O tratamento para síndrome dos ovários policísticos (SOP) inclui como primeira linha de cuidados a mudança de estilo de vida com dieta balanceada e exercícios físicos. Dentre as intervenções nutricionais o jejum intermitente (JI) é uma estratégia alternativa. O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do JI em aspectos metabólicos e reprodutivos em modelo animal de SOP. A SOP experimental foi induzida por injeção subcutânea de propionato de testosterona, em período neonatal. Os animais do grupo Controle receberam injeção subcutânea de óleo de girassol. Após 90 dias de idade, instituiu-se a intervenção: grupo JI recebeu ração padrão em dias alternados enquanto o grupo controle manteve a dieta no esquema habitual. Os grupos experimentais foram: Controle ad libitum (n=10), Controle JI (n=10), SOP ad libitum (n=11) e SOP JI (n=15). Foram realizados: teste de tolerância à insulina (ITT) e à glicose (GTT), esfregaço vaginal, passagem por gaiolas metabólicas e PET/CT para avaliar atividade metabólica de tecido gorduroso. Após 4 semanas de JI, os animais foram eutanasiados e coletados tecido adiposo em região inguinal, perigonadal e mesentérica, adrenal, coração, ovários e útero. Como resultados, identificamos que a ingestão alimentar no grupo SOP foi maior em relação ao Controle, antes e depois da intervenção, assim como a sua massa corporal. Nas gaiolas metabólicas pré-jejum, a ingestão alimentar e hídrica, excreção fecal e urinária foram maiores nos animais SOP. No ITT, a glicemia basal dos animais SOP ADL apresentou-se maior que os Controle ADL. No GTT, a glicemia de jejum das ratas Controle JI era maior que as ratas Controle ADL. O peso da inguinal do grupo SOP JI era menor que SOP ADL. A gordura mesentérica se apresentou menor nos animais Controle JI em relação ao Controle ADL. Controle e SOP JI possuíam menores quantidades de perigonadal quando comparadas as ADL. O peso do coração dos animais SOP ADL era maior que os SOP JI. Grupos SOP apresentaram maior adrenal que os Controle. SOP JI possuía menor peso de ovário em relação aos grupos Controle ADL e JI. Em conclusão, o jejum intermitente reduziu os depósitos de gordura perigonadal e mesentérica dos animais Controle, e inguinal e perigonadal dos animais SOP. Além disso, o JI aumentou a glicemia basal das ratas Controle / Treatment for polycystic ovary syndrome (PCOS) includes as first line of care lifestyle change with balanced diet and exercise. Among the nutritional interventions, intermittent fasting (IF) is an alternative strategy. The objective of this study was to evaluate the impact of IF on metabolic and reproductive aspects in animal models of PCOS. Experimental PCOS was induced by subcutaneous injection of testosterone propionate in the neonatal period. Control animals received subcutaneous injection of sunflower oil. After 90 days of age, the intervention was instituted: IF group received standard ration on alternate days while the control group maintained the diet in the usual scheme. The experimental groups were: Control ad libitum (n = 10), Control IF (n = 10), PCOS ad libitum (n = 11) and PCOS IF (n = 15).The following tests were performed: insulin tolerance test (ITT) and glucose (GTT), vaginal smear, passage through metabolic cages and PET / CT to evaluate the metabolic activity of fatty tissue. After 4 weeks of IF, the animals were euthanized and collected adipose tissue in inguinal region, perigonadal and mesenteric, adrenal, heart, ovaries and uterus. As results, we identified that the food intake in the PCOS group was higher in relation to the Control, before and after the intervention, as well as their body mass. In the pre-fast metabolic cages, food and water intake, fecal and urinary excretion were higher in PCOS animals. In ITT, the basal glycemia of the PCOS ADL animals was higher than the Control ADL. In GTT, the fasting glycemia of Control IF rats was greater than the Control ADL rats. The inguinal weight of the PCOS IF group was less than PCOS ADL. Mesenteric fat was lower in Control IF animals than in Control ADL. Control and PCOS IF had smaller amounts of perigonadal when compared to ADL. The heart weight of the PCOS ADL animals was higher than the PCOS IFs. PCOS groups presented greater adrenal than Control. PCOS IF had lower ovary weight in relation to the ADL and IF Control groups. In conclusion, intermittent fasting reduced deposits of perigonadal and mesenteric fat in Control animals, and inguinal and perigonadal in PCOS animals. In addition, IF increased basal glycemia of control rats

Introdução: A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é a desordem endócrina mais comum em mulheres durante o período reprodutivo. Contudo, representa ainda um desafio, principalmente, quando há infertilidade. Portanto, há necessidade de mais estudos nesta área, em especial, no endométrio. Nosso estudo tem como objetivo realizar a análise da expressão gênica e proteica de marcadores de receptividade endometrial em pacientes com Síndrome dos Ovários Policísticos, comparando-a com a de mulheres com ciclos menstruais regulares. Casuística e métodos: Foram avaliadas 36 mulheres na menacme, divididas em dois grupos: Grupo SOP (n=23) e Grupo Controle - mulheres com ciclos menstruais regulares (n=13). As pacientes do grupo SOP receberam progesterona micronizada na dose de 400mg ao dia, por via vaginal, durante 10 dias. Após o 14º dia do fluxo menstrual, receberam novamente a mesma dose de progesterona natural, por 10 dias. A biópsia de endométrio foi feita durante os últimos dias do emprego da progesterona (6º ao 10º dia de tratamento). No Grupo Controle, a biópsia foi feita na fase secretora (janela de implantação - 20º ao 24º dia). Além disso, foi feita biópsia endometrial em um grupo de mulheres com SOP durante a fase proliferativa. O material coletado foi processado e analisado por técnicas de biologia molecular (avaliação gênica por microarray) e análise imunoistoquimica relacionada à angiogênese. Resultados: As mulheres com SOP apresentaram alterações do metabolismo de carboidratos, hiperinsulinemia e hiperandrogenismo. Após o uso de progesterona natural, o endométrio revelou, na janela de implantação, modificações secretoras, assemelhando-se ao das mulheres com ciclos menstruais regulares. Os dados imunoistoquímicos mostraram haver redução da expressão do VEGF nas mulheres com SOP tratadas com progesterona natural em relação às com ciclo menstrual regular. Após a análise gênica, registrou-se predomínio de genes que podem interferir negativamente com a angiogênese no endométrio das pacientes com SOP tratadas com progesterona natural. Conclusão: O endométrio das mulheres com SOP, mesmo após tratamento com progesterona natural, mostra-se inadequado para a implantação endometrial devido à redução da angiogênese local / Introduction: The Polycystic ovary syndrome (PCOS) is the most common endocrine disorder in women during the reproductive period. However, it still presents a challenge, especially when there is infertility. Therefore, there is a need for further studies in this area, mainly in the endometrium. Our study aims to perform the analysis of gene and protein expression of endometrial receptors in patients with PCOS, comparing it with that of women with regular menstrual cycles. Patients and methods: Thirty-six women in the study were divided into two groups: PCOS group (n = 23) and Control Group - women with regular menstrual cycles (n = 13). Patients in the PCOS group received micronized progesterone at a dose of 400mg per day, vaginally, for 10 days. After the 14th day of menstrual flow, they again received the same dose of natural progesterone for 10 days. Endometrial biopsy was performed during the last days of the use of progesterone (6th to 10th day of treatment). In the Control Group, the biopsy was done in the secretory phase (implantation window - 20th to 24th day). In addition, endometrial biopsy was performed in a group of women with PCOS during the proliferative phase. The collected material was processed and analyzed by molecular biology techniques (microarray gene evaluation) and immunohistochemical analysis related to angiogenesis. Results: PCOS women had some changes in carbohydrate metabolism, hyperinsulinemia and hyperandrogenism. After the use of natural progesterone, the endometrium revealed, during the implantation window, secretory modifications, resembling that of women with regular menstrual cycles. Immunohistochemical data showed reduced expression of VEGF in PCOS women treated with natural progesterone compared to those with a regular menstrual cycle. After gene analysis, there was a predominance of genes that could negatively interfere with the endometrial angiogenesis in patients with PCOS treated with natural progesterone. Conclusion: The endometrium of women with PCOS, even after treatment with natural progesterone, may be inadequate for endometrial implantation due to the reduction of local angiogenesis

O tratamento para síndrome dos ovários policísticos (SOP) inclui como primeira linha de cuidados a mudança de estilo de vida com dieta balanceada e exercícios físicos. Dentre as intervenções nutricionais o jejum intermitente (JI) é uma estratégia alternativa. O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do JI em aspectos metabólicos e reprodutivos em modelo animal de SOP. A SOP experimental foi induzida por injeção subcutânea de propionato de testosterona, em período neonatal. Os animais do grupo Controle receberam injeção subcutânea de óleo de girassol. Após 90 dias de idade, instituiu-se a intervenção: grupo JI recebeu ração padrão em dias alternados enquanto o grupo controle manteve a dieta no esquema habitual. Os grupos experimentais foram: Controle ad libitum (n=10), Controle JI (n=10), SOP ad libitum (n=11) e SOP JI (n=15). Foram realizados: teste de tolerância à insulina (ITT) e à glicose (GTT), esfregaço vaginal, passagem por gaiolas metabólicas e PET/CT para avaliar atividade metabólica de tecido gorduroso. Após 4 semanas de JI, os animais foram eutanasiados e coletados tecido adiposo em região inguinal, perigonadal e mesentérica, adrenal, coração, ovários e útero. Como resultados, identificamos que a ingestão alimentar no grupo SOP foi maior em relação ao Controle, antes e depois da intervenção, assim como a sua massa corporal. Nas gaiolas metabólicas pré-jejum, a ingestão alimentar e hídrica, excreção fecal e urinária foram maiores nos animais SOP. No ITT, a glicemia basal dos animais SOP ADL apresentou-se maior que os Controle ADL. No GTT, a glicemia de jejum das ratas Controle JI era maior que as ratas Controle ADL. O peso da inguinal do grupo SOP JI era menor que SOP ADL. A gordura mesentérica se apresentou menor nos animais Controle JI em relação ao Controle ADL. Controle e SOP JI possuíam menores quantidades de perigonadal quando comparadas as ADL. O peso do coração dos animais SOP ADL era maior que os SOP JI. Grupos SOP apresentaram maior adrenal que os Controle. SOP JI possuía menor peso de ovário em relação aos grupos Controle ADL e JI. Em conclusão, o jejum intermitente reduziu os depósitos de gordura perigonadal e mesentérica dos animais Controle, e inguinal e perigonadal dos animais SOP. Além disso, o JI aumentou a glicemia basal das ratas Controle / Treatment for polycystic ovary syndrome (PCOS) includes as first line of care lifestyle change with balanced diet and exercise. Among the nutritional interventions, intermittent fasting (IF) is an alternative strategy. The objective of this study was to evaluate the impact of IF on metabolic and reproductive aspects in animal models of PCOS. Experimental PCOS was induced by subcutaneous injection of testosterone propionate in the neonatal period. Control animals received subcutaneous injection of sunflower oil. After 90 days of age, the intervention was instituted: IF group received standard ration on alternate days while the control group maintained the diet in the usual scheme. The experimental groups were: Control ad libitum (n = 10), Control IF (n = 10), PCOS ad libitum (n = 11) and PCOS IF (n = 15).The following tests were performed: insulin tolerance test (ITT) and glucose (GTT), vaginal smear, passage through metabolic cages and PET / CT to evaluate the metabolic activity of fatty tissue. After 4 weeks of IF, the animals were euthanized and collected adipose tissue in inguinal region, perigonadal and mesenteric, adrenal, heart, ovaries and uterus. As results, we identified that the food intake in the PCOS group was higher in relation to the Control, before and after the intervention, as well as their body mass. In the pre-fast metabolic cages, food and water intake, fecal and urinary excretion were higher in PCOS animals. In ITT, the basal glycemia of the PCOS ADL animals was higher than the Control ADL. In GTT, the fasting glycemia of Control IF rats was greater than the Control ADL rats. The inguinal weight of the PCOS IF group was less than PCOS ADL. Mesenteric fat was lower in Control IF animals than in Control ADL. Control and PCOS IF had smaller amounts of perigonadal when compared to ADL. The heart weight of the PCOS ADL animals was higher than the PCOS IFs. PCOS groups presented greater adrenal than Control. PCOS IF had lower ovary weight in relation to the ADL and IF Control groups. In conclusion, intermittent fasting reduced deposits of perigonadal and mesenteric fat in Control animals, and inguinal and perigonadal in PCOS animals. In addition, IF increased basal glycemia of control rats

Objective: To compare glycemic index and load (GI and GL) in the usual diet of PCOS and control women and to investigate whether dietary GI and GL are associated with body composition and anthropometric and metabolic variables across PCOS phenotypes. Design: Cross-sectional study. Setting: University hospital outpatient clinic. Patients: 61 women with PCOS and 44 non-hirsute women with ovulatory cycles. Interventions: Metabolic work-up, biochemical and hormonal assays, assessment of body composition and rest metabolic rate, physical activity (pedometer), and food consumption (food frequency questionnaire). Main outcome measure(s): GI and GL. Results: Mean age was 23.7±6.3 years. The prevalence of obesity was 44.3% in PCOS women and 31.8% in controls. Median GI for the group was 58. PCOS patients with GI>58 had higher BMI, worse metabolic profile, and lower intake of fibers. GI was correlated with BMI in controls and with lipid accumulation product (LAP) in the PCOS group, and was higher in classic PCOS vs. other groups. Conclusions: Dietary GI is increased in PCOS patients, especially in the classic PCOS phenotype. Increased dietary GI is associated with a less favorable anthropometric and metabolic profile in PCOS.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Objetivo: A resistÃncia insulÃnica com hiperinsulinemia compensatÃria exerce importante papel fisiopatolÃgico na SÃndrome dos OvÃrios MicropolicÃsticos (SOMP). Neste sentido o uso de substÃncias sensibilizantes à insulina, dentre as quais a melhor estudada à a metformina, tem sido proposto como terapia inicial na patologia. Nosso estudo se propÃe a avaliar a efetividade da metformina na dose de 1.000 mg ao dia por 90 dias, nos parÃmetros antropomÃtricos, metabÃlicos, da morfologia ultrassonogrÃfica ovariana, e dos efeitos colaterais, em pacientes portadoras de SOMP. Pacientes e MÃtodo: Ensaio clÃnico prospectivo, randomizado por tabela de nÃmeros aleatÃrios, duplo-cego e controlado por placebo, com 21 pacientes com SOMP, sendo 13 alocadas no grupo experimental (metformina), e oito alocadas no grupo controle (placebo). Foram analisados e comparados as mÃdias e desvio-padrÃes dos parÃmetros dentro de cada grupo, e entre os grupos, no recrutamento do estudo e apÃs 90 dias de tratamento. Resultados: As mÃdias das medidas basais das variÃveis estudadas foram semelhantes entre os grupos garantindo sua comparabilidade. As pacientes tratadas com metformina obtiveram reduÃÃo significativa de sua circunferÃncia da cintura e glicemia de jejum. Todos os outros parÃmetros analisados nÃo mostraram diferenÃa significativa entre os grupos. Efeitos colaterais foram relatados por 92,31% e 71,43% das pacientes dos grupos experimental e controle, respectivamente. Apenas trÃs (23,07%) pacientes do grupo experimental e nenhuma do grupo controle reportaram efeitos colaterais graves que requereram ajustes da medicaÃÃo. NÃo houve abandono da terapia ou perda de seguimento.ConclusÃo: o uso da metformina na dose de 1.000 mg por 90 dias reduziu significativamente a circunferÃncia da cintura e a glicemia de jejum em pacientes com SOMP, com boa tolerabilidade geral e mÃnima incidÃncia de efeitos colaterais relevantes. Talvez a melhora de parÃmetros mais diretamente relacionados à resistÃncia insulÃnica como a relaÃÃo cintura/quadril requeira doses mais altas e/ou maior tempo de administraÃÃo. / Objectives: Insulin resistance that leads to hyperinsulinaemia plays major pathogenic role in Polycystic Ovary Syndrome. This way, the use of insulin-sensitizing agents, like metformin that has been the most extensively studied drug, is suggested as the initial therapy for the disease. Our aim was to evaluate the effectiveness of metformin 1,000 mg a day for 90 days in anthropometric and metabolic measurements, ovarian ultrasonographic morphology, and side effects, on patients with Polycystic Ovary Syndrome (PCOS). Patients and Method: A randomized, by means of random numbers table, double-bind, placebo-controlled trial, including 21 PCOS patients. Thirteen patients were allocated at the treatment (metformin) group, and eight at the placebo group. The mean and standard-deviation of the measures were taken and analyzed into each group and between the groups on recruitment of the trial and after 90 days. Results: The mean values of the studied baseline characteristics were similar between the groups. The metformin group had significant reductions on waist circumference and fasting glucose. There were no significant differences in any other of the measurements. Side effects were referred by 92.31% and 71.43% of the treatment and placebo groups, respectively. Only three (23.07%) patients of treatment group and none of placebo group referred major side effects that request drug dose adjust. There were no drop-outs or lost of follow up. Conclusions: metformin at doses of 1,000 mg a day for 90 days was effective at waist circumference and fasting glucose reduction on PCOS patients, with good acceptance and mild side effects. Improvement of characteristics more related to insulin resistance, like the waist/hip ratio, probably need higher doses or longer course of use.

Made available in DSpace on 2016-08-19T18:16:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO GLAUCIA.pdf: 908683 bytes, checksum: 091f16039227a3ac61c8e3a16db34d0c (MD5) Previous issue date: 2012-06-18 / Polycystic Ovary Syndrome (PCOS) is diagnosed by consensus of the National Institute of Health (NIH- USA, 1990), Rotterdam (Netherlands, 2003) and Androgen Excess Syndrome - PCOS (AES-PCOS, 2006). It is important to recognize the clinical characteristics of PCOS patients in Maranhão to submit a profile Objectives: To evaluate the prevalence of the PCOS according to the current guidelines for PCOS and Maranhão women, s profile. Methodology: A cross sectional sample of 102 women diagnosed with PCOS, attending at the gynecology clinic of the Materno Infantil Hospital in São Luís -MA. The clinical classification was analyzed by applying the inclusion and exclusion criteria of the NIH, and AES- PCOS. Data were tabulated and analyzed using Microsoft Office Excel 2007 by graphs and frequency tables. Results: Most of the patients were between 20 and 25 years old with 41,2%(n= 42); brown 50%(n= 51), single 52,9%(n=54); 11years of school,44,1%(n= 45) and menarche between 12 and 14 years old with 34,3% (n= 50). They were within normal anthropometrically exception to the waist circumference where the abnormality was more common in 65, 8 %(n= 52). Clinical hyperandrogenism was observed in 51 %( n= 52) of patients, predominance of hirsutism with 32,3% (n= 33) and the laboratorial with 13,7%(n= 14). Ovulatory dysfunctional was the predominant complaint in 90, 2% ( n= 92), highlights for oligomenorrhea with 61,8%(n= 63). As for the phenotypes, there was a predominance of ovary dysfunction and policistose ovarian at 48% (n= 49) (ROTTERDAM), hyperandrogenism and dysfunction was more frequent phenotypes with 81, 1% (n= 43) (NIH) and 42, 1% (n= 43) (AES-PCOS). Conclusion: The most common feature of PCOS was hyperandrogenism and the most prevalent clinical expression was found by applying the Rotterdam criteria. / A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é diagnosticada pelos consensos do Instituo Nacional de Saúde (National Institute of Health- NIH/ EUA, 1990), de Rotterdam (Holanda, 2003) e da Sociedade de Excesso de Androgênios e Síndrome dos Ovários Policísticos (AES- PCOS, 2006 É importante reconhecer as características clinicas da SOP nas pacientes maranhenses para a apresentação de um perfil. Objetivos: Avaliar a prevalência da SOP de acordo com os consensos vigentes para SOP e Conhecer o perfil da SOP nas mulheres maranhenses. Metodologia: Estudo transversal, com amostra de 102 mulheres com diagnóstico clínico de SOP, atendidas no ambulatório de ginecologia especializada do Hospital Universitário Materno Infantil em São Luís MA. A classificação clínica foi estabelecida pelos consensos de NIH, e AES- PCOS. Os dados foram tabulados e analisados no programa Microsoft Office Excel 2007 por meio de gráficos e tabelas de frequência. Resultados: A maioria das pacientes tinha entre 20 e 25 anos (41,2% - n=42),parda 50%(n=51), solteiras 52,9%(n=54), com ensino médio 44,1%(n=45) e menarca entre 12 e 14 anos com 34,3% (n=50), aumento de colesterol total em 22,5% (n=23), HDL em 23,5 %( n=24), Triglicérides em 9,8%( n=10), glicemia aumentada em 5,8%( n=6),com hipertensão arterial sistólica, 5,8%( n=6) e diastólica, 15,7%( n=16); índice de Massa Corpórea estava maior que 30 kg/m² em 25,5%(n=26); com 51%(52) destas mulheres com a cintura abdominal acima da normalidade(88 cm). O hiperandrogenismo foi evidente em 68,6%(70) com hirsutismo em 54,3% (32) e a disfunção ovulatória ocorreu em 90,2% (92) e ovários policísticos em 78,4% (80) das pacientes.De acordo com os consensos,os aspectos disfunção ovulatória, policistose e hiperandrogenismo com 39,2% (40) pelo consenso de Rotterdam. Nos critérios do AES, foram 58,8%(60) com hiperandrogenismo e disfunção ovulatória e o hiperandrogenismo e a disfunção ovulatória pelo NIH com 58,8% (60). Conclusão: Hiperandrogenismo, disfunção ovulatória e ovários policísticos foram mais frequentes e a queixa mais comum foi a oligomenorréia. E o hiperandrogenismo, foi a expressão clínica mais prevalente independente do critério adotado.

O endométrio é a mucosa que reveste o útero. A receptividade uterina é definida como um estado em que o endométrio se encontra receptivo à implantação do blastocisto. E, a preparação do endométrio para a implantação não é somente uma questão de estimulação hormonal adequada, depende da interação entre o blastocisto e o endométrio. Esta interação envolve uma complexa sequência de eventos de sinalização e uma variedade de moléculas. As concentrações de interleucina-8 (IL-8) e interleucina-1β (IL-1β) estão correlacionadas com o processo de implantação. Em humanos, a taxa de insucesso desse processo é alta e ocasionada por diversos fatores. A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é um distúrbio endócrino-ginecológico que afeta de 6 a 8 % das mulheres em idade reprodutiva, e se caracteriza, principalmente, por anovulação crônica e hiperandrogenismo, estando diretamente relacionada à infertilidade feminina. Apesar da incerteza sobre a causa primária da SOP, há relatos sobre a importância da hiperinsulinemia na sua promoção. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um modelo de hiperinsulinemia e hiperandrogenismo em células estromais endometriais in vitro, simulando características de SOP; identificar o melhor gene normalizador para estudos de expressão gênica em amostras das células em cultivo; avaliar o efeito da metformina sobre a proliferação celular e expressão gênica da IL-8 e IL-1β no modelo proposto. O tecido endometrial foi obtido de pacientes submetidas a histerectomia. A cultura primária das células estromais foi padronizada e as células foram divididas em sete grupos de tratamento: estradiol (G1); estradiol e progesterona (G2); estradiol, progesterona e insulina (G3); estradiol, progesterona e diidrotestosterona (G4); estradiol, progesterona e metformina (G5); estradiol, progesterona, insulina e diidrotestosterona (G6); estradiol, progesterona, insulina, diidrotestosterona e metformina (G7). Foi realizada análise de imunocitoquímica para vimentina para confirmação do cultivo com células estromais. Para avaliar a viabilidade e proliferação celular ao longo do tempo foi utilizado o ensaio de MTT em dois tempos diferentes de cultivo. As extrações de RNA foram realizadas e o cDNA obtido das amostras foi utilizado para a amplificação do mRNA de cinco genes candidatos a normalizadores e para avaliar a expressão dos genes da IL-8 e IL-1β através de PCR em tempo real.O estabelecimento da cultura de células estromais foi confirmado através da coloração positiva para a proteína vimentina. As células mantiveram-se viáveis durante todo o período de cultivo, apresentando aumento significativo na proliferação celular no tempo 8 em relação ao tempo 4 em todos os grupos. O grupo G7 (tratado durante 48 horas com metformina) apresentou uma menor taxa de proliferação em relação aos grupos G2, G3 e G6. Para análise de expressão gênica nestas células, o gene que mostrou os melhores parâmetros de estabilidade de expressão no modelo celular proposto foi o gene HPRT1. Observamos uma maior expressão do gene da IL-8 no grupo G5 tratado durante 48 horas em relação ao mesmo grupo tratado durante o período de 24 horas. Verificou-se maior expressão do gene da IL-1β no grupo G5 quando comparado a todos os outros grupos no período de 48 horas de tratamento com metformina. Entretanto, o grupo G7, também tratado com metformina, não apresentou diferença estatística em relação ao tempo de tratamento em nenhum dos genes estudados. Esses resultados demonstram que o modelo de hiperinsulinemia e hiperandrogenismo em cultura de células estromais endometriais é viável. Neste modelo, em que foram testados cinco genes em relação à sua estabilidade de expressão, o gene HPRT1 apresentou uma boa estabilidade, ao contrário de outros genes frequentemente utilizados como genes de referência. O tratamento com metformina apresentou um efeito antiproliferativo nas células do grupo hiperinsulinêmico e hiperandrogênico. No período de 48 horas aumentou a expressão do gene da IL-1β no grupo tratado somente com o medicamento. Sugerindo uma ação inibitória da insulina sobre a expressão dos genes da IL-8 e IL-1β no grupo hiperinsulinêmico e hiperandrogênico. Mais estudos são necessários para melhor entendimento do efeito da metformina nos fatores envolvidos durante a implantação. / The endometrium is the mucosa lining the uterus. The uterine receptivity is defined as a condition in which the endometrium is receptive to implantation of the blastocyst. The preparation of the endometrium for implantation is not only a matter of proper hormonal stimulation, it depends on the interaction between the blastocyst and the endometrium. This interaction involves a complex sequence of events and a variety of signaling molecules. The concentrations of interleukin-8 (IL-8) and interleukin-1β (IL-1β) are correlated to the implantation process. In humans, the failure rate of this process is high and caused by several factors. The polycystic ovary syndrome (PCOS) is an endocrine-gynecological disorder that affects from 6 to 8 % of women of reproductive age. It is characterized mainly by chronic anovulation and hyperandrogenism and directly related to female infertility. Despite the uncertainty about the primary cause of PCOS, there are reports about the importance of hyperinsulinemia in promoting it. The aim of this study was to establish a model of hyperinsulinemia and hyperandrogenism in endometrial stromal cells in vitro, simulating features of PCOS; to identify the best housekeeping gene for gene expression studies in the cultured cells; to evaluate the effects of metformin on cell proliferation, as well as IL-8 and IL-1β gene expression in the proposed culture model. The human endometrial tissue was obtained from patients undergoing hysterectomy. The primary culture of stromal cells was standardized and divided into seven treatment groups: estradiol (G1); estradiol and progesterone (G2); estradiol, progesterone and insulin (G3); estradiol, progesterone and dihydrotestosterone (G4); estradiol, progesterone and metformin (G5); estradiol, progesterone, insulin and dihydrotestosterone (G6); estradiol, progesterone, insulin, dihydrotestosterone and metformin (G7). Immunocytochemistry analysis for vimentin were performed. Cell viability and proliferation were evaluated by MTT assay at two days in different times of cultivation. RNA extractions were performed and the cDNA obtained from primary culture was used to amplify five candidates to housekeeping genes mRNA and to evaluate IL-8 and IL1β expression by real time PCR. The stromal culture cell establishment was confirmed by positive staining for vimentin. The cells remained viable throughout the cultivation period, with significant cell proliferation increase at day 8 compared to day 4 in all groups. The G7 group (metformin treated for 48 hours) showed lower proliferation rate than G2, G3 and G6 groups. For gene expression analysis in these cells, the gene showing the best parameters of stability of expression was HPRT1. Increased gene expression of IL-8 was observed in G5 group treated for 48 hours compared to the same group during 24 hours. Similarly, the G5 group showed higher IL-1β gene expression when compared to all other groups treated with metformin for 48 hours. However, the G7 group, also metformin treated, did not show statistically significant difference in treatment time of any studied genes. These results suggest that model of hyperinsulinemia and hyperandrogenism in endometrial stromal cells is viable and provides a good cell sampling to molecular analysis under different experimental conditions. In this model, several genes were tested for expression stability. HPRT1 presented the best values, unlike others classical housekeeping genes. The metformin treatment showed an antiproliferative effect on cells in hyperinsulinemic and hyperandrogenic group and at 48 hours increased IL-1β gene expression in the treated group with the drug alone. It suggests an inhibitory action of insulin on these genes expression in the hyperinsulinemic and hyperandrogenic group. More studies are needed to better understand the effect of metformin on the factors involved during implantation.

Introdução: A Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) afeta 5 a 10% de mulheres em idade reprodutiva. O tratamento da infertilidade de causa anovulatória em pacientes com SOP envolve a indução da ovulação, sendo o citrato de clomifeno (CC) a medicação de primeira escolha. Nos casos resistentes ao CC, a segunda linha de tratamento pode ser medicamentosa (gonadotrofinas) ou cirúrgica (cauterização ou diatermia ovariana), realizada por videolaparoscopia (VLPC). A indução com gonadotrofinas aumenta muito o risco de multigestação, o que não ocorre com a diatermia ovariana, que restaura a ovulação fisiológica (monovulação). A ecografia transvaginal é um procedimento simples, menos invasivo do que aVLPC, que permite a punção ovariana através do fórnice vaginal. Objetivos: desenvolver uma técnica minimamente invasiva de cauterização ovariana monopolar guiada por ecografia transvaginal, utilizando animais (ovelhas e vacas) como modelo experimental. Métodos: em um primeiro experimento foram utilizadas ovelhas (15 Corriedale e 2 Suffolk) e no segundo experimento foram utilizadas 11 vacas Angus, todos animais em idade reprodutiva e com integridade ovariana anatômica e funcional. Para a cauterização monopolar foi utilizado o eletrocautério Valleylab Force FX e uma agulha especialmente desenvolvida para esse fim. Os animais tiveram os ovários cauterizados em 4 pontos cada e foram abatidos 2 dias após para coleta dos ovários e inspeção do trajeto da agulha. Resultados: Nas ovelhas, dos 34 ovários cauterizados, apenas 3 apresentaram a lesão característica. Dos 22 ovários cauterizados nas vacas, 20 apresentaram a lesão característica, tanto macro quando microscopicamente. Nas duas espécies animais, não houve lesões no trajeto da agulha. Conclusão: A cauterização ovariana se mostrou segura nos dois modelos experimentais, nenhum animal apresentou lesões térmicas ou pela punção no trajeto da agulha. Nas vacas, a identificação ecográfica e a cauterização, além de segura, foram efetivas. A eficiência e segurança dessa técnica devem ser estudadas em mulheres com anovulação por SOP. / Introduction: The Polycystic Ovary Syndrome (PCOS) affects 5-10% of women at reproductive age. Treatment of anovulatory infertility in patients with PCOS involves the induction of ovulation, with clomiphene citrate (CC) the drug of first choice. In cases resistant to CC, the second line of treatment can be medicated (gonadotropins) or surgery (ovarian diathermy or cautery), performed by laparoscopic video (LPCV). The induction with gonadotrophins increases the risk of multi pregnancy, which does not occur with ovarian diathermy, which restores physiological ovulation (monovulation). The transvaginal ultrasound is a simple procedure, less invasive than the LPCV allowing ovarian puncture through the vaginal fornix. Objectives: To develop a minimally invasive technique of monopolar ovarian cauterization guided by transvaginal ultrasound, using animals (sheep and cattle) as an experimental model. Methods: In a first experiment were used sheep (15 Corriedale and 2 Suffolk). In the second experiment were used 11 cows Angus, all animals at reproductive age with anatomic and funcional ovarian integrity. For cauterized were used Valleylab Force FX electrocautery and a needle specially developed for this purpose. The animals had ovaries cauterized at 4 points each and were slaughtered 2 days after for collection of the ovaries and inspection of the needle path. Results: In sheep, from the 34 ovaries cauterized, only 3 showed the characteristic lesion. From the 22 ovaries cauterized in cows, 20 had the characteristic lesion, both macro and microscopically. In both species, there were no injuries in the path of the needle. Conclusion: The ovarian cauterization proved safe in experimental models, no animal showed thermal injury or puncture in the path of the needle. In cows, the sonographic identification and cauterization, beyond safe, were effective. The efficiency and safety of this technique should be studied in women with SOP anovulatory.

No description available.

Thesis (MNutr)--Stellenbosch University, 2012. / ENGLISH ABSTRACT: The role of fructose restriction in addition to dietary modifications for weight loss and lifestyle improvement, on fertility outcome and other markers of metabolic syndrome, in obese women with polycystic ovarian syndrome (PCOS) Introduction: At the time at which the current study was undertaken no data, as yet, existed on whether restriction of fructose, while treating obese patients with PCOS for weight loss, improves the clinical symptoms and metabolic/anthropometric profile so as to promote fertility. Objectives: To evaluate the baseline intake of fructose, as well as the effect of restricting fructose intake from fruit and soft beverages to less than 20 g daily, as well as to provide guidelines for weight loss on anthropometric measurements, for improving subjective clinical symptoms, and for promoting fertility outcome in obese patients with PCOS, who seek to become fertile. Methods: The study was conducted in the Tygerberg Hospital Infertility Clinic, as an experimental cohort. Patients with a body mass index (BMI) higher than 27, seeking fertility after diagnosis with PCOS, were referred for dietary consultation, and followed up 3 monthly over 1 year. At each visit anthropometric measurements and a detailed dietary history were taken and a questionnaire for clinical symptoms was completed. Results: Baselinely, 86 patients were included in the study. Averages for weight and BMI were 99.8 ± 24.3 kg and 39.2 ± 8.7kg/m2, respectively. Average baseline daily fructose intake was 167 ± 116.8g. At baseline, significant relationships were shown between fructose intake and burning feet (ρ=0.02) and frequent waking (ρ=0.02), with a trend towards nightly eating (ρ=0.07). The dropout rate after visit 1 was 50%, with a further dropout of 41% after visit 2. After 3 visits (n=18), fructose intake significantly reduced (ρ=0.018), with the significant relationships with clinical symptoms having disappeared by visit 2. After 3 visits (n=18), both weight and BMI decreased significantly (ρ=0.017) and (ρ=0.019), respectively. Fructose was tested as a covariate to BMI, with high significance (ρ=0.006) in said population group. Conclusion: Dietary intervention to reduce fructose intake proved significant for weight loss and BMI after 3 visits. Reduced fructose intake was associated with reduced clinical symptoms. With fructose being a significant covariate to BMI, it can be concluded that fructose overconsumption could possibly contribute to both clinical symptoms and elevated BMI in said study population. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Die rol wat die beperking van fruktose speel bykomend tot dieetaanpassings en lewenstylverbetering vir gewigsverlies by oorgewig vroue met polisistiese ovariële sindroom (PCOS) in die uitkoms van fertiliteit en ander merkers van metaboliese sindroom. Inleiding: Met die aanvang van hierdie studie was daar is geen data beskikbaar oor die invloed van die beperking van fruktose in die dieet van oorgewig pasiënte met PCOS wat vir gewigsverlies behandel word nie. Dit was ook nie bekend of laasgenoemde pasiënte se kliniese simptome en metaboliese/antropometriese profiel sou verbeter met die beperking van fruktose sodat fertiliteit by hierdie pasiënte terselfdertyd ook bevorder word nie. Doelwitte: Die evaluering van die aanvanklike inname van fruktose, sowel as die beperking van fruktose afkomstig van eetbare vrugte en versoete drankies en sap tot ’n inname van minder as 20 g daagliks, tesame met riglyne vir gewigsverlies. Die uitkoms hiervan is bepaal deur antropometriese metings, die verbetering in subjektiewe kliniese simptome en die fertiliteituitkoms by oorgewig pasiënte wat hulp met fertiliteit verlang. Metodes: Die studie het as ’n eksperimentele kohort by die Infertiliteitskliniek by Tygerberg Hospitaal plaasgevind. Pasiënte wat na diagnose met PCOS fertiliteitsbehandeling verlang het en ’n BMI hoër as 27 gehad het , is vir dieetbehandeling verwys en driemaandeliks oor ’n tydperk van een jaar opgevolg. Tydens elke besoek is antropometriese metings en ’n omvattende dieetgeskiedenis geneem en ’n vraelys oor kliniese simptome ingevul. Resultate: Aanvanklik is 86 pasiënte by die studie ingesluit. Gemiddeldes vir gewig en BMI was 99.8 ± 24.3 kg en 39.2 ± 8.7 kg/m2 respektiewelik. Gemiddelde aanvanklike daaglikse inname van fruktose was 167 ± 116.8 g. Oorspronklik het betekenisvolle verhoudings tussen fruktose en die volgende bestaan: brandvoete (ρ=0.02) en veelvuldige episodes van nagtelike wakkerheid (ρ=0.02), met ’n neiging na nagtelike etery (ρ=0.07). Die uitvalsyfer na een besoek was 50% met ’n verdere uitvalsyfer van 41% na die tweede besoek. Na drie besoeke (n=18) het sowel die gewig as die BMI betekenisvolle afname getoon (ρ= 0.017) en (ρ=0.019), respektiewelik. Fruktose is as ’n belangrike kovariant vir BMI (ρ= 0.006) vir hierdie populasiegroep geïdentifiseer. Gevolgtrekking: Dieetintervensie vir die vermindering van die inname van fruktose was beduidend vir gewigsverlies en afname in BMI na drie besoeke. Verminderde fruktose-inname het gelei tot die vermindering van kliniese simptome. Met fruktose as beduidende kovariant vir BMI kan die gevolgtrekking gemaak word dat die oor-inname van fruktose by hierdie studiepopulasie waarskynlik tot sowel kliniese simptome as BMI bygedra het.