Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2016-09-09T12:00:57Z No. of bitstreams: 1 Augusto Duarte Faria.pdf: 509764 bytes, checksum: abeb590f27771e351e51bf4817e0bfa8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T12:00:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Augusto Duarte Faria.pdf: 509764 bytes, checksum: abeb590f27771e351e51bf4817e0bfa8 (MD5) Previous issue date: 2013-09-27 / Objectives: The aim of this report is to evaluate biological rhythm disruption in a case-­‐ control study nested in a population-­‐based cross-­‐section of people aged 18 to 24 years old. Methods: Caseness was confirmed with the Structured Clinical Interview for DSM-­‐IV (SCID). The Biological Rhythm Interview Assessment in Neuropsychiatry (BRIAN) was used to measure biological rhythm. The severity of depressive symptoms was measured with the Hamilton Depression Rating Scale (HDRS), and to assess the intensity of manic symptoms we utilized the Young Mania Rating Scale (YMRS). The Linear Regression was elaborated to account for potential confounders. Results: The sample consisted of 231 subjects. Of these, 94 were control subjects, 82 had major depression and 55 had bipolar disorder (33 type I and 22 type II). Irregular biological rhythm was associated with a diagnosis of bipolar disorder (40.40±9.78; p<0.001) and major depression (36.39±9.22; p>0.001) when compared with healthy controls (27.67±6.88). Furthermore, the severity of depression symptoms was highly correlated with the total BRIAN scores (r=0.592; p>0.001). Discussion: This population-­‐based study further reinforces the notion that bipolar disorder and major depression are associated with impairment in biological rhythm. / .

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2017-05-17T12:17:06Z No. of bitstreams: 1 Thaise Mondin.pdf: 7947815 bytes, checksum: 17cb281e3a48b1d8f3b3d3b6b8532a20 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T12:17:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thaise Mondin.pdf: 7947815 bytes, checksum: 17cb281e3a48b1d8f3b3d3b6b8532a20 (MD5) Previous issue date: 2016-10-16 / In the last decades, many studies have sought to understand the etiology of mood disorders and the mechanisms involved in relapses, beyond the investigation of low cost and effectiveness treatments. In this sense, the hypothesis of instability in biological rhythms has been studied as a contributing factor in the pathophysiology of mood disorders. This thesis aims to evaluate the effect of cognitive therapy on biological rhythm in a randomized clinical trial, as well as, to evaluate differences in biological rhythms in a populational-based study of individuals with the major depressive disorder, bipolar disorder, and healthy control. In addition, aims to assess correlations between the reduction of depression and anxiety symptoms and the regulation of biological rhythm were observed. Finally, aims to test the association between disruptions of biological rhythms and circadian preferences. The thesis is composed of two different study designs. The first is a randomized clinical trial with young adults aged between 18 and 29 year and aims to observe the impact of two models of brief cognitive psychotherapies for depression: Cognitive behavior therapy and cognitive Narrative therapy. The diagnosis was confirmed using the Structured Clinical Interview for DSM-IV (SCID). The biological rhythm was assessed with the Biological Rhythm Interview of Assessment in Neuropsychiatry (BRIAN). The severity of depressive and anxious symptoms was assessed by the Hamilton Depression Rating Scale (HDRS) and the Hamilton Anxiety Rating Scale (HARS), respectively. The second study is a cross-sectional study corresponding to the second phase of a population-based study with young adults aged from 22 to 30 years. The diagnosis was confirmed using the Mini International Neuropsychiatric Interview – (MINI)-PLUS. The Biological Rhythms Interview of Assessment in Neuropsychiatry (BRIAN) and depression symptoms was evaluated using the Montgomery-Asberg Depression Rating Scale (MADRS). In the first study, it was possible to observe a significant reduction in 10 depressive and anxious symptoms (p<0.001) and an increase in the regulation of biological rhythm (p<0.05) at the twelve-month follow-up. Moreover, we showed a positive correlation between the reduction of depressive symptoms and regulation of biological rhythm (r=0.638; p<0.001) and between the reduction of anxious symptoms and regulation of biological rhythm (r=0.438; p<0.001). In the second study, after all adjustments, bipolar disorders and depression subjects presented higher rates of disruption in biological rhythms compared to healthy controls. Euthymic subjects showed higher biological rhythm disruption when compared to controls. Higher disruption in biological rhythms was observed in subjects with evening preferences. The findings conclude that brief psychotherapy might be effective on the regulation of biological rhythm through the remission of depression and anxiety symptoms. Moreover, we conclude that subjects with mood disorder showed higher disruption in biological rhythms as compared to controls. In subjects with bipolar disorders disruption in biological rhythms are present even in the euthymic period. Thus, monitoring biological rhythms, such as sleep, eating pattern, time of activities and social pattern can be important during the euthymic period of the disease. New treatments that target biological rhythms should be developed to allow for a more timely application of interventions and may be clinically relevant for a better prognosis of individuals with mood disorders. / Nas últimas décadas, estudos têm buscado entender a etiologia e os mecanismos envolvidos no curso dos transtornos de humor, além da busca de tratamentos de baixo custo e eficácia comprovada. A hipótese da instabilidade dos ritmos biológicos têm sido estudada como um fator contribuinte para patofisiologia dos transtornos de humor. Esta tese tem como objetivo geral avaliar o impacto das psicoterapias cognitivas sobre o ritmo biológico em um ensaio clínico randomizado, bem como, avaliar o ritmo biológico em um estudo de base populacional de indivíduos com depressão, transtorno bipolar e controles saudáveis. Ademais, como objetivos específicos, visa correlacionar a redução dos sintomas depressivos e ansiosos com a regulação do ritmo biológico no ensaio clínico randomizado. E por fim, verificar prevalência de preferência circadiana entre participantes com depressão, transtorno bipolar e controles saudáveis e sua associação com a regulação do ritmo biológico entre os episódios de humor no estudo de base populacional. O primeiro artigo é um estudo de tipo ensaio clínico randomizado com jovens de 18 a 29 anos, e verifica o impacto de dois modelos de psicoterapias breves para depressão: terapia cognitiva comportamental e psicoterapia cognitiva narrativa. Como critério diagnóstico foi utilizado a Structured Clinical Interview for DSM-IV (SCID). Para avaliação do ritmo biológico foi utilizada a Biological Rhythms Interview of Assessment in Neuropsychiatry (BRIAN), para avaliação de sintomas depressivos e ansiosos foram utilizadas as escalas Hamilton Depression Rating Scale (HDRS) e a Hamilton Anxiety Rating scale (HARS), respectivamente. O segundo artigo é um estudo transversal, correspondente a segunda fase de um estudo longitudinal com jovens entre 22 e 30 anos, residentes na zona urbana da cidade de Pelotas. O diagnóstico foi realizado através da Mini-Plus. O ritmo biológico foi avaliado através da BRIAN e os sintomas depressivos através Montgomery-Asberg Depression Rating Scale (MADRS). Foi possível observar no 8 primeiro estudo, uma significativa redução dos sintomas depressivos e ansiosos (p<0.001) e um aumento da regulação do ritmo biológico (p<0.05) no follow-up de doze meses. Ainda, uma correlação positiva forte entre a redução dos sintomas depressivos e regulação do ritmo biológico (r=0.638; p<0.001) e uma correlação positiva moderada entre a redução dos sintomas ansiosos e a regulação do ritmo biológico (r=0.438; p<0.001). No segundo estudo, na análise ajustada indivíduos com depressão maior e transtorno bipolar apresentaram maiores disrupções no ritmo biológico quando comparados a controles saudáveis. Indivíduos em eutimia também apresentaram maiores disrupções do ritmo biológico quando comparado aos controles. Por fim, maior disrupção do ritmo biológico foi observado em indivíduos com preferência circadiana noturna. Os achados concluem que as psicoterapias breves podem atuar na regularidade do ritmo biológico, através da remissão da sintomatologia depressiva e ansiosa. Além disso, podemos concluir que indivíduos com transtornos de humor apresentam maiores disrupções do ritmo biológico quando comparados aos controles, e em indivíduos com transtorno bipolar, a disrupção esta presente, mesmo em períodos de eutimia. Assim, conclui-se a importância de um maior monitoramento dos ritmos biológicos, mesmo durante os períodos de eutimia, podendo contribuir para a prevenção de recaída e de um melhor prognostico do transtorno.

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2017-06-30T17:25:16Z No. of bitstreams: 1 Fernanda Pedrotti.pdf: 2330556 bytes, checksum: ddef2784e39ab69a1b9faa141cf2c1f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T17:25:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernanda Pedrotti.pdf: 2330556 bytes, checksum: ddef2784e39ab69a1b9faa141cf2c1f4 (MD5) Previous issue date: 2017-01-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES# / #2075167498588264571# / #600 / Metabolic syndrome (MetS) is a disorder with high prevalence in the general population and presents a high rate of comorbidity with depression. In addition, recent studies suggest that deregulation of the biological rhythm as well as specific symptoms of depression, such as anhedonia, might play a central role in this comorbidity. Thus, the aim of the current thesis was to assess the relationship between metabolic syndrome and depressive episode in a community sample of young adults from Pelotas-RS. This is a cross-sectional study corresponding to the second phase of a cohort study. The first paper sought to evaluate the relationship between metabolic syndrome and depressive episode. The results showed that individuals in a depressive episode and with metabolic syndrome had a worse metabolic profile. In addition, they also presented higher disruption in biological rhythm, with higher total BRIAN scores, as well as in sleep, social behavior and eating domains, when compared to individuals with depression, but without MetS. These findings suggest a strong association between MetS and biological rhythm disruption in depressed individuals. The second paper aimed to evaluate differences in the prevalence of MetS and metabolic parameters in young adults with bipolar disorder and major depressive disorder in current depressive episode. The results showed that individuals with bipolar disorder and depression, in the current depressive episode, present a high prevalence of MetS in relation to the population sample. In addition, there were no significant differences in metabolic parameters between individuals with depression and bipolar disorder, except for BMI, suggesting that MetS is associated with the depressive episode and not specifically with the diagnosis of mood disorder. In the third paper, it was verified that the prevalence of MetS is higher in depression subjects with anhedonia, when compared to depression subjects without anhedonia, and to population controls. This study also showed that individuals in depression with anhedonia have a worse metabolic profile in relation to glucose, triglycerides, total cholesterol and LDL cholesterol than the depression group without anhedonia. Thus, the present study shows an important relationship between MetS and depression, and stresses the importance of designing intervention strategies focused on reducing the high rates of comorbidity among these diseases. / A síndrome metabólica (SM) é um transtorno de alta prevalência na população geral e apresenta alta taxa de comorbidade com a depressão. Além disso, estudos recentes propõem que a desregulação do ritmo biológico, bem como de sintomas específicos da depressão, como a anedonia, podem desempenhar um papel central nesta comorbidade. Assim, o objetivo desta tese foi avaliar a relação entre síndrome metabólica e episódio depressivo através de um estudo populacional com adultos jovens da cidade de PelotasRS. Trata-se de um estudo transversal correspondente à segunda fase de um estudo de coorte. O primeiro trabalho buscou avaliar a relação entre síndrome metabólica e episódio depressivo. Os resultados demonstraram que indivíduos em episodio depressivo e com síndrome metabólica, apresentaram pior perfil metabólico. Além disso, também apresentaram maior desregulação no ritmo biológico, com maiores escores na escala BRIAN total, bem como dos domínios sono, padrão social e alimentação, quando comparados aos indivíduos com depressão, mas sem SM. Estes achados sugerem uma forte associação entre SM e desregulação do ritmo biológico em indivíduos em episodio depressivo. O segundo artigo teve como objetivo avaliar diferenças na prevalência da SM e parâmetros metabólicos entre adultos jovens com transtorno bipolar e transtorno depressivo maior, ambos em episódio depressivo atual. Os resultados revelam que indivíduos com transtorno bipolar e depressão, em episódio depressivo atual, apresentam alta prevalência de SM em relação à amostra populacional. Além disso, não houve diferenças significativas em relação aos parâmetros metabólicos entre os indivíduos com transtorno depressivo maior e transtorno bipolar, exceto para o Índice de massa corporal (IMC), sugerindo que a SM está associada ao episódio depressivo e não especificamente ao diagnóstico de transtorno de humor. No terceiro artigo, verificou-se que a prevalência da SM é maior em indivíduos com depressão e anedonia, quando comparados a indivíduos com depressão sem anedonia e a controles populacionais. Este estudo também mostrou que indivíduos com depressão e anedonia apresentam pior perfil metabólico, em relação aos níveis de glicose, triglicerídeos, colesterol-total e colesterol-LDL, do que o grupo depressão sem anedonia. Dessa forma, o presente trabalho mostra a importante relação entre SM e depressão, e salienta a necessidade de se traçar estratégias de intervenção focadas na redução das altas taxas de comorbidade entre estas doenças

No ambiente marinho a maior fonte de nitrogênio encontra-se na forma de nitrato, que é reduzido para incorporação à biomoléculas como aminoácidos e bases nitrogenadas. A enzima nitrato redutase (NR), responsável pela conversão de nitrato a nitrito, é a primeira enzima a participar do processo de assimilação de nitrogênio. Gracilaria tenuistipitata é uma macroalga marinha de grande importância econômica explorada comercialmente para a produção de ágar, um ficocolóide de ampla aplicação industrial e biotecnológica. Esta alga tem seu crescimento limitado principalmente pela assimilação de nitrogênio do meio. Em trabalhos anteriores envolvendo a NR de G. tenuistipitata, foram demonstradas as oscilações diárias de sua atividade e expressão protéica. Esses ritmos permaneceram mesmo em situações de luz constante, sendo assim regulados endogenamente pelo relógio biológico. Neste trabalho procuramos seqüênciar o gene de NR nesta alga e responder se a regulação de NR também ocorria na transcrição, estudando o ritmo diário dos níveis de expressão do RNA mensageiro. Na biblioteca de cDNA de G. tenuistipitata identificamos e seqüenciamos os clones de NR por primer walking. Utilizando os mesmos primers desenhados, seqüenciamos também o gene da NR, que não apresenta introns. Esta é a primeira descrição na literatura de uma NR sem introns e também do gene NR de algas vermelhas. Observamos a oscilação diária da expressão do RNA mensageiro de NR. Esses dados nos permitem concluir que a regulação de NR em G. tenuistipitata também ocorre durante a expressão deste gene. Em condições normais de claro-escuro há uma expressão basal de NR que pode ser atribuída a existência de dois genes de NR, um constitutivo e outro regulado; ou ainda a um único gene que tem sua expressão basal induzida. / In the marine environment, the major source of nitrogen is nitrate, which must be reduced before incorporation into organic compounds, such as amino acids and nitrogen bases (purines and pyrimidines). The first enzyme that participates in the nitrogen assimilation process is nitrate reductase (NR), which is responsible for the conversion of nitrate to nitrite. Gracilaria tenuistipitata is a marine macroalga with a great economic importance, harvested for the production of agar, which has many uses in products from industry and biotechnology. Nitrogen is the limiting macronutrient of this alga\'s growth. The previous biochemical characterization for NR in this alga demonstrated a dial oscillation of activity and protein expression. These rhythms have been conserved in the situation of continuous light being regulated by the biological clock. For a better understanding of the regulation of NR, we sequenced the NR gene and studied the genetic regulation of NR mRNA expression. In a cDNA library of G. tenuistipitata, we identified and sequenced the NR clones, using the primer walking methodology. Using the same primers we also sequenced the gene that did not show introns. This is the first description in the literature of a NR gene for red algae and also of intron absence in NR genes. A rhythm for NR mRNA expression was observed in a period of 24h. In conclusion NR expression is also regulated at the transcription level. There is a basal expression of the NR gene that could be related to two hypotheses: two NR genes, one constitutive and another regulated, or only one NR gene, which is continuously translated having, however, its expression regulated and enhanced.

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2018-08-08T12:13:43Z No. of bitstreams: 1 Louise Halla Reydams.pdf: 1479930 bytes, checksum: dbeb9959b561b6b01f81682d8d0dd3b9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-08T12:13:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Louise Halla Reydams.pdf: 1479930 bytes, checksum: dbeb9959b561b6b01f81682d8d0dd3b9 (MD5) Previous issue date: 2018-04-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES# / #2075167498588264571# / #600 / Substance use disorder is related to numerous mental and physical health problems, associated with several functional impairments that affect several aspects of the life of the individual with the disorder. The objective of this study was to evaluate the relationship between psychoactive substances and biological rhythm in a community sample of young people. It is a cross-sectional population-based study with adults aged 24 to 30 years living in the urban area of the city of Pelotas, RS. The sample selection was performed by multi-stage conglomerates. Socio-demographic data were collected from the sample and substance abuse or dependence was assessed through the Alcohol, Smoking and Substance Involvement Screening Test (ASSIST), as well as the biological rhythm was evaluated through the Biological Rhythm Interview of Assessment Neuropsychiatry (BRIAN). A total of 1241 subjects were evaluated. The prevalence of substance use disorders in the sample was as follows: alcohol 14.1% (n=175), tobacco 30.8% (n=382), cannabis 10.5% (n=130), cocaine/crack 8.4% (n=104) and other psychoactive substance use disorder 9.2% (n=114). In the model of linear regression adjustment, alcohol use disorder was able to predict change in sleep/social pattern (p<0.001), activity (p=0.024), eating pattern (p=0.049) and overall rhythm (p<0.001). Other psychoactive substance use disorder was also predictive of changes in the sleep/social pattern (p <0.001), activity (p<0.001), eating pattern (p<0.001) and overall rhythm (p<0.001). Our findings suggest that individuals with alcohol and other psychoactive use disorders presented greater changes in sleep/social patterns, activity and food patterns, as well as greater disruptions in maintaining the overall biological rhythm. / O transtorno por uso de substâncias está relacionado a inúmeros problemas de saúde mental e física, associado a diversos prejuízos funcionais que afetam diversos aspectos da vida do indivíduo portador do transtorno. O objetivo deste estudo foi avaliar a relação entre substâncias psicoativas e ritmo biológico em uma amostra comunitária de jovens. Trata-se de um estudo transversal de base populacional com adultos de 24 a 30 anos de idade residentes da zona urbana da cidade de Pelotas-RS. A seleção amostral foi realizada por conglomerados com múltiplos estágios. Foram coletados dados sócio-demográfico da amostra e o abuso ou dependência de substâncias foi avaliado através do Alcohol, Smoking and Substance Involvement Screening Test (ASSIST), bem como o ritmo biológico foi avaliado através da Biological Rhythm Interview of Assessment Neuropsychiatry (BRIAN). Foram avaliados 1241 sujeitos. As prevalências de transtornos por uso de substâncias na amostra foram as seguintes: álcool 14,1% (n=175), tabaco 30,8% (n=382), cannabis 10,5% (n=130), cocaína/crack 8,4% (n=104) e uso de outra substância psicoativas 9,2% (n=114). No modelo de ajuste por Regressão Linear, transtorno por uso de álcool foi capaz de predizer mudança no padrão de sono/social (p<0,001), atividade (p=0,024), alimentação (p=0,049) e ritmo global (p<0,001). Além disso, o transtorno por uso de outras substâncias psicoativas também foi capaz de predizer mudanças no padrão de sono/social (p<0,001), atividade (p<0,001), alimentação (p<0,001) e ritmo global (p<0,001). Nossos sugerem que os indivíduos com transtorno por uso de álcool e outras substâncias psicoativas apresentaram maiores alterações no padrão de sono/social, na atividade e no padrão alimentar, bem como, apresentaram maiores disrupturas na manutenção do ritmo biológico global.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A hiperatividade locomotora e as alterações nos ritmos circadianos têm sido descritas em roedores e humanos expostos ao etanol durante o desenvolvimento. Considerando que a atividade locomotora em camundongos é conhecida por variar ao longo das fases do ciclo claro escuro, é possível que o fenótipo hiperativo resultante da exposição precoce ao etanol também varie em função da hora do dia. Além disso, é possível que a hiperatividade apresentada pelos indivíduos expostos ao etanol durante o desenvolvimento esteja associada com distúrbios no sistema de controle do ritmo circadiano. Neste estudo, avaliamos estas duas possibilidades realizando uma análise circadiana da atividade locomotora e da expressão dos genes de relógio de camundongos adolescentes expostos ao etanol durante o período de surto de crescimento cerebral. Para tanto, camundongos suíços criados e mantidos em um ciclo claro/escuro de 12h (luzes acesas às 2:00h, apagadas as 14:00h) foram injetados com etanol (5g/kg ip, grupo ETOH) ou um volume equivalente de solução salina (grupo SAL) em dias alternados do segundo ao oitavo dias pós-natais. No 30 dia pós-natal, os animais foram testados em campo aberto por 15 minutos em diferentes momentos do ciclo claro/escuro: durante a fase clara entre 6:00 e 7:30h e entre12:00 e 13:30h; durante a fase escura entre 18:00 e 19:30h e entre 0:00 e 01:30h. Durante a fase escura os testes foram realizados sob iluminação com luz vermelha. Após os testes comportamentais, alguns animais foram randomicamente selecionados para as análises de imunofluorescência da expressão dos genes PER 1, 2 e 3 no núcleo supraquiasmático. Ao longo dos seis primeiros minutos, a atividade locomotora dos animais testados durante o período claro não mudou significativamente ou apresentou um leve aumento e a dos animais testados no período escuro apresentou uma marcante redução. Além disso, o grupo de animais testados entre 00:00 e 1:30h apresentou a maior atividade locomotora e o grupo dos animais testados entre 12:00 e 13:30h apresentou a menor atividade locomotora. De modo importante, a exposição neonatal ao etanol promoveu hiperatividade locomotora apenas no grupo de animais testados entre 00:00 e 1:30h. Em relação aos genes de controle do ritmo circadiano, a exposição precoce ao etanol afetou apenas a expressão do gene Per1 que foi menor entre 18:00 e 19:30h. O fato de que a expressão dos genes de controle do ritmo circadiano foi alterada no meio da fase escura e que a hiperatividade locomotora foi observada apenas no final da fase escura é compatível com a hipótese de que a hiperatividade induzida pelo etanol pode estar associada com as perturbações de controle do ritmo circadiano. / Locomotor hyperactivity and alterations of circadian rhythmicity have been described both in rodents and in humans exposed to ethanol during development. Considering that spontaneous locomotor activity in mice is known to vary as a function of the time of the day, it is conceivable that the expression of the locomotor hyperactivity phenotype resulting from developmental ethanol exposure also varies throughout the day. In addition, it is possible that the hyperactivity presented by individuals early exposed to ethanol is associated with a dysfunction in the control system of the circadian rhythm. In this study, we tested these two possibilities by performing a circadian analysis of the locomotor activity and the expression of clock genes in adolescent mice exposed to ethanol during the brain growth spurt period. Subjects were Swiss mice that were bred and maintained in our laboratory on a 12:12h light/dark cycle (lights on: 2:00, lights off: 14:00). From postnatal day 2 (PN2) to PN8, litters either received ethanol (5 l/g i.p., 25% in saline solution) or an equivalent volume of saline solution every other day. At PN30, locomotor activity was automatically assessed for 15 min in the open field test. During the light period, the animals were tested between 6:00 and 7:30 h or between 12:00 and 13:30 h whereas during the dark period the tests were performed between 18:00 and 19:30 h or between 0:00 and 1:30 h. During the dark period, the tests were conducted under red dim light illumination. After the behavioral tests, a sample of animals was randomly selected for the analysis by immunofluorescence of the expression of genes PER 1, 2 and 3 in the suprachiasmatic nucleus. Throughout the first 6 min, the locomotor activity of animals tested during the light period did not change or only increased slightly, while animals tested during the dark period presented a marked reduction. Furthermore, animals tested between 00:00 and 1:30 h presented the highest activity while animals tested between 12:00 and 13:30 h presented the lowest locomotor activity. Importantly, neonatal exposure to ethanol caused locomotor activity only in those animals tested between 00:00 and 1:30 h. As for the the clock genes, neonatal exposure to ethanol only affected the PER 1 expression, which was lowest between 18:00 and 19:30. Our data is in line with the idea that locomotor activity varies as a function of the time of the day. The fact that the expression of a clock gene was altered in then middle of the dark cycle and that locomotor hyperactivity was observed only at the end of this period is compatible with the hypothesis that the hyperactivity observed as result of ethanol exposure is associated with alterations in the control of the circadian rhythm.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A hiperatividade locomotora e as alterações nos ritmos circadianos têm sido descritas em roedores e humanos expostos ao etanol durante o desenvolvimento. Considerando que a atividade locomotora em camundongos é conhecida por variar ao longo das fases do ciclo claro escuro, é possível que o fenótipo hiperativo resultante da exposição precoce ao etanol também varie em função da hora do dia. Além disso, é possível que a hiperatividade apresentada pelos indivíduos expostos ao etanol durante o desenvolvimento esteja associada com distúrbios no sistema de controle do ritmo circadiano. Neste estudo, avaliamos estas duas possibilidades realizando uma análise circadiana da atividade locomotora e da expressão dos genes de relógio de camundongos adolescentes expostos ao etanol durante o período de surto de crescimento cerebral. Para tanto, camundongos suíços criados e mantidos em um ciclo claro/escuro de 12h (luzes acesas às 2:00h, apagadas as 14:00h) foram injetados com etanol (5g/kg ip, grupo ETOH) ou um volume equivalente de solução salina (grupo SAL) em dias alternados do segundo ao oitavo dias pós-natais. No 30 dia pós-natal, os animais foram testados em campo aberto por 15 minutos em diferentes momentos do ciclo claro/escuro: durante a fase clara entre 6:00 e 7:30h e entre12:00 e 13:30h; durante a fase escura entre 18:00 e 19:30h e entre 0:00 e 01:30h. Durante a fase escura os testes foram realizados sob iluminação com luz vermelha. Após os testes comportamentais, alguns animais foram randomicamente selecionados para as análises de imunofluorescência da expressão dos genes PER 1, 2 e 3 no núcleo supraquiasmático. Ao longo dos seis primeiros minutos, a atividade locomotora dos animais testados durante o período claro não mudou significativamente ou apresentou um leve aumento e a dos animais testados no período escuro apresentou uma marcante redução. Além disso, o grupo de animais testados entre 00:00 e 1:30h apresentou a maior atividade locomotora e o grupo dos animais testados entre 12:00 e 13:30h apresentou a menor atividade locomotora. De modo importante, a exposição neonatal ao etanol promoveu hiperatividade locomotora apenas no grupo de animais testados entre 00:00 e 1:30h. Em relação aos genes de controle do ritmo circadiano, a exposição precoce ao etanol afetou apenas a expressão do gene Per1 que foi menor entre 18:00 e 19:30h. O fato de que a expressão dos genes de controle do ritmo circadiano foi alterada no meio da fase escura e que a hiperatividade locomotora foi observada apenas no final da fase escura é compatível com a hipótese de que a hiperatividade induzida pelo etanol pode estar associada com as perturbações de controle do ritmo circadiano. / Locomotor hyperactivity and alterations of circadian rhythmicity have been described both in rodents and in humans exposed to ethanol during development. Considering that spontaneous locomotor activity in mice is known to vary as a function of the time of the day, it is conceivable that the expression of the locomotor hyperactivity phenotype resulting from developmental ethanol exposure also varies throughout the day. In addition, it is possible that the hyperactivity presented by individuals early exposed to ethanol is associated with a dysfunction in the control system of the circadian rhythm. In this study, we tested these two possibilities by performing a circadian analysis of the locomotor activity and the expression of clock genes in adolescent mice exposed to ethanol during the brain growth spurt period. Subjects were Swiss mice that were bred and maintained in our laboratory on a 12:12h light/dark cycle (lights on: 2:00, lights off: 14:00). From postnatal day 2 (PN2) to PN8, litters either received ethanol (5 l/g i.p., 25% in saline solution) or an equivalent volume of saline solution every other day. At PN30, locomotor activity was automatically assessed for 15 min in the open field test. During the light period, the animals were tested between 6:00 and 7:30 h or between 12:00 and 13:30 h whereas during the dark period the tests were performed between 18:00 and 19:30 h or between 0:00 and 1:30 h. During the dark period, the tests were conducted under red dim light illumination. After the behavioral tests, a sample of animals was randomly selected for the analysis by immunofluorescence of the expression of genes PER 1, 2 and 3 in the suprachiasmatic nucleus. Throughout the first 6 min, the locomotor activity of animals tested during the light period did not change or only increased slightly, while animals tested during the dark period presented a marked reduction. Furthermore, animals tested between 00:00 and 1:30 h presented the highest activity while animals tested between 12:00 and 13:30 h presented the lowest locomotor activity. Importantly, neonatal exposure to ethanol caused locomotor activity only in those animals tested between 00:00 and 1:30 h. As for the the clock genes, neonatal exposure to ethanol only affected the PER 1 expression, which was lowest between 18:00 and 19:30. Our data is in line with the idea that locomotor activity varies as a function of the time of the day. The fact that the expression of a clock gene was altered in then middle of the dark cycle and that locomotor hyperactivity was observed only at the end of this period is compatible with the hypothesis that the hyperactivity observed as result of ethanol exposure is associated with alterations in the control of the circadian rhythm.

No ambiente marinho a maior fonte de nitrogênio encontra-se na forma de nitrato, que é reduzido para incorporação à biomoléculas como aminoácidos e bases nitrogenadas. A enzima nitrato redutase (NR), responsável pela conversão de nitrato a nitrito, é a primeira enzima a participar do processo de assimilação de nitrogênio. Gracilaria tenuistipitata é uma macroalga marinha de grande importância econômica explorada comercialmente para a produção de ágar, um ficocolóide de ampla aplicação industrial e biotecnológica. Esta alga tem seu crescimento limitado principalmente pela assimilação de nitrogênio do meio. Em trabalhos anteriores envolvendo a NR de G. tenuistipitata, foram demonstradas as oscilações diárias de sua atividade e expressão protéica. Esses ritmos permaneceram mesmo em situações de luz constante, sendo assim regulados endogenamente pelo relógio biológico. Neste trabalho procuramos seqüênciar o gene de NR nesta alga e responder se a regulação de NR também ocorria na transcrição, estudando o ritmo diário dos níveis de expressão do RNA mensageiro. Na biblioteca de cDNA de G. tenuistipitata identificamos e seqüenciamos os clones de NR por primer walking. Utilizando os mesmos primers desenhados, seqüenciamos também o gene da NR, que não apresenta introns. Esta é a primeira descrição na literatura de uma NR sem introns e também do gene NR de algas vermelhas. Observamos a oscilação diária da expressão do RNA mensageiro de NR. Esses dados nos permitem concluir que a regulação de NR em G. tenuistipitata também ocorre durante a expressão deste gene. Em condições normais de claro-escuro há uma expressão basal de NR que pode ser atribuída a existência de dois genes de NR, um constitutivo e outro regulado; ou ainda a um único gene que tem sua expressão basal induzida. / In the marine environment, the major source of nitrogen is nitrate, which must be reduced before incorporation into organic compounds, such as amino acids and nitrogen bases (purines and pyrimidines). The first enzyme that participates in the nitrogen assimilation process is nitrate reductase (NR), which is responsible for the conversion of nitrate to nitrite. Gracilaria tenuistipitata is a marine macroalga with a great economic importance, harvested for the production of agar, which has many uses in products from industry and biotechnology. Nitrogen is the limiting macronutrient of this alga\'s growth. The previous biochemical characterization for NR in this alga demonstrated a dial oscillation of activity and protein expression. These rhythms have been conserved in the situation of continuous light being regulated by the biological clock. For a better understanding of the regulation of NR, we sequenced the NR gene and studied the genetic regulation of NR mRNA expression. In a cDNA library of G. tenuistipitata, we identified and sequenced the NR clones, using the primer walking methodology. Using the same primers we also sequenced the gene that did not show introns. This is the first description in the literature of a NR gene for red algae and also of intron absence in NR genes. A rhythm for NR mRNA expression was observed in a period of 24h. In conclusion NR expression is also regulated at the transcription level. There is a basal expression of the NR gene that could be related to two hypotheses: two NR genes, one constitutive and another regulated, or only one NR gene, which is continuously translated having, however, its expression regulated and enhanced.

Made available in DSpace on 2016-03-22T17:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thaise Mondi.pdf: 848457 bytes, checksum: ce6247b63ce139703f095380bed2e4ad (MD5) Previous issue date: 2013-01-17 / Background: There is evidence that the biological rhythm influence mood disorders. Studies indicate that individuals with mood disorders are more likely to present a new mood episode when the biological rhythms markers are deregulated. Objective: To verify the capacity regulation of biological rhythms in two models of brief psychotherapy for the remission of depressive symptoms Methods: We conducted a randomized clinical trial with young adults aged 18 to 29 years old who met diagnostic criteria for depression according to the Structured Clinical Interview for DSM (SCID). In order to assess the biological rhythm the Biological Rhythm of assessment in Neuropsychiatry (BRIAN) interview was used, whereas the severity of depression was assessed by the Hamilton Depression Scale (HAM-D). The psychotherapy models consisted on two cognitive psychotherapies: Cognitive Narrative Therapy (CNT) and Cognitive-Behavioral Therapy (CBT). Results: The sample included 97 individuals evenly distributed between the models of psychotherapy. Patients obtained regulation in biological rhythm in CBT and CNT models: the baseline means were 40.89 (±8.32) and 41.17 (±7.81) and at six-month follow-up the means were 32.61 (±11.53) and 29.82 (±9.66), respectively.. Regarding the biological rhythm, there were no differences between the models at post-intervention (p=0.209) and at 6-months follow-up (p=0.323). Concerning the remission of depressive symptoms CBT was more effective at the final evaluation (p = 0.018), however, at 6-months follow-up the effectiveness of the psychotherapies were homogeneous (p=0178). There was a moderate positive correlation (r = 0566 p&#8804;0.001) between the regulation of biological rhythms and the remission of depressive symptoms. 52 Conclusion: The two models of brief psychotherapies were effective in the remission of depressive symptoms as well as the regulation of biological rhythms in the follow-up of 6 months. Brief psychotherapies are low cost to public health and this study demonstrates that act regulating the biological rhythm / Introdução: Há evidências de que o ritmo biológico influencia nos transtornos de humor de forma a contribuir para manutenção dos sintomas. Estudos indicam que quando os marcadores de ritmo biológico estão desregulados há uma maior probabilidade de ocorrer um episódio de transtorno de humor. Objetivo: O objetivo do estudo foi verificar a capacidade da psicoterapia cognitiva atuar na regularização do ritmo biológico em pacientes deprimidos atendidos em dois modelos de psicoterapia breve para remissão de sintomas depressivos. Método: Trata-se de um ensaio clínico randomizado com jovens de 18 a 29 anos que preencheram critérios diagnósticos para depressão segundo a Structured Clinical Interview for DSM (SCID). O ritmo biológico foi avaliado através da Biological Rythm interview of assessment in neuropsychiatry (BRIAN), enquanto a severidade da depressão foi avaliada através da Hamilton Depression Scale (HAM-D). Os modelos de psicoterapia cognitiva utilizados foram: Terapia Cognitivo Narrativa (TCN) e Terapia Cognitivo Comportamental (TCC), ambos com sete sessões. Foram realizadas avaliações pós-intervenção e follow-up de 6 meses. Resultados: A amostra final contou com 97 indivíduos distribuídos de forma homogênea entre os modelos de psicoterapia. Os pacientes regularizaram o ritmo biológico nos dois modelos TCC e TCN, obtendo no baseline em média 40.89(±8.32) e 41.17(±7.81) pontos, e no follow-up de seis meses 32,61(±11,53) e 29,82(±9,66) pontos respectivamente. Na avaliação do ritmo biológico não houve diferenças entre os modelos no pós - intervenção (p=0.209) e follow-up de 6 meses (p=0.323). Para a remissão dos sintomas depressivos a TCC obteve uma maior eficácia na avaliação final (p=0.018), no entanto, no follow-up de 6 meses as psicoterapias mostraram-se homogêneas quanto sua eficácia (p=0.178). Houve uma correlação moderada positiva 50 (r= 0.566 p&#8804;0.001) entre a regularização do ritmo biológico e a remissão dos sintomas depressivos. Conclusão: Os dois modelos de psicoterapia breve mostraram-se eficazes na remissão da sintomatologia depressiva bem como na regularização do ritmo biológico no follow-up de 6 meses. Psicoterapias breves são de baixo custo para saúde pública e demonstram neste estudo que atuam regulando o ritmo biológico