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Uso de genes anti-apoptóticos na construção de plantas de maracujá transgênicas e análise da atividade de diferentes promotores em células vegetais e de insetosFreitas, Daniele Scandiucci de January 2006 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2006. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-10-31T15:56:28Z
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Previous issue date: 2006 / As plantas normalmente são hospedeiras de mais de um patógeno. O maracujazeiro, por exemplo, é infectado por diversos vírus, bactérias e fungos, que limitam consideravelmente a sua produção. Devido a isso, o uso dos sistemas de controle de doenças que confiram amplo espectro de resistência é cada vez mais necessário. Trabalhos recentes demonstraram que plantas de fumo ou tomate expressando genes anti-apoptóticos são resistentes a estresses abióticos e a vários patógenos necrotróficos, isto é, patógenos que matam a célula da planta hospedeira como parte do seu processo de infecção. Neste trabalho, os
genes p35 e iap-3 de baculovirus foram separadamente introduzidos no genoma
de plantas de maracujá usando biobalística. Os genes estrangeiros estavam sob o comando transcricional dos promotores 35S ou UBQ3. As plantas transgênicas foram regeneradas e selecionadas pela presença do transgene usando a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) e/ou Southern blot. Somente plantas p35+ foram selecionadas pela análise por PCR e/ou Sothern-blot. Onze plantas regeneradas mostraram a presença do gene p35. Análises transcricionais de plantas regeneradas mostraram a presença de transcritos específicos para o gene p35 em 9 delas. As plantas regeneradas, contendo o gene p35, foram inoculadas com o vírus Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), a bactéria Xanthomonas axonopodis pv passiflorae, e o herbicida glufosinato (Syngenta). Nenhuma das plantas mostrou resistência ao CABMV. Plantas regeneradas (p35+) continham menos da metade do número de lesões detectadas nas plantas não-transgênicas, quando inoculadas com X. axonopodis pv. passiflorae e algumas plantas p35+ mostraram tolerância aumentada ao herbicida glufosinato, quando comparadas às plantas não-trangênicas. Além disso, no presente trabalho, é demonstrado que um promotor de baculovírus (promotor IE-1) é ativo em células vegetais e que, promotores usados em biotecnologia de plantas (UBQ e 35S) são também, ativos em células de inseto quando analisados em ensaios transientes de expressão onde o gene repórter luciferase (rluc) de Renilla reniformis estava sob o comando transcricional de cada promotor. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / Plants are usually hosts for more than one pathogen. The passion flower, for example, can be infected by a many virus, bactéria and fungi, which limit fruit yield considerably. Due to this, the use of diseases control systems that allow a wide
range of disease resistance is needed. Recent work have shown that tobacco or
tomato plants containing anti-apoptotic genes were more resistant to abiotic
stresses and several necrotrophic pathogens, which are pathogens that kill the
plant host cell as part of their infection process. In this work, the p35 and iap-3
genes from baculoviruses were separetely introduced into the genome of passion
fruit plants by biobalistics. The foreign genes were under the transcriptional control
of the 35S or UBQ3 promoters. The transgenic plants were regenerated and
screened for the presence of the transgene by PCR and/or Southern blot. Only p35+ plants were confirmed by PCR and/or Sothern-blot analysis. Eleven regenerated plants showed the presence of the p35 gene. Transcriptional analysis of regenerated plants showed the presence of specific p35 transcripts in 9 of them. Regenerated plants containing the p35 gene were inoculated with the cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), the bacterium Xanthomonas axonopodis pv passiflorae, and the herbicide, glufosinate, (Syngenta). None of the plants showed resistance to CABMV. Regenerated plants (p35+) showed less than half of local lesions showed by non-transgenic plants when inoculated with X. axonopodis and some p35+ plants showed increased tolerance to the glufosinate herbicide when compared to non-transgenic plants. Furthermore, we have shown that a
baculovirus promoter (IE-1 promoter) is active in plant cells and promoters used in
plant biotechnology (UBQ and 35S) are also active in insect cells by transient expression assays using the luciferase gene (rluc) from Renilla reniformis under the transcriptional control of each promoter.
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Estratégias para conservação ex situ de arnica (Lychnophora ericoides Less)Melo, Luciana Queiroz de 08 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2009-11-06T13:39:00Z
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Atenciosamente,
Kell Viana on 2010-06-23T03:36:36Z (GMT) / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2010-06-23T16:37:39Z
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Previous issue date: 2006-08 / A arnica (Lychnophora ericoides Less) tem uso medicinal e toda a planta em infusão no álcool é usada externamente em machucados ou contusões, como anestésico e cicatrizante. São também produzidas pomadas para os mesmos sintomas. Trabalhos científicos citam que a espécie L. ericoides apresenta um poder antiinflamatório surpreendente. Empresas de cosméticos têm fabricado sabonete de arnica, indicando-o para eliminar asperezas, rachaduras e suavizar hematomas e contusões. Sua exploração é feita por extrativismo. Apresenta baixa germinação de sementes e seu cultivo não é praticado. Devido ao uso intensivo da espécie L. ericoides, torna-se importante e urgente a obtenção de informações sobre o comportamento germinativo de suas sementes para fins de conservação a longo prazo, visando o manejo da espécie. A importância da conservação é reforçada pela identificação de populações de arnica com diferenças de porte da planta e aroma característico da espécie. O estudo da conservação do germoplasma, através da análise do comportamento germinativo de aquênios em diferentes temperaturas e pré-tratamentos, associado ao estudo da variabilidade genética de L. ericoides, poderá fornecer subsídios para a conservação ex situ de aquênios a longo prazo e o manejo sustentado da espécie. Os objetivos deste trabalho foram: (1) analisar e quantificar a variabilidade genética entre as populações de arnica por meio de marcadores RAPD; (2) definir quais as melhores condições para a germinação de arnica bem como avaliar as possibilidade de sua conservação a longo prazo sob temperaturas ambiente a baixas temperaturas (10oC, -20oC e -196oC ). Foram amostradas quatro populações na região geoeconômica do Distrito Federal: Parque Nacional de Brasília (duas populações, uma aromática-APA e outra não aromática- APN), Fazenda Água Limpa - UnB (uma população aromática-FAL) e Jardim Botânico de Brasília (uma população com indivíduos de menor porte e não aromática-JBB). Folhas de 24 indivíduos de cada região foram coletadas. Os DNAs foram extraídos de acordo com o protocolo CTAB 2%. De um total de 147 iniciadores testados foram selecionados 15, xii totalizando 60 bandas polimórficas. Marcadores RAPDs selecionados foram analisados com a utilização dos programas NTSYS e Amova. O dendrograma obtido pelo método UPGMA e o coeficiente de dissimilaridade Dice evidenciaram quatro agrupamentos consistentes. A análise de AMOVA mostrou uma percentagem variabilidade genética entre populações de 35,7% e dentro de populações de 64,3%, evidenciando uma alta variação entre e dentro de populações, sendo um importante resultado para definição de uma estratégia de conservação da espécie que se encontra em situação vulnerável à extinção. No experimento sobre a germinação foram avaliados os efeitos de nove temperaturas e três tratamentos pré-germinativos sobre a germinação que aquênios selecionados pelo teste densimétrico em água destilada: temperaturas constantes de 5C, 10C, 15C, 20C, 25C, 30C, 35C, 40C e alternada de 20-30C em presença de nitrato de potássio (KNO3,) ácido giberélico (GA3) e H2O (testemunha). As maiores porcentagens de germinação foram obtidas a 20oC na presença de água e a 20-30oC em presença de KNO3, 76,5% e 81,5%, respectivamente, não havendo diferença significativa entre estes. A germinação dos aquênios selecionados e dos não selecionados pelo teste densimétrico foi avaliado no experimento de conservação a longo prazo, armazenados a -196oC , -20oC, 10oC e temperatura ambiente durante o período de um ano, com avaliação bimestral. Os dados mostraram que os aquênios de arnica não sofreram redução da germinabilidade quando submetidos às baixas temperaturas nos períodos analisados, demonstrando que as sementes de arnica são ortodoxas. O material selecionado apresentou uma porcentagem média de germinação variando entre 55,5% e 73,5% e uma uniformidade germinativa em todas as condições do experimento. Já os aquênios não selecionados apresentaram uma porcentagem média de germinação, entre 12% e 30,5%, além de um comportamento germinativo desuniforme quando comparado ao material selecionado. O teste densimétrico promoveu uma efetiva seleção de aquênios, aumentando a quantidade de aquênios germinados. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Arnica (Lychnophora ericoides), is a shrub up to 3m height, which is associated with high altitudes (900-1800m) and rocky soils in the Cerrado biome, mainly in the states of Minas Gerais, Goiás and the Federal District. In traditional medicine, arnica leaves are used in alcoholic infusion beverages and extracts as anti-inflammatory and to treat contusions. Also they are produced cosmetic for the same symptoms. Scientific works cite that species L. ericoides presents a surprising antiinflammatory power. Cosmetic companies have manufactured saoap of arnica, indicating it to eliminate cracks and to alleviate hematomas and bruises. Its exploration is made by extrativismo. It presents low germination of seeds and its culture is not practised. Had ericoides the intensive use of species L., the attainment of information becomes in the long run important and urgent on the germinativo behavior of its seeds for conservation ends, aiming at the handling of the species. The importance of the conservation is strengthened by the identification of populations of arnica with differences of transport of the plant and characteristic aroma of the species. Arnica biology and ecology are scarce studied. Considering L. ericoides intensive use, information on the germinative behaviour of L. ericoides achenes became very important for germplasm conservation. The main objectives of this work were (1) to analise and quantify the genetic variability among Arnica populations using RAPD markers; and (2) to evaluate the temperatures and pre-germinative treatments on arnica achenes germination, and the effect of several tempetatures on achenes viability. For the genetic studies, leaves from four populations from the Federal District, Brazil were sampled, based on their geographic distance and organoleptic characteristics: Parque Nacional de Brasília - (2 populations, one scented - APA, and other non-scented - APN), Fazenda Água Limpa - UnB (1 scented population), and Jardim Botânico de Brasília (1 population lower height and non-scented). Scored RAPD markers (Random Amplified Polymorphic DNA) were analised using NTSYS and AMOVA software. The results indicate a high dissimilarity among populations, with an index of 67%. The dendogram obtained by UPGMA method and Dice’s coefficient showed four consistent cluster. An AMOVA analysis presented 35,7% variation among populations, and 64,3% within populations, showing a high variation among populations. For the germination studies, achenes selected based on densimetric method, were used constant temperatures of 5ºC, 10ºC, 15ºC, 20ºC, 25ºC, 30ºC, 35ºC, 40ºC and alternating 20-30ºC in the presence of potassium nitrate (KNO3,) giberelic acid (GA3) and H2O. After the determination of the best germination condition, samples from selected and non selected achenes by densimetric method were stored at -196oC, -20oC, 10oC and environment temperature during one year. Germinability was evaluated every two months. The highest germination percentages were obtained at incubation tempertatures of highest 20oC, in the presence of H2O (76.5%) and 20-30oC, in the presence of KNO3 (81.5%), with no statistical significant difference between these two values. Arnica achenes did not have reduced their germinability when stored at low temperatures, during the experiment time, showing that arnica seeds can be considered ortodox. Selected achenes presented a germination average percentage varying between 55.5% and 73.5%, and a germinative uniformity in all experiemental conditions. Non selected achenes showed a germination average percentage between 12% and 30.5%, besides the desuniform germinative behaviour when compared to the selected achenes. Densimetric test promote an effective selection of achenes, increasing the number of seeds germinated. This is an important result for conservation strategy for such species considered vulnerable to extinction. Also, it indicates that seed collection must consider a large number of populations sampled, preserving a higher genetic diversity of this species from different locations.
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Localização da expressão de genes durante o desenvolvimento de ovários de plantas de Brachiaria brizantha sexual e apomíticaAlves, Elizangela Ribeiro January 2007 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2007. / Submitted by Priscilla Brito Oliveira (priscilla.b.oliveira@gmail.com) on 2009-12-01T21:18:45Z
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Previous issue date: 2007 / Brachiaria é uma gramínea de grande importância econômica. No Brasil, são estimados 70 milhões de hectares cultivados com esta forrageira. Seu melhoramento e a ampliação da variabilidade genética são de grande importância para a sustentabilidade e crescimento da agropecuária no Brasil. Um dos entraves para o melhoramento Brachiaria é a presença da apomixia, modo de reprodução onde não há recombinação para a formação do embrião. A compreensão dos mecanismos que regulam a apomixia possibilitará a utilização desse modo de reprodução como ferramenta biotecnológica para fixar características agronômicas de interesse em espécies cultivadas. A ocorrência de apomixia em espécies, como as de Brachiaria, que conservaram a habilidade de se reproduzir por sexualidade permite estudos comparativos, tanto estruturais, quanto genéticos e moleculares. Comparações, ao longo do desenvolvimento, entre sacos embrionários de plantas sexuais e apomíticos poderão revelar as diferenças que irão especificar se um saco embrionário seguirá a via apomítica ou sexual. Neste trabalho foi comparada, por hibridização in situ, a expressão temporal e espacial de sete seqüências de cDNA em ovários de plantas sexuais e apomíticas de Brachiaria. Nas plantas apomíticas, o transcrito de BbrizREC foi detectado preferencialmente no meiócito, no momento imediatamente anterior à diferenciação de iniciais apospóricas, indicando que esse transcrito pode estar associado à morte programada do meiócito e ao aparecimento das iniciais apospóricas. Em momentos posteriores da diferenciação, precursores da fertilização, BbrizMYO, BbrizAQP, BbrizMAPK apresentaram expressão preferencial nas sinérgides, sugerindo o envolvimento de BbrizMYO e BbrizMAPK no processo de fertilização e de BbrizAQP na ativação da oosfera. Nas apomíticas peseudogâmicas o embrião é formado a partir do desenvolvimento autônomo da oosfera, mas a fertilização da célula central é necessária para formar o endosperma. O presente trabalho também contribuiu para o estabelecimento da técnica de fertilização in vitro em Brachiaria que permitirá, em condições controladas, avaliar o papel de diferentes genes no decorrer deste processo e assim contribuir à melhor compreensão da reprodução em angiospermas. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Brachiaria is a forage grass of great economic importance. In Brazil, an
estimated area of 70 million hectares is cultivated with Brachiaria species.
Improvement of breeding programs and genetic variability is very important for
the culture and sustainability of pastures in Brazil. One of the barriers for
Brachiaria improvement is the asexual mode of reproduction through seeds -
apomixis. The understanding of the mechanisms that regulate apomixis makes
possible its use in biotechnological programs to fix interesting agronomic
characteristics in cultivated plants. Species that show both apomictic and sexual
mode of reproduction allow morphological, genetic and molecular comparative
studies. Analysis of embryo sac development from sexual and apomictic plants
can report the differences that will specify the sexual or apomictic pathway. In
the present work, the temporal and spatial expression of cDNA sequences was
analyzed by in situ hybridization in ovaries of apomictic and sexual plants.
BbrizREC was preferentially expressed in the meiocyte, just before apospore
initials differentiation, suggesting its involvement in programmed cell death of
the meyocite and appearance of apospore initials. Later on in the reproduction,
before fertilization, BbrizMYO, BbrizAQP, BbrizMAPK were preferentially
expressed in the synergids, suggesting that BbrizMYO and BbrizMAPK are
concerned in this process and BbrizAQP in egg cell activation. In pseudogamic
apomicts embryo is formed from autonomous development of the egg cell, but
the central cell fertilization is required to form the endosperm. The present work
contributed to establishing an in vitro fertilization technique in Brachiaria that will
make possible, in controlled conditions, to evaluate the role of different genes
along this process, contributing to a better understanding of reproduction in
angiosperms.
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Padrões nutricionais de espécies lenhosas do cerradoAraújo, Janaina Fernandes de 04 December 2006 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2009-11-30T22:57:35Z
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Previous issue date: 2006-12-04 / A concentração foliar de nutrientes é um importante indicador do estado de nutrição mineral de espécies lenhosas. O Bioma Cerrado apresenta grande diversidade e heterogeneidade de espécies mesmo em fisionomias homogêneas como o cerrado sensu stricto. Esta diversidade se reflete em espécies nativas, que crescem sobre condições edáficas uniformes, pertencerem a diferentes grupos funcionais, especialmente em termos de padrões fenológicos. Espécies lenhosas do cerrado podem ser classificadas em três grupos fenológicos, sempre-verdes, decíduas e brevidecíduas, de acordo com o intervalo de tempo em que as árvores permanecem sem folhas. A perda anual de folhas pode afetar o estado nutricional e consequentemente as funções das folhas tais como fotossíntese e uso de água e processos como ciclagem de nutrientes. Estudos anteriores sobre nutrição mineral de espécies nativas do bioma cerrado foram geralmente focados em comparações entre fisionomias, na influência dos fatores edáficos e em aspectos específicos tais como acumulação de alumínio. O principal objetivo do presente estudo foi comparar as variações na concentração foliar de nutrientes de 15 espécies lenhosas do cerrado sensu stricto pertencentes aos três grupos fenológicos, em latossolo distrófico, para determinar a influencia da deciduidade na nutrição mineral. As principais hipóteses foram que espécies sempre-verdes apresentariam menores concentrações foliares de nutrientes, menor área foliar específica e menor variação sazonal que espécies decíduas porque suas folhas persistem por mais de um ciclo anual de estações seca e chuvosa. . O estudo foi realizado em um cerrado sensu stricto na Reserva Ecológica do IBGE no Distrito Federal. Folhas completamente expandidas foram coletadas de três indivíduos de cada espécie, em intervalos de dois meses durante um ano, iniciando-se em agosto de 2005, para a análise de nutrientes, N, P, K, Ca, Mg, Fe, Mn, Zn e Cu. A área foliar específica foi determinada em duas coletas no fim da estação chuvosa e inicio da estação seca de 2006. Amostras de solo de diferentes profundidades acima de 30 cm foram coletadas em dezembro de 2005 e junho de 2006 e analisadas para determinação da disponibilidade de nutrientes. As análises químicas do solo mostraram forte acidez e baixa disponibilidade dos nutrientes essenciais. As concentrações foliares médias dos macronutrientes, N, P, K, Ca e Mg foram menores nas espécies sempre-verdes. Espécies decíduas mostraram as maiores concentrações de N, P e K no inicio da estação chuvosa, época em que as folhas encontram-se recentemente maduras e suas concentrações decresceram até o fim da estação chuvosa e começo da próxima estação seca. Concentrações de Ca foram maiores no final da estação seca, época de abscisão foliar. Espécies brevidecíduas tiveram menores concentrações de N e P do que as decíduas, que permanecem sem folhas por uma período maior, e maiores concentrações desses nutrientes que as sempre-verdes. As brevidecíduas não tiveram maiores concentrações de K que as sempre-verdes porém apresentaram as maiores concentrações foliares de Ca. Espécies brevidecíduas tiveram menores concentrações de N e P que espécies decíduas e maiores concentrações de N, P e Ca que as sempre-verdes. A área foliar específica média das espécies sempre-verdes (54,0 cm2g-1) foi menor do que a das decíduas (67,0 cm2g-1) e brevidecíduas (83,5cm2g-1). A área foliar específica foi correlacionada com N e P. Existem diferenças não só entre espécies decíduas e sempre-verdes, mas também entre espécies decíduas com diferentes períodos de deciduidade. Entretanto, as análises foliares também mostraram que existe ampla variação inter-específica na concentração de nutrientes que superam as variações entre grupos fenológicos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Foliar concentration of nutrients is an important indicator of the state of mineral nutrition of woody species, especially as related to soil fertility and adaptations in native plant communities. The cerrado biome presents great biodiversity and heterogeneity of species even within homogenous physiognomies like the cerrado sensu stricto. This diversity can be reflected in native species growing under uniform edaphic conditions belonging to different functional groups, specially in terms of leaf traits and phenology patterns. Woody species of the cerrado can be classified into three phenological groups, evergreens, deciduous and brevideciduous, based on the interval during which the trees remain without leaves. Annual leaf shedding would affect the leaf nutrient status and consequently leaf functions such as photosynthesis and water use, and ecosystem processes such as nutrient cycling. Previous investigations on mineral nutrition of native plants of the cerrado biome reported in the literature are generally focused on comparisons of physiognomies, the influence of edaphic factors, and specific aspects such as aluminum accumulation. The main objective of the present study was to compare the variations in leaf nutrient concentrations among 15 woody species of a cerrado sensu stricto belonging to the three phonological groups growing on a dystrophic latosol to determine the influence of deciduousness on mineral nutrition. The main hypothesis was that evergreen species would present lower foliar concentrations of nutrients, less specific leaf area, and smaller seasonal variations than deciduous species, because their leaves would persist beyond one annual cycle of dry and wet season. The study was conducted in a cerrado sensu stricto at the Ecological Reserve of the Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística near Brasília in the Federal District of Brazil. Fully expanded leaves were collected from three individuals of each species at two-month intervals during one year, beginning August 2005 and analyzed for N, P, K, Ca, Mg, Fe, Mn, Zn e Cu. Specific leaf area was determined twice toward the end of the rainy season of 2006. Soil samples from different depths up to 30 cm were collected in December 2005 and June 2006 and analyzed to determine nutrient availability. Soil analysis showed that the soil was acid and dystrophic with low availability of essential nutrients. The mean concentrations of the major nutrients, N, P, K, Ca and Mg were lower in the evergreen species than in the deciduous species. Seasonal variations were less in evergreen species. Deciduous species showed higher concentrations of N, P and K at the beginning of the rainy season when leaves were recently formed and their concentrations decreased toward the end of the rainy season and the beginning of the ix next dry season. Concentrations of Ca increased toward the end of the rainy season, as the leaf age increased. Brevideciduous species had lower concentrations of N and P than those which shed leaves for a longer period though they had higher concentrations than evergreens. Brevideciduous species did not have higher concentrations of K than evergreens but had higher concentrations of Ca. Mean specific leaf area of evergreen species (54,0 cm2g-1) was smaller than that of deciduous (67,0 cm2g-1) and brevideciduous species (83,5 cm2g-1). Specific leaf area was correlated with N and P. Thus there were significant differences not only between evergreen and deciduous species but also among deciduous species with different periods of deciduousness. However, leaf analyses also showed that there were large inter-specific variations in leaf concentrations of nutrients that surpassed the variations among phenological groups.
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Efeitos de diferentes doses de esterco de gado, no desenvolvimento e no balanço nutricional de mudas do Angico (Anadenanthera macrocarpa) / Effect of different doses of manure of cattle, in the development and the nutritional rocking of changes of the Angico (Anadenanthera macrocarpa)Prestes, Márcio Tadeu 04 July 2007 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2007. / Submitted by Fabrícia da Silva Costa Feitosa (fabriciascf@gmail.com) on 2009-12-15T22:49:40Z
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Previous issue date: 2007-07-04 / O experimento foi realizado na Estação Experimental de Biologia da Universidade de Brasília, com a espécie arbórea Angico (Anadenanthera macrocarpa), em um Latossolo Vermelho e esterco de gado. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com seis repetições e sete tratamentos, em que a porcentagem de esterco usado em cada tratamento foi de 0% (testemunha), 10%, 20%, 30%, 40%, 50% e 60%. O objetivo do trabalho foi verificar os efeitos de diferentes doses de esterco de gado, no desenvolvimento e no balanço nutricional de mudas do Angico, através das variáveis: massa da matéria seca, altura, e teores de nutrientes das folhas. Outro objetivo é de subsidiar planos de recuperação, conservação e manejo dos vários biomas onde esta espécie ocorre. A produção de matéria seca das copas, raízes e plantas inteiras, e a altura das mudas no experimento foram submetidas a regressão múltipla. A eficiência da utilização do esterco de gado para composição de substrato com Latossolo Vermelho começa a diminuir com os aumentos das doses, a partir dos pontos máximos de 34,7% e 34,5% para a massa seca das copas e massa seca das plantas inteiras, respectivamente. Na massa seca das raízes, a eficiência da adubação começa a diminuir a partir da dose de 33,9%. Para a altura das plantas aos quarenta dias e cento e vinte dias, houve efeito significativo entre os tratamentos, onde a eficiência do adubo começa a reduzir a partir da dose de 36,3% nas duas idades. A avaliação do estado nutricional do angico demonstrou que todas as concentrações médias dos nutrientes nas folhas encontram-se dentro dos limites de suficiência, porém, os nutrientes que mais contribuíram para a produção de matéria seca nas mudas de angico foram o enxofre e o potássio. A dose de esterco de gado que obteve a maior produção de matéria seca entre os tratamentos que ficaram acima das mudas referência (13,15 g/muda), foi a de 30%, e os nutrientes com maior probabilidade de responder à adubação, de acordo com a análise foliar foram: Mn (23,8%) > Cu (19,0%) > Mg (16,7%) > Fe (14,3%) > K (9,5%) > Ca = B (4,8%) > N = P = Zn (2,4%). O Índice de Balanço Nutricional (IBN) não apresentou correlação significativa com a produtividade. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The experiment was realized at Biology Experimental Station of Universidade de Brasilia, with the tree species Angico ( Anadenanthera macrocarpa), in a Red Latossolo and manure of cattle. The experimental delineation used was the blocks at random with six repetition and six treatments, in which the percentage of manure used in each treatment was 0% (testify), 10%, 20%, 30%, 40% e 60%. The objective of search was verify the effects of different doses of manure of cattle, in the development and in the nutritional balance of seedling of Angico, through the variables: mass of dry matter, height and the contents of nutrients of leaves. Another objective is subsidize recovering plans, conservation and handle of various biomes where this species occurs. The production of dry matter from the tops of trees, roots and whole plants, and the height of seedling were submitted to the multiple regression. The efficiency in the use of manure of cattle for the composition of substrate with Red Latossolo starts to decrease with the increase of the doses, from the maximum points of 34, 7% e 34,5% for dry mass of the tops and the dry mass of whole plants, respectively. In the dry mass from the roots, the efficiency of fertilization starts to reduce from the dose of 33,9%. For the height of the plant at the forty and a hundred twenty days, there was a significative effect between the treatments, where the efficiency of fertilization starts to reduce from the dose of 36,3% in both ages. The evaluation of nutritional state of angico demonstrated that all the concentration averages of nutrients in the leaves is inside the limits of sufficiency, however, the nutrients that contributed more for the production of dry matter in the seedling of angico were the sulphur and the potassium. The dose of manure of cattle that obtained the higher production of dry matter among the treatments stayed above of seedling reference (13,15g/seedling), was 30%, and the nutrients with higher probability to answer to the fertilization, according to the foliage analysis were: Mn (23,8%) > Cu (19,0%) >Mg (16,7) > Fe (14.3%) > K (9,5) > Ca =B (4,8%) > N = P = Zn (2,4%). The Nutritional Balance Rating (INB) have not presented significative correlation to the productivity.
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Identificação de agonistas e antagonistas de receptores nucleares em extratos de plantas medicinais : morus nigra l., plectranthus ornatus codd., ipomoea cairica (L) sweet e pouteria torta (mart.) radlkFranzotti, Elaine Maria 05 May 2006 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2010-05-13T23:47:22Z
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Previous issue date: 2006-05-05 / A utilização de plantas com fins terapêuticos é uma das mais antigas formas de prática medicinal da humanidade. Produtos naturais, incluindo derivados de plantas, têm contribuído grandemente para o desenvolvimento de modernos fármacos. O Brasil possui uma grande tradição no uso de plantas com fins terapêuticos, com pouca ou nenhuma comprovação de suas propriedades farmacológicas. O principal objetivo dos estudos aqui apresentados foi o de aumentar o conhecimento científico sobre a ação de espécies vegetais de nossa flora utilizadas com finalidade terapêutica. Essas informações pretendem contribuir, não somente para o descobrimento de novos ligantes para receptores nucleares, como também para o descobrimento de novos fármacos que tenham sua ação modulada pelos receptores de estrogênio e de glicocorticóide. As espécies aqui estudadas, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus e Ipomoea cairica têm uso comum na medicina popular do Brasil e suas ações ainda não são adequadamente conhecidas em receptores nucleares. Utilizando-se ensaio de gene repórter e transfecção em cultura de células U937, foram pesquisadas as ações de extratos e de substâncias isoladas das espécies já citadas nos receptores de estrogênios (ERa e ERb) e de glicocorticóide (GR). Nas condições experimentais o extrato etanólico de Morus nigra apresentou toxicidade para as células U937; os extratos aquoso e o hexânico não apresentaram ação agonista ou antagonista em ERa e ERb. O extrato hexânico de Pouteria torta apresentou atividade antagonista (não competitiva) em ERb e nenhuma atividade em ERa. O extrato etanólico de Ipomoea cairica apresentou efeito antagonista em ERa e nenhuma ação sobre o ERb. Com relação aos fitoconstituintes de Ipomoea cairica, o glicosídeo de arctigenina, o glicosídeo de traquelogenina, o ácido 4,5-di-O-cafeoilquínico e o ácido 3,5-di-O-cafeoilquínico ativaram a transcrição do ERa. Essa ativação foi menor do que a ativação promovida pelo estradiol. O glicosídeo de traquelogenina e o ácido 4,5-di-O-cafeoilquínico, na presença de estradiol, intensificaram a atividade transcricional do ERb. O extrato hexânico de Plectranthus ornatus aumentou a atividade transcricional do GR com intensidade igual à da dexametasona. Quando adicionados conjuntamente, o extrato hexânico de P. ornatus e dexametasona, a atividade transcricional do GR foi intensificada. Os diterpenos ácido 11R*-acetoxicolavênico, 1a,6b,7b-triacetoxi-8,13R*-epoxi-14-labden-11-ona e 1a,6b,7b-triacetoxi-9-hidroxi-8,13R*-epoxi-14-labden-11-ona, isolados do extrato hexânico de P. ornatus, não tiveram qualquer ação sobre o receptor do GR. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The use of plants for treatment and prevention of diseases is one the oldest medicinal practices. However, for several of these plants, few or none scientific evidence of their pharmacological properties are known. Natural products, including plant derivatives, have contributed to the development of new drugs. The aim of this study is evaluate four species widely used in Brazilian folk medicine, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus, and Ipomoea cairica, in relation to their activities on estrogen (ERa and ERb) and glucocorticoid (GR) receptors. In the experimental conditions the ethanol extract of Morus nigra showed to be toxic for the U937 cells, the aqueous and hexane extracts did not present either an agonist or an antagonist action on ERa and ERb. The hexane extract of Pouteria torta presented non-competitive antagonist activity on ERb and no action on ERa. Ipomoea cairica hexane extract showed an antagonist effect on ERa and no action on ERβ. The compounds isolated from Ipomoea cairica, arctigenin glucoside, trachelogenin glucoside, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid activated the transcription of ERa. This activation was lower than the activation obtained with estradiol. The trachelogenin glucoside and the 4,5-di-O-caffeoylquinic acid, in presence of estradiol, enhanced the ERb transcriptional activity. The hexane extract of Plectranthus ornatus increased the GR transcriptional activity as well as dexametasone. When were togheter, the hexane extract of Plectranthus ornatus and dexametasone, the GR transcriptional activity was enhanced. Diterpenes 11R*-acetoxykolavenic acid, 1a,6b,7b-triacetoxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, 1a,6b,7b-triacetoxy-9-hydroxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, isolated from the hexane extract of P. ornatus did not showed effects on the GR receptor. The use of plants for treatment and prevention of diseases is one the oldest medicinal practices. However, for several of these plants, few or none scientific evidence of their pharmacological properties are known. Natural products, including plant derivatives, have contributed to the development of new drugs. The aim of this study is evaluate four species widely used in Brazilian folk medicine, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus, and Ipomoea cairica, in relation to their activities on estrogen (ERa and ERb) and glucocorticoid (GR) receptors. In the experimental conditions the ethanol extract of Morus nigra showed to be toxic for the U937 cells, the aqueous and hexane extracts did not present either an agonist or an antagonist action on ERa and ERb. The hexane extract of Pouteria torta presented non-competitive antagonist activity on ERb and no action on ERa. Ipomoea cairica hexane extract showed an antagonist effect on ERa and no action on ERβ. The compounds isolated from Ipomoea cairica, arctigenin glucoside, trachelogenin glucoside, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid activated the transcription of ERa. This activation was lower than the activation obtained with estradiol. The trachelogenin glucoside and the 4,5-di-O-caffeoylquinic acid, in presence of estradiol, enhanced the ERb transcriptional activity. The hexane extract of Plectranthus ornatus increased the GR transcriptional activity as well as dexametasone. When were togheter, the hexane extract of Plectranthus ornatus and dexametasone, the GR transcriptional activity was enhanced. Diterpenes 11R*-acetoxykolavenic acid, 1a,6b,7b-triacetoxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, 1a,6b,7b-triacetoxy-9-hydroxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, isolated from the hexane extract of P. ornatus did not showed effects on the GR receptor.
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Dinâmica da vegetação arbórea de uma floresta estacional decidual sobre afloramentos calcários no Brasil CentralCarvalho, Fabrício Alvim January 2009 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-22T20:00:26Z
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Previous issue date: 2009 / As florestas estacionais deciduais sobre afloramentos calcários ocorrem na forma de manchas e constituem uma das várias fisionomias florestais ocorrentes no bioma Cerrado. Estas florestas ocorrem em solos férteis e estão submetidas a um forte déficit hídrico sazonal e condições edáficas adversas (solos rasos e rochosos). O objetivo geral deste estudo foi analisar os aspectos da dinâmica da vegetação arbórea de uma floresta sobre afloramentos calcários no município de Iaciara (140353S; 462915O), Vale do Paranã, nordeste de Goiás, Brasil Central. No estudo da dinâmica da comunidade, as mudanças florísticas e estruturais foram analisadas a partir de comparações entre dois inventários realizados em parcelas permanentes (25 parcelas de 20 x 20 m alocadas aleatoriamente na floresta) nos anos de 2000 e 2006. Todos os indivíduos arbóreos com DAP ≥ 5 cm foram amostrados, mensurados, e calculados os parâmetros fitossociológicos e diversidade das espécies. As espécies foram classificadas em três grupos funcionais definidos conforme a densidade da madeira: madeira leve (densidade de madeira < 0,5 g.cm-3); madeira média (0,5 a 0,8 g.cm-3) e madeira pesada (> 0,8 g.cm-3). Foram calculadas as taxas de crescimento, recrutamento e mortalidade, assim como foram aplicadas análises de gradiente para testar a relação entre as taxas e algumas variáveis edáficas (rochosidade, declividade, macro e micro nutrientes do solo) e de luminosidade (abertura de dossel) coletadas nas parcelas. As taxas de crescimento (média 0,25 cm.ano-1; mediana 0,21 cm.ano-1), mortalidade (2,77 %.ano-1) e recrutamento (4,43 %.ano-1) foram elevadas e compatíveis com outras florestas estacionais tropicais de dinâmica intensa, incluindo florestas estacionais e matas de galeria do Cerrado. Na análise de gradientes, apenas o crescimento apresentou relação significativa com as variáveis ambientais rochosidade e abertura de dossel (CCA, autovalor do eixo 1 > 0,3). A dinâmica acelerada foi promovida principalmente pelo grupo funcional de madeira média, englobando espécies de características tipicamente pioneiras (ex. Acacia tenuifolia e Combretum duarteanum), com alta mortalidade e baixa longevidade. Espécies dos grupos de madeira leve (acumuladoras de água) e pesada (tecidos resistentes) apresentaram baixa mortalidade, maior longevidade, indicando estratégias mais eficientes de lidar com o déficit hídrico estacional. A dinâmica intensa não provocou mudanças qualitativas e quantitativas na composição arbórea, mostrando alta estabilidade florística da comunidade no intervalo. No estudo dos ritmos mensais de crescimento, dendrômetros foram instalados nos troncos de indivíduos de duas espécies pertencentes aos três grupos funcionais: madeira leve (Cavanillesia arborea e Commiphora leptophleos), madeira média (Acacia paniculata e Dilodendron bipinnatum) e madeira pesada (Myracruoduon urundeuva e Tabebuia impetiginosa). As medidas de crescimento através dos dendrômetros, os aspectos fenológicos (folhação, floração e frutificação) e a pluviosidade foram tomados e correlacionados mensalmente, ao longo de 19 meses (maio/2007 a novembro/2008). Espécies pertencentes aos mesmos grupos funcionais tenderam a apresentar ritmos mensais de crescimento similares, influenciados pela estacionalidade na pluviosidade, porém com pequenas diferenciações devido à grande variabilidade intra-específica no crescimento e às flutuações climáticas no intervalo analisado. Foi observada uma tendência de que quanto maior a densidade da madeira, maior o decréscimo radial durante a seca. Espécies de madeira leve com troncos acumuladores de água apresentaram menores decréscimos radiais, ou estagnação, durante os meses secos, comportamento distinto das demais espécies, com maior decréscimo radial nos meses secos. A floresta apresentou uma dinâmica arbórea acelerada com comportamentos diferenciados entre os grupos funcionais em termos de crescimento, mortalidade e recrutamento, devido a suas estratégias de adaptação ao clima fortemente estacional. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The seasonally dry deciduous forests on limestone outcrops occur as natural patches amongst various forest phytophysiognomies in the Cerrado biome. These forests occur on fertile soils and are subjected to strong seasonal rainfall deficits and stressful edaphic conditions (rock and shallow soils). The goal of this work was to investigate the aspects of the tree dynamics in a seasonally dry deciduous forest on limestone outcrops in the municipality of Iaciara (140353S; 462915W), Paranã Valley, northeast Goiás, Central Brazil. Changes in floristics and structure were investigated within the analysis of community dynamics, through comparisons between two consecutive inventories in permanent plots (25 plots of 20 x 20 m randomly allocated in the forest) for the years 2000 and 2006. All trees with DBH ≥ 5 cm were sampled, measured, and the phytosociological and diversity parameters were calculated. The species were classified in three functional groups according the stem wood density: lightwood (wood density < 0.5 g.cm-3); softwood (0.5 to 0.8 g.cm-3) and hardwood (> 0.8 g.cm-3). Rates of growth, mortality and recruitment were calculated, and gradient analyses were applied to test the relationships between these rates and some edaphic (rock cover, slope, soil macro and micro nutrients) and light (canopy opening) data collected in the plots. The rates of growth (mean 0.25 cm.year-1; median 0.21 cm.year-1), mortality (2.77 %.year-1) and recruitment (4.43 %.year-1) were high and compatible with the findings in other highly dynamic seasonally forests, including seasonal and gallery forests in the Cerrado domain. In gradient analysis, only growth showed a significant correlation with rock cover and canopy opening (CCA, eigenvalue of axis 1 > 0.3). The softwood functional group that comprises tipically pioneer species (eg. Acacia tenuifolia and Combretum duarteanum) with high mortality and low lifespan was the main contributor for the intense community dynamics. Lightwood (with stem water storage) and hardwood (with resistant tissues) groups presented low mortality and long lifespan, indicating more efficient seasonal water deficiency strategies. The intense dynamics did not promote qualitative and quantitative changes in floristic composition, therefore showing a highly floristic and structural stability in this community across the studied interval. For the monthly analysis of stem growth rhythms, dendrometers were placed on tree trunks (DBH ≥ 4 cm) of two species belonging of each of three functional groups according the stem wood density, lightwood (Cavanillesia arborea and Commiphora leptophleos), softwood (Acacia paniculata and Dilodendron bipinnatum) and hardwood (Myracruoduon urundeuva e Tabebuia impetiginosa). Measurements of growth by the dendrometers, phenology (foliar, flowering and fruiting) and rainfall were done monthly and correlated, during 19 months (from Mai/2007 to November/2008). Although some differences were detected due to the high intra-specific variability in growth, and to climatic fluctuations on the studied interval, species of the same groups are likely to present similar growth rhythms, influenced by the seasonality in the precipitation. The analysis showed a tendency for the denser the wood the higher the radial contractions in the dry seasons. Lightwood species had high stem water storage and presented low radial contractions, or radial stagnation, during dry months, while softwood and hardwood species presente high radial contractions in dry months. This forest subjected to an extremely seasonal climate presented intense tree dynamics with different strategic responses among the species functional groups promoting different patterns of growth, mortality and recrutement.
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Contribuição ao estudo químico e biológico de Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae)Barros, Ivelone Maria de Carvalho 12 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-23T18:36:16Z
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Previous issue date: 2008-12 / A presente dissertação descreve o estudo químico e da atividade biológica de folhas de Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), espécie frutífera, genuinamente brasileira, comum no bioma Cerrado do Distrito Federal e conhecida popularmente como mangaba. O látex dessa espécie é utilizado na medicina popular para o tratamento de desordens gástricas e tuberculose e as folhas para tratar dismenorréia e diabetes. Dos extratos hexânico e etanólico foram obtidos: mistura de hidrocarbonetos; mistura de álcoois de cadeia longa; obtusalina e eritrodiol; lupeol, α- e β-amirina e seus derivados 3β-acilados; β-sitosterol; rutina e ácido clorogênico. Os extratos e frações de Hancornia speciosa foram submetidos a ensaios para avaliar sua atividade biológica. Em teste de citotoxicidade, utilizando como modelo a toxicidade às larvas de Artemia salina, os extratos brutos e frações não apresentaram toxicidade (DL50>1000 ppm). Na avaliação da atividade alelopática, foi determinada a ação dos extratos brutos sobre a germinação e crescimento das sementes de Lactuca sativa. O extrato hexânico não inibiu a germinação de forma significativa, mas reduziu o índice de velocidade de germinação (IVG) nas concentrações testadas e inibiu o crescimento das partes aéreas (epicótilo) das plântulas e raízes (hipocótilo). O extrato etanólico inibiu a germinação e reduziu o IVG em todas as concentrações avaliadas; não inibiu o crescimento do epicótilo, porém inibiu o crescimento do hipocótilo, nas plântulas. O extrato etanólico foi avaliado quanto à atividade antioxidante através de dois modelos: pelo método de varredura do peróxido de hidrogênio no qual, o extrato etanólico (CE50 = 4.25 μg/mL) apresentou atividade antioxidante cerca de 20 vezes maior que aquela apresentada pelo controle positivo (ácido ascórbico, CE50 = 84,87 μg/mL) e pelo modelo da redução do complexo de fosfomolibdênio, realizado de acordo com a modificação do método de Prieto, (1999), no qual o extrato etanólico (EEB) apresentou 41% de atividade antioxidante em relação à um equivalente de 1mg/mL de quercetina, Assim, trabalho visa contribuir para o conhecimento de plantas medicinais brasileira e até onde vai nosso conhecimento, esse é o primeiro relato da presença de obtusalina, eritrodiol, β-sitosterol e dos derivados acilados de α- e β-amirina no gênero Hancornia. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This dissertation report describes the chemical and the biological activity studies about leaves of Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), a fruitful brazilian species, popularly known as mangaba. In the traditional medicine, this latex is used to protect against gastric disorders and tuberculosis and their leaves in to treat dysmenorrhea, diabetes and obesity. From the hexane and ethanol crude extracts several triterpene mixtures could be identified: obtusalin and erythrodiol, lupeol, α- and β-amyrin and their 3β-acylated derivatives. Also were obtained mixtures of hydrocarbons and of long-chain alcohols, β-sitosterol, and a mixture of rutin and chlorogenic acid. The extracts and fractions of Hancornia speciosa were tested to evaluate a possible biological activity. The crude extracts showed no toxic activity on Artemia salina brine shrimp assay (LD50 > 1000 ppm). Evaluating allelopathy activity over Lactuca sativa seeds’ germination and growing, the hexane crude extract did not inhibit germination significantly, but reduced the rate of germination (IVG) and inhibited the growth of roots and aerial parts of the seedlings. On the other hand, the ethanol crude extract inhibited germination and reduced IVG, but did not inhibit growing of aerial parts of germinated seeds; nevertheless it inhibited the growth of roots in all evaluated concentrations. The ethanol crude extract was evaluated about antioxidant activity by two models: by the scavenging hydrogen peroxide method, in comparison with ascorbic acid activity, and by reducing phosphomolybdenum complex test, done according to Prieto’s method with modifications, using quercetin as control. This work aims to contribute to the knowledge of Brazilian flora species considering that, as far we know, it is the first time the presence of α- and β-amyrin acylated derivatives, obtusalin, erythrodiol and β-sitosterol are reported to the Hancornia genus.
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Análises fitoquímica e farmacognóstica da raiz de Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) Pilger, CochlospermaceaeSolon, Soraya 09 1900 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-05-27T20:48:16Z
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Previous issue date: 2009-09 / Esta pesquisa se comprometeu a pesquisar os aspectos fitoquimicos e farmacognosticos da raiz de Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) visando adquirir informacoes auxiliares para sua padronizacao como materia-prima vegetal para producao de fitoterapicos. Para analise fitoquimica foi realizado o fracionamento do extrato hidroalcoolico associado com a atividade antimicrobiana e, para o estudo farmacognostico foram realizados ensaios para caracterizacao morfoanatomica e fisico-quimica seguindo metodo farmacopeico. O extrato hidroalcoolico e suas fracoes, particularmente a fracao acetato de etila, apresentaram efeito antimicrobiano frente a Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa e ausencia de atividade sobre Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Klebsiella pneumoniae. O fracionamento quimico forneceu cinco derivados fenolicos [acido elagico, acido galico, diidrokaempferol-3-O-β-glicopiranosideo e diidrokaempferol-3-O-β-(6´´-galoil)-glicopiranosideo] e dois triacilbenzenos conhecidos como cochlosperminas A e B. Com excecao do diidrokaempferol e seu glicosideo, e a primeira vez que as substancias isoladas sao reportadas nesta especie e o registro do diidrokaempferol-3-O-β-(6´´-galoil)-glicopiranosideo e inedito na literatura. A presenca dos acidos fenolicos ratifica a acao antimicrobiana observada no extrato hidroalcoolico e fracoes mais polares de C. regium, alem de dar sustentacao ao uso tradicional da raiz para o tratamento de infeccoes. O estudo farmacognostico caracterizou a raiz de C. regium em crescimento secundario com regiao cortical menos desenvolvida, presenca de graos de amido, drusas, polifenois e bolsas oleosas. O po da droga forneceu media granulometrica de 0,285 mm, densidade aparente de 0,40 g/mL, densidade por compactacao de 0,62 g/mL, teores de umidade, cinzas totais e cinzas insoluveis em acido de 8,2, 3,1 e 0,08%, respectivamente. O fingerprint foi determinado por CCD e CLAE-DAD empregando o acido elagico, o acido galico e o diidrokaempferol-3-O-β-glicopiranosideo como marcadores. A quantificacao destas duas ultimas substancias indicou teor medio de 1,8 e 27,9 mg/g, respectivamente, sem haver variacao sazonal entre as amostras coletadas bimestralmente durante o ano de 2008. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The purpose of this study was to investigate the phytochemical and pharmacognostic features of the roots of Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) Pilger in order to acquire ancillary information to support its standardization as a raw material for the production of phytotherapic preparations. Phytochemical analysis was based on the fractionation of its hydroalcoholic extract exhibiting antimicrobial activity. The pharmacognostic investigation involved morphoanatomical and physicochemical characterization using pharmacopea methods. The hydroalcoholic extract and its fractions, particularly the ethyl acetate fraction, had antimicrobial effect on Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, but not on Escherichia coli, Enterococcus faecalis, or Klebsiella pneumoniae. Phytochemical investigation of the hydroalcoholic extract supplied five phenolic derivatives [ellagic acid, gallic acid, dihydrokaempferol, dihydrokaempferol-3-O-β-glucopyranoside and dihydrokaempferol-3-O-β-(6´´-galloyl)-glucopyranoside dihydrokaempferol] and two triacyl benzenes known as cochlospermines A and B. Excluding dihydrokaempferol and its glycoside, the compounds described are being isolated from this species for the first time. Dihydrokaempferol-3-O-β-(6´´-galloyl)-β-glucopyranoside was unpublished. The presence of phenolic acids corroborates the antimicrobial activity observed in the hydroalcoholic extract and the polar fractions extracted from roots. It also corroborates traditional usage of the roots for the treatment of infections. The pharmacognostic study revealed secondary growth roots to have a less developed cortical region, with the presence of starch grains, druses, polyphenols, and oil pockets. The powdered drug had average particle size of 0.285 mm, bulk density of 0.40 g/mL, compaction density of 0.62 g/mL, and humidity, total ash content, and acid-insoluble ash contents of 8.2%, 3.1%, and 0.08%, respectively. Fingerprint was determined by TLC and HPLC-DAD (gradient mode) using gallic acid, ellagic acid, and diidrokaempferol-3-O-β-glucopyranoside as markers. Quantification of the last two compounds revealed average contents of 27.9 and 1.8 mg/g, respectively. No significant seasonal variability was observed for the species during 2008.
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Diagnose, disseminação e efeitos do complexo viral do alho (Allium sativum L.) em regiões produtoras do BrasilAndré, Michelle de Souza Fayad 22 June 2011 (has links)
Tese (doutorado)-Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2010 / Submitted by claudia teixeira (claudiadtx@gmail.com) on 2011-06-22T00:41:02Z
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2010_MichelledeSouzaFayadAndré.pdf: 2189113 bytes, checksum: 4432047fddc05f57223bc21a6ba9e232 (MD5) / A produção do alho em todo o mundo tem sido afetada por diversos patógenos, dentre eles destaca-se o complexo viral que infecta a cultura causando significativa redução na produção de alho no Brasil. Várias espécies foram identificadas no país, no entanto, os danos causados pelo complexo viral nas células e na fisiologia das plantas infectadas ainda é pouco estudado. São também escassas as informações sobre a ocorrência e prevalência desses patógenos nos diferentes sistemas produtivos de alho no país, estudo que demanda o desenvolvimento de um sistema de detecção viral específico e eficiente. Nesse contexto, o presente trabalho visou desenvolver e adaptar métodos de detecção específicos para as espécies virais do complexo do alho e determinar a ocorrência e prevalência desses patógenos nas regiões produtoras de alho no país. Também foram estudadas as principais alterações fisiológicas morfológicas, bioquímicas e citológicas causadas pelo complexo viral nas plantas infectadas, possibilitando a associação dessas informações com as perdas de produção causadas pela infecção viral. O Capítulo I apresenta uma revisão atualizada dos temas abordados no trabalho com o referencial teórico e as informações científicas disponíveis até o presente. O Capítulo II mostra o desenvolvimento de seis sondas não-radioativas espécie-específicas e uma gênero-específico confeccionadas para a detecção das espécies do complexo viral utilizando hibridização em “Dot-Blot” em membrana de nitrocelulose. Reações de PCR, utilizando primers específicos para as sequencias da CP de seis vírus detectados no país (Potyvirus: Onion yellow dwarf virus- OYDV, Leek yellow stripe virus- LYSV; Allexivirus: Garlic virus C- GarV-C, Garlic virus D- GarV-D e Garlic mite-borne filamentous virus- GarMbFv e Carlavirus: Garlic common latent virus- GarCLV), foram efetuadas para a síntese das sondas específicas marcadas com digoxigenina. Os resultados mostraram que as sondas foram específicas para a detecção do gene da capa protéica de cada espécie viral. Todas as sondas espécie-específicas foram sensíveis para detectar o cDNA do gene da capa protéica de suas respectivas espécies a uma concentração de 0,03 ng/ μL. Entretanto, as mesmas não permitiram a detecção de amostras provenientes de RNA total. Foi demonstrado também, que a técnica de hibridização aumentou a capacidade de visualização dos produtos da PCR auxiliando na maior sensibilidade de detecção dos vírus. Paralelamente ao desenvolvimento das sondas, a técnica de RT-PCR foi desenvolvida para a detecção de amostras provenientes de RNA total, sendo estes resultados, comparados com a detecção sorológica via ELISA. Os resultados obtidos indicaram a maior sensibilidade da RT-PCR na detecção de diversas espécies virais em plantas matrizes provenientes de limpeza clonal, que supostamente deveriam estar livres de vírus. No Capítulo III foi estudada a prevalência e a ocorrência das seis espécies virais em regiões produtoras de alho no Brasil sob diferentes sistemas produtivos. Para isso, amostras de alho foram coletadas nas regiões produtoras para análise via RT-PCR com primers específicos. Os resultados revelaram a ocorrência de Potyvirus (OYDV e LYSV) em todas as regiões. O Carlavirus (GarCLV) ficou restrito as regiões de produção de Cerrado (MG, BA e GO). Em todas as regiões amostradas foi observada, no mínimo, uma espécie de Allexivirus (GarMbFV, GarV-C e GarV-D). A prevalência desses vírus nas regiões produtoras foi relacionada principalmente ao tipo de sistema produtivo e as variedades de alho utilizadas pelos produtores rurais. Foram realizadas avaliações em planta de alho sadias (PS), livres de vírus, e infectadas (PI), com um complexo viral com a finalidade de estudar os efeitos fisiológicos, morfológicos, bioquímicos e citológicos causados pelos vírus. Bulbilhos foram semeados em vasos e 30, 60, 90 dias após plantio (DAP) foram realizadas as avaliações de várias variáveis fisiológicas e bioquímicas durante 3 anos e comparadas estatisticamente. As plantas sadias apresentaram desenvolvimento superior em relação às plantas infectadas. A análise fotossintética revelou que as plantas sadias assimilaram 20% a mais de CO2, do que as plantas infectadas, somente aos 30 DAP. Houve uma redução nos teores de clorofilas a e b, nas três épocas de avaliação, durante os três anos, mas não no teor de carotenóides, para as plantas infectadas. Não se observou diferença significativa na atividade da Rubisco, na produção de açúcares solúveis totais e proteínas totais. A avaliação de amido revelou que as plantas de alho não acumulam amido ou o fazem em baixas concentrações. Este resultado foi confirmado pelas análises citológicas em células de plantas sadias. Além disso, foi observada a presença de aglomerações de compostos lipídicos fora dos cloroplastos normais das células sadias. Em contrapartida, os cloroplastos das células infectadas apresentaram deformação estrutural, acúmulo de substâncias lipídicas, no interior dos mesmos e aumento de volume. Os estudos realizados permitiram desenvolver duas técnicas sensíveis e específicas para auxiliar na diagnose das espécies do complexo viral, determinar a distribuição das espécies do complexo viral prevalente nas regiões produtoras do Brasil em diferentes sistemas produtivos e auxiliar na compreensão das respostas das plantas de alho na ativação de processos metabólicos e possíveis mecanismos envolvidos na defesa contra infecções virais. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Garlic production worldwide is affected by several plant pathogens. Among them, viruses represent one of the main pathogens causing significant crop losses. Several virus species were identified infecting garlic in Brazil, however, the damages caused by the viral complex on the physiology of infected plant and on the host responses to virus infection is poorly understood. The occurrence and prevalence of these virus species in the different garlic-growing regions in Brazil is unknown. For this purpose an efficient and specific-detection method is necessary. Based on the lacking of information, this work aimed to develop a specific technique to detect the virus species infecting garlic, to determine the occurrence and prevalence of these species in the country. In addition, the main physiological, biochemical and cytological alterations caused by virus infection in diseased plants were investigated. The Chapter I present an up-to-date review and the state of the art on this topic. The Chapter II shows the development of six non-radioactive virus-specific probes and one potyvirus-specific probe to detect the virus complex by Dot-blot hybridization. PCR reactions using coat protein specific-primers to the viruses detect in Brazil (Potyvirus: Onion yellow dwarf virus- OYDV, Leek yellow stripe virus- LYSV; Allexivirus: Garlic virus C- GarV-C, Garlic virus D- GarV-D and Garlic mite-borne filamentous virus- GarMbFV and Carlavirus: Garlic common latent virus- GarCLV) were performed to obtain virus-specific Dig-labeled probes. The results showed that the probes were able to specifically detect the viruses (cDNA samples) at a concentration of 0,03 ng/μL. However, this efficiency was limited to detect viruses out of total RNA extracts. The hybridization technique was also able to increase the detection capacity of PCR products by gel-hybridization. Simultaneously, the PCR technique was develop to detect samples of total RNA extracts and these results were compared to serological detection by ELISA. PCR was able to detect several viruses even in tissue culture samples, presumable representing virus-free plants. In Chapter III, the prevalence and occurrence of the six virus species in different garlic-growing areas in Brazil were determined. Garlic bulbs were collected in different producing areas and analyzed by RT-PCR with specific primers. The results revealed the occurrence of Potyvirus (OYDV e LYSV) in all regions. The carlavirus (GarCLV) was restricted to the Cerrado area (MG, BA and GO). In all regions sampled at least one Allexivirus species (GarMbFV, GarV-C and GarV-D) was detected. The virus prevalence in the different regions of Brazil was related with the growing system and garlic varieties employed by the growers. Healthy (HP) and infected (IP) garlic plant were studied in order to elucidate the main physiological, biochemical and cytological alterations caused by virus infection. Plants were analyzed at 30, 60 and 90 days after plantio (DAP) and several physiological and biochemical characteristics were determined and compared. Healthy plants showed higher development than infected ones. The photosynthesis analyzes showed that healthy plants assimilated 20% more CO2, than infected plants only at 30 DAP.
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