Orientador: Maria Aparecida Marchesan Rodrigues / Coorientador: Luís Fernando Barbisan / Banca: Carla Adriene da Silva Franchi / Banca: Fernando Silva Ramalho / Banca: Juliana Elaine Perobelli / Banca: Luis Antonio Justilin Junior / Resumo: Investigamos as repercussões do padrão alimentar ocidental, rico em gordura, (óleo de milho) (20%) e pobre em micronutrientes [ácido fólico (1 mg/g), colina (0,12%) e fibra (2%)], ocorrido durante a gestação, lactação e puberdade na susceptibilidade ao desenvolvimento de câncer do cólon induzido pela 1,2-dimetilhidrazina (DMH) no rato. Avaliamos se a reintrodução da dieta Ocidental durante a vida adulta em animais previamente expostos à dieta Ocidental durante a vida intrauterina, lactação e puberdade, pode modificar a susceptibilidade à oncogênese do cólon pela DMH. Ratas fêmeas SD prenhes receberam dieta semi-purificada controle (AIN-93) ou do tipo Ocidental (WD - Western Style Diet) a partir do dia gestacional 12 (DG 12). Após o desmame (dia 21), a prole de machos permaneceu com o mesmo tipo de dieta de suas mães até o dia pós-natal 50 (DPN 50). Nesse momento, receberam quatro injeções subcutâneas de DMH (40mg/kg) e foram divididos nos seguintes grupos/dietas: Grupo I (AIN-93/DMH/AIN-93) recebeu dieta controle durante todo o experimento (DG 12- DPN 370), o Grupo II (AIN-93/DMH/Ocidental) recebeu dieta Ocidental somente na vida adulta, a partir do DPN 260, Grupo III (Ocidental/DMH/AIN-93) recebeu dieta Ocidental desde a vida intrauterina até o início da puberdade (DG 12 - DPN 50), e o Grupo IV (Ocidental/DMH/Ocidental) recebeu dieta Ocidental desde a vida intrauterina até o início da puberdade (DG 12 - DPN 50), e foi reintroduzido à dieta Ocidental na vida adulta (DPN 260). Todos os animais foram eutanasiados ao final da 50ª semana de experimento (DPN 370). O cólon foi removido e submetido à análise estereoscópica e histológica para determinar o número, distribuição e multiplicidade dos focos de criptas aberrantes (FCAs). As características das lesões neoplásicas e os níveis séricos de insulina e leptina foram analisados à necropsia. A exposição à dieta Ocidental durante a gestação,... / Abstract: We examined the effects of a Western Style Diet (WD), high in fat (corn oil) (20%) and low in micronutrients [i.e.; folic acid (1 mg/g), choline (0.12%) and fiber (2%)] during pregnancy, lactation and in prepubertal stage to examine the susceptibility to colon carcinogenesis induced by dimethylhydrazine (DMH) in male Sprague-Dawley (SD) rats as later adults. We also evaluated whether WD reintroduction during adulthood can modify susceptibility to colon carcinogenesis. Pregnant SD rats received one of two diets AIN-93G or WD at gestational day 12 (GD 12). F1 male pups were weaned (21d) and fed the same AIN- 93G or WD diets from their dams until postnatal day 50 (PND 50). At this point, they were given four subcutaneous injections of carcinogen DMH (40 mg/body weight) and were shared the following diets/group: group I (AIN-93/DMH/AIN-93) a lifetime control diet-fed group (GD 12 until postnatal day - PND 370), group II (AIN-93/DMH/WD) received WD only in adulthood (at PND 260), group III (WD/DMH/AIN-93) received WD during pregnancy from dams until prepubertal stage (GD 12 - PND 50) and group IV (WD/DMH/WD), received WD since pregnancy from dams (GD 12) until prepubertal stage (PND 50) and was reintroduced to WD during adulthood (PND 260). All groups were euthanized at the end of 50th week (PND 370). The colon was removed and the aberrant crypt foci (ACF) were stereoscopically and histologically scored for number, distribution and multiplicity. Neoplastic lesions and serum insulin and leptin concentrations were analysed at necropsy. ACF multiplicity and dysplastic lesions were significantly higher in the group fed WD during pregnancy until prepubertal stage (group III) than control group (group I). In the group III, the number of adenocarcinomas were higher than control (group I). In the group fed WD only in adulthood (group II), ACF multiplicity was significantly higher than in the control (group I). The group ... / Doutor

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Coorientador: Yuri Karen Sinzato / Banca: Maria José Sparça Salles / Banca: Felipe Perecin / Resumo: Não disponível / Abstract: In vitro studies suggest that maternal hyperglycemia insult impairs the early embryogenesis in the preimplantation period. In this paper, we show that streptozotocin given at birth day of life or in adulthood of rats caused hyperglycemic state. Regardless of hyperglycemic intensities (mild or severe diabetes), the embryos of these dams presented development retardation and decreased development competence. Apoptosis was detected using terminal dUTP nick end labeling (TUNEL) assays, and the morulas from mild and severe diabetic rats have a higher incidence of apoptotic cells than control embryos. Tumor necrosis factor-alpha, a cytokine whose synthesis is up-regulated in the diabetic uterus, did not alter the incidence of TUNEL-positive nuclei. The glycemic intensity is related with the increased in the apoptosis indexes in morulas. On the other hand, dams with hyperglycemia, regardless of the glycemic intensity and of the tumor necrosis factor-alpha level presented preimplantation embryos with development retardation and increase of non-viable preimplantation embryos, suggesting that the presence of the hyperglycemia leads to a decreased competence development of preimplantation embryos / Mestre

Orientador: Luis Fernando Barbisan. / Banca: José Maurício Sforcin / Banca: Luciana Azevedo / Banca: Luis Antonio Justulin Junior / Banca: Maria Aparecida Marchesan Rodrigues / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades quimioprotetoras e terapêuticas do extrato de Ginkgo biloba (EGb) sobre o desenvolvimento de lesões mamárias neoplásicas induzidas pela dimetil(a)benzoantraceno (DMBA) em ratas da linhagem Sprague-Dawley. No artigo 1 (Quimioprevenção), os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos experimentais, sendo dois grupos controles (Positivo e Negativo) e dois grupos teste. Aos 51 dias de idade, as fêmeas receberão por gavagem (i..g) dose única de 60mg/kg de DMBA ou de óleo de Canola (veiculo da DMBA) e receberam ou não a substância teste (EGb) misturada à ração basal nas concentrações de 0,1 e 0,2%. Ao final da 18ª semana, todos os animais foram eutanasiados na câmara de CO2 e foram coletados ovários, úteros e tumores mamários, fixados em formalina tamponada 10% e processados histologicamente para as análises histopatológicas. Também foram coletadas e congeladas (nitrogênio líquido) amostras dos tumores mamários para a análise dos níveis protéicos de bax, bcl-2 e do receptor de estrógenoalfa (RE-a). O tratamento com EGb nas duas concentrações não modificou a latência, incidência, multiplicidade e tipos histológicos das neoplasias mamárias e não foi capaz de impedir o crescimento e malignidade dessas neoplasias. Além disso, o EGb não alterou os níveis das proteínas apoptóticas bax, bcl-2 e do RE-a nas neoplasias mamárias induzidas pela DMBA. No artigo 2 (Terapêutica), todos os animais foram iniciados pela DMBA (80mg/kg; i.g.). A partir do momento que apresentaram tumores mamários palpáveis, os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos experimentais recebendo ou não o tratamento com Tamoxifeno (TAM) (10mg/kg; i.g.) e/ou EGb (50-100mg/kg; i.p.) durante 28 dias consecutivos. No início do tratamento os animais foram anestesiados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study was designed to investigate the chemopreventive and therapeutic properties of Ginkgo biloba extract (EGb) on 7,12-dimethylbenz( o)anthracene (DMBA)-induced mammary tumors in female Sprague-Dawley rats (SD). In the manuscript 1 (Chemoprevention), the experimental design comprised of four experimental groups, including two control groups (positive e negative) and two test-groups. The 51 days-old female SD rats received a single dose of DMBA (60 mg/kg, i.g.) or a single administration of Canola oil (DMBA vehicle) and were fed with basal diet or EGb supplemented diet at 0,1 or 0,2 %. At 18th week, all animals were euthanized in CO2 atmosphere, the ovaries, uterus and mammary tumors were fixed in 10% phosphate-buffered formalin and processed in order to provide 5-μm thick paraffin sections for histological analysis. Also, tumor samples were frozen in liquid nitrogen for the analysis of bax, bcl-2 and estrogen receptor alpha (ER-a) protein expression by Western blot. The EGb intake did not alter the latency, incidence, multiplicity and histological pattern, neither the growth and malignancy of the mammary tumors. Besides, the treatment with EGb did not modify the bax, bcl-2 and estrogen receptor alpha (ER-a) expression in the mammary neoplasm induced by DMBA. In the manuscript 2 (Therapy), the experimental design comprised of four experimental groups. Female SD rats bearing palpable mammary neoplasms induced by DMBA (80 mg/kg b.wt., i.g.) received (G1) TAM (10 mg/kg b.wt., i.g.); (G2 and G3) TAM + EGb (50 or 100 mg/Kg b.wt., i.p.) or (G4) EGb (100 mg/kg b.wt., i.p.) during 28 days. The therapeutic effectiveness of different treatments were evaluated by measuring tumor volume regression (cm3), live/degenerative/necrotic area analysis (μm2) in tumor sections stained by HE... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: José Carlos Silva Camargo Filho / Banca: Marcelo Papoti / Banca: Mario Jefferson Quirino Louzada / Resumo: Objetivo: Investigar as alterações na composição corporal e resistência aeróbia de animais submetidos a diferentes protocolos de treinamento físico. Método: Foram utilizados 55 animais da raça "Wistar", com 100 dias de idade, ao longo de oito semanas. Os animais foram distribuídos aleatoriamente entre quatro grupos, controle (CTLE); anaeróbio neuromuscular (TAN); aeróbio (TAE) e treinamento concorrente (TCc). Após quatro semanas, parte dos animais foram eutanasiados. Foram mensurados, índice de massa corporal (IMC), índice de Lee (Lee) e tecido adiposo epididimal (TecAdp), massa corporal e coeficiente de eficácia alimentar (CoefAlim). O limiar anaeróbio (Lan) foi determinado pela carga crítica de trabalho (7, 9 e 11% do peso corporal). Resultados: Foi verificado que o TAE e TCc foram mais eficientes na diminuição do Lee e IMC, nos períodos de quatro e oito semanas respectivamente (LeeTAE=X:2,86±0,08; X:2,89±0,07 e LeeTCc=X:2,85±0,05; X:3,00±0,09). Em relação ao TecAdp, todos os grupos exercitados mostraram diminuição, com o TCc sendo menor após oito semanas (X:1,77±0,32). Por último, o TAN se destacou no período de oito semanas para o CoefAlim (X:31,57±3,70) e o TCc com maior valor de Lan (X:7,10±0,80). / Abstract: Objective: Investigate the effects of different physical training protocol in body composition and aerobic resistance in Wistar rats. Method: Were utilized 55 animals, with 100 days old, for eight weeks. The distribution was made between four groups, control (CTLE), neuromuscular anaerobic (TAN), aerobic (TAE) and concurrent training (TCc). After four weeks, part of animals has been euthanized. Were measured, the body indices (IMC), Lee indices (Lee), adiposity tissue epididymal (TecAdp), body mass and coefficient of efficacy feed. The Anaerobic Threshold is determined critical load work (7, 9 and 11% of body weight). Results: TAE and TCc treatments brought alterations in Lee and IMC, in four and eight weeks respective (LeeTAE=X:2,86±0,08; X:2,89±0,07 and LeeTCc=X:2,85±0,05; X:3,00±0,09). For TecAdp, all groups showed decrease, with TCc down value after eight weeks (X:1,77±0,32). Lastly, the TAN improve the CoefAlim (X:31,57±3,70) after eight weeks period and TCc with higher value for Lan (X:7,10±0,80) / Mestre

Orientador: José Ricardo de Arruda Miranda / Banca: Ricardo Brandt de Oliveira / Banca: Roberto Morato Fernandez / Resumo: O útero é um órgão constituído de musculatura lisa, que se contrai periodicamente devido às células de marca-passo localizadas no miométrio. As técnicas in vitro são as mais utilizadas para estudar as mudanças no comportamento uterino, porém não promovem uma análise em ambiente fisiológico real. Este trabalho teve como principal objetivo aplicar a técnica de Biosusceptometria de Corrente Alternada (BAC) e Eletromiografia (EMG) para estudos dos padrões elétrico e mecânico de contração uterina em ratas. O sistema BAC registra o evento mecânico através do deslocamento do material magnético inserido no meio biológico, enquanto o EMG registra a atividade elétrica da fibra muscular ativa através de estímulos na própria musculatura. Neste estudo, todas as medidas foram realizadas com ambas as técnicas atuando simultaneamente. Foram utilizadas 20 ratas Wistar não prenhes, com peso entre 200 e 300 gramas, com implantes de eletrodo e marcador magnético (MnFe2O4) na serosa do útero. Foi realizada uma análise das contrações em cada fase do ciclo estral e, posteriormente, foram realizadas análises utilizando drogas que alterassem o perfil normal de contração para confirmar a eficiência do método: a ocitocina e o butilbrometo de escopolamina. Os resultados mostraram que o útero, em seu estado normal, apresentou dois tipos nítidos de contração, de alta intensidade e baixa frequência (13,62 ± 1,503 mHz para contração mecânica e 13,17 ± 1,201 mHz para contração elétrica), e de baixa intensidade e alta frequência (62,52 ± 4,499 mHz para contração mecânica e 65,08 ± 6,341 mHz para contração elétrica). Em termos de frequência e morfologia, não foram constatadas diferenças entre as fases do ciclo estral. Em ambas as administrações de fármacos não houve uma modificação relevante quanto à freqüência. A amplitude no caso da ocitocina não apresentou diferenças significativas em nenhum dos... / Abstract: The Uterus is a smooth muscle organ that contracts periodically due to the peacemaker cells located on myometrium. In vitro techniques are the most used to study the change in the uterine behavior, still they lack on promoting a real physiological analyses. This main purpose of this study was to apply the Alternating Current Biosusceptometry (AC Biosusceptometry or ACB) and the Electromyography (EMG) systems to evaluate uterine electrical and mechanical patterns in rats. The ACB technique registers the mechanical event by acquiring the displacement of the magnetic material inserted in the biological system, while the EMG register the electrical activity of the active muscular fiber by simulating the muscle itself. Both electrical and mechanical studies were conducted simultaneously. For this study, 20 non pregnant Wistar rats weighting between 200 and 300 g were submitted to the electrode and magnetic marker (MnFe2O4) implant surgery on the uterus serous. Thus, the contraction pattern during the entire estrous cycle was acquired, followed by the same study under influence of specific drugs (oxytocin and scopolamine butylbromide), which had the function to modify the contraction profile to confirm the method efficiency. Results showed two distinct contraction patterns for the uterus on its normal condition. The ACB and EMG systems acquired a high intensity and low frequency (13,62 ± 1,503 mHz to mechanic contraction and 13,17 ± 1,201 mHz to electrical contraction) pattern along with a low intensity and high frequency (62,52 ± 4,499 mHz to mechanical contraction and 65,08 ± 6,341 mHz to electrical one). Although regarding frequency and morphology, no differences were observed among the estrous cycle phases. Neither the oxitocyn nor the butylbromide showed relevant interference on the frequency pattern. For the amplitude, despite the oxytocin have not presented significant differences in neither the events (electrical and mechanical), ... / Mestre

Orientador: Fábio Ermínio Mingatto / Banca:Karina Sayuri Utsunomiya / Banca: Gisele Fabrino Machado / Resumo: O fipronil é um inseticida utilizado para o controle de infestações parasitárias em animais e plantas. O seu mecanismo de ação ocorre por meio da inibição dos receptores do ácido γ-aminobutírico e dos canais de Cl-. Em mamíferos, além do sistema nervoso central, outros órgãos podem ser afetados pelo tratamento com fipronil, dentre eles o fígado. O presente estudo objetivou caracterizar os efeitos do fipronil sobre o metabolismo hepático, por meio da técnica de perfusão isolada de fígado de rato. Foram avaliados parâmetros associados ao metabolismo de carboidratos no período pós-prandial e no jejum e também o metabolismo de aminoácidos no jejum. O fipronil foi infundido no fígado na faixa de concentrações de 10 a 50 μM. O consumo de oxigênio foi monitorado por polarografia e nas amostras do perfusado efluente foram quantificadas as produções de glicose, lactato, piruvato, ureia e amônia. Em animais alimentados, o fipronil inibiu o consumo de oxigênio. Houve aumento da liberação de glicose e lactato provenientes do catabolismo do glicogênio, indicando estímulo da glicogenólise e glicólise. No fígado de animais em jejum, o fipronil inibiu a produção de glicose e de ureia a partir da L-alanina, enquanto a produção de amônia e de lactato foi aumentada. Esses resultados revelam que o fipronil inibe os processos biossintéticos e estimula os processos compensatórios de geração de ATP (glicogenólise e glicólise). A inibição do consumo de oxigênio corrobora que uma ação inibitória sobre a atividade respiratória mitocondrial e, portanto, uma interferência sobre o metabolismo energético seja o mecanismo de ação citotóxica do fipronil / Abstract: Fipronil is an insecticide used to control parasitic infestations in animals and plants. Its mechanism of action is through inhibition of receptor γ-aminobutyric acid and the Cl- channel. In mammals, besides the central nervous system, other organs may be affected by treatment with fipronil, including the liver. The present study aimed to characterize the effects of fipronil on hepatic metabolism, through the technique of isolated perfused rat liver. Parameters related to carbohydrate metabolism in the postprandial and fasting period and also the aminoacids metabolism during fasting were evaluated. Fipronil was infused in the perfused livers in the concentration range of 10-50 μM. Oxygen consumption was monitored by polarography and in samples of effluent perfusate the production of glucose, lactate, pyruvate, urea and ammonia was quantified. In fed animals, fipronil inhibited the oxygen consumption significantly. There was increased release of glucose and lactate from the catabolism of glycogen, indicating stimulation of glycogenolysis and glycolysis. In the liver of fasted animals, fipronil inhibited the production of glucose and urea from exogenous L-alanine, whereas the production of ammonia and lactate was increased. These results indicate that the fipronil inhibits biosynthetic processes (gluconeogenesis and ureagenesis) and stimulates compensatory processes of ATP formation (glycolysis and glycogenolysis). Inhibition of oxygen consumption corroborates the suggestion that an inhibitory effect on mitochondrial respiratory activity and therefore an interference with energy metabolism is the possible mechanism of cytotoxic action of fipronil / Mestre

Orientador: Juliany Gomes Quitzan / Resumo: A laparoscopia tem sido cada vez mais empregada na rotina médica e veterinária com o intuito de promover intervenções cirúrgicas e diagnósticas menos invasivas. Apesar de seus benefícios, há evidências de que a insuflação abdominal pode levar à isquemia dos órgãos, seguida pela injúria de reperfusão. Algumas medicações tem sido utilizadas na tentativa de prevenir ou minimizar os danos que podem ser causados pela injúria isquemia/reperfusão. O presente estudo teve por objetivo avaliar se o uso do sildenafil via oral, antes da realização do pneumoperitôneo, seria capaz de atenuar estes efeitos da isquemia/reperfusão. Foram utilizados 26 ratos Wistar machos, divididos em 3 grupos: controle (6), Sham (10) e S/P (10). O grupo S/P foi suplementado com 1mg/kg de citrato de sildenafil via oral. Os animais dos grupos Sham e S/P foram submetidos ao pneumoperitônio por 60 minutos, com pressão intra-abdominal de 12mmHg. A artéria carótida direita foi dissecada e canulada para que fossem colhidas amostras sanguíneas e avaliadas variáveis de oxigenação e ventilação (pressão parcial de oxigênio, pressão parcial de gás carbônico e saturação de oxigênio). Durante o procedimento também foram avaliadas variáveis hemodinâmicas (frequência cardíaca, frequência respiratória e pressão arterial média). Após 24 horas os animais foram submetidos à eutanásia e foram colhidos os rins para dosagem do estresse oxidativo, através da mensuração da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase, glutationaperoxidase e catalase, além do subproduto da peroxidação lipídica, o hidroperóxido. Os resultados observados em relação às variáveis hemodinâmicas e também de oxigenação e ventilação, não apresentaram diferença quando comparados os diferentes momentos dentro de um mesmo grupo, e na comparação entre os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Laparoscopy has been increasingly used in medical and veterinary routine in order to promote less invasive surgical and diagnostic interventions. Despite its benefits, there is evidence that abdominal insufflation can lead to ischemia of the organs, followed by reperfusion injury. Some medications have been used in attempts to prevent or minimize the damage that can be caused by injury ischemia/reperfusion. This study aimed to assess whether the use of oral sildenafil, prior to the pneumoperitoneum, was able to mitigate these effects of ischemia/reperfusion. We used 26 male Wistar rats, divided in 3 groups: control (6) Sham (10) and S/P (10). The S/P group was supplemented with 1 mg/kg of oral sildenafil citrate. The animals of the sham group and S/P were subjected to pneumoperitoneum for 60 minutes with intra-abdominal pressure of 12mmHg. The right carotid artery was dissected and cannulated in order to collect blood samples and evaluated oxygenation and ventilation variables (partial pressure of oxygen, partial pressure of carbon dioxide and oxygen saturation). During the procedure, hemodynamic variables were also evaluated (heart rate, respiratory rate and mean arterial pressure). After 24 hours the animals were euthanized and their kidneys were collected for dosage of oxidative stress by measuring the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutationaperoxidase, besides the byproduct of lipid peroxidation, hydroperoxide. The results observed for the hemodynamic variables and also oxygenation and ventilation, showed no difference when comparing the diferente times whithin the same group, and compared between groups. The values found for the antioxidant enzyme activity were similar in the S/P and control group. It was observed that the activities of the enzymes glutathione peroxidase and catalase were markedly increased, while... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Thais Borges César / Coorientador:Paulo Inácio da Costa / Banca: Neuza Mariko Aymoto Hassimotto / Banca: Alceu Afonso Jordão Jr. / Banca: Amanda Martins Baviera / Banca: Célia Maria de Sylos / Resumo: As polimetoxiflavonas (PMF) são uma subclasse do grupo dos flavonoides cítricos, as quais são conhecidas devido à ação antioxidante, anti-inflamatória, hipolipidêmica e anticâncer; além de elevada biodisponibilidade. Estudos recentes demonstram que os metabólitos gerados a partir das PMF são biologicamente ativos, e possuem efeitos benéficos superiores aos compostos originais. Objetivo: Este trabalho teve por objetivo, isolar e identificar metabólitos das PMF a partir da urina de ratos, e avaliar sua atividade biológica sobre a proteína transferidora de triglicerídeo microssomal (MTP) em células Huh7.5. Métodos: Trinta ratos Wistar adultos foram separados em 3 grupos (n = 10) e administrados com 200 mg/kg/dia de tangeretina (TAN), nobiletina (NOB) ou heptametoxiflavona (HMF), durante 15 dias. Os metabólitos foram extraídos da urina, isolados por cromatografia líquida preparativa, e identificados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC-ESI-MS) acoplada ao detector de UV (PDA). A ação dos metabólitos sobre a atividade da MTP foi avaliada por método fluorométrico. Resultados: Foram isolados metabólitos glucuronídeos com m/z [M+H]+ 565 amu (unidade de massa atômica), 551 amu, 535 amu, 521 amu, 505 amu; além de metabólitos hidroxilados com m/z [M+H]+ 419 amu, 405 amu, 389 amu, 375 amu, 359 amu, 329 amu, 315 amu. Os metabólitos TAN-4'-glucuronídeo (TAN-G1), TAN-dihidroxi-glucuronídeo (TAN-G2), TAN-4'-monohidroxilada (TAN-OH1), TAN-monohidroxilada (TAN-OH2), NOB-glucuroní... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The polymethoxylated flavones (PMF) are a subclass of flavonoids citrus, which are known because of their antioxidant, anti-inflammatory, hypolipidemic and anticancer properties; besides the high bioavailability that they present. Recent studies show that the metabolites generated from the PMF are biologically active and have beneficial effects greater than the original compounds. Objective: This study aimed to isolate and identify metabolites of PMF from the urine of rats, and evaluate its biological activity upon microsomal triglyceride transfer protein (MTP) in Huh7.5 cells. Methods: Thirty adult male Wistar rats were separated into 3 groups (n = 10) and fed with 200 mg / kg / day with tangeretin (TAN), nobiletina (NOB) or heptametoxiflavona (HMF) for 15 days. The metabolites were extracted from urine, isolated by preparative liquid chromatography and identified by high-performance liquid chromatography (HPLC-ESI-MS) coupled with UV detector (PDA). The action of the metabolites on the MTP activity was evaluated by fluorometric method. Results: We isolated glucuronide metabolites with m / z [M + H] + 565 amu (atomic mass unit), 551 amu, 535 amu, 521 amu, 505 amu; addition to the hydroxilated metabolites with m / z [M + H] + 419 amu, 405 amu, 389 amu, 375 amu, 359 amu, 329 amu, 315 amu. The TAN-4'-glucuronide metabolites (TAN-G1), TAN-dihydroxyglucuronide (TAN-G2), TAN-4'-monohidroxilada (TAN-OH1), TAN-monohydroxylada (TAN-OH2), NOB-glucuronide (NOB-G) NOB-monohydroxylada (NOB-OH), HMFmonohydroxylada (HMF-OH) have been identified and evaluated in in vitro assay. TAN-OH1 and NOB-OH reduced the MTP activity, and HMF-OH showed higher effect compared to its parent compound. PMF obtained from dry extract of orange peel, administered in rats, showed no effect on the MTP. Conclusion: These data show viable methods for isolation of the... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luís Fernando Barbisan / Banca: Noeme Souza Rocha / Banca: Luis Antônio Justulin Junior / Resumo: A atividade física mostra-se eficiente na melhoria da qualidade de vida de pacientes obesos e/ou com câncer, e tem mostrado efeitos benéficos contra a carcinogênese de cólon e mama em modelos de roedores. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito benéfico do treinamento aeróbico sobre a etapa de promoção da hepatocarcinogênese química em ratos Wistar alimentados ou não com dieta hiperlipídica. Os animais receberam dose única i.p. de 200 mg/kg de dietilnitrosamina no início do experimento para iniciação da hepatocarcinogênese. Duas semanas depois, os animais receberam quatro doses orais de 200 mg/Kg de 2-acetilaminofluoreno (2-AAF) e mais duas doses de 75 mg/kg de 2-AAF, dois e quatro dias após hepatectomia parcial de 70%. Na sexta semana do experimento, os animais receberam dieta padrão (DP, Grupos 1 e 2) ou dieta hiperlipídica (HP, Grupos 3 e 4) até o final da 22a semana do experimento. Os animais dos Grupos 2 e 4 foram submetidos a cinco seções semanais de natação (treinados) da 14a a 22a semana do experimento. Ao final da 22a semana, os animais foram eutanasiados e amostras de fígado foram coletadas para análise (histológica, imunoistoquímica, bioquímica e molecular). Ao final do período experimental, os valores médios do peso corporal dos grupos submetidos ao treinamento de natação foram inferiores aos respectivos grupos não treinados alimentados com dieta basal ou hiperlipídica, embora sem diferença significativa. O grupo que recebeu dieta hiperlipídica (G3) apresentou maior teor de gordura corpórea e de colesterol total, mas com redução significativa no grupo treinado (p <0,05). A concentração de hidroperóxido lipídico não diferiu entre os grupos não treinados e alimentados com dieta basal ou hiperlipídica. No entanto, uma redução significativa (p <0,05) nos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Laboratory studies have shown that moderate aerobic exercise inhibit colon and mammary carcinogenesis in rodent bioassays, but no repots exists on their protective action in liver carcinogenesis. Thus, the present study aimed to investigate the beneficial effects of swimming training on the promotion/progression stages of rat liver carcinogenesis. Male Wistar rats were submitted to chemically-induced liver carcinogenesis and allocated into four major groups according their dietary regimen (16-week) and training 5 days/week (8-week): two groups were fed a basal diet (BD) and trained or not and two groups were fed a high-fat diet (HFD) and trained or not. At week 20, the animals were killed and liver samples were processed to histological analyses, immunohistochemical detection of persistent or remodeling preneoplastic lesions (pPNL and rPNL) expressing placental glutathione S-transferase (GST-P) enzyme, proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cleaved caspase-3 and bcl-2 protein levels by western blotting or malonaldehyde (MDA) detection by HPLC. Overall analysis indicated that swimming training reduced the body weight and fat body in both BS and HFD groups, normalized total cholesterol levels in the HFD group and decreased the MDA levels and number of GST-P-positive pPNL and adenomas in BD group. Also, a favorable balance in PCNA, cleaved caspase-3 and bcl-2 levels was detected in the liver from BDtrained group in relation to BD-untrained group. The findings this study indicated that a moderate aerobic exercise protocol may attenuate liver carcinogenesis... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Banca: / Resumo: Lesão renal por isquemia e reperfusão estão envolvidas em muitas condições clínicas. A lesão de reperfusão leva a formação de espécies reativas de oxigênio e o alopurinol apresenta o potencial de diminuí-las. Os novos biomarcadores podem realizar o diagnóstico da lesão de maneira precoce. O objetivo desse estudo foi investigar se o alopurinol tem efeito protetor sobre os rins utilizando os novos biomarcadores de dano (NGALp, NGALu,KIM-1e IL-18), a função renal e a histologia renal durante lesão de isquemia e reperfusão (I/R) em ratos uninefrectomizados. Trinta e dois ratos Wistar foram randomizados em 4 grupos: Sham (S): laparotomia e nefrectomia direita. Controle (C): laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo. Controle Alopurinol (CA): laparotomia e nefrectomia direita, alopurinol na dose de 100 mg.kg-1.d-1. Alopurinol (A): laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo, alopurinol na dose de 100mg.kg-1.d-1. Foram analisados NGALp, NGALu, IL-18, KIM-1, creatinina e histologia. Nível de significância considerado quando p<0,05. Todos grupos aumentam a creatinina ao longo do experimento com A≈C>S≈CA. A NGALp e IL-18 aumentaram em todos os grupos, porém todos evoluem de forma semelhante. A NGALu aumentou no grupo C, porém todos os grupos evoluem de forma semelhante. KIM-1 foi maior no grupo A em relação ao C e intermediário nos grupos S e CA. Em relação aos achados histológicos, os grupos C e A apresentaram grau de lesão no lado esquerdo significativamente maior que os grupos S e CA. Não existiu diferença histológica entre C e A e nem entre S e CA. O alopurinol na dose de 100 mg.kg-1.dia-1 não exerceu efeito protetor ou danoso aos rins submetidos a lesão de I/R na avaliação da função, da histologia renal e dos biomarcadores novos / Abstract: Ischemic and reperfusion kidney injury are involved in many clinical conditions. The reperfusion injury leads to reactive oxygen species formation and allopurinol has the potential to inhibit this process. The novel biomarkers can perform early diagnosis of acute kidney injury. The purpose of this study was to investigate whether allopurinol had a renal protective effect measuring renal function, novel biomarkers levels (pNGAL, uNGAL and IL-18) and studying histopathologic features during renal ischemia-reperfusion (I/R) injury in uninephrectomized rats. 32 Wistar Rats were randomized in 4 groups: Sham (S): laparotomy and right nefrectomy. Control (C): laparotomy and right nefrectomy, I/R maneuvers in left kidney. Allopurinol Control (AC): laparotomy and right nefrectomy, pretreated with allopurinol 100mg.kg-1.d-1. Allopurinol (A): laparotomy and right nefrectomy, I/R maneuvers in left kidney, pretreated with allopurinol 100mg.kg-1.d-1. pNGAL, uNGAL, IL-18, KIM-1, serum creatinine and histopathologic features were analysed. Differences in the mean values were deemed significant at P<0.05. All groups showed a significant rise in serum creatinine throughout the experiment being A≈C>S≈AC. pNGAL and IL-18 showed a significant rise in all groups too, however all of them evolve in a similar way. uNGAL showed signifcantly rise in group C, but all of them evolve in a similar way. KIM-1 was higher in group A than C and had intermediate values in groups S and AC. With regard to histopathologic features, C and A groups showed left kidney injury signifcantly higher than S and AC groups. There were no difference in histopathologic features between groups C and A neither between S and AC. Allopurinol given 100mg.kg-1.d-1 did not seem to exert protective or harmful effects in kidneys that underwent I/R injury under functional, novel biomarkers levels and histopathologic features evaluation / Mestre