicaciones de Purespray 15 E 0,7 y 1% redujeron efectivamente la fijación de ninfas en las cerezas.

Tesis para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo y al grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias mención Sanidad Vegetal / El repilo del olivo, causado por el hongo Fusicladium oleagineum, es considerado la enfermedad más importante del olivo (Olea europaea) y está extendida en todas las áreas del mundo donde éste se cultiva: Cuenca del Mediterráneo, Sudáfrica, California, Sudamérica y Australia. En Chile, la superficie de olivos ha ido en aumento y se estimó en 24.000 ha para el año 2010. Esta enfermedad provoca defoliaciones prematuras que tienen como consecuencia un debilitamiento progresivo del árbol y una disminución importante de la productividad. La medida de control más utilizada es la aplicación de fungicidas, en forma preventiva, por lo tanto es importante conocer la epidemiología de la enfermedad, para lograr un adecuado control. La utilización de cultivares resistentes es otra forma de lucha contra la enfermedad, pero la información existente al respecto es contradictoria debido a que la mayoría de los trabajos se refieren a observaciones de campo. Este trabajo tuvo como objetivo conocer los períodos críticos de infección, establecer la dinámica de esporulación del hongo y evaluar la susceptibilidad de 6 cultivares de olivo Arbosana, Bossana, Coratina, Frantoio, Koroneiki y Leccino inoculados artificialmente con F. oleagineum bajo condiciones de campo. Los períodos críticos de infección se establecieron en tres huertos, en la región de Coquimbo, Metropolitana y de Valparaíso, estos fueron similares siendo los meses de otoño-invierno los más severos, con una fuerte dependencia de parámetros climáticos principalmente precipitaciones, pero además, se observó la importancia del agua libre producto de rocíos que da inicio a las infecciones. La dinámica de esporulación se estableció para dos huertos, ubicados en la región de Atacama y Metropolitana, confirmándose dos períodos de mayor esporulación, otoño y primavera, sin embargo, si las condiciones de humedad lo permiten F. oleagineum puede producir conidias durante todo el año. El estudio de susceptibilidad de 6 cultivares de olivo se llevó a cabo en un huerto de la región Metropolitana, donde se determinó que los cultivares Bossana y Coratina son susceptibles a la enfermedad y los cultivares Arbosana, Frantoio, Koroneiki y Leccino son moderadamente susceptibles. / The olive leaf spot caused by Fusicladium oleagineum (Castagne) is widespread in the Mediterranean basin and other world regions were olive trees are grown. The disease causes premature defoliation which result in a progressive weakening of the tree and a significant decrease in productivity. It is important to understand the epidemiology of the fungus to achieve adequate control of the disease. In this work the critical periods of infection were established for the Coquimbo, Valparaíso and Metropolitan regions, where the higher disease incidence occurred during the fall and winter months, with a strong dependence of climatic parameters mainly rainfall, but disease was observed to occur before the first fall rains as a result of morning dew. The sporulation dynamics of F. oleagineum in one orchard in the Atacama and one orchard in the Metropolitan Regions were also determined. Fall and spring time were confirmed as the periods with the highest sporulation. Finally, the susceptibility of 6 olive cultivars was studied in a commercial orchard located in the Metropolitan Region. Bossana and Coratina were susceptible while Arbosana, Frantoio, Koroneiki and Leccino were moderately susceptible.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Forestal

Memoria para optar al título de Ingeniero en Alimentos / La uva de mesa es una de las principales especies frutales en Chile, ya que es uno de los mayores exportadores a nivel mundial y líder en el hemisferio sur. La principal enfermedad que ha afectado en Chile a la uva ha sido la Pudrición Gris, pero una nueva patología de la vid denominada "Pudrición ácida" ha aparecido progresivamente en la zona centro-norte. La etiología de esta fitopatología indica que los responsables serían hongos, levaduras y bacterias acéticas, sin haber determinado los roles y mecanismos de acción de estos microorganismos. En un estudio realizado en el INTA (Instituto de Nutrición y Tecnologia de los Alimentos), se encontró presencia de bacterias acéticas en un 52% de las uvas enfermas y se obtuvieron recuentos bajos de hongos filamentosos fitopatógenos en uvas enfermas, sugiriendo revisar las teorías sobre un origen principalmente fungoso. Luego, se investigó acerca de la asociación de las principales especies de acetobacterias, obteniéndose un predominio de Acetobacter aceti, con un 71% de presencia en uvas enfermas. Hasta el momento no se dispone de tratamientos eficaces que eviten el desarrollo de la pudrición ácida. Por eso, es que en el presente estudio se busca un método alternativo, amigable con el medio ambiente denominado “control biológico”. Para ello se seleccionaron un grupo de 42 cepas provenientes de la microbiota natural de vides, potenciales biocontroles por tener actividad inhibitoria contra BGA (Bacillus subtilis) y Escherichia coli. De estas, hubo 14 que manifestaron cierta propiedad antágonica contra sobre las bacterias acéticas. No se encontró actividad inhibitoria en el sobrenadante libre de células de los biocontroles, lo que sugiere que el principal mecanismo de acción de antagonismo, no sería la producción de metabolitos antibióticos. En las cepas potenciales biocontroles, no se halló un nivel importante de resistencia a antibióticos (solamente resistencia a la ampicilina y la eritromicina en 3 cepas); encontrándose presencia de plásmidos en 4 cepas (ninguno relacionado con el desarrollo de un cuadro de multidrogo-resistencia); y siendo todos los biocontroles pertenecientes al género Bacillus con predominio de Bacillus circulans y licheniformis / The table grape is one of the main fruit species in Chile, since it is one of the greater exporters of this fruit at world-wide level and leader in the South hemisphere. The main disease that has affected in Chile the grape has been the Grey Mold, but a new pathology denominated “Sour rot” has progressively appeared in the center-north zone. The etiology of this pathology indicates that “Sour rot” would be caused by yeasts, molds and acetic bacterias, without to have determined the roles and mechanisms of action of these microorganisms. In a study carried out in the INTA, presence of acetic bacteria in a 52% of the sick grapes was found and low recounts of filamentous molds were obtained in sick grapes, suggesting revising the theories on a mainly fungous origin. Then, thet investigated about the association of the main species of acetobacterias, being obtained that dominated Acetobacter aceti, with a 71% of presence in sick grapes. Until now there aren´t completely effective treatments that controls the development of the sour rot. For that reason, the present study looks for an alternative method, friendly with environment denominated “biological control”. Therefore, was selected a group of 42 environmental strains native of grapevines, potentials biocontrols with inhibiting activity against BGA (Bacillus subtilis) and Escherichia coli. Of these, there were 14 that showed certain antagonistic activity against the acetic bacterias. It wasn´t detected inhibiting activity in the cell-free supernadant, which suggests the main mechanism of antagonism action; it would not be the production of antibiotic metabolites. In the 14 potential biocontrols strains was not found an important presence of resistance to antibiotics (only resistance to the ampiciline and the eritromicine in 3 strains); there was presence of plasmids in 4 strains (not related to the development of a multidrug resistance); and all biocontrols belonged to the genus Bacillus with predominance of Bacillus circulans and Bacillus licheniformis