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Aplicação de microscopia de força atômica na análise do tempo desde a deposição de hemácias em manchas de sangue : uma contribuição às ciências forenses

Cavalcanti, Douglas Rodrigues 03 March 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2017. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-04-07T17:08:45Z No. of bitstreams: 1 2017_DouglasRodriguesCavalcanti.pdf: 13176012 bytes, checksum: b31b14a830f51259879b50ff467a194b (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-04-20T12:44:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_DouglasRodriguesCavalcanti.pdf: 13176012 bytes, checksum: b31b14a830f51259879b50ff467a194b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-20T12:44:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_DouglasRodriguesCavalcanti.pdf: 13176012 bytes, checksum: b31b14a830f51259879b50ff467a194b (MD5) / Manchas de sangue estão entre os vestígios mais recorrentes em cenas de crime. Estabelecer o tempo desde a deposição (time since deposition - TSD) dessas manchas, pode constituir o primeiro indício dos investigadores forenses acerca do momento em que um crime foi cometido. O sangue inicia o processo de envelhecimento a partir do momento em que sai do corpo humano e entra em contato com o ambiente físico. As propriedades biofísicas (morfologia e elasticidade) das hemácias (RBCs) sofrem uma série de mudanças, muitas das quais podem ser avaliadas utilizando técnicas microscópicas como a microscopia de força atômica (MFA). O objetivo geral do estudo foi avaliar por MFA e espectroscopia de força o processo de envelhecimento associado às possíveis modificações das características das RBCs em manchas de sangue, determinando se há algum padrão de transformação temporal. Os resultados qualitativos demonstraram que não há diferença morfológica na estrutura da RBC, quando do exame de imagens de MFA pela simples comparação visual, durante o período de 28 dias de análise aplicado no estudo. Entretanto, os resultados quantitativos, pelas análises micro- e nanométricas de MFA, demonstraram a tendência de aumento linear das medidas médias, tais como área da superfície e volume dessas células durante esse período, quando a mancha de sangue foi depositada sobre superfície de vidro e mantida sob condição ambiental não controlada. Observou-se também que a variação da temperatura e da umidade pode alterar a avaliação dessas medidas médias durante a estimativa do TSD. O tipo de superfície para deposição de mancha de sangue deve ser levado em consideração durante análises para o cálculo temporal, e os resultados obtidos sobre os suportes de vidro, metal e cerâmica evidenciaram diferenças significativas nas medidas das RBCs. A superfície de metal apresentou valores maiores, quando comparado com as outras duas superfícies. Para avaliar a possibilidade de aplicação dos dados obtidos, pelo padrão temporal das RBCs foram utilizados mapas auto-organizáveis de Kohonen (Self-Organizing Maps – SOM). Apesar das observações aqui obtidas, a utilização da MFA, durante levantamentos periciais em locais de crime, ainda requer a ampliação e o desenvolvimento de estudos científicos para a determinação de um método capaz de avaliar, com precisão, o TSD de manchas de sangue. / Bloodstains are among the most recurring traces in crime scenes. Establishing the time since deposition (TSD) of these spots may be the first clue of forensic investigators as to when a crime was committed. The blood starts the aging process from the moment it leaves the human body and comes into contact with the physical environment. The biophysical properties (morphology and elasticity) of red blood cells (RBCs) undergo a series of changes, many of which can be evaluated using microscopic techniques such as atomic force microscopy (AFM). The overall aim of the study was to evaluate by AFM and force spectroscopy the aging process associated with possible modifications of the characteristics of RBCs in blood spots, determining if there is any pattern of temporal transformation. The qualitative results demonstrated that there is no morphological difference in the structure of the RBC when examining AFM images by simple visual comparison during the 28 day period of analysis applied in the study. However, the quantitative results, by micro- and nanometric analyses of AFM, demonstrated the linear increase trend of the average measurements, such as surface area and volume of these cells during that period, when the blood stain was deposited on glass surface and maintained under uncontrolled environmental conditions. It was also observed that the variation of temperature and humidity may alter the evaluation of these mean measurements during the estimation of TSD. The type of surface for blood stain deposition should be taken into account during analyzes for the temporal calculation, and the results obtained on glass, metal and ceramic supports showed significant differences in RBC measurements. The metal surface presented higher values when compared to the other two surfaces. Kohonen's self-organizing maps (SOM) were used to assess the possibility of applying the data obtained by the temporal pattern of RBCs. In spite of the observations obtained, the use of AFM in crime scenes still requires the expansion and development of more scientific studies to determine the method capable of evaluating the TSD in blood spots.
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Estudos sobre alterações em hemacias e propriedades funcionais e hemoglobina humana, induzidas por papaverina e dipiradamol

Meirelles, Nilce Correa, 1943- 15 July 2018 (has links)
Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T01:08:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Meirelles_NilceCorrea_LD.pdf: 2406445 bytes, checksum: 3e0b6c9144a3fef6c92c9e2215622ff3 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Não informado / Abstract: A review is presented about: 1) Hemoglobin structure and function. 2) Erythrocyte membrane composition. a) The effects of vasodilators drugs dipyridamole and papaverine on the equilibrium dissociation curves of human hemoglobins treated by the drugs have been studied. b) The changes in the apoprotein in the presence of the drugs were investigated. c) The possibility that the drugs promote hemoglobin oxidation or an interaction with the metahaemoglobin were examined. d) Some functional and morphological properties of the human erythrocytes exposed to different concentrations of the drugs were studied, e) Attempts were made to verify the biophysical state of the ghosts from erytrocytes treated by papaverine and dipyridamole, by using spin labels methods / Tese (livre-docencia) - Univer / Livre-Docente em Ciencias Biologicas
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Determinação da incidência de Rh D fraco e Rh D parcial na população da área de abrangência do hemocentro de Botucatu /

Sabino, Janine Schincariol. January 2008 (has links)
Orientador: Valéria Nogueira Dias Paes Secco / Banca: Ana Maria Bormio de Rosis / Banca: Wilson Baliotti Júnior / Resumo: O Sistema Rh é constituído por 48 antígenos eritrocitários, sendo o antígeno Rh D, considerado o mais imunogênico seguido dos antígenos c, E, C, e. A probabilidade de imunização por Rh D é muito mais alta quando comparada com outros antígenos de grupos sanguíneos humano que ocasionalmente produzem anticorpos irregulares, tornando esse sistema de grande importância clínica. O antígeno Rh D é composto por 37 epítopos, formando um mosaico. Qualquer mudança de aminoácidos em uma parte da proteína pode afetar a expressão da seqüência de epítopos ou resultar em novos epítopos. Por isso, os antígenos do grupo sanguíneo Rh D podem apresentar variações de sua expressão na membrana eritrocitária. As hemácias com fenótipo Rh D fraco diferem quantitativamente das células Rh D positivas normais, por serem definidas como tendo todos os epítopos Rh D presentes, porém com uma redução dos níveis de antígeno Rh D. As hemácias Rh D parcial diferem qualitativamente das células Rh D positivas normais, pois carecem de um ou mais epítopos que formam o antígeno Rh D. Em geral, os fenótipos Rh D parcial se expressam devido à presença de genes híbridos, os quais ocorrem predominantemente em indivíduos de origem africana. O número de amostras classificadas como Rh D fraco e Rh D parcial depende das características do reagente utilizado para a fenotipagem Rh D. Anteriormente os reagentes utilizados eram os policlonais, porém atualmente, com a descoberta do anticorpos monoclonais e a dificuldade de obtenção dos policlonais, tem-se utilizado apenas os reagentes monoclonais. Desde então, diferenças entre a reatividade de vários reagentes, especialmente na detecção de Rh D fraco e Rh D parcial, têm criado uma discussão sobre o teste adequado para doadores de sangue, pacientes e receptores. / Abstract: The Rh System is constituted by 48 red cells antigens, where the Rh D antigen is considered the most immunogenic followed by c, E, C, e antigens. The probability of immunization by Rh D is higher when is compared with other human sanguineous groups antigens, that occasionally produce irregular antibodies, what makes this system very important clinically. The antigen Rh D is composed by 37 epitopes, which forms a mosaic. Any amino acid change in a protein part can affect the expression of the epitopes sequence or results in new epitopes. Therefore, the sanguineous group Rh D antigens can present variations in the red cells membrane expression. The red cells with weak D phenotype are quantitatively different from the Rh D normal positive cells, because of the presence of all epitopes in their definition, but with a reduction of Rh D antigen levels. The red cells D partial are qualitatively different from the Rh D normal positive cells, because they need one or more epitopes that form Rh D antigen. In general, the partial D phenotype occurs due to the presence of hybrid genes, which occur predominantly in African individuals. The number of classified samples as weak D and partial D depends on the reagent used for the Rh D phenotyping characteristics. Previously the used reagents were polyclonal, but currently, with the discovery of the monoclonal antibodies and the difficulty of attainment of the polyclonal, it has been used only monoclonal reagents. Since then, differences between the reactivity of many reagents, especially in the detention of weak D and partial D, have been created a discussion about the apropriated tests for blood donators, patients and receivers. / Mestre
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Análise do perfil bioquímico-hematológico em populações de tuco-tucos (ctenomys lami) com e sem impacto antrópico, no Rio Grande do Sul, Brasil.

Stein, Gisele Guiomara January 2009 (has links)
As análises hematológicas e bioquímicas são de extrema, auxiliando no diagnóstico de doenças e estados nutricionais dos animais. O perfil hematológico e valores bioquímicos sanguíneos foram determinados em três populações de vida livre de Ctenomys lami (tuco-tuco), de três regiões distintas: Região A (Distrito de Itapuã), Região B (Município de Viamão) e Região C (Município de Viamão, Unidade de Conservação Refúgio de Vida Silvestre Banhado dos Pachecos, distrito de Águas Claras), sendo as áreas A e B, impactadas pela bovinocultura, e área C, sem impacto antrópico, ambas no sul do Brasil. Amostras de 62 animais foram coletadas ao total para as análises hematológicas. Os valores de hematócrito (Ht), hemoglobina (Hb) e eritrócitos apresentaram diferenças significativas entre machos (n=23) e fêmeas (n=39). O Ht e a Hb encontrados na espécie foram mais baixos em comparação com outras espécies de roedores subterrâneos, podendo estes valores estarem relacionados ao habitat de forrageio ou a características do solo. Diferenças significativas também foram detectadas na hemoglobina, CHCM e linfócitos das amostras coletadas de animais das regiões A e B em relação às da C. O valor da média dos hematócritos das amostras dos animais das regiões A e B foram mais elevados, porém diferenças significativas foram detectadas entre as amostras dos animais das regiões A e C. Algumas dessas alterações sugerem a relação dos valores encontrados com a compactação do solo e estresse dos animais em relação a áreas impactadas. Diferenças significativas no VCM foram encontradas nas amostras coletadas dos animais da região A em relação a C, e também nas plaquetas de animais da região A em relação a B. Não foram observados Corpúsculo de Kurloff nos animais analisados. Para análises bioquímicas foram coletados amostras de 45 animais, sendo 15 animais por região, agrupados em três pools. Foram realizadas determinações bioquímicas para as enzimas AST, ALT, GGT e enzima FA. Além desses, também foram avaliados creatinina, potássio, colesterol, triglicerídeos, uréia, albumina, proteínas totais, cálcio e fósforo. Diferenças significativas foram encontradas na atividade enzimática da fosfatase alcalina entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a B (P<0,05). Também houve diferença significativa nos valores de colesterol, sendo que o pool de amostras dos animais da região B apresentou significância estatística em relação aos pools das regiões A e C (P<0,05). Dentre os minerais analisados, apenas o potássio teve alteração significativa, sendo esta encontrada entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a C (P<0,05). Os valores hematológicos encontrados nesses espécimes de Ctenomys lami fornecem informações importantes sobre a espécie. O uso de pools demonstrou-se eficiente na avaliação bioquímica das populações, evidenciando uma diferença em alguns metabólitos. Os resultados encontrados sugerem possíveis alterações na dieta das populações e também diferença de habitat encontrado, devido ao impacto causado pelo homem. Desta maneira, este estudo poderá fundamentar pesquisas futuras, elucidando melhor as relações existentes entre a fisiologia dos animais e variações no habitat de vida destes. / Hematological profile and biochemical are very important to diagnosis of sickness and animal nutrition of animals in general. The hematological and biochemichal profile were determined in three populations of Ctenomys lami that inhabits three different areas nominated as A and B, affected by cattle production, and C, without human impact, all of them in south Brazil, under the same geologic formation. Sample of 62 individuals were collected. The packed cell volume (PCV), hemoglobin (Hb) and red blood cell (RBC) count presents statistic significant differences between males and females. PCV and Hb values founded were lower in comparison with other subterranean rodents, which could be related to the food searching behavior or soil characteristic of the species. Significant differences were found to for Hb, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and lymphocytes between A and C areas. The PCV values were more elevated in areas A and B, with significance only between A and C. Some of these alterations may suggest a modification on stress levels of the animals inhabiting areas A and B with anthropic alterations, or maybe just an inherited characteristic. Significant statistic differences were found either in mean corpuscular volume (MCV) between A and C areas, and plateletes between A and B areas. No Kurloff cells (Kurloff bodies) were observed in the blood smear from analyzed individuals. Biochemical parameters were determined from 45 animals, fifteen from each area (A, B and C), grouped in serum pools of five animals (one male and four females) for the analyses. The biochemical parameters analyzed were aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP),creatinine, potassium, cholesterol, triglicerides, urea, albumin, total proteins, calcium and phosphorus. Significant statistic difference was found in ALP activity between areas A and B. Also significant differences were found in cholesterol levels, area B presented higher values when compared to the others, and in potassium levels between areas A and C. The use of serum pools demonstrated to be useful in the biochemical population analyzes, showing differences for some metabolites. The hematological values founded for Ctenomys lami are an important information for this species, which can be used for future research and management. These results suggest possible alterations on the diet and physiology of the populations that inhabits the areas with the presence of exotic grasslands introduced by man. This data will be important in future research, as an additional information about animal health and conditions, aggregating information on the physiological differences, adaptation and habitat variations that are inherent to Ctenomys lami.
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Análise do perfil bioquímico-hematológico em populações de tuco-tucos (ctenomys lami) com e sem impacto antrópico, no Rio Grande do Sul, Brasil.

Stein, Gisele Guiomara January 2009 (has links)
As análises hematológicas e bioquímicas são de extrema, auxiliando no diagnóstico de doenças e estados nutricionais dos animais. O perfil hematológico e valores bioquímicos sanguíneos foram determinados em três populações de vida livre de Ctenomys lami (tuco-tuco), de três regiões distintas: Região A (Distrito de Itapuã), Região B (Município de Viamão) e Região C (Município de Viamão, Unidade de Conservação Refúgio de Vida Silvestre Banhado dos Pachecos, distrito de Águas Claras), sendo as áreas A e B, impactadas pela bovinocultura, e área C, sem impacto antrópico, ambas no sul do Brasil. Amostras de 62 animais foram coletadas ao total para as análises hematológicas. Os valores de hematócrito (Ht), hemoglobina (Hb) e eritrócitos apresentaram diferenças significativas entre machos (n=23) e fêmeas (n=39). O Ht e a Hb encontrados na espécie foram mais baixos em comparação com outras espécies de roedores subterrâneos, podendo estes valores estarem relacionados ao habitat de forrageio ou a características do solo. Diferenças significativas também foram detectadas na hemoglobina, CHCM e linfócitos das amostras coletadas de animais das regiões A e B em relação às da C. O valor da média dos hematócritos das amostras dos animais das regiões A e B foram mais elevados, porém diferenças significativas foram detectadas entre as amostras dos animais das regiões A e C. Algumas dessas alterações sugerem a relação dos valores encontrados com a compactação do solo e estresse dos animais em relação a áreas impactadas. Diferenças significativas no VCM foram encontradas nas amostras coletadas dos animais da região A em relação a C, e também nas plaquetas de animais da região A em relação a B. Não foram observados Corpúsculo de Kurloff nos animais analisados. Para análises bioquímicas foram coletados amostras de 45 animais, sendo 15 animais por região, agrupados em três pools. Foram realizadas determinações bioquímicas para as enzimas AST, ALT, GGT e enzima FA. Além desses, também foram avaliados creatinina, potássio, colesterol, triglicerídeos, uréia, albumina, proteínas totais, cálcio e fósforo. Diferenças significativas foram encontradas na atividade enzimática da fosfatase alcalina entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a B (P<0,05). Também houve diferença significativa nos valores de colesterol, sendo que o pool de amostras dos animais da região B apresentou significância estatística em relação aos pools das regiões A e C (P<0,05). Dentre os minerais analisados, apenas o potássio teve alteração significativa, sendo esta encontrada entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a C (P<0,05). Os valores hematológicos encontrados nesses espécimes de Ctenomys lami fornecem informações importantes sobre a espécie. O uso de pools demonstrou-se eficiente na avaliação bioquímica das populações, evidenciando uma diferença em alguns metabólitos. Os resultados encontrados sugerem possíveis alterações na dieta das populações e também diferença de habitat encontrado, devido ao impacto causado pelo homem. Desta maneira, este estudo poderá fundamentar pesquisas futuras, elucidando melhor as relações existentes entre a fisiologia dos animais e variações no habitat de vida destes. / Hematological profile and biochemical are very important to diagnosis of sickness and animal nutrition of animals in general. The hematological and biochemichal profile were determined in three populations of Ctenomys lami that inhabits three different areas nominated as A and B, affected by cattle production, and C, without human impact, all of them in south Brazil, under the same geologic formation. Sample of 62 individuals were collected. The packed cell volume (PCV), hemoglobin (Hb) and red blood cell (RBC) count presents statistic significant differences between males and females. PCV and Hb values founded were lower in comparison with other subterranean rodents, which could be related to the food searching behavior or soil characteristic of the species. Significant differences were found to for Hb, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and lymphocytes between A and C areas. The PCV values were more elevated in areas A and B, with significance only between A and C. Some of these alterations may suggest a modification on stress levels of the animals inhabiting areas A and B with anthropic alterations, or maybe just an inherited characteristic. Significant statistic differences were found either in mean corpuscular volume (MCV) between A and C areas, and plateletes between A and B areas. No Kurloff cells (Kurloff bodies) were observed in the blood smear from analyzed individuals. Biochemical parameters were determined from 45 animals, fifteen from each area (A, B and C), grouped in serum pools of five animals (one male and four females) for the analyses. The biochemical parameters analyzed were aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP),creatinine, potassium, cholesterol, triglicerides, urea, albumin, total proteins, calcium and phosphorus. Significant statistic difference was found in ALP activity between areas A and B. Also significant differences were found in cholesterol levels, area B presented higher values when compared to the others, and in potassium levels between areas A and C. The use of serum pools demonstrated to be useful in the biochemical population analyzes, showing differences for some metabolites. The hematological values founded for Ctenomys lami are an important information for this species, which can be used for future research and management. These results suggest possible alterations on the diet and physiology of the populations that inhabits the areas with the presence of exotic grasslands introduced by man. This data will be important in future research, as an additional information about animal health and conditions, aggregating information on the physiological differences, adaptation and habitat variations that are inherent to Ctenomys lami.
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Monitoramento da qualidade de hemocomponentes produzidos no Hemocecentro da FMB - UNESP

Santiago, Karina Basso [UNESP] 25 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:10:39Z : No. of bitstreams: 1 santiago_kb_me_botfm.pdf: 713656 bytes, checksum: 6c11a051494cb69b7ad351c1bf845a90 (MD5) / Ministério da Saúde / O sangue e seus componentes devem ser coletados, processados e transfundidos sob extremo rigor. Os itens verificados pelo controle de qualidade devem apresentar um percentual de conformidade superior a 75%, e os estéreis deverão apresentar conformidade superior a 99,5%. O objetivo do presente trabalho foi controlar a qualidade da triagem hematológica e dos hemocomponentes: concentrado de hemácias (CH), plasma fresco congelado (PFC), crioprecipitado (CRIO) e concentrado de plaquetas (CP) produzidos no Hemocentro do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade Estadual Paulista da cidade de Botucatu. Este estudo foi dividido em duas etapas, na primeira foram realizados os controles da qualidade da triagem hematológica e analisadas 747 amostras de sangue obtidas de doadores voluntários de sangue. A metodologia utilizada nesta etapa envolveu a realização de hematócrito de ponta de dedo pelo método clássico de centrifugação utilizando equipamento Hemato Stat II e a determinação de hematócrito usando a técnica de referência automatizada (equipamento Horiba ABX). No período da segunda etapa, foram controladas 643 amostras, distribuídas em CH (282), PFC (150) Crio (20) CP standard (181) e CP aférese (10).Para o controle de qualidade dos CHs foram analisados os aspectos, volume e hematimetria. Para os produtos plasmáticos foram os aspectos, volume e fatores da coagulação (TP, TTPA, FV, FVIII e fibrinogênio). E para o controle dos CPs foram os aspectos, volume, pH, contagem do numero de plaquetas e cultura microbiológica. No controle de qualidade da triagem hematológica o resultado obtido para comparação entre as duas técnicas apresentou uma discrepância de 48,1% entre elas. Para o CH, os parâmetros aspectos e hematimetria apresentaram-se satisfatórios em relação ao preconizado pela RDC 153 (> 75% de conformidade) e para o parâmetro volume... / Quality is to conform to what is specified, to conform to the rules. The blood and their components should be collected, processed and transfused under the most rigorous conditions. The items checked by quality control must present a compliance rate of over 75%, and the sterile line must be more than 99.5%. The objective of the present work was to control the quality of the hematological screening and of the blood components: red blood cells concentrated (RBCC), fresh frozen plasma (FFP), cryoprecipitate (Cryo) and platelets concentrates (PC) produced in the Hemocenter of the Hospital of Clinics of the Faculty of Medicine, Universidade Estadual Paulista, in Botucatu. This study was divided in two stages. In the first stage, the quality controls of hematological screening were applied, and blood samples from 747 voluntary donors were analysed. The methodology used in this stage involved the realization of finger tip hematocrit by the classic method of centrifugation, using Hemato Stat II equipment, and of hematocrit determination, using the technique of automated reference (equipment Horiba ABX). During the second stage, 643 samples were controlled and distributed in: RBCC (282), FFP (150), Cryo (20), PC (181) and apheresis PC (10). For quality control of RBCC, the aspects, volume and hemocytometry were analyzed. For the plasmatic products, the aspects, volume and factors of coagulation (PT, APTT, FV, FVIII and fibrinogen) were analysed.And for the control of PCs they were, the aspects, volume, pH, counting of the number of platelets and microbiological culture. In quality control of the hematological screening, the result obtained by comparison among the two techniques, presented a discrepancy of 48,1% among them. For RBCC, the parameters aspects and hemocytometry were satisfactory in relation to the extolled by RDC 153 (> 75% of conformity) and for the parameter volume... (Complete abstract click electronic access below)
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Análise do perfil bioquímico-hematológico em populações de tuco-tucos (ctenomys lami) com e sem impacto antrópico, no Rio Grande do Sul, Brasil.

Stein, Gisele Guiomara January 2009 (has links)
As análises hematológicas e bioquímicas são de extrema, auxiliando no diagnóstico de doenças e estados nutricionais dos animais. O perfil hematológico e valores bioquímicos sanguíneos foram determinados em três populações de vida livre de Ctenomys lami (tuco-tuco), de três regiões distintas: Região A (Distrito de Itapuã), Região B (Município de Viamão) e Região C (Município de Viamão, Unidade de Conservação Refúgio de Vida Silvestre Banhado dos Pachecos, distrito de Águas Claras), sendo as áreas A e B, impactadas pela bovinocultura, e área C, sem impacto antrópico, ambas no sul do Brasil. Amostras de 62 animais foram coletadas ao total para as análises hematológicas. Os valores de hematócrito (Ht), hemoglobina (Hb) e eritrócitos apresentaram diferenças significativas entre machos (n=23) e fêmeas (n=39). O Ht e a Hb encontrados na espécie foram mais baixos em comparação com outras espécies de roedores subterrâneos, podendo estes valores estarem relacionados ao habitat de forrageio ou a características do solo. Diferenças significativas também foram detectadas na hemoglobina, CHCM e linfócitos das amostras coletadas de animais das regiões A e B em relação às da C. O valor da média dos hematócritos das amostras dos animais das regiões A e B foram mais elevados, porém diferenças significativas foram detectadas entre as amostras dos animais das regiões A e C. Algumas dessas alterações sugerem a relação dos valores encontrados com a compactação do solo e estresse dos animais em relação a áreas impactadas. Diferenças significativas no VCM foram encontradas nas amostras coletadas dos animais da região A em relação a C, e também nas plaquetas de animais da região A em relação a B. Não foram observados Corpúsculo de Kurloff nos animais analisados. Para análises bioquímicas foram coletados amostras de 45 animais, sendo 15 animais por região, agrupados em três pools. Foram realizadas determinações bioquímicas para as enzimas AST, ALT, GGT e enzima FA. Além desses, também foram avaliados creatinina, potássio, colesterol, triglicerídeos, uréia, albumina, proteínas totais, cálcio e fósforo. Diferenças significativas foram encontradas na atividade enzimática da fosfatase alcalina entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a B (P<0,05). Também houve diferença significativa nos valores de colesterol, sendo que o pool de amostras dos animais da região B apresentou significância estatística em relação aos pools das regiões A e C (P<0,05). Dentre os minerais analisados, apenas o potássio teve alteração significativa, sendo esta encontrada entre o pool de amostras dos animais da região A em relação a C (P<0,05). Os valores hematológicos encontrados nesses espécimes de Ctenomys lami fornecem informações importantes sobre a espécie. O uso de pools demonstrou-se eficiente na avaliação bioquímica das populações, evidenciando uma diferença em alguns metabólitos. Os resultados encontrados sugerem possíveis alterações na dieta das populações e também diferença de habitat encontrado, devido ao impacto causado pelo homem. Desta maneira, este estudo poderá fundamentar pesquisas futuras, elucidando melhor as relações existentes entre a fisiologia dos animais e variações no habitat de vida destes. / Hematological profile and biochemical are very important to diagnosis of sickness and animal nutrition of animals in general. The hematological and biochemichal profile were determined in three populations of Ctenomys lami that inhabits three different areas nominated as A and B, affected by cattle production, and C, without human impact, all of them in south Brazil, under the same geologic formation. Sample of 62 individuals were collected. The packed cell volume (PCV), hemoglobin (Hb) and red blood cell (RBC) count presents statistic significant differences between males and females. PCV and Hb values founded were lower in comparison with other subterranean rodents, which could be related to the food searching behavior or soil characteristic of the species. Significant differences were found to for Hb, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and lymphocytes between A and C areas. The PCV values were more elevated in areas A and B, with significance only between A and C. Some of these alterations may suggest a modification on stress levels of the animals inhabiting areas A and B with anthropic alterations, or maybe just an inherited characteristic. Significant statistic differences were found either in mean corpuscular volume (MCV) between A and C areas, and plateletes between A and B areas. No Kurloff cells (Kurloff bodies) were observed in the blood smear from analyzed individuals. Biochemical parameters were determined from 45 animals, fifteen from each area (A, B and C), grouped in serum pools of five animals (one male and four females) for the analyses. The biochemical parameters analyzed were aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP),creatinine, potassium, cholesterol, triglicerides, urea, albumin, total proteins, calcium and phosphorus. Significant statistic difference was found in ALP activity between areas A and B. Also significant differences were found in cholesterol levels, area B presented higher values when compared to the others, and in potassium levels between areas A and C. The use of serum pools demonstrated to be useful in the biochemical population analyzes, showing differences for some metabolites. The hematological values founded for Ctenomys lami are an important information for this species, which can be used for future research and management. These results suggest possible alterations on the diet and physiology of the populations that inhabits the areas with the presence of exotic grasslands introduced by man. This data will be important in future research, as an additional information about animal health and conditions, aggregating information on the physiological differences, adaptation and habitat variations that are inherent to Ctenomys lami.
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Estudo da preservação de hemacias em diferentes bolsas de coleta com di-octil-ftalato e anticoagulante citrato-fosfato-dexotrose-adenina

Hashimoto, Maria Cecilia Teori 16 December 1997 (has links)
Orientador: Sara T. O. Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T08:16:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hashimoto_MariaCeciliaTeori_M.pdf: 2751983 bytes, checksum: 4b4f593dd6e814b5aced3080bb2db244 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A proposta deste estudo foi avaliar o comportamento de diferentes bolsas de coleta de sangue, utilizando parâmetros bioquímicos que interprete, in vitro, o metabolismo dos eritrócitos durante a conservação. Para este trabalho utilizamos bolsas de Poli (cloreto) de vinila (PVC) com di-octil-ftalat (DOP), tendo Citrato-fosfato-dextrose-adenina (CPDA) como anticoagulante. Utilizamos concentrados de hemácias coletados em seis diferentes bolsas: Terumo@ (TE), Baxter@ (BA), Grifols@ (GR), Hemobag@ (HE), Asem@ (AS) e Alex istar@ (AL). Estes concentrados foram obtidos por fracionamento de sangue total e foram armazenados a 4°C, por 35 dias. Os parâmetros bioquímicos avaliados foram: sódio e potássio plasmático, dosados por fotometria de chama; pressão de CO2, O2 e pH, determinada por gasômetro, a 37>C, em aparelho Stat Profile 5 Analyzer (Nova Biomedical, Waltham, MA); adenosina trifosfato (A TP), 2,3 difosfoglicerato (2,3 DPG) e hemoglobina plasmática, utilizando-se <1(it" comercial da Sigma Company, S1. Louis, MO; distribuição do tamanho dos eritrócitos (RDW), volume corpuscular médio (VCM) ,concentração de hemoglobínica corpuscular média (CHCM), hematócrito (HfOlÓ) e hemoglobina total foram obtidos pelo Cell-Dyn 1.600, Abbot Canada, EUA. As análises foram realizadas no 1°, 15°,21° e 35° dia. de armazenamento. Os resultados foram avaliados pelas médias e desvios padrões dos parâmetros analisados de cinco bolsas de cada marca. As bolsas HE apresentaram menor valor de hematócrito do que o das AL e GR. As bolsas GR e BA apresentaram, no 21° dia, níveis de hemoglobina plasmática menores do que os observados nas AL; TE, HE e AS. Quanto aos valores de A TP, observamos que as bolsas HE apresentaram níveis maiores (p=O.0020) do que o obtido nas AL e AS. Com relação ao 2,3 DPG, no 1° dia de armazenamento, as bolsas. AL apresentaram níveis superiores aos observados nas TE e HE. As bolsas HE também apresentaram níveis de 2,3 DPG inferiores aos das BA, GR e AS. No 15° dia, as GR e AS apresentaram valores superiores de 2,3 DPG, se comparados aos das bolsas TE, BA, HE. As AL apresentaram níveis maiores de 2,3 DPG, quando comparadas às bolsas BA e HE.Avaliando os valores de pH observamos que, no 15° dia, as bolsas AS e GR apresentaram um pH maior em relação às HE e BA. As AS ainda apresentaram valores superiores aos das TE. No 35° dia, as bolsas GR, AL e AS também apresentaram pH maior em relação às HE, BA e TE. As análises estatísticas de pC02 e p02, de distribuição do tamanho dos eritrócitos (RDW) e de volume corpuscular médio (VCM) não demonstraram diferenças significativas. No 35° dia de armazenamento, as bolsas HE, BA e TE tiveram valores de concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) maiores do que o das AL, GR e AS. As BA apresentaram no primeiro dia de armazenamento valores de sódio maiores do que o das AS, GR, TE e AL, entretanto, durante a preservação destas bolsas (BA) observou-se maior queda dos níveis de sódio plasmático, atingindo valores significativamente menores no 35° dia. Em relação ao potássio não observamos diferenças significativas. A análise geral de nossos resultados evidencia a presença de dois grupos de bolsas de sangue com comportamentos semelhantes entre si. No primeiro grupo (AL, AS, GR), os valores de pH; 2,3DPG; hematócrito e sódio plasmático tendem a ser maiores do que no segundo grupo (HE, BA e TE). Por outro lado, quanto aos valores de VCM, A TP e o CHCM (35° dia) ocorre o inverso, isto é, tendem a ser maiores no segundo grupo. Isto sugere que no 1° grupo, há menor entumescimento das hemácias (menor VCM e maior sódio plasmático) e menor formação de esferócitos no 35° dia ( menor CHCM). Estas diferenças podem decorrer de variadas composições do anticoagulante ou da forma de processamento do DOP, que modificariam o metabolismo das hemácias. Todos os valores obtidos estão muito próximos aos mencionados na literatura / Abstract: The aim of this study was to evaluate the behavior of different blood bags using biochemical parameters capable of interpreting, in vitro, the erythrocyte metabolism during conservation. The bags used in this study were made of polyvinyl chloride with Di (2 etilhexil) Ftalato (DEHP), and citrate - phosphate - dextrose - adenine (CPDA). The red blood cells were stored in six different bags: Terumo@ ( TE); Baxter@ (BA); Grifols@ (GR); Hemobag@ (HE); Asem@ (AS) and Halex Istar@ (AL). The red blood cells were obtained by blood separation and were stored for 35 days at 4°C. The biochemical parameters evaluated were: plasmatic dosage of sodium and potassium by means of flame photometry; CO2, O2 pressure and pH which were determined by gasometry at 370C, using the Stat Profile 5 Analyzer (Nova Biomedical, Waltham, MA) equipment; adenosine triphosphate (ATP), 2,3 diphosphoglycerate (2,3DPG) and plasmatic hemoglobin were determined by the Sigma Company commercial kit (St.Louis, MO). Distribution of erythrocyte size (RDW), corpuscular volume means (CVM), corpuscular hemoglobin concentration means (CHCM), hematocrit (Ht%) and hemoglobin percentage were determined using the Cell-Dyn 1.600 kit (Abbot Canada, V.S.A). The analysis were performed on the 1st, 15th, 21st and 35th day of storage. In order to evaluate the results, the mean and the stándard deviation of five bags of each bred were calculated. The HE bags presented a lower hematocrit value than the AL and GR bags. On the 21st day, the GR and BA bags presented higher plasmatic hemoglobin levels (p=O.OO20) than those obtained using AL and AS. On the 1st day of stored, the AL bags presented higher 2,3 DPG leves than those observed using TE and HE bags. The HE bags also presented lower 2,3 DPG levels than the BA, GR and AS bags. On the 15th day, the GR and AS bags presented higher 2,3 DPG values when compared to those of the BA. and HE bags. On the 15th day, the AS and GR bags presented a higher pH than the HE and BA bags. On the 35th day the GR, AL and AS bags also presented a higher pB! than the HE, BA and TE bags. There was no significant difference between the bags in relation to pC02 and p02, RDW and CVM. On the 35th day of stored, the HE, BA and TE bags presented higher corpuscular hemoglobin mean concentrations than the AJL, GR and AS. On the first day, the plasmatic sodium values were higher in the BA compared to the AS, GR, TE e AL. However, on the 35 th, the levels were higher in the FIE bags. No significant difference were observed related to the potassium values. The general ana1ysis of the results points to the presence of two groups of blood bags presenting similar behavior. In the first group (AL, AS, GR), pH; 2,3 DPG and hematocrit tend to behigher than in the second group (HE, BA and FE). The opposite occurs with CVM , CHCM and ATP values, that is, they tend to be higher in second group. This last observation suggests that, in the first group, the swelling of the red cells is lower than in tlie second group (lower MCV and higher to plasmatic sodium levels) as well as ther is lower spherocytic formation on the 35 th day (lower MCHC), despite the lower levels of ATP, probably related to the higher pH and 2.3 DPG also observed inthis grov-P. These differences may occur due to the various compositions of the anticoagulant or the DOP processing form, which could modify the red cell metabolismo All the values obtained are very near to those reported in literature / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Estudo molecular do gene ABO do subgrupo sanguineo A3 e do grupo O de amerindios da tribo Parakanã

Castro, Maria de Lourdes Rios Barjas de 09 March 1999 (has links)
Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T12:20:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_MariadeLourdesRiosBarjasde_D.pdf: 2659306 bytes, checksum: e700698722dca26cf04c3dff9e15373d (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O sistema ABO é considerado o mais importante grupo de aloantígenos eritrocitários. Os antígenos A e B são glicoproteínas, cujas estruturas antigênicas dependem da atividade de enzimas, glicosiltransferases, que são produtos do gene ABO. Este gene esta localizado no cromossomo nove e apresenta sete exons, sendo os dois últimos responsáveis pela maior parte da seqüência da proteína codificada. Foram estudados os exons seis e sete de dez doadores do subgrupo Â3 com estudo familiar em três casos e de 71 Ameríndios da tribo Parakanã. Os doadores Â3 foram pré selecionados de acordo com critérios sorológicos e posteriormente foi realizado extração do DNA genômico seguido de amplificação dos dois últimos exons através da reação em cadeia da polimerase. O rastreamento das alterações moleculares nos doadores Â3 foi feito através do polimorfismo de conformação de fita simples de DNA e por seqüenciamento direto. Os índios foram submetidos a amplificação dos exons seis e sete e posterior digestão por enzimas de restrição, com o objetivo de definir a presença .da deleção 261 G e das mutações: G542A, T646A e C771T. Os resultados demonstraram que todos doadores são heterozigotos (A3O) e não , apresentam a mutação G871A previamente descrita. O exon sete é polimórfico em indivíduos A3 e com o estudo familiar foi possível concluir que a deleção 1060C assim como as mutações C467T, T646A e G829A são muito freqüentes neste subgrupo. O grupo sangüíneo O dos índios Parakanãs se caracteriza pela presença da deleção 261 G. O polimorfismo G542A foi demonstrado em 22% dos alelos O e as mutações T646A e C771 T em 65%. Estes resultados são distinto das freqüências descritas em Yanomanis, Araras e Kayapos, o que sugeri provável influencia dos efeitos Gargalo e Fundador neste grupo Indígena / Abstract: The ABO blood group is the most clinically important human alloantigen system in transfusion medicine and includes many variant phenotypes. Phenotypic heterogeneity is due structural differences of the glycosyltransferase gene on chromosome nine, which controls the synthesis of transferase capabie of transferring one immunodominant sugar residue to the substrate H. We have studied the last two coding exons of ABO gene, which occupy 91 % of the soluble form of A1 transferase, from ten unrelated Â3 donors and 71 Parakanã Amerindians. The Â3 subgroup was defined according to immunohematological evaluation. Exons six and seven of the ABO gene were amplified and submitted to single strand conformation polymorphism and direct sequencing. The Amerindians were studied by PCR-RFLP for determination the 261 G deletion, the T646A and C771T mutations described in O 1variant and the G542A substitution. Ali Â3 donors have showed heterozygosity for the 261 G deletion (Â30) and have not presented the G871A mutation, previously described in this blood subgroup. The exon seven were heterogeneous at the molecularl~vel and with family studies were possible to conclude that the 1 D6DC deletionand the C467T, T646A and G829A mutations were frequently in this subgroup Ali Amerindians studied were 01 as described in other Indians group. Otherwise, the Parakanã presented lower frequencies of the G542A (22%), T646A and C771T mutation (65%) than other tribes. We concluded that the G542A and probably the O 1v allele are not distributed homogeneously among ali Amazonian Amerindians. The distinct result found in Parakanã Indians suggests a consequence of random genetic drift / Doutorado / Doutor em Clínica Médica
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Diagnose especifica do sangue de "hydrochaeris hydrochaeris" e sua importancia pericial

Caldas, Jose Carlos de Freitas Garcia 26 February 2002 (has links)
Orientadores : Nelson Massini, Eduardo Daruge Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T00:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caldas_JoseCarlosdeFreitasGarcia_M.pdf: 2132075 bytes, checksum: 0b2e6ed5583096bd70f989d9f1a7d5e4 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo selecionar um método para identificação de animais, fornecendo subsídios indispensáveis para a caracterização ou descaracterização de crime, tanto na matança de animais silvestres como torturas de animais domésticos, ambos protegidos por lei, bem como verificar a cristalização da hemoglobina, mais precisamente da oxihemoglobina, em sangue "in natura", com anticoagulante e coagulado de capivaras. Esta é a mais delicada prova das diferenças de constituição química da hemoglobina, pois se acompanha da diferença de estrutura física. Aliado a isto, esta técnica possui baixo custo de implantação, rapidez na obtenção dos resultados, por ser de fácil preparação e manejo. No presente trabalho foram utilizadas preparações modificadas de COSTA (1933). Após a compilação e análise dos dados verificou-se que a quantidade, o tamanho, a cor, o local e o contorno do cristal não estão associados ao sexo do animal e que a quantidade de cristal depende da técnica empregada, sendo a técnica 2 (sangue fresco oxalatado é centrifugado, o sedimento é laqueado pela saponina; junta-se sulfato de sódio, agita-se energicamente e em seguida centrifuga-se durante 10 minutos na velocidade 4 ) a que produz mais cristais. Observou-se também que das técnicas empregadas, nenhuma influenciou o contorno do cristal obtido. Das técnicas utilizadas constatou-se que a técnica de n° 02 é a que produz cristais maiores, com coloração mais intensa (rosa intenso) e com distribuição regular na lâmina. Também .observou-se que a quantidade, o tamanho e a localização do cristal não estão associados à utilização ou não do luto, somente após 48 horas com luto, houve influência na coloração e no contorno dos cristais / Abstract: The present work had as objective to select a method for identification of animaIs, supplying indispensable subsidies the characterization or descaracterização of crime, as much in the slaughter of wild animais as tortures of domestic animaIs, both proteges for law, as wel/ as verifying the crystallization of the hemoglobina, more necessarily of the oxihemoglobina, in blood " in natura ", with anticoagulant and coagulado of capivaras. This verification of the crystallization, aimed at to supply to the professionals, invested in the skillful function, daily pay-establishing the probable limits of this important test-of-certainty, consisting in a great al/y of Justice, it wants Civilian, or Criminal. This is the most delicate test of the differences of chemical constitution of the hemoglobina, therefore it is accompanied by of the difference of physical structure. AI/y to this, this technique possesss low cost of implantation, rapidity in the attainment of the results, for being of easy red tape and handling. In the present work modified red tapes of Coast had been used. After the compilation and analysis of the data were verified that the amount, the size, the color, the place and the contour of the crystal are not assoei ates to the sex of the animal and that the amount of crystal depends on the used technique, being technique 2 (blood cool oxalatado are centrifugado, the sediment are laqueado by the saponina; sodium sulphate is joined, is agitated energicamente and after that centrifuga during 10 minutes in 4 speed) the one that produced more crystals. It was also observed that of the used techniques, none influenced the contour of the gotten crystal. Of the used techniques one evidenced that the technique of n° 02 is the one that obtia bigger crystals, with more intense coloration (pink intense) and with regular distribution in the blade. Also one observed that the amount, the size and the location of the crystal are not assoei ates to the use or of 1 do not fight it, after 48 hours with 1 only fight, had influence in the coloration and the contour of crystals / Mestrado / Mestre em Odontologia Legal e Deontologia

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