Les télomères sont les extrémités des chromosomes linéaires des eucaryotes.Ils sont constitués de répétitions en tandem d'un motif court riche enguanine, et liés par des protéines spécifiques. Chez les vertébrés cesprotéines forment un complexe appelé le shelterin et dont l'intégrité estcritique pour assurer la réplication correcte des extrémités deschromosomes, et pour les protéger contre une prise en charge illicite parles voies de réparation des cassures double-brin de l'ADN. Des dysfonctionsdes télomères engendrent une instabilité du génome qui peut conduire à lasénescence ou au cancer. Les télomères représentent une région subnucléaireoù les protéines du shelterin sont fortement enrichies, ce qui permetl'implication dans les fonctions biologiques d'interactions de basseaffinité. Parmi les protéines du shelterin, la protéine de liaison auxrépétitions télomériques TRF2 et son partenaire constitutif RAP1 sont lesfacteurs majeurs responsables de la protection des extrémités. Nous avonsétudié en détails l'assemblage du complexe TRF2/RAP1 par des approchesintégrées de biologie structurale, de biophysique et de biochimie.Nous avons montré que cet assemblage s'accompagne d'importants ajustementsde conformation des deux protéines, et implique une interaction de basseaffinité qui engage de grandes régions des deux protéines et affecte leurspropriétés d'interactions. / Telomeres are the ends of eukaryotic linear chromosomes. They are made oftandem repeats of a short guanine-rich motif and bound by specific proteins.In vertebrates, these proteins form a complex called shelterin, theintegrity of which is critical to ensure proper replication of chromosomeends and to protect them against illicit targeting by DNA double-strandbreak repair pathways. Telomere dysfunctions lead to genome instability,which can ultimately cause senescence or cancer. Telomeres are a subnuclearregion in which shelterin proteins are highly enriched, enhancing lowaffinity interactions of important biological function. Among shelterinproteins, telomeric repeat-binding protein TRF2 and its constitutive partnerRAP1 are the main factors responsible for end protection. We studied indetails the assembly of TRF2/RAP1 complex by means of integrated structural,biophysical and biochemical approaches. We showed that this assemblydisplays important conformational adjustments of both proteins, and involvesa low affinity interaction engaging large regions in both proteins whichaffects their interaction properties.

Les télomères garantissent la stabilité des extrémités chromosomiques. Une défaillance de protection entraine l’apparition de chromosomes dicentriques (c-à-d. possédant deux centromères) instables en mitose. La présence de chromosomes dicentriques est donc une source de mutagénèse et une menace pour la viabilité des cellules. Chez Saccharomyces cerevisiae, les dicentriques issus d’une fusion de télomères cassent préférentiellement à la fusion. Ce processus inexpliqué permet la régénération d’un caryotype normal et protège les chromosomes des conséquences néfastes d’une fusion accidentelle de leurs extrémités. Ce manuscrit explore les mécanismes moléculaires de cette voie de secours. La haute affinité de Rap1, pour ses sites consensus en tandem ou pour des séquences télomériques est suffisantes pour former un point chaud de cassure des chromosomes dicentriques. Une protéine hétérologue ayant aussi une haute affinité fixation pour sa séquence mime la présence de fusions de télomères, montrant que la forte affinité d’une protéine pour ses sites en tandem suffit à créer un point chaud. En l’absence de séquence télomérique interne, les chromosomes dicentriques cassent plutôt aux régions péricentromériques. Ces positions de cassure dépendent d’une force générée par les Condensines capable de relocaliser rapidement les centromères des chromosomes dicentriques au site de cytodiérèse avant leur cassure. De plus, le repliement des chromosomes dicentriques dépendant des Condensines est également nécessaire à une cassure préférentielle aux séquences fixant Rap1. En anaphase, ces séquences forment aussi un isolateur capable de séparer deux domaines chromosomiques. Ainsi, les télomères fusionnés sont secourus par un mécanisme qui favorise une capture des fusions et des régions péricentromériques par le septum dépendant de la conformation des chromosomes dirigées par les Condensines et par Rap1, Ces résultats suggèrent que les séquences télomériques fixant Rap1 bloquent l’extrusion de boucles par Condensine. De plus ce travail propose un nouvel outil pour l’étude de la condensation in vivo. Il montre également que la cassure des chromosomes dicentriques survient pendant la septation et que cytodiérèse n’est pas ralentie par la présence d’un pont de chromatine. / Telomeres ensure chromosome end stability. Failure to do so would lead to chromosome end fusions and the formation dicentric chromosomes (i.e. chromosomes with two centromeres) that are unstable in mitosis. Dicentrics are a threat to cell viability and a source of extensive mutagenesis. In Saccharomyces cerevisiae, dicentrics formed by telomere fusion preferentially break at the fusion. This unexplained process allows the recovery of a normal karyotype and protects the genome from the detrimental consequences of accidental telomere fusions. Here, I address the molecular basis of this rescue pathway. Simple tandem arrays tightly bound by the telomere factor Rap1 or a heterologous high-affinity DNA binding factor are sufficient to establish breakage hotspots, mimicking telomere fusions within dicentrics. I also adress the mechanism allowing breakage at pericentromeric regions when dicentric do not bear telomeric sequences. During anaphase, Condensins generate forces sufficient to rapidly relocalize the centromeres to the bud neck and refold dicentrics prior their breakage by cytokinesis. This relocalisation is essential for breakage at pericentromeres. Moreover Condensin-dependent refolding is essential to the preferential breakage at telomere fusions, more generally at Rap1-bound arrays and which delimit insulated chromosomal domains. Thus, the rescue of fused telomeres results from a Condensin- and Rap1-driven chromosome conformation that favours fusion entrapment where the septum closes. These results suggest that Rap1-bound telomere sequences stall loop-extrusion by Condensins. In addition, this work provides a new and direct way to monitor Condensin activity on chromatin in live cells. It also shows that dicentric chromosomes are broken during septation and that cytokinesis is not delayed by chromatin bridges.

High Mobility Group AT-hook protein 2 (HMGA2) is a non-histone chromatin binding protein expressed in stem cells, cancer cells but not in normal human somatic cells. The presence of HMGA2 in cancer correlates with advanced neoplastic disease and poor prognosis. HMGA2 plays important roles in Base Excision Repair (BER) and at replication forks. HMGA2 is present at mammalian metaphase telomeres and its loss induces chromosomal aberrations. However, the functional role of HMGA2 at telomeres remains elusive. We hypothesized a protective role of HMGA2 that guards telomeres and modulates DNA damage repair signaling pathways. Employing different HMGA2+ human tumor cell models, we investigated the HMGA2-mediated functions that contribute to chemoresistance in glioblastoma (GB). This study presents a novel interaction of HMGA2 with telomeric protein TRF2 (Telomere Repeat-Binding Factor 2). This interaction retains TRF2 at telomeres, thus capping the telomeres and reducing telomere-dysfunction induced foci despite induced telomere stress. Loss of HMGA2 coincides with increased phosphorylation of TRF2, decreased TRF2 retention at telomeres and increased formation of telomeric aggregates, anaphase bridges and micronuclei. These findings provide new evidence for a unique role of HMGA2 at telomeres as a novel contributor of telomeric integrity. We show that upon DNA damage, HMGA2 causes increased and sustained phosphorylation of Ataxia Telangiectasia and Rad3-related kinase (ATR) and checkpoint kinase 1 (CHK1). Prolonged presence of pCHK1Ser296 coincides with prolonged G2/M block and increased tumor cell survival. The relationship between (ATR)-CHK1 DNA damage response pathway and HMGA2 identifies a novel mechanism by which HMGA2 can alter DNA repair function in cancer cells. We identified HMGA2 as a novel factor contributing to temozolomide (TMZ) resistance in GB. HMGA2 knockdown sensitizes the GB cells to TMZ. We propose a specific combination of FDA-approved drugs, TMZ and Dovitinib (DOV), to increase GB cell death. We show that DOV downregulates key BER proteins, attenuates pSTAT3-coordinated Lin28A and HMGA2 expression. Our results suggest that a sequential therapeutic strategy of pretreating GB cells with DOV followed by a sequence of TMZ and DOV diminishes TMZ resistance and enhances the ability of TMZ to induce GB cell death. Overall, we identified HMGA2 as a multifunctional survival factor in human cancer cells and showed that targeting HMGA2 is a valid strategy to combat HMGA2+ cancer cells. / February 2016

Cell adhesion and migration play crucial roles in development of multicellular organisms, immune surveillance, wound repair and cancer metastasis. The Gβγ subunits of heterotrimeric G-proteins have been implicated in signalling activities that promote cell adhesion and migration but the molecular mechanisms are unclear. Using a mass-spectrometry based proteomic approach we identified a protein complex between Gβγ and Rap1a that is bridged by a novel Rap1 effector, Radil. Overexpression of constitutively active Rap1a, Gβγ or stimulation of cells with the GPCR ligand fMLP triggers recruitment of Radil to the plasma membrane. Exogenous expression of Radil promotes cell spreading through Rap1-dependent inside-out activation of integrins leading to enhanced cell-matrix adhesion. Structure function experiments demonstrated that the RA and PDZ domains of Radil are required for its ability to promote cell adhesion. Using phage-display and mass-spectrometry we identified the kinesin family protein KIF14 as a novel interacting partner for Radil. Both KIF14 and Radil colocalized on microtubules in a PDZ-dependent manner. Depletion of KIF14 or disruption of microtubules led to accumulation of Radil at the cell membrane. Functionally, KIF14 is a negative regulator of Radil signalling as its depletion increased cell spreading and integrin activation and both phenotypes are rescued by simultaneous knockdown of Radil. Knockdown of KIF14 affects focal adhesion dynamics, which we determined is due to delayed adhesion disassembly. Depletion of either KIF14 or Radil dramatically decreased breast cancer cell migration and invasion in vitro. Additionally, knockdown of Radil compromised the ability of cells to metastasize to the lung and reduced tu-mor growth in xenograft mouse models. Collectively, these studies describe a functional re-quirement for the Gβγ-Rap1a-Radil complex during GPCR signalling for the control of integrin-mediated cell adhesion, cell motility and cancer progression.

Cell adhesion and migration play crucial roles in development of multicellular organisms, immune surveillance, wound repair and cancer metastasis. The Gβγ subunits of heterotrimeric G-proteins have been implicated in signalling activities that promote cell adhesion and migration but the molecular mechanisms are unclear. Using a mass-spectrometry based proteomic approach we identified a protein complex between Gβγ and Rap1a that is bridged by a novel Rap1 effector, Radil. Overexpression of constitutively active Rap1a, Gβγ or stimulation of cells with the GPCR ligand fMLP triggers recruitment of Radil to the plasma membrane. Exogenous expression of Radil promotes cell spreading through Rap1-dependent inside-out activation of integrins leading to enhanced cell-matrix adhesion. Structure function experiments demonstrated that the RA and PDZ domains of Radil are required for its ability to promote cell adhesion. Using phage-display and mass-spectrometry we identified the kinesin family protein KIF14 as a novel interacting partner for Radil. Both KIF14 and Radil colocalized on microtubules in a PDZ-dependent manner. Depletion of KIF14 or disruption of microtubules led to accumulation of Radil at the cell membrane. Functionally, KIF14 is a negative regulator of Radil signalling as its depletion increased cell spreading and integrin activation and both phenotypes are rescued by simultaneous knockdown of Radil. Knockdown of KIF14 affects focal adhesion dynamics, which we determined is due to delayed adhesion disassembly. Depletion of either KIF14 or Radil dramatically decreased breast cancer cell migration and invasion in vitro. Additionally, knockdown of Radil compromised the ability of cells to metastasize to the lung and reduced tu-mor growth in xenograft mouse models. Collectively, these studies describe a functional re-quirement for the Gβγ-Rap1a-Radil complex during GPCR signalling for the control of integrin-mediated cell adhesion, cell motility and cancer progression.

Despite recent advances in oncology and extensive research efforts, gliomas remain essentially incurable. Glioblastoma multiforme (GBM, WHO grade IV) is the most common glioma and may arise de novo or progress from a lower-grade lesion. GBM is characterized by invasive growth, aberrant angiogenesis and necrosis. The heterogeneity of GBM is further complicated by the contribution of the inflammation that is facilitated by immune cells that reside in and infiltrate this immuno-privileged organ. One of the cells types present in the tumor microenvironment are mast cells (MC) that accumulate in the tumor in a grade-dependent manner. GBM cells secrete a plethora of cytokines acting as chemoattractants in MC recruitment and to a lesser degree induce MC proliferation in situ. Expression of one of the cytokines secreted by GBM cells - macrophage migration inhibitory factor (MIF) - correlates with MC accumulation in vivo. GBM cells invade the surrounding parenchyma making complete resection impossible. Here, migration was studied with the focus on RAP1 and its negative regulator RAP1GAP. Activation of RAP1 signaling by lentiviral silencing of RAP1GAP lead to decrease in cell migration and a shift in expression of SOX2 and GFAP, presumably enhancing stem cell phenotype. MicroRNAs are small non-coding RNAs known to regulate the mRNA network. miR-21 is highly overexpressed in the majority of cancers including GBM. Its expression is strictly regulated during embryonic development of the brain. SOX2 is co-regulated with miR-21 demarcating a cell population with neural/glial progenitor/stem cell properties. In an experimental mouse model, expression of miR-21 can be sustained by forced expression of PDGF-BB leading to gliomagenesis. GBM cells seem to be addicted to oncogenic properties of miR-21 as its knockdown leads to extensive apoptosis. This observation combined with the fact that miR-21 is absent in the normal adult mammalian brain suggest miR-21 to be an excellent therapeutic target. Effects of conventional therapy (surgery combined with radiochemotherapy) on prolonging patient survival have reached a plateau. New effective personalized therapeutic modalities need to be designed and implemented. Targeting the tumor microenvironment as well as cell intrinsic properties like invasive potential, stemness and onco-miR addiction studied in this thesis will hopefully lead to efficient disruption of GBM’s aberrant ecosystem.

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La terminaison de la transcription est essentielle, aussi bien pour assurer la formation de l’extrémité 3’ de transcrits fonctionnels que pour éviter les phénomènes d’interférence transcriptionnelle entre des régions transcrites adjacentes. Ceci est particulièrement important dans un génome compact comme celui de S. cerevisiae. La terminaison est aussi l’une des stratégies principales que la cellule emploie pour contrôler et limiter la transcription dite envahissante ou cachée. Chez S. cerevisiae, l’ARN polymérase II est responsable de la transcription des ARNm et de nombreuses classes d’ARN non codants tels que les sn(o)ARN et les CUT (Cryptic Unstable Transcripts). Ces derniers représentent une fraction importante des transcrits issus de la transcription cachée. Il existe deux voies canoniques de terminaison de la transcription par cette polymérase. Elles font intervenir le complexe de clivage et de polyadénylation, CPF-CF, notamment pour la terminaison des ARNm ou le complexe NNS pour la terminaison des sn(o)ARN et des CUT. Au cours de ma thèse j’ai étudié deux aspects de la terminaison de la transcription : 1) l’étude des motifs de recrutement du complexe NNS et 2) l’identification et la caractérisation d’une nouvelle voie de terminaison par le facteur Rap1. Les complexes CPF-CF et NNS agissent tous les deux en liant le transcrit naissant et l’ARN pol II. Le complexe NNS lie l’ARN naissant grâce à ses sous-unités Nrd1 et Nab3 qui reconnaissent des motifs spécifiques. Cependant, bien que la séquence de ces motifs soit maintenant connue, leur présence ne permet pas de définir de façon certaine un terminateur. En effet, le nombre de ces motifs varie beaucoup d’un terminateur à l’autre. Afin de mieux comprendre la structure des terminateurs ciblés par le complexe NNS et l’organisation des motifs liés par Nrd1 et Nab3, j’ai recherché les séquences impliquées dans la terminaison d’un CUT modèle en réalisant une mutagenèse aléatoire et j’ai identifié par SELEX des motifs de fixation optimale du dimère Nrd1-Nab3. Un second volet de ma thèse porte sur la caractérisation d’une nouvelle voie de terminaison de la transcription dépendante du facteur Rap1. Rap1 est important pour la structure des télomères et c’est aussi un facteur de transcription ciblant des centaines de promoteurs. Il active ou réprime l’initiation de la transcription notamment en recrutant des complexes de remodelage de la chromatine sur les promoteurs ciblés. De façon surprenante, le motif de fixation de ce facteur a été identifié dans des séquences capables de terminer la transcription isolées au laboratoire. Mes travaux ont permis de caractériser le mécanisme de terminaison par Rap1 et de distinguer cette voie des voies de terminaison canoniques. Ce facteur, lié à l’ADN, agit comme une barrière en bloquant la progression de l’ARN polymérase II par un mécanisme de « road-block ». Les polymérases ainsi arrêtées sont ciblées par une voie qui permet leur élimination lorsqu’elles sont bloquées par des dégâts sur l’ADN, impliquant leur ubiquitination et vraisemblablement leur dégradation par le protéasome. Les ARN libérés sont polyadénylés par la poly(A)-polymérase Trf4 et dégradés par l’exosome nucléaire. Ce mécanisme de terminaison est utilisé dans un contexte naturel puisque j’ai identifié des transcrits endogènes de S. cerevisiae terminés par cette voie. Nous proposons que la terminaison par Rap1 contribue au contrôle de la transcription envahissante. Ce facteur assurerait ainsi au niveau des promoteurs qu’il lie une double fonction de facteur de transcription et de protection de ces promoteurs contre l’interférence transcriptionnelle. / Transcription termination is essential, both for the 3’ end formation of functional transcripts and to avoid transcriptional interference between adjacent transcription units. This is particularly important in a compact genome such as S. cerevisiae. Termination is also one of the main strategies used by the cell to control and limit the “pervasive” or “hidden” transcription. In S. cerevisiae, RNA pol II is responsible for the transcription of the mRNAs and numerous non-coding RNA families such as the sn(o)RNAs and the CUTs (Cryptic Unstable Transcripts). CUTs represent a large fraction of the “pervasive” or “hidden” transcription. There are two canonical transcription termination pathways for this RNA polymerase. They involve the cleavage and polyadenylation complex (CPF-CF), in particular for the mRNAs termination, or the NNS complex for sn(o)RNAs and CUTs termination. During my thesis I studied two aspects or the transcription termination: 1) the motifs involved in the NNS complex recruitment on RNA and 2) the identification and the characterization of a new termination pathway by Rap1. CPF-CF and NNS complex are both recruited on the nascent transcript and on the RNA pol II. The NNS complex binds the RNA through its subunits Nrd1 and Nab3 which recognize specific motifs. Nonetheless, even if these motif sequences are now known, their presence does not elicit the certain identification of NNS dependent terminators. To clarify the NNS dependent terminator structure and the organization of the motifs bound by Nrd1 and Nab3 I looked for the sequences involved in a specific CUT termination doing a random mutagenesis experiment and I identified by SELEX the Nrd1-Nab3 dimer optimal binding motifs. A second part of my thesis concerns the characterization of a new transcription termination pathway dependent on the Rap1 factor. Rap1 is important for the telomere structure and it is also a transcription factor that targets hundred of promoters. It activates or represses transcription initiation recruiting chromatin remodeling complexes on the targeted promoters. Surprisingly, the Rap1 binding motifs have been identified among sequences eliciting termination isolated in the laboratory. My work has led to the characterization of the termination mechanism by Rap1 and distinguished this pathway from the two canonical pathways. This factor, bound to DNA, acts as a barrier blocking the RNA pol II progression by a road-block mechanism. These arrested polymerases are targeted by a pathway responsible for the elimination of RNA pol II blocked by DNA damages, implying their ubiquitination and probably their degradation by the proteasome. The released RNAs are polyadenylated by the poly(A) polymerase Trf4 and degraded by the nuclear exosome. This termination mechanism is used in a natural context since I identified S. cerevisiae endogenous transcripts terminated by this pathway. We propose that the Rap1 termination contributes to the pervasive transcription control. This factor could elicit, on its bound promoters, a double function of both transcription factor and protection of these promoters against transcriptional interference.

Les télomères sont des séquences d’ADN, généralement répétées en tandem, localisées à l’extrémité des chromosomes linéaires. Une des fonctions principales des télomères est de différencier l’extrémité des chromosomes des cassures double-brin, et ainsi de prévenir l’activation des voies de réparation de l’ADN. Chez les mammifères, cette fonction est plus spécifiquement assurée par le complexe shelterin. Il s’agit d’un complexe hétérogène composé de six protéines distinctes : TRF1, TRF2, POT1, RAP1, TPP1 et TIN2, qui interagit spécifiquement avec l’ADN télomérique. Au sein de ce complexe, les protéines RAP1 et TRF2 coopèrent afin d’empêcher l’extrémité des chromosomes d’être perçue comme un dommage de l’ADN, ce qui autrement aboutirait à des fusions inter-chromosomiques suite au processus de réparation. La protéine TRF2 se lie directement à la molécule d’ADN dans laquelle elle s’enroule de façon spécifique. Cette propriété est primordiale pour générer une structure d’ADN en forme de boucle, appelée t-loop, et dont le bon fonctionnement des télomères dépend. Les travaux effectués au cours de cette thèse ont mis en évidence deux scenarii indépendants dans lesquels la protéine RAP1 assure un rôle critique dans la stabilité des télomères. Premièrement, RAP1 peut prévenir les fusions inter-chromosomiques dans des cellules exprimant une forme altérée de TRF2 incapable de former des t-loops. Deuxièmement, l’inhibition de RAP1 dans des cellules en sénescence réplicative conduit à l’activation des voies de réparation de l’ADN et à la formation de fusions inter-chromosomiques. Ces observations font écho à des résultats précédents obtenus dans des cellules HeLa traitées avec l’inhibiteur de la télomérase BIBR1532, et dont l’expression de la protéine RAP1 était abolie par shRNA. De plus, j’ai montré que les fusions interchromosomiques engendrées par la perte de RAP1 sont dépendantes de la ligase IV, qui est un acteur principal de la voie de réparation de l’ADN par recombinaison non-homologue (NHEJ). Dans l’ensemble, ces travaux démontrent l’importance de la protéine RAP1 dans la stabilité des télomères lorsque la protéine TRF2 est non fonctionnelle, mais aussi dans des situations physiologiques telles que la sénescence réplicative. / In mammals, the shelterin complex is the guardian of telomere stability. It operates through a set of six proteins (TRF1, TRF2, POT1, RAP1, TPP1 and TIN2) that binds telomeric DNA and protects it from being recognized as DNA double-strand breaks and therefore control DNA repair and DNA damage response pathways. Among them, RAP1 and TRF2 cooperate and together protect chromosome extremities from end-to-end fusions. TRF2 is seen as a major factor to control telomere DNA topology by wrapping DNA around itself in a right handed manner. This property of TRF2 is required to promote the formation of t-loops, special DNA structures at telomeres that are considered as protective barriers to DNA damage response and fusion. Here we demonstrate two independent situations where RAP1 dysfunction is critical for telomere protection. First, in cells expressing a wrapping-deficient TRF2 allele that cannot form t-loops, RAP1 appears as a backup anti-fusion mechanism. Second, RAP1 downregulation in replicative senescent cells leads to telomere fusions and DNA damage response activation. This is consistent with similar observations in HeLa cells treated with the telomerase inhibitor BIBR1532, and in which RAP1 expression was abolished by an inducible shRNA system. In addition, we show that fusions triggered by RAP1 loss are dependent upon ligase IV, which is a key player of the classical non-homologous end-joining (c-NHEJ) repair pathway. Altogether, these results indicate that RAP1 takes over telomere protection when TRF2 cannot properly function or in the normal physiological situation, such as replicative senescence.

Les tissus épithéliaux présentent deux caractéristiques majeures, ils sont robustes (rôle de barrière) mais également plastiques lors de la morphogénèse. L'homéostasie des tissus épithéliaux repose sur la régulation de la balance prolifération/mort cellulaire. Dans ma thèse, je décris tout d'abord, les mécanismes moléculaires permettant à la cellule épithéliale de se diviser tout en maintenant l'intégrité du tissu. J'ai ensuite altéré cette intégrité, en utilisant le système de génération de clônes mosaïques, afin de comprendre comment la cohésion du tissu est maintenue. Ce travail m'a alors permis de comprendre comment l'adhérence est modulée, puis restaurée, au cours de la division cellulaire. Ainsi, j'ai montré que l'intégrité des tissus est assurée par l'action concomitante des forces d'adhésion et des forces de tension. Enfin, mon travail apporte également des éléments clés pour l'étude de la perte d'adhérence des cellules tumorales responsable en partie, de la progression des tumeurs solides en métastases. / Tissue homeostasis relies on the tight regulation of cell proliferation and cell death. Epithelial tissues are robust tissues that support the structure of developing embryos and adult organs and are effective barriers that physically protect the organism against pathogens. In my thesis, I have first described the molecular mechanisms responsible for maintaining tissue integrity during epithelial cell division. I have then abrogated this integrity by inducing mosaic clones within tissues to understand how tissue cohesion is maintained. This work shows how the continuity of adhesive properties is ensured during cell division. It also reveals new key elements that result in loss of adhesion in tissues and thus may be responsible for the progession from solid cancer to metastasis.