Resumo: O teste de carcinogênese experimental em língua de rato Wistar que utiliza a 4- nitroquinoline 1-oxide (4NQO) como agente cancerígeno, é um excelente modelo para se estudar o carcinoma espinocelular em todas as suas fases, além das lesões pré-neoplásicas e neoplásicas induzidas serem semelhantes àquelas da cavidade bucal de seres humanos. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel da proteína p53 e de mutações no gene supressor tumoral TP53 exons 5 a 8 durante a carcinogênese induzida pela 4NQO em língua de rato Wistar. Para isso, 30 animais foram tratados com o cancerígeno na concentração de 50 ppm, por via oral (água de beber), e sacrificados 4, 12 ou 20 semanas após o tratamento. Dez animais foram utilizados como controle negativo. Os resultados mostraram diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) com a aumento na expressão da proteína p53 nos grupos de animais sacrificados 12 e 20 semanas após a exposição ao cancerígeno, que também apresentaram lesões pré-neoplásicas e carcinomas espinocelulares, respectivamente. Fraca expressão da proteína p53 foi encontrada nos grupos controle e de 4 semanas de exposição ao carcinógeno. O sequenciamento genético dos exons 5 a 8 do gene TP53 não indicou a presença de mutações. Concluindo, a expressão anômala da proteína p53 nas fases intermediária e final da carcinogênese bucal não pode ser relacionada à presença de mutações nos exons 5 a 8 do respectivo gene. / Abstract: The medium-term tongue carcinogenesis assay is a useful model for studying oral squamous cell carcinomas phase by phase. The aim of the present study was to investigate the expressivity of p53, as well as mutations in exons 5-8 of TP53 gene during rat tongue carcinogenesis induced by 4-nitroquinoline 1-oxide (4NQO) using immunohistochemistry and DNA sequencing, respectively. A total of 30 male Wistar rats were treated with 4- nitroquinoline 1-oxide in drinking water for 4, 12, and 20 weeks.Ten animals were used as negative control. Statistically differences (p<0.05) were found in p53 expression 12 and 20 weeks after treatment,i.e., pre-neoplastic lesions and squamous cell carcinomas, respectively. A weak immunoexpression was observed in the negative control and in 'normal' oral mucosa following 4 weeks after exposure to 4NQO. Regarding DNA sequencing, no mutation was found in all of the exons evaluated at all experimental periods. Taken together, our results suggest that abnormal p53 expression was present in pre-neoplastic lesions and squamous cell carcinomas of the oral cavity. However, no mutations were detected during oral cancer progression. / Orientador: Jair Cortez Montovani / Coorientador: Daisy Maria Fávero Salvatori / Coorientador: Daniel Araki Ribeiro / Banca: Maria Regina Sposto / Banca: José Vicente Tagliarini / Banca: José Humberto Damante / Banca: Magaly Machado Sales / Doutor

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Coorientador: Yuri Karen Sinzato / Coorientador: José Roberto Bosqueiro / Banca: Patricia Aline Boer / Banca: Kleber Eduardo de Campos / Resumo: Não disponível / Abstract: We hypothesized that not only insulin is relevant for embryofetal development and diabetes-derived alterations as well the glucoregulatory hormones glucagon and somatostatin. To investigate this possibility in rat pregnancy and in their offspring, we have compared glycemia, insulin, glucagon and somatostatin in late pregnancy and postnatal period to associate with maternal reproductive outcomes of diabetic rats. Wistar rats were randomly assigned into: Non diabetic (C); Mild diabetes (MD); and Severe diabetes (SD). Diabetes was induced in rats by streptozotocin. The female rats were mated and two experiments to evaluate pancreatic hormone were conducted: death of dams and their respective fetuses at day 21 of pregnancy and at day 10 postpartum (newborn assessment). The SD and MD rats presented impaired reproductive performance. In general, the rats presenting severe diabetes and their offspring showed metabolic desarrangement confirmed by reduced body weight and alterations in the pancreatic hormone levels. In the presence of mild diabetes, the offspring presented similar metabolic response to those of their dams against maternal hyperglycemic insult. The diabetes decreased embryofetal competence and caused alterations in the glucoregulatory hormones (glucagon and somatostatin), which showed that somatostatin might be the hormone more susceptible to these changes. This study demonstrates the importance in studying glucagon and somatostatin more profoundly, because of these hormones could be predictor factors of the adverse results in the adult life / Mestre

Orientadora: Telma Gonçalves Carneiro Spera de Andrade / Banca: Roger Luis Henschel Pobbe / Banca: Maria Adrielle Vicente / Resumo: Foram identificados re ceptores de estrógeno em neurônios localizados no Núcleo Mediano da Rafe (NMR). Tem sido apresentado que este esteróide no NMR é hábil para potencializar a ação da serotonina sobre receptores 5 - HT 1A , inibindo a atividade de neurônios serotonérgicos e causa ndo ansiólise. Com o objetivo de avaliar a interação entre a ação estrogênica e a via serotonérgica que se origina no NMR sobre a aquisição da informação aversiva, ratas Wistar foram ovariectomizadas e posteriormente receberam microinjeção direta de Benzoa to de Estradiol (BE) (1200ng) diretamente no NMR, precedida pela microinjeção de salina ou de WAY 100.635 (100ng), um antagonista de receptores 5 - HT 1A . Imediatamente após as duas microinjeções, as ratas ovariectomizadas foram submetidas a sessões de choque s elétricos nas patas, na caixa de Skinner. Vinte e Quatro horas depois, foram expostas ao mesmo contexto por 5 minutos para avaliação comportamental: congelamentos, levantamentos, deslocamentos, auto - limpeza e respostas autonômicas (bolos fecais e elimina ção urinária). A microinjeção de BE previamente à exposição aos estímulos aversivos, (choques elétricos nas patas) não alterou o comportamento na sessão de condicionamento, mas neutralizou a associação entre a experiência aversiva ao contexto: houve um dec réscimo na expressão do congelamento e aumento da atividade motora na sessão teste. Este efeito foi revertido pela microinjeção prévia de WAY 100.635. Em conclusão, o BE agiu sobre neurônios serotonérgicos em ratas ovariectomizadas, prejudicando a associaç ão da experiência aversiva ao contexto, por co - modular a funcionalidade de receptores... / Abstract: Estrogen receptors were identified in neurons originated in the Median Raphe Nucleus (MRN). It is presented that estrogen, in this structure, is able to potentiate the action of serotonin on somatodendritic 5 - HT 1A receptors, inhibiting the function of serotonergic neurons and causing anxiolysis. This study was performed to evaluate interaction between estrogen action and the serotonergic pathway that originates in the MRN on the acquisition o f aversive information. Female Wistar rats were ovariectomized and received direct microinjection of Estradiol Benzoate (EB) (1200ng) into the MRN, preceded by microinjection of saline or WAY 100.635 (100ng), a 5 - HT 1A receptor antagonist. Immediately after the two microinjections, the ovariectomized rats were submitted to a foot shock session in the Skinner box. Twenty four hours later, they were exposed to the same context for 5 minutes for behavioural assessment: freezing, rearing, displacement, grooming and autonomic responses (faecal boluses and micturition). The EB microinjection in the MRN prior to the exposure of animals to the aversive event (foot shock) did not alter their behaviour in the aversive conditioning session, but neutralized the associati on of the aversive experience with the context: there was a decrease in the expression of freezing and increased motor activity in the test session. This effect was reversed by previous microinjection of WAY 100.635. In conclusion, the EB acted on serotone rgic neurons in the MRN of ovariectomized rats, impairing the association of the aversive experience to the context, by co - modulating the functionality of somatodendritic... / Mestre

Orientadora: Isabel Cristina Cherici Camargo / Banca: Luiz Gustavo de Almeida Chuffa / Banca: Regildo Márcio Gonçalves da Silva / Resumo: A utilização de extratos de Cordia ecalyculata está crescendo devido ao seu potencial em inibir o apetite. Seus efeitos colaterais na reprodução são desconhecidos. Então, o estudo avaliou o potencial tóxico reprodutivo de diferentes doses do extrato de C. ecalyculata e m ratos adultos. Os animais (n= 12 /grupo) receberam água destilada (grupo Controle) ou o extrato hidroetanólico de C. ecalyculata em diferentes concentrações de 1,5 ml (20, 100 e 400 mg/kg de peso corpóreo). Os tratamentos foram administrados por via oral (gavage), única dose/dia, durante 60 dias consecutivos. Ao final do tratamento, a massa corpórea dos animais que receberam o extrato foi similar ao grupo controle, demonstrando a ineficácia do fitoterápico na redução do peso corporal. O peso dos testículos, vesícul as seminais e próstata nã o foi afetados pelos tratamentos (p>0 ,05), mas houve aumento significativo no peso dos epidídimos na dose de 400 mg/kg do extrato. Em todas as doses, os testículos e epidídimos apresentaram alterações histopatológicas, houve aumento significativo no percen tual de gametas anormais na cauda do epidídimo e a taxa de fertilidade dos animais foi reduzida (p<0,05) . Concluiu - se que o extrato de Cordia ecalyculata promoveu toxicidade reprodutiva, porém com ausência de efeito dose - dependente / Abstract: The use of extracts from Cordia ecalyculata is growing due to their potential to inhibit appetite. Its side effects on reproduction are unknown. Then , the study evaluated the reproductive toxic potential of different doses of the extract of C. ecalyculata in adult rats. The animals (n = 12/group) received distilled water (control group) and the hydroethano lic extract of C. ecalyculata in different doses (20, 100 and 400 mg / kg body weight). Treatments were administered orally (gavage), single dose/day for 60 consecutive days. At the end of treatment, the body weight of the animals that received the extract was similar to the control group, demonstrating the ineffectiveness of this herbal medicine in reducing body weight. The weight of the testes, seminal glands and prostate were no affected by treatments (p>0.05), but increased there was (p < 0.05) on the epididymis weight at a dose of 400 mg / kg of the extract. At all doses, the testes and epididymides showed histopathological changes, increased (p <0.05) the percentage of abnormal gametes in the epididymal tail and fertility of anim als was reduced (p<0.0 5). In conclusion that the extract of Cordia ecalyculata promoted re productive toxicity, but without dose - dependent effect / Mestre

Orientador: André Sampaio Pupo / Banca: Ana Maria de Oliveira / Banca: Maria Christina Werneck de Avellar / Resumo: O epidídimo é um órgão formado por um longo túbulo enovelado composto por 3 regiões anatômicas distintas: a cabeça, o corpo e a cauda. A cabeça e o corpo do epidídimo têm papel na maturação dos espermatozóides, enquanto que a cauda do epidídimo armazena e mantém os espermatozoides em estado de quiescência até o momento da ejaculação. A cauda do epidídimo é a região que apresenta a camada muscular mais espessa de todo epidídimo, estando sobre o controle principal do sistema nervoso simpático. Durante o processo de emissão seminal, as varicosidades nervosas simpáticas liberam noradrenalina causando a contração da cauda do epidídimo e do ducto deferente para que o esperma seja propelido em direção à uretra. Apesar de estudos demonstrarem a presença e a importância dos adrenoceptores α1 na contração da cauda do epidídimo de rato, os subtipos de adrenoceptores α1 envolvidos ainda não foram identificados. Assim, a presente dissertação investigou a expressão dos três subtipos de adrenoceptores α1 na cauda proximal e distal do epidídimo de rato e caracterizou farmacologicamente os subtipos de adrenoceptores α1 envolvidos na contração da musculatura lisa. Apesar das porções proximais e distais da cauda do epidídimo de rato expressarem mRNA codificando todos os três subtipos de adrenoceptores α1, experimentos com radioligante revelaram a presença apenas dos adrenoceptores α1A e α1D, enquanto que o adrenoceptor envolvido nas contrações destes tecidos em resposta à noradrenalina é o α1A. A cauda do epidídimo pode ser um modelo interessante para a caracterização farmacologia de novas drogas com ação em adrenoceptores α1 e no estudo dos efeitos de drogas sobre o sistema reprodutivo masculino / Abstract: The epididymis is an organ composed by a single convoluted tubule subdivided into three distinct anatomical regions: caput, corpus and cauda epididymis. Caput and corpus epididymis have a role in sperm maturation, while cauda epididymis store and maintain the sperm in a quiescent state prior the ejaculation. The cauda epididymis has a thicker smooth muscle layer than the others regions and is under the control of the sympathetic nervous system. During the emission phase of ejaculation, noradrenaline released from sympathetic nerve varicosities induces smooth muscle contraction in the cauda epididymis and vas deferens to propel the sperm towards the prostatic urethra. Despite some studies reporting the expression and involvement of α1-adrenoceptors in the contraction of cauda epididymis, the α1- adrenoceptors subtypes-mediated contraction are unknown. Thus, the present study investigated the expression of the α1-adrenoceptors subtypes in proximal and distal rat cauda epididymis using RT-qPCR, radioligand binding and functional (contraction) assays. The results indicate the expression of mRNA encoding all three α1-adrenoceptors in the rat cauda epididymis, but radioligand binding studies reveal the presence of only α1A and α1D-adrenoceptors. In addition, only the α1Aadrenoceptor subtype mediates the contractions of both regions in response to noradrenaline. The cauda epididymis may serve as good model for the pharmacological characterization of drugs acting at α1-adrenoceptors and for the study of the effects of drugs in the male reproductive system / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:39:23Z : No. of bitstreams: 1 iessi_il_me_botfm.pdf: 136723 bytes, checksum: bffcbff6e001d5fa891597599b87d63e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / We hypothesized that not only insulin is relevant for embryofetal development and diabetes-derived alterations as well the glucoregulatory hormones glucagon and somatostatin. To investigate this possibility in rat pregnancy and in their offspring, we have compared glycemia, insulin, glucagon and somatostatin in late pregnancy and postnatal period to associate with maternal reproductive outcomes of diabetic rats. Wistar rats were randomly assigned into: Non diabetic (C); Mild diabetes (MD); and Severe diabetes (SD). Diabetes was induced in rats by streptozotocin. The female rats were mated and two experiments to evaluate pancreatic hormone were conducted: death of dams and their respective fetuses at day 21 of pregnancy and at day 10 postpartum (newborn assessment). The SD and MD rats presented impaired reproductive performance. In general, the rats presenting severe diabetes and their offspring showed metabolic desarrangement confirmed by reduced body weight and alterations in the pancreatic hormone levels. In the presence of mild diabetes, the offspring presented similar metabolic response to those of their dams against maternal hyperglycemic insult. The diabetes decreased embryofetal competence and caused alterations in the glucoregulatory hormones (glucagon and somatostatin), which showed that somatostatin might be the hormone more susceptible to these changes. This study demonstrates the importance in studying glucagon and somatostatin more profoundly, because of these hormones could be predictor factors of the adverse results in the adult life

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-06Bitstream added on 2014-06-13T21:00:58Z : No. of bitstreams: 1 000742559.pdf: 13014017 bytes, checksum: a5241c31641f3c43bf9641a5f7f9217f (MD5) / O presente estudo tem como objetivo avaliar o impacto no corpo cavernoso causado pela lesão isolada do nervo e artéria cavernosa, assim como determinar o efeito da tadalafila (IPDE-5) na remodelação tecidual, utilizando um modelo experimental de ratos. 50 ratos machos, da raça Whistar, pesando entre 250 e 350 gramas, foram aleatoriamente divididos, de forma randomizada em cinco grupos. Grupo 1 (G1): controle cirúrgico - CCir (n=10), submetidos apenas a exposição do feixe vásculo nervoso peri prostático. Grupo 2 (G2): Lesão Nervosa Isolada - LNI (n=10), os animais foram submetidos a lesão seletiva do nervo cavernoso bilateralmente. Grupo 3 (G3): Lesão Vascular Isolada - LVI (n=10), os animais foram submetidos a lesão seletiva da artéria cavernosa bilateralmente. Grupo 4 (G4): Lesão Nervosa Isolada + Tadalafila - LNI+T (n=10), os animais foram submetidos a lesão do nervo cavernoso bilateralmente e receberam tadalafila na dose de 5mg/Kg/dia. Grupo 5 (G5): Lesão Vascular Isolada + Tadalafila - LVI+T (n=10), os animais foram submetidos a lesão seletiva da artéria cavernosa bilateralmente e receberam tadalafila na dose de 5mg/Kg/dia. A tadalafila foi administrada pelo período de 45 dias, quando os animais foram sacrificados e o corpo cavernoso foi removido em bloco para análise histomorfométrica. A organização e composição microestrutural do corpo cavernoso foram avaliadas por histomorfometria, imunohostoquímica e métodos bioquímicos. A análise estatística foi realizada pelo teste de comparações múltiplas de Bonferroni. Entre os grupos avaliados não houve diferença entra as áreas de secção peniana, demonstrando homogeneidade entre os mesmos. O volume de músculo liso diminuiu significativamente no grupo com lesão neural (G2), quando comparado ao controle (12,87±1,90 vs 21,78±1,81 p< 0,05), o que não ocorreu no grupo com lesão neural tratado com... / This study aims to evaluate the impact on the corpus cavernosum caused by isolated injury of the cavernous nerve and artery, as well as determine the effect of tadalafil (IPDE-5) on tissue remodeling, using a rat experimental model. Fifty (50) male Whistar rats, weighing between 250 and 350 grams, were divided randomly into five groups. Group 1 (G1): surgical control - SCon (n=10) having undergone only exposure of the periprostatic neurovascular bundle. Group 2 (G2): Isolated Nerve Lesion - INL (n=10), the animals were subjected to selective cavernous nerve injury, bilaterally. Group 3 (G3): Isolated Vascular Lesion - IVL (n=10), the animals were subjected to selective cavernous artery injury, bilaterally. Group 4 (G4): Isolated Nerve Lesion + Tadalafil - INL+T (n=10), the animals were subjected to cavernous nerve injury, bilaterally, and received tadalafil in a dosage of 5mg/kg/day. Group 5 (G5): Isolated Vascular Lesion + Tadalafil - IVL+T (n=10), the animals were subjected to selective cavernous artery injury, bilaterally, and received tadalafil in a dosage of 5mg/kg/day. The tadalafil was administered for a 45 day period, then the animals were sacrificed and the corpus cavernosum was removed en bloc for histomorphometric analysis. The organization and microstructural composition of the corpus cavernosum were assessed through histomorphometry, immunohistochemistry, and biochemical methods. Statistical analysis was performed using the Bonferroni multiple comparisons test. RESULTS: Among the groups evaluated, there was no difference between the penile section areas, demonstrating their consistency. The volume of smooth muscle decreased significantly in the group with nerve injury (G2) when compared with the control (12.87±1.90 vs 21.78±1.81 p<0.05), which did not occur in the group with nerve injury treated with tadalafil (G4). Sinusoidal space volume decreased both in the group with vascular injury ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-12-16Bitstream added on 2014-06-13T20:20:52Z : No. of bitstreams: 1 suarez_oax_dr_botfm.pdf: 3610400 bytes, checksum: f6259d8ab7145b655f41789a5a923ab3 (MD5) / Evidências histopatológicas em pulmões de homens e animais sugerem que o sistema respiratório é igualmente afetado pelo diabetes mellitus (DM). Todavia, a julgar pela defasagem nos conhecimentos em relação às outras lesões diabéticas crônicas, observa-se que os pulmões têm sido negligenciados, principalmente no que se refere aos estudos que visam à melhor caracterização das alterações diabéticas que afetam estes órgãos, bem como os mecanismos possivelmente implicados em sua gênese e evolução. Este estudo foi realizado com os seguintes objetivos: 1- Caracterizar as alterações morfológicas, morfométricas e ultraestruturais determinadas pelo DM, nos pulmões de ratos diabéticos induzidos pela aloxana, tendo como parâmetro de comparação ratos normais não-diabéticos, de mesmo período de seguimento; 2- Estabelecer uma possível correlação entre a evolução dessas alterações com a intensidade do estresse oxidativo pulmonar. Cento e vinte ratos Lewis, machos, pesando entre 250 – 280g, foram distribuídos em 2 lotes de animais, com 60 ratos cada um. Cada um destes lotes foi dividido, por sorteio, em 2 grupos experimentais: GN – 30 ratos não-diabéticos controles; GD – 30 ratos diabéticos sem qualquer tratamento da doença. Cada grupo experimental, dentro dos seus respectivos lotes, foi posteriormente dividido em 3 subgrupos de animais, com 10 ratos cada, para serem sacrificados após 1, 3 e 6 meses de seguimento, respectivamente. O diabetes foi induzido pela administração endovenosa de aloxana a 2%, na dose única de 42mg/kg de peso corporal, tendo sido utilizados no experimento somente animais diabéticos com sinais clínicos evidentes de diabetes grave, associados a níveis glicêmicos >250mg/dl. Parâmetros clínicos, tais como: peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar e diurese foram obtidos de todos os animais de um dos lotes... / Histopathological evidences in human and animal lungs suggest that the respiratory system is equally affected by diabetes mellitus (DM). However, judging from the gap in the knowledge of other chronic diabetic lesions, it is observed that the lungs have been neglected, particularly as regards studies aiming at a better characterization of diabetic alterations that affect such organs as well as of mechanisms possibly implicated in their genesis and development.This study was conducted with the following objectives: 1- To characterize morphological, morphometric and ultrastructural alterations determined by DM in the lungs of alloxan-induced diabetic rats using normal non-diabetic rats followed during the same period of time as a comparison parameter; 2- To establish a possible correlation between the development of such alterations with the intensity of pulmonary oxidative stress. One hundred and twenty male Lewis rats weighing 250 – 280g were distributed into 2 animal lots with 60 rats each. Also, each of such lots was randomly divided into 2 experimental groups: GN – 30 non-diabetic control rats; GD – 30 diabetic rats without any treatment for the disease. Each experimental group, within each respective lot, was later divided into 3 subgroups of animals, each comprising 10 rats, to be sacrificed after 1, 3 and 6 months of follow-up, respectively. Diabetes was induced by intravenous administration of 2% alloxan at a single dose of 42mg/kg of body weight. Only diabetic animals with evident clinical signs of severe diabetes associated with glycemic levels > 250mg/dl were used. Clinical parameters, such as body weight, water intake, food intake and urine output, were obtained from all animals from the one of animal lots in all follow-up periods by using metabolic cages. Blood glucose, urinary glucose, glycosilated hemoglobin and plasma insulin were also determined in these... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:00:25Z : No. of bitstreams: 1 minicucci_em_dr_botfm.pdf: 755824 bytes, checksum: 476f76bec065be2e3efb743481c7ddac (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O teste de carcinogênese experimental em língua de rato Wistar que utiliza a 4- nitroquinoline 1-oxide (4NQO) como agente cancerígeno, é um excelente modelo para se estudar o carcinoma espinocelular em todas as suas fases, além das lesões pré-neoplásicas e neoplásicas induzidas serem semelhantes àquelas da cavidade bucal de seres humanos. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel da proteína p53 e de mutações no gene supressor tumoral TP53 exons 5 a 8 durante a carcinogênese induzida pela 4NQO em língua de rato Wistar. Para isso, 30 animais foram tratados com o cancerígeno na concentração de 50 ppm, por via oral (água de beber), e sacrificados 4, 12 ou 20 semanas após o tratamento. Dez animais foram utilizados como controle negativo. Os resultados mostraram diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) com a aumento na expressão da proteína p53 nos grupos de animais sacrificados 12 e 20 semanas após a exposição ao cancerígeno, que também apresentaram lesões pré-neoplásicas e carcinomas espinocelulares, respectivamente. Fraca expressão da proteína p53 foi encontrada nos grupos controle e de 4 semanas de exposição ao carcinógeno. O sequenciamento genético dos exons 5 a 8 do gene TP53 não indicou a presença de mutações. Concluindo, a expressão anômala da proteína p53 nas fases intermediária e final da carcinogênese bucal não pode ser relacionada à presença de mutações nos exons 5 a 8 do respectivo gene. / The medium-term tongue carcinogenesis assay is a useful model for studying oral squamous cell carcinomas phase by phase. The aim of the present study was to investigate the expressivity of p53, as well as mutations in exons 5-8 of TP53 gene during rat tongue carcinogenesis induced by 4-nitroquinoline 1-oxide (4NQO) using immunohistochemistry and DNA sequencing, respectively. A total of 30 male Wistar rats were treated with 4- nitroquinoline 1-oxide in drinking water for 4, 12, and 20 weeks.Ten animals were used as negative control. Statistically differences (p<0.05) were found in p53 expression 12 and 20 weeks after treatment,i.e., pre-neoplastic lesions and squamous cell carcinomas, respectively. A weak immunoexpression was observed in the negative control and in ‘normal’ oral mucosa following 4 weeks after exposure to 4NQO. Regarding DNA sequencing, no mutation was found in all of the exons evaluated at all experimental periods. Taken together, our results suggest that abnormal p53 expression was present in pre-neoplastic lesions and squamous cell carcinomas of the oral cavity. However, no mutations were detected during oral cancer progression.

Orientadores: Paulo Maria Ferreira de Araujo, Beatriz Maria Machado de Medeiros / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T22:20:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_AdrianadeMoraes_M.pdf: 4942510 bytes, checksum: 8395cb0fcb940ba72f00fcaa6e68c3d7 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A infecção por Yersinia enterocolitica O:3 é uma dentre várias patologias humanas causadas por bactérias gram-negativas, que pode resultar em um quadro de doenças autoimunes, entre elas a artrite reativa. A ativação policIonal de células B tem sido um dos mecanismos propostos que levaria a um aumento de produção de imunoglobulinas autoreativas e por conseguinte estaria associada à indução de uma doença auto-imune. Esta ativação de linfócitos B associada à infecção pela Yersinia enterocolitica O:3, foi pela primeira vez demonstrada em estudos realizados por MEDEIROS, em 1994, a partir de um modelo experimental desenvolvido em camundongos SWISS convencionais. Neste presente trabalho utilizando camundongos Swiss originariamente livres de patógenos específicos (SPF) foi quantificada células esplênicas secretoras de imunoglobulinas (Igs totais e isotipos) após infecção com a Yersinia enterocolitica O:3 e estimulações com seus derivados: Extrato bruto, "Released Proteins' (RP) e Lipopolissacárides, através da técnica de PFC-Reverso-Proteína A, foi utilizado animais normais como grupo controle. Nos soros desses mesmos animais foram detectados níveis de anticorpos (IgG, IgMe IgA) anti-Yersinia.e pesquisados auto-anticorpos frente a um painel de constituíntes autólogos, representados por: miosina , mielina, actina, colágeno, tireoglobulina, laminina e cardiolipina através da técnica de ELISA. Os resultados demonstraram uma elevação no número de células esplênicas secretoras de anticorpos em todas as determinações realizadas (PFC-Ig totais e PFC-isotipos) com animais infectados com Yersinia enterocolitica O:3 ou inoculados com os seus derivados a partir do terceiro dia de inoculação.Estes dados representam uma redução quantitativa do número total de PFC em cerca de 12 vezes em relação àquela observada nos animais convencionais. Anticorpos IgG e IgM específicos anti-Yersinia foram detectados em níveis elevados nos soros dos animais infectados ou estimulados com os diferentes derivados, porém não foram detectados níveis significativos de IgA. Na pesquisa de auto-anticorpos realizada nos soros de animais infectados pela Yersinia foi demonstrada reatividade apenas com a miosina, enquanto que os soros dos animais estimulados com LPS foram reativos com mielina, actina e laminina e os inoculados com RP reagiram com mielina, tiroglobulina e cardiolipina. Em conclusão os camundongos Swiss de origem SPF infectados com Yersinia enterocolitica O:3 ou estimulados com os seus derivados. apresentaram uma ativação policlonal do repertório de linfócitos B. À semelhança do que ocorre com camundongos Swiss convencionais o resultado de tal ativação policlonal é provavelmente não apenas da estimulação de LPS mas de outros componentes envolvidos na infecção. A diferença no perfil de um animal convencional e um de origem SPF reflete a influência do microambiente do hospedeiro na resposta imune. Embora não tenha sido observado sinais de artrite nos animais submetidos às diferentes estimulações, a detecção de anticorpos nos seus soros para constituíntes autólogos é sugestiva para uma possível associação entre o fenômeno de ativação policlonal e a regulação do sistema imunológico / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas