Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T18:31:57Z : No. of bitstreams: 1 vieira_aem_me_araca.pdf: 1153148 bytes, checksum: 441e38e8029d7e636443d6507c2e83c4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente trabalho foi desenvolver metodologia para determinar a relação dose-resposta de produtos fluoretados utilizando esmalte bovino e modelo de ciclagem de pH. Os blocos de esmalte, previamente selecionados através de microdureza de superfície, foram submetidos ao tratamento diário com solução placebo e soluções de NaF a 275, 550, e 1100 ppm F. Foram realizados dois métodos in vitro de desafio cariogênico para verificar o potencial dos produtos fluoretados para inibir a perda mineral (Des>Re) e a capacidade para promover a remineralização (Re>Des). Fatores de influência nas lesões in vitro produzidas no esmalte de dente bovino, como tempo de desmineralização e pH, tempo de remineralização, composição das soluções desmineralizadoras e remineralizadoras, freqüência e tempo de aplicação das soluções fluoretadas e duração da ciclagem foram O alterados para o estabelecimento de metodologia sensível, a partir dos modelos de Ten Cate & Duijsters (1982) e Featherstone et al. (1986). Após, realizou-se o cálculo da variação da microdureza de superfície, percentagem de volume mineral e flúor presente no esmalte. Testes paramétricos e não-paramétricos e análise de regressão foram utilizados para determinar relação dose-resposta entre os tratamentos realizados. As modificações propostas proporcionaram padronização das metodologias atingindo um alto nível de precisão, evidenciando relação dose-resposta entre os tratamentos em termos de flúor presente no esmalte, microdureza de superfície e percentagem de volume mineral em secção longitudinal. / The aim of the present study was to establish methodology for verification of fluoride product dose-response relationship using a bovine enamel and pH-cycling model. Enamel blocks, previously selected in regards to surface microhardness, were submitted to daily treatment with placebo and NaF solutions (275, 550 and 1100 ppm F). Two in vitro methods of cariogenic challenge were performed to verify the potential of fluoride products to inhibit mineral loss and the ability to promote remineralization. Factors influencing in vitro bovine enamel lesions (time and pH of demineralization, time of remineralization, composition of demineralization and remineralization solutions, frequency and time of application of treatment solutions, and pHcycling duration) were altered for the establishment of a sensitive methodology, based on the studies of Ten Cate & Duijsters (1982) e Featherstone et al. (1986). Then, surface microhardness changes, % mineral volume and enamel’s fluoride were calculated. Parametric and non-parametric tests and regression analysis were applied to establish dose-response relationship among different treatment groups. The proposed models provided for improvement in standardization of methods leading to a higher level of precision, demonstrating dose-response between treatments in regards to enamel’s fluoride, surface microhardness and % mineral volume.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-15Bitstream added on 2014-06-13T20:57:08Z : No. of bitstreams: 1 000748513.pdf: 992457 bytes, checksum: 7cbeb4a71be76b703d15cd7ff8afac1e (MD5) / Tendo em vista a variedade de funções da serotonina e poucos estudos em aves sobre o tema, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da serotonina, através do seu precursor (5-hidroxitriptofano) e seu inibidor (m-hidroxibenzilhidrazine), associados à Lactobacillus spp. na resposta imune e na morfometria intestinal de frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis. A partir da avaliação do comportamento e peso corporal das aves, estabeleceu-se a dose do precursor (5HTP), da serotonina, e do inibidor (NSD1015). Com a dose definida, o estudo foi dividido em dois experimentos, aves sem desafio com S. Enteritidis e aves com desafio. Avaliou-se a resposta imune humoral das aves através das concentrações de IgA no fluido intestinal e IgG no soro sanguíneo e recuperação de S. Enteritidis no conteúdo cecal. A morfometria intestinal foi determinada por meio da avaliação do peso corporal, número e altura das vilosidades no duodeno, e, a disponibilidade de serotonina no duodeno foi observada por ensaios imunoistoquímicos. Serotonina ocasionou alterações caracterizadas por sonolência e diminuiu o ganho de peso das aves. Seu precursor (5HTP) também ocasionou sonolência nas aves, porém em intensidade menor e o ganho de peso foi mantido. As aves em que o inibidor (NSD1015) foi administrado não apresentaram alterações no comportamento e ganho de peso. O precursor, inibidor e Lactobacillus spp. não influenciaram nas concentrações de IgA e IgG, mas o precursor e Lactobacillus spp. reduziram a quantidade de S. Enteritidis no conteúdo cecal. Com relação à morfometria intestinal, as aves tratadas com 5HTP apresentaram aumento no peso corporal, no número e altura das vilosidades no duodeno. Lactobacillus spp. e S. Enteritidis determinaram a elevação de células que imunoexpressaram serotonina no duodeno. Os resultados obtidos nos mostram uma possível interação do precursor e... / Given the variety of functions of serotonin and few studies in birds on the topic, this study aimed to evaluate the effects of serotonin, through its precursor (5-hydroxytryptophan) and its inhibitor (m-hidroxibenzilhidrazine) in association with Lactobacillus spp. in the immune response and the intestinal morphometric of broiler chickens challenged with Salmonella Enteritidis. From the evaluation of the behavior and body weight of the birds, established the dose of the precursor (5HTP), serotonin, and inhibitor (NSD1015). With a defined dose, the study was divided into two experiments, birds without challenge with S. Enteritidis and birds challenge. We evaluated the humoral immune response of the birds by the concentrations of IgA in intestinal fluid and the blood serum IgG recovery and S. Enteritidis in cecal contents. The intestinal morphology was determined by evaluating the weight, number of villi and duodenal villus height, and the availability of serotonin in the duodenum was observed by immunohistochemical assays. Serotonin induced changes characterized by drowsiness and decreased weight gain of birds. Its precursor (5HTP) also caused drowsiness in birds, but at a lower intensity and weight gain was maintained. And the birds in the inhibitor (NSD1015) was administered showed no changes in behavior and weight gain. The precursor, inhibitor and Lactobacillus spp. did not affect the concentrations of IgA and IgG, but the precursor and Lactobacillus spp. reduced the number of S. Enteritidis in cecal contents. With regard to intestinal morphology, 5HTP-treated birds showed an increase in body weight, the number of villi and duodenal villus height. Lactobacillus spp. and S. Enteritidis determined the elevation of cells imunoexpressaram serotonin in the duodenum. The results suggested a possible interaction of the precursor and Lactobacillus, acting on the immune response and development of villi inestinais

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-05Bitstream added on 2014-06-13T20:18:13Z : No. of bitstreams: 1 lucio_fr_me_jabo.pdf: 360282 bytes, checksum: 77f31007525ac85b5cdfcbdf88363eab (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Monsanto / O capim-colchão possui ampla colonização e distribuição geográfica, apresentando crescimento vigoroso mesmo em condições de estiagem e sua eficácia de controle não tem sido consistente, especialmente com herbicidas inibidores do Fotossistema II. As razões desta falta de consistência de controle são muitas, no entanto a existência de diferentes espécies pode ser considerada uma das principais. Tendo por base os relatos acima, o presente trabalho teve por objetivo identificar as diferentes espécies do complexo Digitaria spp e avaliar as respostas a ação de diferentes herbicidas inibidores de fotossíntese e associação com inibidores de carotenóides em estudos de curvas de dose resposta. Os herbicidas foram aplicados em pré-emergência com quatro repetições avaliando o controle até 60 DAA. Nos resultados obtidos, pode-se observar que existe diversidade de espécies dentro do gênero Digitaria em áreas cultivadas com cana-de-açúcar. Apenas nestes estudos foram identificadas D. horizontalis, D. nuda e D. ciliaris, as quais mostraram diferença na susceptibilidade aos herbicidas testados. Também foram verificadas diferenças entre os acessos dentro das espécies D. horizontalis e D. nuda. O fato de todas as plantas serem designadas com o nome popular de capim-colchão, estudos de controle, muitas vezes, podem mudar em função da espécie, gerando divergências na eficácias biológicas dos herbicidas sobre este complexo de espécies, pois não são incomuns em que as duas ou mais ocorram na mesma área / The crabgrass has extensive colonization and geographical distribution, with strong growth even in drought conditions and the control performance has not been consistent, especially with Photosystem II inhibiting herbicides. The reasons for this lack of control consistenc are many, but the existence of different species can be considered a major. Based on the above reports, this aimed study to identify the different species of the Digitaria spp complex and evaluate responses to the action of several photosystem – II inhibiting herbicides in studies of dose-response curves. This study was conducted evaluating the performance of six bouts of crabgrass in the sugarcane in São Paulo State to herbicides: ametryn, diuron; ametryn + clomazone, diuron + hexazinone, diuron + hexazinone + mesotrione; hexazinone; metribuzim and tebuthiuron. Herbicides were applied in pre-emergence with four replications evaluating the control until 60 DAA. The results obtained, it can be seen that there really is diversity of species within the genus Digitaria in areas cultivated with sugarcane. Only in these studies were identified D. horizontalis, D. nuda and D. ciliares, which showed differences in susceptibility to herbicides. There were also significant differences among accessions within species D. horizontalis and D. nuda. The fact that all plants are designed with the popular name of crabgrass, the results of studies of chemical control, can often change depending on the species, leading to differences in biological effectiveness of herbicides on this species complex, as there are unusual in that two or more of them occur in the same area

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:49:31Z : No. of bitstreams: 1 000731361.pdf: 750399 bytes, checksum: 349ccb1a1690653ecab3850aed937652 (MD5) / A proteção conferida pela resposta imunológica de cordeiros, às infecções seriadas com Haemonchus contortus (Hc) e Haemonchus placei (Hp) e desafios, por infecções homólogas e heterólogas, com ambas as espécies, foi avaliada. Quarenta e dois cordeiros, com peso corporal inicial médio de 21,3 kg, foram divididos em sete grupos experimentais. No primeiro grupo, 12 cordeiros receberam infecções seriadas (Is) 12 vezes (três vezes por semana) durante quatro semanas, com 500 larvas infectantes (L3) de H. placei e foram posteriormente desafiados (D), em dose única, com 4000 L3 de H. placei (Grupo IsHp+DHp, n=6) ou com 4000 L3 de H. contortus (Grupo IsHp+DHc, n=6). Os animais do segundo grupo (n=12) foram infectados com H. contortus da mesma maneira que o grupo 1 (500 L3, três vezes por semana) e foram desafiados com 4000 L3 de H. contortus (Grupo IsHc+DHc, n=6) ou com 4000 L3 de H. placei (Grupo IsHc+DHp, n=6). O terceiro grupo foi somente desafiado com 4000 L3 de H. placei (Grupo DHp, n=6), 4000 L3 de H. contortus (Grupo DHc, n=6), ou permaneceram livres de infecções durante todo o período experimental (Grupo Controle, n=6). Análises hematológicas e contagem de ovos por grama de fezes (OPG) foram realizadas semanalmente, o plasma sanguíneo foi armazenado para a realização de análises imunológicas (teste de ELISA). Após a eutanásia dos animais os parasitas foram recuperados, bem como tecido e muco abomasal. Animais que receberam infecções homólogas por H. placei (Grupo IsHp+DHp) apresentaram intensa resposta imune com elevados níveis de imunoglobulinas anti-parasita e número de células inflamatórias na mucosa do abomaso. Em adição, esse grupo (IsHp+DHp) apresentou a menor taxa de estabelecimento de parasitas (2,68% de 4000 L3). Estes resultados podem ser associados às infecções em série, que estimularam uma forte resposta imunológica contra a espécie H. placei, pois... / The protection conffered by serial infections with Haemonchus contortus (Hc) and Haemonchus placei (Hp) was evaluated in lambs. Forty two lambs, with initial average body weight of the 21.3 kg, were divided in three experimental groups. In the first group, 12 lambs was serially infected (Si) 12 times (three times a week) for four weeks, with 500 infective larvae (L3) of H. placei and then challenged (Ch), in a single dose, with 4000 L3 of H. placei (Group SiHp+ChHp, n=6) or with 4000 L3 of H. contortus (Group SiHp+ChHc, n=6). The animals of the second group (n=12) were infected with H. contortus, in the same way that group 1 (500 L3, three times a week) and then challenged with 4000 L3 of H. contortus (Group SiHc+ChHc, n=6) or with 4000 L3 of H. placei (Group SiHc+ChHp, n=6). A third group of lambs was single challenged with 4000 L3 of H. placei (Group ChHp, n=6), 4000 L3 of H. contortus (Group ChHc, n=6), or remained uninfected throughout the trial period (Group Control, n=6). Haematological and fecal eggs counts (FEC) occurred weekely, the blood plasma was stored to immunological exams (ELISA test). After the animals sacrifice, the worms were recoverd, as well as, abomasal tissue and mucus. Animals that received homologous infection with H. placei (Group SiHp+ChHp) presented the most intense immune response and number of inflammatory cells in the abomasal mucosa. In adition, this group (SiHp+ChHp) presented the lowest rate of parasite establishment (2.68% of the 4000 L3). These results can be associated to serial infection that stimulated to strong immune respose against H. placei, which presents lower adaptability to sheep. The opposite was observed in animals that only received the challenge infection, with H. placei (group ChHp), in which the rate of establishment was relatively high (25.3%). However, the animals that received heterologous infection, previously infected serially with H. placei and ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-12Bitstream added on 2014-06-13T19:30:55Z : No. of bitstreams: 1 hoffmann_jl_me_botfm.pdf: 1011094 bytes, checksum: 5a00c88dc2c531f42992842568ecd338 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A resposta imune na leishmaniose pode resultar em uma polarização da subpopulação dos linfócitos T, levando a um fenótipo celular distinto, que resultam em proteção imune ou exacerbação da doença. As leishmânias persistem no organismo tanto em infecções assintomáticas como após o tratamento, representando risco em condições de imunossupressão. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da infecção e da imunossupressão com dexametasona associada à pentoxifilina, sobre o peso dos animais, peso do baço, carga parasitária do baço e do fígado, e da imunopatologia quanto à produção de IFN-γ, IL-10, IL-4 e IL-2 em cultura de células esplênicas de camundongos Balb/c infectados com Leishmania chagasi. A infecção não alterou o ganho de peso dos animais, mas sim o peso e o tamanho do baço. A imunossupressão utilizando a dexametasona associada à pentoxifilina afetou tanto ganho de peso, quanto o peso e o tamanho do baço, de animais infectados e não infectados. A imunossupressão não alterou significativamente o curso da carga parasitária, tanto do baço, como do fígado. A dexametasona e a pentoxifilina afetaram a produção das citocinas estudadas, mas não direcionaram o perfil de resposta Th1/Th2 nos animais infectados. / The immune response in leishmaniasis can result in a polarization of a subpopulation of T lymphocytes, leading to a different cell phenotype, resulting in immune protection or exacerbation of the disease. Leishmanias persist in the body both in asymptomatic infections and after the treatment, representing risk in terms of immunosuppression. The objective of this study was to evaluate the effect of infection and immunosuppression with dexamethasone associated with pentoxifylline on the weight of the animals, weight of the spleen, the parasitic load in the spleen and liver, and immunopathology on the production of IFN-γ, IL - 10, IL-4, and IL-2 in spleen cell culture of Balb/c mice infected with Leishmania chagasi. The infection did not alter the animals’ weight gain, but the weight and size of the spleen increased. The immunosuppression using dexamethasone associated with pentoxifylline affected both weight gains, as the weight and size of the spleen of infected and not infected animals. The immunosuppression did not alter significantly the course of the parasite burden of the spleen and the liver. Dexamethasone and pentoxifylline affected the studied cytokines production, but not influenced the profile of Th1/Th2 response in infected animals.

Submitted by CAROLINA PUCCI DE MORAES null (carolpuccim@gmail.com) on 2016-08-30T19:59:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Carol Pucci de Moraes.pdf: 1638908 bytes, checksum: 3ee166e7d6818cac639935061f63d082 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-08-31T17:39:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 moraes_cp_me_bot.pdf: 1638908 bytes, checksum: 3ee166e7d6818cac639935061f63d082 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T17:39:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 moraes_cp_me_bot.pdf: 1638908 bytes, checksum: 3ee166e7d6818cac639935061f63d082 (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O efeito de estímulo de uma característica biológica por baixas doses de um composto considerado tóxico, mas que em altas doses tem efeito inibitório é denominado efeito hormesis. Estímulos de crescimento em plantas têm sido verificados após a aplicação de subdoses de alguns herbicidas, incluindo o glyphosate. Nesse contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar as respostas de crescimento de plantas de Brachiaria decumbens submetidas a diferentes doses de glyphosate. Foram realizados dois estudos em casa de vegetação, ambos em delineamento inteiramente casualizado (DIC). No primeiro estudo foram realizados três experimentos com seis repetições, sendo no experimento 1 testada uma curva de dose-resposta com nove doses do herbicida glyphosate (0; 22,5; 45; 90; 180; 360; 720; 1440 e 2880 g e.a. ha-1). Nos experimentos dois e três foram aplicadas onze doses do herbicida glyphosate (0; 2,8125; 5,625; 11,25; 22,5; 45; 90; 180; 360; 720 e 1440 g e.a. ha-1). No estudo 2 para a avaliação de subdoses com efeito hormesis realizou-se quatro experimentos, em DIC com oito repetições e dois tratamentos (testemunha e dose de 11,25 g e.a. ha-1). Para ambos os estudos foram coletadas oito plantas de vasos sem aplicação para a determinação da biomassa inicial dos experimentos. Nos experimentos do estudo 1 foram realizadas avaliações de fitointoxicação aos 0, 7, 14 e 21 dias após a aplicação (DAA), além da coleta de oito plantas por vaso de cada tratamento para determinação de massa fresca e massa seca. Além disso, realizou-se a quantificação de massa fresca e seca total dos vasos aos 21 DAA, sendo essa metodologia também adotada para os experimentos do estudo 2. Os resultados do estudo 1 indicaram que: em doses acima de 45 g e.a. ha-1 foi possível obter 80% de controle das plantas de B. decumbens; a aplicação de baixas doses de glyphosate estimulou o aumento da biomassa das plantas de B. decumbens, com valores máximos alcançados na subdose de 11,25 g e.a. ha-1 de glyphosate. O segundo estudo indicou que a aplicação de subdose de 11,25 g e.a. ha-1 de glyphosate promoveu tanto estímulo quanto inibição de crescimento, demonstrando haver variabilidade de resposta das plantas à essa subdose.

Submitted by DIANA MARYURI CORREA CASTIBLANCO null (dianita505818@hotmail.com) on 2017-05-08T14:31:50Z No. of bitstreams: 1 Tese_Diana .pdf: 1645730 bytes, checksum: b8ab9611b68c1cc28bde8f3faf627962 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-08T17:08:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 correacastiblanco_dm_dr_jabo.pdf: 1645730 bytes, checksum: b8ab9611b68c1cc28bde8f3faf627962 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-08T17:08:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 correacastiblanco_dm_dr_jabo.pdf: 1645730 bytes, checksum: b8ab9611b68c1cc28bde8f3faf627962 (MD5) Previous issue date: 2017-03-06 / Outra / Objetivou-se com esta pesquisa: 1) avaliar as repostas zootécnicas e morfométricas do fígado e oviduto de codornas japonesas, submetidas a diferentes níveis de energia metabolizável; 2) reavaliar a partição da energia para codornas japonesas na fase de produção de ovos, a partir de estudo dose-resposta, utilizando como base a técnica da diluição para modificar a retenção de energia das aves. Para o objetivo 1, foram utilizadas 270 codornas da linhagem, VICAMI®, o período experimental foi de seis semanas. As variáveis zootécnicas analisadas foram: consumo de ração, produção de ovos, peso dos ovos, massa de ovos, conversão alimentar por massa de ovos, peso corporal e variação do peso corporal. Foram avaliados parâmetros de morfometria e histológicos do fígado e do oviduto. Para o objetivo 2, foram utilizadas 300 codornas da mesma linhagem, o período experimental foi de 10 semanas. As variáveis analisadas foram: ingestão de energia metabolizável (IEM), massa de ovo (MO) e energia retida (ER) foram expressas em kcal/kg0,67. A eficiência de utilização (kt) foi estimada pela relação entre ER e IEM. A energia metabolizável para mantença (EMm) foi obtida resolvendo a equação ER= 0. A exigência de energia líquida para ganho de peso (GP) foi obtida pela relação entre ER no corpo livre de pena (CLP) em função do CLP. A eficiência de utilização para produção de ovos (ko) foi obtida pela relação entre ER na MO e IEM corrigida para mantença e ganho de peso. As conclusões obtidas foram: 1) Os níveis estudados de energia metabolizável afetaram as respostas de codornas na fase de produção, sendo a concentração de 2.960 kcal/kg, o nível que permitiu melhora nas variáveis zootécnicas e não comprometeu a morfometria do fígado e do oviduto das aves. 2) Com base nas eficiências foram calculadas as exigências para GP e MO. A energia ingerida por codornas japonesas particionou conforme o modelo: IEM = 135,12 × P0,67 + 5,25 × GP + 3,1 × MO. / Objective with this research: To evaluate the zootechnical and morphometric responses of liver and oviduct from Japanese quails, submitted to different levels of metabolizable energy; 2) To re-evaluate the energy partition for Japanese quails in the egg production phase, from a dose-response study, using the dilution technique to modify the energy retention of birds. For objective one, two hundred seventy quails of the VICAMI® lineage were used, the experimental period was six weeks. The zootechnical variables analyzed were: feed intake, egg production, egg weight, egg mass, feed conversion by egg mass, body weight and body weight variation. Were evaluated parameters morphometry and histological of the liver and oviduct. For the objective two, were used three houndred Japonese quail, the experimental period was 10 weeks. The variables analyzed were: metabolizable energy intake (MEI), egg mass (EO) and retained energy (RE) were expressed as kcal / kg0.67. The efficiency of use (kt) was estimated by the relation between (RE) and (MEI). The metabolizable energy for maintenance (MEm) was obtained by solving the equation RE = 0. The net energy requirement for weight gain (WG) was obtained by the relation between RE in the feather free body (FFB) as a function of the FFB. The efficiency of use for egg production (ko) was obtained by the relationship between RE in EO and corrected MEI for maintenance and weight gain. The conclusions obtained were:1)The studied levels of metabolizable energy affected quails responses in the production phase, being the concentration of 2,960 kcal/kg, the level that allowed improvement in all evaluated zootechnical variables and did not compromise the liver and oviduct morphometry of birds. 2) 2) Based on the efficiency, the requirements for WG and EO were calculated. The energy ingested by Japanese quails partitioned according to the model: MEI = 135,12 × P0,67 + 5,25 × WG + 3,1 × EO.

Orientador: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Antônio Carlos Alessi / Banca: Rosângela Zacarias Machado / Banca: Wagner Luiz Tafuri / Banca: Karen Regina Lemos / Resumo: Na Leishmaniose Visceral Canina (LVC) a resposta imune órgãoespecífica pode variar de acordo com o órgão afetado, favorecendo ou não a multiplicação do parasito Leishmania (L.) chagasi. O objetivo deste estudo foi analisar, por meio, da técnica de imuno-histoquímica, o fígado e o baço de cães com Leishmaniose Visceral (LV), considerando a carga parasitária, a densidade de células Natural Killer (NK), de macrófagos e de linfócitos, bem como, células em apoptose, de células expressando moléculas de MHC-II e as citocinas TGF-b e TNF- a. Estes resultados foram comparados com os diferentes estágios da doença. Utilizou-se 71 cães naturalmente infectados de área endêmica para LV, classificados nos grupos sintomático (S), assintomático (A) e oligossintomático (O). Um grupo controle foi composto por 10 cães de área não endêmica para LVC. As células positivas para os anticorpos CD56, caspase 3 clivada, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 e para a carga parasitária (soro hiperimune de cão positivo para LVC) foram submetidas a testes não paramétricos para a comparação entre os grupos. O baço foi o órgão que apresentou a maior carga parasitária. A apoptose de linfócitos foi maior nos cães sintomáticos quando comparados ao grupo controle. A intensidade de inflamação foi elevada nos cães com doença avançada (grupo S), caracterizada pela formação de granulomas difusos contendo parasitos. O fígado mostrou menor carga parasitária, um perfil celular dos granulomas rico em linfócitos. A densidade de células NK foi baixa no fígado e baço, bem como a imunodetecção das citocinas TGF- e TNF- . A expressão de MHC-II foi maior no baço de cães do grupo S. Portanto, pode-se sugerir que existe um padrão de resposta diferenciado no baço e fígado, porém outra metodologia deveria ser utilizada para quantificar de forma mais precisa as citocinas TGF- e TNF- nestes órgãos / Abstract: In Canine Visceral Leishmaniasis (LVC), the immune response to organ-specific can vary with the affected organ, thus favoring or hindering the multiplication of the parasiteLeishmania (L.) chagasi. . The aim of this study was to analyze by immunohistochemistry, the liver and spleen of dogs with visceral leishmaniasis (VL), considering the parasitic load, the density of Natural Killer cells (NK), macrophages and lymphocytes, as well apoptosis cells, cells expressing molecules of MHC-II and the cytokines TGF- and TNF- . These results were compared with different stages of disease. We used 71 naturally infected dogs from an endemic area for VL, classifieds in the symptomatic (S), asymptomatic (A) and oligosymptomatic (O) groups. A control group consisted of 10 dogs from nonendemic area for LVC.The positive cells for CD56 antibody, cleaved caspase 3, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 and parasite load (serum hyperimmune dog seropositive for VL) were subjected to nonparametric tests for comparison between groups. The spleen was the organ with the highest parasite load. The apoptosis of lymphocytes was higher in symptomatic dogs when compared to the control group. The intensity of inflammation was higher in dogs with advanced disease (group S), characterized by the formation of granulomas containing diffuse parasites. The liver showed lowest parasite load, a profile of cell granulomas rich in lymphocytes The density of NK cells was low in the liver and spleen and few cells were positive for cytokines TGF- and TNF- . Expression of MHC-II was higher in the spleen of dogs in Group S. Therefore, one may suggest that there is a differential pattern of response in the spleen and liver, but other methods should be used to quantify more accurately the cytokines TGF- and TNF- in these organs / Doutor

Orientador: Angela Maria V. Campos Soares / Coorientador: Luciane Alarcão Dias-Melicio / Banca: Denise Fecchio / Banca: Dulce Helena Jardim Costantino / Resumo: O fungo Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, endêmica na América Latina. As células dendríticas (DCs) desempenham papel crucial na detecção de patógenos, desencadeamento de uma resposta inicial do hospedeiro, assim como na instrução da resposta imune adaptativa. Mediadores liberados pelas DCs, de uma forma autócrina, modulam as suas funções. Entre esses, destacamos as prostaglandinas e leucotrienos. Assim, avaliamos se DCs humanas produzem PGE2 e LTB4 em resposta ao fungo, a participação de receptores de reconhecimento de padrões moleculares (PRRS) nessa produção, assim como o papel modulador desses eicosanóides sobre a maturação fenotipica dessas células e a produção das citocinas IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. DCs humanas imaturas (CD14- / CD1ahigh / CD83 low) obtidas a partir da diferenciação de monócitos cultivados com GM-CSF e IL-4 (7 dias) liberaram substanciais concentrações de PGE2 e LTB4 que aumentaram significativamente, no caso da PGE2, com incubação com LPS durante 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h ou 48h. No entanto, os níveis de PGE2 e LTB4 foram significativamente inibidos após o desafio com as duas cepas do fungo. Ensaios de bloqueio dos PRRS mostraram que o processo de inibição de PGE2 envolveu o receptor de manose. Adicionalmente, ensaios de fenotipagem mostraram que após o desafio com o fungo, as DCs não alteraram o seu fenótipo de imaturas para o de células maduras. Assim, detectamos uma clara associação entre inibição da produção de PGE2 e LTB4 e a incapacidade do fungo em induzir a maturação de DCs. Ensaios utilizando PGE2 ou LTB4 exógenos confirmaram essa associação. Estas células ainda produzem altos níveis de IL-6... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fungus Paracoccidioides brasiliensis is the etiological agent of paracoccidioidomycosis, a systemic mycosis, endemic in Latin America. Dendritic cells (DCs) play a crucial role in the detection of pathogens, triggering an initial response from the host as well as the instruction of the adaptive immune response. Mediators released by DCs, by an autocrine way, modulate their functions. Among these, we highlight the prostaglandins and leukotrienes. We therefore assessed whether human DCs produce PGE2 and LTB4 in response to fungus, the participation of recognition receptors of molecular patterns (PRRS) in this production, as well as the modulating role of these eicosanoids on phenotypic maturation of these cells and the production of the cytokines IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. Human immature DCs (CD14-/ CD1ahigh/CD83low) derived from the differentiation of monocytes cultured with GMCSF and IL-4 (7 days) released substantial concentrations of PGE2 and LTB4 which increased significantly in the case of PGE2, with incubation with LPS for 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h or 48h. However, the levels of PGE2 and LTB4 were significantly inhibited after challenge with two different strains of the fungus. Trials have shown that blockade of PRRS process involved the inhibition of PGE2 mannose receptor. Additionally, phenotyping assays showed that after challenge with the fungus, DCs did not change their phenotype of immature cells to mature ones. Accordingly, we detected a clear association between inhibition of the production of PGE2 and LTB4 fungus and inability to induce maturation of DCs. Assays using exogenous PGE2 and LTB4 confirmed this association. These cells also produce high levels of IL-6 in response to fungus, which, however, were not associated with inhibition of the production of eisosanóides. Rather than that, these DCs do not produce... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientador: Rogério Salvador / Banca: Marco Antônio de Andrade Belo / Banca: Sérgio Henrique Canello Schalch / Resumo: A estreptococose provoca grandes perdas em sistemas de criação intensiva de tilápias no Brasil e uma das soluções é a utilização de vacinas. Assim, este estudo avaliou a resposta imune celular e humoral a uma vacina contra S. agalactiae e utilizou 425 tilápias do Nilo, O. niloticus (200 ± 25 g). Primeiramente foi determinada a porcentagem relativa de sobrevivência (PRS) para avaliar qual das porções (solúvel ou insolúvel) obtidas do S. agalactiae sonicado seria mais eficiente. Para tanto foram constituídos quatro grupos (n= 20), onde o grupo 1 (G1) foi injetado com PBS; grupo 2 (G2) com PBS + adjuvante incompleto de Freund; grupo 3 (G3) imunizado com a fração solúvel + adjuvante incompleto de Freund e grupo 4 (G4) imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freund. Após 21 dias da imunização os peixes foram desafiados com cepa homóloga (CL50), resultando numa PRS de 100, 50 e 16,7% para G4, G3 e G2, respectivamente. Com base nestes resultados utilizou-se a fração insolúvel para avaliar a reposta imune humoral. Neste caso foram constituídos dois grupos; Grupo 5 injetado com PBS (controle) e Grupo 6 imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freund, via i.c. Foram realizadas coletas de sangue nos tempos zero, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 60, 90 dias pós-vacinal. A avaliação da resposta imune foi feita por meio da soroaglutinação direta em microplaca. Os resultados demonstraram que o grupo vacinado apresentou titulação a partir do 21º, com resposta máxima no 60º dia pós vacinal. Para avaliar o componente celular da resposta inflamatória inespecífica provocada pela vacinação foram utilizados três grupos (n=63), sendo Grupo 7 (controle) injetados com PBS, o Grupo 8com PBS + adjuvante incompleto de Freud e Grupo 9 imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freud, as injeções foram realizadas na ... / Abstract: Streptococcal infection causes significant losses in intensive farmed of tilapia in Brazil and one of the solutions is the use of vaccines. Thus, this study assessed the humoral and cellular immune response to a vaccine against S. agalactiae; and to this end were used 425 Nile tilapia, O. niloticus (200 ± 25 g). Firstly, the relative percentage of survival (PRS) was determined to evaluate which portions of sonicate S. agalactiae (soluble or insoluble) would be more efficient. For this, four groups were formed (n=20), G1 - injected with PBS, G2- injected with PBS + adjuvant incomplete of Freund; G3- immunized with the soluble fraction + adjuvant incomplete of Freund; G4 - immunized with the insoluble fraction + adjuvant incomplete of Freund. 21 days after immunization, fish were challenged with homologous strains (LC50) resulting in a PRS 100, 50, and 16.7% to G4, G3, and G2, respectively. Based on these results, the insoluble fraction was used to evaluate the humoral immune response. Group 5 (G5) was injected with PBS (control) and Group 6 (G6) was immunized with the insoluble fraction + incomplete Freund's adjuvant, intracoelomic route. They were performed blood samples at 0; 7; 14; 21; 28; 35; 42; 60, and 90 days post-vaccination. The evaluation of immune response was made by direct agglutination test in microplaque. The results showed that the vaccinated group presented titration from 21th day, with maximal response at 60 days post vaccination. To assess the cellular component of the nonspecific inflammatory response elicited by vaccination, three groups were used (n = 63), G7 - injected with PBS, G8- injected with PBS + incomplete Freund's adjuvant, G9 - immunized with the insoluble fraction + incomplete Freund's adjuvant. All injections were performed in the swim bladder. Therefore, we collected exudates at 6, 24, and 48 hours post-stimulus. The exudate results showed ... / Mestre