Atualmente a ferrugem-asiática da soja é a doença mais importante da cultura e desde o seu surgimento vem causando diversos prejuízos. Devido a sua importância, faz-se necessário buscar alternativas que possam contribuir com o manejo tradicional com fungicidas. Neste sentido, surge a indução de resistência como uma alternativa para o seu controle. Dentre os indutores de resistência, as fitotoxinas apresentam potencial como ativadoras de plantas e neste caso, mais especificamente a taxtomina, produzida por Streptomyces scabies. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da fitotoxina taxtomina parcialmente purificada (TPP) e preparações de Streptomyces scabies como potenciais indutores de resistência em soja à Phakopsora pachyrhizi. Foram realizados ensaios para avaliar o efeito direto dos potenciais indutores deresistência a base de suspensão de células de Streptomyces scabies, filtrado de meio de cultivo de Streptomyces scabies, TPP e acibenzolar-S-metílico sobre a germinação de urediniósporos através do teste de microgotas em placas de Petri de poliestireno. Também foram realizados ensaios em folha destacada, onde fez-se a aplicação dos potenciais indutores e depois de determinado tempo fez-se a inoculação com P. pachyrhizi, sendo posteriormente avaliado o potencial dos compostos na redução da severidade. Ensaios em casa de vegetação foram conduzidos com plantas de soja que receberam a aplicação dos indutores e, posteriormente, foram inoculadas, onde avaliou-se a redução da severidade. Em casa de vegetação também foram conduzidos experimentos para a coleta de amostras para a realização de análises bioquímicas como peroxidase e fenóis, visando monitorar a atividade e o acúmulo de compostos relacionados a defesa de plantas a patógenos. Ensaio de campo foi realizado para verificar o potencial em reduzir a severidade da ferrugem da soja, onde foi avaliada a produtividade e a qualidade fisiológica das sementes produzidas. A expressão de genes relacionados as vias defesa como resposta a aplicação de taxtomina também foi monitorada. Como resultados, observou-se que a TPP tem efeito direto sobre urediniósporos de P. pachyrhizi, inibindo a germinação em 61%. A TPP reduziu a severidade da doença em folha destacada, mas não em plantas em condições de casa de vegetação. A TPP também aumentou a atividade de peroxidase e alterou o acúmulo de fenóis ligados. Em condições de campo, apenas o tratamento com fungicidas reduziu a severidade da doença. Nenhum dos tratamentos utilizados afetou a germinação e o vigor das sementes produzidas. A TPP foi capaz de alterar a expressão gênica e regular positivamente o gene ACC, envolvido na síntese do etileno. Conclui-se que a TPP apresenta, além de efeito direto sobre o patógeno, potencial para alterar compostos e a expressão de genes relacionados as vias de defesa das plantas. / Asian soybean rust is the most important disease of the crop today and since its inception has caused several damages. Due to its importance, it is necessary to look for alternatives that can contribute to the traditional management with fungicides. In this sense, induction of resistance appears as a promising alternative for the control of diseases. Among the resistance inducers, phytotoxins have the potential as plant activators and in this case, more specifically thaxtomin, produced by Streptomyces scabies. Therefore, the objective of this work was to evaluate the potential of the partially purified phytotoxin thaxtomin (TPP) and preparation of Streptomyces scabies as potential inducers of resistance in soybean to Phakopsora pachyrhizi. For this, tests were carried out to evaluate the direct effect of potential resistance inducers on the germination of urediniospores through the test of microdrops on polystyrene Petri dishes. Detached leaf assay also carried out, where the potential inducers were applied and after a certain time the inoculation with P. pachyrhizi was done, being evaluated the potential of the compounds in reducing the severity. Greenhouse tests were also carried out with soybean plants that received the application of the inducers and later inoculated, where the reduction of severity was evaluated. Greenhouse experiments were also carried out for the collection of samples for biochemical analyzes such as peroxidase and phenolic compounds, aiming to monitor the activity and the accumulation of compounds related to plant defense to pathogens. In addition, preliminary field trials were carried out to verify the potential of the inducers in reducing the severity of soybean rust, where the productivity and physiological quality of the seeds were also evaluated. Expression of genes related to the defense pathways as a response to thaxtomin application was also monitored. As results, it was observed that the partially purified thaxtomin had a direct effect on P. pachyrhizi uredinospores, inhibiting germination by 61%. In addition, it was also able to reduce the severity in detached leaves but not in seedlings under greenhouse conditions. Partially purified thaxtomin was also able to increase peroxidase activity and alter the accumulation of bound phenols. At field conditions, only the treatment that used fungicides was able to reduce the severity of the disease. However, although only one of the treatments reduced the disease, none of the treatments used was able to affect the germination and vigor of the seeds produced. Finally, the partially purified thaxtomin was able to alter gene expression and positively regulate the ACC gene, that is involved in ethylene metabolism. In general, it is concluded that TPP has, in addition to a direct effect on the pathogen, potential to alter plant defense related compounds and the expression of genes related to defense pathways.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:36:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_Diss_Rafael_Augusto_Swarowsky.pdf: 1265471 bytes, checksum: b7b6c650055a2ba1f2346656fda7a03d (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Considering the importance of the tomato crop and the high costs of the control of Meloidogyne incognita with resistant cultivar or nematicides, grows the search of new alternatives to control the root-knot disease. The homeopathy may be an alternative way of control, by inducing resistance. This study aimed to evaluate the influence of the homeopathic drug Cina in the number of root galls, eggs and J2 present in the roots of tomato and soil, as well as the growth of tomato plants. The dynamizations used were 12, 24, 50, 100, 200, and 400CH (centesimal hahnemanian dilutions). It was also used the chemical carbofuran, 70% ethanol and water as control treatments. The assay was conducted in pots in greenhouse for the in vivo assay and in laboratory for the in vitro ones. In both assays, homeopathic treatments were diluted with distilled water to 0.1% before application. On the in vivo assay, the homeopathic drug was applied weekly by foliar spray. The first treatments were done three days before pathogen inoculation with approximately 5000 eggs and 500 J2 per pot. The evaluations were made 50 days after transplanting of the tomato seedlings and 44 days after inoculation. The Cina demonstrated effectiveness in stimulating root development, once the results of root volume were higher in homeopathic treatments than in control. Cina 100CH also favored the growth of the stalk diameter of the plants. However, the homeopathic product showed no nematostatic nor nematicide effect / Considerando a importância da cultura do tomateiro e os custos com variedades resistentes e com nematicidas para controle de Meloidogyne incognita, são necessárias alternativas para manejo da doença das galhas radiculares. A homeopatia pode ser uma alternativa de controle, através da indução de resistência de plantas. Este trabalho objetivou avaliar a influência do medicamento homeopático Cina quanto ao número de galhas radiculares, ovos e J2 presentes nas raízes do tomateiro e no solo, bem como variáveis de crescimento das plantas de tomate. As dinamizações usadas foram 12, 24, 50, 100, 200 e 400CH (centesimal hahnemanniana). Também foram utilizados como tratamentos para comparação o nematicida carbofurano, etanol 70% e água. O experimento foi conduzido em vasos dentro de estufa climatizada para ensaio in vivo e em laboratório para o ensaio in vitro. Em ambos os ensaios, os tratamentos homeopáticos foram diluídos em água destilada a 0,1% antes da aplicação. No ensaio in vivo o medicamento homeopático foi aplicado semanalmente por aspersão foliar. A primeira aplicação dos tratamentos foi realizada três dias antes da inoculação, com aproximadamente 5000 ovos e 500 J2 por vaso. As avaliações foram feitas 50 dias após o transplante das mudas de tomate e 44 dias após a inoculação. A Cina demonstrou eficiência em estimular o desenvolvimento radicular, pois os resultados de volume de raiz foram maiores nos tratamentos homeopáticos do que nas testemunhas. Cina a 100CH também favoreceu o crescimento do diâmetro de caule das plantas. Contudo, o medicamento homeopático não demonstrou nenhum efeito nematostático e nem nematicida

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nicanor_Pilarski_Henkemeier.pdf: 1216129 bytes, checksum: 47acef3427a1d000f014e783e91c06ac (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The bean crop presents great nutritional and economic importance for the Brazilian population, its cultivation occurs in all arable regions of the country with favorable climate condition to the development of culture as well as its main diseases, such as bacterial blight and anthracnose. The diseases management rely mainly on the use of chemical control, which presents high environmental damages. During the last few years alternatives such as the use of biological control and the induction of resistance have been developed. The use of Trichoderma sp. is one of the alternatives once it acts as antagonist and biotic inducer. This study aimed to inoculate different Trichoderma isolates, in seeds and evaluate the effects of Trichoderma-bean interaction on the field, and its effects on leaf area development, dry matter accumulation, productivity and disease severity. The experiments were conducted in different regions: at Marechal Candido Rondon - PR, clayey Oxisol Eutroferric, in a humid subtropical climate, using the treatments, Trichoderma virens (TI1), Trichoderma harzianum (TLB2, TLB12 end TI2), Trichoderma asperellum (TLB6), Trichoderma koningiopsis (TLB17), absolute control and fungicide (pyraclostrobin (75 gia ha-1) in season 2013/2014) fungicide (pyraclostrobin (6.5 gia ha-1) + metconazole (4 gia ha-1) in season 2014/2015) and the bean cultivar IAPAR 81. And at Marquinho-PR, whit soil Eutrophic Entisol in a Mesothermal humid Subtropical climate, with seeds treated with Trichoderma virens (TI1 & TLB15), Trichoderma harzianum (TLB2 , TLB12 & TI2), Trichoderma asperellum (TLB6), Trichoderma koningiopsis (TLB17), absolute control and fungicide pyraclostrobin (6.5 gia ha-1) + metconazole (4 gia ha-1), in the bean cultivars IAPAR Tuiuiú and IAPAR 81. The experimental design used was a design randomized block, and the results were submitted to variance analysis (ANOVA) and the results were submitted to Tukey test at (5%). Significant differences could not be observed for development of leaf area, dry matter and production parameters in inoculated bean crop with different isolates of Trichoderma sp.. The Trichoderma-bean interaction demonstrated promising in reduce the severity of bacterial blight, the anthracnose severity had significant reduction in common bean cultivar IAPAR Tuiuiú / O feijoeiro possui grande importância nutricional e econômica para a população brasileira, seu cultivo ocorre em todas as regiões agricultáveis do país e com clima propício para o desenvolvimento da cultura e para suas principais doenças, como o crestamento bacteriano comum e a antracnose. O controle de doenças baseia-se principalmente no controle químico, sendo esse responsável por uma série de impactos ambientais. Nos últimos anos vem se buscando alternativas tais como o uso de controle biológico e a indução de resistência. O uso de Trichoderma sp. é uma das alternativas de controle biológico atuando como antagonista e indutor de resistência. O trabalho objetivou inocular diferentes isolados de Trichoderma, via sementes, e avaliar os efeitos da interação Trichoderma-feijoeiro à campo, e seus efeitos no desenvolvimento de área foliar, acúmulo de massa seca, produtividade e severidade de doenças. Os experimentos foram conduzidos em diferentes regiões: Em Marechal Cândido Rondon PR, em solo Latossolo Vermelho Eutroférrico de textura muito argilosa, clima subtropical úmido, utilizando os tratamentos, Trichoderma virens (TI1), Trichoderma harzianum (TLB2, TLB12 e TI2), Trichoderma asperellum (TLB6), Trichoderma koningiopsis (TLB17), testemunha absoluta, fungicida (piraclostrobina (75 g.i.a ha-1) safra 2013/2014) fungicida (piraclostrobina (6,5 g.i.a ha-1) + metconazole (4 g.i.a ha-1) safra 2014/2015) e a cultivar de feijoeiro IAPAR 81; em Marquinho-PR, em solo Neossolo Regolítico Eutrófico, clima Subtropical Mesotérmico Úmido e sementes tratadas com Trichoderma virens (TI1 e TLB15), Trichoderma harzianum (TLB2, TLB12 e TI2), Trichoderma asperellum (TLB6), Trichoderma koningiopsis (TLB17), testemunha absoluta e fungicida piraclostrobina (6,5 g.i.a ha-1) + metconazole (4 g.i.a ha-1), nas cultivares de feijoeiro IAPAR Tuiuiú e IAPAR 81. O arranjo experimental adotado foi delineamento em blocos casualizado e os resultados submetidos a análise de variância (ANAVA) e as médias submetidas ao teste de Tukey (5%). Não foram observadas diferenças significativas para desenvolvimento de área foliar, massa seca e parâmetros produtivos na cultura do feijoeiro inoculado com diferentes isolados de Trichoderma sp.. A interação Trichoderma-feijoeiro demonstrou-se promissa para diminuir. A severidade de crestamento bacteriano comum, a severidade de antracnose teve significativa redução com cultivar de feijoeiro IAPAR Tuiuiú

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa_Felix_Vaz_Stefanello.pdf: 1562857 bytes, checksum: 9dcf0ad6ea4c077c5df3464b1076ce22 (MD5) Previous issue date: 2015-08-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of the work was to evaluate the action of Trichoderma spp. and its filtered as biocontrol agent of anthracnose and resistance inducer in beans. Were conducted two experiments in vitro, where were made a germination test of Colletotrichum lindemuthianum conidium after the treatment with Trichoderma spp. filtered, and the direct confrontation test of 21 cultures isolated from Trichoderma spp. agains this pathogen were also conducted two experiments in vivo: on the first imposed treatments in base of Trichoderma in the beans inoculated via seed; on the second experiment the treatments aplication were made through foliar spray of filtered medium of Trichoderma spp. For the experiments in vivo were realized sheets collects for biochemical analysis, in which there were two collects for the experimente that were treated via seed (15 days after the foliar emergency and three days after the pathogen inoculation). Whereas for the experiment which the treatments were via foliar spray of filtered medium of Trichoderma, were realized three collectings, (the first without the treatment aplication, the second three days after the filtered pulverization and the third collect realized three days after the pathogen inoculation). Were determined the polyphenoloxidase activity (PFO), peroxidase (POX) and phenylalanine ammonia lyase (FAL), and were evaluated the total protein content, total phenols, lignin and the severity of anthracnose after treatments in base of Trichoderma for both experiments. For the germination test of C. lindemuthianum, conidium the filtered from the isolated TM1, TI1 and TOD1 reduced the germination in, 33%, 38% and 61% respectivily. In direct confrontation were realized that the isolated inhibited pathogen growth. For the PFO activity in via seed treatment, the isolated TLB12, TOD1 and TOD2B caused an increase thereof after challenge with the pathogen, while the treatment via foliar spray of Trichoderma filtered were not observed significant difference. The POX activity in beans treated at sowing, for the time 1 weren‟t observed difference between the treatments, whereas in the time 2 some isolated tended to suppress the enzymatic activity, while for plants treated via foliar pulverization notes the tendency to enzymatic suppression of POX in time 2 caused by some filtered in relation to the positive control. The FAL enzymatic activity and the total soluble protein contents both in the aplication of the treatments via seed and via foliar pulverization in beans didn‟t result in significant difference. For the total phenol contents and lignin the treatments in base of Trichoderma via sowing and via foliar pulverization didn‟t promote an icrease of the same in beans. The severity in treated beans presented in general low, making these inaccurate data / O objetivo do trabalho foi avaliar a ação do Trichoderma spp. e seus filtrados como agente de biocontrole da antracnose e indutor de resistência em feijoeiro. Conduziram-se dois experimentos in vitro, onde foi realizado teste de germinação de conídios de Colletotrichum lindemuthianum após tratamento com filtrados de Trichoderma spp., e o teste de confronto direto de culturas de 21 isolados de Trichoderma spp. frente a esse patógeno também conduziu-se dois experimentos in vivo: no primeiro se impôs os tratamentos a base de Trichoderma no feijoeiro inoculado via semente; já no segundo experimento a aplicação dos tratamentos se deu por meio de pulverização foliar de filtrados de Trichoderma spp. Para os experimentos in vivo realizaram-se coletas de folhas para análises bioquímicas, no qual houve duas coletas para o experimento cujos tratamentos foram via semente (aos 15 dias após a emergência foliar e três dias após a inoculação do patógeno). Já para o experimento aos quais os tratamentos foram via pulverização foliar de filtrados de Trichoderma, realizaram-se três coletas, (a primeira sem a aplicação do tratamento, a segunda realizada três dias após a pulverização dos filtrados e a terceira coleta realizada três dias após a inoculação do patógeno). Determinou-se a atividade de polifenoloxidase (PFO), peroxidase (POX) e fenilalanina amônia-liase (FAL), e foram avaliados os teores de proteínas totais, fenóis totais, lignina e a severidade da antracnose após os tratamentos a base de Trichoderma para ambos os experimentos. Para o teste de germinação de conídios de C. lindemuthianum, os filtrados dos isolados TM1, TI1 e TOD1 reduziram a germinação em, 33%, 38% e 61% respectivamente. No confronto direto percebeu-se que os isolados inibiram o crescimento do patógeno. Para a atividade de PFO em tratamentos via semente, os isolados TLB12, TOD1 e TOD2B causaram aumento da mesma após o desafio com o patógeno, enquanto que no tratamento via pulverização foliar de filtrados de Trichoderma não foi observada diferença significativa. A atividade de POX em feijoeiro tratado na semeadura, para o tempo 1 não observou-se diferença entre os tratamentos, já no tempo 2 alguns isolados tenderam a suprimir a atividade enzimática, enquanto que para as plantas tratadas via pulverização foliar nota-se tendência de supressão enzimática da POX no tempo 2 ocasionada por alguns filtrados em relação ao controle positivo. A atividade enzimática de FAL e os teores de proteínas solúveis totais tanto na aplicação dos tratamentos via semente quanto via pulverização foliar em feijoeiro não acarretou em diferença significativa. Para os teores de fenóis totais e de lignina os tratamentos a base de Trichoderma via semeadura e via pulverização foliar não promoveram incremento dos mesmos em feijoeiro. Já a severidade em feijoeiro tratado apresentou-se no geral baixa, tornando estes dados imprecisos

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viviane_Carla_Costa.pdf: 473789 bytes, checksum: 9b33eaf852229f3ad4dd60593345f2b1 (MD5) Previous issue date: 2007-08-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum is one of the main diseases that can reduce the productivity of tomato culture (Lycopersicon esculentum). The control of this pathogen is difficult, since the bacteria overwinter in plant debris, in diseased plants and in the soil. The use of resistance varieties is difficult because it depends on environmental conditions and amount of bacteria in the soil. Thus, it is necessary the development of alternative methods for the control of this disease, since there is no registered pesticide for this purpose. The objective of this work was to verify the effectiveness of the acibenzolar-S-methyl (ASM) abiotic product, and citric biomass and bacterial fermented extract biotic products in inducing resistance in the tomato against R. solanacearum biovars I and III. To in vitro assay the ASM was used at concentrations of 10, 25, 100 and 200 mg/L, while citric biomass and bacterial fermented extract were used at concentrations of 0.025, 0.1, 0.2 and 0.4 mL/L. Oxytetracycline (22.5 mg/L) + streptomycin (225 mg/L) was used as positive control and only culture medium as negative control. To in vivo assay the doses were 0.05 g/L for ASM, 2.5 and 5 mL/L for citric biomass and 10 and 20 mL/L bacterial fermented extract. After 15 days of transplanting the products were sprayed on the leaves, with a total of 10 applications. Three days after the first application the plants were inoculated with the pathogen through wounds in the roots. The results showed that the three products presented antibacterial activity against R. solanacearum, with differentiated action depend on the dose and biovar inoculated. For ASM the inhibition was of up to 99%, whereas for citric biomass and bacterial fermented extract it was 84% and 99%, respectively. The antibiotic inhibited between 7.5 and 15% the bacterium growth. To in vivo assay, the citric biomass 5 mL/L and bacterial fermented extract 10 mL/L reduced the bacterial wilt caused by biovar I of R. solanacearum, whereas to biovar III the control was obtained with bacterial fermented extract (10 mL/L) and ASM. In these plants with low incidence of wilt symptoms were observed the lower indexes of bacterium isolation in culture medium. These results indicate the potential of ASM, citric biomass and bacterial fermented extract for control of R. solanacearum in tomato plants / A murcha bacteriana causada por Ralstonia solanacearum é uma das principais doenças que afetam a cultura de tomate (Lycopersicon esculentum). O controle da bactéria é difícil, pois a mesma sobrevive no solo, associada a restos culturais e na rizosfera de várias plantas. O uso de variedades resistentes é difícil pelo fato desta depender de condições ambientais e da concentração de inóculo da bactéria. Para tanto, torna-se imprescindível a realização de pesquisas que visem a obtenção de métodos alternativos para o controle da doença, já que não existe atualmente nenhum produto registrado para a mesma. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi testar a eficácia dos produtos abiótico acibenzolar-S-metil (ASM) e bióticos biomassa cítrica e fermentado bacteriano, em induzir resistência no tomateiro contra R. solanacearum biovares I e III. No ensaio in vitro para o ASM utilizaram-se as concentrações 10; 25; 100 e 200 mg/L; para a biomassa cítrica e fermentado bacteriano foram utilizadas as concentrações 0,025; 0,1; 0,2 e 0,4 mL/L. Oxitetraciclina (22,5 mg/L) + estreptomicina (225 mg/L) foi utilizado como controle positivo e apenas meio caldo nutriente como controle negativo. No ensaio in vivo utilizou-se para ASM a dose 0,05 g/L, para biomassa cítrica as doses 2,5 e 5 mL/L e fermentado bacteriano as doses 10 e 20 mL/L. Após quinze dias do transplante das mudas para os vasos as mesmas foram pulverizadas até plena cobertura foliar com os produtos totalizando 10 aplicações. Três dias após a primeira aplicação as plantas foram inoculadas com o patógeno através de ferimentos nas raízes. Os três produtos apresentaram atividade antibacteriana in vitro contra R. solanacearum, sendo esta ação diferenciada em função da dose e dos biovares utilizados. Para ASM a inibição foi de até 99%, enquanto que para biomassa cítrica e fermentado bacteriano foi em média de 84% e 99%, respectivamente. O antibiótico inibiu entre 7,5 e 15% a multiplicação da bactéria. Nos ensaios in vivo, a biomassa cítrica na dose 5 mL/L e o fermentado bacteriano na dose 10 mL/L foram eficientes para o controle da murcha bacteriana causada pelo biovar I de R. solanacearum, enquanto que para o biovar III o controle foi obtido com ASM e fermentado bacteriano (10 mL/L). Nessas plantas com menor incidência da doença também se observou o menor índice de reisolamento da bactéria. Estes resultados indicam o potencial de ASM, biomassa cítrica e, principalmente do fermentado bacteriano, para controle de R. solanacearum em tomateiro

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mauricele Baldo.pdf: 791599 bytes, checksum: bae07fffa63ea2af6fe2884dfd9c37e6 (MD5) Previous issue date: 2008-03-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / One of the focus of the alternative agriculture is the disease control, wich include biological control, the induction of resistance in plants and the use of the natural products with antimicrobial activity and /or resistance induction. Basidiocarps extracts have been studied for disease control. This research focused the avaliation of the fungitoxic effect in the aqueous extracts of the mycelium (EAM), basidiocarps (EAB) and filtrate of culture (EAF) of Pycnoporus sanguineus, in the Colletotrichum lindemuthianum, and avaliate the control of anthracnose in the bean plant by theses extracts and the resistance induction through determination of activity of the enzyme peroxidase (POX), polyphenol oxidase (PFO), phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and β-1,3 glucanase, besydes detection in situ of the reatives oxygen species (ROS) H2O2 and O2-. For the tests in vitro were utilized the extracts on concentration 1, 5, 10, 15 and 20%, avaliating the micelial growth and the germination of the C. lindemuthianum spores. In order to severity tests and determination of enzyme, extracts on concentrations 5 and 10% were applayed on the 1st trifoliate leaves of bean plant, three days before of the inoculation of the pathogen (1x104 conidia mL-1) on 1st s and 2nd s leaves. The same procediment was adopt for detection of ROS, instead utilized just EAM 5%, water, acibenzolar-S-methyl (150 mg i.a.L-1) and azoxystrobin fungicide (4 g. i. a. L-1). For the enzyme determination was amostrated the 1st s and 2nd s leaves at the moment of treatment and after 3, 6, 9, 12, 27 days. For ROS was made avaliations to 48, 96 and 192 hours after the inoculation. The results indicated direct antimicrobial activity of the extracts, having these extracts inhibited the germination, but they didn t inhibited the micelial growing. On plants, the EAF 5 e 10%, reduced 69 and 67% respectively, the severity on the 1st s leaves, while the fungicide and ASM reduced 87 and 76% respectively. On 2nd s leaves the more significative reductions were observed to EAB 10% and EAF 5 and 10%, with reduction of the severity of 63%. This reduction on severity can be associated with POX, PAL and β-1,3 glucanase what apresented alterations on the especific activity, what wasn t observed to PFO. The formation of H2O2 wasn t detected, on 48 and 96 hours. In 192 hours the EAB treatment apresented citoplasmatic desorganization and collapse of epidermic cell similar to the water control. In times 48 and 96 hours there was of the O2- in the EAM, EAB and ASM treatment. In 192 all of the treatments apresented reaction to O2- in epidermic cells and the mesophyll. This results apoint the potencial of P. sanguineus extracts for the control of in the anthracnose in bean plants, that can occurr by induction of the local and systemic resistance an/or antimicrobial direct activity / Um dos enfoques da agricultura alternativa é o controle alternativo de doenças, o qual inclui o controle biológico, a indução de resistência em plantas e o uso de produtos naturais com atividade antimicrobiana e/ou indutora de resistência. Extratos de basidiocarpos têm sido estudados no controle de doenças. Este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito fungitóxico dos extratos aquosos de micélio (EAM), basidiocarpo (EAB) e filtrado de cultura (EAF) de Pycnoporus sanguineus, sobre Colletotrichum lindemuthianum; e avaliar o controle da antracnose em feijoeiro por estes extratos, bem como a indução de resistência pela determinação da atividade das enzimas peroxidase (POX), polifenoloxidase (PFO), fenilalanina amônia-liase (FAL) e β-1,3 glucanase; além de detecção in situ das espécies reativas de oxigênio (ERO s) H2O2 e O2-. Para os ensaios in vitro foram utilizados os extratos nas concentrações 1, 5, 10, 15 e 20%, avaliando-se o crescimento micelial e germinação de esporos de C. lindemuthianum. Para os ensaios de severidade e determinação das enzimas, extratos nas concentrações 5 e 10% foram aplicados nas 1as folhas trifoliadas de feijoeiro, três dias antes da inoculação do patógeno (1x104 conídios mL-1) realizada nas 1as e 2as folhas. O mesmo procedimento foi adotado para detecção das ERO s, porém utilizados apenas EAM e EAB 5%. Água, acibenzolar-S-metil (75 mg i. a. L-1) e fungicida azoxystrobin (4 g i. a. L-1) foram utilizados como tratamentos controle para todos os ensaios. Para a dosagem das enzimas foram amostradas as 1as e 2as folhas no momento dos tratamentos e após 3, 6, 9, 12 e 27 dias. Para ERO s foram feitas avaliações às 48, 96 e 192 h após inoculação. Os resultados indicaram atividade antimicrobiana direta dos extratos, tendo estes inibido a germinação, porém não apresentaram efeito inibitório do crescimento micelial. Nas plantas, os EAF 5 e 10%, reduziram 69 e 67%, respectivamente, a severidade nas 1as folhas, enquanto o fungicida e ASM reduziram 87 e 76%, respectivamente. Nas 2as folhas as maiores reduções foram observadas para EAB 10% e EAF 5 e 10%, com redução média da severidade de 63%. Esta redução na severidade pode estar associada com POX, FAL e β-1,3 glucanase que apresentaram alterações na atividade específica, o que não foi observado para PFO. Não foi detectada formação de H2O2 nas 48 e 96 h. Em 192 h os tratamentos EAB e EAM apresentaram desorganização citoplasmática e colapso das células epidérmicas semelhantes ao controle água. Nos tempos 48 e 96 h houve formação de O2- nos tratamentos EAM, EAB e ASM. Em 192 h todos os tratamentos apresentaram reação para O2- nas células epidérmicas e do mesófilo. Estes resultados indicam o potencial dos extratos de P. sanguineus no controle da antracnose do feijoeiro, que pode ocorrer tanto por indução de resistência local e sistêmica e/ou atividade antimicrobiana direta

O Brasil é o maior produtor e exportador de suco de laranja, sendo esta uma das mais importantes atividades econômicas para o país. Os frutos são afetados pela mancha preta dos citros, causada por Guignardia citricarpa, que deprecia comercialmente os frutos, provoca queda prematura e eleva o custo de produção. Medidas alternativas ao controle químico clássico vêm sendo estudadas e, neste contexto, insere-se a indução de resistência. O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos in vitro da quitosana e radiação UV-C sobre o crescimento micelial, germinação e formação de apressórios por G. citricarpa e a ação destes agentes abióticos no controle da doença em laranjas pós-colheita, sob armazenamento ambiente e refrigerado, estudando-se também mecanismos de resistência ativados no tecido vegetal em resposta ao tratamento de melhor eficiência. Para tanto, foram utilizadas as concentrações de 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 3,0% de quitosana e as doses de 0,52; 1,04; 3,13; 10,44 e 15,66 kJ.m-2 da radiação UV-C. A quitosana inibiu o crescimento micelial do fungo e estimulou a germinação e formação de apressórios, os quais se mostraram morfologicamente alterados. A UV-C não inibiu o crescimento micelial, porém a maior dose ocasionou o menor crescimento. Para os experimentos in vivo, laranjas foram coletadas, lavadas, sanitizadas com hipoclorito e posteriormente tratadas. As concentrações de 0,5, 1,0 e 2,0% de quitosana e a dose de 7 kJ m-2 da UV-C apresentaram melhor resultado em laranjas ?Valência? na redução dos sintomas. Análise da cor da casca dos frutos irradiados revelou que houve leve escurecimento. Os fungicidas tiabendazol e imazalil não controlaram a doença em laranjas ?Pêra Rio?, porém, obteve-se menos lesões nos frutos tratados com os fungicidas em combinação com quitosana, tanto em temperatura ambiente quanto em refrigeração. Análises da cor da casca indicaram amarelecimento e não houve alterações significativas nos teores de sólidos solúveis, acidez titulável, pH, vitamina C e ratio. Nos ensaios com quitosana, tiabendazol e UV-C, a quitosana apresentou melhor controle da doença, aplicada isoladamente ou em conjunto com o fungicida e UV-C, em temperatura ambiente ou refrigeração. A quitosana e a proteína harpina apresentaram controle semelhante e, em comparação com o ácido cítrico, a quitosana ocasionou melhor controle em laranjas ?Valência?. Para análises bioquímicas, amostras de flavedo foram homogeneizadas em de tampão acetato, com posterior centrifugação, coletando-se o sobrenadante. Para as reações enzimáticas, foram utilizados os reagentes CM-chitin-RBV, CMCurdlan- RBB, guaiacol, catecol e L-fenilalanina para quitinase, glucanase, peroxidase, polifenoloxidase e fenilalanina amônia-liase, respectivamente. Para a determinação de fenóis, amostras do flavedo foram homogeneizadas em metanol acidificado e a dosagem feita com o reagente Folin-Ciocalteau. A quitosana induziu o aumento da atividade das enzimas nas primeiras 24 h após o tratamento, sendo neste tempo detectada a maior atividade. Não houve atividade de fenilalanina amônia-liase, bem como acúmulo de fenóis. Finalmente, fica evidenciado que quitosana e a UV-C apresentaram efeito in vitro sobre G. citricarpa, porém somente a quitosana exibiu potencial no controle da mancha preta em laranja pós colheita. / Brazil is the biggest producer and exporter of orange juice, and this is one of the most important economical activities for the country. The fruits can be affected by the citrus black spot, disease caused by the fungus Guignardia citricarpa, which depreciates then commercially, causes premature fall and increases the production cost. Alternative measures to the chemical control are being studied and, in this context, resistance induction can be considered. The present work had as objective evaluate the in vitro effects of chitosan and UV-C radiation on mycelial growth, germination and apressorium formation by G. citricarpa and the action of the abiotic agents on controlling the disease on postharvest oranges, under room temperature and refrigeration storage, also studying the mechanisms of resistance in the plant tissue in response to the better treatment. The chitosan concentrations were 0, 0.5, 1.0, 1.5; 2.0 and 3.0% and the UVC doses were 0.52, 1.04, 3.13, 10.44 and 15.66 kJ.m-2. Chitosan inhibited mycelial growth and stimulated the germination and the apressorium formation that were morphologically abnormal. UV-C did not inhibited mycelial growth, but reduced it at the highest dose used. For the in vivo experiments, oranges were collected, sanitized with hypochlorite and treated. Chitosan concentrations of 0.5, 1.0 and 2.0% and the UV-C dose of 7 kJ m-2 exhibited better results in ?Valência ? oranges. Analyses of peel color of irradiated fruits revealed a light browning. The fungicides thiabendazole and imazalil did not control the disease in ?Pêra Rio ? oranges, but fewer lesions appeared on fruits treated with the fungicides in association with chitosan, under room temperature and refrigeration. Color analysis of peel indicated yellowing and no significant differences among soluble solids, titratable acidity, pH vitamin C and ratio. In the chitosan, thiabendazole and UV-C assays, there was a better control of lesion appearing by treatment with chitosan, applied alone or in association with fungicide and UV-C, at room temperature or refrigeration. Chitosan and the harpin protein were similar on the controlling of the disease and, in comparison to the citric acid, chitosan presented better control on ?Valência? oranges. For biochemical analysis, flavedo samples were homogenized in acetate buffer, centrifuged, and the supernatant collected. The reagents used were CM-chitin-RBV, CM-Curdlan-RBB, guaiacol, cathecol and L-phenylalanine for chitinase, glucanase, peroxidase, polyphenoloxidase and phenylalanine ammonia-lyase, respectively. For phenol determination, flavedo was homogenized in acidified methanol and the evaluation was made with Folin-Ciocalteau. Chitosan increased enzyme activities in the first 24 h after treatment, with the highest activity in that time. Activity of phenylalanine ammonia-lyase was not detected, well as absent of phenolic compounds accumulation. Chitosan and UV-C exhibited in vitro effect on G. citricarpa, however, only chitosan showed potential on the control of black spot in postharvest oranges.

Resumo: A traça-das-crucíferas (Plutella xylostella) é uma praga que ataca culturas de brássicas, causando enormes prejuízos econômicos aos agricultores. O aparecimento de populações resistentes a inseticidas tem dificultado seu manejo, fazendo-se necessário a busca por alternativas de controle que viabilizem a economia do custo de produção, preservando o ambiente de inseticidas químicos em altas doses. As plantas possuem um mecanismo constitutivo de resistência que atua na sua defesa frente às diferentes adversidades bióticas e abióticas, o que representa altos gastos metabólicos. O mecanismo de resistência pode ser melhorado com a indução de resistência por um ou mais elicitores, como é o caso das bactérias promotoras de crescimento. O objetivo deste estudo foi detectar sequências gênicas expressas em resposta à indução de resistência de repolho à traça das crucíferas. A bactéria utilizada como indutora das respostas de defesa foi a Kluyvera ascorbata devido à ação já descrita anteriormente com repolho e traça-das-cruciferas, onde ficou evidente sua influência na defesa contra essa praga. Por meio do sequenciamento de cDNA foi possível identificar uma significativa alteração no metabolismo de plantas que abrigavam esta bactéria, suprimindo da ação de muitos genes, durante o processo de defesa da planta contra o estresse causado pela injúria de lagartas de P. xylostella / Abstract: The diamondback moth Plutella xylostella is a pest that attacks brassics causing great economic losses to the growers. The rise of resistant populations to the chemical insecticides imposes difficulties on this pest management, so the search of other ways to overcame this situation became quite relevant so as to help to reduce production costs and at the same time avoiding the use of high dosage of the commonly used pesticides. Plants exhibit a constitutive resistance mechanism that acts favoring their defense towards biotic and abiotic stress situations, which involves high metabolic energetic challenges. The defense mechanisms may be improved with the induction of resistance by a number of different elicitors, such as the use of plant growth promoting bacteria. The aim of the present work was to detect plant gene sequences in response to cabbage resistance induction against the diamondback moth. Kluyvera ascorbata was used to induce the plant's growth promotion elicitor due to previously described influence. Analyzing DNA sequencing procedures from cDNA library samples, it was possible to observe drastic differences on the plants metabolism when such bacteria was used, either by suppressing the action of several genes while the plant's defense mechanisms was in action against injuries caused by P. xylostella larvae / Orientador: Manoel Victor Franco Lemos / Coorientador: Robson Thomaz Thuler / Banca: Janete Apparecida Desidério Sena / Banca: João Roberto Spotti Lopes / Mestre

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No. of bitstreams: 1 spadotti_dma_dr_bot.pdf: 2776894 bytes, checksum: 521e42c78bd8f798f23c6ae2a7752aa2 (MD5) Previous issue date: 2016-04-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As cultivares de pimentão (Capsicum annuum L.) são geralmente suscetíveis à infecção por vírus, destacando-se no Brasil espécies dos genêros Potyvirus, Begomovirus, Cucumovirus, Tobamovirus e Tospovirus, sendo que deste último gênero predominam as espécies GRSV (Groundnut ring spot virus) e TCSV (Tomato chlorotic spot virus) no Estado de São Paulo. Devido ao amplo número de hospedeiros infectados pelos tospovírus e a ineficiência do controle químico na transmissão do vírus pelo vetor (tripes), é imprescindível o manejo integrado da doença. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar o uso do defensivo químico piraclostrobina + metiram (P +M) como forma alternativa de controle dos tospovírus GRSV e TCSV no híbrido de pimentão Dahra RX, avaliando-se a produção quantitativa e qualitativa da planta e a influência do produto sobre a quantidade relativa de partículas virais do GRSV. Três experimentos foram realizados paralelamente, sendo dois em campo, dos quais um recebeu pré-tratamento pela aplicação de P + M (4 g. l -1) na bandeja. No experimento em estufa, o pré-tratamento consistiu pela aplicação de P + M (4 g. l -1) no transplante em 50% das plantas (total de 120 plantas). Os tratamentos foram constituídos da inoculação do vírus de forma natural no campo e via extrato vegetal em estufa aos 0, 15, 30, 45 dias após o transplantio (DAT) com ou sem aplicação de P + M (4.0 g. l -1) durante o cultivo. A infecção pelos vírus GRSV/TCSV foi confirmada por PTA- ELISA e a concentração viral via qPCR foi avaliada para as plantas cultivadas em estufa. No experimento realizado em estufa obteve-se 98% das plantas infectadas quando inoculadas via extrato vegetal, enquanto 25% das plantas no campo foram infectadas naturalmente por GRSV ou TCSV, porém com predominância do GRSV. A infecção de plantas deste híbrido pelas espécies GRSV e TCSV até os 45 dias após o transplante causaram prejuízos significativos na qualidade e quantidade de frutos produzidos. O uso do produto durante o cultivo deste híbrido não alterou os parâmetros de produção das plantas. Em condições de estufa, as mudas tratadas no transplantio com P + M apresentaram menor produção total, indicando que o modelo adotado de aplicação do produto não foi eficiente. A concentração viral do GRSV, aos 70 DAT não foi alterada com a utilização do produto, indicando pouco efeito deste na supressão do vírus e da doença. / The cultivars of pepper (Capsicum annuum L.) are usually susceptible to virus infection, especially by the species of the genus Potyvirus, Begomovirus, Cucumovirus, Tobamovirus and Tospovirus in Brazil. GRSV (Groundnut ring spot virus) and TCSV (Tomato chlorotic spot virus) are the main tospovirus species in São Paulo state. Due to the large host circle of tospovirus and inefficient chemical vector control (thrips) in the virus transmission, the integrated management of the disease is essential. Thus, the aim of this study was to evaluate the use of chemical defensive Pyraclostrobin + Metiram (P + M) as an alternative form of control of tospoviruses GRSV and TCSV in the pepper hybrid Dahra RX, assessing the quantitative and qualitative production of the plant and the product's influence on the concentration of viral particles of GRSV. Three experiments were carried out in parallel, two in the field, one which received pre-treatment by applying P + M (4 g. L -1) on the tray. In the greenhouse experiment, the pre-treatment consisted by application of P + M (4 g. L -1) in the transplanting of 50% of the plants (total 120 plants). The treatments consisted of inoculation of the virus naturally in the field and sap transmission in greenhouse at 0, 15, 30, 45 days after transplanting (DAT) with application or not of P + M (4.0 g. L -1) during cultivation. Infection by GRSV / TCSV virus was confirmed by PTA-ELISA and virus concentration was evaluated by qPCR for plants in greenhouse. In the greenhouse experiment was obtained 98% of infected plants sap transmitted, while 25% of the plants in the field were naturally infected by GRSV or TCSV, but with predominance of GRSV. Infection of plants of this hybrid by GRSV and TCSV until 45 days after transplantation caused considerable damage in the quality and quantity of fruits produced. The use of the product during the cultivation of the hybrid did not affect the production parameters. Under greenhouse conditions, the seedlings treated at transplanting with P + M had lower total production, indicating that the model adopted for the application of the product was not efficient. The viral concentration of GRSV at 70 DAT was not altered by the use of the product, indicating little effect of suppression of the virus and disease.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-25Bitstream added on 2014-06-13T19:54:05Z : No. of bitstreams: 1 crialesi_pcb_me_jabo.pdf: 717305 bytes, checksum: ddf9d322f3798935db316f769791eac7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A traça-das-crucíferas (Plutella xylostella) é uma praga que ataca culturas de brássicas, causando enormes prejuízos econômicos aos agricultores. O aparecimento de populações resistentes a inseticidas tem dificultado seu manejo, fazendo-se necessário a busca por alternativas de controle que viabilizem a economia do custo de produção, preservando o ambiente de inseticidas químicos em altas doses. As plantas possuem um mecanismo constitutivo de resistência que atua na sua defesa frente às diferentes adversidades bióticas e abióticas, o que representa altos gastos metabólicos. O mecanismo de resistência pode ser melhorado com a indução de resistência por um ou mais elicitores, como é o caso das bactérias promotoras de crescimento. O objetivo deste estudo foi detectar sequências gênicas expressas em resposta à indução de resistência de repolho à traça das crucíferas. A bactéria utilizada como indutora das respostas de defesa foi a Kluyvera ascorbata devido à ação já descrita anteriormente com repolho e traça-das-cruciferas, onde ficou evidente sua influência na defesa contra essa praga. Por meio do sequenciamento de cDNA foi possível identificar uma significativa alteração no metabolismo de plantas que abrigavam esta bactéria, suprimindo da ação de muitos genes, durante o processo de defesa da planta contra o estresse causado pela injúria de lagartas de P. xylostella / The diamondback moth Plutella xylostella is a pest that attacks brassics causing great economic losses to the growers. The rise of resistant populations to the chemical insecticides imposes difficulties on this pest management, so the search of other ways to overcame this situation became quite relevant so as to help to reduce production costs and at the same time avoiding the use of high dosage of the commonly used pesticides. Plants exhibit a constitutive resistance mechanism that acts favoring their defense towards biotic and abiotic stress situations, which involves high metabolic energetic challenges. The defense mechanisms may be improved with the induction of resistance by a number of different elicitors, such as the use of plant growth promoting bacteria. The aim of the present work was to detect plant gene sequences in response to cabbage resistance induction against the diamondback moth. Kluyvera ascorbata was used to induce the plant’s growth promotion elicitor due to previously described influence. Analyzing DNA sequencing procedures from cDNA library samples, it was possible to observe drastic differences on the plants metabolism when such bacteria was used, either by suppressing the action of several genes while the plant’s defense mechanisms was in action against injuries caused by P. xylostella larvae