Orientador: Guiseppina Pace Pereira Lima / Banca: Celina Maria Henrique / Banca: Selma Dzimidas Rodrigues / Resumo: Este trabalho objetivou determinar e comparar os teores de fibras e lipídios, de putrescina, espermidina e espermina, além de fenóis totais e flavonóides totais solúveis em partes de vegetais produzidos de forma orgânica e convencional, geralmente descartadas no preparo de alimentos, porém algumas vezes utilizados no consumo. Os alimentos foram adquiridos de produtores orgânicos certificados ou convencionais da região de Botucatu/SP. As análises foram realizadas em cascas (abóbora, banana, batata, berinjela, laranja, limão, manga, maracujá, rabanete), folhas (abóbora, brócolis, cenoura, couve, mandioca, rabanete e uva), talos (brócolis, couve e espinafre) e semente de abóbora. Os resultados mostraram que sementes de abóbora e talos de brócolis cultivados de forma convencional apresentaram maior teor de fibras. Cascas de banana e laranja orgânicos apresentaram maior teor de lipídios. Já as cascas de limão e rabanete, folhas de brócolis e mandioca e talos de couve, brócolis e espinafre não apresentaram dados que mostrem diferenças significativas entre si quanto ao teor de lipídios. A maior parte dos vegetais analisados mostrou uma tendência em apresentar teor mais elevado de poliaminas e fenóis totais em alimentos oriundos do cultivo orgânico ao contrário do observado para os flavonóides totais, possivelmente em função das práticas culturais adotadas durante o cultivo. A ingestão de alimentos vegetais contendo alto teor de poliaminas e compostos fenólicos devem ser cuidadosamente analisados como possível modulação de seqüelas patológicas. Grande parte dos alimentos geralmente descartados pelos consumidores é desperdiçada quanto ao seu valor nutricional. / Abstract: The objective of this work was to determinie and comparie fibers and lipids, the contents of putrescine, spermidine and spermine, besides soluble total fenols and flavonoids in vegetables parts that grown in organic and conventional cultures, commonly discharged in food preparation, however, sometimes used in the consumption. The plants were obtained from certified organic or conventional producers of Botucatu/SP region. The analyses were made in skin (squash, banana, potato, eggplant, orange, lemon, mango, passion fruit, radish), leaves (squash, broccoli, carrot, kale, cassava, radish and grape), stems (broccoli, kale and spinach) and squash seeds. The results showed that squash seeds and broccoli stems from conventional culture presented higher fiber content. Organic banana and orange skins had higher lipids content. Lemon and radish skins, broccoli and cassava leaves and kale, broccoli and spinach stems presented no data showing significant differences for lipid content. Most of the analyzed vegetables tended to present higher content of polyamines and total fenols in organic culture, opposite to what was observed for total flavonoids, possibly due to the practices used during the culture. The ingestion of vegetables with high contents of polyamines and fenols compounds must be carefully analyzed as possible modulation of pathologic sequels. A great deal of food usually discharged by consumers is lost as for their nutritional value. / Mestre

Orientador: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Banca: Carmen Lucia Cardoso / Resumo: É notável a crescente demanda comercial pelos extratos das folhas de "Chá de Bugre" (Cordia ecalyculata Vell.) principalmente para a sua aplicação como supressor de apetite e agente cicatrizante. Trata-se de uma planta de origem sul americana sendo no Brasil muito comum nos estados de Minas Gerais, Bahia, Goiás, Paraná e Santa Catarina. É uma planta da família boraginaceae utilizada na fitoterapia brasileira como diurético, febrífugo, estimulante circulatório e também como inibidora do apetite, embora poucos relatos científicos comprovem tais atividades. Uma ampla revisão bibliográfica foi realizada e até o momento verificou- se que são poucos os estudos referentes aos constituíntes químicos presentes na espécie, destacando-se alcalóides como a cafeína, a alantoína e ácido alantóico; glicosídeos como a consolidina; taninos e pigmentos, além de compostos inorgânicos como o potássio. Órgãos regulatórios nacionais e internacionais responsáveis pela avaliação dos parâmetros de qualidade dos extratos comercializados tem sido cada vez mais incisivos quanto à padronização focando em marcadores específicos, metodologiasanalíticas validadas para a determinação de tais marcadores, estudos de estabilidade e também comprovações científicas que atestem as atividades biológicas esperadas. De acordo com os objetivos propostos, realizou-se inicialmente uma ampla revisão bibliográfica focando aspectos botânicos, químicos e farmacológicos da espécie. Posteriormente, realizou-se o desenvolvimento e também a validação de uma metodologia analítica cromatográfica capaz de determinar a alantoína nas folhas e também nos extratos obtidos de chá de bugre. Por fim, foi realizada a avaliação farmacológica da espécie, focando em ensaios do tipo antihemorrágico antifúngico, antioxidante e citotóxico para células normais e tumorais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The increasing demand for commercial extracts of "Chá de Bugre" (Cordia ecalyculata Vell.) is remarkable, especially for its use as appetite suppressant and wound healing agent. The specie is a plant originated from South America and widely spread in Brazil, in the states of Minas Gerais, Bahia, Goiás, Parana and Santa Catarina. It is a plant of the family boraginaceae, used in the Brazilian phytotherapy as diuretic, antipyretic, circulatory stimulant and appetite suppressant, but few scientific reports corroborate such activities. An extensive literature review has been carried out and so far it appears that there are few studies regarding the chemical constituents present in this species like alkaloids such as caffeine, allantoin and allantoic acid, glycosides as consolidine, in addition to tannins, pigments, and inorganic compounds such as potassium. National and international regulatory departments responsible for assessment of parameters related to the quality of the extracts have been increasingly incisive focusing on the standardization of specific markers, validation of analytical methods for the determination of such markers, stability studies and also scientific evidence that demonstrates the expected biological activities. According to the proposed objectives, a deep literature review has been initially carried out focusing on botanical, chemical and pharmacological aspects of C. ecalyculata. Subsequently, a chromatographic analytical methodology capable of determining allantoin in the leaves and also in extracts of "chá de bugre" has been developed and validated. Finally, we performed a pharmacological evaluation of the species, focusing on the antihemorrhagic, antifungal, antioxidant and cytotoxic activities to both normal and tumor cells. Biological assays evidenced that the ethyl acetate phase of aqueous ethanol extract of leaves showed hemorrhage inhibition ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marcia Nasser Lopes / Banca: Angela Regina Araújo / Banca: Ana Helna Januário / Resumo: O projeto proposto tem como objetivo principal a obtenção de substâncias bioativas a partir do estudo químico/biológico dos extratos brutos produzidos pelos fungos endofíticos Pg-1, Lasiodiplodia sp. (Pg-2) e Pg-3, os quais foram isolados da alga parda Padina gymnospora. Estes endófitos foram cultivados em escala reduzida em meio de arroz (cultura sólida) fornecendo os respectivos extratos brutos. Nestes extratos avaliou-se a produção metabólica a partir das análises em CCDC, CLAE-DAD e RMN de 1H e foram submetidos à bioensaios para avaliar a potencialidade antifúngica e anticolinesterásica, onde estes extratos demonstraram ser promissores. O endófito selecionado para estudos posteriores (Lasiodiplodia sp.) cultivado em arroz, forneceu o extrato bruto em acetonitrila. O extrato bruto em acetonitrila foi fracionado em coluna de sílica gel de fase normal, resultando em treze frações, as quais foram avaliadas quanto ao seu perfil cromatográfico e químico em CCDC e RMN de 1H, respectivamente. O fracionamento realizado em cromatografia de coluna aberta, resultou no isolamento de uma substância pura a partir da fração L. sp-Fr80:20, sendo identificada como meleina (1). Isolou-se duas substâncias, lasiodiplodina (2) e des-Ometil- lasiodiplodina (3) por CCDC preparativa a partir da fração L. sp-Fr70:30. As substâncias foram elucidadas pela análise dos espectros de RMN de 1H 1D e 2D, espectros de RMN de 13C e pela espectrometria de massas (EM-ESI), sendo este o primeiro relato da identificação de isocumarinas e lactonas a partir de fungos endofíticos associados à alga marinha Padina gymnospora / Abstract: The project proposed has as main objective to obtain bioactive substances from the chemical/biological study of crude extracts produced by endophytic fungi Pg-1, Lasiodiplodia sp. (Pg-2) and Pg-3, isolated from brown seaweed Padina gymnospora. These endophytes were cultivated in a small scale in the middle of rice (solid culture) providing the respectives crude extracts. In these extracts were evaluated the metabolic production by CCDC, HPLCDAD and 1H NMR analyzes and were submitted to bioassays to evaluation the antifungal and acetylcholinesterase potential, where these extracts showed promising. The endophyte selected for further studies (Lasiodiplodia sp.) was grown on rice, provided the acetonitile crude. The EtOAc crude was fractionated on a column of normal silica gel phase, resulting in thirteen fractions, which were evaluated for their chemical and chromatographic profile of CCDC and 1H NMR, respectively. The fractionation carried out in an open column chromatography, resulted in the isolation of a pure substance from the fraction L.sp, Fr80:20, identified as mellein (1). Two compounds, lasiodiplodin (2) and des-O-methyllasiodiplodin (3) was isolated by preparative TLC assay from the fraction L.sp-Fr70:30. The products were elucidated by analyzing the NMR spectra 1H 1D and 2D NMR spectra and 13C by mass spectrometry (ESI-MS), and this is the first report of isocumarinas and lactones were isolated from endophytic fungi associated with seaweed Padina gymnospora / Mestre

Orientador: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Luciana Polese / Banca: Luiz Alberto Beraldo de Moraes / Banca: Jenifer Saffi / Resumo: Este trabalho abordou o estudo químico e a avaliação das atividades biológicas dos extratos de folhas e frutos de Eugenia brasiliensis LAM. e Eugenia involucrata DC, espécies nativas brasileiras usadas na medicina popular para tratamento de inflamações. Nos frutos de E. brasiliensis e E. involucrata foram identificadas por CLAE-DAD-EM/EM 19 antocianinas: cianidina-3-O-soforosídeo (A1), delfinidina-3-O-laminaribiosídeo (A2), delfinidina-3-O-galactosídeo (A3), delfinidina-3-O-glicosídeo (A4), cianidina-3-O-galactosídeo (A5), cianidina-3-O-laminaribiosídeo (A6), cianidina-3-O-sambibiosídeo (A7), cianidina-3-O-cafeoil-diglicosídeo (A8), cianidina-3-O-glicosídeo (A9), cianidina-3-O-cafeoil-glicosídeo (A10), delfinidina-3-O-cumaroil-glicosídeo (A11), pelargonidina-3-O-glicosídeo (A12), cianidina-3-O-maloil-glicosídeo (A13), cianidina-3-O-acetoil-glicosídeo (A14), cianidina-3-O-pentosídeo (A15), quatro antocianinas não identificadas (A16, A17, A18 e A19) e delfinidina (A20). Com exceção de A3, A4, A5 e A9, identificadas anteriormente em E. brasiliensis, as antocianinas são relatadas pela primeira vez em ambas espécies. O teor obtido para as antocianinas majoritárias, A4 e A9, em E. brasiliensis foi 1,15 e 3,01 mg.g-1 (fruto fresco), respectivamente e em E. involucrata foi 0,58 e 2,02 mg.g-1 (fruto fresco), respectivamente. As substâncias isoladas das folhas de E. brasiliensis incluem um dissacarídeo (1), duas flavanonas: 2-(S)-7,5-di-hidroxi-6-metilflavanona (2) e 2-(S)-7,5-di-hidroxi-6,8-dimetilflavanona (3), uma di-hidrochalcona: 2'-6'-di-hidroxi-3'-metil-4'-metoxi-di-hidrochalcona (4) e uma neolignana: 7,8,7',8'-tetra-hidro-8,8'-dimetil-3,3'-dimetoxi-4,4'-di-hidroxi-dibenzociclo-octadieno (5). As substâncias 2, 3 e 4 foram relatadas pela primeira vez na espécie em estudo e a substância 5 é inédita. Nas infusões de E. brasiliensis e E. involucrata foram identificadas 10 substâncias por EM... / Abstract: This work deals with the chemical study and evaluation of biological activities of extracts from leaves and fruits of Eugenia brasiliensis LAM. and Eugenia involucrata DC, two Brazilian species used as folk medicines for treating inflammatory diseases. Nineteen anthocyanins were identified from fruits of E. brasiliensis and E. involucrata by HPLC-PDA-MS/MS: cyanidin-3-O-sophoroside (A1), delphinidin-3-O-laminaribioside (A2), delphinidin-3-O-galactoside (A3), delphinidin-3-O-glucoside (A4), cyanidin-3-O-galactoside (A5), cyanidin-3-O-laminaribioside (A6), cyanidin-3-O-sambibioside (A7), cyanidin-3-O-caffeoyl-diglucoside (A8), cyanidin-3-O-glucoside (A9), cyanidin-3-O-caffeoyl-glucoside (A10), delphinidin-3-O-coumaroyl-glucoside (A11), pelargonidin-3-O-glucoside (A12), cyanidin-3-O-maloyl-glucoside (A13), cyanidin-3-O-acetoyl-glucoside (A14), cyanidin-3-O-pentoside (A15), and four non-identified anthocyanins (A16, A17, A18 e A19) and delphinidin (A20) . Except for A3, A4, A5 and A9, which had been previously identified in E. brasiliensis, the other anthocyanis are reported here for the first time in both species. The major anthocyanins, A4 e A9, were quantified and presented yields of 1.15 and 3.01 mg.g-1 to E. brasiliensis (fresh fruit), respectively and 0.58 and 2.02 mg.g-1 to E. involucrata (fresh fruit), respectively. The isolated compounds from E. brasiliensis leaves include one dissacharide (1), two flavanones: 2(S)-7,5-dihydroxy-6-methylflavanone (2) and 2(S)-7,5-dihydroxy-6,8-dimethylflavanone (3), one dihydrochalcone: 2',6'-dihydroxy-3'-methyl-4'-methoxy-dihydrochalcone (4) and the lignan: 7,8,7',8'-tetrahydro-8,8'-dimethyl-3,3'-dimethoxy-4,4'-dihydroxidibenzocyclooctadiene (5). Compounds 2, 3 and 4 are reported herein for first time in this species and compound 5 is a new neolignan. Eleven compounds were identified by FIA-MS from the tea of E. brasiliensis and E. involucrata: gallic acid (C1), caffeic acid (C2)... / Doutor

Orientador: Wagner Vilegas / Banca: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Sebastião Ferreira Fonseca / Banca: Luce Maria Brandão Torres / Banca: Hosana Maria Debonsi / Resumo: Neste projeto foram estudadas as cascas de Qualea parviflora Mart., Q. grandiflora Mart. e Q. multiflora Mart., pertencentes à família Vochysiaceae. Espécies de Qualea são utilizadas popularmente para problemas gastrointestinais, como antiinflamatória, analgésica, antiúlcera e antidiarréica. O fracionamento do extrato metanólico de Q. parviflora forneceu quatro triterpenóides pentacíclicos (arjunglicosídeo, bellericagenina B, bellericasídeo B e 28-nor-17,22-seco- 2a,3ß,19,22,23-pentaidroxi-?12-oleanano, inédito), quatro derivados de ácido elágico (ácido 3, 3'-di-O-metilelágico-4-O-ß-glicopiranosídeo, ácido 3 Ometilelágico- 4'-rhamnopirosídeo, ácido 3, 3',4-tri-O-metilelágico-4'-O-ß-Dglicopiranosídeo e ácido 3, 3'-di-O-metilelágico e um fitoesterol (ß-sitosterol glicosídeo). O fracionamento do extrato clorofórmico de Q. parviflora forneceu um fitoesterol (ß-sitosterol), cinco triterpenos pentacíclicos (lupenona, lupeol, betulina, ácido epi-betulínico e friedelina). Essas substâncias foram descritas pela primeira vez no gênero. Análises por HPLC-ESI-IT-MS, HPLC-UV-PDA e GC-IT-MS de Q. grandiflora e Q. multiflora usando como padrões substâncias isoladas de Q. parviflora mostraram perfis qualitativamente semelhantes, mas com diferentes teores. Ensaios farmacológicos demonstraram que o extrato metanólico de Q. parviflora não apresentou efeito tóxico agudo, inibindo a formação de úlceras gástricas e reduzindo a severidade das lesões frente a diversos modelos experimentais, confirmando o uso popular. Os extratos metanólicos de Q. parviflora e Q. grandiflora mostraram diminuição da motilidade intestinal, o que justifica o uso popular como agentes antidiarréico. Por outro lado, não foram observadas atividades antiinflamatória e analgésica, relatadas popularmente. Ensaios com substâncias isoladas do extrato clorofórmico de Q. parviflora demonstraram potencial atividade antituberculose. / Abstract: In this project, we studied the bark of the following species: Qualea parviflora Mart., Q. grandiflora Mart. and Q. multiflora Mart., which belong to the Vochysiaceae family. Species of Qualea are polularly used for gastrointestinal problems, as antiinflammatory, analgesic, antiulcer and antidiarrheal. The methanolic extract of Q. parviflora was fractionated to give four pentacyclic triterpenoids (bellericagenin B, bellericaside B and arjunglucoside I and 28-nor- 17,22-seco-2a,3ß,19,22,23-pentahydroxy-?12-oleanane, new), four derivatives of ellagic acid (3,3'-di-O-methylellagic acid-4-O-ß-glucopyranoside, 3-O-methylellagic acid-4'-rhamnopyranoside, 3,3',4-tri-O-methylellagic acid 4'-O-D-glucopyranoside and 3,3'-di-O-methylellagic acid) and one sterol (ß- sitosterol glucoside). The chloroform extract of Q. parviflora was fractionated to give five pentacyclic triterpenoids (lupeol, lupenone, betulin, epi-betulinic acid, and friedelin) and one sterol (ß- sitosterol). These substances are being described for the first time in genus. HPLC-ESI-IT-MS, HPLC-UV-PDA and GC-IT-MS analyses of Q. grandiflora and Q. multiflora using isolated substances of Q. parviflora as standard have shown similar qualitative profiles, but with different content. The pharmacological results have demonstrated that the methanolic extract of Q. parviflora did not present acute toxic effect, but inhibited the formation of gastric ulcers and reduced the severity of gastric injuries demonstrated by diverse experimental models, which indicated that this extract is a powerful gastroprotetor showing the healing effect of this species. Methanolic extracts of Q. parviflora and Q. grandiflora had shown reduction from motility intestinal, which justifies the popular use of it as agent antidiarrheal. On the other hand, no anti inflammatory nor analgesic effect has been observed as is popularly recognized. Assays with substances isolated from chloroform extract has demonstrated potential. / Doutor

Orientador: Maysa Furlan / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Marcos Pivatto / Resumo: O perfil químico de folhas e frutos de Piper fuligineum foi analisado por cromatografia líquida de alta eficiência. A composição química de média polaridade dos dois órgãos vegetais apresentou semelhança. As análises demonstraram também que os frutos apresentavam composição química complexa, principalmente devido a presença de substâncias de maior polaridade. Essas análises permitiram selecionar as folhas de P. fuligineum para dar continuidade aos estudos químicos. Estes estudos resultaram no isolamento de cinco substâncias, sendo duas kavalactonas: (E)-6-(8-feniletil)-4-metoxi-2H-piran-2-ona e 6-(2-fenil-7,8-diidroxetil)-4-metoxi-2H-piran-2-ona; uma cromanona: (2,2-dimetil-4-oxocromano-6-carboxilato de metila) e dois derivados prenilados do acido benzoico: 4-hidroxi-3-(3-metilbutil-2-en-1-il)benzoato de metila e 4-metoxi-3-(3-metil-1-oxobut-2-en-1-il) benzoato de metila. As estruturas químicas das substâncias foram determinadas utilizando técnicas espectrométricas, incluindo RMN 1D e 2D. Todas as substâncias estão sendo descritas pela primeira vez em Piper fuligineum. A substância 4 é inédita como produto natural. O extrato etanolico das folhas e as frações obtidas de P. fuligineum foram avaliadas quanto ao potencial tripanocida frente à forma epimastigota da cepa Y de Trypanosoma cruzi, mostrando promissora atividade do extrato etanólico com IC50 de 26,67 g.mL-1 quando comparado com o controle positivo, benznidazol, com IC50 de 11,11 g.mL-1. O extrato acetato de etila, a fração clorofórmica e a substância 1 foram submetidos a testes antifúngicos frente aos fungos Candida albicans, C.krusei, C. tropicalis, C. parapsilosis e a levedura Cryptococcus neoformans. O extrato apresentou forte atividade frente ao fungo Candida tropicalis e moderada atividade frente aos fungos C. krusei, C. parapsilosis e a levedura Cryptococcus neoformans, enquanto a fração clorofórmica apresentou forte atividade frente ao... / Abstract: The chemical profile of leaves and fruits of Piper fuligineum was analyzed by high performance liquid chromatography. The chemical composition of medium polarity related to leaves and fruits showed great similarity. The analysis also showed that the chemical composition of the fruits was more complex, mainly due to the presence of more polar substances. These analyzes allowed the selection of the leaves of P. fuligineum to continue the chemical studies. The chemical studies of the leaves of Piper fuligienum resulted in the isolation of six compunds, including two kavalactones (4- methoxy-6- [(E)-2-phenyl -vinyl] -2H-pyran-2-one and 6-(1,2-dihydroxy-2-phenyl- ethyl)-4-methoxy-2H- pyran-2-one), one chromanone (methyl-2,2-dimethyl-4-oxo-6- cromanacarboxylate) and two prenylated derivatives of benzoic acid (methyl-4-hydroxy-3-(3-methyl-2- buten-1-yl) benzoate and methyl-4-methoxy-3-(3-methyl -2-butenoyl) benzoate. The chemical structures of the isolated compounds were determined using spectrometric techniques, including 1D and 2D NMR. All compounds were described for the first time in Piper fuligineum, and the compound 4 is a new natural product. The ethanolic leaf extract and fractions obtained from P. fuligineum were evaluated for trypanocidal potential against epimastigote form of Trypanosoma cruzi Y strain, showing promising activity of the ethanol extract with IC50 of 26.67 g.mL-1 compared with the positive control benznidazole, with IC50 of 11.11 g.mL-1. The ethyl acetate extract, the chloroform fraction and substance 1 underwent antifungal drugs against fungi Candida albicans, C.krusei, C. tropicalis, C. parapsilosis and Cryptococcus neoformans yeast. The extract showed strong activity against the fungus Candida tropicalis and moderate activity against fungi C. krusei, C. parapsilosis and Cryptococcus neoformans yeast while the chloroform fraction showed strong activity against the fungus C. krusei, and moderate activity against... / Mestre

Orientador: Maysa Furlan / Banca: Marcia Nasser Lopes / Banca: Roberto Carlos Campos Martins / Resumo: O aumento na demanda pela descoberta de novos fármacos de origem vegetal levou os químicos orgânicos a intensificarem estudos para a elucidação da rota metabólica de formação dos metabólitos de interesse. Muitas vezes, esses metabólitos mostram baixo acúmulo nas matrizes vegetais e/ou apresentam complexidade estrutural, que impossibilitam a obtenção dos mesmos por síntese ou semi-síntese. Com isso, o entendimento dos processos biossintéticos envolvidos em sua formação pode facilitar a obtenção dos mesmos por técnicas biotecnológicas. Para tanto, a espécie Piper tuberculatum, conhecida por acumular amidas piperidínicas, piperidônicas e isobutílicas, com potenciais atividades antitumoral, carrapaticida, antifúngica, inseticida entre outros, se configura em um excelente modelo para tais estudos funcionais. À partir do extrato de folhas e frutos foram isoladas as amidas piplartina e piperina, majoritárias na planta. A síntese dos precursores fenilpropanoídicos: ácido 3',4'-metilenodióxicinâmico e ácido ferúlico, bem como os mesmos marcados com isótopos estáveis: ácido [1-OD, 2-D]-3',4'-metilenodióxicinâmico e ácido [1-OD, 2-D]-ferúlico, foi realizada para os estudos biossintéticos. Os precursores, L-lisina, ácido 3',4'-metilenodióxicinâmico e ácido malônico foram incorporados na fração solúvel do extrato enzimático das folhas de Piper tuberculatum. Foram determinadas as condições ótimas de extração da enzima baseadas em três parâmetros; temperatura (31 °C), tempo de reação (90 minutos) e concentração de precursores (10 mM). Os produtos formados foram avaliados por cromatografia líquida e espectrometria de massas. As análises foram monitoradas utilizando a piperina como padrão, observando a sua formação. Para a determinação da concentração protéica foi utilizado o método de Bradford e a análise das proteínas presentes foi feita utilizando gel de eletroforese... / Abstract: The increase in demand for discovery of new drugs from plant origin has led also to increase organic studies to elucidate the metabolic pathway of the secondary metabolites of interest. Often, these metabolites show low concentration in plant as well structural and configurational complexity distinguishes them from synthetic products and prohibit their synthesis or semi - synthesis. Thus, understanding the biosynthetic processes involved in their formation can facilitate to obtain them by biotechnology techniques. Therefore, the Piper tuberculatum species known to accumulate piperidinic, piperidonic and isobutyl amides that show potential antitumoral, acaricidal, antifungal and insecticidal activities, is set in an excellent model for such functional studies. From leaves and fruits extract two compounds were isolated, the piperine and piplartine, main amides found in Piper tuberculatum. The synthesis of phenylpropanoids precursors: 3'-4'- methylenedioxycynamic acid and ferulic acid as well the same compounds labeled with stable isotopes: acid [1 -OD , 2- D]-3'-4'- methylenedioxycynamic acid and [1 -OD , 2- D]- ferulic acid were performed for the biosynthetic studies. The precursors, L-lysine, 3'-4'- methylenedioxycynamic acid and malonic acid were incorporated in the soluble enzyme fraction of Piper tuberculatum. The optimum conditions for extraction of the enzyme were based on three parameters; temperature (31 ° C), time of reaction (90 minutes) and concentration of precursors (10 mM). The products were analyzed by liquid chromatography and mass spectrometry. The analyzes were monitored using piperine as standard and its formation was determined. For determination of protein concentration the Bradford method was used. The analyze of the proteins was performed by using one-dimensional electrophoresis (SDS- PAGE). / Mestre

CAPES / A carne e seus derivados representam uma parte importante da dieta humana. Porém, devido a sua riqueza na composição química são suscetíveis a alterações de ordem físico-química como a oxidação lipídica, tornando necessário o uso de aditivos para sua conservação. A tendência é utilizar produtos naturais como alternativas aos aditivos químicos. Entre os produtos naturais, a manjerona e o pólen apícola apresentam, em sua composição, metabólitos secundários com alta atividade antioxidante. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades bioativas de dois produtos, pólen apícola orgânico e manjerona (Origanum majorana L.), bem como sua aplicação como antioxidantes naturais em hambúrgueres. No pólen apícola desidratado, foi realizada caracterização palinológica e determinação da composição centesimal. O pólen apícola e a manjerona foram extraídos individualmente com etanol 80% em shaker, a 40 ºC/60 minutos. Os compostos fenólicos e flavonoides totais dos extratos etanólicos de pólen apícola e manjerona foram quantificados e a identificação feita por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR). A atividade antioxidante dos extratos foi determinada e comparada à de antioxidantes comerciais por quatro métodos distintos. Após os extratos serem evaporados e liofilizados, foram aplicados separadamente na concentração de 0,3% em formulações de hambúrgueres de carne bovina, também foi elaborada uma formulação padrão, com 0,01% de butilhidroxitolueno; além da formulação controle, sem antioxidantes. Os hambúrgueres foram caracterizados através da determinação da composição centesimal. A oxidação lipídica foi determinada pelo índice de peróxido a cada 14 dias, e pelo índice de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) a cada 7 dias. Após avaliação microbiológica foi realizada a análise sensorial. Verificou-se que o pólen apícola foi classificado como heterofloral, com predominância da família Asteraceae. Os resultados obtidos na composição centesimal do pólen apícola, com exceção do teor de umidade, estão em conformidade com a legislação brasileira. O extrato de manjerona apresentou o maior teor de compostos fenólicos e flavonoides totais em relação ao extrato de pólen apícola. Pela técnica de CLAE foi possível identificar e quantificar os flavonoides rutina, miricetina, quercetina e canferol, e os ácidos fenólicos, cafêico, p-cumárico, ferúlico e trans-cinâmico. Os extratos apresentaram alta atividade antioxidante in vitro pelos quatro métodos avaliados, sendo esta atividade atribuída à presença de compostos fenólicos. Os resultados obtidos para composição centesimal dos hambúrgueres indicam que com exceção do conteúdo de carboidratos, os demais parâmetros estão de acordo com a legislação brasileira. Com relação à oxidação lipídica, não houve a formação de peróxidos em nenhuma formulação, durante todo o período em que os produtos permaneceram congelados. Os extratos de manjerona e pólen apícola demonstraram resultados satisfatórios pelo TBARS, portanto, a concentração de antioxidantes naturais, foi suficiente para manter a estabilidade oxidativa. Sob os aspectos microbiológicos, os hambúrgueres atenderam à legislação vigente. Os índices de aceitabilidade para a avaliação global foram superiores a 70% para as formulações controle, padrão e adicionada de pólen apícola, no entanto a aplicação de manjerona interferiu negativamente nas características sensoriais. / The meat and its derivatives represent an important part of the human diet. However, due to its richness in chemical composition are susceptible to changes in physicalchemical and lipid oxidation, requiring the use of additives for its preservation. The trend is to use natural products as alternatives to the chemical additives. Among the natural products, marjoram and bee pollen present in its composition, secondary metabolites with high antioxidant activity. The aim of this study was to evaluate the bioactive properties of two products, organic bee pollen and marjoram (Origanum majorana L.) and its application as natural antioxidants in burgers. Dehydrated in bee pollen, pollen characterization was performed and determination of chemical composition. The bee pollen and marjoram were individually extracted with 80% ethanol in a shaker at 40 °C/60 minutes. Phenolic compounds and total flavonoid of ethanol extracts of pollen and marjoram were quantified and the identification made by high performance liquid chromatography on reversed phase (HPLC-RP). The antioxidant activity of the extracts was determined and compared to that of commercial antioxidants by four different methods. After the extracts were evaporated and lyophilized, were applied separately at a concentration of 0.3% in formulations of beef burgers, was also drafted a standard formulation with 0.01% butylhydroxytoluene; beyond the control formulation without antioxidants. The burgers were characterized by determining the chemical composition. Lipid oxidation was determined by peroxide value every 14 days, and the rate of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) every 7 days. After microbiological evaluation was performed sensory analysis. It was found that bee pollen was classified as heterofloral, predominantly family Asteraceae. The results on the chemical composition of bee pollen, with the exception of moisture content, the other parameters are in accordance with Brazilian law. The extract of marjoram had the highest content of total phenolics and flavonoids in relation to the extract of pollen. By HPLC technique was possible to identify and quantify flavonoids rutin, myricetin, quercetin and kaempferol, and phenolic acids, caffeic, p-coumaric, ferulic and transcinnamic acid. The extracts showed high antioxidant activity in vitro by the four methods evaluated, this activity being attributed to the presence of phenolic compounds. The results obtained for proximate composition of burgers indicate that with the exception of carbohydrate content, the other parameters are in accordance with Brazilian law. With respect to lipid oxidation, no formation of peroxides in any formulation during the period in which the products remained frozen. The extracts of bee pollen and marjoram demonstrated by the TBARS satisfactory results, therefore, the concentration of natural antioxidants was sufficient to maintain oxidative stability. Under the microbiological aspects, the burgers attended the law. The rate of acceptability for the overall evaluation was above 70% for the control formulations, standard and added bee pollen, however the application of marjoram negative influence on sensory characteristics.

CAPES / A carne e seus derivados representam uma parte importante da dieta humana. Porém, devido a sua riqueza na composição química são suscetíveis a alterações de ordem físico-química como a oxidação lipídica, tornando necessário o uso de aditivos para sua conservação. A tendência é utilizar produtos naturais como alternativas aos aditivos químicos. Entre os produtos naturais, a manjerona e o pólen apícola apresentam, em sua composição, metabólitos secundários com alta atividade antioxidante. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades bioativas de dois produtos, pólen apícola orgânico e manjerona (Origanum majorana L.), bem como sua aplicação como antioxidantes naturais em hambúrgueres. No pólen apícola desidratado, foi realizada caracterização palinológica e determinação da composição centesimal. O pólen apícola e a manjerona foram extraídos individualmente com etanol 80% em shaker, a 40 ºC/60 minutos. Os compostos fenólicos e flavonoides totais dos extratos etanólicos de pólen apícola e manjerona foram quantificados e a identificação feita por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR). A atividade antioxidante dos extratos foi determinada e comparada à de antioxidantes comerciais por quatro métodos distintos. Após os extratos serem evaporados e liofilizados, foram aplicados separadamente na concentração de 0,3% em formulações de hambúrgueres de carne bovina, também foi elaborada uma formulação padrão, com 0,01% de butilhidroxitolueno; além da formulação controle, sem antioxidantes. Os hambúrgueres foram caracterizados através da determinação da composição centesimal. A oxidação lipídica foi determinada pelo índice de peróxido a cada 14 dias, e pelo índice de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) a cada 7 dias. Após avaliação microbiológica foi realizada a análise sensorial. Verificou-se que o pólen apícola foi classificado como heterofloral, com predominância da família Asteraceae. Os resultados obtidos na composição centesimal do pólen apícola, com exceção do teor de umidade, estão em conformidade com a legislação brasileira. O extrato de manjerona apresentou o maior teor de compostos fenólicos e flavonoides totais em relação ao extrato de pólen apícola. Pela técnica de CLAE foi possível identificar e quantificar os flavonoides rutina, miricetina, quercetina e canferol, e os ácidos fenólicos, cafêico, p-cumárico, ferúlico e trans-cinâmico. Os extratos apresentaram alta atividade antioxidante in vitro pelos quatro métodos avaliados, sendo esta atividade atribuída à presença de compostos fenólicos. Os resultados obtidos para composição centesimal dos hambúrgueres indicam que com exceção do conteúdo de carboidratos, os demais parâmetros estão de acordo com a legislação brasileira. Com relação à oxidação lipídica, não houve a formação de peróxidos em nenhuma formulação, durante todo o período em que os produtos permaneceram congelados. Os extratos de manjerona e pólen apícola demonstraram resultados satisfatórios pelo TBARS, portanto, a concentração de antioxidantes naturais, foi suficiente para manter a estabilidade oxidativa. Sob os aspectos microbiológicos, os hambúrgueres atenderam à legislação vigente. Os índices de aceitabilidade para a avaliação global foram superiores a 70% para as formulações controle, padrão e adicionada de pólen apícola, no entanto a aplicação de manjerona interferiu negativamente nas características sensoriais. / The meat and its derivatives represent an important part of the human diet. However, due to its richness in chemical composition are susceptible to changes in physicalchemical and lipid oxidation, requiring the use of additives for its preservation. The trend is to use natural products as alternatives to the chemical additives. Among the natural products, marjoram and bee pollen present in its composition, secondary metabolites with high antioxidant activity. The aim of this study was to evaluate the bioactive properties of two products, organic bee pollen and marjoram (Origanum majorana L.) and its application as natural antioxidants in burgers. Dehydrated in bee pollen, pollen characterization was performed and determination of chemical composition. The bee pollen and marjoram were individually extracted with 80% ethanol in a shaker at 40 °C/60 minutes. Phenolic compounds and total flavonoid of ethanol extracts of pollen and marjoram were quantified and the identification made by high performance liquid chromatography on reversed phase (HPLC-RP). The antioxidant activity of the extracts was determined and compared to that of commercial antioxidants by four different methods. After the extracts were evaporated and lyophilized, were applied separately at a concentration of 0.3% in formulations of beef burgers, was also drafted a standard formulation with 0.01% butylhydroxytoluene; beyond the control formulation without antioxidants. The burgers were characterized by determining the chemical composition. Lipid oxidation was determined by peroxide value every 14 days, and the rate of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) every 7 days. After microbiological evaluation was performed sensory analysis. It was found that bee pollen was classified as heterofloral, predominantly family Asteraceae. The results on the chemical composition of bee pollen, with the exception of moisture content, the other parameters are in accordance with Brazilian law. The extract of marjoram had the highest content of total phenolics and flavonoids in relation to the extract of pollen. By HPLC technique was possible to identify and quantify flavonoids rutin, myricetin, quercetin and kaempferol, and phenolic acids, caffeic, p-coumaric, ferulic and transcinnamic acid. The extracts showed high antioxidant activity in vitro by the four methods evaluated, this activity being attributed to the presence of phenolic compounds. The results obtained for proximate composition of burgers indicate that with the exception of carbohydrate content, the other parameters are in accordance with Brazilian law. With respect to lipid oxidation, no formation of peroxides in any formulation during the period in which the products remained frozen. The extracts of bee pollen and marjoram demonstrated by the TBARS satisfactory results, therefore, the concentration of natural antioxidants was sufficient to maintain oxidative stability. Under the microbiological aspects, the burgers attended the law. The rate of acceptability for the overall evaluation was above 70% for the control formulations, standard and added bee pollen, however the application of marjoram negative influence on sensory characteristics.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-12-12T13:16:06Z No. of bitstreams: 1 2012_MilennaMilhomemSena.pdf: 12496453 bytes, checksum: 24524e50d4be1522aebb0a06ffccdfe6 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-12-12T14:15:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_MilennaMilhomemSena.pdf: 12496453 bytes, checksum: 24524e50d4be1522aebb0a06ffccdfe6 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-12T14:15:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_MilennaMilhomemSena.pdf: 12496453 bytes, checksum: 24524e50d4be1522aebb0a06ffccdfe6 (MD5) / Nos últimos anos, um crescente número de publicações sobre o desenvolvimento e utilização de novos organocatalisadores tem sido reportado na literatura. Dentre os diversos tipos de novas moléculas utilizadas com este objetivo, podem ser destacadas aquelas contendo um grupo uréia, tiouréia ou sulfonamidas as quais são capazes de ativar nucleófilos e/ou eletrófilos por meio de ligações de hidrogênio e consequentemente induzirem assimetria ao produto desejado. Com esse intuito, na primeira parte deste trabalho foi realizado um estudo visando à síntese de novos organocatalisadores do tipo sulfonilamidas/uréias quirais através da reação entre diferentes amino ésteres e o cloreto de sulfonilisocianato (CSI). Diferentes condições reacionais foram testadas, entretanto, os resultados obtidos não foram satisfatórios uma vez que não se pôde caracterizar tais compostos. Com base na simplicidade e eficiência das reações multicomponentes de Ugi, na segunda parte deste trabalho, foi realizado um estudo diastereosseletivo das reações de Ugi do tipo U-5C-4CR entre diferentes α-aminoácidos naturais, aldeídos aromáticos, o terc-butilisocianeto utilizando o metanol como solvente, para produzir amino ésteres secundários não naturais. Vários ácidos de Lewis foram investigados quanto à sua eficiência catalítica e a capacidade de indução na diastereosseletividade. Dentre os ácidos de Lewis testados, os que apresentaram melhores resultados em termos de diastereosseletividade foram o brometo de cobre (CuBr) e o perclorato de lítio (LiClO 4). Ao final deste trabalho, 15 novas moléculas foram sintetizadas em rendimentos que variaram entre11-90% e diastereosseletividades que variaram de 1,1:1 a 13,3:1 em favor do diastereoisômero (S,S). ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / In recent years, a growing number of publications on the development and use of new organocatalysts have been reported in the literature. Among the many new types of molecules used for this purpose, we should mention those group-containing urea, thiourea or sulfonamides groups which are able to activate nucleophiles and/or electrophiles through hydrogen bonds and to induce asymmetry to the desired product. To that end, the first part of this work involved a study toward the synthesis of new sulphonylamides/ureas likechirals organocatalysts by the reaction of different amino esters and chlorosulfonyl isocyanate (CSI). Different reactions conditions were tested, however, the results have not been satisfactory due to the difficult to characterize such compounds. Based on simplicity and efficiency of the Ugi multicomponent reactions, in the second part of this work, a diastereoselective study was conducted for Ugi reactions of the type U-5C-4CR between different α-natural amino acids, aromatic aldehydes, tert-butylisocyanide using methanol as solvent to produce non-natural secondary amino esters. Several Lewis acids were investigated to probe their catalytic efficiency and ability to induce the diastereoselectivity. Among the Lewis acids tested, the best results observed concerning diastereoselectivity were copper bromide (CuBr) and lithium perchlorate (LiClO 4). At the end of this work, 15 new molecules were synthesized in yields ranging from (11-90%) and diastereoselectivity ranging from 1,1:1 to 13,3:1 in favor to the (S,S)diastereomers.