Orientador: Fátima Pereira de Souza / Banca: Alessandra Vidotto / Banca: Rogério de Moraes / Banca: Natália Bueno Leite Slade / Banca: Marcio José Tiera / Resumo: O Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) é o principal agente causador de doenças respiratórias agudas severas, como pneumonia e bronquiolite. Trata-se de um vírus da família Paramyxoviridae, com simetria helicoidal e envelope lipídico. Possui um genoma de RNA fita simples, não segmentado, com 10 genes codificantes. Um dos fatores que contribuem para o sucesso na replicação viral é a interação da proteína M2-1 com as proteínas P, M e com o RNA. Tal proteína age através da interação com RNA, e assim, participa efetivamente no processo de replicação viral, apresentando atividade anti-parada da replicação sendo ativa quando na forma tetramérica. Deste modo, o ligante que realizar interação com a M2-1 é um potencial candidato a prevenir as interações M2-1 com RNA e demais proteínas, impedindo deste modo o sucesso da replicação viral. Flovonoides são compostos naturais com várias atividades como antioxidante, anticancerígena, cardio protetora, antibacteriana e antiviral. Quercetina é um flavonoide que apresenta atividade antiviral, inibindo o complexo de replicação. Com a finalidade de investigar a interação de um potencial candidato a inibição da atividade da M2-1, clonamos, expressamos e purificamos a proteína M2-1 do hRSV e, determinamos sua característica físico-química de interação com quercetina em diferentes condições de temperatura. Para clonagem e expressão do gene M2-1 foram escolhidos o vetor pGEX-4T-1 e a bactéria Escherichia coli da linhagem BL21 Gold (DE3). A proteína expressa foi purificada em cromatografia de afinidade e cromatografia de exclusão molecular. As análises de composição de estrutura secundária e estabilidade térmica foram realizadas por espectroscopia de dicroísmo circular e, a interação com Quercetina com espectroscopia de fluorescência. Para o mapeamento da interação com a Quercetina foram realizadas docking molecular e dinâmica molecular. A proteína... / Abstract: Human Respiratory Syncytial Virus (hRSV) is the major causative agent of acute respiratory infections such as pneumonia and bronchiolitis. This is a virus of the Paramyxoviridae family with helical symmetry and lipid envelope. It has a single strand RNA genome, not segmented, with 10 coding genes. One of the factors that contribute to success in viral replication is the interaction of M2-1 protein with P, M protein and RNA viral. Such protein acts through the interaction with RNA, hence, participating in the viral replication process, having anti-stop activity in the replication process and, the protein is active only as a tetramer. Thus, a ligand that interacts with M2-1 is a potential candidate to prevent interaction of M2-1 with other proteins, thereby preventing the success of viral replication. The aim of the research is to clone, express and purify the M2-1 protein of hRSV and then determine its physicochemical characteristics of the interaction with Quercetin in different temperatures to investigate the interaction of a potential candidate to inhibit the activity of the M2-1. The M2-1 gene was cloned in vector pGEX-4T-1 and expressed in Escherichia coli strain BL21 Gold (DE3). The expressed protein was purified on affinity chromatography molecular exclusion chromatography, thermal stability and secondary structure were analyzed by circular dicroism and the interaction with Quercetin was analyzed by fluorescence spectroscopy. To understand the interaction mechanism was performed molecular dynamics and molecular docking. The purified protein has 40% α-helix, 10% β-sheet, 19% turns and 31% random coils, being the melting temperature of 55,6°C. The titration of M2- 1 with Quercetin showed that it interacts in two points, on site 1 (the binding affinity is ~1,5x106 M -1 ) and stablishes an ionic interaction and, on site 2 (1,1x105 M -1 ) stablishes a hydrophobic interaction. One Quercetin molecule interacts on site 1 (formed by the ... / Doutor

Nesta tese, descrevem-se técnicas matemáticas visando a caracterização e classificação de sons pulmonares adventícios, por meio de sua análise espectral. Para alcançar este objetivo, desenvolveu-se duas novas metodologias, que utilizam Análise em Multiresolução, implementada a partir da Transformada Wavelet Discreta. A primeira metodologia desenvolvida é utilizada para classificar automaticamente os sons pulmonares em quatro grupos: sons normais e sons adventícios contínuos e descontínuos, notificando também o caso de ocorrência das duas anomalias no mesmo ciclo respiratório. Durante o processamento, o ciclo respiratório é decomposto até seu décimo nível, calculando a energia dos coeficientes detalhe em cada nível de decomposição, assim como a energia dos coeficientes de aproximação. Deste cálculo, obtém-se uma curva de variação da energia em relação ao nível de decomposição, sendo que as curvas obtidas se mostraram curvas caracterísitcas em relação ao tipo de som adventício. Tais curvas são aplicadas a uma simulação de Rede Neural Artificial de Função de Base Radial, que atua como classificador entre os quatro grupos. Esta técnica foi testada utilizando dez wavelets, sendo treinadas cem redes neurais para cada uma. Os melhores resultados apresentaram índice de acerto entre 88% e 92,36% para o conjunto de teste, em um total de 275 ciclos respiratórios. A segunda metodologia, denominada Filtragem por Análise Espectral Seletiva, decompõe o som pulmonar até seu quarto nível, calculando o espectro dos coeficientes aproximação e, baseado na componente de frequência prepoderante, calcula um filtro FIR multibanda. Este filtro é utilizado para eliminar todas as {sic} componentes espectrais dos coeficientes de aproximação, com exceção do mais proeminente. Após o procedimento de filtragem, o sinal é recomposto através de reconstrução wavelet. Para a avaliação de seus resultados, foram testadas dez wavelets no processo de decomposição e reconstrução. Para a wavelet que apresentou melhores resultados, obteve-se uma atenuação dos sons cardíacos da ordem de 6dB em relação aos sons adventícios que ocorrem na mesma faixa espectral, utilizando a Densidade Espectral de Potência dos sinais como referência. Esta metodologia mostrou resultados satisfatórios na tarefa de eliminar tanto os ruídos relativos ao fluxo aéreo normal nas vias aeríferas quanto os sons cardíacos, mantendo somente os sons adventícios nas gravações de sons pulmonares. / In this thesis, the investigation of methods to characterize and classify adventitious lung sounds by spectral analysis is described. To accomplish this task, two novel techniques were developed, through Multiressolution Analysis, based on the Discrte Wavelet Transform. The first technique aims to detect abnormal sounds and classity them info four groups: normal, continuous and discontinuous adventitions lung sounds, also notifying their simultaneous occurence. During its processing, the respiratory cycle signal is decomposed up to its tenth level, and the energy present in the detail and approximation coefficients for each decomposition level is calculated, resulting on a curve of energy versus decomposition level. The resulting curves show different signatures for each kind of adventitious sound. These signatures are used as data source for a classifier system based on Radial Basis Function Artificial Neural Networks. This technique was tested for ten different wavelets, training a hundred neural networks for each wavelet, totalizing a thousand neural networks trained. The best performance rates for each wavelet reach values from 88% to 92.36% for the test group, in a set of 275 respiratory cycles. In the second technique, named Filtering by Selective Spectral Analysis, the lung sound is decomposed until its fourth level, the approximation coefficients spectra are calculatedand, based on the highest frequency component found on those coefficients, a multiband FIR filter is determined. This filter is used to eliminate all frequency components in the approximation coefficients except the highest one. After the filtering procedure, the signal is recomposed by wavelet reconstruction. In order to evaluate the proposed technique, ten wavelets were used in the decomposition and reconstruction stages. The wavelet which presented the best performance attenuated heart sounds 6 dB more than the adventitious sounds that occur in the same spectral band. For measuring this attenuation, the Power Spectral Density was used. This procedure showed satisfactory results, elimination the normal airflow noise and cardiac sounds, leaving only the adventitious sounds in the recorded lung sounds.

Introdução: Diversas são as maneiras de se avaliar o sistema respiratório, entre elas destacam-se a pletismografia por indutância e análises cinemáticas tridimensionais, métodos de custo elevado e difícil transportabilidade. O emprego de um método alternativo baseado em imagem fotográfica (fotogrametria) emerge em um contexto como instrumento de baixo custo e de fácil transporte para análises respiratórias. Objetivo: o objetivo geral deste estudo consistiu em correlacionar volumes respiratórios obtidos por equipamento padrão de espirometria com um modelo biomecânico de análise fotogramétrica em jovens sem obstruções ou restrições respiratórias. Metodologia: foram avaliados 40 indivíduos (19 meninos e 21 meninas) com idade entre 14 e 17 anos. Foram excluídos indivíduos que apresentaram algum tipo de obstrução ou restrição respiratória. Realizou-se, com a utilização de marcadores adesivos, um mapeamento de superfície em cinco pontos anatômicos: projeção da cicatriz umbilical ou onfálica (COd), ângulo inferior da 10ª costela (ACd), projeção do manúbrio do esterno (MEd), projeção da apófise xifóide do esterno (AXd) e espinha ilíaca ântero-superior direita (EId). Com cada avaliado na posição decúbito dorsal, solicitou-se o teste de Capacidade Vital Forçada (CVF) em um espirômetro modelo Care Fusion - Microloop. O teste foi repetido e filmado três vezes. Dos filmes foram extraídas imagens referentes ao momento de máxima expiração e inspiração para tratamento fotogramétrico da prova com melhores índices respiratórios. Com o uso de um programa disponível no mercado foram definidas áreas e volumes pulmonares para regiões do tórax superior e inferior e abdômen superior e inferior. Além do teste espirométrico realizaram-se coletas da massa corporal, estatura, gordura corporal e comprimento torácico. Resultados: a idade média do grupo foi de 15,40±0,98 anos. Para massa corporal, estatura, percentual de gordura e comprimento torácico encontraram-se valores médios de 61,29±12,27kg, 1,66±0,09m, 22,70±6,49% e 25,54±1,87 cm, respectivamente. Ao comparar meninos e meninas apenas para a idade, não foi encontrada diferença estatisticamente significativa. A análise fotogramétrica encontrou valores correlacionado, com as medidas espirométricas da CVF, Volume Expiratório Forçado no primeiro segundo (VEF1), Pico de Fluxo Expiratório (PFE) além da Inspiração realizada pós teste (IP). Encontrou-se maior mobilidade ventilatória em meninos quando comparados às meninas para região de Tórax Inferior, Abdômen Superior e Abdômen Inferior. Foi possível chegar a uma regressão com R² = 0,866 para prova de CVF e R² = 0,776 para IP com uso da fotogrametria, apresentando um erro padrão de 0,353 e 0,451, respectivamente. Conclusão: A fotogrametria para estudos de movimentos toracoabdominais por meio da aplicação de análises bidimensionais e tridimensionais em imagens adquiridas com a utilização de câmera filmadora se mostrou uma ferramenta útil, aplicável e reprodutível. Foi possível verificar um tipo de comportamento respiratório em adolescentes e associar as medidas obtidas na imagem com os valores mensurados com o uso do espirômetro. Também foi possível estimar o valor da CVF e do volume de ar inspirado em manobra de inspiração profunda. / Introduction: There are several ways to evaluate the respiratory system, among them inductance plethysmography and three-dimensional kinematic analysis, methods of high cost and difficult transportability. The use of an alternative method based on the photographic image (photogrammetry) emerges as an instrument of low cost and easy transportation for respiratory analysis. Objective: The objective of this study was to correlate respiratory volumes obtained by spirometry standard equipment with a biomechanical model photogrammetric analysis of adolescents. Methods: 40 patients (19 boys and 21 girls) were evaluated, aged between 14 and 17 years. Individuals who showed some sort of respiratory obstruction or restriction were excluded. With the markers stickers, a mapping in five anatomical landmarks: projection of the umbilicus (Cod), inferior angle of 10th rib (ACd), projection of sternum manubriam (MEd), sternal xiphoid projection (AXd) and right spine iliac (EId). With each subject assessed in supine position, tests the Forced Vital Capacity (FVC) were requested, using a spirometer Care Fusion - Microloop. The test was repeated three times and filmed. Images of the films were extracted for the moment of maximum expiration and inspiration for photogrammetric processing of proof with better breathing. With the use a program commercially available, areas and lung volumes were defined for the region of upper and lower chest, as well as top and bottom abdomen. In addition to spirometric test body weight, height, body fat and thoracic length were measure. Results: the mean age was 15.40 ± 0.98 years. For body mass, height, fat percentage and thoracic length, average values of 61.29 ± 12.27 kg, 1.66 ± 0.09 m, 22.70 ± 6.49% and 25.54 ± 1.87 cm were found, respectively. When comparing boys and girls at the age difference was not found statistically significant. The photogrammetric analysis has found values strongly correlated with the spirometric measurements of FVC, forced expiratory volume in one second (FEV1), Peak Expiratory Flow (PEF) in addition to post test performed Inspiration (IP). There was a higher ventilatory mobility for boys than girls for Lower Chest and Lower and Upper Abdomen. It was possible to reach a regression R² = 0.866 for proof of FVC and R² = 0.776 for IP with the use of photogrammetry, presenting a standard error of 0.353 and 0.451, respectively. Conclusion: photogrammetry can be used to study thoracoabdominal movements by applying analytical two-dimensional and three-dimensional images acquired using a video camera being, applicable and reproducible. It was possible to verify respiratory behavior in adolescents including measurements on the image with the values measured using the spirometer. It was also possible to estimate the value of FVC and volume of air breathed in deep inspiration maneuver.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000405622-Texto+Completo-0.pdf: 2323425 bytes, checksum: b1a3d0391686e872c4c4aa389b2f697d (MD5) Previous issue date: 2008 / Objectives: the aim of this research was to evaluate the lamellar body counts (LBC) and stable microbubble test (SMT) performed on gastric aspirates from preterm babies with and without Respiratory Distress Syndrome (RDS), and to propose cutoff value for these tests for RDS prediction. Methods: a prospective study including 63 patients (34 with RDS), with gestational age between 24-34 weeks, born at the Hospital São Lucas, Pontificia Universidade Católica of Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Brazil, from October 2007 through June 2008. Results: when a cutoff value of 42. 000 lamellar body/μl was used to predict RDS, the LBC showed a sensibility of 92% and a specificity of 86%.For the SMT with a cutoff value of 14 microbubble/mm2, the sensibility was 94% and the specificity 86%. Using both tests in series the sensibility and specificity changed to 86% and 98%, respectively. Conclusion: the cutoff values suggested in this research showed that LBC and SMT have adequate accuracy and could be used as predictors tests for SDR, reducing the the unnecessary intubation and surfactant use, beyond been fast and easy tests. / Objetivo: avaliar os valores obtidos na contagem de corpos lamelares (CCL) e teste de microbolhas estáveis (TME), realizados em aspirado gástrico de prematuros com e sem Síndrome do Desconforto Respiratório (SDR) e propor pontos de corte em cada teste para predição dessa síndrome. Métodos: foi realizado um estudo prospectivo, incluindo 63 pacientes (34 com SDR), com idade gestacional entre 24 e 34 semanas nascidos no Hospital São Lucas, Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Brasil, no período entre outubro de 2007 e junho de 2008. Resultados: utilizando-se um ponto de corte na CCL de 42. 000 corpos lamelares/μl para predição do diagnóstico de SDR, observou-se uma sensibilidade de 92% e uma especificidade de 86%.Para o TME, com um ponto de corte de 14 microbolhas/mm2, obteve-se uma sensibilidade de 94% e uma especificidade de 86%. Associando-se os dois testes em série, a sensibilidade e a especificidade foram de 86% e 98%, respectivamente. Conclusão: os pontos de corte sugeridos neste trabalho mostraram que a CCL e o TME apresentam adequada acurácia diagnóstica, podendo ser usados como preditores de SDR, reduzindo as entubações e uso de surfactante desnecessários, além de serem testes de rápida e fácil realização.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000401051-Texto+Completo-0.pdf: 839175 bytes, checksum: 3d905f44b7571f7529c3d3850e67907c (MD5) Previous issue date: 2008 / Background: There is a renewed interest in very early diagnosis of surfactant deficiency in immature infants as the advantage of indiscriminate surfactant prophylaxis or very early treatment became clear. Lamellar body count (LBC) and stable microbubble test (SMT) in amniotic fluid are quick and inexpensive tests that can be done even during labor or delivery. Its combined use may increase accuracy, although this hypothesis has not been tested yet. Objective: To evaluate the performance of LBC and SMT in amniotic fluid in order to predict respiratory distress syndrome (RDS) in preterm infants. Design/Methods: Amniotic fluid was collected during cesarean section or from vaginal pool in preterm births on São Lucas Hospital from March/2006 to November/2007. Lamellar bodies were counted in fresh amniotic fluid using the platelet counter Sysmex XT-1800I, and SMT was performed later in a blind way. The diagnosis of RDS was established by clinical picture and chest X-ray or, alternatively, in those infants that received prophylactic therapy and presents with microbubble count in the tracheal aspirate below 120 microbubbles /mm2 or/and needed a second dose of surfactant. Results: From the 111 patients analyzed, twenty (18%) infants had the diagnosis of RDS. Mean birth weight was 2062 ± 639g and gestational age 32. 8 ± 3 weeks. At the cutoff point of X12. 000 lamellar bodies/NL the sensitivity, specificity and positive likelihood ratio of the LBC were 90% (95%CI: 68-99), 81% (95%CI: 72-89%) and 4. 8 (95%CI: 3. 2 -7. 4 %) respectively. At the cutoff point of X5 microbubbles/mm2 the SMT showed a sensitivity of 90% (95%CI: 68- 99), a specificity of 79% (95%CI: 69-87) and a positive likelihood ratio of 4. 3 (95%CI: 2. 8 – 6. 6 %). Using both tests combined (SMT< 7 microbubbles/mm2 and LBC X12000 lamellar bodies/NL to define lung immaturity), the positive likelihood ratio and specificity increased to 10. 2 (95%CI: 5. 2-20. 2) and 91% (95%CI: 83-96) respectively, while the sensitivity remained 90% (95%CI: 68-99). Conclusions: LBC and SMT in the amniotic fluid have similar performance to predict RDS in preterm infants. The combined use of the tests may improve positive likelihood ratio and specificity without change the sensitivity. / Introdução: à medida que o tratamento profilático ou precoce com surfactante mostrou-se vantajoso nos recém-nascidos prematuros com imaturidade pulmonar, renovou-se o interesse na busca de testes diagnósticos nesta área. A contagem dos corpos lamelares (CCL) e o teste das microbolhas estáveis (TME) no líquido amniótico são exames rápidos e de baixo custo que podem ser realizados durante o trabalho de parto. Possivelmente, o uso combinado destes exames pode aumentar seus desempenhos diagnósticos, porém esta hipótese ainda não foi testada. Objetivo: avaliar o desempenho do TME e da CCL no líquido amniótico, na predição da síndrome do desconforto respiratório (SDR) em recém-nascidos prematuros. Métodos: foi coletado líquido amniótico durante a cesárea ou por via vaginal, em partos prematuros ocorridos no Hospital São Lucas da PUCRS no período de março de 2006 a novembro de 2007. A CCL foi realizada logo após a coleta do material pelo contador de plaquetas Sysmex XT-1800I e o TME foi realizado posteriormente, pelo autor, cego para o desfecho. O diagnóstico de SDR foi estabelecido pela apresentação clínica e um raio-x de tórax característico ou por recém-nascido que recebeu surfactante profilático e apresentava uma contagem de microbolhas no aspirado traqueal < 120 μNb/mm2 e/ou necessitou da segunda dose de surfactante. Resultados: dos 111 pacientes estudados, 20 (18%) apresentaram SDR. A média do peso foi 2062 ± 639 gramas enquanto que a idade gestacional média foi 32. 8 ± 3 semanas. Para um ponto de corte <12. 000 corpos lamelares/μL a sensibilidade, a especificidade e a razão de verossimilhança positiva da CCL foram 90% (IC95%: 68-99%), 81% (IC95%: 72-89%) e 4. 8 (IC95%: 3. 2 – 7. 4%) respectivamente. Para um ponto de corte X5 microbolhas/mm2, o TME apresentou uma sensibilidade de 90% (IC95%: 68-99%), uma especificidade de 79% (IC95%: 69-87%) e uma razão de verossimilhança positiva de 4. 3 (IC95%: 2. 8-6. 6%). Usando os testes em conjunto (TME <7 μb/mm2 E CCL X12000 corpos lamelares/μL, para definir imaturidade pulmonar), a razão de verossimilhança positiva aumentou para 10. 2 (IC95%: 5. 2-20. 2) e a especificidade aumentou para 91% (IC95%: 83-96%), enquanto que a sensibilidade permaneceu inalterada em 90% (IC95%: 68-99%). Conclusão: a CCL e o TME no líquido amniótico possuem desempenho diagnóstico similar quando usados em separado para predizer a SDR. O uso combinado dos dois testes pode aumentar a especificidade e a razão de verossimilhança positiva sem modificar a sensibilidade.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000400371-Texto+Completo-0.pdf: 594013 bytes, checksum: b2ccf01f8d7a8520538feeb0cf6a3c88 (MD5) Previous issue date: 2007 / Objective: To characterize the respirator parameters used in children with acute viral bronchiolitis, submitted to mechanical ventilation, as to age and evolution. Methods: We performed a retrospective study, between March/2004 and September/ 2006, involving all infants (below the age of 12 months) submitted to mechanical ventilation for bronchiolitis at a pediatric intensive care unit which is a center of reference in Southern Brazil. We evaluated the evolution (presence of Acute Respiratory Distress Syndrome, mortality), interventions (transfusions, drugs), complications (pneumothorax) and respiratory parameters used throughout the mechanical ventilation period. Results: Fifty-nine infants (3. 8 ± 2. 7 months), 59% male were included. The mean length of time on mechanical ventilation was 9. 0 ± 9. 4 days. In 51 (86. 5%) the obstructive pattern of lower airways was observed until extubation. Mortality in this group was nil, with a low incidence of pneumothorax (7. 8%), despite the use of high peak inspiratory pressure (PIP), independent of age. Acute Respiratory Distress Syndrome occurred in 8 infants (13. 5%), with 4 deaths and a higher incidence of pneumothorax. This group of patients used higher PIP, positive end-expiratory pressure (PEEP), inspired oxygen fraction (FiO2) and respiratory frequency (RF) than those with an obstructive pattern. Conclusions: Acute viral bronchiolitis with an obstructive pattern presents nil mortality and a minimum rate of complications, and, in mechanical ventilation it is necessary to use high PEEP, low RF and FiO2, independent of age. The complications of this disease appear to be related to the development of Acute Respiratory Distress Syndrome, with a mortality of up to 50%. / Objetivo: Caracterizar os parâmetros de ventilação mecânica utilizados em crianças com bronquiolite viral aguda relacionando-os a idade e evolução. Métodos: Realizamos um estudo retrospectivo, entre março de 2004 e setembro de 2006, envolvendo todos os lactentes (menores de 12 meses) submetidos à ventilação mecânica por bronquiolite, em uma Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica de referência, do Sul do Brasil. Avaliamos a evolução (presença de Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo, mortalidade), intervenções (transfusões, drogas), complicações (pneumotórax) e parâmetros respiratórios utilizados durante todo o período de ventilação mecânica. Resultados: Foram incluídos 59 lactentes (3,8 ± 2,7 meses), 59% do sexo masculino. O tempo médio de ventilação foi de 9,0 ± 9,4 dias. Em 51 deles (86,5%), observou-se o padrão obstrutivo de vias aéreas inferiores até a extubação. A mortalidade, neste grupo, foi nula com baixa incidência de pneumotórax (7,8%), apesar do uso de pico de pressão inspiratória (PIP) elevado, independente da idade. A Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo ocorreu em 8 lactentes (13,5%), havendo 4 óbitos e maior incidência de pneumotórax. Esse grupo de pacientes utilizou maiores PIP, pressão expiratória final positiva (PEEP), fração inspirada de oxigênio (FiO2) e freqüência respiratória (FR) do que aqueles com padrão obstrutivo. Conclusões: A bronquiolite viral aguda com padrão obstrutivo apresenta mortalidade nula e mínima incidência de complicações, necessitando utilizar na ventilação mecânica PEEP elevada e baixas FR e FiO2, independente da idade. As complicações desta patologia parecem estar relacionadas à evolução para Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo, com uma mortalidade de até 50%.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000426539-Texto+Completo-0.pdf: 739311 bytes, checksum: f650cc62f7d453c93f03cd8df5d812e4 (MD5) Previous issue date: 2010 / Background: Lamellar body count (LBC) in amniotic fluid is widely used to identify infants at risk of respiratory distress syndrome (RDS) who would benefit from surfactant prophylaxis or very early therapy. The LBC test in tracheal aspirates of newborns has not yet been explored. Objectives: The objective was to evaluate the performance of LBC in tracheal aspirates from intubated preterm babies to predict RDS. Method: Preterm infants <37 weeks with RDS (n=38) and a Non-RDS control group (n=34), both needing mechanical ventilation and up to 3 days of age, were included in the study. The control group was divided in 2 groups: preterm infants without RDS (n=16) and term infants (n=18). LBC was performed in an automated cell counter (cell counter Sysmex XT-1800i). The tracheal samples were diluted in a liquefying agent (dithiothreitol) without centrifugation. To perform LBC, diluted Dithiothreitol® - DTT (Invitrogen) in distilled water - 10mg/ml - was prepared in advance. The samples were kept frozen at -20ºC in Eppendorf tubes until its use. The sample was placed in a test tube containing the DTT diluted at a ratio of 1 part of tracheal aspirate to 6 parts of DTT. This sample was vortexed for 10s, and the material was aspirated by the cell counter. LBC was performed using the platelet channel. All results obtained were multiplied by 7. The stable microbubble test was done for comparison. Results: The median and interquartile range (IQR) of LBC for the RDS group were 38,500/μL (14,000-112,000), and for the non-RDS group they were 826,000 stable(483,000-2,866,500), p<0. 001. The best cutoff point to predict RDS was <200,000 lamellar bodies/μL, with a sensitivity of 89. 5% (95%CI: 76. 5- 96. 6) and specificity of 95. 7% (95%CI: 80. 4-99. 8). In the ROC curve the area under the curve for LBC was 0. 96(95%CI 0. 91-0. 99). The comparison of LBC in subgroups (RDS vs. Non-RDS preterm infants and only infants e31 weeks gestation with vs. without RDS) showed also significant lower values in RDS groups (p<0. 001). Conclusions: LBC in tracheal aspirates can be rapidly and easily performed and may be used to diagnose RDS, thus helping in the decision to administer surfactant. / Introdução: A contagem de corpos lamelares (CCL) no fluido amniótico é utilizada amplamente para identificar recém-nascidos em risco da síndrome do desconforto respiratório, que se beneficiariam da profilaxia de surfatante ou terapia muito precoce. O teste de CCL em aspirado traqueal em recém-nascidos ainda não foi explorado. Objetivo: O objetivo foi avaliar o desempenho da CCL em aspirados traqueais de recém-nascidos a termo e pré-termos em ventilação mecânica para predição da Síndrome do Desconforto Respiratório. Método: Recém-nascidos pré-termo <37 semanas com SDR (n=38) e um grupo controle não SDR (n=34), ambos os grupos necessitando ventilação mecânica e com até três dias de vida, foram incluídos no estudo. O grupo controle foi dividido em 2 grupos: recém-nascidos pré-termo sem SDR (n =16) e recém-nascidos a termo (n=18). CCL foi realizada em um contador automático de células Sysmex XT-1800i (Sysmex Corporation, Japão). As amostras traqueais foram diluídas em um diluente (Dithiothreitol) sem centrifugação. Para realizar a CCL, foi preparado antecipadamente uma diluição de Ddithiothreitol® - DTT (Invitrogen) em água destilada -- 10mg/ml, a qual foi mantida congelada a -20°C em tubos de Eppendorf até ser usada. A amostra foi acondicionada em um tubo de teste contendo a diluição DTT em uma proporção de 1 parte de aspirado traqueal para 6 partes de DTT. A amostra foi agitada durante 10s e o material foi aspirado pelo contador de células. A CCL foi realizada através do canal de plaquetas. Todos os resultados obtidos foram multiplicados por 7. O teste de microbolhas estáveis foi feito para comparação. Resultados: A mediana e o intervalo interquartil (IQR) da CCL para o grupo SDR foi 38500/μL (14000- 112000), e, para o grupo NSDR foi 826000 (483000- 2866500), p<0. 001. Utilizando-se um ponto de corte de 200. 000corpos lamelares/μL para predição do diagnóstico de SDR a CCL mostrou uma sensibilidade de 89,5% (IC95%: 76,5-96,6) e uma especificidade de 95,7% (IC95%: 80,4-99,8). Em relação a curva ROC, a área sob a curva foi 0. 96(95%IC 0. 91-0. 99). Conclusão: a CCL em aspirado traqueal pode ser rapidamente e facilmente realizada e poderia ser usada para diagnosticar SDR, auxiliando na decisão de administrar surfatante.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000437297-Texto+Completo-0.pdf: 2046103 bytes, checksum: 5e5e5750b4d41210e95d2b2b28b0eb22 (MD5) Previous issue date: 2011 / Background: there are few studies using animal models in chest physical therapy. However, there are no models to assess these effects in newborns. The objective of this study was to develop a model of atelectasis by bronchial obstruction in newborn pigs for the study of neonatal physiotherapy. Methods: 30 newborn pigs resulting from a cross-breeding between Large White and Landrace, properly sedated, anesthetized, tracheostomized, paralyzed and mechanically ventilated were used. Artificial mucus was instilled into the airways through an infusion pump 15 minutes after instrumentation. Radiological assessment of the lungs (in supine position) and blood gas analysis was performed 30 minutes after mucus infusion to confirm the production of atelectasis. Results: two radiologist not involved in this research analyzed X ray. The model showed consistent results between parameters of oxygenation and radiological analysis. The atelectasis model was successfully developed in over 70% of cases, surpassing 90% of attempts in the final phase of the study. Conclusions: this model of atelectasis showed results consistent enough to be tested in studies of chest physiotherapy techniques in newborns. / Introdução: existem poucos estudos utilizando modelos animais em fisioterapia respiratória. Além disso, não existem modelos para avaliar esses efeitos em recémnascidos. O objetivo deste estudo foi desenvolver um modelo de atelectasia por obstrução brônquica em porcos recém-nascidos, para o estudo das técnicas de fisioterapia respiratória neonatal.Métodos: foram utilizados 30 leitões recém-nascidos, originários de um cruzamento entre as raças Large-White e Landrace devidamente sedados, anestesiados, traqueostomizados, paralisados e colocados sob ventilação mecânica. Quinze minutos após a instrumentação, os animais receberam infusão de muco artificial através de bomba de infusão. Transcorridos 30 minutos da infusão de muco artificial os animais foram submetidos à avaliação radiológica do tórax (em posição supina) e gasometria arterial para confirmar a produção de atelectasia. Resultados: as imagens radiológicas foram analisadas por dois radiologistas não envolvidos no estudo. O modelo apresentado mostrou consistência de resultados entre os parâmetros de oxigenação e a análise radiológica. O modelo de atelectasia foi desenvolvido com sucesso em mais de 70% dos casos, ultrapassando 90% das tentativas na fase final do estudo. Conclusões: este modelo de atelectasia apresentou resultados suficientemente consistentes para que possa ser testado em estudos sobre técnicas de fisioterapia respiratória em recém-nascidos.

Made available in DSpace on 2014-09-17T02:01:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000461332-Texto+Completo-0.pdf: 798905 bytes, checksum: 82dd54ca0a99dcc8c6e82d360335c701 (MD5) Previous issue date: 2014 / Objective : Evaluate the impact of asthma on the quality of life in a population of school children in the city of Ijuí, which is located in an essentially agricultural region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. As well as the relationships between the comorbidities of atopy and rhinoconjunctivitis. Methods : Transversal study of children in elementary school from third through eighth grades in the municipality of Ijuí, Rio Grande do Sul, Brazil. In November 2012 (phase I), parents or guardians of the school children population answered an initial screening questionnaire. Based on it, asthmatic children were classified and paired with non-asthmatics considering parameters, such as age, gender and school. From May to June 2013 (Phase II), at their residency, parents or guardians and school children were interviewed and answered questions related to asthma, rhinitis and rhinoconjunctivitis of the International Study of Asthma and Allergies in Childhood questionnaire. An additional set of questions related to quality of life and asthma control were included on the questionnaire. A group of children, asthmatic and non- asthmatic (control), were subjected to blood tests to evaluate atopy through IgE levels. Results: In the first phase of the study, 2,000 initial screening questionnaires were distributed, out of which 1,691 (84. 5%) were completed; school children aged on average 11. 5 years and 780 (46%) were males. According to the criteria utilized on this study, 324 (19%) of the school children were classified as having active asthma. Questions about asthma, respiratory symptons and questionnaire about quality of life were answered by 480 school children. Out of which, 246 (51,2%) presented rhinoconjunctivitis in the past year. 189 school children were classified as asthmatic and 291 as healthy controls. 185 school children consented to be subjected to blood tests, out of which 127 (68,6%) were considered allergic to at least one of the tested allergens. Assessing the domains of quality of life, the asthmatic group presented the worst scores on the physical domain (p ˂0,001) and on the total quality of life (p=0,025) when compared to the control group. The average scores of quality of life for the group of school children with asthma and rhinoconjunctivitis was significantlly lower on the same domains: physical (p˂0,001) and total quality of life (p= 0,018), when compared to its controls presenting the same symptoms. Considering the group of asthmatic school children with or without rhinoconjunctivitis, the average scores were lower in the physical (p=0,039) and emotional (p=0,025) domains for the group with asthma and rhinoconjunctivitis. Multivariate analysis of health-related quality of life, revelead a significant association between asthma diagnosis and total score (β=-2,59 CI95% -4,82 a -0,37 p=0,022). The asthma control test revealed that 62(50,4%) were not controlling the disease. Evaluating the correlation between the asthma control test and the domains of quality of life, weak statistically significant positive correlations between the physical domain score (r= 0,38; p˂0,001) and total scores(r=0,24; p=0,008) were found. Conclusion : The health-related quality of life in children with asthma was lower when compared to the control group. The rhinoconjunctivitis as an asthma comorbidity seems to affect health-related quality of life, especially in physical domain, but asthma is the major contribuitor to a decreased quality of life. / Objetivo : avaliar o impacto da asma na qualidade de vida em uma população de escolares na cidade de Ijuí, RS, região essencialmente agrícola do estado, bem como as relações entre as comorbidades de atopia e rinoconjuntivite.Métodos : Estudo transversal com escolares de 3ª a 8ª série do Ensino Fundamental do município de Ijuí/RS. Em novembro de 2012 (etapa I), foi enviado aos domicílios um breve questionário de triagem para ser preenchido pelos responsáveis que possibilitou a classificação dos escolares com asma e este grupo foi pareados para sexo e idade com um grupo de colegas da escola, não asmáticos. De maio a junho de 2013(etapa II), os responsáveis e os escolares, em seus domicílios, foram entrevistados e responderam os questionários de qualidade de vida relacionada à saúde, controle da asma e às perguntas do questionário International Study of Asthma and Allergies in Childhood relacionadas à asma, rinite e rinoconjuntivite. Um grupo de crianças com asma e outro de crianças controles realizaram coleta de sangue para avaliação de atopia através de testes de IgE específico. Resultados : Na primeira fase do estudo, dos 2000 questionários de triagem distribuídos obtivemos o retorno de 1691 (84,5%); a média de idade dos escolares foi de 11,5 anos e 780 (46%) eram do sexo masculino. De acordo com os critérios utilizados nesse estudo 324 (19%) dos escolares foram classificados com asma ativa. As perguntas sobre asma, sintomas respiratórios e o questionário de qualidade de vida foram respondidas por 480 escolares. Destes 246 (51,2%) apresentaram rinoconjuntivite no último ano. 189 escolares foram classificados com asma e 291 como controles saudáveis. 185 escolares aceitaram realizar a coleta de sangue e 127 (68,6%) foram considerados atópicos a pelo menos um dos alérgenos testados. Na avaliação dos domínios de qualidade de vida o grupo com asma apresentou pior escore nos domínios bem estar físico (p ˂0,001) e no escore total de qualidade de vida (p=0,025) quando comparado ao grupo controle. A média dos escores de qualidade de vida para o grupo de escolares com asma e rinoconjuntivite é significativamente menor nos mesmos domínios bem estar físico (p˂0,001) e escore total (p= 0,018) quando comparadas aos controles com os mesmos sintomas. Para os escolares asmáticos com e sem rinoconjuntivite, as médias nos domínios bem estar físico (p=0,039) e bem estar emocional (p=0,025) apresentam-se menores para os asmáticos com rinoconjuntivite. Em análise multivariável da qualidade de vida relacionada à saúde, o diagnóstico de asma apresentou associação significativa com o escore total (β=-2,59 CI95% -4,82 a -0,37 p=0,022). Na avaliação do asthma control test, 62(50,4%) apresentou a doença não controlada. Na correlação da pontuação do asthma control test com os domínios de qualidade vida, encontramos fraca correlação positiva em todos os domínios, com significância estatística para domínio bem estar físico (r= 0,38; p˂0,001) e no escore total (r=0,24; p=0,008).Conclusão : A qualidade de vida relacionada à saúde em escolares com asma é menor quando comparadas aos escolares controles. A rinoconjuntivite como comorbidade da asma parece influenciar na qualidade de vida relacionada à saúde, especialmente no bem estar físico, mas a asma aparece mais relacionada com a piora da qualidade de vida.

Nesta tese, descrevem-se técnicas matemáticas visando a caracterização e classificação de sons pulmonares adventícios, por meio de sua análise espectral. Para alcançar este objetivo, desenvolveu-se duas novas metodologias, que utilizam Análise em Multiresolução, implementada a partir da Transformada Wavelet Discreta. A primeira metodologia desenvolvida é utilizada para classificar automaticamente os sons pulmonares em quatro grupos: sons normais e sons adventícios contínuos e descontínuos, notificando também o caso de ocorrência das duas anomalias no mesmo ciclo respiratório. Durante o processamento, o ciclo respiratório é decomposto até seu décimo nível, calculando a energia dos coeficientes detalhe em cada nível de decomposição, assim como a energia dos coeficientes de aproximação. Deste cálculo, obtém-se uma curva de variação da energia em relação ao nível de decomposição, sendo que as curvas obtidas se mostraram curvas caracterísitcas em relação ao tipo de som adventício. Tais curvas são aplicadas a uma simulação de Rede Neural Artificial de Função de Base Radial, que atua como classificador entre os quatro grupos. Esta técnica foi testada utilizando dez wavelets, sendo treinadas cem redes neurais para cada uma. Os melhores resultados apresentaram índice de acerto entre 88% e 92,36% para o conjunto de teste, em um total de 275 ciclos respiratórios. A segunda metodologia, denominada Filtragem por Análise Espectral Seletiva, decompõe o som pulmonar até seu quarto nível, calculando o espectro dos coeficientes aproximação e, baseado na componente de frequência prepoderante, calcula um filtro FIR multibanda. Este filtro é utilizado para eliminar todas as {sic} componentes espectrais dos coeficientes de aproximação, com exceção do mais proeminente. Após o procedimento de filtragem, o sinal é recomposto através de reconstrução wavelet. Para a avaliação de seus resultados, foram testadas dez wavelets no processo de decomposição e reconstrução. Para a wavelet que apresentou melhores resultados, obteve-se uma atenuação dos sons cardíacos da ordem de 6dB em relação aos sons adventícios que ocorrem na mesma faixa espectral, utilizando a Densidade Espectral de Potência dos sinais como referência. Esta metodologia mostrou resultados satisfatórios na tarefa de eliminar tanto os ruídos relativos ao fluxo aéreo normal nas vias aeríferas quanto os sons cardíacos, mantendo somente os sons adventícios nas gravações de sons pulmonares. / In this thesis, the investigation of methods to characterize and classify adventitious lung sounds by spectral analysis is described. To accomplish this task, two novel techniques were developed, through Multiressolution Analysis, based on the Discrte Wavelet Transform. The first technique aims to detect abnormal sounds and classity them info four groups: normal, continuous and discontinuous adventitions lung sounds, also notifying their simultaneous occurence. During its processing, the respiratory cycle signal is decomposed up to its tenth level, and the energy present in the detail and approximation coefficients for each decomposition level is calculated, resulting on a curve of energy versus decomposition level. The resulting curves show different signatures for each kind of adventitious sound. These signatures are used as data source for a classifier system based on Radial Basis Function Artificial Neural Networks. This technique was tested for ten different wavelets, training a hundred neural networks for each wavelet, totalizing a thousand neural networks trained. The best performance rates for each wavelet reach values from 88% to 92.36% for the test group, in a set of 275 respiratory cycles. In the second technique, named Filtering by Selective Spectral Analysis, the lung sound is decomposed until its fourth level, the approximation coefficients spectra are calculatedand, based on the highest frequency component found on those coefficients, a multiband FIR filter is determined. This filter is used to eliminate all frequency components in the approximation coefficients except the highest one. After the filtering procedure, the signal is recomposed by wavelet reconstruction. In order to evaluate the proposed technique, ten wavelets were used in the decomposition and reconstruction stages. The wavelet which presented the best performance attenuated heart sounds 6 dB more than the adventitious sounds that occur in the same spectral band. For measuring this attenuation, the Power Spectral Density was used. This procedure showed satisfactory results, elimination the normal airflow noise and cardiac sounds, leaving only the adventitious sounds in the recorded lung sounds.