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Atividades biológicas e perfil proteomico do muco produzido pelo zoantídeo Palythoa caribaeorumSILVA, Marllyn Marques da 28 March 2016 (has links)
Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-06-18T22:46:41Z
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Previous issue date: 2016-03-28 / FACEPE / O ecossistema marinho é capaz de proporcionar uma enorme diversidade de biomoléculas com potencial terapêutico. Neste ambiente altamente competitivo, os organismos precisam de barreiras químicas para se proteger reduzindo ou evitando contaminação por microrganismos. O Palythoa caribaeorum é um zoantídeo (Cnidário) que produz um muco, conhecido popularmente como baba de boi, cuja principal função é proteger a colônia contra dessecação e patógenos. O muco ainda é pouco conhecido quanto as suas propriedades físico-químicas e biológicas. Esse fato vem despertando o interesse por estudos que desvendem suas propriedades biológicas, bem como identifique a sua composição. Diante do exposto, o presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades biológicas do muco e determinar seu perfil proteomico. Para tal, as atividades biológicas foram testadas contra as linhagens de células S-180, Hela, MCF7, fibroblastos e J774 (macrófagos) através do método MTT. Ainda, a citotoxicidade do muco também foi avaliada em hemácias humanas e a sua capacidade antioxidante testada. O perfil proteomico foi determinado pela eletroforese 2-DE seguido da espectrometria de massa (MALDITOF). Os resultados demonstraram que o muco não exibiu ação citotóxica contra as células testadas, mas o extrato proteico apresentou viabilidade abaixo de 50 % nas linhagens de MCF-7 e S-180. A linhagem celular J774 tratada com o extrato proteico apresentou IC50 de 6,9 μg/mL. Entretanto, no tratamento de fibroblastos com o extrato proteico (6,25 μg/mL) foi visualizado crescimento celular. Na avaliação antimicrobiana o extrato proteico apresentou CMI de 250 μg/mL para Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis. O muco não apresentou atividade hemolítica e foi capaz de reduzir em 50 % do radical ABTS. O estudo proteomico pela eletroforese 2-DE, mostrou a presença de 76 spots, dos quais 14 foram identificados pela MALDI-TOF. São estas, “glutamyltRNA synthetase”, “Hypothetical protein PFICI_09699” e “Hypothetical protein NECAME_18605”, “Proteasome subunit aloha type-1”, “PAS domain S-box protein, parcial”, “Uroporphyrinogen-III synthase”, “Beta-2-microglobulin”, “Zinc metalloproteinase-disintegrin-like”, “mitochondrial import inner membrane tranlocase subunit Tim 10”, “deoxynucleoside triphosphate triphosphohydrolase SAMHD1-LIKE isoform X2”, “Zinc Finger Protein 654”, “Deleted in malignant brain tumors 1 proteinlike”, LIN-52. “Killer protein”. Desse modo, conclui-se que o extrato proteico apresentou proteínas com potencial ação antibiótica, cicatrizante e antitumoral. Portanto, o muco produzido pelo P. caribaeorum se apresenta como uma fonte rica em matéria-prima para isolamento de moléculas com importante potencial biotecnológico e farmacêutico. / The marine ecosystem is capable of providing a diversity of biomolecules that can be used for the treatment of diseases. In this highly competitive environment, organizations need chemical barriers to protect reducing or avoiding contamination by microorganisms. The Palythoa caribaeorum is a zoanthid (Cnidarian) that produces mucus, popularly known as baba ox, has main function to protect the colony against desiccation and against pathogens. Mucus is still unknown as their physicochemical and biological properties. Its features proposes a relevant study its biological properties as well as the isolation of substances. The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial and cytotoxic activity of mucus and its protein extract against tumor cell lines such as S-180, Hela, MCF7, Fibroblasts and J774 (macrophages) using the MTT method. The cytotoxicity of mucus was also evaluated in human red blood cells and also for antioxidant capacity. Mucus showed no cytotoxic activity against the tested cells, but the protein extract showed viability below 50% in lines MCF-7 and S-180. The J774 strain treated with the protein extract showed IC50 of 6.9 µg/mL. For fibroblast cells or mucus or the protein extract showed cytotoxicity, noting that the protein extract showed an increase of cells in 6.25 µg / ml. The protein extract showed MIC of 250 µg/mL for Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. Mucus showed no hemolytic activity and was able to reduce by 50% the ABTS radical. The proteomic study by 2-DE electrophoresis showed the presence of spots 76, 14 of which were identified by MALDI-TOF. These, “glutamyl-tRNA synthetase”, “Hypothetical protein PFICI_09699” and “Hypothetical protein NECAME_18605”, “Proteasome subunit aloha type-1”, “PAS domain S-box protein, parcial”, “Uroporphyrinogen-III synthase”, “Beta-2-microglobulin”, “Zinc metalloproteinasedisintegrin-like”, “mitochondrial import inner membrane tranlocase subunit Tim 10”, “deoxynucleoside triphosphate triphosphohydrolase SAMHD1-LIKE isoform X2”, “Zinc Finger Protein 654”, “Deleted in malignant brain tumors 1 protein-like”, LIN-52. “Killer protein”. Thus, it is concluded that the protein extract showed proteins with potential antibiotic action, healing and antitumor. Therefore, the mucus produced by P. caribaeorum presents itself as a rich source of raw material for isolation of molecules with important potential biotech and pharmaceutical.
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Pirimidinas: de potenciais fármacos a marcadores fluorescentesMONTE, Zenaide Severina do 15 July 2016 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-07-13T14:09:49Z
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Previous issue date: 2016-07-15 / CAPES / Compostos heterocíclicos do tipo pirimidina são conhecidos pela enorme riqueza de
seus potenciais biológicos e farmacológicos. Numerosas reações de
heterociclização que permitem a obtenção dessa classe de compostos são
igualmente reconhecidas, devido à diversidade de atividades e do conhecimento
prévio de inúmeras viabilidades sintéticas. As modificações estruturais obtidas na
busca da otimização das rotas sintéticas conferem às novas moléculas diferentes
propriedades físicas e alteram a reatividade das moléculas, acarretando em
mudanças na distribuição nas células e nos tecidos. Essas discretas modificações
estruturais podem revelar efeitos biológicos que haviam estado latentes ou
eclipsados pelos efeitos colaterais do composto protótipo. Sendo assim, o presente
trabalho apresenta a síntese por método convencional dos derivados da pirimidina
3a-q e 5o-q. Estes compostos foram avaliados quanto às propriedades duais:
Antimicrobiana e Fotoluminescência, estas apresentaram resultados promissores,
podem atuar como boas sondas fluorescentes. Foram realizados também estudos
Espectrofotométricos em diferentes solventes além de determinarmos o Cálculo do
Orbital Molecular de Fronteira nesta série. Realizou-se também a nanoencapsulação
em lipossomas para o composto 3o. Obtivemos também p-arilamidinas 3a-j por
método convencional e avaliamos as propriedades Antimicrobiana e Citotóxica, as
quais apresentaram resultados significativos. Realizamos a síntese dos derivados
pirimidínicos 3a-f e 6a-f pelo método em Irradiação em micro-ondas, em fase sólida
e em solução, respectivamente. Estudamos também para estes as propriedades
Antimicrobiana e Antioxidante, cujos os resultados foram satisfatórios. Foram obtidos
bons rendimentos para todos os compostos obtidos. Um estudo inédito de RMN
bidimensional, COSY, HSQC e HMBC foram aplicados às pirimidinas foi realizado,
proporcionando a caracterização estrutural destes compostos. Os resultados obtidos
apresentaram significativa potencialidades biológicas, farmacológicas e fotofísicas. / Heterocyclic compounds of pyrimidine are known for rich biological and
pharmacological potential. A number of heterociclic reactions that enable the
obtention of this class of compounds are also recognized, due to the diversity of
activities and prior knowledge of their various synthetic viabilities. The structural
modifications obtained in search for the best synthetic routes confered different
physical properties on the new molecules and altered the reactivity of the molecules,
resulting in changes in the distribution in cells and tissues. These discrete structural
changes may reveal biological effects that may have been latent or eclipsed by the
side effects of the compound prototype. This work presents the synthesis by
conventional method of derivatives from pyrimidine 3a-q and 5o-q. These
compounds were evaluated for dual properties: antimicrobial and
photoluminescence. They showed promising results can act as fluorescent probes.
Spectroscopic studies were carried out with different solvents and the Frontier
Molecular Orbital calculation for this series was determined. Nanoencapsulation of
liposomes for the compound 3o was prepared. The conventional method was used
to obtain 3a-j p-arilamidinas. Results were significant for the antimicrobial and
cytotoxic properties. Finally, the synthesis of pyrimidines derivatives 3a-f and 6a-f
by a new method, solid phase micro-wave and in solution, respectively was carried
out. We have studied both the Antimicrobial and Antioxidant properties with
satisfactory results. Good yields were obtained for all compounds obtained. New
studies of two-dimensional NMR, COSY, HSQC and HMBC were performed besides
the characterization of the compounds by standard methods. The results show that
the compounds obtained have great biological, pharmacological potential and
Photophysical.
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Indicadores biológicos de qualidade do solo em uma cronossequência sob sistema plantio direto na Amazônia OrientalHUNGRIA, Letícia Cunha da January 2018 (has links)
The soil management systems and the time of implantation provoke changes in the biological properties of the soil, considering the dynamic nature of the soil microorganisms. In this context, the study on biological indicators provides inputs for assessing the impact of systems on soil, which is related to the processes that occur in the ecosystem and which depends on long-term sustainability. The objective of this study was to evaluate the changes in biological indicators due to the time of implantation of the no - tillage (NT) in the Eastem Amazon. The study was carried out in the city of Paragominas (PA), where arcas under NT were selected with 4 (NT4), 6 (NT6), 10 (NT10) and 12 (NT12) years, an arca under conventional system (CS) another under native vegetation (NV). Samples were collected at 0-5, 5-10 and 10-20 cm depths of a very clayey Yellow Latosol at two seasons of the year (rainy and dry). A completely randomized design was used, in subdivided plots, with four replications. The values of NLoL;ii, Nmic, NO3" and NH/ in the soil were quantified and the mineralization (SMR) and soil nitrification (SNR) rates were evaluated and the Nmic: Ntotai ratio was evaluated. In addition, organic carbon (OC), C-MSB and basal respiration of the soil were quantified. The
results showed that the Ntotai was slightly altered with the increase of the NT time, showing no difference between the evaluated ages. In soils under NT, Nmic tends to be increased, preferentially, in the superficial layer (0-5 cm), NT10 and NT12 being the largest contributors of this fraction in the soil. In general, NT increased N-NO3" and N-NHf1" leveis in the soil in relation to CS, with emphasis on NT10 and NT12, which were similar to NV, evidencing the influence of system time on N-cycling. The time of implantation of up to 12 years of NT was not sufficient to cause significant changes of SOC in the soil. The microbial C content was
similar among ali soils under NT. The NT over time caused small changes in the biological attributes of the soil, suggesting that over time the system can promote the soil similarity to its original conditions after conversion to production systems. / Os sistemas de manejo do solo e o tempo de implantação provocam mudanças nas propriedades biológicas do solo, considerando a natureza dinâmica dos micro-organismos do solo. Nesse contexto, o estudo sobre os indicadores biológicos fornece subsídios para a avaliação do impacto dos sistemas sobre o solo, o qual está relacionado aos processos ocorrentes no ecossistema e que depende da sustentabilidade em longo prazo. Objetivou-se avaliar as transformações ocorridas nos indicadores biológicos em razão do tempo de implantação do sistema plantio direto (SPD) na Amazônia Oriental. O estudo foi realizado no Município de Paragominas (PA), onde selecionaram-se áreas sob SPD com 4 (SPD4), 6 (SPD6), 10 (SPD10) e 12 (SPD12) anos, uma área sob sistema convencional (SC) e outra sob vegetação nativa (VN). Foram coletadas amostras nas profundidades de 0-5, 5-10 e 10-20 cm, de um Latossolo Amarelo de textura muito argilosa, em duas épocas do ano (período chuvoso e seco). Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado, em parcelas subdivididas, com quatro repetições. Foram quantificados os teores de Ntotai, Nmic, NO3" e NFLT1" no solo e foram estimadas as taxas mineralização (TLM) e nitrificação do solo (TLN) e avaliada a relação Nmic:Ntotai. Em adição, foram quantificados o carbono orgânico (CO), C-BMS e a respiração basal do solo. Os resultados mostraram que o Ntotai foi pouco alterado com o incremento do tempo de SPD, não apresentando diferença entre as idades avaliadas. Nos solos sob SPD, o Nmic tende a ser incrementado, preferencialmente, na camada superficial (0-5 cm), sendo os sistemas SPD10 e SPD12 os maiores contribuintes dessa fração no solo. De maneira geral, O SPD incrementou maiores teores de N-NO3" e N-NH4"1" no solo em relação ao SC, com destaque para o SPD10 e SPD12 que foram semelhantes à VN, evidenciando a influência do tempo do sistema sobre a ciclagem do N. O tempo de implantação de até 12 anos de SPD não foi suficiente para provocar mudanças significativas de COT no solo. O teor de C microbiano foi semelhante entre todos os solos sob SPD. O SPD ao longo do tempo provocou pequenas alterações nos atributos biológicos do solo, sugerindo que ao longo do tempo o sistema pode promover ao solo a similaridade com as suas condições originais após a conversão para sistemas de produção.
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Nanocomplexos de európio com mesoiônicos 1,3-tiazólio-5-tiolato e bipiridina: avaliação estrutural, térmica e espectrométrica. / Nanocomplexes of europium with mesoionic 1,3-thiazolium -5-thiolate and bipyridine: structural, thermal and spectrometric evaluation.MOTA, Gabriela Brasileiro Campos. 24 May 2018 (has links)
Submitted by Emanuel Varela Cardoso (emanuel.varela@ufcg.edu.br) on 2018-05-24T18:03:23Z
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GABRIELA BRASILEIRO CAMPOS MOTA – TESE (PPGEP) 2014.pdf: 2208551 bytes, checksum: aefc619e6f9a0e4440ee264fa9431b59 (MD5)
Ficha Catalográfica - GABRIELA BRASILEIRO CAMPOS MOTA – TESE (PPGEP) 2014.pdf: 54437 bytes, checksum: c9ec775e575ff1f890b9adb61626fef7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T18:03:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2
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Previous issue date: 2014 / O estudo de nanomateriais tornou-se uma linha muito importante de pesquisa
em áreas como a física do estado sólido, química de estado sólido, engenharia
de materiais, ciências médicas e biotecnologia. As pesquisas envolvendo a
coordenação de íons lantanídicos ganham cada vez mais destaque na área
científica, devido suas propriedades luminescentes. Concomitantemente,
destacam-se os estudos científicos de compostos orgânicos que apresentam
propriedades biológicas, entre os quais se distinguem os compostos mesoiônicos, que apresentam características estruturais, que despertaram um interesse considerável dos investigadores envolvidos na área da Química Medicinal. Neste sentido, a possibilidade de coordenar e associar as propriedades de íons lantanídeos com compostos mesoiônicos, a fim de preservar as características estruturais destes, têm atraído a atenção de pesquisadores. Nesta perspectiva, o presente trabalho teve como objetivo sintetizar pós cristalinos da coordenação do íon európio lantanídeos com mesoiônico do grupo 1,3-tiazolio-5-tiolato e bipiridina, além de caracterizar o complexo Eu(MESO1)3 bipy e Eu(MESO2)3bipy, 2-(4-clorofenil)-3-metil-4-(4-metilfenil)-1,3-tiazólio-5-tiolato (MESO1) e 2-(4-clorofenil)-3-metil-4-fenil-1,3-tiazólio-5-tiolato (MESO2) e a 2,2-bipiridina (bipy). Partindo da reação entre os cloreto de európio,com os ligantes orgânicos, sob refluxo de aproximadamente seis horas os mesoiônicos como segundo ligante, sob agitação magnética e temperatura de 60ºC, foi obtido um pó cristalino de coloração avermelhada. Os resultados das temperaturas de fusão/decomposição dos ligantes quando comparadas aos complexos mostraram-se bastante diferentes, o que indica a formação de novas substâncias. O nanocomplexos de íons lantadínicos apresentaram resultados da análise elementar satisfatórios, comprovando a estequiometria (1:3:1). Os espectros de absorção na regiao do UV-visível apresentaram deslocamento e surgimento de novas bandas, o que confirma a
coordenação. A coordenação dos ligantes com o íons landanídicos ocorreu
através dos átomos de enxofre exocíclico (C-S-) dos mesoiônicos e dos átomos
de nitrogênio (C-N) da bipiridina, observados nos espectros de infravermelho.
Os espectros de emissão dos complexos mostram que a emissão não foi
potencializada pelo cátion. Os resultados dos difratogramas de raios-x dos
complexos apresentam o desaparecimento e surgimento de novos picos, bem
como, a variação de intensidade. As micrografias dos complexos confirmaram
a formação de aglomerados e evidenciaram a cristalinidade dos compostos.
Com base nas curvas termogravimétricas, as temperaturas de decomposição,
dentre os complexos sintetizados, o Eu(MESO2)3 bipy apresentou maior
estabilidade térmica. As curvas DSC dos complexos mostram um deslocamento dos picos sugestivo da formação de novas espécies. / The study of nanomaterials has become a very important line of research in
areas such as solid state physics, solid state chemistry, materials engineering, medical sciences and biotechnology. Research involving the coordination of lanthanide ions are gaining more prominence in science, because their luminescent properties. Conco mitantly, we highlight the scientific study of organic compounds that exhibit biological properties, among which we distinguish the mesoionic compounds that have structural features that have attracted considerable interest from researchers involved in the field of Medicinal Chemistry. In this sense, the ability to coordinate and link the properties of lanthanide ions with mesoionic compounds, in order to preserve the structural characteristics of these have attracted the attention of
researchers. In this perspective, the present study aimed to synthesize crystalline powders of europium lanthanide ion coordination with the group mesoionic 1,3-thiazolium -5-thiolate and bipyridine, besides characterizing the complex I (MESO1) 3bipy and I (MESO2) 3bipy 2 - (4-chlorophenyl)-3-methyl-4-(4-methylphenyl) -1,3-thiazolium -5-thiolate (MESO1) and 2 - (4-chlorophenyl)-3-methyl-4-phenyl- 1,3-thiazolium -5-thiolate (MESO2) and 2,2-bipyridine (bipy). Leaving the reaction between europium chloride with organic ligands under reflux for about six hours as the mesoionics second linker, under magnetic stirring and temperature of 60 º C, was obtained a crystalline powder reddish. The results of melting / decomposition of binders compared to the complexes were quite different, indicating the formation of new substances. The nanocomplexos of lantadínicos ions showed satisfactory results of elemental analysis, confirming the stoichiometry (1:3:1). The absorption spectra in the UVvisible region showed displacement and the appearance of new bands, confirming coordination. The coordination of the ligands with landanídicos ions occurred through the exocyclic sulfur atoms (CS-) of mesoionics and nitrogen atoms (CN) of bipyridine observed in the infrared spectra. Emission spectra of the complexes show that the issue was not potentiated by cation. The results of x-ray diffraction patterns of the complexes show the disappearance and appearance of new peaks and the intensity variation. The micrographs confirmed the formation of the complexes and clusters showed the crystallinity of the compounds. Based on the thermogravimetric curves, the decomposition temperatures, among the synthesized complexes, I (MeSO2) 3bipy showed higher thermal stability. The DSC curves of the complexes show a shift of the
peaks suggestive of the formation of new species.
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Pólen apícola desidratado: composição físico-química, qualidade microbiologica, compostos fenólicos e flavonoides, capacidade antioxidante e origem botânica / Dehydrtated bee pollen: physicochemical, microbiological quality, phenolic and flavonoids compounds, antioxidant and botanical origin.Arruda, Vanilda Aparecida Soares de 10 October 2013 (has links)
O pólen apícola, produto da aglutinação do pólen das flores com néctar e substâncias salivares das abelhas, tem sido promovido como suplemento da dieta humana por apresentar propriedades nutricionais e bioativas. Sessenta e duas amostras de pólen apícola desidratado foram avaliadas para as análises de compostos fenólicos, flavonoides, atividade antioxidante por três métodos (DPPH, sistema β-caroteno e ORAC), origem botânica, qualidade comercial (umidade, cinzas, lipídeos, proteínas e carboidratos) e sanitária (bolores e leveduras, aeróbios mesófilos, coliformes totais, E.coli, clostrídios sulfito redutores e S.aureus.), além da atividade antimicrobiana (Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus). Os valores obtidos para compostos fenólicos e flavonoides totais variaram de 12,60 a 84,22 mg GAE/g de pólen apícola (GAE: equivalentes em ácido gálico) e 1,90 a 36,85 mg de quercetina/g de pólen apícola respectivamente. O EC50, determinado pelo método do DPPH, variou de 0,35 a 13,42 mg pólen apícola/mL de extrato. Os extratos de pólen apícola apresentaram valores entre 52,58 e 98,37 % para o método do β-caroteno. Quando quantificada por ORAC, a atividade antioxidante medida ficou entre 132,98 e 575,85 µmol eq. trolox/g pólen apícola. Na avaliação da qualidade comercial foram obtidos os valores de 3,06% a 8,12% para umidade, de 1,94 a 4,61%, para cinzas, de 3,35 a 10,96% para lipídeos; de 17,73 a 34,73% para as proteínas, de 11,86 a 25,71% e de 2,77 a 15,87% para os açúcares frutose e glicose, respectivamente. Verificou-se que a presença do pólen apícola inibiu o crescimento de todos os microrganismos estudados. Candida albicans foi a mais resistente e o Staphylococcus epidermides foi o mais sensível. Observou-se 36 tipos polínicos diferentes, destacando-se: Cocos nucifera sp., Mimosa scabrella (Benth.), Mimosa caesalpiniaefolia sp., Eucalyptus sp., Myrcia sp., Asteraceae, Poaceae., Euphorbiaceae e Brassica que ocorreram com maior frequência entre as amostras estudadas. Foram observadas somente correlações moderadas e fracas entre os tipos polínicos presentes e os parâmetros avaliados para as amostras desidratadas de pólen apícola. / Bee pollen, a product of agglutination of flower pollen with nectar and bee salivary substances, has been promoted as a dietary supplement for human because of its nutritional and bioactive properties. Sixty-two samples of dehydrated bee pollen were analyzed for phenolics, flavonoids, antioxidant activity using three methods (DPPH, βcarotene and ORAC), botanical composition, commercial quality (moisture, ashes, lipids, proteins, carbohydrates), hygiene (aerobic mesophiles, yeasts and moulds, coliforms, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and sulfite-reducing Clostridium), and antimicrobial activity (Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus). The obtained values for total phenolics ranged from 12.60 to 84.22 mg GAE/g bee pollen (GAE: gallic acid equivalents) while for total flavonoids ranged from 1.90 and 36.85 mg quercetin/g bee pollen. The EC50, determined by the DPPH method, ranged from 0.35 to 13.42 mg bee pollen/ml of extract. The bee pollen extracts showed values between 52.58 and 98.37% by β- carotene method. When measured by ORAC, antioxidant activity was between 132.98 and 575.85 µmols eq. trolox/g bee pollen. In the evaluation of commercial quality, the following results were achieved: 3.06% to 8.12% for moisture, 1.94 to 4.61% for ashes, 3.35 to 10.96% for lipids, 17.73 to 34.73% for proteins, from 11.86 to 25.71% and 2.77 to 15.87% for the carbohydrates glucose and fructose respectively. It was verified that the presence of the bee pollen inhibited the growth of all microorganisms studied. Candida albicans was the more resistant and Staphylococcus epidermides the more sensitive. Thirty-three pollen-types were identified mainly Cocos nucifera sp., Mimosa scabrella (Benth.) sp., Mimosa caesalpiniaefolia sp., Eucalyptus sp., Myrcia sp., Asteraceae sp., Poaceae sp., Euphorbiaceae sp. and Brassica sp. that occurred more frequently among the samples studied. It was observed only moderate and weak correlations between the pollen types present and the evaluated parameters for dehydrated samples of bee pollen
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Formulação à base de Epigalocatequina-3-galato, derivada do chá verde, desenvolvida para uso endodôntico: estudo físico-químico e biológico / Formulation based on Epigallocatechin-3-gallate, derived from green tea, developed for endodontic use: physicochemical and biological studyFerreira, Danielly Cunha Araújo 28 August 2015 (has links)
O chá verde, obtido da Camellia sinensis, é uma das bebidas mais populares em todo o mundo e, recentemente, tem sido foco de pesquisas científicas por apresentar efeitos benéficos na saúde geral. Estudos laboratoriais e epidemiológicos sugerem que, dentre os polifenóis que compõem o chá verde, a Epigalocatequina-3-galato (EGCG) é o mais bioativo e responsável por sua ação antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, inativadora de LPS bacteriano, anticarcinogênica, antitumoral, anti-angiogênica, anti-hipertensiva e reparadora tecidual, podendo atuar na prevenção e tratamento do câncer, doenças cardiovasculares, neurodegenerativas, hepáticas e renais. Em diversas doenças ósseas, a EGCG também desempenha um importante papel protetor, atuando na indução da mineralização e inibição da osteoclastogênese. No entanto, seus possíveis efeitos na inflamação e na reabsorção óssea associadas à lesão periapical ainda não foram avaliados. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver uma formulação para uso endodôntico à base de EGCG com propriedades físico-químicas e biológicas que permitam seu uso como curativo de demora entre sessões. As formulações testadas incluíram: EGCG diluída em água e diferentes concentrações de EGCG (1,25; 5; 10 e 20 mg/mL) veiculadas em polietilenoglicol 400 (PEG). O óxido de zinco foi utilizado como agente radiopacificador. Em função da possível degradação dos produtos fenólicos em função do ambiente e do tempo, uma solução obtida por meio do contato prolongado da EGCG com o dente também foi avaliada (produto da degradação). Inicialmente, foi realizada a caracterização físico-química da formulação de EGCG por meio de espectrofotometria em Ultravioleta/Visível (UV/Vis), em contato com soluções contendo zinco, óxido de zinco e acetato de zinco. Os estudos biológicos foram realizados para avaliar sua compatibilidade tecidual no tecido subcutâneo de camundongos, por meio da avaliação do extravasamento plasmático após 24 horas e da análise de aspectos macroscópicos e microscópicos aos 7, 21 e 63 dias após a inserção de tubos de polietileno contendo as formulações. Neste estudo, uma pasta a base de hidróxido de cálcio (Calen®) foi utilizada como controle. Na análise macroscópica, realizada por meio de fotografias, foram atribuídos escores aos parâmetros de ulceração epitelial, vascularização, necrose e edema. Na análise microscópica, realizada em microscopia de luz convencional e de fluorescência, foram avaliados os parâmetros de infiltrado inflamatório, vascularização, focos de abscessos, cápsula fibrosa, edema e necrose. Os escores dos resultados biológicos foram submetidos à análise estatística utilizando o teste do Qui-quadrado ou Exato de Fisher e para análise dos resultados quantitativos do extravasamento plasmático foi utilizada análise de variância (ANOVA), seguida pelo pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os estudos físico-químicos mostraram que a EGCG manteve seu comprimento de onda original em 274 nm quando associada ao óxido de zinco, tendendo à formação de uma banda de absorção em 325 nm. A associação da EGCG com acetato de zinco ocasionou diminuição da banda de absorção em 274 nm e formação de uma nova banda em 323 nm. Os estudos biológicos mostraram, nos parâmetros macroscópicos que, em todos os períodos avaliados, todas as formulações apresentaram compatibilidade tecidual, com ausência de ulceração epitelial, presença de leve necrose tecidual superficial, edema e vascularização, não havendo diferença significante entre os grupos avaliados (p>0,05). Na análise microscópica, em todos os períodos foi verificada ausência de focos de abscesso, edema e necrose e presença de suave ou moderado infiltrado inflamatório, cápsula fibrosa e neovascularização, semelhante entre todos os grupos (p>0,05). A avaliação dos espécimes corados com HE em microscopia de fluorescência favoreceu a visualização dos vasos sanguíneos e de fibras colágenas, constituindo metodologia adicional para esta finalidade. Na avaliação do extravasamento plasmático, o produto da degradação da ECGG apresentou extravasamento de corante azul de Evans por grama de tecido inferior (0,0514 ±0,0220 mg/mL) às demais formulações testadas (p<0,05). Conclui-se que a formulação tópica à base de EGCG, desenvolvida para uso endodôntico, apresenta propriedades físico-químicas estáveis e compatibilidade tecidual. / The green tea, obtained from the Camellia sinensis, is one of the most popular drinks in the world and has recently been in the focus of scientific research due its beneficial effects on general health. Laboratory and epidemiological studies suggest that, among the polyphenols found on green tea, the epigallocatechin-3-gallate (EGCG) is the most bioactive and responsible for its antioxidant, anti-inflammatory, anti-microbial, bacterial LPS inactivation, anticarcinogenic, anti-tumoral, anti-angiogenic, anti-hypertensive and tissue repair and can act in the prevention and treatment of cancer, cardiovascular disease, neurodegenerative, liver and kidney diseases. In several bone diseases, EGCG also plays a major protective role, acting in inhibition of osteoclastogenesis and induction of mineralization. However, their possible effects on inflammation and bone resorption associated to apical periodontitis have not been evaluated. Therefore, the aim of this study was to develop a EGCG based formulation for endodontic use with physicochemical and biological properties that allow its use as intracanal dressing between sessions. The formulations tested included: EGCG diluted in water and different concentrations of EGCG (1.25, 5, 10 and 20 mg/ml) diluted in polyethylene glycol 400 (PEG). Zinc oxide was used as radiopacifier agent. Due to the possible degradation of phenolic compounds as a function of the environment and time, a solution obtained through prolonged contact with the tooth EGCG was also evaluated (degradation product). Initially, physicochemical characterization of EGCG formulation was performed by ultraviolet spectrophotometry/Visible (UV/Vis) in contact with solutions containing zinc, zinc oxide and zinc acetate. Biological studies were conducted to evaluate its tissue compatibility with subcutaneous tissue of mice by means of the evaluation of plasma leakage after 24 hours and the examination of macroscopic and microscopic features at 7, 21 and 63 days after insertion of polyethylene tubes containing the formulations. In this study, a calcium hydroxide pastebase (Calen®) was used as control. The macroscopic analysis performed by means of photographs, assigned scores to epithelial ulceration, vascularization, necrosis and edema parameters. Microscopic examination performed in conventional and fluorescence microscopy assessed the inflammatory infiltrate, vascularization, abscesses spots, fibrous capsule, edema and necrosis parameters. The scores of biological results were statistically analyzed by the chisquare test or Fisher\'s exact and for the quantitative analysis of the results of plasma extravasation the analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey\'s post-test were used. The significance level was 5%. The physico-chemical studies showed that EGCG maintained its original wavelength at 274 nm when added to zinc oxide, tending to the formation of an absorption band at 325 nm. The combination of EGCG with zinc acetate led to decreased absorption band at 274 nm and formation of a new band at 323 nm. Biological studies showed, in the macroscopic parameters in all periods, that all formulations showed tissue compatibility, with no epithelial ulceration, presence of mild superficial tissue necrosis, edema and vascularization, with no significant difference between the groups (p > 0.05). On microscopic examination, in all periods was verified absence of abscess foci, edema and necrosis and the presence of mild or moderate inflammatory infiltrate, fibrous capsule and neovascularization, similar among all groups (p> 0.05). The evaluation of the specimens stained with HE under fluorescence microscopy enhancve the visualization of the blood vessels and collagen fibers, constituting an additional methodology for this purpose. In the evaluation of plasma extravasation, the product of degradation of ECGG presented values of Evans blue dye extravasation by gram of tissue (0.0514 ± 0.0220 mg / mL) lower to the other tested formulations (p <0.05). It is concluded that the topical formulation based on EGCG developed for endodontic use, presented stable physical and chemical properties and tissue compatibility.
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Formulação à base de Epigalocatequina-3-galato, derivada do chá verde, desenvolvida para uso endodôntico: estudo físico-químico e biológico / Formulation based on Epigallocatechin-3-gallate, derived from green tea, developed for endodontic use: physicochemical and biological studyDanielly Cunha Araújo Ferreira 28 August 2015 (has links)
O chá verde, obtido da Camellia sinensis, é uma das bebidas mais populares em todo o mundo e, recentemente, tem sido foco de pesquisas científicas por apresentar efeitos benéficos na saúde geral. Estudos laboratoriais e epidemiológicos sugerem que, dentre os polifenóis que compõem o chá verde, a Epigalocatequina-3-galato (EGCG) é o mais bioativo e responsável por sua ação antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, inativadora de LPS bacteriano, anticarcinogênica, antitumoral, anti-angiogênica, anti-hipertensiva e reparadora tecidual, podendo atuar na prevenção e tratamento do câncer, doenças cardiovasculares, neurodegenerativas, hepáticas e renais. Em diversas doenças ósseas, a EGCG também desempenha um importante papel protetor, atuando na indução da mineralização e inibição da osteoclastogênese. No entanto, seus possíveis efeitos na inflamação e na reabsorção óssea associadas à lesão periapical ainda não foram avaliados. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver uma formulação para uso endodôntico à base de EGCG com propriedades físico-químicas e biológicas que permitam seu uso como curativo de demora entre sessões. As formulações testadas incluíram: EGCG diluída em água e diferentes concentrações de EGCG (1,25; 5; 10 e 20 mg/mL) veiculadas em polietilenoglicol 400 (PEG). O óxido de zinco foi utilizado como agente radiopacificador. Em função da possível degradação dos produtos fenólicos em função do ambiente e do tempo, uma solução obtida por meio do contato prolongado da EGCG com o dente também foi avaliada (produto da degradação). Inicialmente, foi realizada a caracterização físico-química da formulação de EGCG por meio de espectrofotometria em Ultravioleta/Visível (UV/Vis), em contato com soluções contendo zinco, óxido de zinco e acetato de zinco. Os estudos biológicos foram realizados para avaliar sua compatibilidade tecidual no tecido subcutâneo de camundongos, por meio da avaliação do extravasamento plasmático após 24 horas e da análise de aspectos macroscópicos e microscópicos aos 7, 21 e 63 dias após a inserção de tubos de polietileno contendo as formulações. Neste estudo, uma pasta a base de hidróxido de cálcio (Calen®) foi utilizada como controle. Na análise macroscópica, realizada por meio de fotografias, foram atribuídos escores aos parâmetros de ulceração epitelial, vascularização, necrose e edema. Na análise microscópica, realizada em microscopia de luz convencional e de fluorescência, foram avaliados os parâmetros de infiltrado inflamatório, vascularização, focos de abscessos, cápsula fibrosa, edema e necrose. Os escores dos resultados biológicos foram submetidos à análise estatística utilizando o teste do Qui-quadrado ou Exato de Fisher e para análise dos resultados quantitativos do extravasamento plasmático foi utilizada análise de variância (ANOVA), seguida pelo pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os estudos físico-químicos mostraram que a EGCG manteve seu comprimento de onda original em 274 nm quando associada ao óxido de zinco, tendendo à formação de uma banda de absorção em 325 nm. A associação da EGCG com acetato de zinco ocasionou diminuição da banda de absorção em 274 nm e formação de uma nova banda em 323 nm. Os estudos biológicos mostraram, nos parâmetros macroscópicos que, em todos os períodos avaliados, todas as formulações apresentaram compatibilidade tecidual, com ausência de ulceração epitelial, presença de leve necrose tecidual superficial, edema e vascularização, não havendo diferença significante entre os grupos avaliados (p>0,05). Na análise microscópica, em todos os períodos foi verificada ausência de focos de abscesso, edema e necrose e presença de suave ou moderado infiltrado inflamatório, cápsula fibrosa e neovascularização, semelhante entre todos os grupos (p>0,05). A avaliação dos espécimes corados com HE em microscopia de fluorescência favoreceu a visualização dos vasos sanguíneos e de fibras colágenas, constituindo metodologia adicional para esta finalidade. Na avaliação do extravasamento plasmático, o produto da degradação da ECGG apresentou extravasamento de corante azul de Evans por grama de tecido inferior (0,0514 ±0,0220 mg/mL) às demais formulações testadas (p<0,05). Conclui-se que a formulação tópica à base de EGCG, desenvolvida para uso endodôntico, apresenta propriedades físico-químicas estáveis e compatibilidade tecidual. / The green tea, obtained from the Camellia sinensis, is one of the most popular drinks in the world and has recently been in the focus of scientific research due its beneficial effects on general health. Laboratory and epidemiological studies suggest that, among the polyphenols found on green tea, the epigallocatechin-3-gallate (EGCG) is the most bioactive and responsible for its antioxidant, anti-inflammatory, anti-microbial, bacterial LPS inactivation, anticarcinogenic, anti-tumoral, anti-angiogenic, anti-hypertensive and tissue repair and can act in the prevention and treatment of cancer, cardiovascular disease, neurodegenerative, liver and kidney diseases. In several bone diseases, EGCG also plays a major protective role, acting in inhibition of osteoclastogenesis and induction of mineralization. However, their possible effects on inflammation and bone resorption associated to apical periodontitis have not been evaluated. Therefore, the aim of this study was to develop a EGCG based formulation for endodontic use with physicochemical and biological properties that allow its use as intracanal dressing between sessions. The formulations tested included: EGCG diluted in water and different concentrations of EGCG (1.25, 5, 10 and 20 mg/ml) diluted in polyethylene glycol 400 (PEG). Zinc oxide was used as radiopacifier agent. Due to the possible degradation of phenolic compounds as a function of the environment and time, a solution obtained through prolonged contact with the tooth EGCG was also evaluated (degradation product). Initially, physicochemical characterization of EGCG formulation was performed by ultraviolet spectrophotometry/Visible (UV/Vis) in contact with solutions containing zinc, zinc oxide and zinc acetate. Biological studies were conducted to evaluate its tissue compatibility with subcutaneous tissue of mice by means of the evaluation of plasma leakage after 24 hours and the examination of macroscopic and microscopic features at 7, 21 and 63 days after insertion of polyethylene tubes containing the formulations. In this study, a calcium hydroxide pastebase (Calen®) was used as control. The macroscopic analysis performed by means of photographs, assigned scores to epithelial ulceration, vascularization, necrosis and edema parameters. Microscopic examination performed in conventional and fluorescence microscopy assessed the inflammatory infiltrate, vascularization, abscesses spots, fibrous capsule, edema and necrosis parameters. The scores of biological results were statistically analyzed by the chisquare test or Fisher\'s exact and for the quantitative analysis of the results of plasma extravasation the analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey\'s post-test were used. The significance level was 5%. The physico-chemical studies showed that EGCG maintained its original wavelength at 274 nm when added to zinc oxide, tending to the formation of an absorption band at 325 nm. The combination of EGCG with zinc acetate led to decreased absorption band at 274 nm and formation of a new band at 323 nm. Biological studies showed, in the macroscopic parameters in all periods, that all formulations showed tissue compatibility, with no epithelial ulceration, presence of mild superficial tissue necrosis, edema and vascularization, with no significant difference between the groups (p > 0.05). On microscopic examination, in all periods was verified absence of abscess foci, edema and necrosis and the presence of mild or moderate inflammatory infiltrate, fibrous capsule and neovascularization, similar among all groups (p> 0.05). The evaluation of the specimens stained with HE under fluorescence microscopy enhancve the visualization of the blood vessels and collagen fibers, constituting an additional methodology for this purpose. In the evaluation of plasma extravasation, the product of degradation of ECGG presented values of Evans blue dye extravasation by gram of tissue (0.0514 ± 0.0220 mg / mL) lower to the other tested formulations (p <0.05). It is concluded that the topical formulation based on EGCG developed for endodontic use, presented stable physical and chemical properties and tissue compatibility.
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Caracterização biológica de extratos de prosópolis de diferentes regiões geográficas obtidos por Extração com Fluido Supercrítico e Extração EtanólicaMachado, Bruna Aparecida Souza 15 December 2015 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Propolis is a resinous material collected by bees from sprouts and barks of different vegetable source and the propolis has pharmacological and biological properties attributed to the presence of different classes of phenolic compounds. The supercritical fluid extraction (SFE) is an operation that explores the solvation power of fluids at temperature and pressure above its critical values, to extracting or separating components of a sample. This technology has been effective for obtaining extracts from natural matrices. The aim of the study was to define the best process conditions for obtaining Brazilian green propolis extracts (from Paraná) using the SFE. For that definition, the influence of different parameters was evaluated, such as S/F (solvent mass – CO2 – relative to solute mass – propolis), percentage of co-solvent (1 and 2% ethanol), temperature (40 to 50°C) and pressure (250, 350 and 400bar) using supercritical carbon dioxide (CO2). The Global Yield Isotherms (GYIs) were obtained through the evaluation of the yield, and the chemical composition of the extracts was also obtained in relation to the total phenolic compounds, flavonoids, antioxidant activity and 3,5-diprenil-4-hidroxicinamic (Artepillin C) and Acid 4-hidroxicinmic (p-coumaric acid). Furthermore, considering that the variations in the chemical composition, and consequently in the biological activity of propolis are associated with the type and geographical origin, samples of eight different propolis were evaluated, obtained by supercritical fluid extraction (SCO2 - 50°C, 350bar, 1% co-solvent and S/F 110) and ethanoic extraction (EtOH - 80% at 70°C). The evaluated samples were: red (Alagoas and Sergipe), green (Minas Gerais and Paraná) and brown (Paraná, Santa Catarina and Rio Grande do Sul). The samples were characterized referring to protein, lipids, ash, minerals (sodium, potassium, calcium and lithium), fiber, water activity and analyzed by scanning electron microscopy (SEM). The extracts were analyzed for their content of phenolic compounds, flavonoids, in vitro antioxidant activity (DPPH and ABTS), quantification of Artepillin C and p-coumaric acid by high-performance liquid chromatography (HPLC) and antimicrobial activity. The EtOH extracts were evaluated as the anti-proliferative activity against B16F10 cell lines (murine) as well. For the SFE application as an extraction method to obtain propolis extract (green propolis from Paraná), the best results were found at 350bar, 50°C, presence of 1% ethanol (co-
solvent) and 110 S/F. Under these conditions, a content of 8.93±0.01 and 0.40±0.05g/100g Artepillin C and p-coumaric acid were identified, respectively, showing efficiency of the extraction process. Regarding to the comparative analysis of EtOH and SCO2 extracts of different samples, the red propolis from northeastern Brazil (Sergipe and Alagoas) showed the highest biological potential and the highest content of antioxidant compounds. The best results were presented for the extracts obtained from the conventional extraction (EtOH). It was found that despite the low yield of the process, the extracts obtained by SFE showed elevated levels of compounds of interest, as well as proving to be a viable process to obtain propolis extracts. The best results of antioxidant activity were presented by red and green propolis, thus demonstrating the biological potential of these samples. Finally, there is the composition and biological activity of Brazilian propolis varies significantly depending on the sample type, geographic region gathering and extraction conditions. / A própolis é caracterizada como um material resinoso produzido pelas abelhas a partir da coleta de materiais de diferentes fontes vegetais e exibe propriedades farmacológicas e biológicas atribuídas à presença de diferentes classes de compostos fenólicos. A extração com fluido supercrítico (SFE) é uma operação que explora o poder de solvatação dos fluidos à temperatura e pressão acima de seus valores críticos para extrair ou separar componentes de uma amostra. Esta tecnologia tem se mostrado eficaz para obtenção de extratos a partir de matrizes naturais. O objetivo do estudo foi o de determinar as melhores condições de processo para a obtenção de extratos de própolis verde brasileira (Paraná) utilizando a SFE. Para isso, foi avaliada a influência de diferentes parâmetros, como S/F (massa de solvente – CO2 – em relação à massa de soluto – própolis), percentual de co-solvente (1 e 2% de etanol), temperatura (40 e 50°C) e pressão (250, 350 e 400bar) utilizando dióxido de carbono (CO2) supercrítico. Foi estudado o rendimento e obtidas as Isotermas de Rendimento Global (GYIs) e composição química dos extratos em relação ao teor de compostos fenólicos totais, flavonoides, atividade antioxidante e 3,5-diprenil-4-hidroxicinâmico (Artepillin C) e Ácido 4-hidroxicinâmico (ácido p-cumárico). Além disso, tendo em vista que as variações na composição química, e, consequentemente na atividade biológica da própolis estão associadas ao tipo e a sua origem geográfica, neste estudo, foram também avaliados extratos de própolis obtidos por extração supercrítica (SCO2 – 50°C, 350bar, 1% de co-solvente e S/F de 110) e extração etanólica (EtOH – 80% a 70°C) de oito amostras de própolis de diferentes tipos, vermelha (Alagoas e Sergipe), verde (Minas Gerais e Paraná) e marrom (Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul), coletas em diferentes regiões geográficas do Brasil. As amostras foram caracterizadas em relação ao teor de proteínas, lipídeos, cinzas, minerais (sódio, potássio, cálcio e lítio), fibras, atividade de água e analisadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Os extratos foram analisados quanto ao teor de compostos fenólicos totais, flavonoides, atividade antioxidante in vitro (DPPH e ABTS), quantificação de Artepillin C e ácido p-cumárico por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e atividade antimicrobiana. Os extratos EtOH foram avaliados também quanto a atividade antiprolifefativa frente a linhagens de células B16F10 (murino). Em relação ao
emprego da SFE como método de obtenção de extratos de própolis (verde do Paraná) os melhores resultados foram identificados em 50°C e 350bar na presença de 1% de etanol (co-solvente) e S/F de 110. Nessas condições, foi identificado um teor de 8,93±0,01 e 0,40±0,05g/100g de Artepillin C e ácido p-cumárico, respectivamente, evidenciando a eficiência do processo de extração. Em relação à análise comparativa dos extratos EtOH e SCO2 das diferentes amostras, as própolis vermelhas do nordeste brasileiro (Sergipe e Alagoas) apresentaram o maior potencial biológico, bem como, o maior conteúdo de compostos antioxidantes. Os melhores resultados foram apresentados para os extratos obtidos a partir da extração convencional (EtOH). Entretanto, foram identificadas as maiores concentrações de Artepillin C e ácido p-cumárico nos extratos SCO2 (própolis verde e marrom), indicando assim uma maior seletividade do processo para extração destes compostos. Constatou-se que apesar do baixo rendimento do processo, os extratos obtidos por SFE apresentaram elevados teores de compostos de interesse, mostrando-se assim como um processo viável para obtenção de extratos de própolis verde. Os melhores resultados de atividade antioxidante foram apresentados pelas própolis vermelha e verde, evidenciando assim o potencial biológico dessas amostras. Por fim, destaca-se que a composição e atividade biológica da própolis brasileira variam significativamente a depender do tipo de amostra, da região geográfica de coleta e das condições de extração.
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Avaliação da atividade biológica do extrato seco da Remiria maritima Aubl. / ASSESSMENT OF BIOLOGICAL ACTIVITY OF EXTRACT DRY LYOPHILIZED REMIRIA MARITIMA AUBL.Oliveira, Isamar Dantas 22 June 2010 (has links)
Remiria maritime Aubl., popularly known as "capim da praia" is used as teas to treat diarrhea, kidney disease, high fever and analgesic and antiinflammatory. There are no records in the
literature about its biological properties. Therefore, this study was designed to evaluate the possible action of the antimicrobial effects, antioxidant, antinociceptive and antiinflammatory effect of aqueous extract of dried sea Remiria Aubl. (ERMA) using tests in vivo and in vitro. The extract was first subjected to tests phytochemicals. Antimicrobial activity was evaluated in vitro by the technique of disk diffusion method and minimum inhibitory concentration. The antioxidant effect was observed in vitro by testing the extent of lipid peroxidation (TBARS), nitric oxide (NO) and hydroxyl radical scavenger capacity where ERMA concentrations used were 10 μg/mL, 100 μg/mL e 1 mg/mL. The antinociceptive activity was evaluated by testing the writhing induced by acetic acid 0.9% and 1% formalin.
The test of motor coordination was used to assess possible effects of muscle relaxants and sedatives ERMA might interfere with the antinociceptive effects. The anti-inflammatory activity was evaluated by testing peritonitis induced by carrageenan 1%. The animals (n = 6/group) were treated 30 min before each experiment, vehicle (saline + 0.2% Tween 80, ip) or ERMA (100, 200 and 400 mg / kg, ip). The phytochemical screening showed the presence of several chemical classes: phenols, tannins, alkaloids, volatile coumarins, flavonoids, saponins and triterpenes. The ERMA demonstrated antimicrobial activity against Gram-positive and
negative. Additionally, evaluation of antioxidant activity in the TBARS assay, there was a reduction of lipid peroxidation (p <0.001). In the test of NO reduction occurred in the formation of nitric oxide (p <0.001). In the test to assess the ability of hydroxyl radical scavenger was significant with (p <0.001). Treatment with ERMA intraperitoneally produced
a significant decrease in the number of writhing 100 (26.0 ± 2.1, p <0.01), 200 (25.1 ± 2.4, p <0.01) and 400 mg / kg (19.3 ± 2.9, p <0.001). In the formalin test, there was a reduced response Algic significantly only in the second phase, 200 mg / kg (22.9 ± 2.9, p <0.05) and 400 mg / kg (15.3 ± 3, 9, p <0.001). In the hot plate there was no significant difference in nociceptive behavior. In Rota rod test was verified that the ERMA does not alter the motor coordination of animals. In the test of peritonitis, treatment with ERMA promoted a significant reduction in leukocyte migration induced by carrageenan at all doses 100 (8.9 ± 0.1, p <0.01), 200 (6.6 ± 0.2 p <0.01) and 400 mg / kg (3.9 ± 0.6, p <0.01) . The results suggest that ERMA has antimicrobial activity, antioxidant, antinociceptive and antiinflammatory.
However, further studies are required to better assess and characterize the mechanisms involved in these effects. / Remiria marítima Aubl., popularmente conhecida como Capim da praia é utilizada na forma de chás para o tratamento de diarréia, doenças renais, febre alta e como analgésico e
antiinflamatório. Não há na literatura registros a respeito de suas propriedades biológicas. Portanto, este estudo foi desenvolvido visando avaliar a ação dos possíveis efeitos
antimicrobiano, antioxidante, antinociceptivo e anti-inflamatório do extrato aquoso liofilizado da Remiria marítima Aubl. (ERMA) utilizando ensaios in vivo e in vitro. O extrato foi
submetido primeiramente aos ensaios fitoquímicos. A atividade antimicrobiana foi avaliada in vitro pela técnica do método de disco difusão e concentração inibitória mínima. O efeito
antioxidante foi verificado in vitro através do teste de medida da lipoperoxidação (TBARS), óxido nítrico (NO) e capacidade scavenger de radical hidroxila onde as concentrações do
ERMA utilizadas foram 10 μg/mL, 100 μg/mL e 1 mg/mL. A atividade antinociceptiva foi avaliada através do teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético a 0,9% e da formalina 1%. O teste da placa quente foi realizado para avaliar possivel ação central do ERMA. O teste da coordenação motora foi utilizado para avaliar possíveis efeitos
miorrelaxantes e sedativos do ERMA que pudessem interferir nos efeitos antinociceptivos. A atividade anti-inflamatória foi avaliada através do teste da peritonite induzida por carragenina a 1%. Os animais (n = 6/grupo) foram tratados 30 min antes de cada experimento, com o veículo (salina + tween 80 0,2%; i.p.) ou ERMA (100, 200 e 400 mg/kg; i.p.). A triagem fitoquímica mostrou a presença de diversas classes quimicas: fenóis, taninos condensados, alcalóides, cumarinas voláteis, flavonóides, saponinas e triterpenos. O ERMA demonstrou ação antimicrobiana frente as bactérias Gram-positivas e negativas. Adicionalmente, na avaliação da atividade antioxidante, no teste TBARS, houve uma redução da lipoperoxidação (p < 0,001). No teste do NO, houve redução na formação de óxido nítrico (p < 0,001). No
teste para avaliar a capacidade scavenger de radical hidroxila foi significativo com (p < 0,001). O tratamento com ERMA via intraperitonial produziu uma redução significativa do número de contorções abdominais 100 (26,0 ± 2,1; p < 0,01), 200 (25,1 ± 2,4; p < 0,01) e 400 mg/kg (19,3 ± 2,9; p < 0,001). No teste da formalina, houve uma redução da resposta álgica
de maneira significativa apenas na segunda fase, 200 mg/kg (22,9 ± 2,9; p < 0,05) e 400 mg/kg (15,3 ± 3,9; p < 0,001). No teste da placa quente não houve diferença significativa no
comportamento nociceptivo. No teste do Rota rod foi verificado que o ERMA não altera a coordenação motora dos animais. No teste da peritonite, o tratamento com ERMA promoveu uma redução significativa na migração dos leucócitos induzida pela carragenina em todas as doses 100 (8,9 ± 0,1; p < 0,01), 200 (6,6 ± 0,2; p < 0,01) e 400 mg/kg (3,9 ± 0,6; p < 0,01).. Os resultados sugerem que o ERMA possui efeito antimicrobiano, antioxidante, antinociceptivo e anti-inflamatório. Entretanto, novos estudos são requeridos para uma melhor avaliação e caracterização dos mecanismos envolvidos nesses efeitos.
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Pólen apícola desidratado: composição físico-química, qualidade microbiologica, compostos fenólicos e flavonoides, capacidade antioxidante e origem botânica / Dehydrtated bee pollen: physicochemical, microbiological quality, phenolic and flavonoids compounds, antioxidant and botanical origin.Vanilda Aparecida Soares de Arruda 10 October 2013 (has links)
O pólen apícola, produto da aglutinação do pólen das flores com néctar e substâncias salivares das abelhas, tem sido promovido como suplemento da dieta humana por apresentar propriedades nutricionais e bioativas. Sessenta e duas amostras de pólen apícola desidratado foram avaliadas para as análises de compostos fenólicos, flavonoides, atividade antioxidante por três métodos (DPPH, sistema β-caroteno e ORAC), origem botânica, qualidade comercial (umidade, cinzas, lipídeos, proteínas e carboidratos) e sanitária (bolores e leveduras, aeróbios mesófilos, coliformes totais, E.coli, clostrídios sulfito redutores e S.aureus.), além da atividade antimicrobiana (Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus). Os valores obtidos para compostos fenólicos e flavonoides totais variaram de 12,60 a 84,22 mg GAE/g de pólen apícola (GAE: equivalentes em ácido gálico) e 1,90 a 36,85 mg de quercetina/g de pólen apícola respectivamente. O EC50, determinado pelo método do DPPH, variou de 0,35 a 13,42 mg pólen apícola/mL de extrato. Os extratos de pólen apícola apresentaram valores entre 52,58 e 98,37 % para o método do β-caroteno. Quando quantificada por ORAC, a atividade antioxidante medida ficou entre 132,98 e 575,85 µmol eq. trolox/g pólen apícola. Na avaliação da qualidade comercial foram obtidos os valores de 3,06% a 8,12% para umidade, de 1,94 a 4,61%, para cinzas, de 3,35 a 10,96% para lipídeos; de 17,73 a 34,73% para as proteínas, de 11,86 a 25,71% e de 2,77 a 15,87% para os açúcares frutose e glicose, respectivamente. Verificou-se que a presença do pólen apícola inibiu o crescimento de todos os microrganismos estudados. Candida albicans foi a mais resistente e o Staphylococcus epidermides foi o mais sensível. Observou-se 36 tipos polínicos diferentes, destacando-se: Cocos nucifera sp., Mimosa scabrella (Benth.), Mimosa caesalpiniaefolia sp., Eucalyptus sp., Myrcia sp., Asteraceae, Poaceae., Euphorbiaceae e Brassica que ocorreram com maior frequência entre as amostras estudadas. Foram observadas somente correlações moderadas e fracas entre os tipos polínicos presentes e os parâmetros avaliados para as amostras desidratadas de pólen apícola. / Bee pollen, a product of agglutination of flower pollen with nectar and bee salivary substances, has been promoted as a dietary supplement for human because of its nutritional and bioactive properties. Sixty-two samples of dehydrated bee pollen were analyzed for phenolics, flavonoids, antioxidant activity using three methods (DPPH, βcarotene and ORAC), botanical composition, commercial quality (moisture, ashes, lipids, proteins, carbohydrates), hygiene (aerobic mesophiles, yeasts and moulds, coliforms, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and sulfite-reducing Clostridium), and antimicrobial activity (Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus). The obtained values for total phenolics ranged from 12.60 to 84.22 mg GAE/g bee pollen (GAE: gallic acid equivalents) while for total flavonoids ranged from 1.90 and 36.85 mg quercetin/g bee pollen. The EC50, determined by the DPPH method, ranged from 0.35 to 13.42 mg bee pollen/ml of extract. The bee pollen extracts showed values between 52.58 and 98.37% by β- carotene method. When measured by ORAC, antioxidant activity was between 132.98 and 575.85 µmols eq. trolox/g bee pollen. In the evaluation of commercial quality, the following results were achieved: 3.06% to 8.12% for moisture, 1.94 to 4.61% for ashes, 3.35 to 10.96% for lipids, 17.73 to 34.73% for proteins, from 11.86 to 25.71% and 2.77 to 15.87% for the carbohydrates glucose and fructose respectively. It was verified that the presence of the bee pollen inhibited the growth of all microorganisms studied. Candida albicans was the more resistant and Staphylococcus epidermides the more sensitive. Thirty-three pollen-types were identified mainly Cocos nucifera sp., Mimosa scabrella (Benth.) sp., Mimosa caesalpiniaefolia sp., Eucalyptus sp., Myrcia sp., Asteraceae sp., Poaceae sp., Euphorbiaceae sp. and Brassica sp. that occurred more frequently among the samples studied. It was observed only moderate and weak correlations between the pollen types present and the evaluated parameters for dehydrated samples of bee pollen
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