Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-27Bitstream added on 2014-06-13T18:26:13Z : No. of bitstreams: 1 alencar_jrcc_me_jabo.pdf: 452079 bytes, checksum: 64ef6d14a56bc4bdcb0ceb200761c268 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O isolamento geográfico de populações de uma mesma espécie de inseto pode resultar em alterações fisiológicas, originando populações com suscetibilidade diferente às diversas táticas de controle. Plutella xylostella, a traça-das-crucíferas é uma praga cosmopolita específica das Brassicaceaes, apresentando problemas de resistência à inseticidas químicos e biológicos. O objetivo deste trabalho foi determinar a influência da variabilidade populacional da traça-das-crucíferas na eficiência das táticas de controle com micro-organismos entomopatogênicos. Foram utilizados os métodos de sequenciamento do gene COI e ISSR-PCR para aferir a variabilidade populacional entre quatro populações da praga, e estudou-se a suscetibilidade delas às táticas de controle com o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (20 isolados), nematoides entomopatogênicos (quatro espécies) e bactérias simbiontes de nematoides entomopatogênicos (dez isolados), avaliando-se o consumo foliar, a multiplicação do entomopatógeno no hospedeiro e estudando os aspectos biológicos em busca de efeitos subletais. . Foram selecionados seis isolados de B. bassiana e as quatro espécies de nematoides, pois foram as mais virulentas à praga. As populações são distintas devido sua variabilidade e isso resulta em diferenças no desenvolvimento de insetos que sobrevivem a aplicação dos entomopatógenos, inclusive na virulência de Steinernema brazilense sobre a população de Jaboticabal. Foi constatada também a redução de consumo foliar nos tratamentos com os entomopatógenos / The geographical isolation of same species populations can result in physiological changes, resulting in populations with different susceptibility to various control tactics. Plutella xylostella, is a specific pest of Brassicaceaes widely spread around the globe, presenting problems with chemical and biological insecticides resistance. The aim of this study was to determine the influence of Diamondback moth populational variability in the efficiency of control tactics with entomopathogenic microorganisms. The methods used were sequencing of the COI gene and ISSR-PCR to measure the population variability among four populations of the pest, and the study of their susceptibility to tactics control with the entomopathogenic fungus B. bassiana (twenty strains), entomopathogenic nematodes (four species) and symbiotic bacteria of entomopathogenic nematodes (ten strains), evaluating leaf consumption, the multiplication of the pathogen in the host and studying the biological aspects in search of sub lethal effects. Six isolates of B. bassiana and four species of nematodes were selected, as were the more virulent to the pest. The populations are distinct because due the genetic, variability and and that results in differences in the development of insects that survive the entomopathogens application, including the virulence of Steinernema brazilense on the population of Jaboticabal. It was also found to reduce leaf consumption in the emtomopathogens treatments

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-04Bitstream added on 2014-06-13T18:26:14Z : No. of bitstreams: 1 000740228.pdf: 486416 bytes, checksum: 3fbeb0e39409e0707c50ade65e946e7a (MD5) / O conhecimento da dinâmica populacional de insetos e inimigos-naturais em grandes áreas de cultivos é fundamental para a implementação de um programa de Manejo Integrado de Pragas. A ocorrência de populações destes insetos em altas densidades populacionais no início de cultivo de grandes culturas deve-se principalmente à sua manutenção na área em outras plantas hospedeiras ou plantas invasoras, que servem como abrigo e fonte de alimentação, permitindo que os mesmos se estabeleçam e permaneçam na área na cultura subsequente, formando o fenômeno chamado de “Ponte Verde”. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a ocorrência de espécies de insetos-pragas e inimigos naturais na cultura do nabo forrageiro, semeada como cultura de cobertura de solo e na cultura do milho em sucessão, em um sistema de plantio direto. O experimento foi instalado em Chapadão do Sul, MS, no ano agrícola de 2012/2013, sendo semeado nabo forrageiro na estressafra e milho na safra verão. As avaliações foram realizadas semanalmente, em 10 pontos, amostrando-se cinco plantas por ponto, totalizando 50 plantas por semana em ambas as culturas. Em razão da dinâmica dos insetos nas duas culturas estudadas no presente trabalho, os mesmos foram agrupados de acordo com o seu modo de alimentação ou ataque e relevância para cada uma, sendo assim, agrupados em: grupo das pragas desfolhadoras, grupo de insetos sugadores, grupo de insetos secundários e grupo de insetos predadores nas duas culturas. Os resultados evidenciaram que a cultura do nabo forrageiro é um importante hospedeiro de pragas primárias e secundárias que ocorrem em outras culturas, de modo que a sua colheita ou incorporação como adubação verde ao solo, deve ser realizada com antecedência ao plantio de milho ou soja em rotação de cultura, para não formar uma “Ponte Verde / The knowledge of the population dynamics of insects and natural enemies - in large areas of crops is critical to the implementation of a program of Integrated Pest Management. The occurrence of populations of these insects at high population densities in early cultivation of major crops is mainly due to its maintenance in the area on other host plants or weeds that serve as shelter and power supply, allowing them to settle and remain in the area in subsequent culture, forming the phenomenon called Green Bridge”. This study aimed to evaluate the occurrence of species of insect pests and natural enemies in the culture of turnip sown as cover crop and soil in corn in succession, in a no-till system. The experiment was installed in Chapadão Sul, MS, in the agricultural year 2012/2013, and sowed turnip in offseason and summer maize crop. Evaluations were performed weekly in 10 points, sampling up to five plants per point, totaling 50 plants per week in both culture. Given the dynamics of insects in the two cultures studied in this work, they were grouped according to their feeding mode or attack and relevant to each, so grouped as: group of defoliating pests, group of sucking insects, group of insects and secondary group of predatory insects in the two cultures. The results showed that the culture of the turnip is an important host of primary and secondary pests that occur in other culture, so that your harvest or incorporation as green manure to the soil, should be performed prior to planting corn or soybean crop rotation, not to form a Green Bridge

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-20Bitstream added on 2014-06-13T20:13:33Z : No. of bitstreams: 1 000740250.pdf: 1666900 bytes, checksum: dd82b6676d1be2569f00bb2f311486fa (MD5) / A família Chrysopidae é considerada a maior da ordem Neuroptera, sendo constituída por predadores generalistas que se alimentam de diversas espécies consideradas pragas agrícolas. A espécie Chrysoperla externa encontra-se tanto em ambientes de vegetação nativa quanto em áreas de cultivo agrícola e possui várias características que a tornam um potencial agente de controle biológico. Entretanto, a capacidade de uma espécie se adaptar à ambientes exóticos, como agroecossistemas, está relacionada à sua variabilidade genética. Assim, os objetivos desse trabalho foram investigar e comparar a variabilidade genética de C. externa em populações estabelecidas no estado de São Paulo, em áreas de vegetação nativa e agroecossistemas, bem como analisar os efeitos da deriva genética e do gargalo populacional sobre essas populações. Foram utilizadas 13 populações coletadas em agroecossistemas, três em áreas nativas e uma linhagem mantida em laboratório sob forte endogamia. Para todas as populações, foram utilizados marcadores moleculares ISSR e para as populações coletadas em agroecossistemas, empregou-se também o gene mitocondrial COI. Altos níveis de variabilidade genética foram observados em todas as populações, o que configura uma característica da espécie. A correlação entre as distâncias genética e geográfica foi baixa, havendo grande compartilhamento de haplótipos entre todas as populações de agroecossistemas. Para essas populações, o gene mitocondrial COI indicou ausência de estrutura genética, enquanto para o marcador ISSR esta pôde ser observada, indicando que as populações estabelecidas em agroecossistema formavam uma única unidade populacional que vem se diferenciando. Quando todas as populações foram analisadas em conjunto, houve a discriminação em três grupos: nativo, agroecossistemas e laboratório, evidenciando a existência de... / The family Chrysopidae comprises the highest number of species in the order Neuroptera, consists of generalist predators that feed on several agricultural pest species. The species Chrysoperla externa is found in native vegetation and agricultural crops and has several features that make it a potential biological control agent. However, the ability of a species to adapt to exotic environments, such as agroecosystems, is related to the genetic variability. The aims of this study were to investigate and compare the genetic variability of C. externa in established populations in the state of São Paulo, in areas of native vegetation and agroecosystems, as well as to analyze the effects of genetic drift and bottleneck on these populations. We used 13 populations collected in agroecosystems, three in native areas and one lineage maintained in the laboratory under strong inbreeding. ISSR molecular markers were used for all populations, but for the populations collected in agroecosystems we used also the mitochondrial COI gene. High levels of genetic variability were observed in all populations, which is one characteristic of the specie. The correlation between genetic and geographic distances was low and a large number of haplotypes was shared among all populations of agroecosystems. For populations of agroecosystems, the mitochondrial COI gene showed no genetic structure, whereas the ISSR marker demonstrated genetic structure, indicating that the established populations in agroecosystems formed a single population unit, which has been under differentiation. When all populations were analyzed together, there was discrimination in three groups: native, agroecosystems and laboratory, showing the existence of genetic structure. The native populations showed a number of polymorphic loci superior to others, but the groups did not differ significantly with respect to the indices of genetic diversity, which ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:32:41Z : No. of bitstreams: 1 viana_cltp_me_jabo.pdf: 681354 bytes, checksum: 292f317000f87f4932ed390de403036a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A pesquisa foi desenvolvida no Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) e no Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) da FCAV-UNESP,Campus de Jaboticabal, SP. O objetivo geral foi selecionar novos isolados de Bacillus thuringiensis através da caracterização molecular, identificando as diferentes subclasses do gene cry1, determinar a patogenicidade contra lagartas de Plutella xylostella e avaliar a influência no ciclo biológico da praga. Foram utilizados 95 isolados de B. thuringiensis obtidos da coleção do LGBBA. O material genético foi extraído pela matriz de troca iônica Kit Instagene Matrix e submetido a PCR com iniciadores gerais para o gene cry1 e específicos para as subclasses. Realizaram-se bioensaios com 58 isolados, um controle positivo com a linhagem padrão HD-1 B. thuringiensis var. kurstaki, um controle negativo com B. thuringiensis var. tenebrionis e água com espalhante adesivo, como testemunha. O conteúdo das subclasses estudadas para o gene cry1 foi determinado para 58 isolados, o que representa 60% do total. Dentre os 95 isolados estudados, 27,4% demonstraram que o conjunto gênico cry1Aa, cry1Ca, cry1Da, cry1Fa e cry1Bd é a freqüência mais comum. Dos 58 isolados testados, 11 causaram mortalidade total das lagartas e os demais influenciaram negativamente o ciclo biológico da praga. Dentre as características avaliadas, a mortalidade larval e a pupal, bem como a duração larval foram as mais relevantes para se determinar quais isolados influenciaram a biologia da praga. Portanto, os isolados que causaram 100% de mortalidade larval têm grande potencial para formulação de produtos comerciais a serem utilizados em programas de manejo integrado de P. xylostella. / The research was developed in the Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) and in the Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) at the FCAV-UNESP-Campus de Jaboticabal, SP. The general objective was to select new strains of Bacillus thuringiensis through the molecular characterization, identifying the different subclasses of the gene cry1, to determine the patogenicity against caterpillars of Plutella xylostella and to evaluate the influence in the pest biological parameters. It was used 95 isolated of B. thuringiensis obtained of the collection of LGBBA. The genetic material was extracted by the head office of change ionic Kit Instagene Matrix and submitted to PCR with general initiators for the gene cry1 and specific for the subclasses. Bioassays were made using 58 strains of B. thuringiensis, a positive control with var. tenebrionis and water was used with adhesive spreader Tween20®, as a standard the strains HD1 from B. thuringiensis var. kurstaki, a negative control with B. thuringiensis check. The content of the subclasses studied for the gene cry1 was determined for 58 isolated, what represents 60% of the total. Among the 95 isolated studied, 27,4% demonstrated that the genic group cry1Aa, cry1Ca, cry1Da, cry1Fa and cry1Bd is the most common frequency. Total mortality of caterpillars was observed in 11 of studied strains and the remainders affected negatively pest biological lifecycle. Larvae and pupae mortality, and larvae period were more relevants parameters to determine which isolates affect P. xylostella biology. In this way, the isolates caused 100 % larval mortality have higher potential for development a commercial bioinseticide to use in Plutella xylostella integrated pest management programs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-13Bitstream added on 2014-06-13T19:47:21Z : No. of bitstreams: 1 silva_csb_me_jabo.pdf: 2042563 bytes, checksum: cdf68da9ed502956924c94701e18a405 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi estudar o padrão de dispersão de Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae), parasitóide de ovos de Spodoptera spp. (Lepidoptera: Noctuidae), avaliando os efeitos da velocidade e direção eólicas, do tamanho de plantas e da disponibilidade de hospedeiros neste processo, em agroecossistemas de algodoeiro. Como quase sempre a dispersão é efetuada pelo vôo, nós estudamos também o efeito de um gradiente de temperatura (18, 21, 24, 27, 30 e 33 ºC) sobre sua iniciação de vôo, em condições de laboratório. O processo dispersivo foi monitorado com armadilhas adesivas e posturas de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), sobre plantas com 30, 60 e 90 dias após emergência (DAE). A temperatura afetou a iniciação de vôo de machos e fêmeas de T. remus, sendo a maior percentagem de vôo observada aos 27ºC. O vento constituiu variável importante no processo dispersivo, influenciando a direção do vôo e a distância percorrida. Velocidades eólicas próximas de 2,5 m/s não inibiram o vôo, porém, anularam ou dificultaram bastante o seu controle. Para ventos de 1,25 m/s o vôo de fêmeas foi predominantemente passivo em plantas com 30 DAE e seguiu orientação contrária à direção eólica aos 90 DAE. A idade das plantas não influenciou a distância percorrida, porém, a probabilidade de parasitismo tendeu a diminuir em plantas mais desenvolvidas. A movimentação de fêmeas foi menor em parcelas aonde foram disponibilizados hospedeiros. Modelos de número e espaçamento entre pontos de liberação foram sugeridos para ambas as situações de velocidade eólica. / We studied the dispersal pattern of Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Scelionidae), an egg parasitoid of Spodoptera spp. (Lepidoptera: Noctuidae), evaluating the effects of the wind speed and direction, plant size and the host availability on this process, in cotton agroecosystems. As dispersal is mostly carried by flight, we also studied the effect of a gradient of temperature (18, 21, 24, 27, 30 e 33 ºC) on the T. remus flight initiation, under laboratory conditions. The dispersal was monitored using sticky traps and Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) eggs, on plants with 30, 60 and 90 days after emergence (DAE). Temperature affected the flight initiation of T. remus males and females. The highest flight intensity was observed at 27ºC. Wind was an important factor on dispersal, affecting the flight direction and the distance covered. Wind speed near 4.4 m/s did not inhibit flight, but reduced it tremendously or turned its control harder. Under winds near 1.25 m/s the flight of females was predominantly passive on plants with 30 DAE. On plants with 90 DAE, the flight direction was contrary to wind direction. The age of plants did not affect the distance covered, but the probability of parasitism tended to fall on more developed plants. The movement of females was smaller on areas where hosts were available. Models about the number and spacing among release points were suggested for both wind speed situations.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-24Bitstream added on 2014-06-13T18:53:12Z : No. of bitstreams: 1 janini_jc_me_jabo.pdf: 724283 bytes, checksum: 0d09b8f041e85668ddf2e661f07a04dd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O amendoim (Arachis hypogaea L.) é uma cultura em crescimento no Brasil, e a sua produção atual é de cerca de 300.000 toneladas/ano, numa área de plantio de mais de 115.200 hectares. Entretanto, a rentabilidade do produtor é limitada pela ocorrência de pragas e doenças, e o seu controle químico eleva o custo de produção. Entre as diversas pragas que atacam a cultura, as mais importantes no Brasil são o tripes (Enneothrips flavens Moulton, 1941 - Thysanoptera: Thripidae) e a lagarta do pescoço vermelho Stegasta bosquella (Chambers, 1875) - Lepidoptera: Gelechiidae). Não se conhecem variedades resistentes, mas o germoplasma do gênero Arachis, nativo da América do Sul, pode conter genes de resistência, ainda não explorados. Assim, este trabalho foi realizado visando avaliar o germoplasma silvestre disponível em coleção, e identificar possíveis fontes de resistência. Dois experimentos de campo foram conduzidos no município de Pindorama, SP. O primeiro envolveu quarenta e quatro acessos de espécies silvestres e dois anfidiploides híbridos de espécies silvestres, além de dois cultivares hypogaea conhecidos, usados como controles. As sementes foram inicialmente germinadas em casa de vegetação e, as plântulas transplantadas no campo. O delineamento experimental adotado foi o de blocos ao acaso com quatro repetições. Iniciando aos 30 dias após o plantio das mudas no campo, foram feitas amostragens de folíolos a cada 15 dias, num total de cinco avaliações. Anotaram-se: porcentagem de folíolos ainda fechados, com presença de tripes-do-prateamento e lagarta-do-pescoço-vermelho; notas dos sintomas de danos visuais de tripes e da lagarta, em folíolos recém abertos baseando-se numa escala de notas de 1 a 5. Outro experimento foi conduzido no campo, envolvendo 35 acessos de espécie silvestres, dois anfidiplóides e dois cultivares controles. O delineamento experimental... / The peanut (Arachis hypogaea L.) is a crop of increasing importance in Brazil, and its present production is around 300,000 tons/year, over a planting area of more than 115,200 hectares. However, peanut grower profitability is limited by the occurrence of pests and diseases, whose chemical control raises costs of production. Among the pests known to affect the peanut crop, the most important in Brazil are the tripes (Enneothrips flavens) and the redneck worm (Stegasta bosquella). Resistant varieties are not known, but the germplasm of Arachis, native of South America, may contain genes of resistance, yet not explored. And so, this work was done to evaluate wild peanut collected germplasm, so as to identify possible sources of resistance. Two field experiments were carried out at Pindorama – SP. The first involved forty four wild Arachis accessions, two hybrid anfidiploids, obtained from crossings between species, and two A. hypogaea known cultivars, as the controls. Seeds were initially germinated in greenhouse conditions and, then, transplanted to the field. The field experiment consisted of a complete ramdomized block design with four replications. Starting at 30 days after plantlets were transplanted, samplings of leaflets were done at 15 day intervals, comprising five evaluations along the plant cycle. The following data were obtained: percentage of closed leaflets that showed the presence of thrips and/or redneck worm; damage ratings of thrips and redneckworm from recently opened leaves, using a scale of 1 to 5. Another experiment was conducted, and this involved thirty five wild accessions, two anfidiploids and two control cultivars. The experimental design and the insect evaluations followed the same criteria of the previous experiment. In this case, the following data were additionally collected, from treated (sprayed for pest control) and untreated plots: number and length... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-10Bitstream added on 2014-06-13T19:32:55Z : No. of bitstreams: 1 000747883.pdf: 1927272 bytes, checksum: 7f72855bd96f9dec437271f91d081f14 (MD5) / Em função da frequente associação do fungo Fusarium solani com podridões de raízes e colo em cucurbitáceas e mais recentemente com o colapso do meloeiro, e o notável aumento da utilização da enxertia para manejo de patógenos de solo, adaptabilidade climática e incremento da produtividade, tem tornado ainda mais importante a realização de pesquisas sobre os efeitos da utilização da enxertia e as combinações mais adequadas a cada situação. Em função do exposto o objetivo deste trabalho foi avaliar a patogenicidade de dois isolados de Fusarium solani em 33 genótipos de cucurbitáceas e a compatibilidade destes genótipos como porta-enxertos para o meloeiro rendilhado. No ensaio I avaliou-se o efeito da lavagem e corte das raízes do meloeiro rendilhado „Fantasy‟ sobre seu desenvolvimento inicial, através de três tratamentos (raízes intactas, raízes lavadas e raízes lavadas e cortadas), com cinco repetições, o desenvolvimento foi realizado por meio de avaliação visual. Ensaio II: foi realizado inoculando-se o isolado proveniente de Jaboticabal-SP por meio do método de suspensão de conídios em 33 genótipos de cucurbitáceas. No ensaio III foram inoculados apenas plantas de meloeiro rendilhado „Fantasy‟ pelo método de inoculação por grãos (de milho, sorgo e arroz) utilizou-se o isolado de Jaboticabal-SP. Ensaio IV: pelo método com palito de dente inoculou-se o isolado proveniente de Mossoró-RN nos 33 genótipos de cucurbitáceas. Para os ensaios de II a IV a avaliação foi feita por meio de escala de notas. Realizou-se ainda um ensaio para avaliar a compatibilidade de enxertia entre 31 genótipos de cucurbitáceas (porta-enxertos) e o meloeiro rendilhado „Fantasy‟ (enxerto), empregou-se o método de enxertia por fenda-cheia. Avaliou-se a porcentagem de sobrevivência das plantas no momento do transplantio e características qualitativas e quantitativas... / Due to the frequent association with the fungus Fusarium solani root rot in cucurbits and stem, and with the collapse of melon, and increasing the use of grafting for management of soil borne pathogens , climatic adaptability and increased productivity, has become even more important to conduct research on the effects of performing grafting and combinations best suited to each situation. In function of this, the aim of this study was to evaluate the pathogenicity of two isolates of Fusarium solani in 33 genotypes of cucurbits and compatibility of these genotypes as rootstocks for net melon. In the assay I evaluated the effect of washing and cutting of the roots of melon lace 'Fantasy' on their initial development through three treatments (intact roots, the roots are washed and cleaned and cut) with five replicates, development was carried out by means of visual assessment . Essay II: was performed by inoculating the isolate yourself from Jaboticabal-SP by the method of spore suspension in 33 genotypes of cucurbits. In test III was inoculated plants only net melon 'Fantasy' by the method of inoculation of grains (corn, sorghum and rice) was used to isolate Jaboticabal-SP. Essay IV: through method with toothpick inoculated isolate from Mossoró-RN in 33 genotypes of cucurbits. For trials II to IV assessment was made by a rating scale. Trials was performed to evaluated the graft compatibility between 31 genotypes of cucurbits (rootstocks) and net melon 'Fantasy' (graft), we used the method for cleft grafting. We evaluated the survival percentage of plants at the time of transplanting and qualitative and quantitative characteristics of the fruit, and the diameter below and above the region of grafting. None of the strains of F. solani was able to induce symptoms in genotypes and Bitter melon and Trichosanthes cucumerins are not indicated as rootstock for net melon 'Fantasy', while watermelon ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:29:31Z : No. of bitstreams: 1 figueiredo_cs_me_jabo_parcial.pdf: 433594 bytes, checksum: 5db23a3d4c3ab1bce497f29f193cd674 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:00:47Z: figueiredo_cs_me_jabo_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:13Z : No. of bitstreams: 1 000718405_20160225.pdf: 327253 bytes, checksum: 949c202d3f1b517f66218611f9a1bd5a (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-26T14:03:56Z: 000718405_20160225.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-26T14:04:50Z : No. of bitstreams: 1 000718405.pdf: 781931 bytes, checksum: cd606945171aa0e2251919afe0b3aec7 (MD5) / A bactéria Bacillus thuringiensis é vista como uma das melhores opções no controle biológico devido à ação entomopatogênica e a especificidade de suas proteínas. As proteínas Vip3, que são secretadas durante o crescimento vegetativo do B. thuringiensis, atuam no controle de importantes lepidópteros praga. O objetivo deste trabalho foi caracterizar um gene vip3A de um isolado de B. thuringiensis, expressar a proteína e verificar sua toxicidade contra larvas de Anticarsia gemmatalis e. Spodoptera frugiperda Para tanto, o gene foi amplificado com iniciadores específicos por PCR, gerando um fragmento de 2370 pb. O fragmento foi clonado em vetor pGEM - T Easy para sequenciamento, subclonado em vetor de expressão pET-28a (+) e o conjunto inserido em células de Escherichia coli BL21 (DE3). A expressão da proteína foi induzida por IPTG, a proteína Vip3Aa50 foi visualizada em SDS-PAGE e detectada por “Western blotting”. Os ensaios de toxicidade revelaram alta virulência às larvas neonatas de A. gemmatalis e S. frugiperda, sendo as larvas da população de A. gemmatalis mais sensíveis. O isolado utilizado neste estudo é altamente promissor como fonte de gene vip3A para controle de ambas as pragas por meio da produção de plantas transgênicas como milho e soja. / The bacterium Bacillus thuringiensis is seen as one the best options for the biological control due to entomopathogenic action and protein specificity. The Vip3 proteins, which are secreted during the vegetative growth of B. thuringiensis, act to the control the most important lepidopteran pests. The aim of this study was to characterize a vip3A gene from an isolate of B. thuringiensis, to induce the protein and evalute its toxicity against Anticarsia gemmatalis and Spodoptera frugiperda larvae. Therefore, the gene was amplified by specific PCR’s primers, generating a 2370 pb fragment. The fragment was cloned into the pGEM-T Easy vector and subsequently, it was sequenced and subcloned into the pET-28a (+)’s expression vector and inserted in to the Escherichia coli BL21 (DE3) cells. The Vip3Aa50 protein expression was induced by IPTG, observed using SDS-PAGE and detected by Western blotting. The toxicity bioassay showed intense virulence for A. gemmatalis and S. frugiperda’s neonate larvae. The results showed that A. gemmatalis larval population was more sensitive. The isolate used in this study is highly promising as vip3A source gene to control both plagues through transgenic plant production, such as, corn and soybean.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-25Bitstream added on 2014-06-13T19:54:05Z : No. of bitstreams: 1 crialesi_pcb_me_jabo.pdf: 717305 bytes, checksum: ddf9d322f3798935db316f769791eac7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A traça-das-crucíferas (Plutella xylostella) é uma praga que ataca culturas de brássicas, causando enormes prejuízos econômicos aos agricultores. O aparecimento de populações resistentes a inseticidas tem dificultado seu manejo, fazendo-se necessário a busca por alternativas de controle que viabilizem a economia do custo de produção, preservando o ambiente de inseticidas químicos em altas doses. As plantas possuem um mecanismo constitutivo de resistência que atua na sua defesa frente às diferentes adversidades bióticas e abióticas, o que representa altos gastos metabólicos. O mecanismo de resistência pode ser melhorado com a indução de resistência por um ou mais elicitores, como é o caso das bactérias promotoras de crescimento. O objetivo deste estudo foi detectar sequências gênicas expressas em resposta à indução de resistência de repolho à traça das crucíferas. A bactéria utilizada como indutora das respostas de defesa foi a Kluyvera ascorbata devido à ação já descrita anteriormente com repolho e traça-das-cruciferas, onde ficou evidente sua influência na defesa contra essa praga. Por meio do sequenciamento de cDNA foi possível identificar uma significativa alteração no metabolismo de plantas que abrigavam esta bactéria, suprimindo da ação de muitos genes, durante o processo de defesa da planta contra o estresse causado pela injúria de lagartas de P. xylostella / The diamondback moth Plutella xylostella is a pest that attacks brassics causing great economic losses to the growers. The rise of resistant populations to the chemical insecticides imposes difficulties on this pest management, so the search of other ways to overcame this situation became quite relevant so as to help to reduce production costs and at the same time avoiding the use of high dosage of the commonly used pesticides. Plants exhibit a constitutive resistance mechanism that acts favoring their defense towards biotic and abiotic stress situations, which involves high metabolic energetic challenges. The defense mechanisms may be improved with the induction of resistance by a number of different elicitors, such as the use of plant growth promoting bacteria. The aim of the present work was to detect plant gene sequences in response to cabbage resistance induction against the diamondback moth. Kluyvera ascorbata was used to induce the plant’s growth promotion elicitor due to previously described influence. Analyzing DNA sequencing procedures from cDNA library samples, it was possible to observe drastic differences on the plants metabolism when such bacteria was used, either by suppressing the action of several genes while the plant’s defense mechanisms was in action against injuries caused by P. xylostella larvae

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-14Bitstream added on 2014-06-13T19:54:07Z : No. of bitstreams: 1 mendes_drp_me_jabo.pdf: 752950 bytes, checksum: da4434743daf49841f285c3909094a1c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Proteínas inseticidas derivadas de Bacillus thuringiensis (Bt) são os inseticidas biológicos mais amplamente utilizados. O trabalho teve por objetivo avaliação da toxicidade das proteínas de Bt, Cry1Ia e Vip3Aa, expressas em Escherichia coli BL21 (DE3), a fim de verificar a eficiência destas toxinas na mortalidade de Spodoptera frugiperda. Para tanto, empregou-se um par de iniciadores específicos para amplificar o fragmento correspondente ao gene vip3Aa completo contendo 2370 pb. O fragmento obtido foi clonado no vetor pET SUMO e transformado em células de E. coli BL21 (DE3) por choque térmico. A expressão das proteínas Vip3Aa e Cry1Ia previamente clonado, foi induzida por tiogalactopiranosídeo de isopropila (IPTG), e as proteínas recombinantes com peso molecular de, aproximadamente, 100 e 81 KDa respectivamente, foram detectadas por SDS-PAGE e Western Blot. Para avaliação da toxicidade os bioensaios foram realizados com as lagartas de primeiro instar que foram alimentadas com dietas artificiais contendo, na superfície, cinco diferentes concentrações da toxina Cry1Ia e cinco diferentes concentrações da toxina Vip3Aa recombinante. Os bioensaios foram estabelecidos em delineamento inteiramente casualizado, com 16 lagartas por repetição, totalizando 4 repetições por tratamento. A quantificação de lagartas mortas pela ação do B. thuringiensis, foi determinada pela CL50. Os resultados demonstraram a eficiência do sistema bacteriano na expressão das proteínas Vip3Aa e Cry1Ia de B. thuringiensis, resultando em toxinas recombinantes com elevada toxicidade frente às lagartas de S. frugiperda, o que sugere o uso destes genes na obtenção de plantas transgênicas, únicas ou piramidada, resistentes a esta praga / Insecticidal proteins derived from Bacillus thuringiensis (Bt) are the most widely used biological insecticides. The study aimed to evaluate the toxicity of Bt proteins, Cry1Ia Vip3Aa and expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) to verify the efficiency of these toxins on the mortality of Spodoptera frugiperda. For this we used a pair of specific primers to amplify the fragment corresponding to the gene vip3Aa complete containing 2370 bp. The fragment was cloned into pET SUMO vector and transformed into cells of E. coli BL21 (DE3) by heat shock. The expression of proteins Vip3Aa and Cry1Ia previously cloned, was induced by isopropyl tiogalactopiranosídeo (IPTG), and the recombinant proteins with a molecular weight of approximately 100 and 81 kDa respectively, were detected by SDS-PAGE and Western blot. To evaluate the toxicity bioassays were performed with first instar caterpillars that were fed diets containing artificial, in surface, whit five different toxin concentrations of Cry1Ia and five different concentrations of recombinant toxin Vip3Aa. Bioassays were established in a randomized design, with 16 larvae per repetition, totaling four replicates per treatment. The quantification caterpillar dead by the action of B. thuringiensis, was determined by LC50. The results demonstrated the efficiency of the bacterial system in protein expression Vip3Aa Cry1Ia of B. thuringiensis toxins, resulting in recombinants with high toxicity against the larvae of S. frugiperda, suggesting the use of these genes in the production of transgenic plants, single or pyramided resistant to this pest