Orientador: José Eduardo Cezar Sampaio / Coorientador: Carlos Rossa Junior / Banca: Márcio Zaffalon Casati / Banca: Luis Carlos Spolidório / Resumo: A regeneração periodontal ainda representa um importante desafio, devido a limitações na efetividade e imprevisibilidade das abordagens clínicas. O condicionamento radicular e a utilização de mediadores biológicos, como os fatores de crescimento, são duas das técnicas que tem sido estudadas para esta finalidade; também tem sido proposta a combinação de ambas. Foi avaliado in vitro o efeito do condicionamento ácido da dentina na liberação de bFGF e BMP-7 aplicados topicamente de forma isolada ou associados, além da influência de tais tratamentos na expressão de genesalvo relacionados ao metabolismo de tecido conjuntivo mineralizado e não mineralizado em três tipos celulares relevantes para o processo regenerativo no microambiente periodontal. Espécimes de dentina bovina foram subdivididos em dois grupos: não condicionados e condicionados com ácido cítrico 25% durante 3 minutos. bFGF recombinante humano (10 e 50 ng), BMP-7 (100 e 300 ng) e associação bFGF/BMP-7 (50 ng e 100 ng, respectivamente) foram suspendidos em 50 μL de meio de cultura e aplicados topicamente sobre a dentina. A liberação de fatores de crescimento aplicados topicamente sobre a dentina condicionada e não condicionada foi determinada por meio de ELISA. Linhagens celulares de camundongos - fibroblastos do ligamento periodontal, cementoblastos e células do estroma ósseo - foram plaqueadas sobre os espécimes de dentina com e sem condicionamento ácido prévio, tratados ou não com os fatores de crescimento. Após 24 horas, as células aderidas sobre as amostras de dentina foram coletadas, o RNA total extraído e a expressão gênica de colágeno 1-alfa1, fibronectina e Runx2 foi avaliada por RTqPCR. Os resultados encontrados neste estudo indicam que os fatores de crescimento são retidos pela dentina após aplicação tópica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Periodontal regeneration still poses a challenge both in terms of predictability and magnitude of effect. Chemical root conditioning and the use of biological mediators are two strategies studied to improve the results of regenerative therapies. The objective of this study was to determine the effect of acid conditioning of dentin on the release of topically applied bFGF and BMP-7, isolated or associated. We also evaluated the impact of such treatment in the expression of target genes related to the metabolism of mineralized connective tissue and non-mineralized in three cell types relevant for the regenerative process in the periodontal microenvironment. Dentin specimens, which were obtained from bovine teeth, were divided into two groups: non-conditioned and conditioned with 25% citric acid for 3 minutes. Human growth factors produced by recombinant DNA technology were diluted in 50 mL of culture medium and topically applied on the dentin in the following amounts: recombinant human bFGF (10 and 50 ng), BMP-7 (100 and 300 ng) and associated bFGF/BMP-7 (50 ng and 100 ng, respectively). The released of growth factor topically applied on the conditioned and non-conditioning dentin samples was determined by ELISA. Murine cell lines - periodontal ligament fibroblasts, cementoblasts and bone marrow stromal cells - were grown on dentin specimens with and without prior acid conditioning and application of growth factors. After 24 hours, the cells adhered on the samples of dentin were collected, total RNA extracted and gene expression of collagen 1-alpha 1, fibronectin and Runx2 was determined by RT-qPCR. The results of this study indicate that: growth factors are retained by dentin after topical application and that the peak release occurs in two hours; the conditioning of dentin with citric acid favored the retention of topically applied growth... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Raquel Fantin Domeniconi / Resumo: O ambiente desempenha papel crucial durante o desenvolvimento fetal, podendo influenciar diretamente a saúde da prole. Assim, o estado nutricional materno é essencial para a saúde e bem-estar do feto. Há relatos de alterações em parâmetros relacionados à função epididimária, em animais adultos, cujas mães sofreram restrição de proteína durante as fases de gestação e lactação. A origem das alterações funcionais no epidídimo pode estar relacionada à fatores hormonais, bem como na expressão de seus receptores, e por meio da modulação de moléculas de sinalização como FGFs (Fator de crescimento de Fibroblastos), vias da ERK e Wnt, e à funcionalidade da Src, ou seja, proteínas relacionadas aos processos do desenvolvimento epididimário. No entanto, não há informações que esclareçam as causas dessas alterações ou como a restrição proteica atua ao longo do desenvolvimento pré e pós-natal do epididímo. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o impacto da restrição proteica materna, no ducto mesonéfrico e no epidídimo nas fases iniciais do desenvolvimento. Assim, ratas Wistar prenhes foram divididas em dois grupos experimentais que receberam uma dieta de normoproteica (NP; 17% de proteína; n=19) ou hipoproteica (HP; 6% de proteína; n=19) durante a gestação e a lactação. Cinco ratas prenhes de cada grupo foram eutanasiadas para coleta dos ductos mesonéfricos dos embriões no dia gestacional (DG)17,5 e as demais permaneceram até os dias pós-natais (DPN) 7 ou 14. Os filhotes mach... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The environment plays a crucial role during fetal development and can directly influence the health of the offspring. Thus, maternal nutritional status is essential for fetus' health and well-being. There have been reports of alterations in parameters related to epididymal function in adult animals whose mothers suffered protein restriction during the gestation and lactation. The origin of the functional alterations in the epididymis can be related to the hormonal factors, as well as in the expression of its receptors, and on signaling molecules modulation like FGFs (Fibroblast Growth Factor), ERK and Wnt pathways, and functionality of Src, or proteins related to epididymal development. However, there is no information to clarify the causes of these changes or how protein restriction acts throughout pre and postnatal development. The aim of this study was to evaluate the impact of maternal protein restriction on the mesonephric duct and in the early stages of epididymal development. Pregnant female Wistar rats were divided into two groups that received either normoprotein (17%; NP) or low-protein (6%; LP) diet ad libitum during gestation and lactation. Five pregnant rats from each group were euthanized to collect the mesonephric ducts on gestational day (DG) 17.5 and the others rats remained until the postnatal days (PND) 7 or PND14. The male offspring had their biometric parameters verified and were euthanized. Blood was collected for sex hormones analysis and genital organs... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-08-21T13:30:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1093430 bytes, checksum: 2520b94dfb2f5365593144a9fb89ce97 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-21T13:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1093430 bytes, checksum: 2520b94dfb2f5365593144a9fb89ce97 (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho, utilizando a técnica de eletroforese em gel de agarose, foi possível estudar o revestimento de complexos DNA- fármacos pelo polipeptídeo C4K12 , assim como determinar a competição da intercalação dos fármacos Brometo de Etídio e Doxorrubicina ao DNA. Com o intuito de estudar tal comportamento, medimos a intensidade da fluorescência do complexo DNA 3000 pares de base - Brometo de etídio, usado como parâmetro de intensidade de fluorescência a várias concentrações de Doxorrubicina por par de bases do DNA. Observou-se que o aumento da concentração de Doxorrubicina implica na expressiva diminuição da intensidade de fluorescência do Brometo de Etídio já intercalado ao DNA, resultado do deslocamento do Brometo de Etídio devido à intercalação da Doxorrubicina. Outro fator relevante observado é a invariabilidade da fluorescência do complexo DNA - fármacos ao acrescentar a proteína C4K 2 às mesmas concentrações de Doxorrubicina, implicando o revestimento do complexo, pela proteína / In this work, using the technique of agarose gel electrophoresis, it was possible to study the coating of DNA-drug compound by the C4K12 polypeptide, a well as determining the competition of the intercalation of the drugs Ethidium Bromide and Doxorubicin to the DNA. In order to study such behavior, we measured the fluorescence intensity of the DNA 3000 bp - Ethidium Bromide compound, used as a parameter of fluorescence intensity at various concentrations of Doxorubicin per base pair of DNA. It was observed that the increase of this Doxorubicin concentration implies in the expressive decrease in the fluorescence intensity of the Ethidium Bromide already intercalated to the DNA, resulting from the displacement of the Ethidium Bromide due to the intercalation of Doxorubicin. Another relevant factor observed is the invariability of the fluorescence of the DNA-drug compound when adding the C4K12 protein to the same concentrations of Doxorubicin, implying the coating of the compound by the protein.

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Resumo: O plasma rico em plaquetas (PRP) atua na reparação corneal e, quando aquecido, minimiza a reação imunológica local sem interferir nos níveis dos fatores de crescimento. O objetivo deste estudo clínico foi comparar o PRP autólogo (GP) com o alogênico aquecido (GA) no tratamento de ceratite ulcerativa em cães, bem como os seus efeitos clínicos. Para isso, foram utilizados 24 cães diagnosticados na rotina oftalmológica com ceratite ulcerativa, distribuídos aleatoriamente em dois grupos experimentais, um tratado utilizando-se colírio de PRP autólogo (n=11) e outro com colírio de PRP alogênico aquecido (n=13). Todos os animais foram avaliados no momento inicial do atendimento e após 3, 5, 10, 15 e 30 dias do tratamento. Foram analisadas as seguintes variáveis oftalmológicas: blefaroespasmo, secreção ocular, opacidade corneal, vascularização, fotofobia, hiperemia conjuntival, quemose, espessura corneal e o percentual de redução da úlcera de córnea. Não houve diferenças estatísticas entre os grupos considerando o tratamento utilizado e verificou-se redução no tempo de cicatrização da lesão com adequada reepitelização corneal, bem como diminuição da opacidade e dos sinais de inflamação. Concluiu-se que o PRP autólogo e alogênico aquecido em cães apresentam-se de forma equiparável, sendo uma excelente opção no tratamento adjuvante da ceratite ulcerativa. / Abstract: Platelet rich plasma (PRP) acts on corneal repair and, when heated, presents reduced local immune response without interfering in growth factor levels. This clinical trial aimed to compare the use of autologous PRP (AP) and heated allogeneic PRP (HP) in the treatment of ulcerative keratitis in dogs, as well as their clinical effects. For this purpose, 24 dogs were utilized from the routine with diagnosis of ulcerative keratitis, and randomly distributed into two experimental groups, one treated with autologous PRP eye drops (n=11) and the other with heated allogeneic PRP eye drops (n=13). All the animals were evaluated at the initial moment of attendance and after 3, 5, 10, 15 and 30 days of treatment. The ophthalmologic variables analyzed were: blepharospasm, ocular discharge, corneal opacity, vascularization, photophobia, conjunctival hyperemia, chemosis, corneal thickness, as well as the percentage of corneal ulcer reduction. There were no statistical differences between the groups as to the treatment utilized whereas there was verification of a reduction in the injury-wound-healing time with adequate corneal re-epithelialization, as well as diminution of opacity and of inflammation signs. It was concluded that autologous and heated allogenic PRP in dogs are comparable in efficacy and constitute an excellent option in the adjuvant treatment of ulcerative keratitis. / Mestre

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Mário Taba Junior / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Ronaldo Célio Mariano / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi avaliar, histologicamente, a influência da associação do plasma rico em plaquetas (PRP) ao enxerto de osso autógeno (OA) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) em calvárias de coelhos. Sessenta coelhos foram divididos em 3 grupos: C (controle), OA (osso autógeno) e OA/PRP (osso autógeno associado ao plasma rico em plaquetas). Um defeito de tamanho crítico, com 15 mm de diâmetro, foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo. No Grupo OA, o defeito foi preenchido com osso autógeno particulado. No Grupo OA/PRP, o defeito foi preenchido com osso autógeno particulado associado ao PRP. Todos os grupos foram divididos em subgrupos (n = 10) para eutanásia aos 30 ou 90 dias pós-operatórios. Foram realizadas análises histológica e histométrica. A quantidade de osso neoformado foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Os dados em porcentagem foram transformados em raiz quadrada para análise estatística (ANOVA, teste t, p<0,05). Aos 30 dias pós-operatórios, o Grupo OA/PRP apresentou uma quantidade significativamente maior de osso neoformado que o Grupo OA (64,44% e 46,88%, respectivamente). Aos 90 dias, todos os espécimes dos Grupos OA/PRP e OA mostraram fechamento ósseo completo do defeito, com quantidades similares de osso neoformado (77,9% e 75%, respectivamente). Dentro dos limites deste trabalho, pode-se concluir que o PRP acelerou o processo de reparo do enxerto de osso autógeno em defeitos de tamanho crítico em calvária de coelhos. / Abstract: The purpose of this study was to histologically analyze the effect of platelet-rich plasma (PRP) on bone healing in an autogenous bone graft placed in surgically created criticalsize defects (CSD) in rabbit calvaria. 60 rabbits were divided into 3 groups: C (control); AB (autogenous bone graft) and AB/PRP (autogenous bone graft with platelet-rich plasma). A 15 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C the defect was filled by blood clot only. In Group AB the defect was filled with particulate autogenous bone. In Group PRP it was filled with particulate autogenous bone in combination with platelet-rich plasma. All groups were divided into subgroups (n=10) and euthanized at either 30 or 90 days post-operative. Histometric, using image analysis software, and histologic analyses were performed. Amount of new bone was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Percentage data were transformed into square root for statistical analysis (ANOVA, t test, p<0.05). At 30 days post-op, Group AB/PRP had a statistically greater amount of bone formation than Group AB (64.44% and 46.88%, respectively). At 90 days, complete bone regeneration of the defect was seen in all specimens of Groups AB/PRP and AB, with similar amounts of newly formed bone (77.9% and 75%, respectively). Within the limits of this study, it can be concluded that PRP accelerated the healing of autogenous bone graft in critical-size defects in rabbit calvaria. / Doutor

Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Coorientador: Rosemari de Oliveira Vasconcelos / Banca: José Angelo Lauletta Lindoso / Banca: Gisele Fabrino Machado / Resumo: Leishmaniose visceral (LV) é uma doença causada pelo parasita intracelular do gênero Leishmania, que acomete o homem e várias espécies animais. O cão é um dos principais reservatórios urbanos do parasita, e desempenha um papel central no ciclo de transmissão aos seres humanos pelos flebotomíneos. Estudos sobre a resposta imune em cães com Leishmaniose Visceral têm demonstrado que a imunidade protetora está associada à resposta imune do tipo celular, enquanto que a progressão da doença está associada à resposta humoral e à produção de IL-10 e TGF-β. Essas citocinas induzem a desativação de macrófagos e têm potencial para incapacitar a defesa do hospedeiro contra Leishmania spp., levando à visceralização da infecção. O objetivo do estudo foi avaliar a produção de IL-10 e de TGF-β por células T regulatórias (Treg) em amostras de sangue e de baço de cães naturalmente infectados por Leishmania spp., e correlacionar à carga parasitária e aos achados histopatológicos. Cinco cães saudáveis e vinte e nove cães com manifestações clínicas de leishmaniose visceral e sorologia positiva para anticorpos anti-Leishmania foram incluídos no grupo de estudo. A PCR em tempo real foi utilizada para a quantificação da carga parasitária e para confirmação da infecção por Leishmania spp. Realizou-se, por citometria de fluxo, a quantificação das células T CD4 regulatórias produtoras de IL-10 e TGF-β. O teste t não pareado foi utilizado para comparar o percentual de células Treg produtoras de IL-10 e TGF-β entre os cães infectados e os saudáveis, e utilizou-se o teste de Mann-Whitney para comparar o percentual de IL-10 e TGF-β no sangue e no baço de cães com LV... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)) / Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) is a disease caused by the intracellular parasite of the Leishmania genus that affects humans and several animal species. The dog is one of the main urban reservoirs of the parasite once it plays a central role in the transmission cycle to humans by sandflies. Studies about the immune response in dogs with visceral leishmaniasis have demonstrated that protective immunity is associated with the immune response of the cellular type, while disease progression is associated with the humoral response and IL-10 and TGF-β production. These cytokines induce the macrophages deactivation and have the potential to disable the host defense against Leishmania spp. leading to infection visceralization. The aim of this study was to evaluate the regulatory T cells (Treg) producing IL-10 and TGF-β in blood and spleen samples from dogs naturally infected by Leishmania spp. and correlate to the parasite load and histopathology. Five healthy dogs and twenty-nine dogs with clinical visceral leishmaniasis manifestations, and seropositivity for anti-Leishmania antibodies were included in the study group. The real-time PCR was used to quantify the parasite load and infection confirmation with Leishmania spp. The regulatory CD4 T cells producing IL-10 and TGF-β quantification was performed by flow cytometry. The unpaired t test was used to compare the percentage of Treg cells producing... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-19Bitstream added on 2014-06-13T19:43:56Z : No. of bitstreams: 1 duque_c_dr_arafo.pdf: 3415509 bytes, checksum: 28877cc82c665b1435a26345350d003f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo in vivo foi avaliar a resposta do complexo dentino-pulpar após a aplicação de um cimento de ionômero de vidro modificado por resina, um cimento de hidróxido de cálcio e um extrato de proteínas extraídas da matriz dentinária solúvel em EDTA (ESDP - EDTA-soluble dentin proteins) em cavidades profundas preparadas em dentes de macacos. Dezoito cavidades de classe V profundas foram confeccionadas em pré-molares de quatro macacos-pregos. Nos grupos 1 e 2, as paredes axiais das cavidades foram forradas com ESDP e cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Vitrebond - 3M ESPE), respectivamente. No grupo 3 (controle), foi aplicado um cimento de hidróxido de cálcio (Dycal - Dentsply). Em seguida, as cavidades foram restauradas com amálgama. Após seis meses, os animais foram sacrificados e os dentes foram preparados para avaliação microscópica. Cortes seriados de seis micrometros foram corados utilizando as técnicas de H/E, tricrômico de Masson e Brown & Brenn. Nenhuma resposta inflamatória foi observada para os grupos controle ou de materiais experimentais. Entretanto, em relação à deposição de dentina reacional, houve diferença entre os grupos, considerando a seguinte seqüência: ESDP (Grupo 1) > Hidróxido de cálcio (Grupo 3) > Cimento de ionômero de vidro (Grupo 2). Todos os materiais foram biocompatíveis quando aplicados em cavidades profundas. ESDP estimulou maior deposição de matriz de dentina reacional que os cimentos Vitrebond e Dycal.

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Maurício Guimarães Araújo / Banca: Luiz Alberto Milanezi / Resumo: Objetivo: O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente, a influência do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) criados cirurgicamente em calvárias de ratos. Material e Método: 32 ratos foram divididos em 2 grupos: C (controle) e PRP (Plasma Rico em Plaquetas). Um DTC de 8 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido somente com coágulo sangüíneo. No Grupo PRP, o defeito foi preenchido com Plasma Rico em Plaquetas. Cada grupo foi subdividido para eutanásia em 4 ou 12 semanas pós-operatórias (n=8). Foram realizadas análises histológica e histométrica. A quantidade de osso neoformado foi calculada como uma proporção da área total do defeito original. Esses valores foram transformados em arcoseno para a análise estatística (ANOVA, Tukey, p < 0.05). Resultados: Nenhum defeito reparou completamente com tecido ósseo. O Grupo PRP apresentou significativamente mais neoformação óssea que o Grupo C, tanto em 4 semanas (17,68% e 7,20%, respectivamente) como em 12 semanas (24,69% e 11,65%, respectivamente) pós-operatórias. Conclusão: Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que o PRP aumentou significativamente o reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico em calvárias de ratos. / Abstract: The purpose of this study was to histologically analyze the influence of Platelet Rich Plasma (PRP) on bone healing in surgically created critical-size-defects (CSD) in rat calvaria. 32 rats were divided into 2 groups: C (control) and PRP (Platelet Rich Plasma). An 8 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C the defect was filled by blood clot only. In Group PRP it was filled with Platelet Rich Plasma. Both groups were divided into subgroups (n=8) and euthanized at either 4 or 12 weeks post-operative. Histometric, using image analysis software, and histologic analyses were performed. Amount of new bone was calculated as percentage of total area of original defect. Percentage data were transformed into arccosine for statistical analysis (ANOVA, Tukey, p < 0.05). No defect completely regenerated with bone. Group PRP had a statistically greater amount of bone formation than Group C at both 4 (17.68% and 7.20%, respectively) and 12 weeks (24.69% and 11.65%, respectively) post-operative. Within the limits of this study, it can be concluded that PRP significantly enhanced bone healing in critical-size-defects in rat calvaria. / Mestre

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Sonia Regina Panzarini Barioni / Resumo: Este estudo avaliou histomorfometricamente o processo de cicatrização em defeitos de fenestração periodontal, criados cirurgicamente em cães e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP) associado ou não ao uso de barreira de membrana. Defeitos de fenestração periodontal com 5 mm de diâmetro foram cirurgicamente criados nos caninos superiores de 12 cães. Os dentes foram divididos em 4 grupos: C (controle) - defeito preenchido somente com coágulo sangüíneo; M - defeito preenchido com coágulo sangüíneo e protegido com uma membrana de politetrafluoretileno expandido (PTFE-e) com reforço de titânio; PRP - defeito preenchido com PRP; PRP/M - defeito preenchido com PRP e protegido com uma membrana de PTFE-e com reforço de titânio. Os animais foram eutanasiados após 4 semanas. Medidas lineares e de área da cicatrização periodontal foram avaliadas e calculadas como porcentagem do defeito original. Os dados foram submetidos à análise estatística (análise de variância, p < 0,05). Nenhum espécime regenerou-se completamente com osso ou cemento. Formação de novo cemento foi significativamente maior nos Grupos PRP e PRP/M quando comparados ao Grupo C. Observou-se, também, significativa maior formação de novo cemento no Grupo PRP/M que no Grupo M. Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que o PRP favoreceu a formação de novo cemento. A Regeneração Tecidual Guiada (RTG) não proporcionou efeitos adicionais ao uso do PRP no tratamento de defeitos de fenestração periodontal em cães. / Abstract: This study histomorphometrically analyzed the healing of periodontal fenestration defects surgically created in dogs and treated with Platelet-Rich Plasma (PRP) with or without a barrier membrane. A 5 mm diameter periodontal fenestration defect was made in each upper canine of 12 dogs. The teeth were divided into 4 groups: C (control) - defect filled with blood clot only; M - defect filled with blood clot and covered by a titanium-reinforced expanded polytetrafluoroethylene membrane (ePTFE); PRP - defect filled with PRP; PRP/M - defect filled with PRP and covered by a titanium-reinforced ePTFE. All animals were euthanized at 4 weeks post-operative. Linear and area measurements of periodontal healing were evaluated and calculated as a percentage of the original defect. Data were statistically analyzed (analysis of variance, p < 0.05). No defect completely regenerated with either bone or cementum. Cementum formation was significantly greater in groups PRP and PRP/M when both groups were compared to Group C. A significant greater cementum formation was also observed in Group PRP/M than in Group M. Within the limits of this study, it can be concluded that the PRP favored cementum formation. Guided Tissue Regeneration (GTR) did not promote any additional benefit to the use of PRP in the treatment of periodontal fenestration defects in dogs. / Mestre

Orientador: Sonia Maria Oliani / Banca: Claudia Regina Bonini Domingos / Banca: Janetti Nogueira de Francischi / Resumo: Introdução: A proteína anexina A1 (ANXA1) está envolvida principalmente na regulação dos processos inflamatórios, proliferativos, crescimento e diferenciação celular. Embora esses efeitos tenham sido explorados em diversas investigações, são raros os estudos na angiogênese. A terapia angiogênica consiste no controle do crescimento vascular, e a descoberta da ação da proteína ANXA1 nesse processo resultaria no desenvolvimento de novos procedimentos terapêuticos. Objetivo: em função da importância do entendimento da ação reguladora da ANXA1 na formação de novos vasos, o objetivo das nossas investigações foi avaliar, in vivo e in vitro, o mecanismo de ação dessa proteína sobre a angiogênese, na vigência do fator de crescimento do endotélio vascular - subtipo A (VEGF-A). Métodos: Nas investigações in vivo avaliamos os efeitos da ANXA1 sobre a cinética de formação de novos vasos da rede microcirculatória da região dorsal da pele de camundongos BALB/c selvagens (WT) e destituídos do gene para ANXA1 (AnxA1-/-). Na linhagem de células endoteliais de veias umbilicais humanas (HUVEC) investigamos o efeito da ANXA1 na viabilidade celular, proliferação, migração, formação de tubos, aderência e expressão de moléculas de adesão. Resultados: Os animais WT tratados com o peptídeo ANXA12-26 (1 mg/kg) ou VEGF e, os AnxA1-/- tratados com VEGF (10 ng/10 μL) apresentam aumento da neovascularização na pele. Nas células HUVEC, a análise da viabilidade não mostra diferenças significantes com ANXA12-26 nas concentrações de 1, 10 e 30 μM. Enquanto, a proliferação celular aumenta com o VEGF e/ou tratamento com ANXA12-26 (1 μM). No entanto, a migração celular aumenta após o tratamento com ANXA12-26 (10 μM) e, associado ao VEGF, nas concentrações de 10 e 30 μM. A tubulogênese aumenta após indução com VEGF e não altera após tratamento com ANXA12-26 (1, 10 ou 3... / Abstract: Introduction: The annexin A1 protein (ANXA1) is mainly involved in the regulation of inflammation, proliferative, growth and cell differentiation. Although these effects have been studied in several investigations, are scarce the studies in angiogenesis. The angiogenic therapy consists in the vascular growth control, and the discovery of ANXA1 protein action in this process result in the development of new therapeutic procedures. Aim: According to the importance of understanding the ANXA1 regulatory action in the new vessels formation, the objective of our research was to evaluate in vivo and in vitro, the action mechanism of this protein on angiogenesis, in the presence of the growth factor vascular endothelial - subtype A (VEGF-A). Methods: In vivo investigations have evaluated the ANXA1 effects on the kinetics of formation of new vessels of microcirculatory network of dorsal skin of BALB/c wild (WT) and ANXA1 depleted (AnxA1-/-) mice. In endothelial cells from human umbilical vein lineage (HUVEC) investigated the effect of ANXA1 on cell viability, proliferation, migration, tube formation, cell adhesion and molecules adhesion expression. Results: The WT animals treated with peptide ANXA12-26 (1 mg/kg) and VEGF and the AnxA1-/- animals treated with VEGF (10 ng/10 μL) show an increase of neovascularization in the skin. In HUVEC cells, the viability analysis does not show significant differences with ANXA12-26 at concentrations of 1, 10 and 30 μM. While, the cell proliferation increases with VEGF and/or ANXA12-26 treatments (1 μM). However, cell migration increases after ANXA12-26 treatment (10 μM) and, associated with VEGF, in concentrations of 10 and 30 μM. The tubulogenesis increases after induction with VEGF and does not change after ANXA12-26 treatment (1, 10 or 30 μM). In contrast, VEGF associated with ANXA12-26 (10 μM) enhance the formation of tubular structures. The ANXA12-26 peptide increases the expression of β3 integrin... / Mestre