Orientador: Ângela Regina Araujo / Banca: Alberto José Cavalheiro / Banca: Antonio Gilberto Ferreira / Resumo: O presente trabalho descreve o desenvolvimento de método de extração e quantificação da citocalasina D, produzida pelo fungo endofítico Xylaria sp.. A técnica de extração tem embasamento no planejamento fatorial utilizando um gráfico ternário como referência, onde cada vértice foi constituído de um solvente puro. Os solventes utilizados foram: acetato de etila, álcool isopropílico e éter etílico. Foram selecionados 10 pontos no gráfico a partir dos quais foram realizadas as devidas extrações em triplicata, resultando em 30 amostras do extrato bruto de Xylaria sp.. A avaliação da quantidade de citocalasina D no extrato bruto foi feita por quantificação por RMN de 1H utilizando-se o antraceno como padrão interno. A escolha do melhor solvente extrator ocorreu após a quantificação, em que foi levado em conta: o teor de citocalasina D no extrato bruto, o rendimento do extrato bruto, a quantidade total de citocalasina D presente no extrato bruto e o custo de extração. A análise das variáveis nos permitiu a escolha do acetato de etila como melhor solvente extrator. / Abstract: The present work describes the development of method for extraction and quantification of cytochalasin D, produced by the endophytic fungus Xylaria sp. The technique of extracting makes uses of a factorial design with a ternary graph as reference, where each vertex has consisting of one solvent. The solvents used were: ethyl acetate, ethyl ether and isopropyl alcohol. It was selected 10 points at the graph which were due to extractions in triplicate, resulting in 30 samples of crude extract of Xylaria sp .. For the avaliation of the amount of cytochalasin D in crude extract it was developed a quantification technique by 1H NMR of which the internal standard used was the anthracene.. Choosing the best solvent extractor occurred after the quantification, which was taken into account: the content of cytochalasin D in the crude extract, the yield of the crude extract, the total cytochalasin D present in the crude extract and the cost of extraction. After the analysis, the ethyl acetate was elected the best solvent for the extraction. / Mestre

Diversas classes de compostos orgânicos de telúrio foram exploradas neste trabalho. Inicialmente foi estudada a transmetalação entre teluretos alílicos e dibutil cianocupratos de lítio de ordem superior, levando aos respectivos cianocupratos alílicos de lítio. Estes, por sua vez, foram acoplados com triflatos vinílicos, importantes intermediários sintéticos preparados previamente a partir de teluretos vinílicos, levando a sistemas altamente insaturados em ótimos rendimentos (Esquema 1). (Ver no arquivo em PDF) Em seguida, foi explorada a reatividade de teluretos aromáticos frente a reagentes organometálicos. Cianocupratos arílicos, gerados a partir da transmetalação entre teluretos aromáticos com cianocupratos de lítio de ordem superior, foram adicionados a cetonas α,β -insaturadas, levando aos produtos de adição 1,4 em bons rendimentos (Esquema 2). (Ver no arquivo em PDF) Teluretos vinílicos funcionalizados de configuração Z também foram alvo de estudo visando a formação de ligação carbono-carbono. Reações de substituição entre estes teluretos e cianocupratos de lítio de ordem inferior levaram a cetonas e ésteres α,β- insaturados com estereoquímica defInida em ótimos rendimentos (Esquema 3). (Ver no arquivo em PDF) De agosto/20OJ a março/2004, a aluna realizou um estágio sanduíche na University of California, Santa Barbara, sob a orientação do Prof. Bruce H. Lipshutz, onde realizou estudos sobre a ciclização de Bergman, visando a síntese do fragmentobiarílico A-B da vancornicina. Diversas condições para a ciclização foram estudadas com um composto modelo (Esquema 4) (Ver no arquivo em PDF) e parte da síntese total do fragmento da vancomlcma, onde a ciclização seria a etapa-chave, foi realizada com sucesso (Esquema 5). (Ver no arquivo em PDF) / Several classes of organotellurium compounds were explored in this work. First, transmetallation reaction between allylic tellurides and higher order dilithium dibutyl cyanocuprates was carried out, leading to the corresponding allylic cyanocuprates. Then these reagents performed cross-coupling reactions with vinylic triflates, important synthetic intermediates prepared previously from vinylic tellurides, affording highly unsaturated systems in high yields (Scheme 1). (See in file PDF) Next, the reactivity of aryl tellurides was explored with some organometallic reagents. Aryl cyanocuprates, generated by transmetallation reaction between aryl tellurides and higher order lithium cyanocuprates, were reacted with α,&$946;-unsaturated ketones, yielding 1,4-addition products (Scheme 2). (See in file PDF) Functionalized Z-vinylic tellurides were also investigated in reactions aiming carbon-carbon bond formation. Substitution reactions of these tellurides with lower order lithium cyanocuprates gave α,β-unsaturated ketones and esters with defined stereochemistry in good yields (Scheme 3). From Aug/03 to Mar/04, the student worked in the University of California, Santa Barbara, under the supervision of Prof. Bruce H. Lipshutz, where studies concerning the Bergman cyclization were performed, aiming the synthesis of the vancomycin A-B biaryl fragment. Several conditions for this cyclization were investigated using a model compound (Scheme 4) (See in file PDF) and part of the total synthesis of the vancomycin fragment, in which the Bergman cyclization would be the key-step, was accomplished (Scheme 5). (See in file PDF)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work describes the reactions of 1-methoxy-2-trifluoroacetyl-3,4-dihydro-naphthalene (4) with substituted anilines 5a-j to obtain a series of N-aril-2-trifluoroacetyl-3,4-diidronaphtalenes (6a-j). Intramolecular cyclization of 6a-j furnished a novel series of substituted 7-trifluoromethyl-5,6-dihydrobenzo[c]acridines (7a-j). Coumpond 4 was obtained from the trifluoroacetylation reaction of the mixture of acetal (2) and enoléter (3) derived from ketone α-tetralone (1) with trifluoroacetic anhydride. The reactions of 1-methoxy-2-trifluoroacetyl-3,4-dihydro-naphthalene (4) with anilines 5a-j, in molar ratio 1:1, were carried out in acetonitrile at 81oC for 6 hours leading to the compounds 6a-j in 68-87%. The synthesis of 7-trifluoromethyl-5,6-dihydrobenzo[c]acridines (7a-j) were carried out by intramolecular cyclization reaction of 6a-j in the presence of polyphosphoric acid (PPA), in abscence of organic solvent at 110oC for 24 hours, in 44-82%. Others Lewis acid such as TiCl4, ZnCl2, P2O5/POCl3, POCl3 or CF3COOH and triethylamine were employed to obtain 7a, however only the reactions using PPA gave positive results. / Este trabalho descreve as reações de 1-metoxi-2-trifluoracetil-3,4-diidro-naftaleno (4) com anilinas substituídas 5a-j para obter uma série de N-aril-2-trifluoracetil-3,4-diidronaftalenos (6a-j). O composto 6a-j sofre reação de ciclização intramolecular formando uma nova série de 7-trifluormetil-5,6-diidrobenzo[c]acridinas (7a-j). O composto 4 foi obtido por reação de trifluoracetilação da mistura de compostos acetal 2 e enoléter 3 derivados da α-tetralona 1, com anidrido trifluoracético. A reação de 1-metoxi-2-trifluoracetil-3,4-diidro-naftaleno (4) com anilinas 5a-j, em quantidade molar 1:1, foi realizada em acetonitrila a 81oC por 6 horas levando aos compostos 6a-j em 68-78% de rendimento. A síntese de 7-trifluormetil-5,6-diidrobenzo[c]acridinas (7a-j) foi realizada via reação de ciclização intramolecular de 6a-j na presença de ácido polifosfórico (PPA), sem solvente a 110oC por 24 horas, em 44-82%. Outros ácidos de Lewis como TiCl4, ZnCl2, P2O5/POCl3, POCl3 ou CF3COOH e trietilamina foram utilizados para obter 7a, entretanto somente a reação utilizando PPA levou a resultados positivos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work describes the study of the chemical behavior of trifluoromethyl substituted heterocycles as 1H-pyrazoles, 2-pyrazolines, 2H-cromenones and isoxazolines in reactions with DAST, with the aim of evaluating possible reactions in the oxygenated sites, aiming mainly the insertion of fluorine atoms in these molecules. Trifluoromethylated heterocycle precursors such as 1H-pyrazoles (2), 2-pyrazolines (6, 8), 2H-cromenones (10-14), isoxazolines (20) were obtained from cyclic and acyclic trifluoroacetylated vinyl ethers (1) and hydrazines, hydrazides, diketones, aldehydes and hydroxylamine employing conventional or multi-component cyclocondensation reaction procedures. When the reactions were carried out in dichloromethane as solvent and DAST in slight excess (1:2), at room temperature for a reaction time of 24 hours, it was observed monofluorination reactions on 4-hydroxyalkyl-1H-pyrazoles (2) (70-75%), difluorination reactions in 4-formylethyl-1H-pyrazoles (4e) (71%), intramolecular cyclization on 4-hydroxyalkyl-4,5-dihydro-1H-pyrazoles (6) (74-80%) and dehydration reactions in 3-(alkyl/aryl)-4,5-dihydropyrazoles (8) (65-75%). Reactions of 2-hydroxy-2H-chromenones (10-14) with DAST by similar reactions conditions, were chemoselective, despite the various reactive sites present in these compounds, and exclusively by the SN2 nucleophilic substitution at the C-2-, conduted to the monofluorinated tetrahydro-2H-chromenones (15-19) (63-81 %). Finally, despite the partial structural similarity with 2-hydroxy-2H-cromenones (10-14), were performed reactions of 4,5-dihydroisoxazoles (20) in the presence of DAST, which resulted only in dehydration products (21) (73-85%) similarly to the results for 3-(alkyl/aryl)-4,5- dihydropyrazoles (8). / Este trabalho descreve o estudo do comportamento químico de heterociclos trifluormetil substituídos como 1H-pirazóis, 2-pirazolinas, 2H-cromenonas e isoxazolinas na presença de DAST (Dietilamino trifluoreto de enxofre), tendo por objetivo avaliar possíveis reações em sítios oxigenados, e visando, principalmente, a inserção de átomos de flúor nestas moléculas. Os heterociclos trifluormetil substituídos precursores 1H-pirazóis (2), 2-pirazolinas (6, 8), 2H-cromenonas (10-14), isoxazolinas (20) foram obtidos empregando vinil cetonas acíclicas e cíclicas (1) e hidrazinas, hidrazidas, dicetonas, aldeídos ou hidroxilamina via reações de ciclocondensação convencionais ou reações multi-componentes. A partir de reações que foram procedidas em diclorometano como solvente e DAST em pequeno excesso (1:2) à temperatura ambiente, por um tempo reacional de 24 horas, foi possível observar reações de fluoração em 4-hidroxialquil pirazóis (2) (70-75%), reações de difluoração em 4-formiletil pirazóis (4e) (71%), ciclização intramolecular em 4-hidroxialquil-4,5- diidropirazóis (6) (74-80%) e reações de desidratação em 3-(alquil/aril)-4,5-diidropirazóis (8) (65-75%). As reações de 2-hidróxi-2H-cromenonas (10-14) com DAST foram quimioseletivas, considerando os diversos sítios reativos presentes nestes compostos, e conduziram exclusivamente, via substituição nucleofílica, a reações de monofluoração no C-2 (15-19) (63-81%). Finalmente, apesar da semelhança estrutural parcial com 2-hidróxi-2H-cromenonas (10-14), as reações de 4,5-diidroisoxazóis (20) na presença de DAST conduziram somente a produtos de desidratação (21) (73-85%) de maneira similar aos resultados obtidos para 3-(alquil/aril)-4,5- diidropirazóis (8).

In this work, the structures of coordination polymers and molecular compounds Cu(II), Hg(II), Pb(II) and Cd(II) with phenylphosphinate or diphenylphosphinate ligands were determined and are discussed. The reaction of phenylphosphinic or diphenylphosphinic acid with copper(II) acetate hydrate produces respectively aquaphenylphosphinate copper(II) or quadiphenylphosphinate copper(II), both insoluble polymeric compounds. The formation of adducts by dissolving these compounds in methanol in the presence of Lewis bases, such as pyridine or N, N, N , N -tetramethylethylenediamine (tmeda), breaks the polymeric chains. Slow evaporation under an inert atmosphere of solutions of the adducts formed crystals for the complexes [Cu{O2P(H)Ph}2(NC5H5)2(OH2)] (1.1), [Cu{O2PPh2}2(NC5H5)2(OH2)] (2.1) e [Cu{O2PPh2}2{(CH3)2N(CH2)2N(CH3)2}(OH2)] (2.2). There are intra and intermoleculares interactions between ligands molecules. Strong hydrogen bond interactions form a supramolecular arrangement in the two structures, those of 1.1 e 2.1. The novel diphenylphosphinate bridged coordination polymer catena- [Hg(μ2O2PPh2)] was synthesized as a colorless powder from mercury(II) acetate and diphenylphosphinic acid. Coordinating solvents were used to break the solid-state polymeric chains to allow the crystallization of new polymeric compounds. Crystallization from methylsulfoxide/methanol gave the solvent-free polymer catena-[Hg(μ2O2PPh2)] while pyridine/methanol gave the 1:2 Hg:pyridine adduct, catena-[Hg(μ2-O2PPh2)2(NC5H5)2] 3.1 and the molecular compound [Hg(O2PPh2)2(HO2PPh2)2(C5H5N)2] 3.2. In the centrosymmetric title compound [Hg(O2PPh2)2(HO2PPh2)2(C5H5N)2] 3.2, the approximately octahe9 dral Hg atom is coordinated by two each of phenylphosphinato, phosphinic acid and pyridine ligands. Each pair of phosphinic acid and phosphinato ligand features an intramolecular hydrogen bond to form an eight membered ring. The compounds 3 e 3.1, have a polymeric chain with two asymmetrically bridging diphenylphosphinate ligands. The latter also has two pyridine molecules coordinated to the Hg center. Bridged polymers, catena-[Pb(m2-O2PPh2)2{OCHN(CH3)2}2], 4.1, catena Pb(μ2-O2PPh2)2(NC5H5) 4.2, catena-[Pb(m2-O2PPh2)2(OS(CH3)2)2] 4.3 e [Pb(μ2-O2PPh2)2(4,4 -bipy)] 4.4 were synthesized by dissolving the polymeric [Pb(O2PPh2)2]n in coordination solvents; and, with slow evaporation, reforming the polymer in a well crystalline form of the solvent adduct, suitable for single crystal X-ray crystallography. The reaction of phenylphosphinic or diphenylphosphinic acid with cadmium(II) acetate produces respectively phenylphosphinate cadmium(II) or diphenylphosphinate cadmium(II), both insoluble polymeric compounds. The formation of adducts by dissolving these compounds in methanol in the presence of Lewis bases, such as pyridine, dimethylsulfoxide and dimethylformamide, breaks the polymeric chains. The slow evaporation formed crystals of [Cd(O2PHPh)2(OS(CH3)2)2]n 5.1 [Cd(O2PHPh)2(C5H5N)2] 5.2 [Cd(O2PPh2)2]n 6, [Cd(O2PPh2)2(C5H5N)2]n 6.1, [Cd(O2PPh2)2(OS(CH3)2)2]n 6.2 e [Cd(O2PPh2)2(OCHN(CH3)2)2] 6.3. The structures show one dimensional polymeric chains, formed by phosphinate ligands asymmetrically bridging. / Neste trabalho, foram caracterizados compostos poliméricos de coordenação e compostos moleculares com metais do tipo Cu(II), Hg(II), Pb(II) e Cd(II), com ligantes do tipo fenilfosfinato e difenilfosfinato. Fosfinatos formam fortes interações metal oxigênio devido à polaridade da ligação P O, logo, estes ligantes tornam-se ideais na formação de cadeias poliméricas no estado sólido com um grande número de centros metálicos divalentes. Com centro metálico do tipo Cu(II), foram caracterizados três compostos monoméricos: [Cu{O2P(H)Ph}2(NC5H5)2(OH2)] (1.1), [Cu{O2PPh2}2(NC5H5)2(OH2)] (2.1) e [Cu{O2PPh2}2{(CH3)2N(CH2)2N- (CH3)2}(OH2)] (2.2), caracterizando a série dos fosfinatos do tipo Cu[R2P(=O)OH]. A característica principal desta série é a presença de fortes interações do tipo inter ou intramolecular do tipo ligações de hidrogênio no estado sólido. Já com o centro metálico Hg(II), foram sintetizados compostos poliméricos catena-[Hg(μ2-O2PPh2)2] 3, catena-[Hg(μ2-O2PPh2)2(NC5H5)2] 3.1 e o composto molecular [Hg(O2PPh2)2(HO2PPh2)2(C5H5N)2] 3.2. A característica destes compostos é apresentar na forma polimérica duas pontes, entre dois centros metálicos adjacentes, formadas pelos ligantes difenilfosfinatos e no composto monomérico a presença de interações intramolecular do tipo ligações de hidrogênio. Na série dos compostos do tipo fosfinatos de Pb(II), os compostos obtidos são todos de natureza polimérica, são eles: poli-catena-[Pb(m2-O2PPh2)2{OCHN(CH3)2}2], 4.1, poli-catena [Pb(μ2-O2PPh2)2(NC5H5)] 4.2, poli-catena-[Pb(m2-O2PPh2)2(OS(CH3)2)2] 4.3 e [Pb(μ2-O2PPh2)2(4,4 -bipy)] 4.4, em todos o ligante difenilfosfinato forma duas pontes entre dois centros Pb2+ adjacentes. E a última série corresponde à série dos fosfinatos de Cd(II), novamente, todos os compostos desta série são de natureza polimérica, são eles: [Cd(O2PHPh)2(OS(CH3)2)2]n 5.1 e [Cd(O2PHPh)2(C5H5N)2] 5.2 tendo em comum o ânion fenilfosfinato e as estruturas [Cd(O2PPh2)2]n 6, [Cd(O2PPh2)2(C5H5N)2]n 6.1, [Cd(O2PPh2)2(OS(CH3)2)2]n 6.2 e [Cd(O2PPh2)2(OCHN(CH3)2)2] 6.3 tendo em comum o ânion difenilfosfinato. Nesta série novamente, a preferência dos ligantes fosfinatos é a formação de duas pontes entre os centros metálicos adjacentes, com exceção para o composto 6.2, onde os ligantes difenilfosfinatos realizam três pontes entre dois centros Cd(II). Vale salientar que, na maioria dos compostos sintetizados, a presença de solventes coordenantes teve importância fundamental, pois muitos destes polímeros são praticamente insolúveis na maioria dos solventes polares e apolares, sendo então difícil à obtenção de cristais apropriados para a difração de raios-X, logo, a presença de solventes coordenantes propiciou a quebra da cadeia polimérica, possibilitando a solubilidade destes compostos.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A series of [3-(phosphate)-4,4,4-trifluoro-but-1-yl]-carbamic acid ethyl ester and [3-(phosphonamide)-4,4,4-trifluoro-but-1-yl]-carbamic acid ethyl ester obtained from the reaction of g-amino alcohols (4,4,4-trifluoro-3-hydroxy-butan-1-yl)-carbamic acid ethyl ester with phosphorus oxychloride in the presence of base and subsequent reaction with alcohols or amines. In addition, this work describes the synthesis and characterization of 3-carboxyethyl-2-oxo-6-trifluoromethyl-[1,2,3]oxathiazinanes and 3-[pyrimidin-2-yl]-2-oxo-6-trifluoromethyl-[1,2,3]oxathiazinanes obtained from the cyclization reaction of the g-amino alcohols (4,4,4-trifluoro-3-hydroxy-butan-1-yl)-carbamic acid ethyl ester and 4-(pyrimidin-2-ylamino)-1,1,1-trifluoro-butan-2-ols with thionyl chloride in the presence of a base. The g-amino alcohols used in this work were obtained from synthetic routes using as precursor b-alkoxyvinyl trifluoromethyl ketones with general formula F3CC(O)CH=C(R)OR1, where R = H, Me, Pr, Bu, Ph, 4-Me-Ph; R1 = Me, Et. The b-alkoxyvinyl trifluoromethyl ketones were obtained from the acylation of acetals or enolethers with trifluoroacetic anhydride. The effect of the carbamates containing phosphate group in the inhibition of acetylcholinesterase enzyme was tested. Several compounds exhibited significant inhibition of this enzyme. Molecular modeling studies were developed to elucidate the interaction mode of these new inhibitors. The oxathiazinanes were assessed against a panel of microorganisms including yeast like fungi, bacteria and algae, but no activity was found. / Uma série de [3-(fosfato)-4,4,4-trifluor-but-1-il]-carbamatos de etila e [3-(fosfonamida)-4,4,4-trifluor-but-1-il]-carbamatos de etila foram obtidos a partir da reação de g-amino álcoois (4,4,4-trifluor-3-hidróxi-butan-1-il)-carbamatos de etila com oxicloreto de fósforo na presença de base e subseqüente reação com álcoois ou aminas. Este trabalho apresenta também a síntese e caracterização de 3-carboxietil-2-oxo-6-trifluormetil-[1,2,3]oxatiazinanas e 3-[pirimidin-2-il]-2-oxo-6-trifluormetil-[1,2,3]oxatiazinanas obtidas por reação de ciclização dos g-amino álcoois (4,4,4-trifluor-3-hidróxi-butan-1-il)-carbamatos de etila e 4-(pirimidin-2-ilamino)-1,1,1-trifluor-butan-2-ols com cloreto de tionila na presença de base. Os g-amino álcoois utilizados neste trabalho foram obtidos por rotas sintéticas que tem como precursor as b-alcoxivinil trifluormetil cetonas de fórmula geral F3CC(O)CH=C(R)OR1, onde R = H, Me, Pr, Bu, Ph, 4-Me-Ph; R1 = Me, Et. As b-alcoxivinil trifluormetil cetonas utilizadas foram obtidas através de acilação de acetais ou enol éteres com anidrido trifluoracético. O efeito dos carbamatos contendo grupo fosfato na inibição da enzima acetilcolinesterase foi avaliado. Vários compostos apresentaram inibição significante dessa enzima e estudos de modelagem molecular foram desenvolvidos para elucidar o modo de interação destes novos inibidores. As oxatiazinanas foram testadas na inibição do crescimento de microorganismos incluindo leveduras como fungos, bactérias e alga, porém, não apresentaram atividade inibitória

Orientador: Angela Regina Araujo / Banca: Luiz Alberto Beraldo de Moraes / Banca: Vera Lúcia Garcia Rehder / Resumo: O projeto proposto tem como objetivo principal a obtenção de substâncias bioativas a partir do estudo químico/biológico do extrato bruto produzido pelo fungo endofítico Schizophyllum commune, este isolado das folhas de Alchornea glandulosa. Este endófito foi cultivado em pequena escala em diferentes meios de cultura líquidos (MBD, YM, Extrato de Malte, Nutrient, Czapek) e sólidos (Arroz e Milho) fornecendo os respectivos extratos brutos. Nestes avaliou-se a produção metabólica em CCDC, CLAE-DAD e RMN de 1H e foram submetidos à bioensaios para avaliar a potencialidade antifúngica, antioxidante e anticolinesterásica, onde estes extratos demonstraram ser promissores. O endófito S. commune cultivado em MBD (escala ampliada) a 25 oC, sob agitação por 28 dias, forneceu o extrato bruto AcOEt após separação do caldo e micélio por filtração a vácuo e evaporação do solvente. O extrato obtido em escala ampliada foi fracionado em coluna de sílica gel de fase reversa (C18), resultando em oito frações (S.co-F1-S.co-F8), que foram avaliadas quanto o seu perfil cromatográfico e químico em CLAE-DAD e RMN de 1H, respectivamente. A fração S.co-F1 após sucessivos fracionamentos cromatográficos resultou no isolamento de duas substâncias puras como a ciclo(L-Pro-L-Val) (1) e a uracila (2) e quatro substâncias identificadas em mistura por LC-MS e RMN de 1H 1D e 2D como a ciclo(Pro-Tyr) (3), ácido p-hidroxibenzoico (4), Rel.ciclo(Pro-Phe) (5) e a Rel.ciclo(Pro-Ile) (6). O extrato bruto em YM pequena escala foi analisado em RMN de 1H 1D e 2D e neste identificou-se o ácido trans-cinâmico (7). O extrato bruto em milho (CH3CN) (peq. escala) foi fracionado e resultou no isolamento de duas substâncias puras como N-(4-hidroxifeniletil) acetamida (8) e a N-(2-feniletil) acetamida (9). Analisando os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The project proposed has as main objective to obtain bioactive substances from the study of chemical/biological of crude extract produced by the endophytic fungus Schizophyllum commune, isolated from the leaves of the Alchornea glandulosa. This endophyte was cultivated in a small scale in differents liquid culture medias (PBD, YM, Malte Extract, Nutrient, Czapek) and solids (Rice and Corn) providing the respectives crude extracts. The metabolic production of the extracts was evaluated in CCDC, HPLC-DAD and 1H NMR and the extracts were subjected to bioassays to evaluation the antifungal, antioxidant and anticholinesterasic potential, where these extracts showed promise. The endophyte S. commune cultivated on PDB (large scale) at 25 oC under agitation for 28 days, provided the EtOAc extract after the separation of the broth and mycelia by vacuum filtration and evaporation of the solvent. The extract obtained on a large scale was fractionated on a column of silica gel reversed phase (C18), resulting in eight fractions (S.co-F1-S.co-F8), which were evaluated for their chemical (1H NMR) and chromatographic profile (HPLC-DAD). After successives chromatographic fractionations of the fraction S.co-F1 was isolated two pure substances as cyclo (L-Pro-L-Val) (1) and uracil (2) and four substances as cyclo (Pro-Tyr) (3), p-hydroxybenzoic acid (4), Rel.ciclo (Pro-Phe) (5) and Rel.ciclo (Pro-Ile) (6) were identified in mixture by LC-MS and 1H NMR 1D and 2D. The YM crude extract in small scale was analyzed in 1H NMR 1D and 2D and was identified the trans-cinnamic acid (7). The corn crude extract (CH3CN) (small scale) was fractionated and resulted in the isolation of two pure substances such as N-(4-hidroxifeniletil) acetamide (8) and N-(2-phenylethyl) acetamide (9). Analyzing the different crude extracts (small scale) and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Banca: Marcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Jan Schripsema / Resumo: A identificação e quantificação de micromoléculas em uma matriz tem vários objetivos, entre eles, conhecer a diversidade química de determinado organismo (metaboloma) visando obter informações biológicas fundamentais ao entendimento destes sistemas biológicos. Isso inclui uma série de estudos químicos e biológicos essenciais para explicar a ecofisiologia de um determinado organismo e, com isso, fazer previsões sobre adaptação e regulação em condições ambientais adversas. Poucos estudos metabolômicos foram desenvolvidos com a cana-de-açúcar, especialmente no Brasil, onde esta espécie é matéria-prima para fabricação de etanol combustível e outros produtos de alto valor agregado. Essa abordagem é, portanto, de suma importância para o desenvolvimento e/ou implantação de métodos analíticos robustos para o estudo de um largo espectro de metabólitos primários e secundários. A partir da interpretação desses dados, será possível obter informações valiosas para se entender, em nível molecular, os processos ecofisiológicos de uma espécie. A presente dissertação de mestrado teve como objetivo o desenvolvimento e validação de métodos de analíse por HPLC-DAD, utilizando métodos quimiométricos de planejamento experimental, visando mapear o metabolismo micromolecular de folhas de cana-de-açúcar. Obteve-se um fingerprint metabólico, essencial para a análise quali e quantitativa que se deseja determinar posteriormente via HPLC e outras técnicas adicionais como EM e RMN. A partir de métodos quimiométricos de análise multivariada (PCA, SIMCA e PLS-DA), foi possível diferenciar amostras vegetais submetidas a diferentes condições de cultivo / Abstract: The identification and quantification of molecules in a matrix has several goals, among them, to know the chemical diversity of a particular organism (metabolome), to get fundamental biological information and to understand the biological systems. It includes a series of chemical and biological studies, wich are essential to explain the ecophysiology of an organism and thus, make predictions about the adaptation and regulation at adverse environmental conditions. Only a few metabolomic studies about sugarcane have been developed, specially in Brazil, where this species is a raw material for manufacturing ethanol and other products with high added value. This approach is therefore very important for development and establishment of robust analytical methods for studying a wide range of primary and secondary metabolites. From the interpretation of these data, will be possible to get valuable information to understand at molecular level, the ecophysiologycal processes of a species. This Master's dissertation aimed the development of analytical HPLC-DAD methods, coupled with Chemometrics methods of experimental design, in order to understand the micromolecular metabolism of sugarcane leaves. It was obtained a metabolic fingerprint, essential for the qualitative and quantitative analysis desired to be done latter by HPLC and other additional technics such as MS and NMR. Based on Chemometrics methods of multivariate analysis (PCA, SIMCA and PLS-DA), it was possible to distinguish samples subjected to different growing conditions / Mestre

CAPES / O okara é uma biomassa gerada no processamento do extrato hidrossolúvel de soja e do tofu. Tal biomassa tem elevada qualidade nutricional em função do conteúdo de proteínas, fibras e compostos bioativos como as isoflavonas. É gerado em grandes quantidades pela indústria processadora de soja como um subproduto e embora se trate de um material de baixo valor comercial possui em sua composição moléculas com potencial nutricional e funcional. As isoflavonas estão presentes na soja principalmente nas formas conjugadas (β-glicosídicas, acetil e malonil) e, em menor proporção, nas formas livres (agliconas). Diversos estudos comprovam a eficiência das isoflavonas agliconas na prevenção de doenças crônicas. Algumas tecnologias têm sido empregadas para a bioconversão das isoflavonas β-glicosídicas em agliconas baseadas na ação de enzimas β-glicosidases sintetizadas por micro-organismos. Neste contexto, o presente trabalho objetivou a bioconversão de isoflavonas presentes no okara através de fermentação semissólida por Saccharomyces cerevisiae r. f. bayanus, buscando melhorar a qualidade nutricional e propriedades biológicas do okara para uso como ingrediente em produtos alimentícios. A fermentação semissólida foi conduzida a 28 °C durante 72 horas. O processo contribuiu para o aumento dos teores de proteínas e redução do conteúdo de fibra bruta o que pode contribuir para melhorar a digestibilidade do produto. A fermentação proporcionou a biotransformação de isoflavonas conjugadas em agliconas, o que levou ao aumento da quantidade de compostos fenólicos, capacidade antioxidante da biomassa e consequente melhoria da qualidade nutricional. A biotransformação das isoflavonas do okara por processo fermentativo mostrou ser uma estratégia promissora para agregação de valor e melhor aproveitamento da biomassa. / Okara is a biomass generated by the soybean and tofu water soluble extract process. Such biomass has a very important nutritional quality because of the protein content, fibres and bioactive compounds as the isoflavons. It is produced in great amounts by the soybean processing industry as a by-product, although it is a product of low commercial value, it possess on its composition molecules with nutritional and functional potential. The isoflavons are present in the soybean mainly in the combined forms (B-glycosidics, acetyl and molonic) and, in a minor proportion, in the free forms (aglycons). Several studies prove the efficiency of aglycons isoflavons preventing cronicle diseases. Some technologies have been employed for the bioconversion of β-glycosidic isoflavon in aglycons based in the action of enzymes β-glycoside hydrolase synthesized by microorganisms. In this context, the current work has aimed the bioconversion by Saccharomyces cerevisiae r. f. bayanus, trying to improve the okara nutritional quality and biological properties in order to use it as an ingredient in food. The semisolid fermentation has been lead under 28° C per 72 hours. The process was conduction at increase protein and reduction of crude fiber content improving the product digestibility. The fermentation provided a biotransformation of isoflavonscombining aglycons, what has taken to the raise of amount of phenolic compounds, biomasa antioxidant capacity and consequently improving of nutritional quality. The biotransformation of okara isoflavons by fermentation process has should to be a promising strategy for adding value and better use of biomass.

Orientador: José Eduardo de Oliveira / Banca: Luciana Polese / Banca: Márcia Miguel Castro Ferreira / Resumo: Em face as constantes adulterações de gasolinas divulgadas pela mídia nacional e devido às especificações para comercialização e as características de qualidade do produto ser diferente em cada região do mundo (Brasil, alto teor de AEAC 25%), surge a necessidade de pesquisas objetivando propor metodologias específicas para o controle de qualidade. No presente trabalho foi desenvolvido e otimizado um método cromatográfico para análise (CG EM e CG DIC) de gasolina com alto teor de etanol utilizando-se planejamento fatorial e análise por superfície de resposta. O método desenvolvido foi associado a ferramentas quimiométricas (PCA, SIMCA e PLS) e utilizado para comparar os perfis cromatográficos com a finalidade de caracterizar a qualidade (conforme e não-conforme) e interpretar as propriedades físico-químicas em amostras de gasolinas comerciais de acordo com a Portaria ANP n°. 309. Foram analisadas 400 amostras de gasolina/mês de acordo com as normas vigentes, durante o período de abril a setembro de 2004, coletando-se dados de 16 parâmetros físico-químicos (cor, densidade, T10%, T50%, T90%, PFE, Resíduo, MON, RON, IAD, benzeno, aromáticos, saturados, olefinas, % de AEAC, % de AEAC por IV) e selecionados através de HCA, lotes mensais com 25 gasolinas representativas. A partir destes lotes (150 amostras) foi possível através de métodos cromatográficos selecionar uma amostra que apresentou maior complexidade, ou seja, maior número de picos cromatográficos. Através de planejamento fatorial e método de superfície de respostas aliados a cálculos de resoluções globais e parciais tornou-se possível estabelecer condições ótimas para análise cromatográfica, efetuando-se 27 experimentos. / Abstract: In face of the news about constant adulterations of gasolines spread by the national press and due to the specifications for retailing and the quality characteristics of the product to be different in each region of the world (Brazil, high content of AEAC C 25 %), it appears to be necessary investigations aiming the proposal of some methodologies specific to the quality control of brazilian C gasolines. In this work it was developed a chromatographic methodology of analysis (GC C MS and GC C DIC) of gasoline with high content of ethanol by the utilization of factorial design and surface response analysis. The developed methodology was associated the chemometrics tools (PCA, SIMCA and PLS) and used to compare the chromatographic profiles to characterize the quality (in accordance or not in accordance) and interpret the physico-chemical properties of retailed gasoline samples in agreement with the official standards (Portaria number 309 C ANP). 400 gasoline samples were collected per month in retailing stations and assayed through official standards, from April to September 2004, when data of 16 physicochemical parameters were collected (color, density, T10 %, T50 %, T90 %, FBP, Residue, MON, RON, IAD, benzene, aromatics, aliphatics, olefines, % of AEAC, % of AEAC by IR). Next they were selected through HCA, six monthly sets with 25 representative gasolines. From the six monthly sets (150 samples) it was possible, through chromatographic methods (GC C MS) to select a sample that presented highest complexity, in other words, larger number of chromatographic peaks. Through factorial design and surface response analysis associated to calculations of global and partial resolutions it was possible with only 27 experiments to achieve the best conditions for chromatographic analysis. / Mestre