Introdução No contexto da valorização crescente do teste anti-HIV como estratégia de prevenção programática, a promoção do teste anti-HIV como estratégia de prevenção entre homens que fazem sexo com homens (HSH) é fundamental. Objetivo - Analisar os fatores associados tanto ao uso rotineiro como episódico do teste anti-HIV. Métodos - Os participantes foram 946 HSH entrevistados pelo Projeto SampaCentro em locais de sociabilidade HSH da região central de São Paulo entre novembro de 2011 e janeiro de 2012, nunca testados ou que procuraram o teste espontaneamente. A metodologia de amostragem foi a time-space-sampling e foram utilizados protocolos do Stata 12.0 para análise de amostras complexas. Os homens que se testaram por rotina ou episodicamente foram comparados aos nunca testados. As variáveis analisadas nos dois modelos de regressão de Poisson foram divididas em três níveis: características sociodemográficas (primeiro nível); socialização na comunidade gay e exposição da orientação sexual, discriminação e opiniões e atitudes em relação ao HIV/Aids e ao teste (segundo nível); percepção de risco, estratégias de prevenção e práticas e parcerias sexuais (terceiro nível). Resultados Os homens que se testaram rotineiramente eram mais velhos e moradores no Centro de SP. Além disso, tinham exposto a orientação sexual para profissional de saúde, sido discriminados em serviços de saúde mas não por amigos e/ou vizinhos (em razão da sexualidade) e não mencionaram medo do resultado do teste como motivo para HSH não se testarem. Também tinham maior probabilidade de conhecer pessoa soropositiva e de ter parcerias estáveis sem sexo anal desprotegido nas casuais (comparado a ter apenas parcerias casuais protegidas). Os homens que se testaram episodicamente eram mais velhos, residentes do Centro de SP, não moravam com parentes, expuseram sua orientação sexual para profissional de saúde, não reportaram medo do resultado do teste como barreira, conheciam pessoa soropositiva e mencionaram parceria estável sem sexo desprotegido com parceiro casual ou então sexo desprotegido em parcerias casuais (comparado a ter apenas parcerias casuais protegidas). Conclusões Os mais jovens, os que moram fora do centro de São Paulo, e os que expões menos sua orientação sexual são os segmentos que menos se testam rotineira ou episodicamente. Assim, dependem de ações para que seu direito seja protegido e assegurado. A estigmatização e a discriminação da homossexualidade deve ser combatida para que não impeça o acesso ao teste e a outros serviços de saúde. Disseminar informações e socializar os mais jovens para o diálogo sobre as estratégias de prevenção biomédicas e estratégias comunitárias de prevenção é necessário. Para ampliar o acesso e qualidade da testagem como recurso fundamental de programas de prevenção permanece o desafio de sustentar o debate sobre sexualidade e prevenção a cada geração, assim como nos programas de formação de educadores e de profissionais de saúde de todas as áreas. / Introduction The relevance of HIV testing is growing in programmatic policies. Promoting HIV testing among men who have sex with men (MSM) is of utter importance. Objective Analyze factors associated with routine and episodic use of HIV testing. Methods Our participants were selected from the database of Projeto SampaCentro, a time-location sampling serobehavioral surveillance survey of MSM in São Paulo, Brazil, that took place between November 2011 and January 2012. Our participants were 946 MSM not HIV positive who were never tested or whose last testing was client-initiated. All analysis were performed using complex samples protocols in Stata 12.0. Men were divided in routine testers, episodic testers and men who had never tested. Routine testers and episodic testers were compared to those who had never tested using two Poisson regression models. Variables were divided in three levels of analysis: sociodemographic (first level); socialization in gay community and disclosure of sexual orientation, discrimination, attitudes and opinions on HIV/AIDS and testing (second level); risk perception, prevention strategies and sexual practices and partnerships (third level). Results Routine testers were older and lived in Central São Paulo, had more frequently disclosed their sexual orientation to a health professional and been discriminated against in health service settings, were less likely to having suffered discrimination from friends and/or neighbors and to point fear as a barrier to testing, were more likely to know someone infected with HIV and to mention steady partners without unprotected anal intercourse (UAI) with casual partners (compared to having only casual partners with no UAI). Episodic testers were also older and more likely to live in Central São Paulo, less likely to live with relatives, more likely to have disclosed their sexual orientation to a health professional, less likely to point fear as a barrier to testing, more likely to know someone infected with HIV. This group more frequently mentioned steady partners without UAI with casual partners and UAI with casual partners, regardless of mentioning steady partners (compared to having only casual partners with no events of UAI). Conclusion Young MSM, those who live outside Central São Paulo and those less ready to disclose their sexual orientation are the MSM segments that are less likely to test, routinely or episodically. Therefore, programmatic actions are needed to ensure their rights are protected. Stigmatization and discrimination of homosexuality must be mitigated so that it wont be a barrier to information about prevention and testing services. Additionally, information on biomedical and communitarian prevention technologies must be shared and presented to those not yet familiar with these strategies. In order to improve access and quality of testing, the challenge of sustaining the debate about sex, sexuality and prevention remains, as new generations of MSM will need to be introduced to this debate. The same is true for the course curriculum of health professionals and educators.

A Diarréia Viral Bovina (BVD) provoca grandes perdas econômicas na pecuária mundial, é causada pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV), vírus que apresenta diversidade genética e antigênica entre as estirpes o que provavelmente influencia no diagnóstico. Com a proposta de verificar a presença de anticorpos, sua mensuração e neutralização cruzada frente quatro estirpes do vírus, amostras de 1500 bovinos não vacinados contra BVDV, sendo 519 de 15 rebanhos do Estado de Minas Gerais (MG), 499 de cinco rebanhos do Mato Grosso do Sul (MS) e 482 de cinco rebanhos de São Paulo (SP), foram testadas pela técnica de virusneutralização (VN) com as seguintes estirpes citopatogênicas: BVDV-1 (NADL estirpe americana e IBSP-11 isolado nacional) e BVDV-2 (VS-253 estirpe americana e IBSP-1020 isolado nacional). Dos 1500 animais, a variação da frequência de sororreagentes ao BVDV foi de 66,07% a 68,67%, ao analisar os diferentes grupos de animais, de acordo com o estado, a maior frequência de anticorpos foi obtida no MS, seguida por MG e SP, independente da estirpe utilizada na VN. O isolado nacional do genótipo 2, IBSP-1020 foi a estirpe que resultou em maior detecção de reagentes em MG e MS, enquanto que em SP foram as estirpes do genótipo 1. A avaliação dos resultados com as quatro estirpes revelou 73,27% (1099/1500) de animais reagentes a pelo menos um dos vírus, enquanto que, 57,60% (864/1500) foram reagentes aos quatro vírus, simultaneamente, ou seja, estes animais produziram anticorpos que reagiram com todas as estirpes em questão. Os títulos de anticorpos variaram de 10, valor mínimo de detecção da prova, a 5120, sendo que a maior parte dos animais apresentou títulos entre 40 e 160, os títulos observados nos animais de SP foram mais baixos com relação aos animais dos outros estados. A avaliação dos títulos de anticorpos de cada animal, comparando o resultado das estirpes duas a duas, revelou diferença na maioria das situações. Conclui-se que, houve alta frequência de ocorrência de bovinos reagentes ao BVDV, que variou de acordo com o sistema de criação e manejo dos rebanhos. Além disso, a utilização de mais de uma estirpe viral, independente do genótipo ou do local de origem do isolado, aumentou a sensibilidade de detecção de animais sororreagentes na VN. Foi evidenciada neutralização cruzada entre todas as estirpes estudadas. Os resultados reforçam a importância de selecionar estirpes representativas das regiões a serem estudadas para inclusão na VN, visando aumentar a sensibilidade do diagnóstico. / The bovine viral diarrhea (BVD) causes great economic losses in livestock worldwide, is caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV), which presents genetic and antigenic diversity among strains which probably influences the serological diagnosis. For the proposal to verify the presence and titers of antibodies and cross-neutralization against four strains of virus, samples from 1,500 bovines naturally infected with BVDV, from the States of Minas Gerais (MG), Mato Grosso do Sul (MS) and São Paulo (SP) were tested by the virus-neutralization test (VN), against four cytopathic strains: BVDV-1 (NADL - American strain and IBSP-11 Brazilian isolate) and BVDV-2 (VS-253 - American strain and IBSP-1020 - Brazilian isolate). Of the 1,500 animals, the range from 66.07% to 68.67%, were reactive to BVDV, and the increased frequency of antibodies was obtained in the state of MS, followed by MG and SP, independent of the BVDV strain used in the VN. The national isolate of the genotype 2, IBSP-1020 strain showed highest detection of reagents in MG and MS states, while in SP were the strains of genotype 1. The results with the four strains showed that 73.27% (1,099/1,500) of animals positive to at least one virus, whereas 57.60% (864/1,500) were simultaneously reactive to the four viruses, in other words that is, these animals produced antibodies that cross reacted against all strains in question. The titers of antibodies ranged from 10, the minimum value of detection of VN, to 5120, and that most animals were between 40 and 160 titers. In comparison of antibodies titers among states was observed that animals in SP presented lowest antibody titer that other states. The evaluation of titers of antibodies in each animal, comparing the results of two by two strains showed statistical difference in most situations. It is concluded that there was a high frequency of occurrence of bovine reagents to BVDV, which varied according to the system of rasing and management of herds. Moreover, the use of different viral strains, independently of genotype or place of origin of isolate, increased the sensitivity of detection of seropositive animals in the VN. Cross-neutralization was observed among all strains studied. To increase the sensitivity of diagnosis it is important to select for VN the strains representative of the regions to be studied.

Introdução No contexto da valorização crescente do teste anti-HIV como estratégia de prevenção programática, a promoção do teste anti-HIV como estratégia de prevenção entre homens que fazem sexo com homens (HSH) é fundamental. Objetivo - Analisar os fatores associados tanto ao uso rotineiro como episódico do teste anti-HIV. Métodos - Os participantes foram 946 HSH entrevistados pelo Projeto SampaCentro em locais de sociabilidade HSH da região central de São Paulo entre novembro de 2011 e janeiro de 2012, nunca testados ou que procuraram o teste espontaneamente. A metodologia de amostragem foi a time-space-sampling e foram utilizados protocolos do Stata 12.0 para análise de amostras complexas. Os homens que se testaram por rotina ou episodicamente foram comparados aos nunca testados. As variáveis analisadas nos dois modelos de regressão de Poisson foram divididas em três níveis: características sociodemográficas (primeiro nível); socialização na comunidade gay e exposição da orientação sexual, discriminação e opiniões e atitudes em relação ao HIV/Aids e ao teste (segundo nível); percepção de risco, estratégias de prevenção e práticas e parcerias sexuais (terceiro nível). Resultados Os homens que se testaram rotineiramente eram mais velhos e moradores no Centro de SP. Além disso, tinham exposto a orientação sexual para profissional de saúde, sido discriminados em serviços de saúde mas não por amigos e/ou vizinhos (em razão da sexualidade) e não mencionaram medo do resultado do teste como motivo para HSH não se testarem. Também tinham maior probabilidade de conhecer pessoa soropositiva e de ter parcerias estáveis sem sexo anal desprotegido nas casuais (comparado a ter apenas parcerias casuais protegidas). Os homens que se testaram episodicamente eram mais velhos, residentes do Centro de SP, não moravam com parentes, expuseram sua orientação sexual para profissional de saúde, não reportaram medo do resultado do teste como barreira, conheciam pessoa soropositiva e mencionaram parceria estável sem sexo desprotegido com parceiro casual ou então sexo desprotegido em parcerias casuais (comparado a ter apenas parcerias casuais protegidas). Conclusões Os mais jovens, os que moram fora do centro de São Paulo, e os que expões menos sua orientação sexual são os segmentos que menos se testam rotineira ou episodicamente. Assim, dependem de ações para que seu direito seja protegido e assegurado. A estigmatização e a discriminação da homossexualidade deve ser combatida para que não impeça o acesso ao teste e a outros serviços de saúde. Disseminar informações e socializar os mais jovens para o diálogo sobre as estratégias de prevenção biomédicas e estratégias comunitárias de prevenção é necessário. Para ampliar o acesso e qualidade da testagem como recurso fundamental de programas de prevenção permanece o desafio de sustentar o debate sobre sexualidade e prevenção a cada geração, assim como nos programas de formação de educadores e de profissionais de saúde de todas as áreas. / Introduction The relevance of HIV testing is growing in programmatic policies. Promoting HIV testing among men who have sex with men (MSM) is of utter importance. Objective Analyze factors associated with routine and episodic use of HIV testing. Methods Our participants were selected from the database of Projeto SampaCentro, a time-location sampling serobehavioral surveillance survey of MSM in São Paulo, Brazil, that took place between November 2011 and January 2012. Our participants were 946 MSM not HIV positive who were never tested or whose last testing was client-initiated. All analysis were performed using complex samples protocols in Stata 12.0. Men were divided in routine testers, episodic testers and men who had never tested. Routine testers and episodic testers were compared to those who had never tested using two Poisson regression models. Variables were divided in three levels of analysis: sociodemographic (first level); socialization in gay community and disclosure of sexual orientation, discrimination, attitudes and opinions on HIV/AIDS and testing (second level); risk perception, prevention strategies and sexual practices and partnerships (third level). Results Routine testers were older and lived in Central São Paulo, had more frequently disclosed their sexual orientation to a health professional and been discriminated against in health service settings, were less likely to having suffered discrimination from friends and/or neighbors and to point fear as a barrier to testing, were more likely to know someone infected with HIV and to mention steady partners without unprotected anal intercourse (UAI) with casual partners (compared to having only casual partners with no UAI). Episodic testers were also older and more likely to live in Central São Paulo, less likely to live with relatives, more likely to have disclosed their sexual orientation to a health professional, less likely to point fear as a barrier to testing, more likely to know someone infected with HIV. This group more frequently mentioned steady partners without UAI with casual partners and UAI with casual partners, regardless of mentioning steady partners (compared to having only casual partners with no events of UAI). Conclusion Young MSM, those who live outside Central São Paulo and those less ready to disclose their sexual orientation are the MSM segments that are less likely to test, routinely or episodically. Therefore, programmatic actions are needed to ensure their rights are protected. Stigmatization and discrimination of homosexuality must be mitigated so that it wont be a barrier to information about prevention and testing services. Additionally, information on biomedical and communitarian prevention technologies must be shared and presented to those not yet familiar with these strategies. In order to improve access and quality of testing, the challenge of sustaining the debate about sex, sexuality and prevention remains, as new generations of MSM will need to be introduced to this debate. The same is true for the course curriculum of health professionals and educators.

B virus diagnosis presents a challenge largely complicated by the asymptomatic infection of rhesus macaques, and extremely pathogenic fatal infections in humans. Humoral detection of antibodies is generally performed using whole virus antigen for which preparation requires strict biosafety measures and specialized BSL-4 facilities. As an alternative to utilizing B virus antigen, we describe the production of a truncated form of B virus envelope glycoprotein D, gD 287, in a baculovirus expression system, and evaluate its diagnostic potential as an antigen in recombinant ELISA. After purification and characterization, gD 287 was tested using 22 negative and 72 positive macaque sera samples previously classified using the traditional method. We find that sensitivity and specificity of the recombinant ELISA are dependent on antibody titer of tested serum and gD 287 shows good to excellent predictive potential for identification of positive sera with titers higher than 500.

The Jaagsiekte Sheep Retrovirus (JSRV), an exogenous type B/D-retrovirus with about 10-15 endogenous counterparts in all normal sheep genomes, causes Jaagsiekte (JS) or ovine pulmonary adenocarcinoma (OPA), a contagious lung cancer of sheep. This sheep lung cancer has been identified as the best natural out-bred model that can be used to study human epithelial tumours. The close similarity between the pathology of the sheep disease and Human Bronchiolo-alveolar carcinoma are highly suggestive that the human disease could have a similar aetiology and mechanism to the sheep disease. However, in the case of sheep at the time of the study there was a need for an assay that could be used to screen for infected sheep. The isolation, cloning and subsequent sequencing of the first full-length exogenous and endogenous forms of JSRV contributed greatly towards JSRV research. Until recently the diagnosis of OPA was based mostly on clinical presentation with confirmation by micro and macro examination of the affected lungs by expert pathologists. In the absence of a specific humoral response no serology-based tests were available to diagnose the disease early in live animals. Control and management of the disease was primarily by regular flock inspections and prompt culling of the suspected cases. The objective of this research project was therefore to assess and investigate the serological and molecular diagnosis of JSRV. In an attempt to develop a serology based assay three proteins were identified as candidate diagnostic antigens, the group specific antigen JSRV p26, the transmembrane and the orf-X proteins. Genes coding for all three proteins were isolated, cloned and expressed. The JSRV p26 was sufficiently purified and its potential as a diagnostic antigen was evaluated in both a Western blot and ELISA. Our studies confirmed that there were no circulating antibodies to the JSRV capsid protein. Evidence suggested that the immune response was localised to the lungs. Lung lavage samples were therefore collected from infected and normal sheep and analysed for the presence of JSRV p26 antibodies using an in-house JSp26 peroxidase conjugate in an antigen capture assay. This assay lacked sensitivity but the results indicated that there was a specific localised immune response to JSRV in the lungs of OPA affected sheep. This was confirmed with an in-house antigen capture assay that we developed. JS antigen was detected in the lung and nasal fluid of affected sheep, but not in equivalent samples from normal sheep. Three molecular assays were investigated for their sensitivity and specificity, the LTR-gag PCR, U3/LTR hemi-nested PCR and the PCR that covered the V1/V2 region. The U3/LTR hemi-nested assay was 2 logs more sensitive than the LTR-gag PCR. However, it detected the endogenous JSRV5.9A1 loci at higher concentrations. This was overcome by designing a more specific primer P3M for the first step of the U3/LTR hemi-nested PCR and the use of the AmpliTaq Gold DNA polymerase. This assay proved to be both sensitive and specific enough to screen for the infectious exogenous JSRV in peripheral blood samples from individual sheep. It is now possible to use this assay to selectively eradicate the disease from a flock through a selective culling programme. Furthermore, the assay could be made quantitative by the inclusion of concentration standards. / Thesis (M.Med.)-University of KwaZulu-Natal, 2005.

African animal trypanosomosis is a devastating disease affecting livestock mainly found in sub-Saharan Africa. This disease is known as nagana and is transmitted by the trypanosome parasite from the tsetse fly vector to a mammalian host. There are three African trypanosomes namely Trypanosoma vivax, T. congolense and T. brucei brucei that are the causative agents responsible for this disease in African cattle. This disease is serious since it not only affects livestock but also has a negative impact on the sub-Saharan African economy. There is, therefore, a great demand for better control methods of the disease and suitable diagnostic methods. Current control measures such as the use of trypanocidal drugs, tsetse fly eradication methods and trypanotolerant cattle have become inadequate. The defence mechanism of the trypanosome to continuously change its surface coat by a process of antigenic variation has made it impossible to produce a suitable vaccine. Therefore, chemotherapy is still one of the key approaches for control of this wasting disease. The long existence of the current trypanocidal drugs has allowed the development of drug resistance. The development of new chemotherapeutic drugs is focused on targeting the pathogenic factors such as parasite cysteine peptidases that contribute to the disease. Vivapain is the main cysteine peptidase of T. vivax and shares high sequence identity with congopain, the main cysteine peptidase of T. congolense, which was previously shown to be a pathogenic factor contributing to trypanosomosis. Vivapain, thus, has potential as a target for chemotherapeutic drug design. Hence, the first part of this study involved the recombinant expression and enzymatic characterisation of vivapain for future production of new synthetic inhibitors for the use in new trypanocidal drugs. The catalytic domain of vivapain (Vp) was recombinantly expressed in the Pichia pastoris yeast expression system and enzymatically characterised. The main finding from this study was that Vp was only able to hydrolyse a substrate if the P2 position was occupied by either a hydrophobic Phe or Leu residue. Vp was also found to be active close to physiological pH and was inhibited by the reversible cysteine peptidases, leupeptin, antipain and chymostatin and the irreversible cysteine peptidases L-trans-epoxysuccinyl-leucylamido (4-guanidino) butane (E-64), iodoacetic acid (IAA) and iodoacetamide (IAN). A further important aspect of controlling trypanosomosis is the diagnosis of the disease. Clinical, parasitological, molecular and serological techniques have been applied and used to diagnose trypanosomosis. One of the most promising serological techniques has proven to be the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), more specifically the antibody and antigen detection ELISAs. The main requirement for this technique is a readily available and reproducible antigen such as that produced by recombinant expression. While there are recombinant antigens that are available to be used to detect T. congolense, T. brucei brucei and even T. evansi infections, there are none available to detect T. vivax infections. In the second part of this study, a mutant inactive full length form of vivapain (FLVp) was expressed in a bacterial expression system for the detection of T. vivax infections. Antibodies against this antigen were produced in both chickens and mice. Both the chicken IgY and mice sera were able to detect the recombinant FLVp in western blots. The mice sera were also able to detect native vivapain in a T. vivax lysate, which is very promising for future use of the FLVp antigen and the corresponding antibodies in diagnosis of T. vivax infections in sera of infected animals. / Thesis (M.Sc.)-University of KwaZulu-Natal, Pietermaritzburg, 2010.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2003. / Härtill 6 uppsatser.

A Diarréia Viral Bovina (BVD) provoca grandes perdas econômicas na pecuária mundial, é causada pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV), vírus que apresenta diversidade genética e antigênica entre as estirpes o que provavelmente influencia no diagnóstico. Com a proposta de verificar a presença de anticorpos, sua mensuração e neutralização cruzada frente quatro estirpes do vírus, amostras de 1500 bovinos não vacinados contra BVDV, sendo 519 de 15 rebanhos do Estado de Minas Gerais (MG), 499 de cinco rebanhos do Mato Grosso do Sul (MS) e 482 de cinco rebanhos de São Paulo (SP), foram testadas pela técnica de virusneutralização (VN) com as seguintes estirpes citopatogênicas: BVDV-1 (NADL estirpe americana e IBSP-11 isolado nacional) e BVDV-2 (VS-253 estirpe americana e IBSP-1020 isolado nacional). Dos 1500 animais, a variação da frequência de sororreagentes ao BVDV foi de 66,07% a 68,67%, ao analisar os diferentes grupos de animais, de acordo com o estado, a maior frequência de anticorpos foi obtida no MS, seguida por MG e SP, independente da estirpe utilizada na VN. O isolado nacional do genótipo 2, IBSP-1020 foi a estirpe que resultou em maior detecção de reagentes em MG e MS, enquanto que em SP foram as estirpes do genótipo 1. A avaliação dos resultados com as quatro estirpes revelou 73,27% (1099/1500) de animais reagentes a pelo menos um dos vírus, enquanto que, 57,60% (864/1500) foram reagentes aos quatro vírus, simultaneamente, ou seja, estes animais produziram anticorpos que reagiram com todas as estirpes em questão. Os títulos de anticorpos variaram de 10, valor mínimo de detecção da prova, a 5120, sendo que a maior parte dos animais apresentou títulos entre 40 e 160, os títulos observados nos animais de SP foram mais baixos com relação aos animais dos outros estados. A avaliação dos títulos de anticorpos de cada animal, comparando o resultado das estirpes duas a duas, revelou diferença na maioria das situações. Conclui-se que, houve alta frequência de ocorrência de bovinos reagentes ao BVDV, que variou de acordo com o sistema de criação e manejo dos rebanhos. Além disso, a utilização de mais de uma estirpe viral, independente do genótipo ou do local de origem do isolado, aumentou a sensibilidade de detecção de animais sororreagentes na VN. Foi evidenciada neutralização cruzada entre todas as estirpes estudadas. Os resultados reforçam a importância de selecionar estirpes representativas das regiões a serem estudadas para inclusão na VN, visando aumentar a sensibilidade do diagnóstico. / The bovine viral diarrhea (BVD) causes great economic losses in livestock worldwide, is caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV), which presents genetic and antigenic diversity among strains which probably influences the serological diagnosis. For the proposal to verify the presence and titers of antibodies and cross-neutralization against four strains of virus, samples from 1,500 bovines naturally infected with BVDV, from the States of Minas Gerais (MG), Mato Grosso do Sul (MS) and São Paulo (SP) were tested by the virus-neutralization test (VN), against four cytopathic strains: BVDV-1 (NADL - American strain and IBSP-11 Brazilian isolate) and BVDV-2 (VS-253 - American strain and IBSP-1020 - Brazilian isolate). Of the 1,500 animals, the range from 66.07% to 68.67%, were reactive to BVDV, and the increased frequency of antibodies was obtained in the state of MS, followed by MG and SP, independent of the BVDV strain used in the VN. The national isolate of the genotype 2, IBSP-1020 strain showed highest detection of reagents in MG and MS states, while in SP were the strains of genotype 1. The results with the four strains showed that 73.27% (1,099/1,500) of animals positive to at least one virus, whereas 57.60% (864/1,500) were simultaneously reactive to the four viruses, in other words that is, these animals produced antibodies that cross reacted against all strains in question. The titers of antibodies ranged from 10, the minimum value of detection of VN, to 5120, and that most animals were between 40 and 160 titers. In comparison of antibodies titers among states was observed that animals in SP presented lowest antibody titer that other states. The evaluation of titers of antibodies in each animal, comparing the results of two by two strains showed statistical difference in most situations. It is concluded that there was a high frequency of occurrence of bovine reagents to BVDV, which varied according to the system of rasing and management of herds. Moreover, the use of different viral strains, independently of genotype or place of origin of isolate, increased the sensitivity of detection of seropositive animals in the VN. Cross-neutralization was observed among all strains studied. To increase the sensitivity of diagnosis it is important to select for VN the strains representative of the regions to be studied.

Submitted by Fabiana Gonçalves Pinto (benf@ndc.uff.br) on 2016-04-25T20:40:26Z No. of bitstreams: 1 Kyra Vianna Alochio.pdf: 2551601 bytes, checksum: 2c76896ed6f4298f61e5233bf3ef5d2e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-25T20:40:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kyra Vianna Alochio.pdf: 2551601 bytes, checksum: 2c76896ed6f4298f61e5233bf3ef5d2e (MD5) Previous issue date: 2015 / Mestrado Profissional Ensino na Saúde / O objetivo deste trabalho foi investigar a formação e a prática de multiplicadores em Testes Rápidos para Diagnóstico do Vírus da Imunodeficiência Humana (TRD/HIV) na região da Baixada Litorânea no estado do Rio de Janeiro. Trata-se de um estudo descritivo exploratório de campo com abordagem qualitativa. Os dados foram obtidos entre os meses de outubro e dezembro de 2014 através de entrevistas semiestruturadas com treze trabalhadores da saúde, sendo nove multiplicadores regionais e quatro coordenadores municipais de programas de DST/Aids. A análise temática dos dados permitiu identificar duas categorias principais: a) Formação de multiplicadores regionais: diversidade de atividades e b) Replicação e descentralização do TRD/HIV: entre críticas e obstáculos. A primeira categoria permitiu observar que os multiplicadores avaliaram positivamente seu processo de formação na região, e que estes são perpassados por características de três tipos de atividades: técnica, educacional e cuidadora, de acordo com sua preferência pela multiplicação ou execução/aconselhamento. A segunda categoria reuniu análises afinadas às perspectivas da prática de replicação dos multiplicadores, e discutiu a oferta da formação de executores/aconselhadores, além das perspectivas de descentralização do TRD/HIV na região. Detectou-se baixo número de oficinas replicadas no período de um ano. As principais dificuldades relacionadas à replicação foram a diminuição da carga horária de replicação, a pouca disponibilidade dos multiplicadores regionais e a ausência de apoio político da gestão municipal para a efetivação das oficinas. A morosidade no processo de descentralização da testagem rápida para as unidades municipais foi relacionada em parte ao pequeno número de multiplicadores formados na região e sua pouca disponibilidade. Por outro lado, reconheceu-se o fato de que há unidades sem condições mínimas para a implantação do TRD e, nesses casos, os participantes apontaram desmotivação dos executores/aconselhadores municipais formados diante da desorganização dos serviços nas unidades. Apesar das críticas e do reconhecimento de obstáculos, percebeu-se a perspectiva de um trabalho colaborativo no processo de replicação, em especial por parte de coordenadores formados multiplicadores. Os participantes defenderam a realização de oficinas periódicas pela secretaria estadual de saúde ou a possibilidade dessa formação ser descentralizada para os multiplicadores regionais de modo a diminuir a dependência dos municípios em relação à disponibilidade dos multiplicadores regionais. Conclui-se que, para que a replicação aos municípios aconteça, são necessários movimentos frequentes de sensibilização desde as instâncias de gestão/gerência até as equipes de saúde. O estudo resultou em um encontro regional envolvendo SES, CIES regional e sujeitos participantes no qual foi ratificada a importância da proposição de ações capazes de articular sujeitos envolvidos com as ações programáticas, fortalecendo estratégias de aproximação em âmbito regional, promovendo a prática reflexiva e possibilitando espaços de produção de saberes e enfrentamento de fragilidades na concepção da Educação Permanente em Saúde / The goal of this study was to investigate the qualification and practice of multipliers in rapid tests for diagnosis of human immunodeficiency virus (TRD/HIV) in the Coastal Lowlands region of Rio de Janeiro state. It is an exploratory descriptive study, with a qualitative approach. The data were collected between October and December 2014 through semi-structured interviews with thirteen health workers, and nine regional multipliers and four municipal coordinators of sexually transmitted diseases programs (DST). Subject analysis of the data allowed us to identify two main categories: a) Regional multipliers Qualification: Diverse activity b) TRD/HIV replication and Decentralization: between critics and obstacles. The first category observed that the multiplier positively analyzed their training process in the region and these are crossed by three types of characteristics of activities: technical, educational and caregiver, according to their preference by multiplying, execution or advice. The second category brought together multiplier prospect analyses of replication practice and discussed the offer of training executors/advisers, besides the decentralization prospects of TRD/HIV in the region. A low number of replicated workshops in a one year period of time were detected. The main difficulties related to replication were the reduction of workload replication, the limited availability of regional multipliers and the lack of political support from municipal management to perform the workshops. The rapid testing unit delay and the municipal decentralization process for the units were related to the small number of trained multipliers in the region and their limited availability. On the other hand, it was recognized that there were no minimum conditions for the TRD implementation to take place and lower motivation was pointed out by executors /advisers. Despite the obstacles recognition and criticism, collaborative work perspective in the replication process was noticed, especially by coordinator-trained multipliers. Participants called for periodic workshops held by the health state board or the possibility of such training is decentralized to regional multipliers, in order to reduce the dependence of municipalities regarding the availability of regional multipliers. In conclusion, in order for replication to occur the municipalities are required to have frequent awareness movements, from management/manages level / up to health teams. The study resulted in a regional meeting involving the health state board, the Education and Health integration services (CIES) and the participating subjects that were ratified by the importance of proposing programmatic actions to articulate involved individuals with program activities, strengthening strategies approach at the regional level, promoting reflective practice and enabling knowledge production room and coping with weaknesses in the design of Continuing Education in Health

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-03-14T17:34:35Z No. of bitstreams: 1 Sandes, Valcieny de Souza [Dissertação, 2015].pdf: 5247211 bytes, checksum: 6044b3009ac1d7e5c2ee9f913a1410c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-14T17:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sandes, Valcieny de Souza [Dissertação, 2015].pdf: 5247211 bytes, checksum: 6044b3009ac1d7e5c2ee9f913a1410c9 (MD5) / Introdução: Após 110 anos da descoberta do primeiro teste sorológico para sífilis, a doença continua sendo um problema de saúde pública. Os testes sorológicos desempenham papel fundamental no diagnóstico da doença. A evolução de vários testes e a introdução de novas metodologias de testes treponêmicos frequentemente geram dúvidas na hora da interpretação dos resultados. Nos bancos de sangue, resultados discordantes e falsos positivos geram desconforto na relação com o doador. O presente trabalho se propõe a fazer uma análise da introdução recente do teste treponêmico por quimioluminescência na triagem sorológica para sífilis em doadores de sangue do Serviço de Hemoterapia do Instituto Nacional de Câncer José Alencar Gomes da Silva no Rio de Janeiro. Metodologia: Trata-se de um estudo retrospectivo e exploratório a partir dos resultados de triagem e confirmatórios de testes para Sífilis no Laboratório de Sorologia do Serviço de Hemoterapia do INCA no período de Janeiro de 2010 a Junho de 2014. Na primeira parte do estudo, foi realizada uma revisão bibliográfica sobre sensibilidade e especificidade dos principais testes sorológicos para sífilis. A segunda parte foi dividida em três fases: i) uma análise comparativa do perfil de resultados na triagem sorológica utilizando os testes VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) entre 2010 e 2011 e ChLIA (Chemiluminescent Immunoassay) entre 2012 e 2013); ii) análise das propriedades e concordância de dois testes ChLIA (Architect® Syphilis TP e Liaison® Treponema Scren) com o FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibody-Absortion) como comparador; iii) e análise de possíveis associações das variáveis idade, gênero, estado civil, nível de escolaridade, utilização de medicamentos e concomitância de reatividade para outros agentes infecciosos com resultados positivos e/ou falsos positivos. Resultados: A revisão bibliográfica incluiu 49 artigos. A variação da sensibilidade e da especificidade encontrada foi: 62,2 – 83,7 e 83,9 – 100 para o VDRL; e 95,8 – 100 e 78,4 – 100 para o ChLIA, respectivamente. No período em que foi utilizado o VDRL, a taxa de reatividade para sífilis foi de 1,01% (N = 28.158). Dos inicialmente reativos, foi possível confirmar o resultado após coleta da segunda amostra de 65,96% (188) dos doadores. Já no período em que foi utilizado o ChLIA, foram triados 25.577 doadores e a taxa de reatividade para sífilis aumentou para 2,66%. Retornaram para coleta de segunda amostra 52,48% (360) doadores. Foi encontrado perfil de resultados semelhantes com taxas de falsos positivos de 40,5% para o VDRL e 37,4% para o ChLIA (p = 0,5266). Entre os testes ChLIA, o Liaison® Treponema Scren apresentou melhores resultados de concordância com o FTA-ABS e especificidade (81% e 87% respectivamente) do que o Architect® Syphilis TP (71% e 79%). Foi encontrada associação entre idade mais avançada e níveis de escolaridade mais baixos com os resultados positivos para sífilis. Conclusão: A nova metodologia introduzida na triagem sorológica apresentou desempenho inferior ao esperado quanto à especificidade. Este resultado sugere a importância de se investir em estudos para avaliar custo-efetividade de novas estratégias para redução das perdas de doadores em casos de falsos positivos / Introduction: Since the discovery of the first syphilis serological test 110 years ago, the disease remains a public health problem. Serologic tests play an important role in diagnosis of the disease. Various tests have become available and the introduction of new treponemal tests often raises questions at the time of interpretation. In blood banks, discordant and false positives results causing discomfort in the relationship with donor. This study analyzed the recent introduction of a treponemal chemiluminescent assay in syphilis screening in blood donors of the Hemotherapy Service/INCA/RJ. Methodology: A retrospective exploratory study was performed based on results of screening and confirmatory tests for syphilis in the Hemotherapy Service of INCA from January 2010 to June 2014. In the first part of the study, a literature review on sensitivity and specificity of the main serologic tests for syphilis was performed. The second part was divided into three phases: i) a comparative analysis of positives, negatives and false positives results in screening using the VDRL test (Venereal Disease Research Laboratory) between 2010 and 2011 and ChLIA (Chemiluminescent Immunoassay) between 2012 and 2013; ii) a concordance analysis of two ChLIA tests (Architect® Syphilis TP and Liaison® Treponema Scren) with the FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibody-Absorption) as a comparator; iii) and an analysis of possible association of age, gender, marital status, educational level, use of medicines and reactivity for other infectious agents with positive and/or false positive test results. Results: The literature review includes 49 articles. The variation of sensitivity and specificity found was: 62.2 to 83.7 and from 83.9 to 100 for VDRL; and 95.8 - 78.4 and 100 - 100 for ChLIA respectively. In VDRL test period the reactivity rate for syphilis was 1.01% (N = 28 158). It was possible to confirm the result after collecting the second sample in 65.96% (188) of donors with initially reactive test results. In ChLIA period, 25,577 donors were screened and the reactivity rate for syphilis increased to 2.66%. Second samples were collected from 52.48% (360) donors. A similar profile was found with false positive rate of 40.5% for VDRL and 37.4% for ChLIA (p = 0.5266). In the ChLIA tests assessed, Liaison® Treponema Screen showed a better agreement with FTA-ABS and specificity (81% and 87% respectively) than the Architect® Syphilis TP (71% and 79%). An association between elderly and lower education status with positive results for syphilis was found. Conclusion: The new methodology introduced in serological screening showed a lower performance than expected in specificity. This result suggests the importance of investing in studies to evaluate cost-effectiveness of new strategies for reducing losses of donors in cases of false positives