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Avaliação da Inocuidade e Qualidade Microbiológica do Queijo Artesanal Serrano e sua Relação com o Período de Maturação / Assessment of Microbiological Safety and Quality of handmade Cheese Serrano and its Relation to the Ripening PeriodMelo, Fernanda Danielle 22 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-22 / The handmade serrano cheese of Santa Catarina is a typical product made on small
farms in the Serrana Region Catarinense. Its main feature is to be manufactured
from raw milk without suffering any heat treatment in order to eliminate pathogenic
microorganisms that may be present. This fact has major implications, especially for
the public health risk that product cause foodborne illness. Current law allows
handmade cheeses from raw milk to be aged for a period less than 60 days,
however, but also declares the need for technical-scientific studies to prove the best
time of maturation, to ensure the quality and safety of the product. The present study
aimed to realize the isolation and identification of Listeria monocytogenes and
Salmonella sp. and isolating and quantifying Staphylococcus aureus, Escherichia coli
and total coliforms and relate the maturation time with contamination of handmade
cheeses, thus verifying the best time of maturation to make a product that is safe for
consumers. The experiment was conducted using 108 samples of handmade
serranos cheese from various cities in the mountainous region of SC, with maturity
periods of between 14, 28, 42 and 63 days. In Animal Microbiological Diagnostic
Center - CEDIMA were performed the following analyzes: isolation of Listeria
monocytogenes using the method USDA/2009 and of Salmonella sp. methodology
according to ISO 6579/2007. The bacteria identified as Listeria monocytogenes were
sent for serotyping the Instituto Oswaldo Cruz Foundation. The enumeration of
Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Total Coliform was performed on
petrifilm plates. The sanitary quality of the cheeses analyzed was unsatisfactory,
because the presence of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and total coliform
was found above the levels permitted by law, indicating deficiency in hygiene
procedures during manufacture of the product. Salmonella sp. not detected in any
sample, but, the presence of Listeria monocytogenes makes cheese unfit for human
consumption, as it offers potential risk to consumer health .The maturing period up to
60 days did not affect the isolation of the microorganisms statistically analyzed / O queijo artesanal serrano de Santa Catarina é um produto típico produzido em
pequenas propriedades rurais na Serrana Catarinense. Sua principal característica é
ser fabricado a partir do leite cru, sem sofrer nenhum tratamento térmico que elimine
os microrganismos patogênicos que podem estar presente. Este fato traz grandes
implicações, principalmente, para saúde pública pelo risco desse produto causar
doenças transmitidas por alimentos. A legislação vigente permite que queijos
artesanais elaborados a partir de leite cru sejam maturados por um período inferior a
60 dias, porém, declara a necessidade de estudos técnico-científicos a fim de
comprovarem a melhor época de maturação, para que se possa garantir a qualidade
e a inocuidade do produto. O presente estudo teve por objetivo realizar o isolamento
e a identificação de Listeria monocytogenes e Salmonella sp. e o isolamento e
quantificação de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e coliformes totais e
relacionar o tempo de maturação com a contaminação dos queijos artesanais,
verificando assim, a melhor época de maturação para comercializar um produto que
seja seguro ao consumidor. O experimento foi conduzido utilizando 108 amostras de
queijo artesanais serranos provenientes de várias cidades da Região Serrana de
SC, com períodos de maturação entre 14, 28, 42 e 63 dias. No Centro de
Diagnóstico Microbiológico Animal - CEDIMA foram realizadas as seguintes análises:
pesquisa de Listeria monocytogenes segundo o método USDA/2009 e isolamento de
Salmonella sp. segundo a metodologia ISO 6579/2007. As bactérias identificadas
como Listeria monocytogenes foram enviadas para sorotipificação na Fundação
Instituto Oswaldo Cruz. A contagem de Staphylococcus aureus, Coliformes Totais e
Escherichia coli foi realizada em placas de petrifilm . A qualidade higiênicosanitária
dos queijos analisados foi insatisfatória, pois a presença de Staphylococcus
aureus, Escherichia coli e coliformes totais encontrou-se acima dos valores
permitidos pela legislação, indicando deficiência nos procedimentos de higiene
durante a fabricação do produto. A Salmonella sp. não detectada em nenhuma das
amostras, porém, a presença de Listeria monocytogenes torna o queijo impróprio
para o consumo humano, uma vez que oferece risco potencial a saúde do
consumidor. O período até 60 dias maturação não influenciou estatisticamente no
isolamento dos microrganismos analisados
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Isolamento, quantificação e perfil de resistência de sorovares de Salmonella isolados de lingüiça frescal suína em Lages/SC / Isolation, quantification and resistance profile in Salmonella serovars strains isolated from fresh pork savage in Lages, Santa Catarina StateSpricigo, Denis Augusto 05 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-05 / Salmonella is one of the main causes of food poisoning. In the last years, the main
focus has been on meat and swine products both because of public health concerns
and also because of its commercialization/exportation. Two studies were conducted
in order to: 1) verify the prevalence of Salmonella serovars in fresh pork sausages
commercialized in Lages, Santa Catarina and analyze its level of contamination,
and 2) determine the profile of antimicrobial resistance in samples of Salmonella sp.
isolated in fresh pork sausages. For this purpose, 200 samples of nine brands were
collected in different commercial stores. At laboratory 25 grs of the collected material
was weighed aseptically. Each sample was submitted to a pre-enrichment in buffered
water peptone (37oC/24 h) followed by selective enrichment in Tetrationate Muller-
Kauffmann and Rappaport-Vassiliadis (42oC/24h) and isolated in Xylose Lysine
Tergitol-4 agar and Brilliant-Phenolred-bile-Lactose-Saccharose agar with
Novobiocine. Suspected colonies were cofirmed by biochemical and serological
tests. Among the samples analyzed, Salmonella sp. was isolated from 27% (54).
Serovar Typhimurium (20%) accounted for the highest percentage of isolates in a
total of 15 serovars. Only one sausage sample had a quantity of Salmonella capable
of causing diseases in human beings (>1.100 MPN/g). In the second study, the 60
strains were tested against 14 antimicrobials by the agar diffusion method. 56,67% of
the analyzed isolates showed resistance to at least one antimicrobial agent, and
20% showed multi-resistance. The highest rate of resistance was detected against
sulfonamide (45%) and tetracycline (41%). No sample was resistant to
amoxicillin/clavulanic acid, ceflacor, gentamicin, neomycin and tobramycin. The
sample that showed resistance against the highest number of antimicrobial agents
(7/14) belonged to serovar Schwarzengrund, although serovar Typhimurium
presented the highest number of multiresistent isolates (5/12 41,67%). Although
most products were positive for Salmonella sp., in amounts below the infection dosis,
their prevalence may be a risk for the consumer. The high number of isolated agents
found in the study stresses that future monitoring of the use of antimicrobial agents is
necessary to control the risk of selection and transmission of resistant families
through the food chain / A Salmonella sp. é uma das principais causas mundiais de toxinfecção alimentar.
Nos últimos anos, as preocupações têm se voltado para a carne e produtos suínos
tanto no aspecto de saúde pública como de comercialização/exportação. Dois
estudos foram conduzidos com o objetivo de: 1) verificar a prevalência de sorovares
de Salmonella sp. em lingüiças tipo frescal de matéria-prima suína comercializadas
em Lages/SC, bem como seu nível de contaminação; e, 2) verificar o perfil de
resistência aos antimicrobianos em linhagens de Salmonella isoladas de lingüiças
frescal suína. Para tanto, na primeira fase do trabalho, foram coletadas 200
amostras de nove marcas em diferentes estabelecimentos comerciais. No
laboratório, foram pesados assepticamente 25 g de cada material coletado. Cada
amostra foi submetida a pré-enriquecimento em água peptonada tamponada
(37oC/24h), seguido de enriquecimento seletivo em Tetrationato Muller-Kauffmann e
Rappaport-Vassiliadis (42oC/24h) e isolamento em agar seletivo Xilose Lisina
Tergitol-4 e Verde Brilhante Lactose Sacarose acrescido de Novobiocina. Colônias
suspeitas foram identificadas através de perfil bioquímico e sorologia. Das amostras
analisadas, foram isoladas Salmonella sp. em 27% (54), sendo o sorovar
Typhimurium o mais encontrado (20%) num total de 15 sorovares. Em apenas seis
amostras foi isolado mais de um sorovar. Apenas uma apresentou uma quantidade
de microrganismos capaz de causar enfermidade no homem (>1.100 NMP/g). Na
segunda fase, os 60 isolados foram submetidos ao teste de susceptibilidade in vitro
frente a 14 antimicrobianos através do método de difusão em agar Mueller-Hinton.
Das amostras analisadas, 56,67% apresentaram resistência a pelo menos um dos
antimicrobianos testados e o perfil de multi-resistência foi encontrado em 20% das
amostras testadas. Os maiores índices de resistência foram apresentados contra
sulfonamida (45%) e tetraciclina (41,67%). Nenhuma amostra foi resistente a
amoxicilina/ácido clavulânico, cefaclor, gentamicina, neomicina e tobramicina. A
amostra com maior índice de resistência (50%) foi do sorovar Schwarzengrund,
porém o sorovar Typhimurium foi o que apresentou maior número de isolados multiresistentes
(5/12 41,67%). Apesar da maioria dos produtos positivos para
Salmonella sp. conter uma quantidade de microrganismo abaixo da dose infectante,
sua prevalência elevada pode representar um risco ao consumidor. Além disso, o
alto número de isolados resistentes encontrado no presente estudo indica a
necessidade de futuro monitoramento do uso de antimicrobianos na granja, para
controlar o risco de seleção e transmissão de cepas resistentes através da cadeia
alimentar
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Detecção de Salmonella sp. em aves silvestres cativas e avaliação do impacto sobre a avicultura / Detection of Salmonella sp. in captive wild birds and evaluation of the impact on the avicultureLUZ, Patrícia Gaspar da 10 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-10 / Salmonelosis is a term to designate patologies caused by the Salmonella genus, which has an extensive dissemination in the poultry environment and a large interconnection with wild birds, which act as reservoirs. Salmonella sp. is representative of the Enterobacteria s family, being usually associated with infections on aviary, and human food poisoning. It can, mainly in wild birds, present as asymptomatic form, which give to these animals the status of carrier and diffuser in the environment. The present research had the purpose to detect wild bird carriers of the agent, also by inoculation of the found strain in vivo, realize the retro isolation, so researching the effects caused on poultry production and evaluating its impact over the aviculture. The biological material that had been collected of the wild birds was derived of cloacal swabs, totalizing 121 samples of eleven different groups, which were processed by isolation. Only one from the 121 samples was positive, isolated in a Magellanic penguin (Spheniscus magellanicus), then was inoculated in chicks (Gallus gallus) with one day of age, which were challenged and watched for 12 days. In total 21 chicks were used as biological model, distributed in 3 groups, one positive control (inoculated with a known sample of Salmonella), one negative control (inoculated with saline solution), and one challenged with the strain field found and identified as Salmonella sp. After the observation period, was executed the sacrifice of the birds by full bleed, when were collected blood samples for serology, and the necropsy with collect of biological material of liver, duodenum, jejunum and cecum for bacteriological diagnosis, also histopathological. In the bacteriological diagnosis were found biochemical profiles compatibles with the bacteria in question both in the positive control group and in the group which was challenged with the strain field. After, the retro isolation was confirmed by the serological identification technique, in which there was an agglutination reaction of the standard serum with the retro isolated antigen from these two groups of birds. In the histopathology lesions caused by Salmonella sp. were observed in the studied organs, both in the positive control group and in the challenged group. Also it was possible to detect the presence of anti Salmonella sp. antibodies in the end of the experimental period in both groups of birds where was retro isolated the bacteria. So, even with the low isolation of the bacteria in the species of wild birds studied, there is the possibility of transmission of Salmonella sp. to poultry production, from strain of wild marine birds, and its potential to cause disease, and consequently, prejudice in the avian environment. / Salmonelose é um termo utilizado para designar doenças causadas por bactérias do gênero Salmonella sp., que tem ampla disseminação no meio avícola, e grande interligação com as aves silvestres, que atuam como reservatórios. A Salmonella sp. é representante da família das enterobactérias, sendo normalmente associada a infecções dentro de aviários e toxinfecções alimentares humanas. Pode, principalmente nas aves silvestres, se apresentar de forma assintomática, o que confere a estes animais o estado de portadores e disseminadores no ambiente. O presente trabalho teve como finalidade detectar aves silvestres portadoras do agente, além de, através de inoculação in vivo da cepa encontrada, realizar o retroisolamento, pesquisando assim os efeitos causados nas aves de produção e avaliando seu impacto sobre a avicultura. O material biológico coletado das aves silvestres foi oriundo de suabe cloacal, totalizando 121 amostras provenientes de onze diferentes ordens, as quais foram processadas mediante o isolamento. Das 121 amostras, somente uma foi positiva, isolada na espécie pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus), sendo então inoculada em pintos (Gallus gallus) com um dia de vida, os quais foram desafiados e observados por 12 dias. No total foram utilizados como modelo biológico 21 pintos, distribuidos em 3 grupos, sendo um controle positivo (inoculado com uma amostra conhecida de Salmonella), um controle negativo (inoculado com solução salina) e um desafiado com a cepa de campo isolada e identificada como Salmonella sp. Após o período de observação, foi realizado o sacrifício das aves com sangria total, quando foram coletadas amostras sanguíneas para sorologia, e na necropsia, foi coletado material biológico do fígado, duodeno, jejuno e ceco para diagnóstico bacteriológico, além de histopatológico. No diagnóstico bacteriológico foram encontrados perfis bioquímicos compatíveis com a bactéria em questão, tanto no grupo controle positivo quanto no grupo que foi desafiado com a cepa de campo. Após foi confirmado o retroisolamento através da técnica de Identificação Sorológica, na qual houve reação de aglutinação do soro padrão com o antígeno retroisolado proveniente destes dois grupos de aves. No exame histopatológico foram observadas lesões nos órgãos estudados causadas pela bactéria Samonella sp. tanto no grupo controle positivo quanto no grupo inoculado com a cepa isolada. Foi possível também detectar a presença de anticorpos anti Salmonella sp. ao final do período experimental nos dois grupos de aves onde a bactéria foi retroisolada. Dessa forma, mesmo com o baixo isolamento da bactéria nas espécies de aves silvestres estudadas existe a possibilidade de transmissão de Salmonella sp. para aves de produção, proveniente de cepas de aves selvagens marinhas, e seu potencial em causar enfermidade, e consequentemente prejuízos no ambiente avícola.
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QUALIDADE MICROBIOLÓGICA E FÍSICO-QUÍMICA DE QUEIJO MUSSARELA FATIADO À GRANEL E EMBALADO À VÁCUO / MICROBIOLOGICAL QUALITY AND PHYSICAL CHEMISTRY OF BULK MOZZARELLA CHEESE SLICED AND VACUUM PACKEDEtges, Joviana Ceolin 30 March 2011 (has links)
The mozzarella cheese is a product of high consumption, but very susceptible to microbiological contamination. Therefore, this study aimed to evaluate the microbiological
and physical-chemistry of sliced mozzarella cheese in bulk and vacuum-packed, sold in supermarkets in the Northwest region of Rio Grande do Sul State. We evaluated five marks
(50 samples) of vacuum-packed mozzarella cheese (A, B, C, D and E) and a mark (25 samples) sold in bulk (F). Microbiological tests were performed according to Normative
Instruction 62, August 26th, 2003: fecal coliform counts (45ºC), Salmonella sp. and coagulase positive Staphylococcus in two different periods during the validity period (period I) and after the expiration of the samples (period II). Were also conducted analysis of pH, fat and moisture, according to the Normative Instruction 68, December 12th, 2006. The physicochemical parameters classified the samples as fat cheese and medium humidity and all attended the legal parameters established by the Brazilian legislation. The microbiological results showed that all samples were within the standards for fecal coliform and coagulase positive Staphylococcus in both periods of analysis. However, in period I detected the
presence of Salmonella sp. in one of the marks (16.67 %), being improper for human consumption. / O queijo Mussarela é um produto de elevado consumo, porém muito susceptível à contaminação microbiológica. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade
microbiológica e físico-química do queijo Mussarela fatiado à granel e embalado à vácuo, comercializado em supermercados da região Noroeste do estado do Rio Grande do Sul. Foram
avaliadas 5 marcas de queijo Mussarela embalado à vácuo (A, B, C, D e E), totalizando 50 amostras, e uma marca comercializada à granel (F), totalizando 25 amostras. As análises microbiológicas realizadas foram: contagem de coliformes termotolerantes (45°C), Salmonella sp. e Staphylococcus coagulase positiva, em dois diferentes períodos, durante o prazo de validade (período I) e após o vencimento das amostras (período II). Também foram
realizadas as análises de pH, teor de gordura e umidade. Os parâmetros físico-químicos classificaram as amostras como sendo queijos gordos e de média umidade e atenderam os
padrões exigidos pela legislação brasileira. Os resultados microbiológicos mostraram que todas as amostras apresentaram-se dentro dos padrões para coliformes termotolerantes e Staphylococcus coagulase positiva, nos dois períodos de análise, porém, no período I, foi
detectada a presença de Salmonella sp. em uma das marcas (16,67 %), encontrando-se imprópria para o consumo humano.
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Susceptibilidade a antimicrobianos e resistência plasmidial de cepas de Salmonella spp isoladas de dois estuários do Estado do Ceará, Brasil /Figueirêdo, Francileide Vieira. January 2008 (has links)
Resumo: A salmonelose é uma das doenças de origem alimentar mais freqüente e considerada uma das zoonoses mais relevantes para a saúde pública em todo o mundo. A Organização Mundial de Saúde (OMS) assinalou aumento alarmante de estirpes de Salmonella resistentes aos antibióticos devido ao seu uso abusivo em criações intensivas, especialmente nas aquícolas. Diante do exposto, o escopo deste trabalho foi o de isolar e identificar a resistência plasmidial em bactérias do gênero Salmonella, em amostras de água de dois ambientes estuarinos, um do Norte (Acaraú) e outro do Sul (Jaguaribe) do Estado do Ceará, ambos com atividades de carcinicultura. Durante sete meses, de novembro de 2006 a maio de 2007, foram coletadas 84 amostras de água dos dois estuários. A pesquisa de Salmonella seguiu a metodologia do "Bacteriological Analytical Manual". As salmonelas foram testadas quanto à susceptibilidade a dez antimicrobianos: Ácido nalidíxico, Ampicilina, Ciprofloxacina, Ceftriazona, Cloranfenicol, Gentamicina, Imipenem, Nitrofurantoína, Sulfametoxazol e Tetraciclina. A Concentração Inibitória Mínima dos antibióticos seguiu a técnica de macrodiluição em caldo. Em atividade de base, mediu-se o pH, a temperatura e a salinidade da água. Foram confirmadas 103 cepas de Salmonella, 90 no Rio Acaraú e 13 no Rio Jaguaribe, pertencentes aos sorovares: S. Newport, S. Saintpaul, S. Panama, S. Rubislaw, S Albany, S. Anatum, S. Corvallis, S. Madelia. O Rio Acaraú apresentou-se mais contaminado do que o Rio Jaguaribe, onde foram encontradas cepas resistentes a antimicrobianos, com um percentual de 25% para resistência plasmidial, e 75% para a cromossômica. Esses resultados ressaltam dois problemas de saúde pública: a presença de cepas de Salmonella resistentes e a possibilidade de contaminação humana pelo consumo dos crustáceos. Somado a isso,...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Salmonellosis is one of the most common foodborne diseases, was considered and the most important for public health authorities throughout the world. The World Health Organization (WHO) recently drew attention to the rapid increase in Salmonella strains resistant to antibiotics employed in farming activities, especially in aquaculture. Thus, the objective of this study was to test the antimicrobial susceptibility of Salmonella strains isolated from water samples collected in the estuaries of the Acaraú and Jaguaribe rivers (respectively in the north and south of Ceará State, Brazil), both of which are subject to extensive shrimp farming. Eighty-four samples were collected between November 2006 and May 2007. The susceptibility tests were performed following the guidelines of the Bacteriological Analytical Manual (BAM). The strains were exposed to 10 different antibiotics: nalidixic acid, ampicillin, ciprofloxacin, ceftriaxone, chloramphenicol, gentamicin, imipenem, nitrofurantoin, sulfamethoxazole and tetracycline. The minimum inhibitory concentration of the antibiotics was determined with the broth macrodilution method. In base activity, mensure the factores as Temperature, salinity and pH values were registered for all water samples. One hundred three Salmonella strains were isolated (Acaraú n=90; Jaguaribe n=13) belonging to the serotypes S. Newport, S. Saintpaul, S. Panama, S. Rubislaw, S Albany, S. Anatum, S. Corvallis and S. Madelia. Thus, the Acaraú river was more severely contaminated than the Jaguaribe river, where strains resistant to antimicrobial were found in a rate of 25% to plasmid resistance and 75% to chromosomal resistance. These results show up two problems of public health: the presence of resistant strains of Salmonella and the possibility of human contamination though crustacean consumption. In addition to this,...(Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Julieta Rodini Engracia de Moraes / Coorientador: Regine H. S. dos Fernandes Vieira / Banca: Fabiana Pilarski / Banca: Angela Cleusa de Fátima Banzatto de Carvalho / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Fabiana Rizzi Bozzo / Doutor
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Caracterização fenotípica e genotípica de salmonelas isoladas de área rural e urbana de Manaus, AmazonasMachado, Andréia Santa Rita 28 December 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-22T22:06:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Andreia Santa Rita Machado.pdf: 2387947 bytes, checksum: d35cf07d159853de28eceb1bc4ec7852 (MD5)
Previous issue date: 2013-12-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Salmonella sp. lives in the intestinal tract of many warm and cold blooded animals. Salmonella can cause mild gastroenteritis and severe invasive diseases. Those are responsible for 216 thousands deaths /year, and are most commonly linked with areas of low socioeconomic status and sanitation. The aim of this study was to describe the genotypic and phenotypic characteristics of Salmonella isolated from countryside and urban areas of Manaus / AM. Samples were collected from children 0-10 years old with and without diarrhea in the urban area and in the countryside samples were collected from stools of adults, children, animals, and the water. These strains were isolated in liquid sodium Tetrationado, then, sown on solid media selective for Salmonella, reproduced in predetermined conditions for Salmonella. Colonies were then selected with morphological characteristics for Salmonella and sown in biochemical tests for phenotypic characterization and identification. We performed the amplification and sequencing of 16S rRNA and analyzed genetic similarity using the Pulsed Field technique for genotypic characterization and identification of these strains. In total, 22 Salmonella samples were characterized, 3 of (13.6%) S. Paratyphi B, 3 of (13.6%) S. Javiana, 3 of (13.6%) S. enterica subsp. arizonae, 3 of (13.6%) Salmonella enterica, 3 of (13.6%) Salmonella sp., 2 of (9%) S. Bareilly, 2 of (9%) S. Typhimurium, 1of (4.5%) S. Agona, 1 of (4.5%) S. Stanley and 1 of (4.5%) S. Enteritidis. Among the 22 isolates, 100% were sensitive to Ciprofloxacin, 10 (46%) were resistant to Nitrofurantoin and 8 (36, 3%) were resistant to Sulfametaxazol + trimethropim. These strains have the ability to cause infections. All of them presented virulence factors with invasion, adhesion and survival capacity into the cell. The genetic similarity analysis generated different profiles among clinical isolates and wild isolates. We must call attention to this type of research and continue focusing on improving the diagnosis and decreasing resistance to antibiotics and ultimately the creation of programs for control and prevention of that disease. / As salmonelas fazem parte da microbiota intestinal de muitos animais de sangue quente e frio. Podem causar gastroenterite leve ou até mesmo doenças invasivas graves, causadoras de 216 mil mortes/ano, e geralmente está associada a regiões de baixos níveis socioeconômicos e de saneamento básico. O objetivo deste estudo foi descrever as características genotípicas e fenotípicas de Salmonella isolada de área rural e urbana de Manaus/AM. Foram utilizadas amostras diarreicas coletadas de crianças de 0 a 10 anos de idade e amostras não diarreicas, coletadas de adultos, crianças, animais, além de amostras da água. Estas amostras foram isoladas em meio líquido Tetrationato de sódio, semeadas em meios sólidos seletivos para Salmonella. Em seguida foram selecionadas colônias com as características morfológicas para Salmonella e semeadas em provas bioquímicas para a caracterização fenotípica e identificação. Foi realizada a amplificação e o sequenciamento do gene 16S rRNA e análise da similaridade genética pela técnica de Pulsed Field para caracterização genotípica e identificação destas cepas. No total foram caracterizadas 22 salmonelas, sendo 3 (13,6%) S. Paratyphi B, 3 (13,6%) S. Javiana, 3 (13,6%) S. enterica subsp. arizonae, 3 (13,6%) Salmonella enterica, 3 (13,6%) Salmonella sp., 2 (9%) S. Bareilly, 2 (9%) S. Typhimurium, 1 (4,5%) S. Agona, 1 (4,5%) S. Stanley e 1 (4,5%) S. Enteritidis. Entre os 22 isolados, 100% foram sensíveis a ciprofloxacina e, 10 (46%) resistentes a Nitrofurantoína e 8 (36, 3%) a Sulfametaxazol + trimetropima. Estas cepas têm a capacidade para causar infecções invasivas, pois todas apresentaram fatores de virulência com capacidade de invasão, aderência e sobrevivência no interior da célula. A análise de similaridade genética formou perfis diferentes entre os isolados clínicos e isolados selvagens. Chama-se a atenção para realização contínua desse tipo de pesquisa, visando a melhoria no diagnóstico e diminuição da resistência aos antibióticos, além da criação de programas de controle e prevenção da doença.
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Avaliação de probiótico e bacteriófagos líticos para o controle de Salmonella sp. em supinos experimentalmente infectadosNogueira, Mariana Gomes January 2010 (has links)
Devido à limitação do uso de antimicrobianos, alternativas que seguem a linha de controle biológico, como os bacteriófagos líticos e probióticos, vêm sendo propostos para o controle de Salmonella sp. em animais de produção. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração oral de probiótico e bacteriófagos líticos sobre a ocorrência de infecção e excreção fecal de Salmonella sp. em suínos em fase de crescimento e terminação. O experimento foi realizado em dois períodos (blocos), com duração de 49 dias, em suínos com 43 dias de idade. Estes animais foram divididos em três tratamentos: T1 (controle), T2 (bacteriófagos) e T3 (probiótico), com 12 animais em cada tratamento e 10 animais controle. Após duas semanas de alojamento, os suínos foram inoculados com Salmonella Typhimurium (dia 0 P.I.). Os animais receberam uma suspensão de bacteriófagos líticos (CNPSA1, CNPSA3 e CNPSA4) por oito dias consecutivos, quatro dias antes e quatro dias após inoculação. O probiótico foi fornecido pela via oral nos dois primeiros dias de alojamento (108 Unidade Formadora de Colônia-UFC/ g), posteriormente o produto (107 UFC/g) foi fornecido diariamente na ração na concentração de 1%. Foram realizadas colheitas de sangue (-14, 0, 7, 14, 21, 28 e 35 PI) para pesquisa de IgG anti- Salmonella, e de fezes (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21 e 28) para pesquisa e quantificação de Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus e coliformes totais. No dia 35PI os animais foram eutanasiados e fragmentos de órgãos foram coletados para pesquisa de Salmonella. Foram coletados segmentos do intestino delgado para análise de morfometria e pesquisa de IgA de mucosa. Os resultados indicam que o tratamento de suínos na fase de crescimento não foi capaz de impedir a infecção dos animais, e a soroconversão ocorreu a partir do dia 7PI. Não foi observada menor excreção de Salmonella nos grupos tratados. Não houve efeito sobre a população de Lactobacillus, Enterococcus e coliformes totais, nem diferença na morfometria de vilosidades entre grupos. O grupo tratado com probiótico apresentou uma tendência a maiores densidades óticas no teste de ELISA para pesquisa de IgA anti-Salmonella na mucosa intestinal. A partir disso, conclui-se que o tratamento com probiótico e fagos líticos testados de acordo com o protocolo proposto no presente estudo não influenciam a infecção e excreção de Salmonella sp. em suínos em fase de crescimento e terminação. / Due to the limited use of antimicrobial, alternatives that follow the line of biological control, as lytic bacteriophages and probiotics, have been proposed for the control of Salmonella sp. animal production. The aim of this study was to evaluate the effect of oral administration of probiotic and lytic bacteriophages on the occurrence of infection and fecal excretion of Salmonella sp. in growing pigs. The experiment was conducted in two periods (blocks), lasting 49 days, in 43 days old pigs. These animals were divided into three treatments: T1 (control), T2 (bacteriophages) and T3 (probiotic), with 12 animals in each treatment and 10 control animals. After two weeks of accommodation, the pigs were inoculated with Salmonella Typhimurium (day 0 PI). The animals received a suspension of lytic bacteriophages (CNPSA1, CNPSA3 and CNPSA4) for eight consecutive days, four days before and four days after inoculation. The probiotic was given orally in the first two days of lodging (108 of Colony Forming Units-CFU / g), then the product (107 CFU / g) was supplied daily in the diet at a concentration of 1%. Were collected blood (-14, 0, 7, 14, 21, 28 and 35 PI) for the detection of IgG anti-Salmonella, and feces (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21, 28) for research and quantification of Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus and Coliforms. On 35PI the animals were euthanized and samples of organs were collected for Salmonella. We collected small intestinal segments for morphometric analysis and research of mucosal IgA. The results indicate that treatment of pigs in the growing phase was not able to prevent infection of animals, and seroconversion occurred on the day 7PI. There was no lower excretion of Salmonella in the treated groups. There was no effect on the population of Lactobacillus, Enterococcus and Coliforms, and no difference in the morphology of villi between groups. The group treated with probiotic showed a trend to higher optical densities in ELISA for the detection of IgA anti-Salmonella in the intestinal mucosa. From this, it is concluded that treatment with probiotic and lytic phages tested in accordance with the protocol proposed in this study did not influence the infection and excretion of Salmonella sp. in growing pigs.
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Avaliação de probiótico e bacteriófagos líticos para o controle de Salmonella sp. em supinos experimentalmente infectadosNogueira, Mariana Gomes January 2010 (has links)
Devido à limitação do uso de antimicrobianos, alternativas que seguem a linha de controle biológico, como os bacteriófagos líticos e probióticos, vêm sendo propostos para o controle de Salmonella sp. em animais de produção. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração oral de probiótico e bacteriófagos líticos sobre a ocorrência de infecção e excreção fecal de Salmonella sp. em suínos em fase de crescimento e terminação. O experimento foi realizado em dois períodos (blocos), com duração de 49 dias, em suínos com 43 dias de idade. Estes animais foram divididos em três tratamentos: T1 (controle), T2 (bacteriófagos) e T3 (probiótico), com 12 animais em cada tratamento e 10 animais controle. Após duas semanas de alojamento, os suínos foram inoculados com Salmonella Typhimurium (dia 0 P.I.). Os animais receberam uma suspensão de bacteriófagos líticos (CNPSA1, CNPSA3 e CNPSA4) por oito dias consecutivos, quatro dias antes e quatro dias após inoculação. O probiótico foi fornecido pela via oral nos dois primeiros dias de alojamento (108 Unidade Formadora de Colônia-UFC/ g), posteriormente o produto (107 UFC/g) foi fornecido diariamente na ração na concentração de 1%. Foram realizadas colheitas de sangue (-14, 0, 7, 14, 21, 28 e 35 PI) para pesquisa de IgG anti- Salmonella, e de fezes (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21 e 28) para pesquisa e quantificação de Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus e coliformes totais. No dia 35PI os animais foram eutanasiados e fragmentos de órgãos foram coletados para pesquisa de Salmonella. Foram coletados segmentos do intestino delgado para análise de morfometria e pesquisa de IgA de mucosa. Os resultados indicam que o tratamento de suínos na fase de crescimento não foi capaz de impedir a infecção dos animais, e a soroconversão ocorreu a partir do dia 7PI. Não foi observada menor excreção de Salmonella nos grupos tratados. Não houve efeito sobre a população de Lactobacillus, Enterococcus e coliformes totais, nem diferença na morfometria de vilosidades entre grupos. O grupo tratado com probiótico apresentou uma tendência a maiores densidades óticas no teste de ELISA para pesquisa de IgA anti-Salmonella na mucosa intestinal. A partir disso, conclui-se que o tratamento com probiótico e fagos líticos testados de acordo com o protocolo proposto no presente estudo não influenciam a infecção e excreção de Salmonella sp. em suínos em fase de crescimento e terminação. / Due to the limited use of antimicrobial, alternatives that follow the line of biological control, as lytic bacteriophages and probiotics, have been proposed for the control of Salmonella sp. animal production. The aim of this study was to evaluate the effect of oral administration of probiotic and lytic bacteriophages on the occurrence of infection and fecal excretion of Salmonella sp. in growing pigs. The experiment was conducted in two periods (blocks), lasting 49 days, in 43 days old pigs. These animals were divided into three treatments: T1 (control), T2 (bacteriophages) and T3 (probiotic), with 12 animals in each treatment and 10 control animals. After two weeks of accommodation, the pigs were inoculated with Salmonella Typhimurium (day 0 PI). The animals received a suspension of lytic bacteriophages (CNPSA1, CNPSA3 and CNPSA4) for eight consecutive days, four days before and four days after inoculation. The probiotic was given orally in the first two days of lodging (108 of Colony Forming Units-CFU / g), then the product (107 CFU / g) was supplied daily in the diet at a concentration of 1%. Were collected blood (-14, 0, 7, 14, 21, 28 and 35 PI) for the detection of IgG anti-Salmonella, and feces (-14, -7, 0, 3, 7, 14, 21, 28) for research and quantification of Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus and Coliforms. On 35PI the animals were euthanized and samples of organs were collected for Salmonella. We collected small intestinal segments for morphometric analysis and research of mucosal IgA. The results indicate that treatment of pigs in the growing phase was not able to prevent infection of animals, and seroconversion occurred on the day 7PI. There was no lower excretion of Salmonella in the treated groups. There was no effect on the population of Lactobacillus, Enterococcus and Coliforms, and no difference in the morphology of villi between groups. The group treated with probiotic showed a trend to higher optical densities in ELISA for the detection of IgA anti-Salmonella in the intestinal mucosa. From this, it is concluded that treatment with probiotic and lytic phages tested in accordance with the protocol proposed in this study did not influence the infection and excretion of Salmonella sp. in growing pigs.
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Estudo longitudinal da infecção por Salmonella sp. em um sistema integrado de produção de suínos.Silva, Luís Eduardo da January 2004 (has links)
O presente estudo teve por objetivo acompanhar um lote de suínos durante todas as fases zootécnicas de produção, de forma a demonstrar em que momento os animais eram expostos à contaminação por Salmonella sp. e quando observava-se a soroconversão nos mesmos. A unidade produtora de leitões foi escolhida por ter apresentado uma alta prevalência de leitoas de reposição positivas (32%), em avaliação bacteriológica prévia. As matrizes incluídas no estudo (n=19) foram selecionadas de acordo com a idade gestacional (100 dias), identificadas e amostradas para teste bacteriológico e sorológico. Aos 15 dias de lactação, 15 fêmeas deste grupo foram novamente amostradas, sendo 99 leitões, pertencentes às suas leitegadas, igualmente identificados e incluídos no estudo. Subseqüentemente, todos os leitões foram amostrados aos 38 dias e um subgrupo destes (n=56), aos 59 e 80 dias. Em todas as visitas foram coletados sangue e fezes dos animais, amostras de ração e suabe de arrasto das instalações. Ao abate, de 26 animais do grupo acompanhado no estudo foram coletados sangue, conteúdo intestinal e linfonodos mesentéricos. As baias de espera do frigorífico e o caminhão que transportou o lote de animais para o abate foram amostrados por suabes de arrasto. O isolamento de Salmonella sp. foi confirmado por caracterização bioquímica e sorotipificação. No teste de ELISA foi utilizado antígeno LPS de Salmonella Typhimurium e o ponto de corte foi definido por média de densidade ótica de uma população negativa somado a quatro desvios padrões. Entre as fêmeas da gestação, 94,7% (18/19) foram soropositivas, mas nenhuma apresentou isolamento de Salmonella. Por outro lado, aos 15 dias de lactação, a soroprevalência do grupo reduziu para 66,7% (10/15), mas duas fêmeas estavam excretando Salmonella nas fezes. Os leitões foram negativos no isolamento e na sorologia durante todo período de maternidade e creche. Entretanto, já na primeira coleta realizada na terminação (80 dias de idade), 28,6% (16/56) foram soropositivos e 75% (42/56) estavam excretando Salmonella. Ao abate, houve um aumento na soroprevalência 20/26 (76,9%), e 5/26 (19,2%) animais tiveram isolamento de Salmonella no conteúdo intestinal e/ou linfonodos mesentéricos. A avaliação da contaminação ambiental realizado na granja demonstrou que, apenas após o aparecimento de animais excretores no lote, foram encontrados suabes de arrasto positivos nas instalações. Ao lado disto, foi possível isolar Salmonella de 2/26 amostras de ração, sendo todas as amostras positivas provenientes do período final da terminação. As baias de espera do frigorífico apresentaram 25% dos suabes de arrasto positivos antes da entrada do lote. Em todos os animais positivos durante a terminação foi encontrado o sorovar Typhimurium; dois animais tiveram isolamento concomitante do sorovar Senftenberg. Ao abate, os sorovares Typhimurium e Senftenberg foram encontrados em três e dois animais, respectivamente. Todas as amostras de Salmonella isoladas de ração pertenciam ao sorovar Senftenberg, enquanto que as amostras de baias de espera eram S. Panama. A presença do sorovar Senftenberg em animais durante a terminação e ao abate demonstra a possível relação com a contaminação encontrada nas amostras de ração.
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Comparação de dois métodos de quantificação de Salmonella sp. em embutidos suínos.Borowsky, Luciane January 2005 (has links)
A segurança dos alimentos é uma preocupação mundial e um fator importante na comercialização de produtos de origem animal. A presença de Salmonella sp. em suínos ao abate e em produtos do tipo frescal podem representar um risco para a saúde do consumidor. A análise de risco prevê a avaliação de diferentes fatores, entre eles a quantificação do microrganismo presente no alimento. A partir disso, a contribuição do presente estudo foi buscar estabelecer um método confiável de quantificação de Salmonella sp. em produtos suínos, uma vez que uma das etapas da análise de risco prevê a quantificação do perigo. No caso de Salmonella sp., a técnica da estimativa do Número Mais Provável (NMP) tem sido adotada. Em uma primeira fase desse trabalho, amostras foram quantificadas, individualmente, com três amostras de Salmonella Typhimurium (ATTCC15290 e 2 amostras de suínos) em três diferentes contagens, 101, 102 e 103 UFC. Para o método A, as amostras quantificadas foram adicionadas a 225 mL de água peptonada tamponada, sendo, posteriormente, fracionadas em 3 alíquotas de 50mL, 5mL e 0,5mL. Para o método B, a amostra fortificada foi diluída em água peptonada tamponada até 10-3, sempre em triplicata. Na segunda fase, foram testadas amostras naturalmente contaminadas, utilizando as mesmas metodologias usadas na primeira fase. Todas as alíquotas de ambos métodos foram incubadas a 370C por 18 horas. Após, cada alíquota foi semeada em caldo Rappaport-Vassiliadis (RV) e incubadas à 420C por 24 h e após, em àgar Xylose-Lysine-Tergitol 4 (XLT4) à 370C por 48 h. Colônias suspeitas foram confirmadas por testes bioquímicos. O número de placas positivas para Salmonella sp. foi utilizado para o cálculo do Número Mais Provável, utilizando tabela apropriada. Na segunda fase, os dois métodos foram avaliados em 20 amostras naturalmente contaminadas, mantidas congeladas por até 115 dias. Em 45 ensaios conduzidos, para cada método, em amostras de lingüiça de carne suína contaminadas artificialmente, 38 do método A e 41 do método B resultaram em NMP (95% de intervalo de confiança) concordante com número de UFC de Salmonella inoculado. A maioria das amostras naturalmente contaminada de massa de embutido apresentaram contagens <10NMP/g. A variabilidade encontrada entre os valores de NMP médio foi bastante elevada, tanto entre os métodos como entre repetições de um mesmo método. Isto reflete uma das limitações do método de NMP para estimar a contagem de microrganismos e deverá ser considerada quando o método for aplicado em alimentos naturalmente contaminados e quando aplicado em um estudo de análise de risco. Uma vez que o método B foi o que demonstrou valores médios de NMP mais próximos das quantidades inoculadas, sugere-se que este seja adotado em estudos futuros de quantificação de Salmonella sp. em produtos de origem suína.
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