No description available.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-11-04T11:03:35Z No. of bitstreams: 1 2013_LauanaCostaNogueira.pdf: 2888889 bytes, checksum: 414e46f51fc1a2485bfe9a49f9064a46 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-11-04T11:15:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LauanaCostaNogueira.pdf: 2888889 bytes, checksum: 414e46f51fc1a2485bfe9a49f9064a46 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-04T11:15:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LauanaCostaNogueira.pdf: 2888889 bytes, checksum: 414e46f51fc1a2485bfe9a49f9064a46 (MD5) / Foram conduzidos levantamentos em intervalos entre 1 e 4 anos em quatro parcelas permanentes de 50 x 50 m, totalizando 1 hectare, localizadas na Fazenda Água Limpa (FAL), Distrito Federal, para investigar a estrutura e dinâmica populacional de Caryocar brasiliense Cambess. (Pequi) e Tachigali subvelutina (Benth.) Oliveira-Filho (Carvoeiro) em ambiente natural. Ao todo foram feitas 11 amostragens para a população de Pequi e 12 amostragens para a população de Carvoeiro, no período de 26 anos (1985 a 2011). A população de está crescendo e teve aumento de 54,4% na densidade. As taxas médias de recrutamento e mortalidade para esta espécie foram 3,99 e 0,63 %.ano-¹, respectivamente. A taxa de incremento médio anual efetivo em altura foi 0,02 m.ano-¹ e em diâmetro 0.08 cm.ano- ¹. A taxa de incremento médio anual potencial em altura foi 0,11 m.ano-¹ e em diâmetro 0,25 cm.ano-¹. A população de Carvoeiro aumentou 4,1% na densidade e apresentou taxas médias de recrutamento e mortalidade de 2,84 e 2,83 %.ano-¹, respectivamente. A taxa de crescimento médio anual efetivo em altura foi 0,17 m.ano-¹ e em diâmetro 0,39 cm.ano-¹, e as taxas de crescimento médio anual potencial em altura e diâmetro foram 0,34 m.ano-¹ e 0,57 cm.ano-¹, respectivamente. Para as duas espécies as taxas de mortalidade estão sendo compensadas pelo recrutamento, mas ocorrem variações ao longo das amostragens. Para o Pequi o crescimento é lento, com pequenos incrementos em diâmetro e altura, enquanto que para o Carvoeiro o crescimento é rápido e a espécie apresenta maiores incrementos em diâmetro e altura. As espécies apresentaram comportamentos estruturais e dinâmicos diferentes, o que significa que desempenham funções ecológicas diferentes no ambiente em que estão inseridas. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Surveys were conducted at intervals between 1 and 4 years in four permanent plots of 50 x 50 m, totaling 1 hectare farm located on the Fazenda Água Limpa farm (FAL), Distrito Federal, to investigate the structure and population dynamics of Caryocar brasiliense Cambess. (Pequi) and Tachigali subvelutina (Benth.) Oliveira-Filho (Carvoeiro) in natural environment. A total of surveys 11 were made for the population of Pequi and 12 for the population of Carvoeiro, during a 26 year period (1985-2011). The population of Pequi is growing and increased by 54,4% in density. The average rates of recruitment and mortality for this species were 3,99 and 0,63 %.yr-¹, respectively. The average annual rate of increase in height was 0,02 m.yr-¹ in diameter and 0,08 cm.yr-¹. The average annual growth rate of potential height was 0,11 m.yr-¹ in diameter and 0,25 cm.yr-¹. The population of Carvoeiro increased 4,1% in density and showed average rates of recruitment and mortality of 2,84 and 2,83 %.yr-¹, respectively. The average annual growth rate of height was 0,17 m.yr-¹ and in diameter was 0,39 cm.yr-¹, and the average annual growth rates of potential height and diameter were 0,34 m.yr-¹ and 0,57 cm.yr-¹, respectively. For both species mortality rates are being off set by recruitment but variations occur along among sampling dates. For Pequi growth is slow, with small increases in diameter and height, while for the Carvoeiro growth is fast and this species has greater increases in diameter and height. The species showed different structural and dynamic behavior, indicating means that play different ecological roles in the environment in which they are found.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-11-29T12:27:03Z No. of bitstreams: 1 2013_MarinaNeisRamos.pdf: 2639943 bytes, checksum: d8c3271895c2eb67189b77bad55b3f1b (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-12-09T13:51:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MarinaNeisRamos.pdf: 2639943 bytes, checksum: d8c3271895c2eb67189b77bad55b3f1b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-09T13:51:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MarinaNeisRamos.pdf: 2639943 bytes, checksum: d8c3271895c2eb67189b77bad55b3f1b (MD5) / Apesar do vasto conhecimento sobre adultos de lepidópteros, grande parte da história natural dos imaturos permanece desconhecida. Elbella luteizona (Pyrginae) é um hesperídeo registrado no Distrito Federal, Minas Gerais, São Paulo, Paraná e Rio Grande do Sul. No Cerrado, a espécie é polífaga, sendo que as larvas consomem e constroem seus abrigos em folhas de duas espécies de plantas: Byrsonima coccolobifolia (Malpighiaceae) que é decídua, e Myrsine guianensis (Myrsinaceae), sempre-verde. Essas são as únicas informações disponíveis para E. luteizona. Dessa forma, os objetivos do presente trabalho foram: descrever os imaturos e a arquitetura dos abrigos larvais; verificar a abundância relativa temporal das larvas nas duas espécies de plantas e, particularmente, responder se há preferência da larva por alguma dessas plantas. O trabalho foi desenvolvido em 568 parcelas circulares de 10m de diâmetro em áreas de cerrado sensu stricto, em Brasília, DF, de agosto de 2011 a maio de 2013. Em todas as parcelas, as plantas das duas espécies foram vistoriadas à procura de ovos, larvas, pupas e abrigos. Para as análises temporais os dados obtidos dessas parcelas foram agrupados em dois grupos: os da estação seca e da chuvosa. Foram encontrados 31 ovos (28 em M. guianensis e três em B. coccolobifolia) e 262 lagartas (239 em M. guianensis e 23 em B. coccolobifolia). O desenvolvimento larval apresentou oito ínstares similares na morfologia. Os abrigos larvais apresentaram variações ontogenéticas. A abundância relativa de E. luteizona foi maior na estação seca, quando foram encontrados 28 ovos e 239 larvas do que na chuvosa com três ovos e 23 larvas. Houve significativamente maior proporção de larvas na estação seca do que na chuvosa. Provavelmente, isto ocorreu porque a oviposição acontece no início da seca e, consequentemente, a proporção de ovos e larvas de primeiro ínstar apresenta abundância relativa maior nesse período. À medida que os ínstares se sucedem, ocorrem as perdas naturais e a abundância relativa das larvas decresce até a estação chuvosa, quando há as pupas e os adultos. Não houve diferença significativa na utilização das plantas hospedeiras por E. luteizona. Não houve, também, diferenças significativas no tamanho dos abrigos construídos pelas larvas nas duas plantas hospedeiras. A altura da planta hospedeira exerceu influência significativa sobre a presença de larvas, elas ocorreram em plantas de 1 a 2m de altura. E. luteizona é uma espécie univoltina e de crescimento lento, supostamente permitido pela baixa frequência de parasitismo (7,2% em lagartas). A espécie parece bem adaptada às suas plantas hospedeiras, já que ela desenvolve-se de forma semelhante em ambas. Para esta espécie, a polifagia é vantajosa, pois durante um período de restrição de um recurso (deciduidade de folhas), ela tem a opção de utilizar outra espécie como recurso. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In spite of the vast knowledge about lepidopteran adults, a great part of the natural history of the immature stages remains unknown. Elbella luteizona (Pyrginae) is a hesperiid found in Distrito Federal, Minas Gerais, São Paulo, Paraná and Rio Grande do Sul. In the Cerrado, the species is polyphagous, and the caterpillars consume and build their shelters in leaves of two plant species: Byrsonima coccolobifolia (Malpighiaceae), which is deciduous, and Myrsine guianensis (Myrsinaceae), which is evergreen. This is all the information available for E. luteizona. Being so, the objectives of this work were: to describe the immature stages and the architecture of the larval shelters; examine the temporal relative abundance of caterpillars in both plant species. Particularly, to answer if there is a preference for any of the plants. The study was conducted in 568 circular plots of 10m in diameter in the cerrado sensu stricto, in Brasilia, Brazil, from August 2011 to May 2013. In all plots, the plants of both species were inspected in search of eggs, larvae, pupae and shelters. For the temporal analysis, the data obtained from these plots were grouped into two groups: the dry and the rainy season. Thirty-one eggs (28 in M. guianensis and three in B. coccolobifolia) and 262 caterpillars (239 in M. guianensis and 23 in B. coccolobifolia) were found. Larval development presented eight similar instars in morphology. The larval shelters presented ontogenetic variation. The relative abundance of E. luteizona was higher in the dry season, when 28 eggs and 239 caterpillars were found, than in the rainy season, with three eggs and 23 caterpillars. There was a significantly higher proportion of caterpillars in the dry season than in the rainy season. This is probably explained because the egg-laying happens in the beginning of the dry season and, thus, the proportion of eggs and caterpillars of first instars presents a higher relative abundance in this period. As the instars succeed, natural losses happen and the relative abundance of the caterpillars decreases until the rainy season, when there are pupae and adults. There was no significant difference in the use of host plants by E. luteizona. There wasn’t, either, significant differences in the size of shelters built by the caterpillars in the two host plants. The height of the host plant significantly influenced the presence of caterpillars, they occurred in plants from 1 to 2m in height. E. luteizona is a univoltine and slow growing species, supposedly allowed by the low frequency of parasitism (7,2% in caterpillars). The species seems well adapted to their host plants, since it develops similarly in both. For this species, polyphagy is advantageous because during a period of restriction of a resource (deciduity of leaves), it has the option of using other species as a resource.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-04-29T10:48:27Z No. of bitstreams: 1 2014_FabielleMelissaZorzin.pdf: 3291894 bytes, checksum: e68710f246a1c0d84ed0dd7988cf4255 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-04-29T12:57:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_FabielleMelissaZorzin.pdf: 3291894 bytes, checksum: e68710f246a1c0d84ed0dd7988cf4255 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-29T12:57:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_FabielleMelissaZorzin.pdf: 3291894 bytes, checksum: e68710f246a1c0d84ed0dd7988cf4255 (MD5) / O Diabetes Mellitus é uma doença metabólica crônica, de etiologia múltipla, caracterizada por hiperglicemia resultando na deficiência da secreção ou incapacidade da insulina exercer seus efeitos adequadamente, provocando alterações no metabolismo de carboidrados, lipídios e proteínas. A procura por substância ativa presente em plantas que possa inibir a enzima α-amilase, chave neste processo metabólico, com ação mais seletiva e menos efeitos indesejáveis, tem sido o alvo de pesquisas. O Brasil ocupa o topo dos países mais ricos em biodiversidade do mundo, possui cerca de 20% do total das espécies do planeta e pelo menos metade destas espécies possuem alguma propriedade terapêutica. No entanto, menos de 1% desta diversidade tem sido alvo de estudos apropriados, principalmente como inibidores enzimáticos, o que inclui as espécies vegetais do Cerrado, segundo maior bioma brasileiro. Assim, este projeto propôs avaliar a espécie vegetal Eugenia dysenterica, presente no bioma Cerrado, quanto à atividade de inibição da enzima α-amilase, padronizar e caracterizar o extrato bruto aquoso das folhas desta planta. Para atingir o objetivo proposto, o extrato aquoso bruto foi padronizado de acordo com a presença do marcador químico catequina, fracionado e avaliado quanto a sua ação inibitória sobre a atividade da α-amilase. O extrato aquoso bruto apresentou 47,51 mg de catequina por grama de extrato. As frações com potencial atividade de inibição sobre a α-amilase foram as frações isopropanólica e suas subfrações I8, I16, I17, I20 e I21, além do extrato aquoso bruto. Foi identificado a presença de ácido elágico na subfração com maior potencial inibitório (I8). Os valores de IC50 do extrato bruto e da fração isopropanólica (14,92, e 8,06 μg/mL), respectivamente, foram próximos ao IC50 do controle positivo de inibição Acarbose (5,58 μg/mL). As subfrações apresentaram valores de IC50 maiores que o controle. Não foi observada citotoxicidade para o extrato aquoso bruto e fração isopropanólica em concentrações próximas aos valores de IC50 para α- amilase. Foi desenvolvido um método cromatográfico rápido e confiável para determinação do flavonóide catequina no extrato bruto, pois foi observada ampla faixa de linearidade e excelente precisão. Além disso, o método foi robusto e exato informando corretamente seu limite de detecção e quantificação. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diabetes Mellitus is a chronic metabolic disorder of multiple aetiology characterized by hyperglycemia resulting in deficiency of insulin secretion or inability to exert its effects properly, causing changes in the metabolism of carbohydrates, lipids and proteins. The search for active substance in plants that can inhibit the enzyme α- amylase, key in this metabolic process, with more selective action and less side effects, has been the target of research. Brazil topped the richest countries in biodiversity in the world, has about 20% of the planet's species and at least half of these species have some therapeutic properties. However, less than 1% of this diversity has been the subject of appropriate studies, primarily as enzyme inhibitors, which includes the plant species of the Savanna, second largest brazilian biome. This project proposed to evaluate the plant species Eugenia dysenterica, present in the Savanna biome, as for the inhibitory activity of the enzyme α-amylase, standardize and characterize the crude aqueous extract of the leaves of this plant. To achieve the proposed goal, the crude aqueous extract was standardized according to the presence of the chemical marker catechin, fractionated and evaluated for its inhibitory effect on the activity of α-amylase. The crude aqueous extract showed 47.51 mg of catechin per gram of extract. The fractions with potential inhibitory activity on α-amylase were isopropanolic fractions and its subfractions I8 , I16 , I17 , I20 and I21, besides the crude aqueous extract. The presence of ellagic acid in the subfraction with highest inhibitory potential (I8) was identified. The IC50 values of crude extract and isopropanolic fraction (14.92 and 8.06 μg/mL, respectively), were close to the IC50 inhibition positive control acarbose (5.58 μg/mL). The subfractions showed IC50 values greater than control. No cytotoxicity was observed for the crude aqueous extract and isopropanolic fraction in concentrations near the IC50 values for α-amylase. A fast and reliable chromatographic method for determination of flavonoid catechin in the crude extract was developed because wide range of linearity and excellent accuracy were observed. Moreover, the method was robust and accurate, properly informing its limit of detection and quantification.

A invasão biológica pela espécie arbórea Hovenia dulcis Thunb., oriunda da Ásia, tem sido relatada na África e América do Sul. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos decorrentes do estabelecimento desta espécie exótica sobre a abundância, riqueza, composição de espécies, crescimento, proporção de categorias sucessionais e diversidade beta da regeneração natural na Floresta Atlântica no sul do Brasil. Para tanto, o componente regenerante arbóreo-arbustivo (15 cm ≤ h ≥ 100 cm) foi investigado em uma área de Floresta Atlântica submontana após o estabelecimento de H. dulcis. Dados de diversidade, abundância, e altura total foram coletados em 60 unidades amostrais circulares, de 2 m de raio, divididas entre dois tratamentos, cada qual com 30 unidades amostrais. Entre os métodos, utilizaram-se testes univariados e multivariados para detectar padrões e diferenças entre os tratamentos. Nossos resultados demonstraram que H. dulcis não afetou aspectos quantitativos da comunidade, como abundância e riqueza. Os efeitos de H. dulcis ocorrem sobre a composição de espécies, frequência dos grupos sucessionais e diversidade beta. A invasão estava sob controle da resistência biótica local na área estudada. O efeito diferencial de H. dulcis sobre o componente regenerante foi confirmado pelos resultados deste estudo. A resistência biótica à invasão por H. dulcis no âmbito regional da Floresta Atlântica foi associada ao bom estado de conservação das áreas florestais. / Biological invasions by Hovenia dulcis Thunb., a tree from Asia, have been reported for Africa and South America. The present work aimed to evaluate the effects of the establishment of this exotic species on abundance, richness, species composition, growth, successional categories and beta diversity of natural regeneration in the Atlantic Rain Forest. Thus, the tree-shrub regenerating component (15 - 100 cm tall) was investigated in a southern Brazilian submontane (lowland) Atlantic Rain Forest area after the establishment of invasive tree H. dulcis. Data on abundance, diversity and height were collected in 60 circular sampling units of 2 m radius, divided between two treatments. Among the methods, we used univariate and multivariate tests to detect patterns and differences between treatments. Our results show that H. dulcis did not affect the quantitative aspects of the community, such as abundance and richness. Effects of H. dulcis were observed on the species composition, frequencies of successional categories and beta diversity. The invasion on the studied area was under control by biotic resistance. The differential effect of H. dulcis on regenerant component was confirmed by the results of the present study. The biotic resistance to invasion by H. dulcis at the regional level of the Atlantic Rain Forest was associated with the good conservation status of forest areas.

Peroxidases são enzimas amplamente distribuídas nos organismos, sendo de fundamental importância para o seu desenvolvimento. Atuam reduzindo o peróxido de hidrogênio à água, minimizando, assim, o dano celular em condições de estresse e modulando as respostas celulares que utilizam o peróxido de hidrogênio como molécula sinalizadora. Através de análises em bancos de depósito de genomas, uma provável nova heme-peroxidase (ascorbate peroxidase-related ou APx-R) foi identificada. APx-R é uma proteína exclusiva de plantas e está presente desde organismos basais, como algas, até angiospermas. Diferentemente de outras peroxidases, geralmente codificadas por pequenas famílias gênicas originadas a partir de eventos de duplicação, APx-R se apresenta como um gene cópia-única em todos os genomas de plantas já sequenciados e disponibilizados. Apesar de haver grande similaridade de estrutura proteica entre APx e APx-R, APx-R possui um grande número de substituições conservadas em domínios críticos, sugerindo que esta proteína provavelmente se originou de algum membro da família das ascorbato peroxidases, mas acumulou mutações suficientes de forma que não pode mais ser considerado um membro desta família. Para verificar a localização subcelular de APx-R, protoplastos de arroz foram transfectados com uma construção de fusão traducional APx-R::YFP, sob o controle do promotor 35S. A visualização da florescência foi feita através de microscopia confocal e revelou que APx-R é uma proteína de dupla-localização, a qual pode localizar-se tanto nas mitocôndrias quanto nos cloroplastos. Análises de BiFC mostraram que APx-R pode interagir com as APx presentes nos mesmos compartimentos subcelulares, indicando que estas proteínas podem estar atuando de forma sinérgica no metabolismo de detoxificação do peróxido de hidrogênio. Para caracterizar APx-R funcionalmente, mutantes de arroz superexpressando RNA de interferência objetivando silenciar o gene OsAPx-R foram obtidos através de transformação via Agrobacterium tumefaciens. As plantas RNAi-OsAPx-R apresentaram alterações no metabolismo do peróxido de hidrogênio quando comparadas às plantas não-transformadas, mostrando diferenças nas atividades de SoD. Cat e APx, suportando a provável participação de APx-R na defesa contra o estresse. Assim, estes resultados mostraram que OsAPx-R codifica uma proteína funcional, a qual está relacionada com o sistema antioxidante e é requerida na resposta a estresses, provavelmente atuando na proteção dos cloroplastos e mitocôndrias, ambas organelas com intensa formação de espécies reativas de oxigênio. / Peroxidases are widely distributed in all organisms, being of fundamental importance for their development. These enzymes act reducing hydrogen peroxide into water, minimizing cellular damage in stressful conditions and modulating cell responses through hydrogen peroxide signaling. From analysis in public genomic databases, a putative new heme-peroxidase (ascorbate peroxidase-related or APx-R) was identified. APx-R is exclusive of plants and present from basal to vascular organisms. Unlike other peroxidases, usually encoded by large genic families originated from duplication events, APx-R is present as a single-copy gene in all available plant genomes. Despite the high structure similarity between APx and APx-R proteins, APx-R presents a great number of conserved substitutions in critical domains, suggesting that this protein probably emerged from the family of ascorbate peroxidases, but accumulated enough mutations so it cannot be grouped in this family anymore. To access subcellular localization, rice protoplasts were transfected with a translational fusion of yellow fluorescent protein (YFP) to APx-R protein under the control of the 35S promoter. Fluorescence visualization was performed by confocal microscopy and revealed that APx-R is a dual-target protein targeted to chloroplasts and mitochondrias. BiFc analysis showed that APx-R can interact with APx proteins which are present in the same subcellular compartments, indicating that these proteins may be acting synergistically in hydrogen peroxide scavenging metabolism. To further characterize APx-R in antioxidant metabolism, rice mutants expressing interference RNA for APx-R gene were obtained through Agrobacterium tumefaciens transformation. RNAi-silenced plants presented a disturbed hydrogen peroxide metabolism in comparison to non-transformed plants, with differences in SoD, Cat and APx activity, supporting the participation of APx-R in stress defense. Altogether, these results showed that OsAPx-R encodes a functional protein, which is related to the antioxidant system and required in stress response, probably acting in chloroplast and mitochondria protection, both organelles with intense reactive oxygen species formation.

Plantas da família Asteraceae de diversos gêneros têm demonstrado relevantes propriedades biológicas. O gênero Eupatorium tem sido estudado em todo o mundo e muitos compostos biologicamente ativos já foram isolados de espécies desse gênero. Entre as atividades biológicas descritas para extratos ou compostos desse gênero, merecem destaque as relacionadas à proliferação celular: citotóxica, citostática, antitumoral e antileucêmica. Destacam-se também a atividade antibacteriana, antifúngica, antimalárica e antioxidante. Esse trabalho teve por objetivo verificar a presença de atividade biológica em extratos brutos e semi-purificados de Symphyopappus casarettoi Robinson (sin. Eupatorium casarettoi (B.L. Rob) Steyerm), uma planta nativa do Sul do Brasil e cujas propriedades biológicas e compostos químicos nunca haviam sido pesquisados. O extrato etanólico de inflorescências de S. casarettoi demonstrou atividade antiproliferativa significativa em cinco linhagens celulares derivadas de tumores humanos. O fracionamento com solventes de polaridade crescente sugeriu que tal atividade antiproliferativa ocorreu devido a compostos presentes na fração clorofórmica. Desta forma, preparou-se uma fração enriquecida de lactonas sesquiterpênicas, a qual demonstrou atividade antiproliferativa com doses mais baixas. Três de quatro manchas cromatográficas obtidas a partir dessa fração foram consideradas ativas, com valores de IC50 entre 24.33±3.65 to 1.87±0.32 μg/ml nas cinco linhagens tumorais e em fibroblastos humanos normais. Adicionalmente, não foi observada atividade antiproliferativa em linfócitos humanos. A análise por citometria de fluxo da mancha de cromatografia C2, sugeriu um mecanismo de ação diferente entre os tipos celulares testados. Não foram observadas atividades antibacteriana e antifúngica nos testes com o extrato etanólico de S. casarettoi. Atividade antimalárica foi observada in vitro contra Plasmodium falciparum e in vivo, com a dose de 250 mg/kg em camundongos infectados com P. berghei. A fração clorofórmica foi a que demonstrou melhor atividade e a hexânica demonstrou uma fraca atividade. Adicionalmente, a fração metanólica de S. casarettoi demonstrou um potencial antioxidante maior, quando comparado às outras frações em ensaios in vitro. Já nos testes ex vivo, tanto a fração metanólica, quanto o extrato etanólico atenuaram a morte celular e protegeram contra dano lipídico induzido por ferro. Embora haja a necessidade de estudos adicionais com o intuito de isolar e identificar os compostos bioativos, podemos sugerir que substâncias pertencentes ao grupo das lactonas sesquiterpênicas sejam responsáveis pelas atividades antiproliferativa e antimalárica, e que compostos fenólicos respondam pelas atividades antioxidantes observadas, como descrito previamente para outras espécies do gênero Eupatorium. / Species of the Asteraceae family of many genera have demonstrated a wide array of biological properties. The Eupatorium genus has been studied worldwide and a considerable number of bioactive natural products have been isolated from species of this genus. Among the biological activities reported, special attention was given to the inhibition of cell proliferation, including cytotoxicity, cytostasis and antitumor effects. In addition, antibacterial, antifungal, antimalarial and antioxidant activities have also been described. The aim of this work is to study for the first time the biological properties of crude and partially purified extracts of Symphyopappus casarettoi Robinson (syn. Eupatorium casarettoi (B.L. Rob) Steyerm), a plant native to South Brazil. Notably, the inflorescence ethanolic extract of S. casarettoi showed significant inhibitory activity against five cell lines derived from human tumors. Fractionation with solvents in increasing polarity demonstrated that the antiproliferative activity was due compounds found in chloroformic fraction. This last fraction was separated to get the enriched sesquiterpene lactones fraction, which inhibited cell proliferation with lower dosage. Three of four chromatographic spots from sesquiterpene enriched fraction were considered active with IC50 values ranging from 24.33±3.65 to 1.87±0.32 μg/ml in five human cancer cell lines tested and normal human fibroblasts. Additionally, no cytotoxic activity was found in human lymphocytes. The flow cytometry analysis of C2 chromatographic spot suggested a different mechanism of action of the active compound. We did not observe antibacterial and antifungal activities in the ethanolic extract of S. casarettoi. Antimalarial activity was observed in vitro against Plasmodium falciparum and in vivo, at 250 mg/kg in mice infected with P. berghei. The chloroformic fraction again was the most active one and the hexanic fraction had a weak activity. In addition, methanolic fraction showed a higher antioxidant potential compared to the other fractions in the in vitro assays. In the ex vivo tests, the ethanolic extract and the methanolic fraction attenuated cell death and effectively protected against lipid damage induced by iron. Despite the needs of additional studies to isolate and identify the bioactive compounds, we suggest that substances of the lactone sesquiterpenic class are probably responsible for the antiproliferative and antimalarial activities, while phenolic compounds are responding for the antioxidant activities. These biological properties should be further evaluated.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-10T18:58:14Z No. of bitstreams: 2 Laís Costa Rodrigues_Mestrado em Biologia Vegetal_2012.pdf: 2378011 bytes, checksum: 69789011e27dd701b9ca85fb296f3570 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T18:58:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Laís Costa Rodrigues_Mestrado em Biologia Vegetal_2012.pdf: 2378011 bytes, checksum: 69789011e27dd701b9ca85fb296f3570 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES / Na Região Nordeste do Brasil, a vegetação da Caatinga exerce um papel de grande importância na vida das pessoas, fornecendo espécies vegetais utilizadas como alimento, combustível, construção, medicamento e outros fins. Os usos das plantas locais foram investigados junto a quatro comunidades estabelecidas no município de Carnaubais, na região semiárida do estado do Rio Grande do Norte, nordeste do Brasil. A pesquisa foi conduzida através de entrevistas semi-estruturadas para inventariar as plantas úteis para os moradores, citadas por 74 informantes, enquadrando-as nas categorias medicinal, alimentício, místico-religioso, tecnológico, ornamental, combustível, artesanato e forragem. Comparou-se o número de citações de uso medicinal das espécies e os seus respectivos hábitos, através do teste de Kruskal-Wallis, e o conjunto de espécies úteis em cada comunidade, através do índice de Similaridade de Sorensen. O Índice de Importância Relativa (IR) foi calculado para saber as espécies mais importantes para uso medicinal. O Fator de Consenso do Informante (FCI) foi calculado para avaliar a maior concordância entre os informantes sobre o uso das plantas utilizadas como medicinais. Além disso, calculou-se a média de citações de espécies úteis por grupo de mulheres (jovens e idosas). Foram registradas 142 espécies, a maioria utilizada como medicinal. O uso de herbáceas, quando comparado ao número de citações de uso dos hábitos arbustivo e subarbustivo, foi significativo (N= 74, p<0,05), porém o mesmo não ocorre quando o número de citações de uso de espécies do componente herbáceo é comparado com as que compõem o estrato arbóreo. O conjunto de espécies utilizadas no tratamento de doenças do aparelho respiratório e digestório são semelhantes nas comunidades estudadas (Sorensen= 48%). O número médio de espécies nativas citadas por pessoa é menor (9,4-19,6) no primeiro grupo (23,6-41,4) que no segundo. O percentual de espécies nativas em relação ao total também difere, sendo menor (9,4-19,6%) no primeiro grupo quando comparado ao segundo grupo (23,6-41,4%). Nas comunidades estudadas percebeu-se uma preferência por espécies herbáceas introduzidas para uso medicinal, correspondendo a um melhoramento do repertório local, aumentando a riqueza de espécies utilizadas.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-02-25T18:28:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Pollyanna Michelle da Silva.pdf: 1543877 bytes, checksum: 1ffd7e0ed02c76fe3fc79d12bf815053 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-25T18:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Pollyanna Michelle da Silva.pdf: 1543877 bytes, checksum: 1ffd7e0ed02c76fe3fc79d12bf815053 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CNPQ / Frutos da romãzeira (Punica granatum L.) são usados popularmente para tratar infecções causadas por microorganismos. Este trabalho descreve o isolamento da lectina da sarcotesta de P. granatum (PgTeL; P. granatum testa lectin) através de extração de proteínas utilizando NaCl 0,15 M, fracionamento salino utilizando sulfato de amônio (30 % de saturação) e cromatografia em coluna de quitina. A atividade hemaglutinante (AH) foi monitorada ao longo do processo de purificação utilizando eritrócitos de coelho. A massa molecular de PgTeL nativa foi determinada por cromatografia de gel filtração e o perfil eletroforético em condições desnaturantes foi avaliado em gel de poliacrilamida contendo sulfato sódico de dodecila (SDS-PAGE). Os efeitos do pH, temperatura e íons sobre a sua AH foram determinados e a atividade antimicrobiana contra bactérias e fungos de importância médica foi avaliada através da determinação das concentrações mínima inibitória (CMI), mínima bactericida (CMB) e mínima fungicida (CMF). Ainda, foi avaliado o efeito de PgTeL na capacidade de aderência e invasiva de bactérias em células HeLa. Tratamento do extrato que apresentou HA específica (18,3) da sarcotesta com sulfato de amônio resultou na precipitação de contaminantes proteicos, uma vez que a fração sobrenadante (FS 30%) apresentou maior AH específica (782) que a fração de proteínas precipitadas (13,92). O perfil da cromatografia de FS 30% em coluna de quitina apresentou um único pico proteico adsorvido, que foi eluído com ácido acético 1,0 M e, após diálise, aglutinou eritrócitos, correspondendo a PgTeL (AH específica: 19.430). A massa molecular relativa de PgTeL nativa em cromatografia de gel filtração foi 58 kDa. Em SDS-PAGE, PgTeL apresentou uma única banda polipeptídica de 58 kDa, indicando que sua estrutura não é formada por subunidades unidas por ligações nãocovalentes. A AH de PgTeL foi detectada em valores de pH de 5,0 a 8,0 e foi resistente ao aquecimento até 100°C durante 30 minutos. A AH de PgTeL foi estimulada por Ca2+ (10 mM) e Mg2+ (20 mM). PgTeL foi agente bacteriostático e bactericida contra Aeromonas sp., Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Salmonella enteritidis, Serratia marcescens, Staphylococcus saprophyticus e Streptococcus mutans (valores de CMI variando de 0,27 a 9,0 μg/mL e CMB de 0,27 a 68,4 μg/mL), enquanto apenas inibiu o crescimento de Klebsiella sp., Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis (valores de CMI variando de 16 a 20 μg/mL). PgTeL também inibiu a capacidade de aderência de S. enteritidis (40% de inibição) e a capacidade invasiva de E. coli e S. aureus (59% e 25% de inibição respectivamente) em células HeLa. PgTeL mostrou atividade antifúngica contra espécies de Candida (com CMI variando de 6,25 a 25 μg/mL e CMF variando de 6,25 a 50 μg/mL). Em conclusão, PgTeL é uma lectina ligadora de quitina, termoestável, ativa em ampla faixa de pH e com ação antibacteriana e antifúngica, bem como é capaz de interferir na aderência e capacidade invasiva bacteriana. / Fruits of pomegranate (Punica granatum L.) are used by people to treat infections caused by microorganisms. This work reports the isolation of a lectin from P. granatum sarcotesta (PgTeL) by protein extraction using 0.15 M NaCl, saline fractionation using ammonium sulfate (30% saturation) and chromatography on chitin column. Hemagglutinating activity (HA) was monitored during the purification process using rabbit erythrocytes. The molecular mass of native PgTeL was determined by gel filtration chromatography and the electrophoretic profile under denaturing conditions was evaluated using polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulphate (SDS-PAGE). The effects of pH, temperature and ions on its HA were determined and the antimicrobial activity against bacteria and fungi with medical importance was evaluated by determination of minimal bactericide (MBC), inhibitory (MIC) and fungicide (MFC) concentrations. In addition, it was evaluated the effect of PgTeL on the adherence and invasive abilities of bacteria on HeLa cells. Treatment of the sarcotesta extract which showed specific HA (18.3) with ammonium sulphate resulted in precipitation of proteic contaminants since the supernatant fraction (SF 30%) showed highest specific HA (782) than the precipitated protein fraction (13.92). Chromatography profile of SF 30% on chitin column showed a single adsorbed protein peak, which was eluted with 1.0 M acetic acid and, after dialysis, agglutinated erythrocytes, corresponding to PgTeL (specific HA: 19.430). The relative molecular mass of native PgTeL on gel filtration chromatography was 58 kDa. In SDS-PAGE, PgTeL appeared as a single polypepetide band with 58 kDa, indicating that its structure is not composed by subunits linked by non-covalent interactions. The HA of PgTeL was detected at pH values from 5.0 to 8.0 and was resistant to heating at 100°C for 30 minutes. The HA of PgTeL was stimulated by Ca2+ (10 mM) and Mg2+ (20 mM). PgTeL was bacteriostatic and bactericide agent against Aeromonas sp., Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Salmonella enteritidis, Serratia marcescens, Staphylococcus saprophyticus and Streptococcus mutans (MIC values ranging from 0.27 to 9.0 μg/mL and MBC from 0.27 to 68.4 μg/mL) while only inhibited the growth of Klebsiella sp., Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis (MIC values ranging from 16 to 20 μg/mL). PgTeL also inhibited the adherence ability of S. enteritidis (40% inhibition) and invasive ability of E. coli and S. aureus (59% and 25% inhibition respectively) on HeLa cells. PgTeL showed antifungal activity against Candida species (MIC values ranging from 6.25 to 25 μg/mL and MFC ranging from 6.25 to 50 μg/mL). In conclusion, PgTeL is a thermostable and chitin-binding lectin, active at a broad pH range, and with antibacterial and antifungal action, as well as is able to interfere with adherence and invasivive abilities of bacteria.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4522_1.pdf: 1012518 bytes, checksum: 74b47b40c7035abde6501b0dbd54331a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / As plantas medicinais constituem uma fonte valiosa para o isolamento de microrganismos capazes de produzir diversas moléculas bioativas. Momordica charantia L., conhecida popularmente como Melão-de-São Caetano, pertence à família das Cucurbitáceas e é uma planta muito utilizada na medicina popular para o tratamento de várias afecções de origem microbiana. Folhas e raízes de Melão-de- São Caetano foram coletadas e, após a desinfecção, foram fragmentadas e plaqueadas nos meios Batata Dextrose Ágar (BDA) e Caseína Amido Ágar (CAA). A rizosfera foi processada por meio de diluição seriada, seguida de semeadura nos mesmos meios. Foram isolados 289 microrganismos endofíticos, sendo 71 das folhas (72% fungos, 21% bactérias e 7% actinomicetos) e 218 das raízes (55% fungos, 38% bactérias e 7% actinomicetos). Da rizosfera foram isolados 220 microrganismos (5% fungos, 47% bactérias e 48% actinomicetos). A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada através dos testes de bloco de gelose e de difusão em disco, utilizando os seguintes patógenos: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Mycobacterium tuberculosis, quatro linhagens de Malassezia spp. e quatro de Candida spp. Entre os actinomicetos endofíticos testados em bloco de gelose (ISP-2), 35,2% apresentaram atividade antimicrobiana, sendo 23,5% endofíticos da raiz e 11,7% da folha. Quanto à rizosfera, 63% dos actinomicetos testados foram ativos para um ou mais patógenos. Neste ensaio os halos de inibição variaram entre 10 a 40 mm. As melhores linhagens foram cultivadas nos meios líquidos M1, MPE e ISP-2. Todas as linhagens apresentaram atividade para pelo menos um dos patógenos testados, com halos entre 9 e 30 mm. A maioria dos actinomicetos avaliados foi identificado como pertencente ao gênero Streptomyces